组织培养技术2
6 植物组织培养实验二PPT课件
谢谢你的到来
学习并没有结束，希望大家继续努力
Learning Is Not Over. I Hope You Will Continue To Work Hard
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
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2、无菌操作要注意：每次操作前， 将双手用酒精棉球擦拭消毒；镊 子、解剖剪刀等金属工具用火焰 烧过灭菌，冷却后方可使用；尽 量减少无菌三角瓶或培养皿在空 气中的暴露时间；所有无菌操作 尽量快速完成，并要求在酒精灯 附近进行。
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3、请先在自然条件下练习外植体解剖， 分割成0.5cm2左右的小块（段），经操 作熟练，检查无误后，再进行无菌解 剖分割及接种，以减少植物材料染菌 或失水死亡的机率。
欢迎同学们进入奇幻的植物组织培养实验世界
1
植物组织培养实验Ⅱ——— 外植体取材﹑表面消毒与接种
实验目的 实验原理、基本知识 实验用品、材料 实验要求 实验内容 、方法 实验报告——作业 下一次实验预告
2
一、实验目的
1、掌握无菌操作技术，加深对无菌操作的了
解；
2、掌握常规的植物细胞组织培养技术，达到 能独立操作的能力
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7、打开三角瓶——铝箔纸的拿法
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8、瓶口在火焰上烧过
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9、铝箔纸的放法
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10、镊出黄瓜苗
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11、镊出黄瓜苗
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12、放入培养皿中
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13 、
黄 瓜
幼 苗 形 态
生 长 点
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——
14、剪取茎段
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15、剪好的外植体
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16、黄瓜切块的接种
蓝莓组织培养
蓝莓组织培养方案1、植物介绍：1）供试材料来源：选取长势旺盛的幼嫩枝条，去除多余的叶片，切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体。
提供的材料希望老师可以从组培室提供。
2）技术路线：外植体处理→接种→增殖培养→生根培养→移栽2方法步骤：1）外植体的剪取与消毒程序的筛选：切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体段去叶片留叶柄→流水冲洗30min→75%酒精浸泡30s→0.1%升汞溶液消毒3~7min→无菌水冲洗4~5次→用滤纸吸去水分→将茎段切成带有1~2个腋芽的小段2)初代培养基的筛选：选用MS为最基本的培养基，根据需要的不同，添加激素6-BA、NAA、ZT。
3)增殖培养基的筛选：以MS为基本培养基，按激素6-BA、NAA、ZT含量的不同，诱导增殖培养基设4系列处理（培养基1~4号），生根培养基设2系列处理（培养基5~6号），培养基配方表如下：表中培养基蔗糖含量：分化和继代培养基为30g/L，pH值5.6~5.8，在115MPa气压下灭菌20min。
4)生根培养基的筛选不同的培养基进行生根的优势也不一样，根据大量的材料表明1/4 MS中的小苗生根均明显优于全量的MS培养基，所以用激素以IBA0.5mg/L效果最好，生根情况好且所需天数也最短。
最适培养基应该为1/4 MS+IBA 0.5mg/L5)试管苗移栽试验：当苗根长到1~1.5cm时，打开瓶盖，取出小苗，洗净培养基。
用多灵菌500~800倍浸泡30min左右，然后栽入0.1%高锰酸钾消毒过的苗床上。
苗床基质分5个处理，分别为沙：草炭土=1:1、沙：蛭石=1：1、纯沙、纯蛭石、腐苔藓。
（根据资料查找以腐苔藓为基质最好，成活率达80%以上，草炭土和沙半量也可达50%的成活率。
）。
高中生物 专题 植物的组织培养技术 课题 菊花的组织培养素材2
专题3 植物的组织培养技术 课题1 菊花的组织培养庖丁巧解牛知识•巧学一、植物组织培养的基本过程1.细胞分化植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。
高等生物一般都从一个受精卵开始发育，经多次细胞分裂与分化，产生出各种不同的特殊结构和专一功能的细胞。
例如，植物体中的木纤维、韧皮纤维等.已分化的细胞，其基因组成并未改变，并无遗传信息的增减，仍具有发育的全能性。
一般认为，细胞分化是细胞中遗传信息有选择地表达的结果。
2.细胞的全能性细胞全能性比较权威的定义是1984年国际组织培养协会做出的：“细胞全能性为细胞的某种特征,有这种能力的细胞保留形成有机体所有细胞类型的能力”。
这个定义比一般所说的概念“一个细胞中包含着这种生物的全部遗传信息(基因)，在适当的条件下可以发育成一个完整的生物体”更基本和全面.它不但包含了培养细胞再生成植株的情况（分化成各种类型的细胞，并以一定形式构建成植物），同时也包含了培养细胞生产次生代谢物的情况(不分化或只分化成某种类型细胞,但仍留着分化为其他细胞类型的能力）.前者成为组织培养和转基因植物需要进行植株再生的理论基础，后者成为像微生物发酵一样培养细胞，生产人们所需要的次生代谢产物的理论基础，如通过红豆杉的细胞培养生产紫杉醇.难点培析 （1)全能性的含义:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整的个体的潜能。
（2)全能性的基础：每个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体的全部基因.(3）全能性程度：由高到低依次是受精卵→生殖细胞→体细胞 .(4)表现全能性的条件：①离体 ②营养物质 ③激素。
（5）与植物和低等细胞相比，高等动物体细胞的发育潜能有显著差异.3.植物组织培养的过程植物组织培养是指在无菌条件下,对离体植物组织（器官或细胞）分离并在培养基中培养,使其能够继续生长，甚至分化发育成完整植株的一项技术。
中药资源学考试资料
○●第一章中药资源：是指在一定区域范围内分布的各种药用植物，药用动物，要用矿物及其蕴藏量的总和。
中药资源学：指研究中药资源的种类、分布、形式、蕴藏量、品质、保护盒可持续利用的科学，其目的是研究中药资源的分布及动态规律，更合理的开发中药资源，为人民保健事业和制药工业不断提供优质优量的中药材原料。
传统中药：指在全国范围内广泛使用，并作为商品在中药市场流通，以传统中医药理论阐述药理药效和指导临床用药，有独特的理论体系，加工炮制方法及使用形式的天然药物和人工加工产品。
民间药：草药医生或民间用以防治疾病的天然药物或加工品，通常根据经验用药，应用地区局限，缺少医药理论指导及统一加工炮制工艺。
民族药：我国除汉族外各少数民族使用的天然药物及加工品，多数均有各自独特的医药理论体系。
中药：在中医理论指导下用于防病，治病，康复保健的药物。
中药资源的特征？（1）中药资源具有明显的地域性（2）可再生资源是中药资源的主体（3）中药资源与多种资源并存（4）中药资源具有多用性（5）中药资源具有可解体性（6）中药资源具有国际性。
○●第二章我国的气候：我国形成强烈的季风性和大陆性气候特点，东部地区季风性显著，西部地区大陆性强烈，温度和降雨变化大。
土壤：土壤是地球陆地表面能够生长植物的疏松表层，是一个独立的自然体，有着自己发生发展的历史，是自然地理环境的重要组成部分之一。
——是地球陆地表面，由矿物质。
有机质，水分，空气和生物等组成的疏松表层，是植物赖以生存的物质基础。
（北方钙土：甘草、枸杞、麻黄、苦豆子。
盐碱地：罗布麻。
酸性：肉桂、黄连、槟榔。
碱性：甘草、枸杞。
）森林土壤，草原土壤，荒漠土壤，高山土壤，水成土壤。
环境：指某一特定生物体或生物群体周围一切的总和。
我国植被类型及特点：荒漠，草甸，沼泽（森林沼泽，灌木沼泽，草本沼泽）森林：针叶林，针阔叶混交林，落叶阔叶林，常绿阔叶林，季雨林，雨林灌丛：高寒灌丛，落叶灌丛，常绿灌丛草原：草甸草原，典型草原，荒漠草原中药资源与土壤土壤的物理化学性质，如质地、酸碱度、水分状态和肥力水平等均与植物的生长密切相关，也对药材的产量具有一定影响（1）不同土壤类型分布着不同的植物类群（2）土壤酸碱度土壤的化学成分和土壤生物对某些药用植物的生长也有一定作用（3）土壤的物理化学性质，水分状态，其中所含化学成分种类含量和比例，施肥等都对植物的生长发育以及要用活性成分的形成和积累有一定作用。
【安徽】中职农业生物技术(主编曹春英、丁雪珍第二版 高教版)教案：第二章 植物组织培养技术04
第三节植物组织培养操作技术（2）一、授课章节第三节植物组织培养操作技术（2）。
二、学时安排2学时。
三、教学目标1．掌握培养基的作用。
2．掌握培养基中生长调控物质的作用。
3．了解培养基的类型。
四、教学重点、难点分析重点：培养基的基本成分。
难点：培养基中生长调节物质的作用。
五、教具电化教学设备。
六、教学方法讲授法，演示法。
七、教学过程Ⅰ.导入培养基是进行植物组织培养的基质，进行植物组织培养必须掌握培养基的基本知识，今天我们就学习培养基的种类和基本成分。
II.新课三、培养基制备技术（一）配制培养基的目的配制培养基的目的是人为提供离体培养材料的营养源。
配制的不同培养基，是为满足不同类型植物材料对营养的不同需要。
没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一种合适的培养基，培养才有可能成功。
（二）培养基的种类1.培养基的种类划分2.常用培养基的配方和特点 目前已公开报道的基本培养基有许多种类，各有不同的特点和适用范围，在植物组织培养生产中应根据不同的植物种类和培养部位及不同的培养目的选用不同的培养基。
常用的培养基配方：表1 常用培养基配方只含有无机盐、蔗糖、维生素和水等最基本成分的合继代培养中促进培养物快速增殖的培养基，也称扩繁培养基。
培养基主要有水、无机盐、有机物、植物生长调节物质、培养基的支持材料五大类组成。
1.水水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。
它是生命活动过程中不可缺少的物质。
配制培养基母液时要用蒸馏水，以确保母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程发霉变质，大规模生产时可用自来水。
但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。
2.无机元素(1)大量元素指浓度大于0.5 mmol／L的元素，有N，P，K，Ca，Mg，S等。
常由KN03、NH4NO3、KH2P04、NaH2P04、KCl、MgS04·7H20、CaCl2·2H20等化合物来提供。
第二章植物组织培养的基本原理-精品文档
二、植株再生的方式： 1、器官发生（organogenesis）： ①一部分由外植体中已存在的器官原基发育而来。 ②多数则是由外植体经过脱分化后形成愈伤组织，在不断的 培养过程中形成的一些分生细胞团，这些分生细胞团在进 行分化后，重新形成不同类型的器官原基形成的。 特点：单极性结构、新发生的器官原基中的原形成层结构与 母体（愈伤组织或外植体）的维管组织相连接。
1934年, White用离体的番茄根建立了第一个活跃生长的无 性系，使根的离体培养实验首次获得了真正的成 功。提出B族维生素的重要性。 1944年，Skoog报道DNA的降解产物腺嘌呤, 可以促 进愈伤组织的生长，解除生长素对芽形成的抑 制作用，诱导芽的形成。 1958年, Steward和Reinert由培养的胡萝卜细胞诱导形成 了 胚状体。 1965年, 由Vasil和Hildebrandt用单个分离的细胞培养 获得整个植株, 植物细胞全能性的理论真正得到 了科学的证实。
4、愈伤组织形成过程：
(1)
诱导期（启动期）：细胞准备分裂的时期。 外植体细胞在适宜的诱导培养条件下，细胞中RNA含 量迅速增加，核糖体数量增加、淀粉消失、线粒体嵴膜 数量增多，细胞内合成代谢迅速加强。但此时外植体的 体积大小改变不大。
Hale Waihona Puke (2) 分裂期：细胞迅速分裂时期
外植体外层细胞开始迅速分裂，中央细胞常不分裂，由于 分裂不均匀，形成了中间静止的芯。 细胞分裂快，结构松散、颜色浅、透明。
通过器官发生形成再生植物通常有三种方式：
先生根，再长芽。
先产生芽，再生根。
愈伤组织不同部位形成根、芽，通过维管组织将根、 芽连结在一起。
2、体细胞胚胎发生（somatic embryogenesis）： 特点：双极性结构，由单个体细胞形成胚状体，最后发育 生长为一个植株。
高中生物 专题3 植物的组织培养技术 课题2 月季的花药培养精练(含解析)新人教版高二选修1生物试题
课题2 月季的花药培养一、选择题1．花药中的花粉发育为单倍体植株时，脱分化既可以形成愈伤组织也可以形成胚状体，对此起决定作用的因素是( )A．培养基中激素的种类及其浓度配比B．选取离体花药的时期C．培养基是固体培养基还是液体培养基D．培养花粉的时间长短解析：选A 通过花粉培养产生花粉植株一般有两种途径，一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。
这两种途径之间本身并没有绝对的界限，主要决定因素是培养基中激素的种类及其浓度配比。
2．在花粉的发育过程中，选择下列哪个时期的花药培养成功率最高( )A．小孢子四分体时期B．单核居中期C．单核靠边期D．双核期解析：选C 单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难；在单核靠边期花药培养成功率最高。
3．(2019·某某期中)下列说法错误的是( )A．被子植物的花粉发育依次经历了四分体时期、单核期、双核期B．被子植物的花粉是由花粉母细胞经有丝分裂而形成的，因而含有与体细胞中数目相同的染色体C．被子植物花粉是单倍体的生殖细胞D．被子植物花粉粒内有两个精子解析：选B 被子植物的花粉是由花粉母细胞经减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞，含有比体细胞中数目减半的染色体。
4．下列关于花药培养产生花粉植株的两个途径，叙述错误的是( )A．花粉可通过诱导形成愈伤组织发育成植株B．花粉可通过胚状体阶段进一步分化成植株C．两种途径依据的原理都是植物细胞的全能性D．产生胚状体是花药离体培养中特有的途径解析：选D 通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育成植株；二是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。
产生胚状体并不是花药离体培养中特有的途径。
5．(2019·鹤岗期中)将二倍体玉米的幼苗用秋水仙素处理，待其长大后用其花药进行离体培养得到了新的植株，下列有关新植株的叙述正确的是( )①是单倍体②体细胞内没有同源染色体③不能形成可育的配子④体细胞内有同源染色体⑤能形成可育的配子⑥可能是纯合子也可能是杂合子⑦一定是纯合子⑧是二倍体A．④⑤⑦⑧B．①④⑤⑥C．①②③⑥ D．①④⑤⑦解析：选B 二倍体玉米的幼苗用秋水仙素处理后得到的是四倍体，用四倍体的花药进行离体培养得到的是单倍体，但其单倍体体内含有同源染色体，可以形成可育配子，该单倍体可能是纯合子，也可能是杂合子。
人教版高二生物选修三知识点总结：专题二细胞工程
选修3《现代生物科技专题》知识点总结专题2 细胞工程（一）植物细胞工程1.植物组织培养技术（1）原理：植物细胞的全能性全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞脱分化再分化发育（2）过程：离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体植物体常用的植物激素生长素和细胞分裂素。
（3）用途：微型繁殖、作物脱毒（选材应该选择茎尖组织）、制造人工种子、单倍体育种（最大的优点是明显缩短育种年限，得到的全为纯种）、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。
（4）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
2.植物体细胞杂交技术（1）原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性（2）过程：去壁的方法：酶解法；诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电激等。
化学法是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（4）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
（二）动物细胞工程1. 动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
（2）原理：细胞增殖（3）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
（4）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
（5）动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。
此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
通常需加入血清、血浆等天然成分。
植物组织培养的过程是什么？
植物组织培养的过程是什么？根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术——植物的组织培养技术植物组织培养的简单过程如下：剪接植物器官或组织——经过脱分化（也叫去分化）形成愈伤组织——再经过再分化形成组织或器官——经过培养发育成一颗完整的植株。
植物组织培养的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，叫做愈伤组织。
再适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，产生出植物的各种器官和组织，进而发育成一棵完整的植株。
植物组织培养即植物无菌培养技术，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科植物组织的培养方法：1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙子培养基上进行培养，利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。
一般植物7～15天可以生长出根系。
此技术投资低，操作环节少。
2、试管组织培养试管组织培养是将外植体（即离体组织、器官或细胞）放置在试管等器皿中在无菌的条件下进行组织培养获得试管苗。
植物组织培养的优点：1、占用空间小，不受地区、季节限制。
2、不携带病毒3、培养周期短4、可用组培中的愈伤组织支取特殊的生化制品5、可短时间大量繁殖，用于拯救濒危植物6、可诱导之分化成需要的器官，如根和芽7、解决有些植物产种子少或无的难题，8、不存在变异，可保持原母本的一切遗传特征9、投资少，经济效益高10、繁殖方式多，试用品种多植物组织培养一般分为以下几种：1、胚胎培养指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。
植物组织培养第二章
（三）Байду номын сангаас细胞胚胎发生的基因表达机理（略）
二、植物体细胞胚胎发生途径
（一）体细胞胚胎发生的方式 由外植体诱导体细胞胚胎发生的途径有两种： 直接途径和间接途径。 直接途径：从外植体某些部位的胚性细胞直接 诱导分化出体细胞胚胎。这种“胚性细胞”是在胚 胎发生之前就已决定了的。 间接途径：外植体先脱分化形成愈伤组织， 在从愈伤组织的某些细胞，即重新决定为胚性细胞 的细胞分化出体细胞胚胎，多数体细胞胚胎的形成 是通过间接途径产生的。
植物愈伤组织的培养
愈伤组织培养是指将母体植株上的各个部分切下，形成 外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长 和发育的一门技术。 一般情况下，植物组织均能诱发形成愈伤组织，由外植 体形成愈伤组织，标志着植物离体培养的开始。
差异：（1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化 后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 潜在全能性的原因：基因表达的选择性
科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一 定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就 可能表现出全能性，发育成完整的植株。 人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。
三、植物体细胞胚胎发生的极性和生理隔离
体细胞胚胎具有两个明显特点： 1、双极性 2、与母体组织或外植体的维管束系统无直接联系，处于较为 孤立的状态，即存在生理隔离。
（一）体细胞胚胎发生的极性
单个胚性细胞与合子胚一样，具有明显的极性，第一次 分裂多为不均等分裂，顶细胞继续分裂形成多细胞原胚，基 细胞进行少数几次分裂形成胚柄。 （二）体细胞胚胎发生的生理隔离
第二章
植物组织培养的基本原理
植物细胞全能性理论是植物组织培养的核 心理论。 离体细胞具有生命的特征属性，在全能性的 基础上，提供合适的营养和环境条件，离体细 胞经历脱分化和再分化过程
实验二 灭菌、无菌操作技术
四、主要实验步骤 1、材料处理及外植体消毒； 室外的叶片→自来水下用软毛刷冲洗干净。如叶片上粘 附许多植物分泌物或其他物质，可以使用洗涤剂（洗衣粉 或洗涤灵）轻轻刷洗，干净为止。 体表灭菌在超净工作台上操作。 紫外照射15～20min→关紫外→工作送风15～20min。 实验台上准备好无菌水，灭菌的三角瓶，灭菌的镊子、刀 片、剪子等，回收氯化汞的容器。 沥干（或者用灭菌的滤纸吸干）植物材料上的水→70％ 乙醇溶液中灭菌15-30sec→无菌水冲洗3次→放入无菌三 角瓶→加入0.1%氯化汞溶液，计时3-6min→无菌水洗涤 6～10次。注意用过的氯化汞溶液以及前3次洗涤植物材料 使用的有污染的水回收到一个的三角瓶中，待处理。
六、注意事项 1、实验安全及实验室使用规则； 2、实验设备使用方法及损坏赔偿条例； 3、本次实验注意事项。 （1）材料消毒要掌握好时间、浓度，避免消毒不够或 过头； （2）酒精用70%-75%效果最好，外植体用酒精消毒时 间一般不超过半分钟； （3）植物激素用过滤灭菌法，不能高温消毒； （4）各种消毒剂处理后，要用无菌水冲洗干净； （5）高温高压灭菌时，注意锅底水位，压力上升至5磅 时要放气，灭菌结束，必须等锅内压力回到零时才能 打开锅盖，灭菌时须有人看守，注意异常情况；
6、整理及清洗； 将污染的培养瓶挑出，灭菌，清洗。 五、作业 1.实验报告（包括实验目的、设备、步骤、结果与 现象分析）； 2.课后思考 （1）什么叫外植体体表灭菌，常用消毒剂有哪些， 各有什么特点，要掌握什么原则？ （2）植物激素一般用什么方法消毒？为什么？ （3）无菌操作要注意哪些问题。 （4）如何区分细菌性污染和真菌性污染？
植物组织培养技术所有名词解释
植物组织培养复习材料一、名词解释。
1、植物组织培养（plant tissue culture）：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术2、脱分化（dedifferentiation ）：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化（redifferentiation ）：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体（explant）：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）5、愈伤组织（callus）：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。
可进一步发育成植株。
8、细胞全能性（cell totipotency ）：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性：细胞（也可指器官或植株）内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗：通过组织培养产生的植株。
12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。
植物组织培养技术所有名词解释
植物组织培养复习材料一、名词解释。
1、植物组织培养（plant tissue culture）：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术2、脱分化（dedifferentiation）：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象.3、再分化（redifferentiation）：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体(explant）：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
(如器官、组织、细胞、原生质体、种子等)5、愈伤组织(callus）：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中,由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构.可进一步发育成植株。
8、细胞全能性（cell totipotency)：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性：细胞（也可指器官或植株)内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗：通过组织培养产生的植株.12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点,有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用.14、悬浮细胞培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术.适用于大规模的培养,使细胞工程的基本平台。
组培苗,概念(二)
组培苗,概念(二)组培苗概念什么是组培苗？•组培苗是指在无土环境中培养的植物幼苗。
•它是一种现代化的植物繁殖技术，通过组织培养和再生技术，可以在较短时间内获得大量健壮、一致的幼苗。
组培苗的培养过程1.组织培养：从植物体中取得愈伤组织，并在培养基中利用合适的激素和养分条件下培养，使其再生成幼苗。
2.根系诱导：在培养基中通过调节激素浓度和养分供应，促进幼苗根系的形成和发育。
3.苗期管理：对幼苗进行光照、温度和水分等方面的控制，以保证幼苗的健康生长。
4.移栽：将培养好的组培苗移至合适的环境中，继续生长发育。
组培苗的优势•高效繁殖：通过组织培养技术，一株植物可以繁殖成上千甚至上万株组培苗，加速繁殖速度。
•无土栽培：组培苗不需要土壤，可以在无土培养基中生长，减少土壤传播的病虫害风险。
•干净无害：组培苗在无菌条件下培养，不含病虫害，不经过化学药物处理，更加安全无害。
•一致性强：组培苗经过标准化的培养过程，生长速度和植株形态一致，便于统一管理。
•便于运输：组培苗生长在小容器中，体积小巧轻便，便于运输和销售。
组培苗的应用领域•农业种植：组培苗可以用来繁殖蔬菜、水果、花卉等农作物，提高产量和品质。
•林业育苗：组培苗可以用来繁育树木，用于林业造林和园林绿化。
•园艺花卉：组培苗可以用来繁殖花卉，保持花色品种的一致性。
•医药植物：组培苗可以用来繁殖草药和药用植物，保证品质和药效的稳定性。
结语组培苗作为一种现代化的植物繁殖技术，具有高效繁殖、无土栽培、干净无害、一致性强和便于运输等优势，广泛应用于农业种植、林业育苗、园艺花卉和医药植物等领域。
通过不断的技术创新和应用推广，组培苗助力着现代农业和园艺的发展。
组织培养 名词解释
组织培养名词解释
组织培养是指从生物体中分离出符合需要的组织、器官或细胞等，在人工控制的条件下进行培养，以研究其生长、发育和代谢等生命活动规律的一种技术。
组织培养广泛应用于基础研究和生产实践中，如植物繁殖、细胞工程、基因工程等。
组织培养通常包括以下几个步骤：
1. 分离组织：从生物体中分离出需要的组织器官或细胞等。
2. 培养基制备：根据需要配置适合的培养基，以保证细胞的生长和发育。
3. 细胞接种：将分离出的组织或细胞接种到培养基上，使其在人工控制的环境中生长。
4. 培养和观察：在恒温、恒湿和无菌的环境中培养细胞，并进行定期观察和记录。
5. 细胞繁殖和诱导分化：通过控制培养条件，促进细胞增殖和诱导分化，以获得所需的细胞类型。
6. 实验结果分析：对实验结果进行分析，了解细胞的生长、发育和代谢规律等。
组织培养具有很多优点，如可获得大量同质的细胞、可进行严格的无菌操作、可控制细胞的生长和分化等。
同时，组织培养也存在一些局限性，如需要严格的条件控制、需要定期更换培养基等。
植物组织培养技术
植物基因编辑：利 用组织培养技术， 可以对植物基因进 行编辑，提高植物 的抗病性、抗虫性 等特性。
植物生物反应器： 组织培养技术可以 用于生产生物药物 、生物燃料等，提 高生物产业的发展 水平。
植物修复技术：组 织培养技术可以用 于修复受损的植物 组织，提高植物的 生存能力和生长速 度。
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汇报人：
生物反应器技术：利用生物反应器技术，实现植物组织培养的规模化和自动化
生物信息学技术：利用生物信息学技术，分析植物组织培养过程中的基因表达和调控机制
合成生物学技术：利用合成生物学技术，设计和构建新型植物组织培养体系，提高植物组织 培养的效率和成功率。
应用前景
植物新品种的培育： 通过组织培养技术， 可以快速培育出新 的植物品种，提高 农业生产效率。
缺点
技术要求高：需要熟练掌握植物组织培养技术，操作难度大 成本高：培养基、培养设备、培养室等成本较高 成功率低：植物组织培养成功率较低，需要多次尝试 培养周期长：植物组织培养周期较长，需要耐心等待
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植物组织培养技术的未 来展望
技术创新方向
基因编辑技术：通过基因编辑技术，提高植物组织培养的效率和成功率
应用：植物组织培养技术广泛应用 于植物育种、生物技术、植物保护 等领域。
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原理：利用植物细胞的全能性，使 其在适宜的条件下，经过脱分化和 再分化，形成完整的植株。
特点：快速繁殖、保持品种特性、 提高生产效率等。
原理
植物组织培养技术是指利用植物细 胞、组织或器官在无菌条件下进行 培养，使其生长、分化和再生的技 术。
植物组织培养技术在药物生 产中的应用
植物组织培养技术在药物质 量控制中的应用
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六、试述体细胞胚胎发生的实际应用。
（1）无性繁殖（2）人工（合成）种子的制备（3）分离可再生的原生质体的材料（4）遗传转化（5）代谢产物的合成（6）遗传资源的保存单细胞培养方法有平板培养法、看护培养法、微室培养法和条件培养基培养法。
五、试述细胞培养的应用。
1突变体选择2植物次生代谢产物的生产（细胞的工厂化生产、高产细胞系的建立、“种子”培养、细胞的大量培养）3生产天然的植物成分4生物转化5细胞固定化二、简述花药培养的一般程序。
（1）取材：一般而言，单核后期花药对培养反应较好。
（2）预处理：适当的预处理可以显著提高花药的愈伤组织诱导率。
常用的预处理方法是低温冷藏，具体的处理温度和时间长度因物种而异：烟草7～9℃，7～14 d；水稻7～10℃，10～15 d；黑麦1～3℃，7～14 d；大麦3～7℃，7～14 d。
但低温预处理对小麦效果不稳定，有时还有负效果。
（3）消毒：通常只要以70％酒精喷洒或擦拭花器或包被着麦穗的叶鞘表面，即可达到灭菌要求。
（4）接种（5）培养方式和培养条件：培养方式：花药的培养方式主要有3种：一是在琼脂固化培养基表面培养，二是在加入30％Ficoll(水溶性聚蔗糖)的液体培养基表面飘浮培养，三是利用固体一液体双层培养基培养，以便既能保持较高的接种密度，培养基又不易失水干涸。
培养条件：主要包括温度和光照。
（6）花粉植株的诱导三、简述花粉分离与纯化的方法及花粉培养的方式。
将小孢子从花药里游离出来的主要方法有（1）自然散落法（2）挤压法（①直接挤压法、②研磨过滤收集法）（3）机械游离法（①磁搅拌法、②小型搅拌(超速旋切)法）纯化方法：过筛、离心收集、使用聚果糖等制成不连续梯度等方法。
花粉培养方式：平板培养、液体培养、双层培养、看护培养、微室培养、条件培养基培养四、影响雄核发育的因素有哪些？1）基因型：植物基因型是影响花药离体培养诱导单倍体成功的最重要的因素之一。
迄今为止，花药培养的成功主要局限于3个科的植物—茄科、禾本科和十字花科。
2）植株生理状态和生长条件：供体植株的年龄及其所处的生长条件(如光周期、光强、温度和矿质营养)也能影响花药对离体培养的反应。
一般来说，幼年植株的花药反应能力较好。
在开花末季采集的花药不但形成孢子体的频率很低，而且发生反应的时间也较迟。
3）花粉发育时期：花粉发育时期的选择对雄核发育也是至关重要的。
一般而言单核后期花药对培养反应较好，但不同物种最适的发育时期不同。
4）预处理：接种前或后对花药采用适当的方法进行预处理，能使绿苗产量大量增加。
在花药培养中采用的预处理方法很多，有高低温、化学物质、离心、射线等方法。
5）培养基6）药壁因子7）培养条件：培养条件如温度、光照、板植密度等对雄核发育也有一定的影响。
五、试述单倍体植株的鉴定方法及其染色体加倍的方法。
1）花粉和花药植株的倍性鉴定：染色体直接计数法、间接鉴定（扫描细胞光度仪鉴定、细胞形态学鉴定法、植株形态学鉴定法、高／低温胁迫法、杂交鉴定法分为自交鉴定和测交鉴定、分子标记鉴定分为①生化标记鉴定②分子标记研究）2）花粉和花药植株的染色体加倍茎段培养：单倍体愈伤组织培养过程中会有一定频率的核内有丝分裂(没有核分裂的染色体复制)及花粉核的融合，形成二倍体细胞，可有意识地利用这一特点来获得纯合的二倍体植株。
化学试剂诱变:单倍体植物染色体加倍用得最多的是化学诱变法，常用的诱变剂有秋水仙素和Oryzalin(黄草消)、trifluralin(氟乐灵,一种除莠剂)、APM(amiprophos methyl)等除草剂，其中秋水仙素应用最广泛。
二、简述离体授粉的程序。
①确定开花、花药开裂、授粉、花粉管进入胚珠和受精的时间；②去雄后将花蕾套袋隔离；③制备无菌子房或胚珠；④制备无菌花粉；⑤胚珠(或子房)的试管内授粉。
三、什么是胚珠培养和子房培养？简述胚珠培养和子房培养的技术措概念:①胚珠培养:是将胚珠从母株上分离出来，在人工控制的条件下，进行离体培养，使其生长发育形成幼苗的技术。
根据培养目的的不同，可将胚珠培养分为受精胚珠培养和未受精胚珠培养。
②子房培养:是指将子房从母体上分离下来，置于培养基上，使其进一步发育成幼苗的技术。
根据培养的子房是否授粉，可将子房培养分为授粉子房培养和未授粉子房培养。
技术措施: ①胚珠培养:（1）材料的选择和灭菌.（2）培养基:多为White、Nitsch、MS等，Nitsch使用更普遍。
离体胚珠发育中，培养基的渗透压起着重要的作用，特别是对幼嫩的胚珠。
不同发育时期的胚珠对培养基的要求也不同。
（3）胎座和子房对胚珠培养的影响: 胎座或子房的某些组织在胚珠发育初期起着重要的作用。
（4）胚发育时期的影响: 合子和早期原胚期的胚珠较难剖取和培养，对培养基成分也要求严格。
培养发育到球形胚期的胚珠，较容易获得种子，对培养基的要求也不高。
②子房培养:（1）子房外植体的制备.（2）培养基:用于子房培养的培养基有MS、White、B5、N6、Nitseh等。
此外，培养基的成分对子房的生长发育及成熟有很大的影响。
（3）培养子房的发育.（4）影响子房培养的因素:可以通过控制培养基及激素条件调节子房发育的方向。
五、离体胎座授粉技术有哪些方面的应用？①克服自交不亲合性.②克服杂交不亲合性: 离体胎座授粉方法最重要的应用潜力，是在那些由于受精前不亲合性障碍从未形成过杂种的植物间建立杂种。
③通过孤雌生殖产生单倍体:能通过未受精子房培养产生孤雌生殖单倍体的植物已知有大麦、烟草和小麦等。
④培育抗逆性植物.一、什么是植物的胚胎培养?什么是合子胚培养？简述胚培养的方法和应用。
(1)植物胚胎培养:是指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。
(2)合子胚培养:是指在无菌条件下分离和培养有性胚，以期获得可育植株的一种技术。
(3)方法: 成熟胚培养:①培养基和培养条件:培养基只需含无机盐和糖即可;提供合适的生长条件及打破休眠.②操作:受精后的果实或种子(带种皮) 表面消毒剥离种胚培养完整植株.幼胚（未成熟胚）培养:①幼胚指的是尚未成熟即发育早期的胚。
在人工培养基上幼胚培养难成功,利用胚乳看护培养,可显著提高幼胚的成活率.可用同种胚乳,也可用异种胚乳. 进行幼胚培养时，关键是维持胚性生长。
此途径为需要途径.②操作:表面消毒(对受精后子房进行表面消毒) 切开子房壁取出胚珠剥离胚珠取出完整幼胚培养完整植株.(4)应用:①通过“胚拯救"获得远缘杂种。
通过“胚拯救” 即可克服这种受精后障碍，产生远缘杂种。
“胚拯救”的方式有3种：一是杂种幼胚在人工培养基上培养，二是杂种幼胚的胚乳看护培养，三是杂种幼胚的愈伤组织培养。
其步骤是：有性杂交杂种幼胚培养杂种愈伤组织形成愈伤组织增值茎芽分化植株再生。
②获得单倍体。
在远缘杂交之后，通过染色体的定向消除而产生单倍体，是胚培养的另一项新用途。
③打破种子休眠，缩短育种周期。
在有些情况下，园艺植物如落叶树的育种工作，会因种子休眠期太长而延误。
通过胚的离体培养，可使休眠期缩短。
许多植物的种子发育不完全或有抑制物存在而影响种胚发芽。
④提高种子萌发率。
长期营养繁殖的植物具有形成种子的能力，但其生活力较低，萌发成苗率低下，胚培养可促进这类种子萌发和形成幼苗。
⑤种子生活力的快速测定。
通过胚培养可以打破种子休眠，因而也可以利用这项技术进行种子生活力的快速测定。
三、植物超低温保存的概念是什么？它的基本操作程序如何？1、植物超低温种质保存的概念；指将植物的离体材料包括茎尖(芽)、分生组织、胚胎、花粉、愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等，经过一定的方法处理后在超低温(一196℃液氮)条件下进行保存的方法。
2、基本操作程序；一、简述单倍体在遗传研究和植物育种中的意义和单倍体获得的途所谓单倍体，指的是具有配子染色体数的个体或细胞。
(一)意义：（1）单倍体是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。
在诱导频率较高时，单倍体能在植株上较充分地显现重组的配子类型，可提供新的遗传资源和选择材料。
显著缩短了育种年限。
（二）途径1整体操作技术①雌核发育。
通过阻止授粉途径(利用预先离子辐射处理的花粉或使用不亲和花粉)，引起未受精卵细胞发育成单倍体植株。
②胚珠雄核发育。
由有雄核的卵细胞发育成单倍体植株。
在这种发育途径中，卵细胞核在受精前发生消失或失活。
③通过远缘杂交消除一个亲本的基因组。
这种情况出现在属间和种间杂交中，在受精之后的发育过程中双亲之一的基因组被选择性消除。
于是，形成的胚只具有一亲本的基因组，由此发育形成的植株理所当然属于单倍体。
④半受精。
杂交过程中，卵细胞核与萌发花粉粒产生的精核不发生融合，各自独立地进行分裂，产生嵌合的单倍体植株。
⑤化学处理。
一些化学试剂如氯霉素和对氟苯丙氨酸，可能诱导体细胞或组织中的染色体丢失，产生单倍体。
用甲苯蓝、顺丁烯二酰肼、一氧化二氮和秋水仙素也可能产生类似的结果。
⑥高低温处理。
高低温处理，可以起到抑制配子融合，诱导单倍体的作用。
⑦辐射效应。
据报道，X射线或紫外线能诱导染色体断裂，导致亲本的染色体丢失，形成单倍体植株。
2花药、花粉的离体培养技术花药和花粉培养都指在合成培养基上，改变花粉的发育途径，使其不形成配子，而像体细胞一样进行分裂、分化，最终发育成完整植株。
花药的离体培养过程中，花粉粒的命运会脱离常轨，最终发育成一个单倍体的孢子体。
为什么会这样呢？这涉及到花粉小孢子的发育途径。
五、试述单倍体植株的鉴定方法及其染色体加倍的方法。
1）花粉和花药植株的倍性鉴定：染色体直接计数法、间接鉴定（扫描细胞光度仪鉴定、细胞形态学鉴定法、植株形态学鉴定法、高／低温胁迫法、杂交鉴定法分为自交鉴定和测交鉴定、分子标记鉴定分为①生化标记鉴定②分子标记研究）2）花粉和花药植株的染色体加倍茎段培养：单倍体愈伤组织培养过程中会有一定频率的核内有丝分裂(没有核分裂的染色体复制)及花粉核的融合，形成二倍体细胞，可有意识地利用这一特点来获得纯合的二倍体植株。
化学试剂诱变:单倍体植物染色体加倍用得最多的是化学诱变法，常用的诱变剂有秋水仙素和Oryzalin(黄草消)、trifluralin(氟乐灵,一种除莠剂)、APM(amiprophos methyl)等除草剂，其中秋水仙素应用最广泛。
二、简述离体授粉的程序。
①确定开花、花药开裂、授粉、花粉管进入胚珠和受精的时间；②去雄后将花蕾套袋隔离；③制备无菌子房或胚珠；④制备无菌花粉；⑤胚珠(或子房)的试管内授粉。
胚珠培养的意义为：①通过受精前胚珠培养以及未受精的胎座或子房培养，可以作为试管受精的基础；②利用胚珠培养技术，使杂种尽早培养，防止杂种胚早期败育，获得杂种植株；③未受精的胚珠培养能和花药培养一样，诱导出大孢子或卵细胞增殖，形成单倍体植株，用于单倍体育种。