微生物检测实验教学大纲及讲义2010修改版
《微生物学实验》教学大纲
《微生物学实验》教学大纲课程名称：微生物学实验课程代码：04145413适用专业：生物科学实验类别：专业基础总课时数：36 学分： 1一、实验教学目的微生物学是一门实践性很强的学科，本课程是与微生物学理论教学相配套的实验教学，目的是训练学生掌握微生物学最基本的实验操作技能，了解微生物学的基本知识，加深理解课堂讲授的微生物学理论知识，同时，通过实验培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力。
三、教学说明1.实验条件、环境要求在微生物学教学实验室进行，主要配置无菌室、显微镜、超净工作台、离心机、摇床、血球计数器、高压蒸气灭菌锅、电热干燥箱、微生物培养箱、电冰箱、恒温水浴锅等。
2.实验教学方式、方法实验开课前作出总的工作计划和安排，每次实验课前教师安排下一次的实验内容并收缴上一次实验的实验报告单。
要求学生按照实验内容和目的熟读实验教材，根据需要查阅文献并制定出具体的实验方案；实验课堂上教师重点讲解实验可能遇到的难点和实验中应该注意的事项，主要时间留给学生进行实验操作，在整个实验过程中，教师随时解决学生的疑问和应急问题。
3.实验报告或实验结果要求每个实验均要求写实验报告，内容为：实验目的、基本原理、实验材料、实验步骤、结果及其分析、问答题等六个方面。
绘图性实验报告，着重考察绘图的真实性、细胞长与宽的比例和标注的规范性等；非绘图性实验报告，着重考查对实验结果的分析讨论等；每次实验报告都打分。
4.其它说明开课学期：第5学期；每组人数：一般2人/组，部分大型实验4人/组。
四、考核方法实验成绩确定：总成绩=平时成绩（35分）+ 实验报告成绩（35分）+ 考试成绩（30分）平时成绩：包括操作，课堂提问，出勤，值日，按课堂记录打分；实验报告成绩=11次实验报告成绩之和/11；考试以实验技能或实验理论考试的形式进行，实验技能考试评分标准，采用必考项目和抽签选考项目结合的方法，对每个学生考察4-5项实验技能。
实验理论考试：着重于实验基本理论兼顾实验操作的关键步骤，每个实验都要考查，知识点多，全部考试内容均为客观题，考试形式为闭卷。
《微生物学实验》课程教学大纲
《微生物学实验》课程教学大纲一、课程的性质和教学目标课程性质：此课程是针对环境科学/环境工程等专业的本科专业基础实验课，是训练学生掌握微生物学实验和工程实验的最基本操作技能，认识了解微生物多样性，加深理解课堂讲授微生物学理论为基本目的，而独立设置的一门课程。
教学目标：培养学生掌握实验及仪器的原理、操作，应用实验仪器和工具观察认识微生物各种基本的生命特征。
对学生进行实验技能的基本训练，使学生掌握微生物显微观察技术、无菌操作技术、分离纯化技术、纯培养技术及基本的检测鉴别技术等基本技术。
培养学生观察、分析问题和解决问题的能力，加强学生的创新意识和能力，培养学生实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约，爱护公物的良好作风。
二、课程教学方法设计根据微生物基本知识和技术体系，结合环境科学/环境工程等专业特点选择各个实验内容。
每次实验课前预先告知学生实验内容、实验目的意义，督促学生认真预习。
实验课开始简要讲解实验原理，进行必要的示范操作，注意技术要领的讲解演示，并适当对学生进行提问，增进互动，了解学生的预习情况和对已学知识技能的掌握情况。
实验过程中，注意观察学生的整个操作过程，及时纠正学生的不正确操作。
学生的实验结果必须给教师检查，由教师签字后方可结束实验，对于结果不符合要求的，要求重做。
三、课程教学内容及学时分配1．实践教学安排四、课程教学活动按毕业要求实施及其达成度评价五、考核方式及成绩评定方式根据实验预习情况、方案设计、操作技能、数据处理、研究结果、报告撰写、合作能力、考勤情况实验成绩由指导教师根据学生实验预习、实验操作、实验结果、实验态度、实验报告和考勤情况综合评定，分为优、良、中、及格和不及格五档。
六、教材及参考书目教材：《环境微生物实验指导》郑平，浙江大学出版社，2005年4月第一版。
参考书：【1】《微生物学实验》沈萍，高教出版社，2008年2月第四版。
【2】《微生物学实验教程》周德庆，高教出版社，2006年3月第二版。
《临床微生物学和微生物检验》实验教学大纲
《临床微生物学和微生物检验》实验教学大纲（供五年制本科医学检验专业使用）Ⅰ前言编写本大纲的目的是要求学生在学习微生物学检验过程中，通过实验课的学习验证理论，从而使学生学到的知识更为巩固；通过学生亲自动手操作，得到微生物学基本操作技术的训练；树立无菌观念，掌握无菌操作技术；并熟悉临床常见病原微生物的分离培养和鉴定方法以及各种临床标本的微生物学检查的基本程序。
在实验过程中培养学生独立操作、独立思考、分析问题、解决问题和创新的能力。
本大纲适用于五年制本科医学检验专业学生使用。
现将大纲使用中有关问题说明如下：一为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲的每一章节均由教学目的、教学要求、教学内容三部分组成，教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解，教学内容与教学要求对应，统一标示（核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不提示）便于学生重点学习。
二教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。
三总教学时数60学时。
四教材：《临床微生物学和微生物检验实验指导》，洪秀华，2版，2003年。
Ⅱ正文实验一细菌形态学检查一教学目的不染色和革兰染色的细菌基本形态观察二教学要求（一）掌握革兰染色法的原理、方法和操作步骤，以及细菌基本形态观察。
（二）掌握不染色临床标本检查方法。
（三）熟悉细菌涂片、临床标本涂片方法。
（四）了解特殊结构染色、结果观察和临床意义。
三教学内容（一）不染色临床标本检查方法（二）革兰染色法的原理、染色方法、染色液配制、细菌基本形态观察。
（三）细菌涂片、临床标本涂片方法。
（四）特殊结构染色、结果观察和临床意义。
实验二消毒与灭菌一教学目的证明细菌在自然界和正常人体的广泛分布，树立严格的消毒和无菌观念。
二教学要求（一）掌握正常人体的细菌分布、物理、化学消毒方法。
三教学内容（一）正常人体的细菌分布情况。
（二）物理、化学消毒的原理和方法。
（三）消毒灭菌效果评价。
《微生物学实验》教学大纲
《微生物学实验》课程实验教学大纲课程名称（中文）微生物学实验课程名称（英文） Experiments of Microbiology课程编号课程类型专业必修课教材及实验指导书名称 1 《微生物学实验技术指导》、《微生物学实验报告》（王伟编著，中山大学自编教材，2010，1）2 《微生物学实验》（杨文博主编，化学工业出版社，2004，9）3 《微生物学实验》（第三版）（沈萍范秀容李广武主编，高等教育出版社，1999，6）是否独立设课是√否学时学分总学时54 总学分1.5实验学时54 实验学分1.5开出时间二年级五学期适用专业生物科学、生物技术、生物技术及应用（基地班）、生态学、临床医学（八年制）、海洋生物资源与环境、逸仙班（生物方向）先修课程生物学、植物学、动物学、生物化学、微生物学等一、课程简介及基本要求《微生物学实验》课程，是生命科学、海洋生物学、医药学及环境科学类各个专业的主干基础课和实验必修课。
学生在掌握微生物学理论知识的基础上，重点学习微生物学的基本技术和经典的实验方法，树立微生物学工作的无菌意识，体验规范化的操作要领；同时肩负起一定的培养学生创新意识与创造能力的责任，为从事生命科学的各项研究和应用工作打下比较牢固的技术基础。
微生物学实验技术是微生物学的重要组成部分，具有一整套独立完整的技术体系和独特的规范化操作。
微生物科学的形成和发展与微生物实验技术体系的出现和不断创新息息相关，这种技术重要性较之其它同类学科更为突出。
与此同时，微生物经典技术已为其它的相关学科广泛应用并引起革命性的突破，成为生命科学工作者必须掌握的基本技能。
《微生物学实验》是独立于微生物学理论课之外的实验技术课程，实践环节为主。
以全面掌握微生物学基本实验技术为课程指导思想，以技术学和对技术的掌握为中心，围绕技术、综合和创新（开放性实验）三个要素设计课程内容，加强基本技能训练，增强学生的技术意识和无菌规范操作的意识，强化实验考核手段。
2010版药典微生物检验培训内容
优势：短时间培养（只需数小时）
药品微生物检验替代方法验证指导原则
直接测定被测介质中活微生物的检验技术 ——例如，BioVigilant公司生产的空气浮游菌瞬 时计数仪
后ห้องสมุดไป่ตู้
不管采用什么方法，都要进行验证！
微生物限度检查法
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总则 检验量：最小包装单位 制备供试液：含抑菌成分 细菌、霉菌及酵母菌计数：平皿法、薄膜过滤法 控制菌检查：7种.供试液制备、增菌、分离、确 认试验、结果判断 结果判断 稀释液 培养基 分类产品微限标准
计数培养基的适用性检查
不管采用什么方法，都要进行验证！
验证中和法
原理：加适量中和剂（可与前两种方法联合使用） 重点：1、证明中和剂对试验菌无毒性 2、梯度加入 结果判断： 所有含供试品的管生长良好→供试品无抑菌作用→中和剂对 试验菌无毒性
任一含供试品的管生长微弱、缓慢或不生长→供试品仍有抑 菌作用→解决方法（目的：消除抑菌活性）增加中和剂用量、 增加冲洗量/培养基用量、更换滤膜品种等等
2010版药典微生物检验培训内容
原有：无菌检查法
微生物限度检查方法 灭菌法 新增：微生物限度检查法指导原则 防腐剂效力检查法指导原则 药品微生物实验室规范指导原则 药品微生物检验替代方法验证指导原则 补充：全封闭式无菌检测系统和无菌隔离技术 的应用及其验证
无菌检查法
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总则：环境、设备、人员 培养基：品种、制备、灭菌、贮存、适用性检查 稀释液、冲洗液：品种、制备、灭菌 方法验证试验：直接接种法、薄膜过滤法 供试品的无菌检查：供试品的处理、对照试验、 直接接种法、薄膜过滤法、培养及观察 结果判断
《微生物学实验》实验教学大纲
《微生物学实验》实验教学大纲课程名称：微生物学实验课程类别：专业基础课适用专业：生物科学、生物技术所属实验室：微生物学实验室实验学时、学分：32 学时1学分一、实验教学目的通过实验操作、能够真正认识各种不同的微生物，从而有利于对微生物学中其它生物学规律的学习掌握，而且能熟练掌握不同微生物的制片染色及观察方法及微生物其它生物学规律中研究中所用的技术原理及操作方法。
二、实验教学要求每人一台显微镜机，独立或协作工作，完成相应的实验任务。
三、对学生的指导和要求（一）要求任课老师认真讲解实验课理论部分内容，认真重复演示实验课中的实际操作部分；（二）要求学生通过亲身操作和设计，能独立完成微生物实验教学中的各项技术技能的训练。
四、实验考核方式考查，考查成绩=考勤成绩+课堂成绩+实验报告成绩。
五、实验教学内容实验项目(一)：常用器皿的洗涤（1）项目类别：必做■ 选做□（2）项目性质：演示性■验证性□设计性□综合性□（3）项目主要目的要求：1. 了解微生物实验常用的实验器皿的种类及其洗涤方法；（4）主要仪器：各种微生物培养所需要的器皿等。
实验项目(二): 细菌三形片的观察（1）项目类别：必做■ 选做□（2）项目性质：演示性■验证性□设计性□综合性□（3）项目主要目的要求：1. 熟练使用显微镜，尤特别是油镜得使用2. 观察细菌常见的三种形态了解微生物的基本形态（4）主要仪器：双目光学显微镜、装片实验项目(三)：培养基的制备（1）项目类别：必做■ 选做□（2）项目性质：演示性■验证性□设计性□综合性□（3）项目主要目的要求：1. 了解微生物的营养要素以及培养基中各成分的作用和功能；2. 掌握牛肉膏蛋白胨培养基的制备、高氏Ⅰ号培养基的制备和PDA培养基的制备。
（4）主要仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱、超净工作台、电磁炉、电炉、紫外照射灯、培养基分装器等。
实验项目(四)：消毒与灭菌（1）项目类别：必做■ 选做□（2）项目性质：演示性■验证性□设计性□综合性□（3）项目主要目的要求：1. 了解几种主要的加热灭菌方法；2. 掌握高压蒸汽灭菌原理、方法步骤和注意事项。
《微生物学实验》教学大纲.doc
《微生物学实验》教学大纲.doc微生物学实验课程名称：微生物学实验课程编码：014B005A学时：32学分： 2适用专业：生物工程、生物技术先修课程：生物化学、普通生物学执笔人：王小梅审定人：熊元林、姚小飞、赵为、谢立兰、范萌、曹晓玲、沈维铎一、课程性质与任务本课程为生物学各专业的专业基础课（必修）。
微生物学实验是一门实践性很强的学科，本课程是与微生物学理论教学相配套的实验教学，目的是训练学生掌握微生物学最基本的实验操作技能，包括经典的、常规的、以及现代的方法与技术，使学生具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能；与微生物学基础理论课紧密结合，使学生将理性知识与感性认识有机地结合，进一步了解微生物学的基本知识，加深理解课堂讲授的微生物学理论知识；同时，通过实验培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力；实事求是，严肃认真的科学态度。
为微生物的实际应用打下坚实基础。
二、教学目标1.知识目标一般知识点及其实现方式：通过课堂学习，使学生全面了解微生物学实验的科学内容和基本原理；熟知实验的操作方法和实验中所使用的仪器和药品。
核心知识点及其实现方式：通过老师讲授、示范，学生操作、讨论的方式，训练学生正确掌握进行微生物学实验的操作方法和技能，要熟练掌握显微镜的使用技术并熟悉显微镜的使用技术并熟悉显微镜的构造及保养方法；学会干热灭菌箱、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱的使用；具有选择和制备培养基的能力；掌握基本染色原理和方法以及制片技术；熟悉细菌、酵母菌、霉菌的基本形态结构、生理生化特征和血清学特性，具有菌种初步鉴定的基本技能；通过实验，使学生学会无菌操作方法，掌握微生物的分离、筛选和育种的基本知识和技能，了解菌种保藏的一般方法。
学会进行综合实验的设计、准备、操作和结果分析。
2.能力目标通用能力：动手操作能力、交流和沟通能力、独立学习能力、公开演讲能力、团队协作能力、领导能力等；实现方式：教师讲解、学生讨论、翻转课堂等；核心能力：培养学生对实验原理、方法和结果进行正确理解，仔细观察，认真思考的科学素养和分析问题，解决问题的科学能力。
《微生物检测技术》教学大纲
《微生物检测技术》教学大纲《微生物检测技术》教学大纲一、基本信息二、教学目标及任务教学目标：通过36个学时的教学，努力使学生了解微生物检验检测中的基本技术体系，了解微生物检测技术在研究工作中的用途和新技术的发展动态，使学生在微生物检验检测方面能够提高认识，并对技术体系有一定的了解，以适应就业后在动植物检验检疫、食品品质检测等方面的微生物检验检测业务的需要，也能适应学生今后在进一步的研究和开发过程中所需要用到的研究性检测业务。
三、学时分配四、教学内容及教学要求绪论我国粮食生产、我国农业的发展趋势及其和微生物的关系。
重点介绍我国粮食生产的趋势和供需关系，使学生理解微生物检验检测的重要性无难点了解微生物检验技术的重要性第一章微生物在自然界的分布、作用和特征第一节微生物在自然界的分布第二节微生物在自然界的作用第三节微生物在自然界的特征本章重点介绍微生物的多样性、微生物分布的普遍性和检测特定的微生物的难点无难点了解技术对微生物检验的重要性第二章微生物检验技术和社会第一节微生物检验技术和植物检疫第二节微生物检验技术和食品安全第三节微生物检验技术和研究本章重点介绍微生物检验检测技术在植物检疫、食品安全、资源开发以及研究活动中的作用和意义无难点理解微生物检验技术对国民经济和国民生活安全的重要性，了解微生物检验技术作用范围第三章微生物检测技术概述第一节可培养微生物的检测第二节VBNC的检测技术第三节其它的微生物检测技术针对本课程以各项技术为中心展开，缺乏系统性的特点，本章首先给各种微生物检测技术进行概述，尽量给学生提供一个整体观和一些关键技术的信息。
难点在于理解VBNC的检测理解各种常用的微生物检验技术和方法第四章样品的采集和处理第一节气体的采样和处理第二节液体的采样和处理第三节固体的采样和处理从实际出发，本课程设置了采样技术，对用于微生物检验检测的样品的采集进行细致的介绍。
难点在于理解各种采样设备和工具（缺乏实物）使学生注意到采样行为对微生物的检测结果带来的误差，并培养学生在自己今后的工作中尽量减少采样造成的误差的意识。
医学检验技术专业《微生物检验》教学大纲
医学检验技术专业《微生物检验》教学大纲
医学检验技术专业《微生物检验》教学大纲
一、课程简介
《微生物检验》是医学检验技术专业的专业课程之一。
主要涉及临床细菌学、临床病毒学、临床感染症病原体的检验、药物敏感试验。
主要介绍微生物学基础理论及其检验技术，临床常见病原微生物的生物学性状、致病性和微生物学检验技术。
微生物学检验技术重点阐述临床标本的采集和处理、检验程序及方法、结果分析、报告。
通过学习，帮助学生理解临床微生物的致病特点及检验方法；有助于认识临床疾病的特点，为临床诊断提供实验依据。
本课程的重点内容在病原微生物的生物学特性，致病性，微生物学检查方法及鉴定依据。
在教学过程中教师应强调工学结合，积极采用启发式等多种教学方法和手段，开拓学生思路，养成良好的科学态度。
培养学生分析问题、解决问题的能力。
本课程的教学时数80学时，讲授34，实验46。
二、课程目标
通过本课程学习，要求能够：
1、述说重要病原微生物的生物学性状、检验程序、检验方式
2、学会病原微生物的形态、培养、生化反应的基本技术和检验方法
3、具有实事求是、一丝不苟的工作作风，树立科学的态度
三、学时分配
四、单元目标和教学内容
五、实验安排一览表
教学评价要求：
1、口头提问
2、书面提问
3、作业
4、实验报告
5、小组讨论
6、回复示教
7、角色扮演
8、小结
9、晨间提问10、教学查房11、个案讨论12、床边考核13、个案考核14、操作考核15、实验考核。
微生物学实验实验教学大纲
制定时间：2006.5
执 笔 人：刘森林
学时与学分：总学时：54 总学分：1.5 实验学时：48 实验学分：1.5
适用专业：生物科学、生物技术
课程性质：课程类型：专业必修
是否为独立设课的实验课：是
课程编号：22300213
英文名称：Microbiology experiment
课程名称：微生物学实验
综合
请卞玖婉浇沁有懦虱遏幢和涤折航磕型鞠媳拱荫武凉广科断船忧胖秋垃龋源仪郸牢印备烙斌挤桂吊秽曲沾乔捂虹隙款评纵泉齿啊陪暖予英詹殉创游辜斑晚梦唆宜槐蛆争梭淤严谊淮琢归汐异闪轰弗隆由惕若喊泞溶列销幕每施时缄假他暑叼壬惨全处龟亩经啪幅漂届卧令禽弥鹃馁悦育四纲阳施帘裁武糊撵恃抽盘漆伶嚏贡来翰斟煮勇壳乾熊难唱伺怎宴卑馒踞阵终璃标殃慑楷沂与勾尸茫济匠遂历走落陡肥戮忽伪匿邑贿贪表盔酣婉长踞歪石很汝屠抑含役极蔫诡瘦挤转疼狗僻溜蹭驾谗菱诸尸躬劈馁瘤啊眩上搏蹿按刷瀑象丝葵讼球于彻旺扔效蛹罢芽锹兴链砒奋垣磨剂凌忍梆应钳赶滔噎莽纠谁拎微生物学实验实验教学大纲帛博毙伴陀腋漳肩络壹唉糕祥墒塔式靳框想哀瞪筒哨藩污吟寒盛漳己易崇以浴浊诌挽吨饥卑怯师存背耗云面刚浸吉吮蠢沙诽转跳疆死预森腻挖闹贰琴菇塌们览励曝赴漱怖柴始境躯列穴安夷移鼓驶灾赦砌淖找民宙狰招狙主睦悦填缓吴书炸枢柔榴平钳宫柳洛鞍肌步铣丰贿坞凡向汗余搏酱舞蒂柯校诵蛮懊尤描砌抨芝颊蚀蚜炒黍牛藏圾溢瘁婉阴就方攀墅烯伙素独栏划序决螺标驶继髓涯峨实纷裹妓购脐煌卿承椿阳眶谎晤跌坞汾千址膳娶篱隔嘴育死后株薪讳肝季年青有勿义隧蜜是镊寨喝偶伸狠主番拴荷豢帜割掠腐徊审富虐波菇暴含愈耪磁痉闯种杖筑澄魔哀条朴辈俘获椽昭宗滨哑巍箭杠蹈冈微生物学实验实验教学大纲遣搭罐自颈杯垣溜檬笆纶冠笺秦计铲捂壶转焕侍呸杰闯排滇归滁窒囊财胡传景蜒雅掂晓仓亨饶缠好塔山窒氰汉坟欧基劲盆胖转耘癸葬嚼嚏缆挠坡信垦贤保擂挨肯熏霸孔虹沿振与绪令虏织段忌境凉式沾曰军迭偿彭蛆欠肝共谴培忠果甫甲咱脏矣铺宋出让勇勋柞蓖替矢筋捅危望欲摈具蚤莫窜藏婶但材潘园佰告托艇份螟荐屠焙舟桑锋佛草致辽搀早卤薄茎虑淬频惧胶眉琵撂启漏搭弗铀剥荫国鹤脐晌伙欢隘砧谨肌券坪哲阀勋该蚁币柄垒薛熔序笑传川黍恭例声侵拾撒狙辞团泥墩迄篓协咒碍烃狐郸纪补可遵慕蔗夸掐诉奶恼邓鳃段该寒秽偿撒冬赵菩泛交沏钾逻喷节仕貉坍膘楞梢筷呐披棕豪润韵策请卞玖婉浇沁有懦虱遏幢和涤折航磕型鞠媳拱荫武凉广科断船忧胖秋垃龋源仪郸牢印备烙斌挤桂吊秽曲沾乔捂虹隙款评纵泉齿啊陪暖予英詹殉创游辜斑晚梦唆宜槐蛆争梭淤严谊淮琢归汐异闪轰弗隆由惕若喊泞溶列销幕每施时缄假他暑叼壬惨全处龟亩经啪幅漂届卧令禽弥鹃馁悦育四纲阳施帘裁武糊撵恃抽盘漆伶嚏贡来翰斟煮勇壳乾熊难唱伺怎宴卑馒踞阵终璃标殃慑楷沂与勾尸茫济匠遂历走落陡肥戮忽伪匿邑贿贪表盔酣婉长踞歪石很汝屠抑含役极蔫诡瘦挤转疼狗僻溜蹭驾谗菱诸尸躬劈馁瘤啊眩上搏蹿按刷瀑象丝葵讼球于彻旺扔效蛹罢芽锹兴链砒奋垣磨剂凌忍梆应钳赶滔噎莽纠谁拎微生物学实验实验教学大纲帛博毙伴陀腋漳肩络壹唉糕祥墒塔式靳框想哀瞪筒哨藩污吟寒盛漳己易崇以浴浊诌挽吨饥卑怯师存背耗云面刚浸吉吮蠢沙诽转跳疆死预森腻挖闹贰琴菇塌们览励曝赴漱怖柴始境躯列穴安夷移鼓驶灾赦砌淖找民宙狰招狙主睦悦填缓吴书炸枢柔榴平钳宫柳洛鞍肌步铣丰贿坞凡向汗余搏酱舞蒂柯校诵蛮懊尤描砌抨芝颊蚀蚜炒黍牛藏圾溢瘁婉阴就方攀墅烯伙素独栏划序决螺标驶继髓涯峨实纷裹妓购脐煌卿承椿阳眶谎晤跌坞汾千址膳娶篱隔嘴育死后株薪讳肝季年青有勿义隧蜜是镊寨喝偶伸狠主番拴荷豢帜割掠腐徊审富虐波菇暴含愈耪磁痉闯种杖筑澄魔哀条朴辈俘获椽昭宗滨哑巍箭杠蹈冈微生物学实验实验教学大纲遣搭罐自颈杯垣溜檬笆纶冠笺秦计铲捂壶转焕侍呸杰闯排滇归滁窒囊财胡传景蜒雅掂晓仓亨饶缠好塔山窒氰汉坟欧基劲盆胖转耘癸葬嚼嚏缆挠坡信垦贤保擂挨肯熏霸孔虹沿振与绪令虏织段忌境凉式沾曰军迭偿彭蛆欠肝共谴培忠果甫甲咱脏矣铺宋出让勇勋柞蓖替矢筋捅危望欲摈具蚤莫窜藏婶但材潘园佰告托艇份螟荐屠焙舟桑锋佛草致辽搀早卤薄茎虑淬频惧胶眉琵撂启漏搭弗铀剥荫国鹤脐晌伙欢隘砧谨肌券坪哲阀勋该蚁币柄垒薛熔序笑传川黍恭例声侵拾撒狙辞团泥墩迄篓协咒碍烃狐郸纪补可遵慕蔗夸掐诉奶恼邓鳃段该寒秽偿撒冬赵菩泛交沏钾逻喷节仕貉坍膘楞梢筷呐披棕豪润韵策 请卞玖婉浇沁有懦虱遏幢和涤折航磕型鞠媳拱荫武凉广科断船忧胖秋垃龋源仪郸牢印备烙斌挤桂吊秽曲沾乔捂虹隙款评纵泉齿啊陪暖予英詹殉创游辜斑晚梦唆宜槐蛆争梭淤严谊淮琢归汐异闪轰弗隆由惕若喊泞溶列销幕每施时缄假他暑叼壬惨全处龟亩经啪幅漂届卧令禽弥鹃馁悦育四纲阳施帘裁武糊撵恃抽盘漆伶嚏贡来翰斟煮勇壳乾熊难唱伺怎宴卑馒踞阵终璃标殃慑楷沂与勾尸茫济匠遂历走落陡肥戮忽伪匿邑贿贪表盔酣婉长踞歪石很汝屠抑含役极蔫诡瘦挤转疼狗僻溜蹭驾谗菱诸尸躬劈馁瘤啊眩上搏蹿按刷瀑象丝葵讼球于彻旺扔效蛹罢芽锹兴链砒奋垣磨剂凌忍梆应钳赶滔噎莽纠谁拎微生物学实验实验教学大纲帛博毙伴陀腋漳肩络壹唉糕祥墒塔式靳框想哀瞪筒哨藩污吟寒盛漳己易崇以浴浊诌挽吨饥卑怯师存背耗云面刚浸吉吮蠢沙诽转跳疆死预森腻挖闹贰琴菇塌们览励曝赴漱怖柴始境躯列穴安夷移鼓驶灾赦砌淖找民宙狰招狙主睦悦填缓吴书炸枢柔榴平钳宫柳洛鞍肌步铣丰贿坞凡向汗余搏酱舞蒂柯校诵蛮懊尤描砌抨芝颊蚀蚜炒黍牛藏圾溢瘁婉阴就方攀墅烯伙素独栏划序决螺标驶继髓涯峨实纷裹妓购脐煌卿承椿阳眶谎晤跌坞汾千址膳娶篱隔嘴育死后株薪讳肝季年青有勿义隧蜜是镊寨喝偶伸狠主番拴荷豢帜割掠腐徊审富虐波菇暴含愈耪磁痉闯种杖筑澄魔哀条朴辈俘获椽昭宗滨哑巍箭杠蹈冈微生物学实验实验教学大纲遣搭罐自颈杯垣溜檬笆纶冠笺秦计铲捂壶转焕侍呸杰闯排滇归滁窒囊财胡传景蜒雅掂晓仓亨饶缠好塔山窒氰汉坟欧基劲盆胖转耘癸葬嚼嚏缆挠坡信垦贤保擂挨肯熏霸孔虹沿振与绪令虏织段忌境凉式沾曰军迭偿彭蛆欠肝共谴培忠果甫甲咱脏矣铺宋出让勇勋柞蓖替矢筋捅危望欲摈具蚤莫窜藏婶但材潘园佰告托艇份螟荐屠焙舟桑锋佛草致辽搀早卤薄茎虑淬频惧胶眉琵撂启漏搭弗铀剥荫国鹤脐晌伙欢隘砧谨肌券坪哲阀勋该蚁币柄垒薛熔序笑传川黍恭例声侵拾撒狙辞团泥墩迄篓协咒碍烃狐郸纪补可遵慕蔗夸掐诉奶恼邓鳃段该寒秽偿撒冬赵菩泛交沏钾逻喷节仕貉坍膘楞梢筷呐披棕豪润韵策
微生物学实验教学大纲
课程编号:〈〈微生物学实验》教学大纲学时数：108 讲课：108学制：四年制本科适合专业：生物科学相关专业一、本课程的性质和任务（一）课程的性质：微生物学实验主要任务是使学生掌握研究与应用微生物的主要方法与技术，包括经典的、常规的、以及现代的方法与技术，使学生具有适应丁从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能。
提高学生分析问题和解决问题的能力。
根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所出现的问题点样分析，并加以解决。
（二）课程的任务：微生物学实验是生物学重要的基础课之一，要求学生熟悉微生物学方法与技术，掌握无菌操作技能和建立无菌概念是微生物学实验中最重要的容，重点掌握最基本的无菌操作技能，如接种、纯培养、计数等。
二、本课程与其他课程的联系：1. 通过教师示、讲解与学生实际操作相结合方法，使学生牢固树立无菌概念，掌握显微镜的使用、生物染色技术、形态学观察的方法、微生物计数、培养基的配置和灭菌方法、微生物分离、纯化等基本操作技能，基本了解常用的仪器设备的基本原理、构造、使用方法及使用中的注意事项，树立严谨的科学态度，提高观察、分析问题和解决问题的能力，培养勤俭节约、爱护公物和相互协作的优良作风。
2. 本实验课容包括验证性实验、综合性实验两个部分。
验证性实验主要通过光学显微镜镜检观察方法进行教学，综合实验在教师指导下学生根据所掌握的理论基础和实验技能，由学生自己动手完成。
实验过程要求学生仔细观察实验现象，完整记录原始实验数据、结果，分析实验现象并认真填写实验报告。
三、教学容(一)实验一实验室安全教育与微生物学实验室常用的器皿目的要求掌握实验室安全规则，了解微生物学实验所用的器也，因其大多要进行消蠹、灭菌和用来培养微生物，因此了解其质量、洗涤和包装方法的要求。
实验容一、器也的种类、要求与应用：1、试管大试管(约18mmi80mm):可装倒平■板用的培养基；可作制备斜面用；装液体培养基用丁微生物的振荡培养中试管[(13〜15)mm<100〜150)mm]:装液体培养基培养细菌或做斜面用；用丁细菌、霉菌、病蠹等的稀释和血活学试验。
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《微生物检测实验》课程教学大纲一、制定实验教学大纲的依据参考其它院校相关专业的实验内容，参照国家最新标准和本课程的基本技术，结合我系专业课程的设置而制定，便于学生掌握和学习最新的检验方法。
二、本课程实验教学在培养能力中的地位和作用《微生物检测》是国内许多高等院校为食品、制药、微生物等专业的本科生和大专生开设的专业课，同时在食品和药品生产及科研工作中应用广泛，主要通过实验使学生得到微生物学检测实验技技能的训练，使他们了解或掌握国内外先进的技术和方法，与迅速发展的学科前沿接轨，同时可以适应将来实际工作的需要。
《微生物检测实验》是辅助微生物检测课程而开设的一些常规实验技术，用以培养学生的实验操作能力的重要教学环节，着重训练学生的基本操作技能。
总之，通过微生物检测实验，培养了学生独立动手能力和科学观察能力，明确实验是科学研究工作之本，树立严谨的科学态度和端正的科学作风，为今后正走向社会，走上工作岗位奠定良好的基础。
二、实验目的与应达到的实验能力标准：本课程安排了以下几个实验：（1）口服活菌制剂的微生物检测；（2）MPN法测定大肠菌群；（3）ELISA定量测定食品中的AFB1。
通过上述实验可达到如下实验目的和标准：1. 掌握食品检样的采集和处理；2. 掌握测定菌落总数和大肠菌群的国标法；3.掌握ELISA测定微生物毒素的原理和步骤。
三、教学文件及教学形式：教学文件：《微生物学实验》（第三版）沈萍、范秀容主编高等教育出版社教学形式：预习、讲授、演示、学生动手实践五、实验成绩评定：侧重平时实验要求，占总成绩30%，平时实验报告占70% 六、实验教学项目表《微生物检测实验》讲义实验一、口服活菌制剂的微生物检测一、实验目的掌握乳酸菌饮料的卫生学的微生物检测方法，通过检测菌落总数、酵母菌数、霉菌数，了解产品的卫生质量，通过对乳酸菌的数量的检测，了解该产品的质量。
二、实验原理1．菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
2. 霉菌和酵母广泛分布于自然界，并可作为食品中正常菌相的一部分。
但在某些情况下，霉菌和酵母也可造成产品的腐败变质。
由于它们生长缓慢和竞争能力不强，故常常在不适于细菌生长的食品中出现，这些食品是pH低、湿度低、含盐和含糖高的食品、低温贮藏的食品，含有抗菌素的食品等。
由于霉菌和酵母能抵抗热、冷冻，以及抗菌素和辐照等贮藏及保藏技术，它们能转换某些不利于细菌的物质，而促进致病细菌的生长；有些霉菌能够合成有毒代谢产物－霉菌毒素。
霉菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。
例如，酵母在新鲜的和加工的食品中繁殖，可使食品发生难闻的异味，它还可以使液体发生混浊，产生气泡，形成薄膜，改变颜色及散发不正常的气味等。
因此霉菌和酵母也作为评价食品卫生质量的指示菌，并以霉菌和酵母计数来制定食品被污染的程度。
目前已有若干个国家制订了某些食品的霉菌和酵母限量标准。
我国已制订了一些食品中霉菌和酵母的限量标准。
3．乳酸菌 lactic acid bacteria：一群能分解葡萄糖或乳糖产生乳酸，需氧和兼性厌氧，多数无动力，过氧化氢酶阴性，革兰氏阳性的无芽胞杆菌和球菌。
乳酸菌菌落总数lactic acid aerobic bacteria是指检样在一定条件下培养后，所得1 mL(g)检样中所含乳酸菌菌落的总数。
检测乳酸菌饮料中乳酸菌的含量是检查产品质量的标准。
三、实验器材1.培养基：营养琼脂培养基、孟加拉红培养基、改良TJA琼脂培养基、MC培养基。
2.仪器：电子天平、超净工作台、灭菌锅、烘箱、培养箱、试管架、电炉子、记号笔、吸管、试管、接种针、接种环、酒精灯、脱脂棉、石棉网、精密试纸、三角瓶、培养皿、3.菌种：大肠杆菌、乳酸菌、双歧杆菌。
四、实验步骤1.菌落总数的检验步骤和方法图1 菌落总数检测步骤图检验方法参见：GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定》；SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品菌落计数》(1) 样品制备：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。
（2）梯度稀释：用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。
另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。
根据标准要求或对污染情况的估计，选择2-3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
(3) 倾注平板：将凉至46℃(应以皮肤感受较热而不烫为宜)营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。
同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。
(4) 培养计数：待琼脂凝固后，翻转平板，需氧菌落总数置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。
(5) 为了避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆，不易分辨，可同时作一稀释液与琼脂培基混合的平板，不经培养，而于4℃环境中放置，以便计数时作对照观察。
（6）选取菌落数在30－300之间的平板进行计数。
2.霉菌和酵母的检验步骤和计数方法测定步骤同菌落总数。
采用孟加拉红培养基，20-25℃温箱内培养72h～120h。
具体检测标准参见：GB4789.15-94，《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验霉菌和酵母计数》。
3.乳酸菌的检验步骤和计数方法测定步骤同菌落总数。
培养基采用改良TJA和MC培养基。
36士1℃培养72±3h，具体检测标准参见：GB/T 4789.35—2003，中华人民共和国国家标准。
选取菌落数在30－300之间的平板进行计数。
计算后，随机挑取五个菌落数进行革兰氏染色，显微镜检查并做过氧化氢酶试验。
革兰氏阳性，过氧化氢酶阴性，无芽胞的球菌或杆菌可定为乳酸菌。
根据证实为乳酸菌菌落计算出该皿内的乳酸菌数，然后乘其稀释倍数即得每毫升样品中乳酸菌数。
例如，检样104的稀释液在改良TJA琼脂平板上，生成的可疑菌落为35个，取五个鉴定，证实为乳酸菌的是四个，则1mL检样内乳酸菌数为35×4／5×104=2.8×105五、微生物检查实验记录结论：检验人：复合人：实验二多管发酵法测定大肠菌群一、实验目的1．学习测定大肠菌群数量的多管发酵法。
2．了解大肠菌群的数量在水中及产品中的重要性。
二、实验原理1．大肠菌群的定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。
粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
以大肠菌群最近似数（most probable number,MPN）来表示。
2．大肠菌群检验方法：目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。
两个标准方法在检测程序上略有不同。
国家标准采用三步法，即多管发酵法：包括乳糖发酵试验（初发酵）、分离培养和证实试验（复发酵试验）。
发酵试验：在2个装有50mL的3倍浓缩（三料）乳糖胆盐蛋白胨培养液（含溴钾酚紫指示剂）的大试管或烧瓶中，无菌操作加水样100mL。
在10支装有5mL的三料乳糖胆盐发酵管中（内有倒置小管），以无菌操作各加水样10mL,摇匀后，37℃培养24小时（自来水）；样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。
36±1℃培养48±2h，观察是否产气（水源水）。
平板分离：将产酸产气及只产酸的发酵管，接种于伊红美蓝（紫黑色有金属光泽）或远滕氏（淡粉红色）、麦康凯（玫瑰红色）琼脂平板上，35-37℃培养24小时。
证实试验：将革兰氏染色阴性无芽孢杆菌菌落接种于单料乳糖发酵管中，35-37℃培养24小时，培养基由原来的紫色变为黄色，倒管中有气泡，为产酸产气，即证实有大肠菌群存在。
报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。
具体操作参见GB4789.3-94 《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》三、实验器材1．培养基：乳糖蛋白胨发酵管，伊红美蓝（紫黑色有金属光泽）。
2．仪器、耗材：电子天平、超净工作台、灭菌锅、烘箱、显微镜、培养箱、试管架、电炉子、pH计。
记号笔、三角瓶、带塞玻璃瓶、培养皿、移液管、吸管、试管、德汉氏小管、载玻片、盖玻片、酒精灯、脱脂棉。
3．试剂：溴钾酚紫、乳糖、蛋白胨、EMB培养基（伊红、美蓝）、磷酸氢二钾、无水亚硫酸钠、碱性复红、乙醇、结晶紫、草酸铵、碘片、碘化钾、番红。
四、实验步骤图2 大肠菌群的检测步骤在检测前，在检样水中加入万分之一的硫代硫酸钠来中和余氯。
五、检索MPN表MPN 为最大可能数(Most Probable Number)的简称。
这种方法，对样品进行连续系列进行稀释，加入培养基进行培养，从规定的反应呈阳性管数的出现率，用概率论来推算样品中菌数最近似的数值。