葡萄酒中还原糖含量测定方法研究
葡萄酒、果酒-总糖和还原糖的测定-高效液相色谱法(Ⅰ法)
葡萄酒、果酒－总糖和还原糖的测定－高效液相色谱法(Ⅰ法) 1 范围
本方法适用于葡萄酒、果酒及其相关产品中总糖和还原糖含量的测定。
2 原理
利用样品中各种组分在液固两相分配系数的不同，令样品通过液相色谱柱，而将样品中的果糖、葡萄糖、蔗糖与其他组分分离。
然后再利用示差折光检测器进行鉴定，用外标法定量。
3 试剂与溶液
3.1 超纯水（或经0.45μm水系微过滤膜脱气过滤的新鲜重蒸蒸馏水）；
3.1 糖标准溶液（含总糖6.000g/L）：分别称取干燥的葡萄糖、果糖、蔗糖各0.100g （精确至0.0019），移入50mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度。
该溶液含葡萄糖、果糖、蔗糖分别为2.000 g/L。
4 仪器设备
4.1 高效液相色谱仪（配有记录系统或数据处理装置）；
4.2 示差折光检测器；
4.3 色谱柱：300 mm×6.5mm（内径），Sugar－PAK1 柱；
4.4 微过滤膜：0.45μm，水系；
4.5 脱气装置（或超声波装置）。
5 试样的制备
将样品用超纯水（或经0.45μm水系微过滤膜脱气过滤的新鲜重蒸蒸馏水）稀释至含糖量为5g/L左右，并用0.45μm水系微过滤膜过滤。
6 分析步骤
6.1 色谱条件
a.柱温：90℃；
b.流动相：超纯水；
c.流速：0.5mL/min；
d.进样量：50μL。
6.2 测量
在同样的色谱条件下，将糖标准溶液和处理好的试样分别注入色谱仪。
开启记录系统后，扳动进样阀。
葡萄酒酿制过程中糖酸和酒精度的检测
葡萄酒酿制过程中还原糖、总酸及酒精度的测定方法一、还原糖的测定在葡萄酒发酵前，测定葡萄的还原糖含量，以确定要添加的糖含量；发酵之后测定酒中的残糖含量。
1、测定方法：裴林试剂热滴定法（1）裴林氏A 、B 液标定预备试验：取裴林氏A 、B 液各5.00mL 于250mL 三角瓶中，加50mL 水，摇匀，在电炉上加热沸，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色将消失呈红色时，加2滴甲基蓝指示液，继续滴至蓝色消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积(V1ml)。
正式试验：取裴林氏A 、B 液各5.00mL 于250mL 三角瓶中，加50mL 水和比预备试验少1ml 葡萄糖标准溶液，加热至沸，并保持2min ，加2滴次甲基蓝指示液，在沸腾态下于1min 内用葡萄糖标准溶液滴至终点(消耗葡萄糖标准液，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。
（2）样品的测定预备试验：裴林试剂A 、B 液各5ml 250ml 三角瓶中 加水50ml 加入7.5ml 试样 在沸腾状态下用5g/l 的葡萄糖标液滴定至 蓝色消失成红色时 加2滴亚甲基兰指示剂 继续滴定至蓝色消失，记录体积。
正式试验：裴林试剂A 、B 液各5ml 250ml 三角瓶中 加水50ml 加入7.5ml 试样＋比预备试验少1ml 的葡标液，在沸腾状态下用5g/l 的葡萄糖标液滴定至 蓝色消失成红色时 加2滴亚甲基兰指示剂 继续滴定至蓝色消失，记录体积。
结果计算：总糖或还原糖含量g/l ＝稀释倍数）（取样体积测定试样消耗的葡标液标定消耗的葡标液葡标液⨯-⨯V V V C 2、试剂的配制及仪器需求（1）斐林试剂配制方法将36.4g CuSO4.5H2O 溶于200mL 水中，用0.5mL 浓硫酸酸化，再用水稀释到500mL 待用；取173g 酒石酸钾钠KNaC4H4O6.4H2O ，71g NaOH 固体溶于400mL 水中，再稀释到500mL ．使用时取等体积两溶液混合。
葡萄酒中总糖测定方法的研究进展
葡萄酒中总糖的检测方法
葡萄酒中总糖的分析方法包括滴 定法、比色法和新型的技术方法等。 滴定法包括直接滴定法、 反相滴定法、 间接碘量法。 比色法包括蒽酮比色法， ３，５ 二硝基水杨酸法，苯酚硫酸法。新 型的技术方法包括连续流动分析法， 短波近红外光谱技术等。 滴定法 １． 直接滴定法 国家标准《葡萄酒、果酒通用分 析方法》（ＧＢ／Ｔ １５０３８－２００６）中 ４．２．１ 即为规定的直接滴定法。该方法原理 为：利用费林溶液与还原糖共沸，生 成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝 为指示剂，以样品或经水解后的样品 滴定煮沸的费林溶液，达到终点时， 稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝 还原为无色，以示终点。根据样品消 耗量求得总糖或还原糖的含量。 该实验方法对样品的取样量、实 验过程中加热的温度、滴定速度和实 验操作人员技术水平等都有较严格的 要求。特别是对于酒体颜色较深、含
葡萄酒的分类
葡萄酒的甜味主要来自于酒中的 糖类，根据其总糖含量的多少，葡萄 酒可分为干葡萄酒、半干葡萄酒、半 甜葡萄酒、甜葡萄酒。干葡萄酒为葡 萄糖含量≤ ４．０ ｇ／Ｌ，或当总糖与总酸 （以酒石酸计）的差值≤ ２．０ ｇ／Ｌ 时， 含糖最高为 ９．０ ｇ／Ｌ 的葡萄酒。半干葡 萄酒为含糖量高于干葡萄酒、最高为 １２．０ ｇ／Ｌ 的葡萄酒， 或当总糖与总酸 （以 酒石酸计）的差值≤ ２．０ ｇ／Ｌ 时，含糖 最高为 １８．０ ｇ／Ｌ 的葡萄酒。半甜葡萄 酒为含糖量高于半干葡萄酒，最高为 ４５．０ ｇ／Ｌ 的葡萄酒。甜葡萄酒为含糖量
葡萄酒中总糖测定方法的研究进展
李晓明 魏法山 刘 燕 刘永安 河南省产品质量监督检验院
Oct. 2016
CHINA FOOD SAＧＢ／Ｔ １５０３８－２００６ 中 ４．２．１．４ 分 析 步骤即为反相滴定法。因葡萄酒酒体 颜色较深，在水解中和后颜色更深， 达到 终 点 时， 稍 微 过 量 的 还 原 糖 将 蓝 色 的 次 甲 基 蓝 还 原 为 无 色， 因 此 滴 定 终 点 很 难 判 定， 特 别 是 总 糖 含 量 较 低 的 干 红 葡 萄 酒， 而 滴 定 终 点 判断不准确直接影响检测结果的准 确 性。 反 相 滴 定 法 将 一 定 体 积 颜 色 较深的水解液加入预先装有费林溶 液 Ⅰ、 Ⅱ 液 的 三 角 瓶 中， 再 用 葡 萄 糖 标准溶液按直接滴定法操作。杨静 红 等利用反相滴定法测定葡萄酒中总 糖含量，检测结果满意。 ３． 间接碘量法 间接碘量法的实验原理为被测样品 与过量的费林氏液共沸，其中所含的还 原糖将二价铜离子还原成氧化亚铜。剩 余的二价铜离子在酸性条件下与碘离子 反应生成定量的碘。以硫代硫酸钠标准 溶液滴定生成的碘，从而计算出样品中 总糖或还原糖的含量。武平 等通过实 验发现，该实验方法回收率均在 ９９％ 以 上。该方法测定结果准确、重现性好， 操作简单、快速、易于掌握。 比色法 １． 蒽酮比色法 蒽酮比色法是一种快速而简便的 测定总糖含量的方法，糖类遇浓硫酸 脱水生成糠醛及其衍生物，该衍生物 与蒽酮发生反应，使溶液呈蓝绿色， 于波长 ６２０ ｎｍ 处有最大吸收，因此可 用此方法测定糖的含量。武平 等通过 实验发现，蒽酮比色法可灵敏、快速、 简便地测定样品中总糖含量。该方法 更适合测定含糖量较少的样品，虽简 便但测得的葡萄酒的总糖含量不够准 确，与真实值有偏差。 ２． 二硝基水杨酸法 ３． 二硝基水杨酸试剂与还原糖溶 液共热可被还原成棕红色的氨基化合 物，在一定浓度范围内，还原糖的含 量和红色物质颜色深浅的程度成线性关 系，可用于比色测定，操作简单，快速， 杂质干扰少。刘忠义 等对实验条件进
葡萄酒糖类的测定—高效液相色谱法(氨基柱)
FSPJLPG005 葡萄酒（果酒）糖类的测定 高效液相色谱法（氨基柱）F_SP _JL _PG _005葡萄酒（果酒）—糖类的测定—高效液相色谱法（氨基柱）1. 范围本方法采用氨基柱的高效液相色谱法测定葡萄酒、果酒中的糖类，包括果糖、葡萄糖、蔗糖的含量，以及由此计算的总糖、还原糖的含量。
本方法适用于各种类型的葡萄酒、果酒中糖类的测定，以g/L 报告其结果，测定值保留一位小数。
2. 原理根据各种糖类在流动相和液相色谱柱的固定液之间具有不同的分配系数，将样品注入液相色谱柱，用乙腈和水作流动相，糖类分子按其分子量由小到大的顺序流出，经示差折光检测器检测，用外标法定量。
3. 试剂3.1乙腈：液相色谱纯3.2超纯水（或新鲜的重蒸馏水）3.3乙腈-水（80+20）：将乙腈和水按（80+20）的比例混合（或根据仪器情况调整该比例至分离效果最佳），用0.45µm 微孔滤膜（可用于有机溶剂的）过滤后用脱气装置充分脱气。
3.4糖混合标准溶液（10g/L ）分别准确称取干燥的果糖、葡萄糖、蔗糖各1g （精确至0.0001g ），用少量水溶解后，完全转移至100mL 容量瓶中，用超纯水定容至刻度，混匀。
该溶液含果糖、葡萄糖、蔗糖分别为10g/L 。
将糖混合标准溶液用0.45µm 微孔滤膜过滤，备用。
4. 仪器4.1高效液相色谱仪：配有示差折光检测器及积分仪或工作站4.2色谱柱：µ Bondapak Carbohydrate 柱（300mm ×4mm ）（Waters 公司），或相当。
4.3样品及溶剂的过滤装置及可用于有机溶剂的微孔滤膜（0.45µm ）。
4.4脱气装置（或超声波装置）4.5微量注射器：25µL5. 操作步骤5.1试样的制备将样品超纯水稀释至总糖量在4～50g/L 左右，并用0.45µm 微孔滤膜过滤。
5.2色谱条件采用乙腈-水(80+20)作为流动相,流速为2ml/min,在室温下运行至基线平稳后再进样,进样量为20µL 。
葡萄酒中还原糖含量测定方法的研究
文章编号:1002-8110(2000)06-0089-03收稿日期:2000-09-14葡萄酒中还原糖含量测定方法的研究杨艳彬1, 宋于洋2, 颜海燕1(11石河子大学食品科学系,新疆石河子;21石河子大学园艺园林工程学8332002)摘 要 比较测定葡萄酒中还原糖含量的两种方法———直接滴定法和改进后的碘量法,研究结果表明,改进后的碘量法比直接滴定法的终点易于分辨,测定数据重复性强、精密度和准确度高,易于操作。
关键词 葡萄酒;直接滴定法;碘量法;还原糖中图分类号:TS26216;O655123 文献标识码:A葡萄酒生产过程中,还原糖含量的多少是一个重要指标。
生产中测定还原糖的方法主要有:直接滴定法、高锰酸钾法、3,5-二硝基水杨酸比色法。
高锰酸钾法、3,5-二硝基水杨酸比色法比较准确,但对一般工厂实验室来说,检测技术操作复杂、费时,而用直接滴定法测定葡萄酒样品时,在判断滴定终点时常出现视觉误差(主要指红色葡萄酒),操作条件要求严格、数据重现性差、准确度低。
为弥补直接滴定法的不足,我们根据从法国引进的葡萄酒生产设备中附带的分析仪器和雷伯特分析方法,结合国内现有仪器和条件,将分析方法进行整理和改进,用改进后的碘量法进行测定,以淀粉为指示剂,滴定终点容易判断,不受加热因素的影响,测定结果稳定,数据重现性好,准确度高。
1 材料与方法111 材料 自酿梅鹿辄葡萄酒主发酵期结束后取样,无水葡萄糖(AR )。
112 方法11211 直接滴定法:G B500917—8511212 改进后的碘量法1121211 碘量法的原理:还原性糖在碱性硫酸铜溶液中呈氧化还原反应,二价Cu2+被还原为Cu +,剩余硫酸铜与碘化钾反应,游离出碘,以淀粉为指示剂,再用硫代硫酸钠回滴碘量,以求得还原糖含量。
1121212 试剂:①25g ΠL 葡萄糖标准溶液;②010834m ol 硫酸铜溶液(4116g ΠL );③20g 酒石酸钾钠和8g 氢氧化钠溶于100m L 水中;④10%碘化钾溶液;⑤1∶9硫酸溶液;⑥015%淀粉溶液;⑦010278m ol 硫代硫酸钠溶液(1138g ΠL )。
葡萄酒生产分析检验
葡萄酒中还原糖和总糖的检测葡萄酒中的主要糖类是葡萄糖和果糖，成熟的葡萄果糖的含量较高，葡萄中只有极少的蔗糖。
生产过程中添加的蔗糖在酸和酵母转化酶的作用下水解成葡萄糖和果糖后被酵母利用，称之为可发酵性糖，不能被酵母利用的称之为非发酵性糖或残糖。
根据还原斐林试剂的能力，又可分为还原糖和非还原糖。
在葡萄酒中残糖主要由戊糖（如阿拉伯糖、鼠李糖、木糖及少量的未发酵的葡萄糖和果糖，约0.1～0.2g/L）组成。
1.高效液相色谱法（1）原理利用氨柱，将样品中的果糖、葡萄糖、蔗糖与其他组分分离。
示差折光检测器进行鉴定，外标法定量。
（2）试剂与仪器①超纯水：经纯水机制出的电阻率达到18ΜΩ或经0.45μm微滤膜过滤的新鲜的重蒸水。
②乙腈—水（75+25）：将乙腈和水按75+25的比例混合（或根据仪器情况调整该比例至分离效果最佳），用脱气装置充分脱气后，再用0.45μm的油系过滤膜过滤。
该溶液用做流动相。
③糖标准溶液（含总糖45.000g/L）：分别称取干燥的葡萄糖、果糖、蔗糖各1.500g（准确至0.001g），移入100mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度。
该溶液含葡萄糖、果糖、蔗糖分别为15.000g/LNH④高效液相色谱仪，示差折光检侧器：色谱柱为150mm× 5.0mm，Shim-paek CLC-2柱。
⑤微过滤膜：0.45μm，油系。
⑥脱气装置（或超声波装置）。
（3）测定步骤①试样的制备：将样品用超纯水稀释至总糖量为45g/L左右，并用0.45μm油系微过滤膜过滤。
②色谱条件如下。
柱温：室温；流动相：乙腈十水（75+25）；流速：2mL/min；进样量：20μL③测定：在同样的色谱条件下，将糖标准溶液和处理好的试样分别注入色谱仪。
测定各糖分峰面积，井计算其含量。
n C A A X si sii i ⨯⨯= P G X +=12X =1X Z 05.1+式中1X ——样品中还原糖含量（以葡萄糖计），L g /； 2X ——样品中总糖含量（以葡萄糖计），L g /； G ——样品中的果糖含量，L g /；P ——样品中的葡萄糖含量，L g /；Z ——样品中的蔗糖的含量，L g /；05.1——由蔗糖换算为葡萄糖的系数；i X ——样品中。
葡萄酒理化指标的测定(酒精度、还原糖、滴定酸、挥发酸、游离SO2、总SO2、干浸出物、总糖、单宁、色度
葡萄酒理化指标的测定（酒精度、还原糖、滴定酸、挥发酸、游离SO2、总SO2、干浸出物、总糖、单宁、色度依据不同的酒精溶液所对应的比重不同的原理，将葡萄酒中的酒精蒸馏出来，通过用比重计测量其比重，计算出酒精溶液的浓度。
1步骤用100ml容量瓶准确量取20℃酒样倒入1000ml圆底烧瓶中，再用约100ml水冲洗容量瓶，洗液一齐倒入圆底烧瓶中，置600W电炉上加热蒸馏开启冷却水，用原容量瓶接收蒸馏液。
将蒸馏液摇匀倒入100ml量筒，选用合适的精密酒精计，眼睛平视，读数读弯月面下缘，同时记录下温度，查酒精温度、浓度换算表，得到被测酒样的酒精度。
所得结果保留至1位小数。
2结果的允许误差平行实验测定结果绝对值之差不得超过%。
3检验时注意事项被测样品酒精度在15%以上时采用此方法。
酒精计的分度值为或％，所用酒精计必须经国家认可的计量部门检定。
测定含气葡萄酒时需排气后再取样。
排气方法：用低真空连续抽气2分钟。
蒸馏液的温度应控制在20℃±5。
为避免蒸馏过程中乙醇蒸汽的逃逸而影响测定结果的准确性，蒸馏前必须检查蒸馏仪器的接口处是否严密。
若出现漏气，必须重新测定。
对于挥发酸含量过高或二氧化硫含量过高的样品应根据总酸测定的结果，用1N的氢氧化钠对样品进行中和后再进行蒸馏。
斐林法步骤预备试验取斐林氏A、B液各5ml，置于250ml三角瓶中，加水50ml，加入酒样5ml，加热至沸腾。
在沸腾状态下，用%的葡萄糖溶液滴定至淡蓝色，加2滴1%的次甲基兰指示剂，继续滴定至蓝色完全消失，记录所消耗的葡萄糖溶液的毫升数。
正式试验取斐林氏A、B液各5ml，置于250ml三角瓶中，加水50ml，加入酒样5ml。
然后加入比预备试验少1ml的%的葡萄糖溶液，加热至沸腾并保持2分钟。
加2滴次甲基兰指示剂，在沸腾状态下，在1分钟内用葡萄糖溶液滴定至终点，记录消耗的毫升数，读数至小数点后两位。
计算还原糖＝［/5］×F×1000式中：S－斐林氏A、B液各5ml，相当于葡萄糖的克数；G－葡萄糖溶液的准确浓度，g/mL；V－耗用葡萄糖溶液的平均体积，mL；5－取样体积，mL；F－制备含糖5～8g/L试样时，酒样的稀释倍数；所得结果保留至1位小数。
葡萄酒中总糖的测定（直接滴定法）
葡萄酒中总糖的测定（直接滴定法）一、原理斐林氏溶液与还原糖共沸，其中斐林氏溶液中的Cu2+被还原糖还原为Cu2O（砖红色）时，反应达到终点，过量的还原糖使次甲基蓝指示剂蓝色褪去，显露出Cu2O的红色即为终点。
二、试剂（1）200g·L-1 NaOH溶液（2）葡萄糖溶液（2.5g·L-1）：准确称取葡萄糖2.5g，用水定容到1000ml。
（3）1：1的HCl溶液（4）次甲基蓝指示剂（10g·L-1）：1.0g次甲基蓝溶于100L水中。
（5）斐林A、B溶液（6）酚酞指示剂（10g·L-1）配制：A溶液：称取34.7g CuSO4·5H4O，溶于水，稀释至500ml。
B溶液：称取173g酒石酸钾钠和50gNaOH，溶于水，稀释至500ml。
标定：移取斐林氏A、B溶液各5.00ml于100ml小烧杯中，加30ml 水摇匀，在电炉上加热，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色消失呈现红色时，加2d 次甲基蓝指示剂，继续滴定至蓝色消失，记录所消耗的葡萄糖标准溶液的总体积V 。
另移取斐林氏A 、B 溶液各5.00ml 于100ml 小烧杯中，加30ml 水和比上次实验少0.5～1ml 的葡萄糖标准溶液，加热至沸并保持2min ，加入2d 次甲基蓝指示剂在沸腾状态下于1min 内以3～4s ·d -1的速度用葡萄糖标准溶液滴定至蓝色消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积V 葡萄糖则斐林氏A 、B 溶液各5.00ml 相当于葡萄糖的克数（F ） 按下式计算葡萄糖m三、试样制备（1）测定总糖试样：准确吸取样品V 1 ml 于V 2 ml 容量瓶中，（注：使定容后溶液中含糖量为2～4g ·L -1）先加25mL 水，再加1：1盐酸5mL ，摇匀，于（68±1）℃水浴中水解15min ，使样品中非还原性糖转化为还原性糖，取出冷却，加入2d 酚酞，用NaOH 溶液滴定至微红色，加水定容至刻度。
果酒中还原糖和总糖含量的测定(精)
六、注意事项
3．滴定时必须在沸腾条件下进行，其原因： 一是可加快还原糖与Cu2+的 反应速度；二是 次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基 蓝遇空气中氧后又变为氧化型的蓝色。此外， 氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。 保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲 基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。
实验一 果酒中还原糖和总糖含量的测定
一、目的
1、掌握用直接滴定法测定还原糖的原理和 方法； 2、掌握用酸水解法测定葡萄酒中总糖含量 的原理和方法； 3、了解测定总糖含量的意义； 4、了解葡萄酒国家标准。
二、原理
利用费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜 沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品 或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液，达 到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲 基蓝还原为无色，以示终点。根据样品消耗 量求得总糖或还原糖的含量。
六、注意事项
4．滴定时不能随意摇动三角瓶，更不能把三 角瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入 反应液中。
六、注意事项
5．样品溶液预测的目的：一是本法对样品中还原 糖浓度有一定要求，测定时样品溶液的消耗体积应 与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积接近。通过预 测可了解样品浓度是否合适，浓度过大或过小，应 加以调整，才能提高测定结果的准确性；二是通过 预测可知道样液大概消耗量，以便在正式测定时， 预先加入比实际用量少1ml左右的样液，只留下1ml 左右样液在后滴定时加入，以保证在1分钟内完成 后滴定工作，提高测定的准确度。
六、注意事项
1．葡萄糖与斐林试剂的反应特别复杂，且随 反应条件而变化，因此，不能根据化学反应 方程式直接计算，而是用已知浓度的葡萄糖 标准溶液标定的方法进行计算，或按编制的 还原糖检索表来计算。在测定过程中要严格 按照所规定的操作条件，如三角瓶规格、加 热时间、滴定速度等。
全自动分析仪酶法检测葡萄酒中还原糖的含量
全自动分析仪酶法检测葡萄酒中还原糖的含量赛默飞世尔科技（中国）有限公司摘要：本实验使用Thermo Scientific Arena全自动分立式生化分析仪，采用还原糖酶法检测试剂盒，建立了快速检测葡萄酒中还原糖含量的分析方法。
实验表明还原糖含量在0.02～2.00g/L浓度范围内线性关系良好，相关系数为0.9994；加标回收率(n=3)在97.56%～107.66%之间；精密度和重复性(n=10)的RSD%分别为1.26%和2.14%。
该法具有无需样品前处理、特异性好、灵敏度高、测定速度快等优点，适用于葡萄酒企业对葡萄酒酿造过程控制和葡萄酒产品质量检测。
关键词：还原糖；葡萄酒；酶法试剂盒；Arena自动分立式分析技术Enzymatic Determination of Reducing Sugar in Wine by Automatic Discrete Analyzer 1China National Research Institute of Food & Fermentation Industries, 100027, Beijing2Thermo Fisher Scientific (China) Inc., 100007, BeijingAbstract:Applying Thermo Scientific Arena Automated Discrete Analyzer, using Reducing sugar enzymatic kits, a method was developed for rapidly analyzing the concentration of reducing sugar in wines. A suitable linear relationship was obtained between the concentrations of Reducing sugar (0.02～2.00g/L) and the correlation coefficient was0.9994; the Recovery ratio (n=3) were between 97.56%～107.66%;the RSD% of precision and repeatability (n=10) were 1.26% and 2.14% respectively. This method is simple, specific, sensitive, rapid, and good for determination of Reducing sugar in wines, suitable for monitoring samples during wine-making and brewing process and quality control for the finished wine in winery.Keywords: Reducing sugar, Wine, Enzymatic kits, Arena Automatic Discrete Technology前言羰基碳（异头碳）没有参与形成糖苷键，能够还原斐林(H.von Fehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂的糖称为还原糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等。
374-演示文稿-葡萄酒分析检测——糖的测定
Company Logo
葡萄酒检测项目
( 六 ) 结果与允许 差
所得结果表示至一位小数。平行试验 2 次滴定误差不超过 0.05 毫升 .
Company Logo
葡萄酒检测项目
( 七 ) 注意事项
1. 制备测总糖用试样时，制备量可根据要求而定。 2. 试样在滴定前的含糖量应 2 ～ 4 克 / 升，否则应 在样品制备时通过稀释进行调正。 3. 还原糖与裴林试剂的反应很复杂，其当量关系随 反应条件而变化。因此，操作时要尽量使试剂浓度 、糖浓度、加热的温度和时间前后一致。
毫升三角瓶中，加水 50 毫升，摇匀。在电炉上加热至 沸，在沸腾状态下用标准葡萄糖滴定至蓝色刚好消失 ，加 2 滴定甲基兰指示剂，继续滴定至蓝色消失而显 红色。记录消耗葡萄糖标准溶液体积数。
正式试验：取 A 液、 B 液各 5 毫升于 250 毫升三角 瓶中，加 50 毫升水及比预备试验少 1 毫升的葡萄糖标 准溶液，加热至沸腾并保持 2 分钟。加 2 滴次甲基兰 指示剂，在沸腾状态下于 1 分钟内用葡萄糖标准溶液 滴至终点。记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体Co积mp。any Logo
滴定。以处理好的样品滴定煮沸的溶液，样品中的
还原糖将斐林试剂中的深蓝色络合物还原，生成红
色的。到达终点后，微过量的还原糖将蓝色的次甲
基兰还原成无色，以示终点。根据样品消耗量，计
算得出还原糖与总糖的量。
Company Logo
葡萄酒检测项目
（二）Cl 溶液
2. 200 克 / 升 NaOH 溶液
葡萄酒检测项目
3) 计算
F m 1000 V
式中： m— 称取葡萄糖质量，克： V— 消耗标准葡萄糖溶液总体积； F— 斐林试剂 A 液、 B 液各 5 毫升相当于 葡萄糖的克数，克。
市售葡萄酒中还原糖测定的实验方案
市售葡萄酒中还原糖测定的实验方案《市售葡萄酒中还原糖测定的实验方案》一、实验目的测定市售葡萄酒中的还原糖含量，以便评估其品质和甜度，为消费者提供参考。
二、实验原理还原糖与费林试剂在加热条件下反应，生成砖红色沉淀。
通过测定沉淀的吸光度，可以计算出样品中的还原糖含量。
三、实验材料1. 费林试剂：甲液（质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液），乙液（质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液）。
2. 葡萄酒样品：市售多种葡萄酒。
3. 蒸馏水：用于稀释样品和清洗仪器。
4. 75%乙醇：用于清洗仪器。
5. 电子天平：精确到0.01g。
6. 玻璃棒、烧杯、试管、容量瓶等实验室常用玻璃仪器。
四、实验步骤1. 准备费林试剂：将甲液和乙液等量混合均匀，现配现用。
2. 样品处理：取适量葡萄酒样品，用蒸馏水稀释至10mL。
3. 测定吸光度：取稀释后的样品1mL，加入2mL费林试剂，振荡均匀后放入水浴锅中加热至沸腾，维持2分钟。
冷却后，使用分光光度计测定样品在520nm波长下的吸光度。
4. 计算还原糖含量：根据标准曲线，计算出样品中的还原糖含量。
五、实验注意事项1. 实验过程中需严格控制温度和时间，确保测定结果准确。
2. 费林试剂需现配现用，避免长时间放置影响测定结果。
3. 加热过程中需不断振荡试管，使反应充分进行。
4. 测定吸光度时，确保仪器清洁，避免误差。
六、实验结果与分析1. 通过对市售葡萄酒样品的测定，得到不同葡萄酒的还原糖含量数据。
2. 分析还原糖含量与葡萄酒品质、甜度的关系，为消费者提供参考。
七、实验报告1. 记录实验过程中所用的样品、试剂、仪器等详细信息。
2. 描绘实验结果数据，并进行简要分析。
3. 提出实验中可能存在的问题及改进措施。
4. 撰写实验总结，概括实验成果及意义。
葡萄酒中还原糖含量测定方法的研究
葡萄酒中还原糖含量测定方法的研究
葡萄酒是一种受欢迎的饮品，其口感和质量与其中的还原糖含量有着密切的关系。
因此，测定葡萄酒中还原糖含量的方法对于葡萄酒生产和质量控制具有重要意义。
常用的测定葡萄酒中还原糖含量的方法有两种：显色法和酶法。
显色法是通过还原糖与某些化学试剂反应产生颜色变化，从而测定还原糖含量的方法。
这种方法简单易行，但存在一定的误差。
酶法则是利用葡萄酒中的葡萄糖氧化酶将葡萄糖转化为葡萄糖酸，从而测定还原糖含量的方法。
这种方法准确度高，但需要专业的设备和技术。
近年来，随着科技的发展，新的测定葡萄酒中还原糖含量的方法也不断涌现。
例如，利用红外光谱技术测定葡萄酒中还原糖含量的方法，可以快速、准确地测定葡萄酒中的还原糖含量。
此外，利用电化学方法测定葡萄酒中还原糖含量的方法也逐渐得到应用。
测定葡萄酒中还原糖含量的方法多种多样，每种方法都有其优缺点。
在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的方法。
无论采用何种方法，都需要严格控制实验条件，以保证测定结果的准确性和可靠性。
葡萄酒中总糖含量测定
2．试剂和材料
• 2.5g/L葡萄糖标准溶液
• 费林溶液（Ⅰ、Ⅱ） • 10g/L次甲基兰指示液 • 20%盐酸溶液 • 30%氢氧化钠溶液
葡萄酒中总糖含量测定
3.操作步骤
标定预备实验 正式标定
操作流程图示
试样的制备 试样的测定 结果分析
葡萄酒中总糖含量测定
3.操作步骤 （1）标定
预备标定试验：吸取费林溶液Ⅰ、Ⅱ各5.00ml于250ml三角瓶中，加 蒸馏水50ml摇匀，在电炉上加热至沸，然后在沸腾状态下用葡萄糖标准溶 液滴定，当溶液的蓝色将消失呈红色时，加次甲基兰指示液2滴，继续滴至 蓝色消失，呈亮红色为止，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
葡萄酒中总糖含量测定
1.测定原理
◆ 利用费(斐) 林（Fehling）溶液与还原糖共沸，生成氧 化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以经水解 后的样品滴定煮沸的费（斐）林溶液，达到终点时， 稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以 示终点。根据样品消耗量求得总糖或还原糖的含量。
葡萄酒中总糖含量测定
《生物产品的分析与检验技术》
葡萄酒中总糖含量测定方法的研究
葡萄酒中总糖含量测定方法的研究摘要：本研究分别通过直接滴定法和黄酒中总糖测定方法（亚铁氰化钾滴定法）测定了葡萄酒中总糖的含量。
经过多次实验测定以及参与能力验证，结果分析得出亚铁氰化钾滴定法较适用于测定葡萄酒中的总糖含量。
此法去除了干红葡萄酒颜色的干扰，准确性高、快速、易于掌握，可作为葡萄酒中总糖测定的常规检测方法。
关键词：葡萄酒总糖含量直接滴定法亚铁氰化钾滴定法Abstrac：In this study the Total sugar content was measured in Wine respectively by direct titration method and the determination method of total sugar in yellow rice wine （potassium ferrocyanide titration method）. After many experiments to determine， and the ability to participate in verification，the results analysis showed that ferrous potassium cyanide titration method is more applied to determination of total sugar content in wine. This method，without the dry red wine color interference and with the advantage of high accuracy， fast， easy to master， can be used as a conventional detection method for the determination of total sugar in the wine.Key Words： Wine； Total sugar content； Direct titration method；Potassium ferrocyanide titration葡萄酒中的总糖含量是影响葡萄酒质量和区分葡萄酒种类的重要指标之一。
葡萄酒还原糖的测定—廉-爱农滴定法
FSPJLPG006 葡萄酒（果酒）还原糖的测定 廉-爱农滴定法F_SP _JL _PG _006葡萄酒（果酒）—还原糖的测定—廉-爱农滴定法1. 范围本方法采用直接滴定法（廉-爱浓法）测定葡萄酒、果酒中还原糖的含量。
本方法适用各种类型的葡萄酒、果酒中还原糖的测定，以g/L 报告其结果，测定值保留一位小数。
2. 原理费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀，以次甲基蓝为指示剂，用样品滴定沸腾状态的费林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将次甲基蓝还原成无色为终点。
依据样品的消耗量求得还原糖的含量。
3. 试剂3.1盐酸溶液（1+1）3.2氢氧化钠溶液 200g/L3.3葡萄糖标准溶液2.5g/L称取经103℃～105℃烘干至恒重的无水葡萄糖2.5g （精确至0.0001g ），加水溶解定容至1000mL 。
3.4次甲基蓝指示液10g/L称取次甲基蓝1.0g ，加水溶解并定容至100mL 。
3.5费林甲液：称取硫酸铜（CuSO 4・5H 2O ）69.28g ，加水溶解并定容至1000mL 。
3.6费林乙液：称取酒石酸钾纳346g 及氢氧化钠100g ，加水溶解并定容至1000mL ，摇匀、过滤、备用。
4. 仪器4.1电炉：300W ～500W5．操作步骤5. 1费林溶液的标定5.1.1预滴定：准确吸取费林甲、乙液各5.00mL 于250mL 锥形瓶中，加50mL 水，摇匀，在电炉上加热至沸，在沸腾状态下用葡萄糖标准溶液（2.5g/L ）溶液滴定，待溶液的蓝色即将消失时，加入2滴次甲基蓝指示液（10g/L ），继续用葡萄糖标准溶液滴定至蓝色消失为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的体积。
5.1.2正式滴定：准确吸取费林甲、乙液各5.00mL 于250mL 锥形瓶中，加50mL 水，混匀后，加入比预滴定体积少1mL 的葡萄糖标准溶液（2.5g/L ），置于电炉上加热至沸，并保持2min ，加2滴次甲基蓝指示液，在沸腾状态下用葡萄标准溶液（2.5g/L ）滴定至蓝色刚好消失为终点，滴定操作须在1min 内完成。
葡萄酒分检实验课讲义---总糖还原糖测定
葡萄酒（汁）的总糖、还原糖测定1. 必要性监控糖含量对于葡萄酒生产来说至关重要！可以区分酒类型，反映酒风味，利于控制生产，决定工艺参数。
① 葡萄浆果：监测成熟度变化，确定最佳采收期；② 葡萄醪：了解葡萄酒可能的酒度，决定是否人为提高酒度及加糖量； ③ 葡萄酒：了解酒精发酵是否完全，区分酒的类型2. 基础葡萄汁和葡萄酒中的糖，按氧化还原性质分为还原性糖和非还原性糖，二者加和为总糖。
还原糖：能与碱性铜液，汞液发生还原作用的糖；如葡萄糖、果糖等发酵性糖，阿拉伯糖、木糖等非发酵性糖；非还原糖：如蔗糖、海藻糖；残糖（RS ）：干型葡萄酒中的非发酵性糖和微量发酵性糖。
3. 测定方法① 比重计法：一般葡萄酒糖度（g/L ）=（比重计读数一1000)×2＋16先除酒精再恢复到取样体积的葡萄酒糖度（g/L ）=（比重计读数一1000)×2-14② 糖量计法③ 光谱法：紫外可见（酶法）④ 色谱法：HPLC⑤ 费林试剂热滴定法：利用某些糖的还原性能，将某些重金属在碱性条 件下迅速还原，然后从被反应的重金属数量来求知糖分的数量。
4. 费林试剂热滴定法（1） 原理：天蓝色氢氧化铜、深蓝色酒石酸钾钠铜，Cu 2+将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，Cu 2+被还原为Cu 2O 红色沉淀；酸解以测定总糖。
（2） 次甲基蓝：氧化态时蓝色，还原态时无色；（3） 样品制备① 总糖：将非还原糖酸解为还原糖；稀释酒样——5mL HCl——68℃15min——补水——200 g/L NaOH 中和；② 还原糖：稀释至浓度2~4 g/L.（4） 菲林试剂A 、B 液标定① 预备实验：初步确定费林氏A 、B 液各5mL 能与葡萄糖标液反应的体积; 5 mL A 液 + 5 mL B 液—— 50 mL 水——滴加葡标液致出现红色——次甲基蓝2滴——滴加葡标液致蓝色消失为无色，记录消耗葡标液体积V 0；② 正式试验：精确测定费林氏A 、B 液各5mL 能与葡萄糖标液反应的体积；5 mL A 液 + 5 mL B 液 + （V 0-1）葡标液—— 50 mL 水——沸腾2 min——出现红色加次甲基蓝2滴——1min 内，滴加葡标液致蓝色消失为无色，记录消耗葡标液体积V 1；重复得到V 2、V 3。
葡萄酒理化指标的测定
葡萄酒主要理化指标的测定1 实验目的通过测定葡萄酒中糖（总糖或还原糖）、酸、花色苷、酒精度、SO2(游离SO2和总SO2)的含量以及酒的色度和色调，掌握葡萄酒主要理化指标的测定方法。
2 方法2.1总糖和还原糖（直接滴定法）2.1.1原理利用费林溶液与还原糖共沸，生成砖红色氧化亚铜溶液的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以示终点。
根据样品消耗量求得总糖或还原糖含量。
注：反滴法——即先向反应体系中加入一定量的葡萄酒，再用标准葡萄糖溶液滴定反应体系至终点，此时所用糖的体积与标定费林试剂时所用糖体积的差值即为酒中的糖。
（一般地，滴定时用待测液进行滴定，但由于干葡萄酒中糖含量较低，滴定至终点所需样液量极大，因此采用反滴法）2.1.2试剂和材料盐酸溶液（1:1）氢氧化钠溶液（200g/L）葡萄糖标准液（2.2778g/L）次甲基蓝指示液费林溶液（I，II）测总糖用葡萄酒（25mL葡萄酒，酸水解，调pH至中性，蒸馏水定容至500mL）测还原糖用葡萄酒（50mL葡萄酒，蒸馏水定容至500mL）2.1.3分析步骤（见黑板）2.1.4结果计算X=*1000X:葡萄酒中总糖或还原糖的含量，单位g/LF：费林溶液I、II各5mL相当于葡萄糖的克数，单位gC：葡萄糖标准溶液的浓度，单位g/mLV：消耗标准葡萄糖溶液的体积单位mLV1吸取酒样的体积；V2稀释后的体积；V3吸取V2的体积=(测总糖用葡萄酒)2.2总酸（指示剂法）2.2.1原理利用酸碱中和原理，以酚酞做指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定样品中的有机酸，根据氢氧化钠溶液的体积计算葡萄酒中的有机酸含量（以酒石酸计）2.2.2 试剂和材料氢氧化钠标准滴定溶液0.04974mol/L酚酞指示液2.2.3分析步骤（见黑板）2.2.4结果计算X=X:样品中总酸的含量（以酒石酸计），单位g/Lc：氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，单位mol/LV0：空白试验消耗氢氧化钠体积，单位mLV1:滴定样品时消耗氢氧化钠体积，单位mLV2：吸取酒样的体积，单位mL75：酒石酸摩尔质量数，单位g/mol3思考题1 试分析总糖或还原糖测定过程中产生误差的原因；2 简述总酸测定过程中待测液颜色的变化及其可能原因；3 试分析总SO2或游离SO2测定过程中产生误差的原因4简述沸点测定仪测定酒精度时影响待测液沸点的原因。