循环肿瘤DNA在胶质瘤研究中的进展

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循环RNA在癌症中的作用及调控机制

循环RNA在癌症中的作用及调控机制癌症是一种生命威胁性非常严重的疾病，不仅在医学界引起了高度关注，在广大民众中也备受关注。

癌症的发生和发展是一个复杂的过程，涉及到多个环节和多种因素。

近年来，随着分子生物学和生物信息学技术的不断发展，越来越多的研究表明，循环RNA（Circular RNA，circRNA）在癌症的发生和发展中具有重要的调控作用。

本文将对循环RNA在癌症中的作用及其调控机制进行探讨。

一、循环RNA的定义和特点循环RNA是一种新型的RNA，它是一种特殊的环形RNA，由于磷酸二酯键的5'端与3'端直接连接形成一个环，以此与线性RNA不同。

它的稳定性和抗降解性比线性RNA更高。

除此之外，与传统的RNA种类相比，循环RNA的表达量较低，具有相对一致的表达谱，而且具有组织、种类和发育阶段的重要特点。

具有以上特点，使得循环RNA成为生命科学研究的热点之一。

二、循环RNA在癌症中的作用循环RNA在癌症的发生和发展中扮演着重要的调控作用。

研究发现，循环RNA不仅能够参与免疫反应的调控，还能够调节细胞周期、转录、翻译、凋亡及增殖等多种生理过程，进而影响肿瘤的发生和发展。

1、调节细胞周期过度活化的细胞周期是导致癌症发生的重要原因之一。

循环RNA可以与相关基因的mRNA相互作用，影响其同源结合、翻译和稳定性，最终调控细胞周期。

例如，循环RNA SCD-circRNA2可以间接控制G1到S期细胞周期转换，从而影响细胞增殖。

2、调节转录和翻译循环RNA可以作为调节基因转录的调节因子，参与基因表达的调控。

例如，某些循环RNA可以通过与转录因子相互作用，影响其对基因启动子的结合。

同时，循环RNA还能影响蛋白质的翻译水平，从而调节细胞生理和代谢过程。

例如，循环RNA SRY在肺癌中调节多种新陈代谢通路的自由基稳定性，从而抑制星形胶质瘤的发生和发展。

3、调节细胞凋亡和增殖细胞凋亡和增殖是癌症发展的两个关键环节。

胶质瘤诊断和预后标志物的研究进展

胶质瘤诊断和预后标志物的研究进展杨燕武袁毛庆渊四川大学华西医院神经外科袁四川成都 610041冤揖摘要铱神经胶质瘤是中枢神经系统最常见而又最难治的恶性肿瘤, 因其部位的特殊性, 造成诊断困难, 易复发而且难以治愈遥因而寻找胶质瘤特异性的诊断和预后生物标志物变得更为重要遥生物标志物是近些年来出现在医学研究领域上的热点, 它作为可供客观测定和评价的一个生化或分子生物学指标, 反映机体当前所处的生物学状态及进程遥随着分子生物学新技术的应用袁已发现一系列对诊断尧鉴别诊断和治疗有实用价值的生物学标志物遥本文总结了近几年关于胶质瘤诊断和预后标志物的一些研究进展袁比如 BRAF 融合基因在毛细胞星形细胞瘤中的作用袁染色体 1p/19q袁 6O鄄甲基鸟嘌呤鄄 DNA 甲基转移酶渊MGMT冤甲基化状态和异柠檬酸脱氢酶渊IDH冤在弥漫性胶质瘤中的作用遥这些标志物是近几年恶性胶质瘤研究的热点袁对进一步完善胶质瘤的诊断尧鉴别诊断尧指导预后和开辟有效的分子靶向治疗有重要的指导意义遥关键词: 神经胶质瘤曰分子标志物曰 BRAF 基因曰染色体1p/19q曰 MGMT曰 IDH 中图分类号院R739.41文献标识码院A文章编号院1726-8192渊2012冤01-0045-06Current Progress of Diagnostic and PrognosticMarkers in GliomasYan鄄 wu Yang, Qing MaoDepartment of Neurosurgery, W est China Hospital, Sichuan University,Chengdu 610041, P. R .China揖ABSTRACT 铱 Glioma is the most common malignant tumor in the central nervous system. The particularity ofits position makes it difficult for diagnosis. As a result, looking for glioma biomarkers is important for diagnosis and prediction of the prognosis. With the application of new technology of molecular biology, series of biological markers have been found. This review summarized recent studies on diagnostic and prognostic markers for gliomas such as theBRAF fusion gene in pilocytic astrocytomas and 1p/19q codeletion, O鄄 6鄄 methylguanine鄄 DNA methyltransferase status and isocitrate dehydrogenase gene mutations in diffuse gliomas. These glioma biomarkers have been expected to facilitate diagnosis and the prediction of patient outcome. KEY WORDS: Glioma biomarkers; BRAF; 1p/19q codeletion; Isocitrate dehydrogenase; O鄄 6鄄 methylguanine鄄 DNA methyltransferase收稿日期院圆园12鄄 02鄄 10 修回日期院圆园12鄄 03鄄12 通讯作者院毛庆悦燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻贼燥押Qing Mao 栽藻造押 86鄄 28鄄85422490 E鄄 mail: *********************.cn基金项目院四川省科技支撑项目渊编号2008SZ020冤窑综述窑叶中国神经肿瘤杂志曳圆园12袁10渊1冤院 45-50目前袁胶质瘤的诊断及其分级主要依赖组织病理学, 但仅靠组织形态学, 特别是立体定向取材小标本, 其组织缺乏典型病变, 常常不能根据肿瘤的密度尧异型性尧血管增生尧坏死等进行分级遥颅内非肿瘤性病变如梗死尧出血尧转移瘤尧感染尧脱髓鞘尧血管炎尧放射治疗后等均可导致反应性增生, 胶质细胞数量增加, 体积变大, 甚至出现异型性, 细胞增殖指数可达 5% , 或许能够见到分裂象遥当取材为肿瘤边缘, 尤其低级别胶质瘤, 或肿瘤治疗后判断是否存在复发情况, 区分这些胶质细胞是肿瘤还是反应性增生显得十分困难遥准确诊断与分级, 对临床治疗和预后判断却十分重要,本文关注近来胶质45瘤分子生物学研究的热点标志物袁就其在诊断尧鉴别诊断和治疗方面的研究进展和临床应用综述如下遥1染色体 1p/19q Reifenberger等 [1]首先于 1994年报道了在少突胶质细胞瘤中发现了染色体 1p/19q杂合子缺失 (loss of heterozygosity袁LOH)遥后来袁1998年Cairncross 等 [2]指出 1p/19LOH的间变性少突胶质细胞瘤对 PVC化疗方案 (甲基苄肼+洛莫司汀+长春新碱冤强烈敏感遥目前袁许多研究已经表明 lp/19qLOH是预后良好的重要标志并对化疗敏感袁NCCN颅内肿瘤临床治疗指南已经建议 lP LOH或 lp/19q LOH的少枝胶质细胞瘤切除后可以选择单纯化疗 [3] 遥国外目前已经将此项检测指标作为常规检查袁国内近几年已开展 1p/19q LOH的检测袁但尚未作为常规检查普遍应用于临床遥1p/19q联合缺失在胶质瘤病理诊断中的价值院不同病理类型胶质瘤组织的 lp/19q联合缺失率存在差异遥大规模的临床回顾性研究表明袁lp/19qLOH 与少枝胶质瘤的形态高度相关袁染色体 1p/19q LOH在 WHO域级少突胶质细胞瘤中的发生率为 61%耀89%袁在 WHO芋级间变性少突胶质细胞瘤中的发生率只有 13%耀20% [4] 遥星形细胞肿瘤 lp/19q联合缺失率低遥在星形细胞瘤中袁1p/19q的联合缺失率为 7.5%耀25豫曰胶质母细胞瘤中袁lp/19q的联合缺失率为 2.9豫耀3.7豫[5-8] 遥因此 1p/19q在不同来源的胶质瘤鉴别中有一定价值遥在一些形态学分类模棱两可的胶质瘤中袁1p/19q的检测结果有助于胶质瘤的病理学分类和鉴别遥1p/19q在治疗方案选择和疗效尧预后判断中的价值院lp/19q LOH在 WHO 域级胶质瘤中是良好预后和对化疗敏感的重要标志遥在低级别胶质瘤和间变性少突胶质细胞瘤中袁发生 1p/19qLOH的中位生存期分别为 12耀15年和 6耀7年袁而没有发生 p/ 19qLOH的中位生存期分别为 5耀8年和 2耀3年 [9-11] 遥 Jenkins等 [12]对 125例低级别胶质瘤患者的生存期及 1P尧19q缺失检测进行分析袁结果表明 1p/ 19qLOH的患者中位生存期及 5年生存率显著高于 lP尧19q未缺失的患者遥1p/19q联合性缺失的病人对替莫唑胺及放疗同样敏感遥在应用替莫唑胺治疗低级别胶质瘤的研究中袁Ricard等 [13]指出 1p/19qLOH能够延迟化疗发生耐药的时间遥Kaloshi等 [14]也报道了在替莫唑胺治疗的脑胶质瘤患者中袁1p/19qLOH预示着更高的有效率袁无进展生存期(24.5个月颐13.7个月)和总生存期渊66.8个月颐15.2个月冤更长遥评估 1p/19q缺失状态袁对于选择最佳的个体化治疗方案和较准确地预测患者预后有重要的意义遥但是 1p/19qLOH究竟能否作为一个准确诊断或预后标志仍然存在一定争议遥一方面袁Ricard等 [13]证明了存在 1p/19q联合缺失的低级别胶质瘤的肿瘤生长速度明显要比不伴随 1p/19q联合缺失的低级别胶质瘤慢得多渊3.4mm/年 vs. 5.9mm/年冤遥另外袁Weller等 [15]通过多元统计分析发现袁无论 1p/19q缺失与否都没有影响只进行了单纯手术治疗患者的无进展生存期遥还需进一步研究 1p/19q联合性缺失的作用及在其他恶性胶质瘤中 1p/19q联合性缺失的临床意义遥2 6 O鄄甲基鸟嘌呤鄄DNA甲基转移酶渊 6 O鄄methylguananine鄄DNA methyltransferase袁 MGMT冤MGMT由 MGMT基因编码袁定位于染色体 10q26遥它是一种修复 6 O甲基鸟嘌呤的酶袁在不需任何辅助因子和其他蛋白质的条件下袁既可作为甲基转移酶又可作为甲基受体蛋白曰可将烷化剂作用下形成的 6 O位甲基化鸟嘌呤上的甲基移除到自身的活性半胱氨酸残基上袁有效地修复 DNA损伤袁同时自身不可逆失活为烷基化 MGMT袁是修复 DNA 烷化损伤的一个非常重要的酶遥但 MGMT修复 DNA损伤的同时袁阻止了化疗药物形成的二级损伤袁从而导致了烷化剂化疗抵抗遥测定 MGMT水平或 MGMT启动子甲基化状态可预测肿瘤对烷化剂化疗药物的反应袁为实现个体化化疗提供理论和实践依据袁同时也有利于判断胶质瘤患者的预后遥欧洲癌症治疗研究组织渊EORTC)与加拿大国家癌症研究院(NClC) 26981/22981合作进行的一项具有里程碑式意义的大样本尧多中心研究袁评价了放疗辅以替莫唑胺化疗和单纯放疗之间的效果袁证明在单纯放疗的基础上辅以替莫唑胺可以使生存期延长遥后来袁Stupp等 [16]在一项 5年生存分析研究中指出袁MGMT甲基化是预后良好和替莫唑胺敏感的强烈标志袁MGMT甲基化的病例进行放疗辅以替莫唑胺化疗和单纯放疗的中位生存期分别为 23.4个月和 15.3个月遥 Hegi等 [17]报道了在具有 MGMT 基因启动子甲基化的胶质瘤患者中行放疗辅以替杨燕武袁等. 胶质瘤诊断和预后标志物的研究进展 46莫唑胺化疗袁其中位生存期(21援7个月)明显长于单纯放疗(15援3个月)遥而在无 MGMT基因启动子甲基化的患者中两者差别不大 (分别为 12援7和 11援8个月)遥但是 MGMT基因启动子甲基化与否没有确切地影响单纯放疗患者的中位生存期(甲基化组 15援3个月袁未甲基化组 11援8个月)遥提示 MGMT基因沉默是胶质母细胞瘤化疗效果好的因素之一遥随后袁很多研究 [18,19]都证实了 MGMT启动子甲基化水平与恶性胶质瘤对于烷化剂类化疗药物使用的疗效间的关系袁这些都提示 MGMT甲基化可能预示着对替莫唑胺化疗的强烈敏感性遥MGMT甲基化状态还可以评估假性进展的发生率遥 Brandes[等 [20]在一项 103例胶质瘤病例的研究中发现袁MGMT启动子甲基化者比没有甲基化的病例在接受放疗联合化疗后更容易出现假性进展渊58:16%)袁而不容易出现早期恶化(5:24%)遥在所有出现甲基化的病例中 91.3%出现了假性进展袁而 59%的非甲基化病例出现了早期进展遥目前 MGMT基因启动子甲基化影响临床结局的具体机制仍不清楚遥同样袁也有非 MGMT启动子甲基化获得了长生存期的报道 [21,22] 袁表明存在其他影响预后的因素袁这样的结果也有可能是由于标本被非肿瘤组织污染曰但同样可能提示了胶质瘤耐药机制比单纯的启动子甲基化导致 MGMT基因沉默更复杂遥3异柠檬酸脱氢酶渊isocitrate dehydro鄄genase袁 IDH冤IDH是三羧酸循环中一种关键性限速酶,催化异柠檬酸( isocit rate)氧化脱羧生成琢鄄酮戊二酸(琢鄄KG)及 CO 2,为细胞新陈代谢提供能量和生物合成的前体物质遥而 IDH1催化反应生成的产物包括琢鄄酮戊二酸和 NADPH, NADPH作为体内还原性氢的供体一方面参与了细胞抵御氧化胁迫反应曰另一方面还参与了不饱和脂肪酸的氧化过程遥而琢鄄酮戊二酸的功能之一可能与胶质瘤发生相关遥 IDH突变可能对胶质瘤的诊断和预后都有一定的指导意义遥Parsons等 [23]将多形性胶质母细胞瘤作为研究对象,通过对 22例样本 20661个蛋白编码基因进行全测序以鉴定与肿瘤发生相关的基因突变,结果发现大约 12%的 GBM患者在 IDH1的活性位点即 132位精氨酸渊R132)处发生了频繁突变遥 IDH1的这种突变多发生于青年患者和继发患者曰并且突变发生率与患者的总生存率成正相关,携带正常 IDH1的 79例患者死亡率是突变 IDH1的 11例患者的 3. 7倍,而前者平均存活时间仅 1. 1年,后者则为 3. 8年遥这意味着 IDH1突变与胶质瘤的发生尧发展及预后存在着某种密切联系,而随后大量实验证实 IDH1突变在胶质瘤中具有普遍性遥如 IDH1/IDH2突变 [24]对芋级星形细胞瘤和胶质母细胞瘤的预后有很强的预测价值遥芋级星形细胞瘤和胶质母细胞瘤的 IDH1/IDH2突变型和IDH1/IDH2野生型的生存期分别为 65:20个月渊P < 0.001冤和 31:15个月渊P = 0.002冤遥Yan等 [24]比较了 455个中枢神经系统肿瘤和 494个非中枢神经系统肿瘤中 IDH1的基因突变情况,结果发现超过 70%的域级和芋级 (所有级别均为世界卫生组织脑肿瘤分类标准)星形细胞瘤 (astrocytomas)和少突胶质细胞瘤 (oligodendrogliomas)都存在 IDH1的 R132突变,且拥有该突变的患者治疗效果和预后更为理想遥携带 IDH1基因突变的患者平均存活 31月,而未携带患者平均存活只有 15月,这与 Parsons等的结果相一致遥对 404个不同级别的胶质瘤患者进行 IDH1的 R132密码子测序发现, 38. 4%存在突变,且突变率与肿瘤级别呈负相关, 域级突变率达 77%, 芋级有 55%,而郁级仅 6%,同时也发现 IDH1突变与肿瘤治疗预后效果成正相关遥而且 IDH1或 IDH2突变率在域级星形细胞瘤和少突胶质细胞瘤为 86%渊70/81冤袁在芋级星形细胞瘤和少突胶质细胞瘤为 82%渊72/88冤袁在继发性胶质母细胞瘤为 85%渊11/13冤遥但是袁仅有 5%的原发性胶质母细胞瘤发生 IDH1突变渊6/123冤袁在毛细胞型星形细胞瘤渊0/20冤尧室管膜瘤渊0/30冤尧髓母细胞瘤渊0/55冤或非中枢性肿瘤渊0/494冤中都没有发现 IDH1/IDH2突变遥因此袁IDH1和 IDH2可能有助于胶质瘤的鉴别诊断遥IDH1/IDH2突变有可能在未来成为诊断和判断预后的指标遥比如袁可以用于比较困难的域级胶质瘤和毛细胞星形细胞瘤之间的鉴别诊断袁也可以用来判断芋级胶质瘤的预后遥但是袁IDH1/IDH2究竟能否应用于临床用来诊断和指导治疗袁还有待进一步研究遥4 BRAF融合基因BRAF基因是近几年研究的热点基因袁它很有可能与毛细胞星形细胞瘤的肿瘤发生机制有关遥 MAPK(mitogen鄄activated protein kinase)信号途杨燕武袁等. 胶质瘤诊断和预后标志物的研究进展 47径是一种丝裂原活化的蛋白激酶超家族袁调控细胞间代谢尧基因表达尧细胞的生长尧分化尧凋亡和对外界刺激的反应等遥 BRAF是 MAPK途径中的一员遥BRAF是 RAF基因家族成员袁位于人染色体 7q34袁属于丝氨酸辕苏氨酸蛋白质激酶类袁在 MAPK信号通路中发挥重要作用遥BRAF的改变可能激活 MEK (ERK激酶)袁向 MAPK信号通路下游传递细胞有丝分裂信号袁在肿瘤形成和生长过程中起重要作用遥到目前为止袁关于毛细胞型星形细胞瘤肿瘤发生的分子机制的认识都比较少遥只有少部分关于这方面的研究遥国外的 2个研究 [25袁26]首先报道了毛细胞型星形细胞瘤的发生可能与染色体 7q34的变异有关遥第一个研究得出的结论是位于 7q34的 BRAF产生变异并表达过量袁而第二个研究则认为是 HIPK2的变异及表达过量遥随后袁Jones等 [27]证明发生在染色体 7q34的 BRAF基因点发生了串联突变袁该突变产生了一个新的致癌融合基因并活化了 BRAF激酶域遥大约 70%的肿瘤中出现了 KIAA1549和 BRAF之间的融合遥这种在染色体 7q34获得的 BRAF融合基因在他们所研究的毛细胞型星形细胞瘤中出现的概率为 29/44渊66%冤遥它出现于各个年龄段和颅内各个部位袁并且对预后没有产生显著影响遥BRAF融合基因并没有出现在 60例未分化星形细胞瘤或者 184例胶质母细胞瘤中袁而是仅仅出现在 118例域级胶质瘤中的 6例遥而这 6例患者全都是儿童或青少年袁他们的病变都位于后颅窝并且都有很长的生存期袁表明这几个病例很可能都是毛细胞型星形细胞瘤袁而被误诊为域级胶质瘤遥Schiffman等 [28]的研究也指出 BRAF基因改变在儿童星形细胞瘤中出现的频率很高遥 BRAF融合基因拥有本身的激酶活性并且激活 MAPK通路遥有趣的是袁发生于 NF1渊神经纤维瘤蛋白 1冤相关的毛细胞型星形细胞瘤的 NF1突变同样可以激活 MAPK通路遥总之袁Jones等 [29]在他们的研究中发现袁82%的毛细胞型星形细胞瘤存在激活 MAPK通路的基因改变遥其中袁BRAF融合基因出现的频率最高渊66%冤袁然后是 NF1突变渊7%冤尧BRAF 突变渊7%冤曰并且在 1例患者中的染色体 3p25中发现类似于 7q34的串联改变袁并产生了 RAF1融合基因遥所有这些基因改变的类型都不相同袁说明其中一项改变就可影响 MAPK通路袁从而引起毛细胞星形细胞瘤的发展遥在 Alex等 [30]进行研究的 106例中枢神经系统肿瘤中袁应用聚合酶链反应检测 KIAAI549院 BRAF融合基因袁在出现该融合基因的肿瘤中袁60%为毛细胞型星型细胞瘤遥由于 BRAF融合基因在毛细胞型星型细胞瘤出现的频率以及其特异性袁其很有可能成为一个重要的诊断标志物遥检测 BRAF基因的改变可能有助于某些比较困难的毛细胞型星形细胞瘤和低级别弥漫性星形细胞瘤间的鉴别诊断遥一项体外研究 [31]显示袁通过病毒载体转导以抑制 MEK1/2激酶袁使 BRAF稳定沉默袁可以阻断神经胶质瘤细胞增生并抑制其生长遥已有案例报道 [32]通过索拉非尼+丙戊酸抑制 Raf鄄MEK鄄ERK通路在儿童胶质瘤中取得疗效的报道遥因此袁BRAF变异可能为药物阻断 MAPK通路提供新的靶向治疗的方向袁特别是对难以完全手术切除的肿瘤遥由于上述标志物的发现袁胶质瘤基于分子水平更客观的分类又向前迈进了重要的一步遥在不久的将来袁其他一些大规模的关于胶质瘤分子或基因表达的研究将会进一步展开遥但是袁虽然近些年来对胶质瘤分子生物学的病因尧机制尧诊断尧治疗方面取得了很大的突破,但是患者预后仍然不乐观,因此在此领域的研究还任重道远遥目前袁包括上述分子标志物在内尚无一种分子指标可以准确区分胶质瘤亚型或判断预后袁联合多个分子指标可能有助于克服这一缺陷遥随着分子生物学的发展尧检测方法灵敏度的提高,使分子检测技术更广泛应用于胶质瘤的诊断和治疗遥这将提高预测肿瘤生物学行为的能力袁将对合理的个体治疗及评估患者预后具有重要的理论意义和实用价值遥[参考文献]Reifenberger J, Reifenberger G, Liu L, et al. 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METHODS: Sixteen patients with the pathological confirmation of the diagnosis of gliomas prior to receiving radiotherapy (postoperative) were included, and on whom both MRI and CHO PET scans were performed at the same position for comparison of residual tumors with the two techniques. (11)C鄄CHO was used as the tracer in the PET scan. A plain T1鄄 weighted, T2鄄 weighted and contrast鄄 enhanced T1鄄 weighted imaging scans were performed in the MRI scan sequence. The gliomas' residual tumor volume was defined as the area with CHO鄄 PET high鄄 affinity uptake and metabolism (V(CHO)) and one with MRI T1鄄 weighted imaging high signal intensity (V(Gd)), and was determined by a group of experienced professionals and clinicians. RESULTS: (1) In CHO鄄 PET images, the tumor target volume, i.e., the highly metabolic area with a high concentration of isotopes (SUV 1.016-4.21) and the corresponding contralateral normal brain tissues (SUV0.1-0.62), was well contrasted, and the boundary between lesions and surrounding normal brain tissues was better defined compared with MRI and (18)F鄄 FDG PET images. (2) For patients with brain gliomas of WHO Grade II, the SUV was 1.016-2.5; for those with WHO Grades III and IV, SUVs were > 26-4.2. (3) Both CHO PET and MRI were positive for 10 patients and negative for 2 patients. The residual tumor consistency between these two studies was 75%. Four of the 10 CHO鄄 PET鄄 positive patients were negative on MRI scans. The maximum distance between V(Gd) and V(CHO) margins was 1.8 cm. (4) The gross tumor volumes (GTVs) and the ensuing treatment regimens were changed for 31.3% (5/16) of patients based on the CHO鄄 PET high鄄 affinity uptake and metabolism, in which the change rate was 80% (4/5), 14.3 % (1/7) and 0% (0/4) for patients with WHO Grade II III, and IV gliomas, respectively. CONCLUSION: Our data demonstrate that difference exists between CHO PET and MRI by which to judge and identify residual tumor for patients with brain gliomas. CHO PET is considered to be a supplementary diagnostic approach for MRI. Biological tumor target volume (BTV) displayed in the CHO PET images is useful in determining or delineating the radiotherapy target volume and making decisions in selecting treatment regimens. Tumor target volume may be defined more accurately and rationally when the CHO PET is combined with MRI.杨燕武袁等. 胶质瘤诊断和预后标志物的研究进展50。

检测血浆中p16及CDO1基因甲基化在胶质瘤诊断中的价值

检测血浆中p16及CDO1基因甲基化在胶质瘤诊断中的价值李显雄;徐培坤;李式浩;胡光东;邓鹏程;杨成子【摘要】采用甲基化特异PCR(MSP)法分别检测49例胶质瘤患者组织及其对应的术前血浆,10例颅脑外伤患者挫伤的脑组织及其对应的术前血浆和16例健康体检者血浆中p16及半胱氨酸双加氧酶1(CDO1)基因的甲基化状态,以探讨血浆中检测p16及CDO1基因甲基化在胶质瘤临床诊断中的价值.胶质瘤组织中p16及CDO1基因甲基化率分别为53.1%(26/49)、42.9%(21/49),对应的血浆甲基化率为39.0%(19/49)、34.7%(17/49).在肿瘤组织和血浆中p16及CDO1至少一个[p16和(或)CDO1]基因甲基化的频率为75.5%(37/49)和67.3%(33/49).血浆中p16及CDO1基因(甲基化)联合检测胶质瘤的灵敏度为67.3%,较单基因检测的灵敏度明显提高.单因素分析显示术前患者血浆中p16和(或)CDO1基因的甲基化与年龄、性别、肿瘤分级无关.对一些肿瘤特异基因的甲基化状态进行联合检测可提高胶质瘤在血清学诊断水平上的灵敏度,为胶质瘤的筛查及早期诊断提供新的临床诊断思路.%Methylation-specific polymerase chain reaction was used to detect the methylation statuses of gene p16 and gene CDO1 from 49 patients with glioma tissues and their corresponding preoperative plasma, 10 patients with craniocerebral brain tissues their corresponding preoperative plasma, as well as 16 samples of plasma from healthy subjects, respectively, in order to investigate the value of the methylation detection of gene p16 and gene CDO1 from plasma in the clinical diagnosis of glioma.For glioma tissues, the methylation rates of gene p16 and gene CDO1 were 53.1% (26/49) and 42.9% (21/49), respectively, while the methylation rates of the corresponding plasma were 39.0% (19/49) and34.7% (17/49), respectively.As for tumor tissues and plasma, the frequencies for methylation of gene p16 and/or gene CDO1 were 75.5% (37/49) and 67.3% (33/49).The joint detection of the methylation of gene p16 and gene CDO1 in the plasma for the sensitivity of glioma was 67.3%, an obvious improvement compared with single gene detection.In addition, a univariate analysis showed that the methylation of gene p16 and gene CDO1 from the preoperative plasma had no significant correlation with the patient'age, sex or tumor grade.Therefore, we draw a conclusion that a joint detection of the methylation status of some specific tumor genes can improve the sensitivity of glioma at the serological diagnosis level, which may provide new clinical thoughts for screening and early diagnosis of glioma.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2017(052)004【总页数】4页(P593-596)【关键词】DNA甲基化;胶质瘤;早期诊断;p16基因;CDO1基因【作者】李显雄;徐培坤;李式浩;胡光东;邓鹏程;杨成子【作者单位】安徽医科大学第一附属医院神经外科,合肥 230022;安徽医科大学第一附属医院神经外科,合肥 230022;安徽医科大学第一附属医院神经外科,合肥230022;安徽医科大学第四附属医院神经外科,合肥 230013;安徽医科大学第一附属医院神经外科,合肥 230022;安徽医科大学第一附属医院神经外科,合肥 230022【正文语种】中文【中图分类】R739.41神经胶质瘤是由神经外胚叶衍化而来的胶质细胞发生的一类原发性颅内恶性肿瘤的总称[1]。

2024贝伐珠单抗长期治疗诱导胶质母细胞瘤侵袭转移的研究进展要点(全文)

2024贝伐珠单抗长期治疗诱导胶质母细胞瘤侵袭转移的研究进展要点（全文）胶质母细胞瘤(glioblasto ma,GBM)是最常见和最具侵袭性的原发性脑肿瘤。

尽管对GBM进行手术、放疗和化疗，但其复发仍不可避免。

目前标准治疗方案是最大程度地安全切除，然后进行放化疗(CRT)。

放射治疗总剂量60Gy,在6周内分30次完成，同时每日使用替莫嗤胺，后续辅助替莫嗤胺治疗6个月。

诊断和治疗后的中位生存期为12~15个月。

美国目前GBM5年生存率约为5%。

在替莫嗤胺之外，美国食品药品监督管理局千2009年快速批准贝伐株单抗(bevacizumab,BVZ)用千治疗GBM。

BVZ是一种靶向抑制血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEG F)的特异性抗体，其试图阻止肿瘤血管生成，从而减少肿瘤血液供应，减缓肿瘤细胞扩散。

然而随着研究不断深入，研究发现：B VZ 对胶质瘤仅发挥轻微的抗肿瘤作用，主要用千症状控制，在总生存率方面无显著益处，反而会增强肿瘤侵袭性。

本文就BV Z治疗GBM诱发侵袭转移的机制，以及用千预测BVZ治疗反应的特异性标志物展开论述。

1.BVZ在G BM的应用BVZ治疗GBM的首次临床试验是2009年的“AVF3708g/BRAIN"和“NCI06-C-0064E二期试验。

在试验中，BVZ单药或联合伊立替康治疗GBM的客观有效率为28%~40%,6个月无进展生存率为40%~50%，与较高的历史对照组相比改善显著，但总体生存率为38%~40％并无改善。

随后，2014年完成的两项田期临床试验评估在原发GBM中应用BV Z 辅助标准放化疗方案的价值，研究结果显示：应用BVZ联合标准放化疗治疗的病人与仅采用标准放化疗方案的病人相比，无进展生存期(progression-free survival, PFS)有显著改善(10.6个月VS6.2个月），但总生存期(o verall survival, OS)并无显著差异(16.7个月VS 16.8个月）。

文献检索

基础知识一、单选D 1.下列属于文献外表特征的是（）.A.文献的分类号B.文献的主题词C.文献的关键词D.文献的作者B 2.以作者本人取得的成果为依据而创作的论文、报告等，并经公开发表或出版的各种文献，称为（）。

A.零次文献B.一次文献C. 二次文献D. 三次文献B 3.（）是指能代表文献或课题的主要内容，具有实质意义，规范化的词或词组。

A. 标题词B. 主题词C. 副主题词D. 关键词B 4.“发作性睡病的诊断及舒必利对该病的治疗作用”的最佳检索式是（）。

A. 发作性睡病AND 诊断AND 舒必利B. 发作性睡病AND （诊断OR 舒必利）C. 发作性睡病OR 诊断OR 舒必利D. 发作性睡病AND 诊断OR 舒必利AND 治疗作用D 5.“腹腔镜、胆道镜治疗胆囊结石疗效观察”不能充当该课题检索词的是（）。

A. 腹腔镜B. 胆道镜C. 胆囊结石D. 治疗C 6.课题“差异蛋白(TM9SF1,AZU1)在颅内动脉瘤破裂中的作用机制”最佳检索式是（）。

A.差异蛋白AND TM9SF1 AND AZU1 AND 颅内动脉瘤AND 破裂B.(差异蛋白OR TM9SF1 OR AZU1) AND 颅内动脉瘤AND 破裂C.差异蛋白AND (TM9SF1 OR AZU1) AND 颅内动脉瘤AND 破裂D. 差异蛋白AND 颅内动脉瘤AND 破裂D 7.按照文献的加工程度分，《医学文献信息检索实用教程》属于（）。

A. 零次文献B. 一次文献C. 二次文献D. 三次文献B 8.课题“临终关怀对晚期胃癌患者生活质量的影响”，最恰当的检索式是（）。

A. 临终关怀AND 晚期胃癌患者AND 生活质量B. 临终关怀AND 晚期胃癌AND 生活质量C. 临终关怀AND 晚期胃癌AND 生活质量AND 影响D. 临终关怀AND 晚期胃癌患者AND 生活质量AND 影响C 9.评价检索效果的两个指标是查全率和（）。

A. 检索速度B. 下载速度C. 查准率D. 结果数量D 10.实验数据、观测记录等未融入正式交流渠道的信息或未经公开发表于正式刊物的信息属于（）。

DNA甲基化对miR-133a表达及胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

ＤＮＡ甲基化对ｍｉＲ－１３３ａ表达及胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响刘　亮１，２，朱正权１，阿满·哈迪尔别克１，杜山别克·克孜１，夏海成１，郑　勇２ＥｆｆｅｃｔｏｆＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａａｎｄｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓＬＩＵＬｉａｎｇ１，２，ＺＨＵＺｈｅｎｇｑｕａｎ１，Ａｍａｎ·Ｈａｄｉｅｒｂｉｅｋｅ１，Ｄｕｓｈａｎｂｉｅｋｅ·Ｋｅｚｉ１，ＸＩＡＨａｉｃｈｅｎｇ１，ＺＨＥＮＧＹｏｎｇ２１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ＴｕｍｏｒＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＸｉｎｊｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＸｉｎｊｉａｎｇＵｒｕｍｑｉ８３００１１，Ｃｈｉｎａ；２ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈｅｎｚｈｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８０００，Ｃｈｉｎａ．【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｉｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｉｎｇｌｉｏｍａｔｉｓｓｕｅａｎｄｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＲＴ－ＰＣＲ．ＴｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｇｅｎｅｉｎｇｌｉｏｍａｔｉｓｓｕｅａｎｄｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＭＳＰ，ａｎｄｔｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｇｅｎｅｉｎｎｏｒｍａｌｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅＨＥＢａｎｄｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅｓＡ１７２，Ｕ８７，Ｕ２５１ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＢＳＰ．Ａｆｔｅｒ７２ｈｏｕｒｓｏｆｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｏｆＡＺＡｗｉｔｈｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅｓＡ１７２，Ｕ８７ａｎｄＵ２５１，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＲＴ－ＰＣＲ，ａｎｄｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｔｉｃａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｒｅｅｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＡＺＡｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＭＴＴａｎｄＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＲＴ－ＰＣＲａｓｓａｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｉｎｇｌｉｏｍａｔｉｓｓｕｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ．ＭＳＰａｓｓａｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｇｅｎｅｉｎｇｌｉｏｍａｔｉｓｓｕｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ．ＢＳＰａｓｓａｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅＨＥＢ，ｇｌｉａｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒ．ＴｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｇｅｎｅｉｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓＡ１７２，Ｕ８７ａｎｄＵ２５１ｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．ＲＴ－ＰＣＲａｓｓａｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａｉｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓＡ１７２，Ｕ８７ａｎｄＵ２５１ｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｆｔｅｒ７２ｈｏｕｒｓｏｆｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｗｉｔｈｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔＡＺＡ．ＴｈｅａｐｏｐｔｏｔｉｃｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｏｆＭＴＴａｎｄＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓＡ１７２，Ｕ８７ａｎｄＵ２５１ｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｆｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔＡＺＡ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｔｉｃｒａｔｅｏｆｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｉｎｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓｓｉｌｅｎｃｅｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａ，ｗｈｉｃｈｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】ｇｌｉｏｍａ，ｍｉｃｒｏＲＮＡ－１３３ａ，ＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓＭｏｄｅｒｎＯｎｃｏｌｏｇｙ２０２１，２９（０８）：１２９６－１３００【摘要】　目的：探讨ｍｉＲ－１３３ａ在胶质瘤细胞中的表达及ＤＮＡ甲基化对其的调控机制并初步探究ｍｉＲ－１３３ａ对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响。

脑胶质瘤的分子分型与基因检测

IDH常见变异类型
低等级胶质瘤中，R132变异在IDH中出现的频率
基因
IDH1 IDH2
核苷酸变化
c.395G>A c.394C>T c.394C>A c.395G>T c.394C>G c.515G>A c.515G>T c.514A>T c.514A>G
氨基酸变化
R132H R132C R132S R132L R132G R172K R172M R172K R172G
脑胶质瘤的分子标记
IDH1/2突变
1p/19q联合缺失
MGMT启动子甲基化
生物学结增加与脑胶质瘤CPG岛甲基化不清楚，候选基因CIC与FUBP1在研究减少DNA修复，在IDH1/2突变肿瘤中
果
亚型相关的2羧基戊二酸二乙酯中
与脑胶质瘤CPG岛甲基化亚型相关
的浓度
检测方式免疫组化（R123H）、ddPCR、 FISH、LOH微卫星分析
• MGMT可以使烷化剂作用下形成的O6位甲基化鸟嘌呤去甲基化，有效修复DNA损伤，同时自身不可逆失活为烷基化MGMT，所以该反应又称为自杀反应。
• 细胞的修复能力取决于MGMT在细胞内的含量和合成速率，而MGMT甲基化可以导致基因沉默和抑制蛋白合成，阻碍DNA的修复。
MGMT甲基化与临床特征
• IDH（异柠檬酸脱氢酶）是三羧酸循环的关键酶，催化异柠檬酸氧化脱羧生成α-酮戊二酸（α-KG）。
• IDH1、IDH2基因分别位于染色体1q33.3和15q26.1。 • IDH1、IDH2存在于细胞质、过氧化物酶体和线粒体中，分别催化细胞质和线粒体
中NADP+（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）和异柠檬酸生成α-KG和NADPH（还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）。

胶质母细胞瘤循环肿瘤细胞的研究进展

胶质母细胞瘤循环肿瘤细胞的研究进展
谭呼;刘畅;张庆梅;肖绍文
【期刊名称】《肿瘤防治研究》
【年(卷),期】2018(45)12
【摘要】胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)是恶性程度极高的肿瘤,即使在手术、放射治疗和化学治疗等多重方案联合治疗下,大部分GBM患者还是因复发死亡。

胶质母细胞瘤患者预后极差不仅与肿瘤细胞侵袭和增殖相关,而且还与肿瘤监测手
段尚欠成熟有关。

研究发现循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)能够在GBM患者血液中能检测到,它在GBM的复发过程中发挥极其重要的作用。

因此,胶质母细胞瘤CTCs的检测技术及其临床意义成为当下研究热点之一。

【总页数】3页(P1020-1022)
【关键词】胶质母细胞瘤;循环标志物;循环肿瘤细胞
【作者】谭呼;刘畅;张庆梅;肖绍文
【作者单位】广西医科大学第一附属医院神经外科,南宁530021;广西医科大学组
织学与胚胎学教研室,广西医科大学基础医学研究重点实验室,南宁530021
【正文语种】中文
【中图分类】R739.41
【相关文献】
1.循环肿瘤细胞和循环肿瘤DNA在结直肠癌中的研究进展 [J], 高雅婷;张春玉;傅松滨
2.循环肿瘤细胞及循环核酸检测在胃癌中的研究进展 [J], 冯彦虎;陈昊;李玉民
3.循环肿瘤细胞及循环肿瘤DNA在胃癌中的研究进展 [J], 马晓溪
4.乳腺癌原发灶、转移灶肿瘤细胞及循环肿瘤细胞分子分型差异研究进展 [J], 张琳; 万方鑫; 富泽龙; 冯锐
5.血循环肿瘤细胞及循环游离DNA在乳腺癌临床应用的研究进展 [J], 娜仁;贾永峰
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ctDNA与免疫治疗相关的假性进展和超进展

ctDNA与免疫治疗相关的假性进展和超进展①韩叶吴重阳宋颖金祺祺蒋皓云柴晔曾鹏云岳玲玲（兰州大学第二医院血液科，兰州 730030）中图分类号R559 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）07-1554-07［摘要］以细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）、程序性死亡受体1（PD-1）及其配体PD-L1/PD-L2为主的免疫检查点抑制剂（ICI）在肿瘤免疫治疗中扮演重要角色，部分患者对该治疗反应良好，但仍有部分患者会出现非常规反应（假性进展、超进展及解离反应等），如何早期鉴别假性进展和超进展在临床中非常必要。

循环肿瘤DNA（ctDNA）因其源于凋亡和/或坏死后的肿瘤细胞而成为肿瘤早期检测的有力指标。

接受ICI治疗的患者中，ctDNA减少和增加可分别见于假性进展和超进展患者，给临床医生早期识别假性进展和超进展提供了可能。

本文就假性进展和超进展的定义、机制及ctDNA在鉴别假性进展和超进展中的作用进行综述。

［关键词］假性进展；超进展；ctDNA；免疫疗法ctDNA and immunotherapy-related pseudoprogression and hyperprogression HAN Ye，WU Chongyang，SONG Ying，JIN Qiqi，JIANG Haoyun，CHAI Ye，ZENG Pengyun，YUE Lingling. Department of Hematology， Lanzhou University Second Hospital， Lanzhou 730030， China［Abstract］Immune checkpoint inhibitor （ICI） based on cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 （CTLA-4）， programmed death receptor 1 （PD-1） and its ligands PD-L1/PD-L2 plays an important role in tumor immunotherapy. Some patients respond well to treatment，while some patients still have unconventional reactions （pseudoprogression，hyperprogression，dissociation reactions，etc.），thus early identification of pseudoprogression and hyperprogression is very necessary for clinical practice. Circulating tumor DNA （ctDNA） is a powerful indicator of early tumor detection because it is derived from tumor cells after apoptosis and/or necrosis. In patients receiving ICI treatment， decrease and increase of ctDNA can be seen in patients with pseudoprogression and hyperprogression respectively，which provides possibility for clinicians to identify pseudoprogression and hyperprogression early. This article reviews definition and mechanism of pseudoprogression and hyperprogression and role of ctDNA in identification of pseudoprogression and hyperprogression.［Key words］Pseudoprogression；Hyperprogression；ctDNA；Immunotherapy免疫疗法已成为继手术、化疗、放疗后肿瘤治疗的第4种治疗手段，尤其是针对细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4，CTLA-4）、程序性死亡受体1（programmed death receptor 1，PD-1）及其配体PD-L1/PD-L2的免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitor，ICI）治疗已在多种肿瘤中成功应用［1］。

胶质母细胞瘤组织中沉默FAP-1表达促进细胞增殖和迁移

胶质母细胞瘤组织中沉默FAP-1表达促进细胞增殖和迁移沙娅•玛哈提1，刘洋2,肖双东0,刘文2,王增亮2Silegcing expressiog of FAP一1in glioblastoma tissues promote cell proliferatiog and mi-gratiogShaya•MaUati1,LIE Yang0,XIKO Shuanudong1,LIE Wex2,WANG Zexg/ang21Departmedi op Tumor Centdr；2 Departmeni cp Neurosurgerg Centrr,Firsi OffUiated Hospital op Xiigiang Medical Univenpa,Xinjiang Urumqt830011.China.【Abstrvct i Objective:To investigate the expression and funcSoo of FAP-1in g/oVmstoma and Us ekect on pro-lifera/od and metastasis of glioma ceks.Methodt:Oncominc dataUase was used to examine the expression of FAP-1in GBM and then PCR was performed to test the r esults,diRerentof FAP-1siRNA targeted FAP-1were applied to aUjust the expression levels of FAP-1,scratch test and aUsorkance test001110X51/0were performedto test the ekect of FAP-1ox cell prodfera/og and migntion.RestlU:MTT and scratch test suagested that knocheddown of FAP-1resulted in endancement of cell pnXfenLog and migntion.Conclusion:FAP-1may ylay a role ofcancer suppnsscr gene in GBM.【Key words】glioma,FAP-1,pnXfen/ox,mign/oxMoVern Oncoloyy2021,29(11):1872-1867【摘要】目的:探讨FAP-1在胶质母细胞瘤(g/oVmstoma,GBM)组织中的表达及其对胶质瘤细胞增殖、迁移作用的影响。

脑胶质瘤发病机制及治疗中的新进展

脑胶质瘤发病机制及治疗中的新进展摘要胶质瘤约占所有中枢神经系统（central nervous systems，CNS）肿瘤的 50%。

根据世界卫生组织（World Health Organization，WHO）的分类标准，胶质瘤的病理分级可分为I-IV 级；从组织形态学角度胶质瘤可分为星形细胞瘤、室管膜瘤、少突胶质细胞瘤等。

手术切除是胶质瘤治疗的重要治疗手段之一，也是胶质瘤明确诊断、改善症状以及延长胶质瘤患者生存期的重要措施。

关键词：脑胶质瘤；转录因子；免疫治疗截至目前，研究已经证明长链非编码RNA的表达失调与胶质瘤的发生发展有关，其中一些被认为可能是胶质瘤的重要的潜在的早期诊断、预后评估和治疗的潜在靶点。

例如，Chen等通过对公共数据集的分析，发现N6-甲基腺苷相关的长链非编码RNA可以作为低级别胶质瘤患者预后评估的生物标记物，长链非编码RNA MAGI2-AS3（MAGI2 antisense RNA 3）在胶质瘤组织中低表达，且与胶质瘤的病理分级以及卡诺夫斯基量表（Karnofsky performance scale，KPS）评分之间存在直接相关性，且MAGI2-AS3表达水平低的胶质瘤患者的总生存率低于MAGI2-AS3表达水平高的患者[1]；Ghasemi等研究发现，与正常对照相比，胶质瘤患者来源的血清中长链非编码RNA HOTAIR（HOX transcript antisense RNA）表达升高且具有诊断特异性，可作为胶质瘤早期诊断的生物标志物[2]。

MiRNAs是一类长度为17-22个核苷酸的非编码RNA分子，通过抑制信使RNA翻译或者切割信使RNA来调控转录后基因的表达过程[3]。

Chen等用RNase A酶消化处理miRNAs后发现超过一半的miRNAs在RNase A酶消化处理三小时后仍能保持结构完整[3]。

循环miRNAs在煮沸、低或高pH值和延长储存时间等恶劣条件下仍保持结构稳定。

中药治疗脑胶质瘤作用机制研究进展

㊃综述㊃基金项目:陕西省中西医结合临床协作创新项目(2020⁃ZXY⁃007);陕西省省级院士工作站建设项目(2019⁃30)作者单位:712000　咸阳,陕西中医药大学第一临床医学院[陈紫莹(硕士研究生)㊁唐笛笛(硕士研究生)];陕西中医药大学附属医院脑外科(赵晓平㊁范小璇);陕西省康复医院神经内科(张梦洁);西安市中医脑病医院脑病科(薄晗)作者简介:陈紫莹(1998-),2021级在读硕士研究生㊂研究方向:中西医结合神经外科基础与临床研究㊂E⁃mail:czy1446368103@通信作者:赵晓平(1963-),硕士,教授,主任医师,博士生导师,陕西省名中医㊂研究方向:中西医结合神经外科基础与临床研究㊂E⁃mail:zxp9918@中药治疗脑胶质瘤作用机制研究进展陈紫莹　赵晓平　范小璇　唐笛笛　张梦洁　薄晗【摘要】　中药治疗脑胶质瘤疗效确切,但其作用机制尚未完全明晰㊂单味中药及其活性成分㊁中药复方可能通过多条途径发挥抗脑胶质瘤作用,主要涉及6大方面:(1)调节非肿瘤细胞如重塑肿瘤相关巨噬细胞表型,降低其向M2型极化及促进向M1型极化㊁抑制骨髓源抑制性细胞浸润等,进而改善脑胶质瘤免疫抑制微环境;(2)调控半胱氨酸蛋白酶㊁B 淋巴细胞瘤⁃2(B⁃cell lymphoma⁃2,Bcl⁃2)㊁Bcl⁃2相关X 蛋白等凋亡相关蛋白以及基质金属蛋白酶类的表达,抑制脑胶质瘤细胞增殖,诱导其细胞周期阻滞及细胞凋亡,阻断脑胶质瘤细胞发展进程;(3)下调血管内皮生长因子㊁缺氧诱导因子等关键性因子的表达,改善脑胶质瘤中存在的缺氧微环境,并阻止脑胶质瘤微血管的新生;(4)开发多种不同类型的中药靶向递送系统,提高脑胶质瘤细胞聚集部位的药物有效浓度,调控血脑屏障的通透性;(5)降低端粒酶㊁逆转录酶的表达,抑制端粒酶的活性;(6)提高活性氧水平,诱导氧化应激的发生,导致脑胶质瘤细胞凋亡㊂【关键词】　中药;　脑胶质瘤;　作用机制;　研究进展【中图分类号】　R285　【文献标识码】　A　doi:10.3969/j.issn.1674⁃1749.2024.05.039Research progress on mechanism of action of Chinese medicine in treating brain glioma CHEN Ziying ,ZHAO Xiaoping ,FAN Xiaoxuan ,TANG Didi ,ZHANG Mengjie ,BO HanThe First Clinical Medical College of Shaanxi University of Chinese Medicine ,Xianyang 712000,China Corresponding author :ZHAO Xiaoping ,E⁃mail :zxp9918@ 【Abstract 】　Chinese medicine is effective in treating brain glioma,but its mechanism of action isnot completely clear.Single Chinese medicinals,their active components,and Chinese medicinecompounds may exert anti⁃glioma effects through multiple channels,which mainly involve six aspects:(1)Regulating non⁃tumor cells,such as reshaping the phenotype of tumor⁃associated macrophages,reducingtheir M2⁃type polarization and promoting their M1⁃type polarization,inhibiting the infiltration of bone marrow derived inhibitory cells,and thus improving the brain glioma immunosuppressive microenvironment.(2)Regulating the expression of cysteine protease,Bcl⁃2⁃assoicated X protein,B⁃cell lymphoblastoma⁃2and other apoptosis⁃related proteins and matrix metalloproteinases,inhibit the proliferation of brain glioma cells,induce cell cycle arrest and apoptosis,and block the development process of brain glioma cells.(3)Down⁃regulating the expression of vascular endothelial growth factor,hypoxia⁃inducing factor and other key factors,improving the hypoxia microenvironment in glioma,and preventing the neovascularization of cerebral glioma microvessels.(4)Developing a variety of different types of Chinese medicine targeteddelivery systems to improve the effective concentration of drugs at the aggregation site of brain glioma cellsand regulate the permeability of the blood⁃brain barrier.(5)Decreasing the expression of telomerase reverse transcriptase and inhibited the activity of telomerase.(6)Increase the level of reactive oxygen species,induce oxidative stress and lead to apoptosis of brain glioma cells.【Key words】　traditional Chinese medicine;　glioma;　mechanism of action;　research progress 脑胶质瘤是成人最常见㊁最致命的中枢神经系统恶性肿瘤㊂据统计,我国脑胶质瘤发病率为5~ 8/10万,5年病死率在全身肿瘤中高居第三,总生存期中位数仅为14~17个月㊂其确切发病机制尚不清楚,已被证实的危险因素只有基因遗传突变和电离辐射[1⁃3]㊂脑胶质瘤以颅内压增高㊁神经功能缺损㊁认知障碍及癫痫等临床症状为主[4]㊂目前临床主要以最大安全手术切除为主,联合放化疗等综合治疗手段㊂尽管标准㊁合理的治疗方案可在一定程度上使患者受益,但仍存在手术完全安全切除难度大㊁复发率高㊁生存期短和预后差等亟待解决的问题[5]㊂随着对中医学的继承与创新,中医药的优势体现在能够改善患者难以承受的临床症状㊁协同增强放化疗的治疗效果㊁减轻放化疗所带来的毒副作用㊁提高患者的平均生存周期等方面㊂中医学认为,脑胶质瘤归属于脑瘤” 头痛” 痫证” 厥逆”等范畴,多与风㊁火㊁痰㊁瘀㊁虚㊁毒等致病因素相关,总病机为本虚标实[6⁃7]㊂笔者查阅文献发现,中医药治疗脑胶质瘤作用机制的相关研究不在少数,亟需对其研究结果进行整理㊁分析及总结㊂故本文搜集近5年内最新研究结果的文献,以期为中医药辅助治疗脑胶质瘤提供相关依据㊂1　改善脑胶质瘤免疫抑制微环境肿瘤免疫微环境(tumor immune microenvironment, TIME)是脑胶质瘤细胞侵袭性生长的关键因素㊂TIME由相互影响的胶质瘤细胞㊁非肿瘤细胞㊁趋化因子㊁细胞因子及细胞外基质等共同提供㊂研究表明,在胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中,免疫抑制性细胞占主导地位,丰富的非肿瘤细胞有利于胶质瘤细胞的生长繁殖㊂其中,肿瘤相关巨噬细胞(tumor⁃associated macrophages,TAMs)和骨髓源抑制性细胞(myeloid⁃derived suppressor cells,MDSCs)等非肿瘤细胞在发挥免疫抑制方面起到重要作用㊂1.1　肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)TAMs是TIME中最丰富的免疫细胞,约占GBM的30%~50%[8],具有增强脑胶质瘤免疫作用的促炎M1型和呈现免疫抑制作用的抗炎M2型是TAMs在脑胶质瘤中的两种不同功能细胞表型的体现形式[9]㊂杨新宇[10]的研究发现人参皂苷Rh2能显著降低TAMs中M2型巨噬细胞的比例,促进TIME中巨噬细胞向M1亚型进行极化,并抑制M2型巨噬细胞的迁移能力和其促胶质瘤细胞生长的效应;此外,人参皂苷Rg3脂质体[11]㊁多肽修饰的脂质体共载和厚朴酚㊁双硫仑铜[12]被研究证实均能将促脑胶质瘤增殖的M2型巨噬细胞诱导成抗脑胶质瘤的M1型巨噬细胞㊂因此,中药活性成分可通过TAMs表型重塑,促进M2型巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化,进而改善胶质瘤细胞生存免疫抑制微环境,发挥其抗脑胶质瘤作用㊂1.2　骨髓源抑制性细胞(MDSCs) MDSCs是介导TIME的另一种重要免疫细胞类型,其导致免疫逃逸的原因在于多机制地抑制了T 细胞㊁自然杀伤细胞㊁树突状细胞和巨噬细胞的功能,进一步将Treg和免疫抑制B细胞募集于TIME,以促进GBM的进展[13]㊂因此,肿瘤微环境中的MDSCs浸润程度越高,免疫抑制越严重㊂程孟祺[14]的研究发现双参散结方(西洋参㊁三七㊁冬虫夏草菌粉)与替莫唑胺(temozolomide,TMZ)联用能够抑制U87MG胶质瘤荷瘤小鼠移植瘤的生长,且抑瘤效果优于单纯使用TMZ化疗,原因可能在于减少了U87MG胶质瘤荷瘤小鼠外周脾脏中MDSCs比例,降低了TIME中MDSCs的浸润程度,其机制可能与抑制了促进MDSCs扩增激活的PTEN/P13K/Akt信号通路有关㊂2　促进脑胶质瘤细胞凋亡及抑制其增殖㊁侵袭㊁迁徙脑胶质瘤细胞的顽强增殖性,使得胶质瘤细胞拥有无限的增殖力及强大的侵袭力,是手术难以完全切除及术后极易复发的主要原因㊂细胞凋亡过程的异常和紊乱与脑胶质瘤的发生同样密切相关,多种凋亡相关蛋白共同参与调控㊂脑胶质瘤中研究较多的凋亡相关蛋白包括半胱氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)㊁B淋巴细胞瘤⁃2(B⁃cell lymphoma⁃2,Bcl⁃2)和Bcl⁃2相关X蛋白(Bcl⁃2⁃associated X protein,Bax)等㊂Bax和Bcl⁃2比例的变化可影响细胞凋亡,Bax/Bcl⁃2比值增大,细胞易发生凋亡[15⁃17]㊂一项研究显示,在脑胶质瘤中,基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase⁃2,MMP2)的表达量和肿瘤的恶性程度及侵袭潜能呈正相关[18]㊂因此,MMP2是脑胶质瘤细胞侵袭能力的关键分子㊂王增勇等[19]根据网络药理学结果,选取熊果酸为白花蛇舌草抗胶质瘤有效活性物质成分研究的代表化合物,发现熊果酸可抑制U251胶质瘤细胞的增殖并诱导细胞凋亡,同时伴有Bax/Bcl⁃2表达水平增加;王镔[20]的研究发现,绿原酸能够通过上调胶质瘤细胞中Cleaved Caspase⁃3及Bax,下调Bcl⁃2等含量,显著诱导胶质瘤细胞周期阻滞和细胞凋亡;刘海云等[21]实验发现芦荟苷能够增加U251胶质瘤细胞中Bax的含量,降低MMP2㊁Bcl⁃2蛋白表达;朱祚云等[22]研究发现水苏碱可抑制人胶质瘤细胞中MMP2等金属基质蛋白酶类的mRNA及蛋白水平;滑祥廷等[23]利用不同浓度天麻素探究其抗脑胶质瘤的作用机制,发现使用5㊁10㊁20μmol/L的天麻素能使U87细胞凋亡率显著提高且呈药物浓度依赖性,其可能通过激活cAMP/PKA/GRK2通路来增加Bax㊁降低Bcl⁃2等蛋白表达,抑制U87胶质瘤细胞的增殖及促进其凋亡㊂3　阻止脑胶质瘤组织内血管生成血管生成是一种由促血管生成因子和抗血管生成因子共同控制平衡的生理过程,目的在于为恶性脑胶质瘤提供新生血管㊂脑胶质瘤中存在缺氧微环境与丰富的血管特性,为抗脑胶质瘤血管生成治疗提供了新思路㊂目前研究表明血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)㊁缺氧诱导因子(hypoxia⁃inducible factor,HIF)是影响脑胶质瘤微血管生成的重要因素㊂3.1　血管内皮生长因子(VEGF)胶质瘤细胞与胶质瘤血管内皮细胞相互作用,形成恶性循环㊂前者通过分泌以VEGF为代表的促血管生成因子,促进胶质瘤血管内皮细胞生长,后者又能分泌多种促胶质瘤细胞生长的因子,利于脑胶质瘤更好的存活㊂其中,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)对于调节VEGFA的分泌尤为关键,大量研究证实上调EGFR 表达可导致VEGF分泌水平增加[24]㊂WANG C 等[25]实验表明,异甘草素是一种有效的环氧化酶⁃2 (cyclooxygenase⁃2,COX⁃2)㊁膜结合型前列腺素E合成酶1(membrane⁃associated prostaglandin E synthase⁃1,mPGES⁃1)和人细胞色素P4504A11(cytochrome P4504A11,CYP4A11)抑制剂,它通过下调VEGF等来阻断血管生成并诱导胶质瘤中的血管正常化,这是首个直接证明异甘草素对COX⁃2㊁mPGES⁃1和CYP4A11的三重抑制具有抗血管生成活性的研究;郝玉梅等[26]研究发现川芎挥发油能够抑制U87MG 胶质瘤细胞的血管生成,可能通过下调EGFR㊁VEGF表达而实现;王敏等[27]通过临床观察发现姜黄消瘤汤(姜黄㊁人参㊁炙黄芪㊁生薏苡仁㊁三棱㊁莪术㊁白花蛇舌草㊁半枝莲㊁猫爪草㊁焙壁虎㊁全蝎)可通过抑制VEGF的表达来阻止脑胶质瘤血管新生㊂3.2　缺氧诱导因子(HIF)与其他实体瘤一样,缺氧也是脑胶质瘤的重要特征㊂缺氧它不仅可促进脑胶质瘤的恶性生物学表型,还能影响重塑细胞外基质,这为脑胶质瘤新生血管及血管生成拟态的形成提供了良好条件㊂HIF⁃1是连接脑胶质瘤细胞对缺氧微环境的关键转录因子,是脑胶质瘤微血管形成机制中的中枢”[28]㊂因此,阻止脑胶质瘤组织内新生血管的生成,并诱导脑胶质瘤血管正常化,具有巨大的潜在临床应用价值㊂张其海等[29]通过体外实验发现,西黄丸(牛黄㊁麝香㊁乳香㊁没药)含药血清可显著下调HIF⁃1α㊁VEGFA㊁p⁃VEGFR2等表达,通过调控HIF⁃1α/VEGFA/VEGFR2信号通路,抑制脑胶质瘤U251细胞血管生成拟态,阻止U251细胞的迁移与侵袭能力,发挥抗血管生成的作用㊂4　调节血脑屏障通透性天然存在的血脑屏障(blood brain barrier, BBB)使得大部分药物不能及时且高效地进入颅内,是脑胶质瘤治疗突破的关键点㊂因此,为了更好地跨越BBB带来的阻碍,尽可能提高富集于脑胶质瘤靶部位的有效药物浓度,中药靶向递送系统被研究开放㊂它的优势点在于能促进中药活性成分到达脑胶质瘤靶部位,增加药物在颅脑内的有效浓度,延长治疗药物的停留时间等,最终达到优化治疗脑胶质瘤的目的㊂4.1　微粒靶向递送系统以脂质体㊁纳米粒等为代表的微粒靶向递送系统受到越来越多的关注㊂赵华聪等[30]将隐丹参酮包载在脂质体中,纳米递药系统能够荷载隐丹参酮高效克服BBB,实现药物有效聚集于脑胶质瘤细胞,展现了良好的抑制GL261胶质瘤细胞的活性作用,且显示出较好的体内BBB跨越能力㊂4.2　载体材料表面修饰靶向递送系统以小分子㊁蛋白质㊁多肽等为代表的载体材料表面修饰靶向递送系统更具有选择性亲和力㊂朱颖[11]构建的新型人参皂苷Rg3脂质体能够与葡萄糖转运蛋白相互作用以实现胶质瘤靶向和跨越BBB,并且能与所载化疗药物紫杉醇发挥协同抗胶质瘤的作用㊂4.3　中药引经”药物递送系统以冰片㊁麝香等芳香开窍药为代表的中药引经”药物递送系统将传统中医药与现代制剂技术相结合以促进BBB的渗透已成为国内外新趋势㊂安娜[31]利用冰片引药上行”的特点,构建冰片修饰载紫杉醇纳米结构脂质载体,递送到脑胶质瘤内,结果显示其可以借助冰片的开窍作用穿透BBB,到达胶质瘤部位,可改善紫杉醇治疗胶质瘤的效果㊂KANG S等[32]研究使用的麝香酮/RI7217共修饰的多西紫杉醇脂质体亦证实了中药芳香族复苏和现代受体靶向技术的综合作用㊂4.4　肿瘤微环境响应靶向递送系统肿瘤微环境响应靶向递送系统以PH值㊁还原响应等为代表㊂XU H等[33]将中药砒霜的主要成分As2O3联合金属离子形成金属砷复合物,利用其在弱酸的胶质瘤微环境下会分解并释放药物而发挥抗脑胶质瘤的作用㊂5　抑制端粒酶活性2013年发现的端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)启动子突变揭示了GBM 中最常见的致癌突变,发生率高达80%[34]㊂TERT 作为端粒酶的核心催化亚基,是调控端粒酶活性强弱的关键,它在正常组织中不表达,而高表达于脑胶质瘤中,它的表达使得脑胶质瘤细胞获得无限增殖的能力[35⁃36]㊂研究表明,TERT的表达不仅与上述端粒酶活性有关,还与细胞凋亡关联㊂当TERT 高表达时,细胞凋亡被抑制[37]㊂因此,中药活性成分可通过降低TERT表达,诱导胶质瘤细胞凋亡,抑制端粒酶的活性而发挥抗脑胶质瘤的作用㊂LIU J等[38]通过体外实验发现,蟾蜍灵可抑制胶质瘤干细胞的活性,并诱导其凋亡,使脑胶质瘤细胞的生长和增殖得以抑制,其机制可能与蟾蜍灵能够下调TERT的表达,进而降低端粒酶的活性有关;GU B等[39]运用酶联免疫吸附试验检测不同时间段的端粒酶活性,实时定量聚合酶链式反应和Western印迹分析检测不同浓度人参皂苷RD对U251细胞增殖的影响,并从信使RNA和蛋白水平检测不同浓度人参皂苷RD对TERT等表达的影响㊂该研究发现其机制可能通过降低端粒酶活性㊁下调TERT等含量而抑制U251细胞的增殖,促进细胞凋亡㊂6　促氧化应激活性氧(reactive oxygen species,ROS)是引起氧化应激的主要原因㊂不同浓度水平的ROS对细胞具有不同的作用,高浓度的ROS可经自噬等信号传导途径诱导氧化应激的发生,从而导致细胞凋亡㊂然而,低或中等浓度的ROS将发挥有益作用,涉及多种细胞信号通路,并发挥各种生理作用[40]㊂高浓度ROS具有细胞毒性,能够导致脑胶质瘤细胞死亡,限制其在转移过程中的存活㊂因此,中药利用促氧化剂进一步升高脑胶质瘤中的ROS水平,继而杀死脑胶质瘤细胞成为治疗脑胶质瘤的重要作用机制之一㊂任薇等[41]发现四氢姜黄素可通过增加ROS的产生,从而促进C6胶质瘤细胞凋亡;LIU X等[42]研究表明,雷公藤红素可导致G2/M期阻滞和凋亡以抑制胶质瘤细胞的增殖㊂更值得注意的是,雷公藤红素能够诱导ROS的产生,通过激活ROS/c⁃Jun氨基末端激酶(c⁃Jun N⁃terminal kinase,JNK)信号通路并阻断蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路途径,同时触发凋亡与自噬;HUANG FM等[43]发现蛇床子素主要通过产生过量的ROS诱导胶质瘤细胞坏死,且坏死过程主要通过ROS介导的受体相互作用蛋白激酶1/受体相互作用蛋白激酶3/混合谱系激酶结构域样蛋白途径发生;LIU W等[44]研究中药七叶一枝花中提取的生物活性成分多叶绿素VI,揭示其在胶质瘤细胞中的抗肿瘤活性是通过ROS的积累以及激活了ROS调节的JNK和p38通路而发挥作用㊂7　总结与展望本文系统回顾了中药防治脑胶质瘤作用机制的研究进展,发现单味中药及其活性成分㊁中药复方能够多途径㊁多靶点㊁多方面阻断脑胶质瘤发展的病程链,并且将中医药与现代技术相结合能够突破单一方式无法克服的困难,促进疗效,值得深思㊂目前认为中医药防治脑胶质瘤的作用机制主要与改善脑胶质瘤免疫抑制微环境,促进脑胶质瘤细胞凋亡及抑制其增殖㊁侵袭㊁迁徙,阻止脑胶质瘤组织内血管生成,调节BBB通透性,抑制端粒酶的活性,促氧化应激相关㊂这些机制的发现不仅为中药防治脑胶质瘤提供了理论支撑,而且进一步证明了中药治疗脑胶质瘤是一种有效途径㊂但其机制研究过程亦存在诸多问题:如(1)中药通过多靶点治疗脑胶质瘤虽是一种优势亦是一个难点,因其过程可能涉及多条通路㊁存在多种机制交叉,所以难以阐明确切的作用途径,且对上下游信号通路的研究有待深入;(2)上述研究表明中药可调控非肿瘤细胞,但脑胶质瘤微环境所涉及范围甚广,非肿瘤细胞并不一定是中药抗脑胶质瘤免疫抑制微环境的核心环节;(3)目前中药阻止脑胶质瘤组织内血管生成方面的研究主要倾向于促血管生成因子的研究,对血管生成抑制因子研究较薄弱,可进一步研究中药对脑胶质瘤血管生成的双向调节作用;(4)相关基础研究未能与中医证型相结合,无法体现中医学病证结合的优势等㊂虽然中药治疗脑胶质瘤的疗效是确切的,但因其成分复杂,药理机制尚不完全清楚,成分间相互作用的研究也较少,影响了作用机制的进一步阐明㊂因此,中药目前只是治疗脑胶质瘤的补充或替代疗法㊂若要广泛使用中医药治疗脑胶质瘤,应综合多学科优势,开展更多严谨科学㊁高质量的临床研究,为中医药的临床应用提供可靠依据㊂参考文献[1]　国家卫生健康委员会医政医管局,中国抗癌协会脑胶质瘤专业委员会,中国医师协会脑胶质瘤专业委员会.脑胶质瘤诊疗指南(2022版)[J].中华神经外科杂志,2022,38(8):757⁃777.[2]　Weller M,Van Den B M,Preusser M,et al.EANO guidelineson the diagnosis and treatment of diffuse gliomas of 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egfr扩增胶质瘤标准

egfr扩增胶质瘤标准EGFR扩增在胶质瘤中的标准检测方法胶质瘤是一种常见的中枢神经系统肿瘤，其中一小部分病例存在EGFR（表皮生长因子受体）扩增的突变。

EGFR扩增是指EGFR基因的复制数增加，导致表皮生长因子受体的过度表达。

这种突变与胶质瘤的发生、发展以及治疗预后密切相关。

因此，准确检测EGFR扩增对胶质瘤的治疗和预后评估非常重要。

EGFR扩增的检测方法主要有荧光原位杂交（FISH）和免疫组织化学（IHC）。

FISH是一种能够准确检测基因复制数的技术，它使用荧光标记的探针与目标基因结合，通过观察信号数量来确定基因的扩增状态。

FISH检测EGFR扩增的优势在于能够精确计数扩增的EGFR基因的复制数，可提供EGFR扩增的准确比例。

然而，FISH检测方法需要显微镜下的解释，结果的解读存在主观性和操作技术的要求。

另一种常用的EGFR扩增检测方法是IHC，它通过检测组织切片中EGFR蛋白的表达水平来评估EGFR扩增的状态。

IHC的优势在于它是一种简单、快速、经济的检测方法，可以直观地观察EGFR蛋白的表达情况。

然而，IHC检测结果的判断依赖于观察者的主观解读，结果的准确性和可重复性可能会受到影响。

近年来，还出现了一种新的检测方法，称为液体活检。

液体活检通过分析血液或脑脊液中的循环肿瘤DNA（ctDNA）来评估肿瘤的遗传变异。

液体活检不需要进行组织切片，可以非侵入性地检测EGFR扩增的情况。

然而，液体活检技术的准确性和可靠性仍然需要进一步的研究和验证。

无论采用哪种检测方法，EGFR扩增的检测结果对于胶质瘤的治疗决策和预后评估都具有重要的意义。

EGFR扩增的存在通常与肿瘤的恶性程度和预后不良相关，而EGFR扩增的胶质瘤对EGFR抑制剂（例如埃克替尼）有更好的治疗反应。

因此，准确检测EGFR扩增可以帮助医生选择更合适的治疗方案，提高患者的治疗效果和生存率。

总之，EGFR扩增的检测在胶质瘤的诊断、治疗和预后评估中起着重要的作用。

胶质瘤抗血管生成治疗新进展

１１Ｂｖｃｕａ．ｅａｉｍｂ即Ａａｔ，新型人抗ＶＧｚｖｓｎ为ｉＥＦ单克隆抗
外对于晚期癌症患者缺乏肯定的临床效应，ｍｒａｔｔ如ａｉｓ对ｍａ
患有多形性成胶质细胞瘤、卵巢癌、小细胞肺癌、非小细胞肺
癌的患者均缺乏能改善临床预后的证据，另外对接受化疗后病情稳定的恶性小细胞肺癌患者，Ａ１－５６和安慰剂的ＢＹ２９６对照研究显示ＢＹ２９６Ａ１－５６可导致患者生存期缩短，于此基ＢＹ１－５６的临床研究均被迫终止。这一方面由于晚期Ａ２９６肿瘤脉管系统已构建完好，另一方面基质金属蛋白酶对于血管生成具有多重效应，除了促进血管生成外，它还可通过裂
抗血管生成治疗为胶质瘤的治疗提供了一种新的策略。在
此对近几年在这方面研究进展综述如下。
１４９５年Ａｉｅ首次提出了肿瘤血管生成学说，瘤血１ｇｉ肿管的生长和发育受血管形成的活性物质因子调节。１７９１年
Ｆｌｍｎ把由肿瘤细胞释放并诱导血管生成的物质命名为ｏａｋ
内的血管生成过程中的关键成分，良反应主要是呕吐、不腹泻等胃肠道反应。
胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，管采用尽了手术、放疗、化疗等综合治疗方法，效仍不能使人满意，疗几乎所有病人都会复发且生存期很短，这就迫使人们寻找新
维普资讯
１０４
ＪＣｌｕｏｕｇ，ｅｔｍｂｒ２０Ｖｏ．Ｎｏ３ｉＮｅｒｓｒＳｐｅｅ０６，１３，．ｎ

病理进展学ASCO年度报告：临床肿瘤学进展课1.1

2015年度进展ASCO首次宣布年度进展(Advance of the Year)——慢性淋巴细胞白血病（CLL）治疗的重大“变革”1. 用于新诊断CLL患者的两种免疫治疗药物：obinutuzumab和ofatumumab2. 两种分子靶向药物（ibrutinib和idelalisib）为复发性或耐药性CLL患者提供了可代替化疗的新治疗选择预防与筛查进展1. 激素类药物阿那曲唑使绝经后女性罹患乳腺癌的风险减半2. 低剂量CT肺癌筛查向广泛使用又前进了一步：美国预防服务工作组（USPSTF）发布了首部关于肺癌筛查的推荐方案；新研究权衡了筛查的获益与风险。

患者护理进展1. 尽早开始姑息治疗可改善患者身心和情绪状态。

2. 在化疗基础上增加一种激素类药物为乳腺癌女性增加了妊娠成功率。

3. 2014年3月，ASCO发布的美国癌症医疗现状全面分析报告为帮助美国患者确保获得癌症医疗服务提供了策略。

肿瘤生物学进展1. 遗传学研究为提高癌症诊断与治疗奠定基础①大型基因组研究提供了癌症分子起源的线索②完全无关的癌症类型中发现了相同的遗传学改变，可能会给治疗带来影响2. 血液检测可预测前列腺癌的治疗耐药3. 肠道菌群并非是癌症的“旁观者”---人的第二个“脑”是胃肠道治疗进展联合治疗策略延长脑肿瘤和前列腺癌患者的生存期1. 放化疗联合治疗方法治疗低分级胶质瘤，能够使患者寿命延长5年2. 一线化疗联合标准激素治疗改善晚期前列腺癌患者生存克服肺癌治疗耐药的新希望1. 美国食品与药物管理局（FDA）批准首个化疗失败的晚期胃癌治疗方案2. Lenvatinib：治疗难治性性甲状腺癌的新选择癌症免疫疗法1. 免疫治疗药物ipilimumab降低早期黑色素瘤复发风险2. 免疫疗法在肺癌治疗中稳步前行3. 肿瘤引导的T细胞治疗：复发性白血病治疗突破的早期预兆罕见癌症的治疗进展1. 首个可行的治疗一种罕见致残性关节病[被称为色素沉着绒毛结节性滑膜炎（PVNS）]的手术替代方案2. 早期研究表明贝伐珠单抗有望治疗一种罕见的卵巢癌十年回顾靶向治疗药物迅速增加1. 使肿瘤细胞“饥饿”的新药血管生成抑制剂，一类旨在减缓肿瘤血管生成的药物，被证明可以成功治疗许多晚期和侵袭性肿瘤2. EGFR抑制剂：抑制癌细胞生存的关键通路3. 人表皮生长因子受体2抑制剂的新疗法为乳腺癌的治疗不断带来突破4. 针对多条分子通路的靶向药物：一个新兴趋势研究者们正在不断发现新的、可以同时阻断1种以上的癌症靶向治疗方法，这些方法将成为对抗癌症的有力武器。

NMR分析胶质瘤细胞系CHG5和U87的代谢轮廓

NMR分析胶质瘤细胞系CHG5和U87的代谢轮廓邵巍;顾金苹;黄彩华;黄子成;季天海;林东海【摘要】胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,其发病原因和恶性进展机制均不明确,给胶质瘤的临床诊疗带来很大困难.胶质瘤恶性进展伴随着癌细胞代谢改变,但可以反映胶质瘤恶性进展的代谢物信息和分子机制目前仍不清楚.该研究以两种不同恶性程度的胶质瘤细胞系CHG5和U87为研究对象,用基于NMR的代谢组学方法分析这两种胶质瘤细胞系的代谢轮廓,寻找差异性代谢物.结果表明CHG5和U87的代谢轮廓存在明显差异.在高恶性程度的U87细胞中,柠檬酸盐(citrate)等15种代谢物有上升趋势;而乳酸盐(lactate)、牛磺酸(taurine)等6种代谢物有下降趋势.以上结果表明这些差异性代谢物可能与胶质瘤细胞的恶性特性密切相关.这些从胶质瘤细胞系获取的代谢信息将成为临床标本代谢组学研究的重要前提和有益补充.【期刊名称】《波谱学杂志》【年(卷),期】2014(031)001【总页数】9页(P40-48)【关键词】核磁共振(NMR);代谢轮廓;差异性代谢物;胶质瘤细胞;恶性程度【作者】邵巍;顾金苹;黄彩华;黄子成;季天海;林东海【作者单位】厦门大学附属成功医院,厦门大学化学生物学系生物核磁共振实验室,福建厦门 361005;厦门大学附属成功医院,厦门大学化学生物学系生物核磁共振实验室,福建厦门 361005;福建医科大学运动和康复研究所,福建福州351009;厦门大学附属成功医院,厦门大学化学生物学系生物核磁共振实验室,福建厦门 361005;厦门大学附属成功医院,厦门大学化学生物学系生物核磁共振实验室,福建厦门361005;厦门大学附属成功医院,厦门大学化学生物学系生物核磁共振实验室,福建厦门 361005【正文语种】中文【中图分类】O482.53胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤．具有发病率、复发率、死亡率高等特点．根据WHO标准，按照恶性程度将胶质瘤分为4级．低级别胶质瘤(WHO I～II)患者的生存时间在5～10年．高级别胶质瘤(WHO III～IV)的平均生存时间仅有12～15个月．此外，超过50%的WHO II级胶质瘤会在5～10年内转变为高级别胶质瘤[1,2]．目前，人们在胶质瘤恶性进展机制等方面开展的研究，主要集中在基因和蛋白质水平上．研究发现，1p19q基因的联合缺失(loss of heterozygosity of 1p19q)[3]以及IDH1[4]、MGMT[5]等基因突变与恶性胶质瘤的进展和预后密切相关．仅仅是基因和蛋白质的变化，并不能完全解释胶质瘤恶性进展过程中细胞恶性转化的分子机制．代谢物处于基因和蛋白质的下游，是基因和蛋白质功能变化的最终反映．胶质瘤恶性进展伴随着癌细胞代谢改变，但可以反映胶质瘤细胞恶性转化的代谢物信息和分子机制目前知之甚少．从代谢层面上考察胶质瘤细胞恶性转化的研究，将有助于阐明胶质瘤恶性进展的分子机制，探索靶向代谢途径治疗恶性胶质瘤的新策略．因此，本研究利用600 MHz1H NMR对两种不同恶性程度的胶质瘤细胞系CHG5和U87的代谢轮廓进行分析，寻找差异性代谢物，重点探讨与胶质瘤细胞恶性程度相关的细胞代谢变化．1.1 细胞培养恶性胶质瘤细胞系CHG5和U87使用含血清10%的DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Mediclm)完全培养基培养．培养箱条件为：相对湿度 95%、O295%、CO25%，37℃恒温．1 d～2 d给予细胞换液，3 d 进行传代，使用混合消化液[0.02% EDTA（乙二胺四乙酸二钠）+0.25% 胰蛋白酶]消化 2 min 后，收集细胞离心 1 000 rpm，3 min，细胞计数，将106的细胞接种在培养皿中，培养48 h．1.2 制备细胞萃取液利用直接刮取法制备细胞萃取液：倒掉细胞培养液，在培养皿中加入2 mL冷甲醇(-20 ℃)，将细胞灭活后，刮离培养皿．按4∶4∶2.85的比例往细胞甲醇混合液中加入2 mL氯仿和1.95 mL的超纯水．漩涡振荡5 min，静置15 min；离心 10 000～14 000 rpm，4℃，30 min , 分为两层．本实验只对水溶性代谢物进行分析．在进行NMR分析前，使用氮吹仪将上层液体的溶剂（甲醇/水）全部吹干，重新加入500 μL D2O和50 μL D2O配制的磷酸缓冲液（1.5 mol/L KH2PO4，pH=7.4，含0.1% TSP），混合均匀后在14 000 g，4℃条件下，离心15 min．随后取上清500 μL加入到5 mm的核磁管中进行分析．1.3 核磁共振波谱分析所用谱图采集都在Bruker Avance III 600型谱仪上完成，实验温度是298 K．一维氢谱采用的脉冲序列为 [(RD)-90°-t1-90°-τm-90°-ACQ] (Bruker Biospin pulse program library)．其中t1=6.6 μs, τm=120 ms．水峰压制在等待时间（relaxation delay，RD，3 s）中进行．数据采集点（TD）32 k，谱宽（SW）为10 kHz，累加次数（NS）为256次，空采次数（DS）16次．使用Topspin2.1（Bruker Biospin, Germany）处理谱图，FID（free induction decay）信号在傅里叶变化之前进行指数窗函数处理（1b=0.3 Hz），变换后的1H NMR谱图以TSP定标．1.4 数据分析使用MestReNova6.5（Mestrelab Research S.L,Espain）对样品进行手动相位和基线校正，然后分段积分．1H NMR谱中的积分区域为0.8～9.5，为了消除水对积分的影响，去除谱图中4.5～5.5区域，积分宽度（bin）为0.003[6]．积分后的数据导出保存成ASCⅡ格式，以谱图总面积对积分面积进行归一化得到X矩阵．将X矩阵数据导入到SIMCA-P12+软件（Umetrics Inc., Umea, Sweden）进行主成分分析（PCA）[7]和偏最小二乘分析（PLS-DA）[8]．将X矩阵数据导入到MATLAB2011b（MathWorks, USA），使用MATLAB生物信息学工具箱（bioinformatics toolbox）中提供的分层聚类函数clustergram，得到样品分类的系统树图和Heatmap图．差异性代谢物寻找，主要通过7次循环交互验证（7-fold cross validation）和响应排序验证（response permutation testing, RPT），验证PLS-DA模型的可靠性，再进行差异性变量（bin）的筛选．筛选标准主要依据第一预测主成分（predictive component）的变量权重重要排序（variable importance in projection，VIP）值和载荷权重（loading weights）和相关系数（correlation coefficients，Pcorr）．2.1 CHG5和U87细胞萃取液中代谢物信号检测CHG5和U87两种胶质瘤细胞系来源于不同恶性程度的胶质瘤组织，因此具有不同的恶性特性．CHG5来源于WHO II 级的胶质瘤组织，U87来源于WHO IV级的胶质瘤组织．利用Bruker Avance III 600谱仪对CHG5和U87两种细胞萃取液进行检测，获得的NMR谱如图1．从谱图上可以看出，细胞萃取液的NMR谱中含有丰富的代谢物组成信息．两种细胞相比，虽然没有新谱峰产生，但部分谱峰在面积上存在差异，这表明两种细胞萃取液的代谢物浓度存在一定差异．在实验中，我们做了大量的预试验对细胞萃取液的稳定性和重复性进行比较．结果显示在相同接种浓度和培养时间条件下，同一种细胞萃取液的核磁谱图稳定性和重现性良好．该结果说明，在相同的培养条件下，同种细胞可以维持较为稳定的代谢模式．因此，不同种细胞在相同培养条件下的代谢模式差异具有可比性．选用临床患者体液或瘤组织样本进行胶质瘤病理分级相关的代谢组学研究，往往会存在样本个体因素（如年龄、饮食、服药等）或者瘤组织细胞异质性等因素影响肿瘤代谢物的测定和差异性代谢物的判别．直接以培养的肿瘤细胞为对象，进行代谢组学研究，可以排除体液和组织样本异质性的缺点，还具有可控性、稳定性高、重复性好等优点．因此，从肿瘤细胞本身获得的代谢信息，可以成为临床患者体液或瘤组织样本代谢组学的研究重要前提和有益补充．2.2 CHG5和U87的主成分分析和聚类分析为了观察两种细胞萃取液代谢轮廓是否存在分离趋势，进行了无监督的PCA分析和聚类分析．PCA结果如图2．两种细胞萃取液的每个样品点都落在95%置信区间的Hotelling’s T2的椭圆形中．PCA图上，可以看到两种样本的分布存在以下趋势：在第一主成分上（PC1），同一种细胞的平行样品点落在极为相近的区域，不同细胞的样品点之间具有分离趋势．U87的样本点主要落在左侧PC1值较小的区域，CHG5则落在右侧PC1值较大的区域．这种分布表明不同恶性程度的胶质瘤细胞的代谢轮廓存在明显差异．聚类分析结果如图3．根据样本谱峰的bin值，CHG5（5个样本点）和 U87（8个样本点）可以很好的聚成2类．聚类分析结果再次表明不同恶性程度的胶质瘤细胞的代谢轮廓存在明显差异．在无监督分析之后,又通过有监督的偏最小二乘判别分析(PLS-DA)进一步验证分类结果的可靠性．PLS-DA得分图如图4(a)，该结果表明在以第一主成分和第二主成分构成的空间（tp[1] / tp[2]）里，CHG5和U87的样本点可以较好区分．置换排列验证结果如图4(b)，该结果表明分类模型没有出现过拟合现象，具有很好的数据预测能力．2.3 CHG5和U87的差异性代谢物分析两种胶质瘤细胞萃取液的代谢谱图可以明显区分．在良好的分类模型基础上，通过计算第一预测组成分的VIP值和相关系数| r |，进一步寻找引起模型差异的代谢物，并对变化显著的代谢物进行指认和归属．OPLS-DA的loading图显示（图5），共有21种代谢物变化较为显著．这些差异性代谢物主要包含氨基酸、糖、有机酸、胆碱等多类物质，主要涉及三羧酸循环、糖酵解、氨基酸合成与降解等代谢途径．利用峰面积积分，对这些物质进行相对浓度定量．我们发现在高恶性程度的U87细胞的萃取液中，柠檬酸盐（citrate）、延胡索酸盐（fumarate）、葡萄糖（glucose）、谷氨酸盐（glutamate）、谷氨酸（glutamine）、甘油磷脂酰胆碱（GPC）、谷胱甘肽（GSH）、异亮氨酸（isoleucine）、亮氨酸（leucine）、赖氨酸（lysine）、肌醇（myo-Inositol）、苯丙氨酸（phenylalanine）、苏氨酸（threonine）、酪氨酸（tyrosine）、缬氨酸（valine）等15种代谢物有上升趋势；而丙氨酸（alanine）、乳酸盐(lactate)、牛磺酸（taurine）、甲酸盐（formate）、肌酸（creatine）、乙酸盐（acetate）等6种代谢物有下降趋势．这些差异性代谢物大部分与体液或组织样本得到的结果相类似[9]，但是最为明显不同的是乳酸．研究表明，与正常组织相比，肿瘤组织处在缺氧的状态，瘤细胞进行糖酵解，会产生大量乳酸[10,11]．利用1H MRS在不同级别的胶质瘤组织中均可以检测到乳酸峰．有趣的是，我们的结果显示在高恶性程度的胶质瘤细胞U87萃取液中乳酸的含量明显降低．有文献报道胶质瘤细胞可以通过单羧酸转运蛋白MCTs(monocarboxylate transporters)快速将乳酸排到其所处的微环境中去，如果阻止乳酸的转运，将会导致瘤细胞侵袭能力下降并诱导凋亡[12]．因此可以推测高恶性程度的胶质瘤细胞转运或者消耗乳酸的能力更强，该种细胞可能将大量乳酸排到细胞外，保持细胞内乳酸在较低水平，从而维持高侵袭能力和抗凋亡能力．此外，图5显示牛磺酸和肌酸的变化也非常显著．根据文献报道，牛磺酸具有调节细胞渗透压，参与细胞凋亡和抗氧化等多种生理功能．U87细胞中牛磺酸含量降低，很可能与其抗凋亡和抗氧化功能增强相关，在后续研究中我们将进一步对此进行验证．肌酸是细胞能量存储和利用的重要化合物．其浓度在能量代谢减退时增加，而在能量代谢增加时降低．U87细胞中肌酸含量降低很可能与其能量代谢改变有关．本工作利用NMR技术分析两种不同恶性程度的胶质瘤细胞的代谢轮廓，指认了两种胶质瘤细胞的差异性代谢物．主要得到以下结论：不同恶性程度的胶质瘤细胞系具有明显的代谢模式差异．找到导致代谢模式差异的差异性代谢物21种．通过两种胶质瘤细胞找到的差异性代谢物很可能与细胞的恶性特性相关．尽管如此，进一步明确上游基因和蛋白质对这些恶性特性相关代谢物的调控关系，成为我们下一步研究的重点．【相关文献】[1] Maher E A, Furnari F B, Bachoo R M, et al. Malignant glioma: genetics and biology of a grave matter[J]. Genes Dev, 2001, 15(11): 1 311－1 133.[2] Compostella A A, Tosoni V, Blatt, et al. Prognostic factors for anaplastic astrocytomas[J]. J Neurooncol, 2007, 81(3): 295－303.[3] Reifenberger J G, Reifenberger L, Liu, et al. Molecular genetic analysis of oligodendroglial tumors shows preferential allelic deletions on 19q and 1p[J]. Am J Pathol, 1994, 145(5): 1 175－1 190.[4] Borodovsky A, Seltzer M J, Riggins G J. Altered cancer cell metabolism in gliomas with mutant IDH1 or IDH2[J]. Curr Opin Oncol, 2012, 24(1): 83－9.[5] Brandes A A, Franceschi E, Tosoni A, et al. MGMT promoter methylation status can predict the incidence and outcome of pseudoprogression after concomitant radiochemotherapy in newly diagnosed glioblastoma patients[J]. J Clin Oncol, 2008,26(13): 2 192－2 197.[6] Craig A, Cloarec O, Holmes E, et al. Scaling and normalization effects in NMR spectroscopic metabonomic data sets[J]. Anal Chem, 2006, 78(7): 2 262－2 267.[7] Pérez-Enciso M, Tenenhaus M. Prediction of clinical outcome with microarray data: a partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) approach[J]. Hum Genet, 2003, 112(5-6): 581－592.[8] Chinnaiyan P, Kensicki E, Bloom G, et al. The metabolomic signature of malignant glioma reflects accelerated anabolic metabolism[J]. Cancer Res, 2012, 72(22): 5 878－5 888.[9] Weljie A M, Bondareva A, Zang P, et al.1H NMR metabolomics identification of markers of hypoxia-induced metabolic shifts in a breast cancer model system[J]. J Biomol NMR, 2011, 49(3-4): 185－193.[10] Cuperlovic-Culf M, Culf A S, Touaibia M, et al. Targeting the latest hallmark of cancer: another attempt at’magic bullet’drugs targeting cancers’ metabolic phenotype[J]. Future Oncol, 2012, 8(10): 1 315－1 315.[11] Colen C B, Shen Y, Ghoddoussi F, et al. Metabolic targeting of lactate efflux by malignant glioma inhibits invasiveness and induces necrosis: an in vivo study[J]. Neoplasia, 2011, 13(7): 620－632.。

IVIM与DKI在胶质瘤分级中的应用

IVIM 与DKI 在胶质瘤分级中的应用蔡雷1，白江涛1，刘连锋1，樊丽媛1，王少彧2，于东升31.延安大学咸阳医院CT/MR 室，陕西咸阳712000；2.西门子医疗系统有限公司磁共振临床科研部，上海201318；3.延安大学咸阳医院病理科，陕西咸阳712000【摘要】目的探究体素内不相干运动成像(IVIM)与弥散峰度加权成像(DKI)在胶质瘤分级中的应用价值。

方法回顾性分析2022年5月至2023年4月延安大学咸阳医院经手术及穿刺病理确诊的82例脑胶质瘤患者的临床资料，其中Ⅰ级12例、Ⅱ级26例、Ⅲ级25例、Ⅳ级19例。

所有患者在术前进行常规MRI 平扫、IVIM 及DKI 扫描。

IVIM 序列采用8组b 值，范围分别为0s/mm 2、50s/mm 2、100s/mm 2、150s/mm 2、200s/mm 2、400s/mm 2、800s/mm 2、10000s/mm 2。

DKI 采用30个方向，b 分别取0s/mm 2、1000s/mm 2、2000s/mm 2。

所得IVIM 及DKI 原始数据经处理软件处理分析，结合平扫及增强图像，获取真实弥散系数(D)图、灌注分数(f)图以及假弥散系数(D*)图以及平均弥散系数(MD)、各向异性分数(FA)、平均弥散峰度(MK)、轴向峰度(AK)及径向峰度(RK)参数图，比较各组肿瘤的参数值。

绘制IVIM 、DKI 中存在差异参数在鉴别高级别胶质瘤的受试者工作特征曲线(ROC)，计算曲线下面积(AUC)。

结果Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级脑胶质瘤患者肿瘤区域的D*值分别为(2.03±0.52)×10-3mm 2/s 、(3.32±0.68)×10-3mm 2/s 、(4.63±0.82)×10-3mm 2/s 、(7.15±0.61)×10-3mm 2/s ，MK 值分别为0.71±0.14、0.86±0.19、1.03±0.18、1.25±0.23，脑胶质瘤分级越高，D*值、MK 值水平越高，差异均有统计学意义(P <0.05)；D*值、MK 值在鉴别高级别胶质瘤上的AUC 分别为0.840、0.821，两者在鉴别高级别胶质瘤上均具有较高的诊断效能。

肿瘤转移新进展和机制

结果一：在两种肿瘤条件培养基条件下
相同的循环肿瘤细胞具有相同的穿血管内皮迁移能力。
结果二：转移性肿瘤细胞亚群较其祖代
细胞更具穿血管内皮迁移能力，且与肿瘤条件培养基的种类无关。
实验结论
一、 “接受”瘤体的肿瘤细胞释放某种信号来吸引循环中肿瘤细胞穿透血管内皮层。
二、高侵袭性肿瘤细胞较其它亚群肿瘤细胞更具响应“吸引”
CD31是一个血管内皮细胞表面130KD的糖基化蛋白质。
免疫组化检测泛白细胞标记 CD45，“接受”瘤体内白细胞迁移增多。
进一步分析发现，在“接受”瘤体内中性粒细胞和巨噬细胞（CD68+）增多。
应用RNAi将“自种植”肿瘤细胞的CXCL1封闭
与封闭MMP1 和 FSCN1不同，封闭CXCL1并不能减少MDA231 cells穿血管内皮细胞迁徙和“自我种植”程度；但是，明显减少对粒细胞的募集。 CXCL1是一小分子的细胞因子属于CXC趋化因子家族，又被称作生长调节致癌基因α，参与新血管形成、炎症反应、伤口愈合和肿瘤形成、促进肿瘤细胞的增殖。
“渗透”相关调节因子
转移性相关基因在MDA231-S1亚代中的增强表达说明循环肿瘤细自我种植优先涉及到具有转移潜质肿瘤细胞亚群。
为了明确介导渗透功能的相关因子，研究人员从表达在原发乳腺癌肿瘤并证实与乳腺癌复发相关的因子中进行筛选。
筛选标准：在原发肿瘤细胞内表达的这些因子赋予肿瘤细胞潜在的侵透优势，正如介导肿瘤细胞侵入的循环中一样。
霍华德休斯医学研究所斯隆-凯特琳癌症中心肿瘤生物学和遗传学项目
Tumor Self-Seeding by Circulating Cancer Cells. Cell. 2009 Dec 24;139(7):1315-26.

弥漫性胶质瘤生物标志物的发现及研究进展

弥漫性胶质瘤生物标志物的发现及研究进展茆晨雪;周宏灏;刘昭前【期刊名称】《中国临床药理学与治疗学》【年(卷),期】2016(21)1【摘要】弥漫性胶质瘤是成人中最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,分为星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤和少突星形细胞瘤,病理级别为Ⅱ-Ⅳ级,其中Ⅳ级的胶质母细胞瘤是最常见的高级别胶质瘤。

传统上弥漫性胶质瘤的诊断主要是基于其组织病理学特征,但是仍有很多生物学特点无法很好地解释。

而以异柠檬酸脱氢酶（IDH）为代表的生物标志物已被证明对脑胶质瘤分子特征的分类和患者预后情况都有不可忽视的作用。

IDH在成人Ⅱ级和Ⅲ级弥漫性胶质瘤及继发性胶质母细胞瘤中突变频率较高。

IDH突变的浸润性星形细胞瘤和继发性胶质母细胞瘤具有TP53和ATRX 突变的特点。

少突胶质细胞瘤也伴随IDH突变并以1p/19q联合性缺失和CIC、FUBP1、Notch1、TERT启动子突变为特征。

胶质瘤的生物标志物有望成为临床诊断的新标准。

【总页数】6页(P93-98)【关键词】胶质瘤;生物标志物;IDH突变【作者】茆晨雪;周宏灏;刘昭前【作者单位】中南大学湘雅医院临床药理研究所;中南大学临床药理研究所湖南省遗传药理学重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R730【相关文献】1.弥漫性轴索损伤生物标志物的研究进展 [J], 朱士胜;张鹏2.脑胶质瘤精准治疗相关分子生物学标志物及信号通路的研究进展 [J], 李斌;朱海波;宋贵东;李储忠;张亚卓;赵澎3.弥漫性大B细胞淋巴瘤血清生物标志物的研究进展 [J], 张杰; 蒋依憬; 徐小红4.脑胶质瘤的循环生物标志物研究进展 [J], 张水仙;刘丹;李飞;胡荣;冯华5.胶质瘤相关循环生物标志物的研究进展 [J], 刘征;徐国政因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。