实验二 染色体组型分析
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染色体组型分析
D组13-15：具亚端部着丝粒的中等大小染色体（13 号染色体有随体，14号染色体短臂上有 一小 随体）； E组16-18：具中部（16号）、亚中部着丝粒的较小 染色体； F组19-20：具中部着丝粒的最小染色体； G组21-22：具亚端部着丝粒的最小染色体（21号染 色体上有随体，Y染色体与这些染色体 相似）。
五、作业
制作人类染色体组型图或制作棕色田 鼠组型图。
1.0<臂比值< 1.70；
(2)亚中部着丝粒染色体（SM）：
1.71<臂比值< 3.00；
(3)亚端部着丝粒染色体（ST）： 3.01 <臂比值< 7.00；
(4) 端部着丝粒染色体（T）：
7.01<臂比值< ∞。
5、染色体组长度=该物种单倍体全部染 色体长度（包括性染色体）之和。
6、着丝粒指数=
5、分组问题： （1）植物不分组 （2）动物以及人类染色体要分组： （3）分组原则： ①按染色体大小相当及着丝粒 位置相同进行分组排列； ②性染色体排在最后。
人类22个常染色体分为7组（A、B、C、 D 、 E 、 F 、 G ）， 7 组很易确定分开， X 染 大小相当于C组的、 Y染色体大小相当于G 组的染色体。 A 组 1-3 ：具中部着丝粒染色体（易区 别）； B 组 4-5 ：具亚中部着丝粒的大染色体 （难区别）； C组6-12：具亚中部着丝粒的中等大小 染色体；
（二）显微照相 1、胶卷：选取5-10个染色体分散 较好的细胞显微照相放大照片； 2、CDD照相 （三）组型分析
1、测量计算： （1）相对长度 =[单条染色体长度/染 色体组中 各染色体长度总和]×100% （2）绝对长度
（3）臂比=[长臂/短臂]
染色体组型分析实验报告
染色体组型分析实验报告
染色体组型分析是遗传相关性研究的基础，它可以用来
鉴定个体的表现型，进一步确定疾病的发病特点，以及进行群体种质传承的探索等。
本次实验我们通过使用常见的细胞分析技术，结合基因分析仪器，以传统和现代分析方法，来处理和分析样品，从而识别和研究染色体组型差异。
在实验过程中，我们先在实验培养室完成了细胞分析，
利用玻片技术染色，并运用点阵染色，观察染色体分布和特征。
接着，我们选取样品，进行分子染色体分析，以测定每一条染色体的坐标。
最后，运用改良的FISH技术，对样品进行测序，利用染色体包膜特有的染色序列，进行染色体组型分析，以获得有效的种群组型信息。
经过上述实验，我们验证了染色体组型分析实验的可行性，它为进一步确定染色体变异的模式提供了一条有效的途径。
本次实验在获取有效种群组型信息，确定个体表现型和群体种质传承等方面取得了良好的效果，为后期研究奠定了坚实的基础。
【遗传学实验】染色体组型分析
相对长度=
X100
染色体组内全部染色体总长度
臂比值=
长臂长度（q） 短臂长度（p）
请问如何准确地确定 染色体组内全部染色 体的总长度？
臂比值 1.0~1.7 1.7~3.0 3.0~7.0 7.0以上
3 配对：根据测量、计算的数据进行同 源染色体的配对。
4 排列和剪贴：将配对的染色体按由大 到小的顺序进行排列并编号。等长的染色体 短臂长的排在前面，特殊的染色体（如性染 色体）排在最后。让各对染色体的着丝粒排 在一条直线上，短臂在上，长臂在下。
染色体组型分析就是通过对染色体标本 和其照片进行测量、对比分析、配对、分组 、排列，对各染色体的形态进行分析。在细 胞遗传学、现代分类学、生物进化和遗传育 种学等研究中，是重要的研究手段。
得到良好的细胞分裂图像（人）
蚕豆的核型分析
实验材料：
洋葱、大麦、玉米、黑麦、蚕豆等。本 实验选用蚕豆（2n=12）。 实验用品：
染色体组型分析
实验目的：
1 学习并掌握植物染色体组型的方法；
2 了解染色体组型分析的意义。
实验原理：
各种生物染色体的数目、形态和结构都 是恒定的。染色体组型，也称为核型，指一 个个体或物种的特有的染色体构成，包括染 色体数目以及每一条染色体所特有的形态特 征（染色体的长度、着丝粒的位置、臂比值 、随体的有无、次级缢痕的数目及位置、异 染色质的分布等）。核型是物种最稳定的性 状和标志，通常在体细胞有丝分裂中期时进
用具：蚕豆有丝分裂中期照片（6x8cm） 、剪刀、镊子、铅笔、直尺、计算器、胶水 、实白验纸步等骤。：
1 测量：测量每条染色体的长臂长度和 短臂长度,得出总长度。每条染色体的着丝粒 应平分为二，计入两条臂长度之内。（要使 测量尽可能准确，应注意哪些问题？）。
染色体组型分析
一.实验目的
• 了解动物细胞培养的方法 • 掌握人体外周血淋巴细胞培养与染色 体标本制备 • 熟悉人类染色体的镜下检查和组型分 析方法
二.实验原理
一、外周血培养
所谓外周血培养即是将外周血接种在适当的培养物中 加入适量的秋水仙素，使纺锤体微管解聚，这样细胞停留 在中期，可以获得大量的分裂细胞。 用低渗盐溶液（一般是0.075mol/L的KCl）处理，使 其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去，最后 以气干法制片，可获得较好的染色体装片。 人类外周血细胞本来是终末分化细胞，一般没有 分裂能力，但经PHA（植物血球凝集素）或ConA 等药物刺激后，转变成可分裂的转化细胞。
•
（1）染色体不是很清晰的原因：
• ①渗透，染色效果不好，
•
②张相机的像素不清晰
（2）镜检分析：
• 现象： 染色体视野较少难找
• • （1） 由于不仅是细胞的分裂相少， （2） 而且整体的细胞数就少，
• 原因
• 可能是由于在先倒培养基时没有 先吹打后在倒， • 可能有一部分贴在培养瓶上，导 致细胞损失。
二、组型分析
组别 A B C D E F G 染色体编号 大小 1～3 最大 4、5 大 6～12+X 中 13～15 中 16～18 较小 19、20 小 21、22 +Y， 最小 着丝粒位置 中、亚中 亚中 亚中 近端 中、亚中 中 近端
三.实验材料及用具
• • • • • • • • 培养基：RPMI1640，含双抗和小牛血清 肝素 PHA 秋水仙素：50ug/ml 低渗溶液：0.075mol/L氯化钾 固定液：甲醇：冰乙酸（3：1） Giemsa染液 磷酸缓冲液（pH6.8）
五.实验结果
（1）镜检结果
• 了解动物细胞培养的方法 • 掌握人体外周血淋巴细胞培养与染色 体标本制备 • 熟悉人类染色体的镜下检查和组型分 析方法
二.实验原理
一、外周血培养
所谓外周血培养即是将外周血接种在适当的培养物中 加入适量的秋水仙素，使纺锤体微管解聚，这样细胞停留 在中期，可以获得大量的分裂细胞。 用低渗盐溶液（一般是0.075mol/L的KCl）处理，使 其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去，最后 以气干法制片，可获得较好的染色体装片。 人类外周血细胞本来是终末分化细胞，一般没有 分裂能力，但经PHA（植物血球凝集素）或ConA 等药物刺激后，转变成可分裂的转化细胞。
•
（1）染色体不是很清晰的原因：
• ①渗透，染色效果不好，
•
②张相机的像素不清晰
（2）镜检分析：
• 现象： 染色体视野较少难找
• • （1） 由于不仅是细胞的分裂相少， （2） 而且整体的细胞数就少，
• 原因
• 可能是由于在先倒培养基时没有 先吹打后在倒， • 可能有一部分贴在培养瓶上，导 致细胞损失。
二、组型分析
组别 A B C D E F G 染色体编号 大小 1～3 最大 4、5 大 6～12+X 中 13～15 中 16～18 较小 19、20 小 21、22 +Y， 最小 着丝粒位置 中、亚中 亚中 亚中 近端 中、亚中 中 近端
三.实验材料及用具
• • • • • • • • 培养基：RPMI1640，含双抗和小牛血清 肝素 PHA 秋水仙素：50ug/ml 低渗溶液：0.075mol/L氯化钾 固定液：甲醇：冰乙酸（3：1） Giemsa染液 磷酸缓冲液（pH6.8）
五.实验结果
（1）镜检结果
人类染色体组型分析
对于你
你知道染色体组型分析吗？ 你了解哪些相关内容？
6
1 实验目的：
掌握染色体组型分析的各种数据指标 学习染色体组型分析的基本方法
7
2 实验原理
核型（Karyotype） ：又称染色体组型，是指将动物、 植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等） 的体细胞内的整套染色体，按照一定的顺序排列起来的图 像。
绝对长度通常在放大的照片或图象上以微米 （μm）进行测量，然后按下式换算：
染色体绝对长度 = 放大的染色体长度（μm） × 1000 / 放大倍数
染色体相对长度 =（染色体长度/染色体组总 长度）× 100%
15
染色体长度：
绝对长度不大稳定，这是因为预处理条件和染色体的缩短 程度难以完全相同，即使同一个体的不同细胞的染色体，缩 短程度也常常不同。因此，绝对长度只有在染色体大小差异 明显的种或属间的比较才有价值。
核型模式图：指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特 征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。代 表了一个物种的染色体组型特征
8
2 实验原理
染色体组型分析：
是鉴别染色体进行配对分类的基木技术，是在 对染色体进行测量计算的基础上, 进行分组、 排队、配对, 并进行形态分析的过程。
9
3 染色体核型分析的意义：
23
6 实验用品
毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 人染色体放大照片
24
7 实验步骤
(1) 计数，沿边缘剪下染色体，编号 (2) 初步目测配对，分组 (3) 测量长度，计算相对长度、着丝粒指数、
臂比，相同的染色体间配对 (4) 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上，染色
体短臂向上，每一组下面画一横线，在两端 注明起止号，并在横线下的中部写明A-G组 号，染色体从大到小编为1-22号，性染色 体单独列为一组
你知道染色体组型分析吗？ 你了解哪些相关内容？
6
1 实验目的：
掌握染色体组型分析的各种数据指标 学习染色体组型分析的基本方法
7
2 实验原理
核型（Karyotype） ：又称染色体组型，是指将动物、 植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等） 的体细胞内的整套染色体，按照一定的顺序排列起来的图 像。
绝对长度通常在放大的照片或图象上以微米 （μm）进行测量，然后按下式换算：
染色体绝对长度 = 放大的染色体长度（μm） × 1000 / 放大倍数
染色体相对长度 =（染色体长度/染色体组总 长度）× 100%
15
染色体长度：
绝对长度不大稳定，这是因为预处理条件和染色体的缩短 程度难以完全相同，即使同一个体的不同细胞的染色体，缩 短程度也常常不同。因此，绝对长度只有在染色体大小差异 明显的种或属间的比较才有价值。
核型模式图：指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特 征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。代 表了一个物种的染色体组型特征
8
2 实验原理
染色体组型分析：
是鉴别染色体进行配对分类的基木技术，是在 对染色体进行测量计算的基础上, 进行分组、 排队、配对, 并进行形态分析的过程。
9
3 染色体核型分析的意义：
23
6 实验用品
毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 人染色体放大照片
24
7 实验步骤
(1) 计数，沿边缘剪下染色体，编号 (2) 初步目测配对，分组 (3) 测量长度，计算相对长度、着丝粒指数、
臂比，相同的染色体间配对 (4) 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上，染色
体短臂向上，每一组下面画一横线，在两端 注明起止号，并在横线下的中部写明A-G组 号，染色体从大到小编为1-22号，性染色 体单独列为一组
染色体组型(核型)分析
al
v
三、实验材料与用品
Do cuC ww o w.p m
dfw P iza D rd. F com Tr i
人染色体放大照片 v 毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸
al
v确定染色体数目 v染色体形态特征
§
长度：绝对、相对 臂比=长臂/短臂 随体的有无
§ § §
着丝点指数=短臂/（长+短臂）
Do
cuC ww o w.p m
近端部着丝粒染色体(subterminal region) st 端部着丝粒染色体 (terminal region) 端部着丝粒染色体 (terminal point)
cuC ww o w.p m
近中部着丝粒染色体(submedian region) sm
Do
al
臂比值 1.00 1.01-1.70 1.71-3.00 3.01-7.00 7.01以上 ∞
相对长度=每条染色体的长度/全套染色体长度
dfw P iza D rd. F com Tr i
al
四、组型分析方法
着丝点位置
染色体种类
dfw P iza D rd. F com Tr i
简写 M m t T
根据着丝粒位置，将染色体分为以下六类： 正中部着丝粒染色体(median point) 中部着丝粒染色体 (median region)
中部着丝粒染色体 近中部着丝粒染色体
cuC ww o w.p m
Do
dfw P iza D rd. F com Tr i
al
近端部和端部 着丝粒染色体
细胞分裂后期染色体形态
四、组型分析方法
v
§ § § § §
着丝粒类型相同，相对长度相近的分一组 同一组的按染色体长短顺序配对排列
遗传学实验之——染色体组型分析
发展历史
1920年提出 三项技术促进：低渗处理 秋水仙素应用 植物凝激素应用 染色体分带技术：Q带、G带、C带、R 带、T带、N带等 FISH技术染 Nhomakorabea体的特征
数目 （2n=？） 长度 （绝对长度、 相对长度） 着丝粒位置 （M\SM\ST\T） 随体与次溢痕的数目、 大小和位置 带型分析
各类常用实验生物和人细胞DNA含量与染 色体数目
FISH的临床运用
白血病检测中常用的FISH探针有单一序 列探针, 着丝粒探针, 整条染色体探针, 常 用方法有单标记FISH, 双 标记FISH, 比 较基因组杂交(CGH), M-FISH 和RxFISH等.各种FISH探针及方法均在白血 病的诊断, 治疗监测, 预后估计和微小残 留病检测中起重要作用
FISH的临床运用
在细胞遗传学检查中，重复序列的探针 应用最多，它们是α卫星DNA、β卫星 DNA和经典卫星DNA探针。
– α卫星DNA探针主要检测人染色体的着丝粒。 – β卫星DNA位于顶端着丝粒染色体及染色体 的异染色质 周围。 – 经典卫星DNA有着AATGG短片段，位于染 色体1、9、15、16和Y染色体长臂异染色质 周围，后两处探针除了可用于染色体数目检 查外，还可用于上述部位精细改变的检查。
实验用品
毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 人染色体放大照片
染色体编号(人X染色体)
记述一特定带时，需 要写明4个内容：染 色体号，长短臂，区 的号序和带的号序。 这些内容按顺序写， 不用间隔或加标点。 如果某一带被再细分， 在原带号数后加一小 数点，编号原则仍按 从着丝粒往臂端序贯 编号。如1p31.2代表 一号染色体短臂3区1 带第2亚带
物 种
MS2 λ噬菌体 T4 枯草杆菌 大肠杆菌 啤酒酵母 果蝇 海胆 蛙 小鸡 小鼠 玉米 人
实验二人类染色体核型分析ppt课件
十号染色体
十号长臂三条带
亚中着丝粒染色体
长臂上有三条深染带，近侧的 第一条深带最深
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
十一号染色体
采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
实验目的
❖熟悉人类染色体G显带的带型特征 ❖初步掌握G显带核型分析的基本方法
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净 无污物
五黑腰
五号染色体
亚中着丝粒染色体 长臂上有四条深染带，其中 间三条深带常集中在一起
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染色体观察及核型分析
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采 用 PP管 及 配 件： 根据给 水设计 图配置 好PP管 及配件 ，用管 件在管 材垂直 角切断 管材， 边剪边 旋转， 以保证 切口面 的圆度 ，保持 熔接部 位干净炮五黑腰。 六号短臂小白脸，七上八下九苗条。 十号长臂三条带，十一低来十二高。 十三十四十五号，三个一样一二一。 十六长臂近点深，十七远端带脚镣。 十八人小肚皮大，十九中间一点腰。 二十头重脚底轻，二十一象葫芦瓢。 二十二一点Y黑腰，X pq 一肩挑。
实验二 植物细胞染色体组型分析
染 色 体 编 号
相对 长度 （%） 短臂 长臂 全长 臂比 随体 类型
1 2 3 4 5 6 . . . n
2、经测量分析，可将宽叶吊兰根尖的染色体进行配对。
3、绘制吊兰核型模式图
4、根据吊兰的染色体参数、核型及核型模式图分别见上表、 配对图和模式图。吊兰的14对染色体中，各种类型的染色 体分别有多少对，写出核型公式是 K(2n)=2x=28=？M + ？m + ？sm + ？st + ？t + ?T。
四、实验程序
1、将打印好的图片上的每条染色体进行随机 编号。 2、测量每一条染色体的长臂、短臂长度 （mm ，精确到0.01 ），自行制表。随体 长度不计入染色体长度，但需标注带随体 染色体的编号。 3、计算每一条染色体相对长度及臂比值。 4、根据测量数据，即染色体相对长度、臂比 值、次缢痕的有无及位置、随体的形状和 大小等进行同源染色体配对。
三、仪器与材料
材料：植物细胞染色体的照 片或永久片（可由实验一 所得），本实验是玉米根 尖染色体照片。
器具：显微镜、测微尺、毫 米尺、镊子、剪刀、绘图 纸、圆规、铅笔等。
四、实验说明
染色体组型分析通常包括如下指标：
1、染色体的数目：一般以体细胞染色体数目为准， 至少统计5-10个个体、30个以上细胞的染色体数 目为宜，在个体内出现不同数目时，则应如实记 录其变异幅度和各种数目的细胞数或百分比，而 以众数大于85%者为该种类的染色体数目。
3、相对长度：均以百分数表示，即：
每条染色体的长度 相对长度= 100 % 单倍染色体长度
精确到0.01
4、染色体长度比：这是指核型中最长染色体与最 短染色体的比值，即：
染色体长度比=
相对 长度 （%） 短臂 长臂 全长 臂比 随体 类型
1 2 3 4 5 6 . . . n
2、经测量分析，可将宽叶吊兰根尖的染色体进行配对。
3、绘制吊兰核型模式图
4、根据吊兰的染色体参数、核型及核型模式图分别见上表、 配对图和模式图。吊兰的14对染色体中，各种类型的染色 体分别有多少对，写出核型公式是 K(2n)=2x=28=？M + ？m + ？sm + ？st + ？t + ?T。
四、实验程序
1、将打印好的图片上的每条染色体进行随机 编号。 2、测量每一条染色体的长臂、短臂长度 （mm ，精确到0.01 ），自行制表。随体 长度不计入染色体长度，但需标注带随体 染色体的编号。 3、计算每一条染色体相对长度及臂比值。 4、根据测量数据，即染色体相对长度、臂比 值、次缢痕的有无及位置、随体的形状和 大小等进行同源染色体配对。
三、仪器与材料
材料：植物细胞染色体的照 片或永久片（可由实验一 所得），本实验是玉米根 尖染色体照片。
器具：显微镜、测微尺、毫 米尺、镊子、剪刀、绘图 纸、圆规、铅笔等。
四、实验说明
染色体组型分析通常包括如下指标：
1、染色体的数目：一般以体细胞染色体数目为准， 至少统计5-10个个体、30个以上细胞的染色体数 目为宜，在个体内出现不同数目时，则应如实记 录其变异幅度和各种数目的细胞数或百分比，而 以众数大于85%者为该种类的染色体数目。
3、相对长度：均以百分数表示，即：
每条染色体的长度 相对长度= 100 % 单倍染色体长度
精确到0.01
4、染色体长度比：这是指核型中最长染色体与最 短染色体的比值，即：
染色体长度比=
实验二植物染色体核型分析
着色区段分析。染色体经低温、KCl和酶解，HCl或HCl与醋酸混合液体等处理后制片，能使染色体出现异固缩反应，使异染色质区段着色可见。在同源染色体之间着色区段基本相同，而在非同源染色体之间则有差别。因此用着色区段可以帮助识别染色体，作为分析染色体组型的一种方法。
定量细胞化学方法。即根据细胞核、染色体组或每一个染色体的DNA含量以及其他化学特性去鉴别染色体。如DNA含量的差别，一般能反映染色体大小的差异，因此可作为组型分析的内容。染色体组型分析有助于探明染色体组的演化和生物种属间的亲缘关系，对于遗传研究与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要。
三、实验材料 ：
要求染色体分散良好，无重叠或重叠很少，着丝粒、随体等形态清晰可辨。
小麦、人等有丝分裂中期标本和显微摄影所得放大照片。
பைடு நூலகம்
仪器用具：显微镜（附摄影装置）、冰箱、恒温水浴锅、135胶卷、载玻片、盖玻片、剪刀、浆糊、镊子、白纸、解剖针、刀片及毫米尺。
01
药品试剂：无水酒精、70%酒精、冰乙酸、碱性品红、苯酚、甲醛、山梨醇、对二氯苯、1N盐酸、0.05%秋水仙碱。
实验步骤：
染色体照片的测量和对比：
剪贴：将上述染色体按顺序粘贴在实验报告上，粘贴时，应使着丝点处于同一水平线上，一律短臂在上，长臂在下，构成核型图。
要求：染色体从大到小，短臂向上，长臂向下，各染色体着丝粒排在同一直线上。有特殊标记的染色体（如含有随体的）及性染色体可单独排列。
编号 1 2 3 4 5 6 ……
五、实验步骤： 染色体照片的测量和对比： 1．测量：在已放大的照片上对染色体进行测量和描述，记录染色体形态测量数据，如下： 臂率=长臂/短臂 着丝粒指数=短臂/该染色体长度 总染色体长度=该细胞单倍体全部染色体长度（包括性染色体）之和 相对长度=每一个染色体的长度/总长度 2.配对：根据测量数据，即染色体相对长度、臂率、着丝粒指数、次溢痕的有无及位置、随体的性状和大小等进行同源染色体配对。 3.染色体排列：染色体对从大到小，短臂向上、长臂向下，各染色体的着丝粒排在同一条直线上。有特殊标记的染色体（如含有随体的）及性染色体的单独排列。
定量细胞化学方法。即根据细胞核、染色体组或每一个染色体的DNA含量以及其他化学特性去鉴别染色体。如DNA含量的差别，一般能反映染色体大小的差异，因此可作为组型分析的内容。染色体组型分析有助于探明染色体组的演化和生物种属间的亲缘关系，对于遗传研究与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要。
三、实验材料 ：
要求染色体分散良好，无重叠或重叠很少，着丝粒、随体等形态清晰可辨。
小麦、人等有丝分裂中期标本和显微摄影所得放大照片。
பைடு நூலகம்
仪器用具：显微镜（附摄影装置）、冰箱、恒温水浴锅、135胶卷、载玻片、盖玻片、剪刀、浆糊、镊子、白纸、解剖针、刀片及毫米尺。
01
药品试剂：无水酒精、70%酒精、冰乙酸、碱性品红、苯酚、甲醛、山梨醇、对二氯苯、1N盐酸、0.05%秋水仙碱。
实验步骤：
染色体照片的测量和对比：
剪贴：将上述染色体按顺序粘贴在实验报告上，粘贴时，应使着丝点处于同一水平线上，一律短臂在上，长臂在下，构成核型图。
要求：染色体从大到小，短臂向上，长臂向下，各染色体着丝粒排在同一直线上。有特殊标记的染色体（如含有随体的）及性染色体可单独排列。
编号 1 2 3 4 5 6 ……
五、实验步骤： 染色体照片的测量和对比： 1．测量：在已放大的照片上对染色体进行测量和描述，记录染色体形态测量数据，如下： 臂率=长臂/短臂 着丝粒指数=短臂/该染色体长度 总染色体长度=该细胞单倍体全部染色体长度（包括性染色体）之和 相对长度=每一个染色体的长度/总长度 2.配对：根据测量数据，即染色体相对长度、臂率、着丝粒指数、次溢痕的有无及位置、随体的性状和大小等进行同源染色体配对。 3.染色体排列：染色体对从大到小，短臂向上、长臂向下，各染色体的着丝粒排在同一条直线上。有特殊标记的染色体（如含有随体的）及性染色体的单独排列。
染色体组型分析名词解释
染色体组型分析名词解释染色体组型分析是一种用于分析基因遗传变异情况的方法，可以指导个体和家系临床检测、疾病分析和对病患进行治疗。
它是一种利用现代分子生物学技术，通过宏大的DNA序列组装技术，进行基因组结构研究、基因之间关系研究以及遗传学研究的一种分析方法。
染色体组型分析的核心步骤是将DNA识别为染色体组型。
其中的染色体组型可以通过扩增和测序技术进行鉴定，这是一种利用抗原-抗体反应原理奠定的免疫原理。
扩增技术包括聚合酶链反应（PCR）、环复制（RM）和可编程DNAR，可以根据指定的基因片断来扩增DNA序列。
DNA测序技术则可以根据基因序列全部或部分序列来进行测试，它的原理是：将检测的片断元素特异性加标，再利用平台上的特定识别条件，对DNA片断进行精确定位，最终根据检测到的DNA序列，确定染色体的组型。
染色体组型分析的结果可以转化为遗传图谱，来证明个体与家系中不同染色体位点型的情况。
染色体组型分析具有诊断精度高、可靠性强等优点，因此，已经广泛应用在早期遗传疾病筛查、分子病理学诊断以及肿瘤治疗方面，并得到了广泛应用。
例如，染色体组型分析可以用于早期遗传病筛查。
通过比较与疾病相关的染色体组型，可以发现最有可能的遗传性病因，从而促进早期诊断和治疗。
此外，染色体组型分析还可以用于分子病理学诊断。
可以根据病变部位的染色体组型，与正常组织的染色体组型进行比较，从而判断病变的病理学类型。
此外，染色体组型分析还可以用于肿瘤治疗，可以根据染色体组型，挑选出最佳的治疗方案，从而提高患者治疗效果。
染色体组型分析对于认识遗传学及肿瘤、先天性疾病以及疾病的病理发生机制有着重要的意义。
它有助于提高对基因的认识和遗传变异的认识，为肿瘤的恶性程度和治疗方法提供基础，为遗传预防和家系基因检测提供依据等。
总之，染色体组型分析是一种新兴的基因分析方法，其优势在于准确性高，并可以在短时间内得到结果，因此受到科学界和检测机构的重视与推广。
它可以为临床检测、肿瘤分析及疾病的治疗提供参考，为科学研究提供指导，是一种非常具有意义的分析方法。
遗传实验2_人类染色体组型分析
根据人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN），依据染色体的形
态、大小和着丝粒的位置，将染色体分为七组：
人类各染色体的特征
一秃二蛇三蝶飞， 四像炮竹五黑腰，六是一、四 小白脸，七上八下九苗条， 十号长臂近腰好， 十 一低来十二高，十三、十四、十五三个样，十六 中央次缢痕好，十七脚上带镣铐，十八人小白肚 皮， 十九中央一点红， 二十头重脚又轻，二十 一像个葫芦瓢，二十二一点y黑脚， X-pq竹节一 担挑， 1-9-16有次缢痕；13、14、15端部着丝点有随体， 21、22有随体。
识别单条染色体、基因定位
染色体着丝粒荧光
临床应用（染色体疾病、产前诊断）
21三体：先天愚型或Down综合症
三、人类染色体组型分析
人类染色体的特征和类型
染色体的形态、结构特征在细胞周期中， 以细胞分裂中期最为典型，称为中期染色体。
（1）中期染色体的特征：
次缢痕 主缢痕（着丝粒）
随体：位于染色体末端的球形染色 体节段，通过次缢痕区与染色体主 体部分相连。位）常规的形态分析。选用分裂旺盛细胞的有丝分
裂中期染色体，以测定各染色体的长度或相对长度 （％），着丝粒位置及两臂长的比例，鉴别随体及副 缢痕的有无作为分析的依据。 （2）带型分析。显带技术是通过特殊的染色方法使 染色体的不同区域着色，使染色体在光镜下呈现出明 暗相间的带纹。根据染色体的不同带型，可以更细致
这种过程称为染色体组型分析。 染色体组型分析有助于探明染色体组的演化和生物种属间的亲缘关
系，对于遗传研究与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要。
一、实验原理（一）
每一个中期染色体均由 两条染色单体构成，每一条 染色单体由一个DNA分子螺 旋而成。 两条染色单体互称为姐 妹染色单体。两条染色单体 通过一个着丝粒彼此连接。 着丝粒将染色体分为两臂， 长臂（q）和短臂（p）。 如何获得中期染色体?
实验02 植物染色体组型分析
实验二植物染色体组型分析一、实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。
2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化，了解有丝分裂全过程。
3.观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的方法。
二、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。
每一细胞内特定的染色体组成叫染色体组型。
染色体组型分析就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各种染色体的形态特征，如对染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体有无等观测，从而描述和阐明该生物的染色体组成，为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。
染色体组型分析大都采用植物根尖等分生组织的有丝分裂中期细胞，染色体制片要求分裂相为染色体分散，互不重叠，能清楚显示着丝点位置。
然后通过显微摄影，测量放大照片上的每个染色体的长度和其它形态特征，依次配对排列，编号，并对各对染色体的形态特征作出描述。
三、实验材料1.材料：洋葱（Aillumcepa）的鳞茎，黑麦，蚕豆（Viciafaba）的种子，2.用具：载玻片，盖玻片，50ml烧杯，温度计，恒温水浴锅，试剂瓶，镊子，解剖针，吸水纸，剪刀，绘图，纸胶水等。
3.药品：Carnoy固定液，70％酒精，酸酒精，0.002M8-羟基喹啉，饱和对二氯苯水溶液，秋水仙素，1mol/HCl，石碳酸品红染色液。
四、方法与步骤（一）植物有丝分裂1、材料处理先将种子用0.1～0.2%升汞（HgCl2）消毒10分钟，清水洗净后，置于23-25℃下发根至0.5cm，再移入0.05-0.1%秋水仙素溶液，根尖朝下且浸在药液中，25℃下培养直至根尖膨大。
将洋葱，或黑麦，或蚕豆发根，待根长到1.5-2.0cm左右时备用；在分裂高峰期前3h，用0.002M8-羟基喹啉，或对二氯苯饱和水溶液，或0.02％秋水仙素溶液中，预处理3—4h；或放入冰箱(0—4℃)中预处理24h。
遗传学试验
染色体的排列原则：①染色体的大小（即 长度），②着丝粒的位置，③特殊标记，如 随体的有无。
〖材料和方法〗
1、材料及用具：人体染色体显微照 片，剪子、镊子、刻度尺、圆规。
2、方法：测量—计算相对长度及臂 比—染色体粗剪配对—排列—剪 贴—翻拍与绘图。
〖步骤〗
1、 染色体制片→显微照相→放大 2、 测量：染色体长度，粗剪 3、 计算：臂比、着丝粒指数、相对长度 4、 配对：根据形态特征 5、 排列：a）长度从大到小；b）臂剪贴：细剪，按顺序从大到小，短臂在上，
着丝粒于一直线（或染色体下端于一直线）， 贴图
7、 翻拍
〖作 业〗
1、 记录染色体的测量计算数据，制 备人体染色体组型分析（男性、女 性）图片。
2、 思考：为什么要用染色体的相对 长度表示各染色体的长度 ？
染色体组 型分析是 对染色体 组中处于 有丝分裂 中期时染 色体的数 目、大小、 形态、着 丝点的位 置以及次 缢痕、随 体的有无 等形态特 征作一描 述。
遗传学试验
一、教学基本要求
1、 掌握染色体组型分析的一般步 骤和方法。
2、 能够绘制出染色体的模式图。
二、教学内容
〖目的和要求〗 通过这一实验，要求掌握染色体组 型分析的一般步骤和方法，并能够 绘制出染色体的模式图。
〖实验原理〗
染色体组型分析是对染色体组中处于有丝 分裂中期时染色体的数目、大小、形态、着 丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态 特征作一描述。将一个细胞内的染色体按照 一定的顺序排列起来所构成的图像就称为该 细胞的核型。
〖材料和方法〗
1、材料及用具：人体染色体显微照 片，剪子、镊子、刻度尺、圆规。
2、方法：测量—计算相对长度及臂 比—染色体粗剪配对—排列—剪 贴—翻拍与绘图。
〖步骤〗
1、 染色体制片→显微照相→放大 2、 测量：染色体长度，粗剪 3、 计算：臂比、着丝粒指数、相对长度 4、 配对：根据形态特征 5、 排列：a）长度从大到小；b）臂剪贴：细剪，按顺序从大到小，短臂在上，
着丝粒于一直线（或染色体下端于一直线）， 贴图
7、 翻拍
〖作 业〗
1、 记录染色体的测量计算数据，制 备人体染色体组型分析（男性、女 性）图片。
2、 思考：为什么要用染色体的相对 长度表示各染色体的长度 ？
染色体组 型分析是 对染色体 组中处于 有丝分裂 中期时染 色体的数 目、大小、 形态、着 丝点的位 置以及次 缢痕、随 体的有无 等形态特 征作一描 述。
遗传学试验
一、教学基本要求
1、 掌握染色体组型分析的一般步 骤和方法。
2、 能够绘制出染色体的模式图。
二、教学内容
〖目的和要求〗 通过这一实验，要求掌握染色体组 型分析的一般步骤和方法，并能够 绘制出染色体的模式图。
〖实验原理〗
染色体组型分析是对染色体组中处于有丝 分裂中期时染色体的数目、大小、形态、着 丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态 特征作一描述。将一个细胞内的染色体按照 一定的顺序排列起来所构成的图像就称为该 细胞的核型。
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FISH的临床运用
白血病检测中常用的FISH探针有单一序 列探针, 着丝粒探针, 整条染色体探针, 常 用方法有单标记FISH, 双 标记FISH, 比 较基因组杂交(CGH), M-FISH 和RxFISH等.各种FISH探针及方法均在白血 病的诊断, 治疗监测, 预后估计和微小残 留病检测中起重要作用
物 种
MS2 λ噬菌体 T4 枯草杆菌 大肠杆菌 啤酒酵母 果蝇 海胆 蛙 小鸡 小鼠 玉米 人
染色体数目
1 1 1 1 1 34 8 52 26 78 40 20 46
DNA含量（bp）
3×103 5×104 5×105 2×106 4.2×106 1.4×107 1.4×108 1.6×109 4.5×109 2.1×109 4.7×109 3×109 3.2×109
组型分析实验方法
染色体数目确定 染色体形态特征：
长度：绝对、相对 相对长度=每条染色体的长度/全套染色体长度 臂比=长臂/短臂 着丝点指数=短臂/（长+短臂） 随体的有无
分组排队原则
着丝粒类型相同，相对长度相近的分一组 同一组的按染色体长短顺序配对排列 各指数相同的染色体配为一对 可根据随体的有无进行配对 将染色体按长 短排队，短臂向上
探针标记
在已知探针DNA结构及序列情况下可采 用PCR或RNA逆转录法标探针。通常用 Biotin标记的探针应大于100bp，较小的 探针可采用PCR技术来标记。 近年来，VYSIS公司成功的生 产了大片 段的DNA探针（100─400kb）。由于探针 较长，故可将荧光物质直接标记在核苷 酸上，这不仅使杂交过程进一步简化面 且杂交信号增强。
多色荧光原位杂交（M-FISH）
M-FISH相当于在 一次杂交中给每一条染色体 都涂上了不同的颜色, 因而很容易就可看到多 条染色体间的复杂易位情况和确定标志染 色 体的来源. M-FISH是1996年才建立的一种新技术。使用5 种荧光染料按比例标记探针，杂交后形成24 条染色体上24种特异的荧光色彩以供核型分 析。它为人们提供了既丰富又完善的细胞遗 传学信息，包括确定标记染色体的来源、检 测微小的染色体易位和检测复杂的染色体易 位。
发展历史
1920年提出 三项技术促进：低渗处理 秋水仙素应用 植物凝激素应用 染色体分带技术：Q带、G带、C带、R 带、T带、N带等 FISH技术
染色体的特征
数目 （2n=？） 长度 （绝对长度、 相对长度） 着丝粒位置 （M\SM\ST\T） 随体与次溢痕的数目、 大小和位置 带型分析
各类常用实验生物和人细胞DNA含量与染 色体数目
染色体着丝粒荧光
染色体端粒荧光
多色信号采集
常规的荧光显微镜的荧光显微镜的照像， 彩色胶片不易多次曝光，限制了这种联 合标记探针的应用，使用CCD照像系统， 先分别多次摄取灰色的影像关储存在计 算机内，而后冠以人为的颜色，运用软 件系统融合各次得到的影像，最终形成 一个复合的多颜色的图像。
FISH和G显带技术结合
FISH具有其不可比拟的优点：
1.操作简便，探针标记后稳定，一次标记 后可使用二年。 2.方法敏感，能迅速得到结果。 3.在同一标本上，可同时几种不同探针。 4.不仅可用于分裂细胞染色体数量或结构 变化的研究，而且还可用于静止期细胞 的染色体数量及基因改变的研究。
FISH的技术特点 的技术特点： 的技术特点
FISH的基本原理
很简单, 就是标记了荧光的单链DNA(探 针)和与其互补的DNA(玻片上的标本)退 火杂交, 通过观察荧光信号在染色体上的 位置来反映相应基因的情况.
荧光原位杂交（FISH）
FISH技术是常规染色体分析的辅助手段。 它是用荧光素标记特异探针，与染色体 做杂交后，根据特异的荧光信号来判断 结果。 它可用于标记染色体的识别、特异融合 基因的检测、新基因定位，用全染色体 涂抹探针识别复杂的染色体结构异常。
对已做过G显带的染色体片子用75%的 乙醇或甲醇褪色后，可使FISH更清晰的 辨认各条染色体及染色体结构异常（包 括某些复杂的易位，插入，倒位等）,不 仅可以用新近G带外理过的片子，而且还 可用陈旧的G带片子。因此，FISH技术 可成功的帮助细胞遗传学家做出回顾性 分析。
FISH技术和其他技术的结合
染色体制片技术
骨髓细胞和外周血细胞制片技术
– 直接制片法：直接取骨髓细胞经空气干燥法 制片 – 外周血淋巴细胞制片：
• 快速法 先注射秋水仙素-低渗-固定-干燥 • 培养法 取血加植物凝血素培养
植物细胞染色体制片技术
前处理-酶解去壁-低渗-固定-解离-染色-压片
实验用品
毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 人染色体放大照片
染色体编号(人X染色体)
记述一特定带时，需 要写明4个内容：染 色体号，长短臂，区 的号序和带的号序。 这些内容按顺序写， 不用间隔或加标点。 如果某一带被再细分， 在原带号数后加一小 数点，编号原则仍按 从着丝粒往臂端序贯 编号。如1p31.2代表 一号染色体短臂3区1 带第2亚带
FISH的临床运用
在细胞遗传学检查中，重复序列的探针 应用最多，它们是α卫星DNA、β卫星 DNA和经典卫星DNA探针。
– α卫星DNA探针主要检测人染色体的着丝粒。 – β卫星DNA位于顶端着丝粒染色体及染色体 的异染色质 周围。 – 经典卫星DNA有着AATGG短片段，位于染 色体1、9、15、16和Y染色体长臂异染色质 周围，后两处探针除了可用于染色体数目检 查外，还可用于上述部位精细改变的检查。
比较基因组杂交（CGH）
CGH不需要制备患者的染色体标本, 只需采用 肿瘤患者的基因组DNA和正常人的基因组DNA 作为探针，与正常人的中期染色体分裂相进行 杂交。比较两种探针所标的荧光信号的强度比 率来判断肿瘤患者的DNA是否存在缺失、增加 或复制。 因而CGH最适合于检测实体瘤, 淋巴 瘤等不易得到高质量染色体标本的疾病. CGH另一无法替代的优点是, 它可在一次杂交 中检测整个基因遗传 物质的增加或减少, 但精 度有限, 对微小的扩增或缺失检测不出, 仅适用 于对整个基因组进行筛查. CGH也无法发 现平 衡染色体易位.
放射性同位素原位杂交技术
原有的放射性同位素原位杂交技术存在 着较多缺点，诸如每次检验需重新标记 、 已标记的探针表现出明显的不稳定性 、 需要较长时间的曝光时间和对环境的污 染等。在观察结果时，需要较多的分裂 相进行统计学分析。此外，由于放射性 银粒和染色体聚集的不同平面，可能引 起计数上的误差等。
FISH技术和RFLP结合，可以精确地描 述原属于染色本长短臂等结构改变和染 色体核形或复杂片段的性质。 FISH和细胞免疫化学技术结合，可以同 FISH 时用多种颜色反应不同的核苷酸链和蛋 白质，这样可以在单个细胞内同时找到 基因的位点。转录和翻译和产物，有助 了解核苷酸结构功能以及表达产物之间 关系的研究。
实验步骤
1. 2. 3. 4.
计数，沿边缘剪下染色体，编号 初步目测配对，分组 测量长度，计算相对长度、着丝粒指数、 臂比，相同的染色体间配对 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上，每一 组下面画一横线，在两端注明起止号，并在 横线下的中部写明A-G组号，染色体从大到 小编为1-22号，性染色体单独列为一组
核型描述
首先列出染色体总数，然后是性染色体组成， 接着列出异常的染色体数目或形态。下列统一 的命名符号：
– – – – – – – – – A-G 染色体组的名称 1-22 染色体编号 X,Y 性染色体 del 缺失 der 结构重排的染色体 dup 重复 inv 倒位 t 易位 +/在染色体符号前表示染色体增加或减少，在 染色体符号后表示染色体多出或缺少一部分
遗传学实验之—— 遗传学实验之 染色体组型分析
厦门大学生命科学学院
实验目的：
掌握染色体组型分析的各种数据指标 学习染色体组型分析的基本方法
实验原理
定义：染色体组型又称核型，是指将动 物、植物、真菌等的某一个体或某一分 类群（亚种、种、属等）的体细胞内的 整套染色体，按它们相对恒定的特征排 列起来的图像。 核型模式图是指将一个染色体组的全部 染色体逐个按其特征绘制下来，再按长 短、形态等特征排列起来的图像。
染 色 体 超 螺 旋
染 色 体 的 大 小
灯刷染色体（光镜观察）
染色体观察及核型分析
应用意义
染色体组型分析——染色体水平上的表型 可确定物种的特征，确定种属亲缘关系 分析生物物种的变异和进化过程 识别单条染色体、基因定位 临床应用（染色体疾病、产前诊断）
人类23对染色体 人类 对染色体
FISH选用的标本可以是分裂期细胞染色 体也可以是间期细胞。间期细胞可以是 冰冻切片，也可以是细胞滴片或印片。 生物素（Biotin）地高辛（digoxigenin ）, dinitrophenyl(DNP)，aminoacetyl fluorene(AAF)均可用于探针标记。
直接标记和间接标记
用生物素或地高辛标记称为间接标记, 杂交后 需要通过免疫荧光抗体检测方能看到荧光信号, 因而 步骤较多, 操作麻烦, 其优点是在信号较 弱或较小时可经抗原抗体反应扩大 直接用荧光素标记DNA的方法称为直接标记. 由于直接标记的探针杂交后可马上观察到荧光 信号, 省去了烦琐的免疫荧光反应, 不再需要购 买荧光抗 体, 也由于近年来荧光素的亮度和抗 淬灭性的不断改进和提高, 直接标记的荧光探 针越来越成为首选, 并采用多种不同颜色的荧 光, 方便在同一标本上同时检测多种异常. 其荧 光强度 和信号大小都易于在普通荧光显微镜下 观察, 使FISH过程变得简便而易于操作.
应用实例
常规的染色体核型分析已广泛用于各类急、慢性白血病 患者的骨髓染色体检查。如M3型的t（15；17）、M2b 型的t（8；21）、CML和部分ALL的Ph染色体等。 FISH技术已成功地用于t（15；17），t (8；21) 和Ph染 色体等的检测，并为人类基因组实验室发现的新基因进 行了定位。利用染色体涂抹技术，结合常规核型分析和 CGH技术，确诊了多例复杂的染色体异位。已用CGH技 术，分别对高二倍体ALL的患者和CML患者进行了研究。 CGH技术在实体瘤的DNA研究中有其独特的优势。 Rx-FISH和M-FISH都是目前细胞遗传学中最先进的研 究手段。对于肿瘤性疾病包括白血病和实体瘤中极其复 杂的染色体异常的检测有着不可替代的作用。