2-2-1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
动物细胞特点 分化潜能变窄:随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄, 这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性:细胞核,它含 有保持物种遗传性所需的全套基因, 而且并没有因细胞分化而丢失基因, 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一 个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组 并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终 发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
9.回答下列有关动物细胞培养的问题: ⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目, 最好选用细胞分裂到 中 期的细胞用显微镜进行 观察。 ⑸在细胞培养过程中,通常在 冷冻 条件下保存 细胞,因为在这种条件下,细胞中 酶 的活性 降低,细胞的 新陈代谢 速率降低。 ⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发 生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织 当作 抗原 进行攻击。
动物克隆过程的实际是细胞核移植
思考题
1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核? 为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。
2、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞,为什么? 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型, 未发生突变
思考题
5、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程,找 出操作过程的不同点? 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞,而高 产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞; 多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞, 而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体 细胞。 6、讨论分析上述哪一种措施更科学?并说明 理由? 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、 活性比卵细胞高,用它作受体更容易成功 将供体细胞注入受体细胞,使克隆动物更像 供体动物,操作也方便
人教版选修三生物课件:2.2.1动物细胞培养和核移植
有机物:糖、氨基酸、促生长因子
(2)营养
动物血清、血浆:P补46充旁培栏养题液及中小没有知完识全搞清
楚的补成充分合成培养基中所缺乏的营养物质及激素等。
36.5±0.5℃
细胞代谢
7.2~7.4
培养液的PH7
5.应用: 连线表示动物细胞培养的应用及实例
可根据变异细胞占细胞总数的比 例来判断毒性的大小。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动 物进行了100%的复制吗?为什么?
不是。克隆动物的DNA绝大部分来自供体细胞核,但还有少 量DNA(如线粒体DNA)来自受体卵母细胞的细胞质。此外, 生物的性状还受环境的影响。
17Biblioteka 思考题1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程,找出操 理由:______________________________ 作过程的不同点? 胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性较容易。
5胚)体胎细细胞胞是核分移化使植程技度细术低得,胞到恢的复克从其隆全牛瓶能从性生壁较殖容胰方上易式。蛋上脱看白属落于酶下来,便于分装后继续培养。
2、克隆动物遗传物质的来源?
10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。
归纳:克隆动物的基因型、性别、主要性状、染色体组成均与供核个体相同。
10~50 5)体细胞核移植技术得到的克隆牛从生殖方式上看属于
2.相关概念: (1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_表__面__相__互__接__触__时, 细胞_停__止__分__裂__增__殖__的现象。 (3)原代培养:指动物组织消化后的_初__次__培__养__。 (4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现_接__触__抑__制__后,需要重新用 _胰__蛋__白__酶__等处理,然后分瓶继续培养,让细胞_继__续__增__殖__的培 养过程。
动物细胞培养和核移植技术
吗?为什么?受体内
妊娠、分娩 ◆遗传物质 基本相同
体细体胞细核胞移核植移的植原的理过:程动
物细胞核具有全能性 受精
供体细胞 (供核)
细胞
体细胞
卵
培养
注入
细胞 重组
卵巢卵母细 胞(MⅡ中期:
供质)
去
去核卵 融合 细胞
2.原理:动物细胞核具有全能性
胚胎细胞分化程 度低,恢复其全 能性相对容易
动物体细胞分化 程度高,恢复其 全能性十分困难
3.分类:胚胎细胞核移植、体细胞核移植
4.体细胞核移植的过程
供体:优质高产奶牛
◆为何取供体细 胞传代培养10代
以内的细胞?
10代以内的细胞 一般保持正常二 倍体的核型,未
发生突变。
治疗人类疾病,作为组织器官移植的供体
主要的优 点是?
不发生免疫 排斥反应
◆研究克隆动物和克隆细胞更了解 胚胎发育及细胞衰老过程;克隆动 物做疾病模型,更好追踪研究疾病
的发展过程和治疗疾病。
6.体细胞核移植技术存在的问题
(1)成功率仍然非常低,产下的活 克隆动物比率平均不到10%。
(2)绝大多数克隆动物还存在健康 问题,许多克隆动物表现出遗传和生 理缺陷,如体型过大,异常肥胖,发
因为在这个时候去核的话对 卵细胞损伤最小,距离很近,
便于去核。
◆为什么不是取供体 细胞核进行核移植操 作,而是直接将供体 细胞整个注入去核卵
母细胞中?
保证供核不被破坏, 使所得个体的性状
更符合供体。
◆激活 方法:
◆激活 目的:
◆促融方法: 电刺激
高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术学案新人教版选修3
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术[学习目标] 1.归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。
2.归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景。
方式一2003年,四川少年小林点燃鞭炮,导致面部、四肢被严重烧伤并感染。
为了挽救儿子的生命,小林的爸爸、妈妈向医生恳求“割皮救儿”,烧伤整形科主任魏平最终同意进行这场罕见的亲体皮肤移植手术。
为了全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染的创面,医生把取自父子俩的皮肤全部剪成指甲盖大小的皮块,儿子和爸爸的皮肤相隔相嵌,估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活半年甚至更长时间,这就给儿子自身皮肤的生长带来了生机,孩子的痊愈指日可待。
思考:1.小林在皮肤烧伤之后,很容易得病,为什么?2.选取植皮时,理论上选择谁的皮肤最好?为什么?3.自身的健康皮肤是有限的,能不能通过其他途径获得自身的皮肤?方式二古代神话里孙悟空用自己的汗毛变成无数个小孙悟空的离奇故事,表达了人类对复制自身的幻想。
1978年,美国科幻小说家罗维克(D.Rorvick)写了一本名叫《克隆人》(The Cloning of a man)的书,内容是一位富商将自己的体细胞核移植到一枚去核卵中,然后将其在体外卵裂成的胚胎移植到母体子宫中,经过足月的怀孕,最后生下了一个健康的男婴,这个男婴就是一个克隆人。
现在,克隆人已经不是科幻小说里的梦想,而是呼之欲出的现实。
由于克隆人可能带来复杂的后果,一些生物技术发达的国家,现在大都对此采取明令禁止或者严加限制的态度。
克隆人,真的如潘多拉盒子里的魔鬼一样可怕吗?我们应该怎样正确看待克隆技术呢?一、动物细胞工程和动物细胞的培养1.动物细胞工程2.动物细胞培养 (1)概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
(2)过程动物组织块或器官――――――――――→剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理单个细胞――→加培养液细胞悬液――→初次培养原代培养―→传代培养。
生物:2.2.1《动物细胞培养和核移植技术》教案(2)(新人教版选修3)
动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.
动物细胞的培养过程
见书:
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
•思考讨论:在动物细胞培养过程中,为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理?
答:胰蛋白酶处理动物组织,可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解,获得单个细胞。
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基特有成分
蔗糖植物激素
葡萄糖动物血清
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无病毒植株
获得细胞或细胞分泌蛋白
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
核移植技术
1.克隆羊培育过程
胚胎移植技术
2.体细胞核移植技术的应用前景
3.体细胞核移植技术存在的问题
课后笔记:有了第一节的基础,学生对本节内容易于理解,因此,在教学中我采用讲授、自学、讨论等相结合的教学方法。
学生在比较中学习知识,加深对知识的理解
学习这部分内容
可先让学生列举所知道的克隆动物
课堂巩固
学案与测评的反馈练习
作业
学案与测评练习
板书设计:动物细胞培养和核移植技术
一、动物细胞培养
1.发展历史:
2、动物细胞培养的应用和概念:
3.动物细胞培养的条件:
4.动物细胞培养技术的应用:
5.植物组织培养和动物细胞培养的比较
细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。
2.2.1 动物体细胞核移植技术
思考与讨论
③. 你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物, 是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?
不是,克隆动物的线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。
此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的一些 行为、习性的形成与所处环境有很大关系,核供体动 物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同, 其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同, 从这一角度看,克隆动物不会是核供体动物100%的复制。
◆此实验应用到的技术: 动物细胞培养、动物体细胞核移 植、胚胎移植
电脉冲刺激
重组胚胎
胚胎移植
代孕母体 供体奶牛遗 传基础相同 的牛
思考与讨论
①. 在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须 先去掉受体卵母细胞的核? 为了使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价 值的动物提供的体细胞。 ②. 用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞, 想一想,这是为什么? 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,能保证供体细 胞正常的遗传基础。
较植物组织培养基,动物细胞培养液的独特之处?
维持培养液的PH
①液体培养基
②成分中有动物血清等
想一想
为什么对动物细胞进行培养时要添加血清?
血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋 白质为白蛋白和球蛋白;氨基酸有多种,是细胞合成蛋 白质的基本成分,有些动物细胞不能合成,必须由培养 液提供;激素有胰岛素、生长激素等促进细胞的生长、 增殖、贴附,还有很多未知的促细胞生长因子等其他活 性物质。因此,细胞培养要保证细胞能顺利生长和繁殖, 一般要添加10%----20%的血清。
4.体细胞核移植技术存在的问题
出生率非常低<10% 克隆动物存在着健康问题 克隆动物的食品安全性问题存在争议
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
接触抑制 传代培养
原代培养 (primary culture)
• 定义:把第1代细胞的培养与传10代以内的细 胞培养统称为原代培养。 •过程:从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养(1—2天换一 次培养液) 细胞贴壁生长 长成单层细 胞
先用剪刀剪碎,后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处 理。
动物细胞培养过程 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细 胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗? 细胞间的物质主要是蛋白质(胶原纤维)。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6 时,胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适 宜环境pH为7.2~8.4。多数动物细胞培养的适宜 pH为7.2~7.4。
一.动物细胞培养
(一)概念
从动物机体中取出相关组织,将它们 分散成单个细胞,然后放在适宜的培养 基中,让这些细胞生长和增殖。
(二)、动物细胞培养过程 阅读“动物细胞培养过程”并思考: 1、动物细胞培养的技术实施的原理是什么? 特点 是什么? 2、为什么要对取出的动物组织进行处理,使细胞 分散? 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间 的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗? 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么? 5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织 做动物细胞培养材料? 6、简述动物细胞培养的操作过程。
原代培养与传代培养的区别
原代培养:
分装之前,10代以前பைடு நூலகம்
传代培养:
分装后继续培养,10代以后
细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存 活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的 改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传 物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制, 容易传代培养。
人教版高中生物选修三2.2.1《动物细胞培养和核移植技术》ppt精讲课件
(2)细胞增殖特点不同: ①原代培养:细胞分裂旺盛,一般表现为细胞贴壁生长和接触抑 制。 ②传代培养:传至10代~50代左右时,细胞增殖缓慢,甚至完全 停止,此时细胞普遍表现为衰老和凋亡特征,但也有少部分细胞 会发生突变,会朝着等同于癌细胞的方向发展。 3.结果:动物细胞培养只能获得大量细胞,不能得到生物个体。
生长和增殖 2.培养过程:
胰蛋白酶
细胞悬液
原代培养
3.相关概念:
(1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_____________时,
表面相互接触 细胞_____________的现象。
(3)原停代止培分养裂:指增动殖物组织消化后的_________。
异种移植
5.体细胞核移植技术存在的问题:
(1)成功率_非__常__低__。 (2)绝大多数克隆动物存在_________。
健康问题 (3)对克隆动物食品的_______问题存有争议。
安全性
1.判断正误 (1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性。( )
× 【分析】动物细胞培养只能获得大量细胞,不能得到生物个体, 不能体现动物细胞的全能性。 (2)动物细胞在培养的过程中一些细胞会发生遗传物质的变化。
【典例训练2】某研究性学习小组同学在研究细胞工程时,列表 比较了植物细胞工程和动物细胞培养的有关内容,其中错误的 是( )
选项 比较项目
A 处理方法
B
原理
C
应用
D
培养除细胞壁 用胰蛋白酶处理后 制成细胞悬液
细胞增殖
细胞的全能性
快速繁殖技术
生产干扰素等
固体培养基
(4)重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛体内
高中生物动物细胞工程动物细胞培养和核移植技术原创
1、进行动物细胞培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间 的主要物质是什么成分?用胃蛋白酶行吗?
主要:蛋白质。 不能。多数动物细胞培养的适宜PH为7.2-7.4,胃蛋白酶在此环境中会变性失活。
2、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有 何独特之处?
主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
为使核移植的胚胎或动物的遗传物质来自有重 要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的 细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞核去 掉或将其破坏。
问题3
用于核移植的供体细胞一般都选用传 代10代以内的细胞,这是为什么?
培养的动物细胞一般当传代至10~50代左右时, 部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质 也可能会发生突变,而10代以内的细胞一般能保 持正常的二倍体核型。因此,在体细胞核移植中, 为了保证供体细胞正常的遗传基础,通常采用传 代10代以内的细胞。
二、动物细胞核移植技术和克隆动物
问题1
我们能否利用类似植物组织培养获得 完整植物体的方法培养动物细胞,使 其发育成一个完整的个体?
不能,高度分化的植物细胞仍保持着全能性,而 动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高逐渐受 到限制,分化潜能逐渐变弱。
全能性高低:
植物细胞>动物细胞
动物细胞特点?
• 分化潜能变窄:随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄, 这是指整体细胞而言。
细胞融合 重组 细胞
归纳:
胚胎移植
构建重组胚胎
代孕母体
生出与供体奶牛遗传 基础相同的犊牛
1.两阶段:核移植和胚胎移植
2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状
3.严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状
高中生物《动物细胞培养和核移植技术》优质课教案、教学设计
思考:1、为什么用卵母细胞?
2、 促融方法?激活目的?
3、 克隆动物的三个母亲
4、 克隆动物性状与供体动物完全一样吗?它们彼此
完全一样吗?
引起学生兴趣情感教育
根据所讲的内容,尝试写出过程。
预习中完成的很好,仅一张PPT展示知识点。
引导学生根据预习总结核移植过程.写在黑板上, 其他小组点评补充.
学生在比较中学
习知识, 加深对知识的理解
课代表总结表现Leabharlann 的个人和小组,并对本节课进行总结。
及时巩固
动物细胞培养和核移植技术教学设计
,
4、记忆巩固
二、动物体细胞 核 移 植 技术 和 克 隆 动物
1、引入
2、过程
3、前景及存
在的缺陷
4、跟踪练习
几分钟记忆细胞培养的相关知识点
前面刚学过植物组织培养,由部分植物组织培养出完
整植株。提出动物是不是也可以采取同样的方法。
播放中国克隆技术发展的历程,介绍中国技术在世界上的领先地位
2-2-1 动物细胞培养和核移植技术
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3.关于动物细胞培养的叙述,错误的是( D ) A.用于培养的细胞大量都取自胚胎或幼龄动物 的器官或组织 B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其 分散成单个细胞 C.在培养瓶中要定期用蛋白酶使细胞从瓶壁上 脱离,制成悬浮液 D.动物细胞培养只能传50代左右,所培育的细 胞会衰老死亡
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展示内容
课内探究:1 课内探究:2 课内探究:3 课内探究:4 归纳总结
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展示组/个人
【精彩展示】
展示要求: 1.言语要规范、准确, 注意配合肢体语言。 2.声音洪亮,语速适 中。 3.注重总结方法规律。 非展示同学: 注意聆听,积极思考, 及时记录。
2014-3-7 此处添加公司信息
独学求教
1.可以自己进行总结反思;
2.可以就学习当中仍存在的
问题向小组同学请教。
作业:2.2.1 第二课时 学案。
【自查自纠】(3min)
LOGO
一、1.分散成单个细胞,生长,繁殖; 2.胰蛋白酶,胶原蛋白酶,单个细胞,细胞悬液,原 要求: 代细胞,胰蛋白酶,传代培养; 3.①菌,毒,培养液,所有培养皿,抗生素,换培养 1.深入思考, 总结归纳。 液 2.规范认真, 落到实处。 ②糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素, 血清、血浆; 3. 标注疑难, 准备讨论。 ③温度,pH,36.5±0.5,7.2~7.4 ④气体,CO2,O2,O2,pH;培养皿,松盖,95% 空气,5%CO2; 4.生物制品,基因工程,有毒物质,研究
LOGO
存在的问题:
1. 学案的预习不够充分。 2. 不明确的问题没有在组内 研讨后及时记录。
高中生物 2.1《动物细胞培养和核移植技术》教学设计 新人教版选修3-新人教版高二选修3生物教案
动物细胞培养和核移植教学设计〔第一课时〕一、概述本节是人教版普通高中课程标准实验教科书生物选修三第二章第三节《动物细胞培养和核移植》第一课时。
普通高中《生物课程标准》〔实验〕指出,高中生物课程目的之一是帮助学生理解生物科学、技术和社会的相互关系,增强学生对自然和社会的责任感,促进学生形成正确的世界观和价值观。
同时现代教育理论认为,从某种意义上说,主动参与的学习过程比单纯获得现成的结论更重要。
在学生通过对植物细胞工程的学习之后,可能会对是否能对动物细胞进行培养、克隆动物等问题产生疑问。
本节课在设置情景,介绍动物细胞工程相关技术之后,我采用自主学习的方法,先让学生自学动物细胞的培养过程,找出关键概念,画出动物细胞培养的流程图,在此基础上,再对学生的流程图进行修正,并强调重要的名词和概念。
对于动物细胞培养应注意的问题,我采用一系列问题串的形式,让学生讨论探究。
最后总结得出结论。
通过对植物组织培养和动物细胞培养的比较,实现对新知识进行有意义的构建。
最后通过介绍居里夫人的名言,进一步激励学生热爱科学,关爱生命的情感。
二、教学目标分析知识目标: 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用;2、说出贴壁生长、接触抑制、原代培养、传代培养等基本概念;3、区分植物组织培养和动物细胞培养的异同能力目标: 1、通过自学概括出动物细胞培养的过程,积极参与小组讨论2、运用已学知识,分析动物细胞培养的条件。
情感目标: 1、培养热爱科学,关爱生命健康的情感2、关注细胞工程研究的发展和应用前景三、学习者特征分析本节课的学习者特征分析主要是根据教师平时对学生的了解而做出的:〔1〕学生是某某培元中学高二年学生;经过一年多的高中学习,已经掌握了一定的生物学基础知识,具备了独立思考和判断的能力。
〔2〕学生已经学习了基因工程、植物细胞工程的学习,对动物细胞工程的学习有较浓厚的兴趣。
〔3〕学生在以前较少开展课堂的自主学习和讨论,有必要加以引导四、教学策略选择与设计〔1〕情境激趣策略:通过大量动物细胞培养的图片、诗歌、名人名言激发学生的学习兴趣和热爱科学的情感〔2〕以任务驱动的自主学习策略:通过布置每位学生阅读教材相关内容,培养学生的自主学习能力。
2.2.1动物细胞培养和核移植技术完善过且投影清晰 (2)
• 什么叫黏性末端?
当限制酶从识别序列的中心轴线两侧 切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的 切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间 正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
•大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序 列,并在G和A之间切开形成黏性末端。
什么叫平末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线处 切开时,切开的DNA两条单链的切口,是 平整的,这样的切口叫平末端。
基因进入受体细胞的载体—— “分子运输车” 要让一个从甲生物细胞内取出 来的基因在乙生物体内进行表达, 首先得将这个基因送到乙生物的细 胞内去!能将外源基因送入细胞的 工具就是运载体(分子运输车)。
基因进入受体细胞的载体—— “分子运输车”
假如目的基因导入受体细胞后不能复制 将怎样? 作为运载体没有切割位点将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,你如何察 觉?
限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
限制酶切割 DNA后形成的 末端——黏性 末端、平末端 是如何形成的?
磷酸二酯键,指一分子磷酸与 磷 两个醇(羟基)酯化形成的两 酸 个酯键。该酯键成了两个醇之 二 间的桥梁。例如一个核苷的 酯 3ˊ羟基与另一个核苷的5ˊ羟 键 基与同一分子磷酸酯化,就形 成了一个磷酸二酯键。
酯键(在相邻核苷酸的3位碳原子上的羟基与5位碳原子上所连磷
酸基团的羟基之间形成),那么,二者的差别主要表现在什么地方 呢? (1)DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的 3′末端的羟基上,形成磷酸二酯键;而DNA连接酶是在两个DNA 片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA片段之间 形成磷酸二酯键。 (2)DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二 酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA双链上 的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。 此外,二者虽然都是由蛋白质构成的酶,但组成和性质各不相同。
高二生物选修(3)课件:2.2.1动物细胞培养和核移植技术
3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎 或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因 是这样的组织细胞 ( D ) A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A ) ------------------------------( A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培 养成植株。
动物细胞工程常用的技术
细胞工程的基本技术
植物细胞工程
植物组织培养技术
动物细胞工程
动物细胞核移植技术
植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体技术 动物细胞培养技术(基础)
一、动物细胞培养 1、概念:
zxxk
是从动物机体中取出相关组织, 将它分散成单个细胞,放在适宜的培 养基中,让这些细胞生长和增殖
思
考
1、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官,请解释原因? 2、为什么动物细胞培养过程需将组织分散成单个细胞? 3、如何将动物组织分散成单个的细胞呢? 4、如何理解原代培养和传代培养? zxxk 5、传代培养的细胞能一直传代下去吗?为什么? 6、动物细胞培养需满足哪些条件? 7、动物细胞培养有哪些应用?
4、种类
体细胞核移植 (难度较高)
胚胎细胞核移植
5、体细胞核移植的过程(克隆高产奶牛)
高产奶牛 (供体)
MⅡ期 卵母细胞 (去核)
供体细胞培养
重组细胞
重组胚胎 胚胎移植
P49
6、应用
①器官移植
②加快家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育
动物细胞培养和核移植技术课件
(3)如何区分原代培养与传代培养? 答案 ①原代培养:通常将动物组织消化后的初次培养称 为原代培养。 ②传代培养:贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处 理,然后分瓶继续培养,让细胞增殖,即为传代培养。
2.条件 (1)无菌、无毒的环境:培养液应进行_无__菌___处理。 (2)营养:合成培养基的成分为糖、__氨__基__酸___、促生长 因子、无机盐、微量元素、_血__清___、血浆等。 (3)温度和 pH:适宜的温度为__3_6_._5_±_0_.5__℃_____;pH 为 _7_._2_~__7_._4___。 (4)气体环境:_空__气___ 95%和 CO25%的混合气体。
【归纳提炼】 1.不同层次的克隆
(1)分子水平:如DNA复制。 (2)细胞水平:动物细胞培养。 (3)个体水平:“多利”羊的诞生。 2.动物细胞核移植的条件及结果 (1)核移植一般选择去核的卵母细胞,因为卵母细胞体 积大,易操作,含有促使细胞核全能性表达的物质和营 养条件。一般不选择生殖细胞作为供核细胞,因为生殖 细胞与正常体细胞相比,遗传物质减半。
【归纳提炼】 动物细胞培养与动物组织培养的比较
【活学活用】
1.判断下面关于动物细胞培养的叙述的正误。
(1)动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性
()
(2)需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理 ( )
(3)原代培养的细胞是指从贴壁生长到发生接触抑制的细胞
()
(4)恒温条件下,细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而
5.应用 (1)加速家畜_遗__传___改良进程,促进优良畜群繁育。 (2)增加濒危动物数量,保护_濒__危___物种。 (3)生产医用蛋白。 (4)作为_异__种__移植的供体。 (5)用于组织器官的移植。
(完整版)动物体细胞核移植技术
2.2.1动物细胞培养和核移植技术第二课时动物体细胞核移植技术和克隆动物学习目标:1、简述克隆动物的概念和原理2、简述体细胞核移植技术和体细胞克隆及其应用前景3、关注体细胞克隆技术的安全性和伦理性问题学习重点和难点:动物体细胞核移植技术克隆动物的过程教学过程:二、动物体细胞核移植技术和克隆动物阅读教材47页相关文字思考:1、对动物来说,为什么不能用类似植物组织培养的方法获得完整的个体?2、根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达?(一)动物体细胞核移植:是将动物的一个细胞的,移如入一个已经去掉细胞核的细胞中.使其并发育成一个新的,这个新的胚胎最终发育为动物哺乳动物核移植分为和。
思考:1、核移植得到的动物叫什么?2、体细胞核移植和胚胎核移植比较那个难度低一点?为什么?(二)体细胞核移植的培育过程1、【动手设计】1、体细胞核移植过程流程图:(以P48为例)2、回顾克隆多莉羊的生产流程:(多莉的性状和B羊完全相同说明什么问题? )(多莉体内的遗传物质全部来自B羊吗?为什么? )思考:1、核移植的原理是什么?2、为什么要去掉受体卵母细胞的核?3、用于核移植的细胞一般都选用10代以内的细胞,这是为什么?4、核移植获得克隆动物是百分之百对供体细胞的复制吗?(三)体细胞核移植技术的应用前景:1、在畜牧业生产中:可以加速进程,促进优良畜群繁育2、在保护濒危物种方面:利用体细胞核移植技术增加这些动物的数量3、在医药卫生领域:转基因克隆动物可以作为,生产许多珍贵的医用4、在治疗人类疾病时:转基因克隆动物细胞、组织、器官可以作为异种移植的。
5、对克隆动物和细胞的研究,使人类深入了解发育及衰老过程6、用克隆动物做疾病模型,使人们更好的追踪研究过程和疾病(四)体细胞核移植技术存在的问题:1、成功率比较2、绝大多数动物还存在许多克隆动物表现出缺陷,如体型过大,异常肥胖,发育困难,脏器缺陷,免疫失调等3、克隆动物食品的问题也存在质疑练一练:1、绵羊的乳腺细胞是高度分化的细胞.但用乳腺细胞的细胞核与去核卵细胞的细胞质重组成一个细胞后,这个细胞核仍然保持着全能性,这主要是因为()A.细胞核内含有保持物种发育所需要的全套遗传物质B.卵细胞的细胞质内含有生物发育所需要的全套遗传物质C.卵细胞的细胞质为细胞核提供营养物质D.细胞核中的基因在卵胞质中才能表达2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
2-2-1动物细胞培养(课件)——高中生物人教版(2019)选择性必修三
练习
3.有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白,从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明,利用诱移功能干细胞(iPS细胞) 制作前驱细胞,然后移植给渐冻症实验鼠,能延长其寿命。下列相关描述错误的是( )iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同,蛋白质却不完全相同B. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达,细胞种类增多C.若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换,则可以起到良好的治疗作用D.植入神经干细胞,恢复受损的运动功能,也许会在一定程度上使渐冻症病情改善
ES细胞
成体干细胞
成体组织或器官内
造血干细胞(骨髓、外周血和脐带血中)神经干细胞(神经系统中)精原干细胞(睾丸中)
具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等)
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
A.使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分B.通常置于含有 和 的混合气体的 培养箱中进行培养C.渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数D.需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作
B
练习
例2 下列关于动物细胞培养过程的叙述,正确的是( )。
动物细胞培养的条件
保证无菌、无毒的环境
无菌
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
②在无菌环境下进行操作
定期更换培养液。
无毒
③添加一定量的抗生素
目的:方便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。
动物细胞培养的条件
温度、PH和渗透压
(1)适宜的温度:哺乳动物多以__________ ℃为宜。(2)适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为_________。(3)适宜的渗透压。
专题2 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
A.原理
B.培养基区别
C.结果
【尝试解答】 【解析】 A
D.培养目的
本题考查的是植物组织培养和动物细胞
培养相关知识的比较,动物细胞培养的目的是获得 更多细胞或细胞产物。而不是获得个体,其原理只
涉及细胞增殖(细胞分裂)。
【误区警示】
误认为动物细胞培养也是为了获
得一个完整的个体,而得出错误答案“D”,但却 忽略了动物细胞培养只是为了得到细胞或细胞产
此没有产奶量高的优良性状。
【探规寻律】 体细胞核移植的过程必须弄清的 几个问题: (1)动物细胞的全能性会随着动物体的发育而逐渐 受到限制,其主要原因是细胞的分化。 (2)克隆高产奶牛所用的受体细胞是去核的卵母细 胞,处于减数第二次分裂中期。因为卵母细胞中 含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。 (3)克隆高产奶牛过程所利用的生物技术有:细胞 核移植、动物细胞培养、胚胎移植。 (4)目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微 操作法。
制,细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞,A错;
克隆培养法中细胞都是由一个细胞经过有丝分裂而
得的,所以细胞的基因型相同,多数不会发生改变, B错;二倍体细胞传代培养至10代多数会死亡,只 有少数的细胞能够培养至50代以后成为细胞系,C 错;恶性细胞系的细胞具有癌变的特点,能够无限
增殖,可以进行传代培养,D正确。
解析:选A。对动物细胞培养和植物组织培养的知 识理解程度不够,造成了概念上的混淆,认为动物 细胞培养和植物组织培养具体过程相差不大,故误
选B或C或D。动植物细胞培养时培养基的成分差
别较大,动物培养基需加入血清,植物培养基需加
入激素和琼脂。
动物体细胞核移植 1.原理:细胞核的全能性。 2.供核细胞:一般选优良动物的传代培养10代以 内的细胞。 3.受体细胞:去核的MⅡ期卵母细胞。
2.2.1动物细胞培养和核移植技术拓展
有关概念
• 细胞贴壁:培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长 繁殖。 注:也有一些细胞(如淋巴细胞)能够持续在悬浮状态下生长 。 • 接触抑制:贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止 分裂增殖 • 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞(分装前的 细胞培养)。 • 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分 装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。
无限传代
已遗细 改传胞 变物系 质:
细胞克隆的主要用途就是分离出突 变细胞系
• 连续用同一种培养基进行定向筛选就会收 获纯系 但是培养基有选择培养基和完全培养基两 种,用选择培养基定向培养筛选就可获得 分离出缺乏特殊基因的突变细胞系
动物细胞培养时候,有的连续细胞系获得 不死性,但保留了接触抑制的现象,不致 癌。
胚胎移植技术
试管动物(婴儿)培养过程
卵细胞 体外受精 受精卵 精子
母体子宫内
胚胎
孕育、产出
新个体
动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官 剪碎用胰蛋白酶处理 为什么用胰蛋白酶处理? 单个细胞 加培养液稀释 原代培养特点:细胞贴壁、 配置细胞悬液 原 代 接触抑制 转入培养瓶 遗细 培 传胞 养 物株 分瓶传代培养
总结:动物细胞培 养过程
传代10代以内,遗传物质不改变, 保持正常二倍体核型。
传代10-50代左右,增长缓慢以 至于完全停止,部分细胞核型可 能发生变化(遗传物质可能改变) 40-50代细胞 继续传代培养少部分细胞获得不 死性,细胞突变,遗传物质已经 改变,等同于癌细胞。
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【集智研讨】(8min)
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研讨内容:课内探究和自主预习中未 解决的问题。 要求: 1.认真、高效、有序。 2.先对学后群学,并将交流的成果及时整 理到学案上。 3.组长负责宏观调控,负责好结果反馈, 并做好展示、质疑的准备。
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展示内容
展示组/个人
课内探究:1
课内探究:2 课内探究:3 课内探究:4(1)
1组(口头)
2组(口头) 5组(口头) 6组(口头)
课内探究:4(2)
7组(板书)
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1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?
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卵细胞 和极体 第一极体 次级卵母细胞
MⅡ期: 减数第二次分裂中期
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显微操作去核法。
细胞核核移植
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体细胞核移植过程
供体细胞 (供核) 卵母细胞 (MⅡ期:供质)
细胞培养
获取供体 细胞 注 入 无核卵母细胞 妊娠
细胞融合 重组 细胞 激 活
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1.动物细胞工程技术的基础是( B ) LOGO A.动物细胞融合 B.动物细胞培养 C.胚胎移植 D.单克隆抗体 2.用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自 胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织, 其主要原因是这样的组织细胞( D ) A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
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2.2.1
动物细胞培养和核移植技术
第二课时
【学习目标】
和应用前景;
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1.说出动物体细胞核移植技术克隆动物的过程
2.通过阅读教材找出关键词,归纳动物体细胞 核移植技术的流程;
3.激情投入,快乐学习。
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细胞间的物质主要是蛋白质(胶原纤维)。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于 6时,胃蛋白酶就会失去活性。 胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2~8.4。
多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4。
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胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么? 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外, 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有 损伤作用,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时 间。
去核
与供体奶牛遗传 基础相同的犊牛
胚胎移植 重组 孕母体 胚胎 分娩
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独学求教
1.可以自己进行总结反思;
2.可以就学习当中仍存在的
问题向小组同学请教。
作业:2.2.1 第二课时 学案。
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幼龄与老龄动物的组织细胞比较,分化程度 低的与分化程度高的组织细胞比较,哪一种 更易于培养?
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,它们 的细胞分化程度低,增殖能力强,有丝分 裂旺盛,更容易培养。
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用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞 间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?
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独学求教
1.可以自己进行总结反思;
2.可以就学习当中仍存在的
问题向小组同学请教。
作业:2.2.1 第二课时 学案。
有关概念
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细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长 停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活 到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长 停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改 变,使其在培养条件下可以无限制传代,这 种传代细胞为细胞系。 细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点, 失去接触抑制,容易传代培养。
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4.简述高产奶牛 的克隆过程。
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(MⅡ卵母细胞)
供体细胞注入去 核卵母细胞 激活受体细胞, 完成分裂、发育 去核的卵 母细胞 去核卵母细 胞体积比较 大
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胚胎移植
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卵原细胞
卵细胞
卵原细胞 卵母细胞作受体 细胞的原因: 体积大,易操作; 含有激发细胞核 全能性的物质。
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1.植物细胞脱分化需要什么条件? 2.植物组织培养应用的原理? 3.植物组织培养的基本操作流程?
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2.2.1
动物细胞培养和核移植技术
第一课时
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动物细胞工程常用的技术手段:
1.动物细胞培养 3.制备单克隆抗体 2.动物细胞融合 4.细胞核移植 动物细胞工 程的基础
胞一般能保持正常的二倍体核型。
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LOGO 3.体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体 细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什 么?
绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还 有少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自于受体 卵母细胞。 此外,动物的一些行为、习性的形成与所处环 境有很大关系,核供体动物生活的环境与克隆 动物所生活的环境不会完全相同,其形成的行 为、习性也不可能和核供体动物完全相同,从 这一角度看,克隆动物不会是核供体动物100% 的复制。
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展示内容
课内探究:1 课内探究:2 课内探究:3 课内探究:4 归纳总结
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展示组/个人
3组(口头) 8组(口头) 10组(板书) 9组(板书) 4组(板书)
【精彩展示】
展示要求:
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1.言语要规范、准确。
2.声音洪亮,语速适 中。 3.思路清晰。 非展示同学: 注意聆听,积极思考, 及时记录。
【学习目标】
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1.说出动物细胞培养的过程、条件及 应用。
2.通过阅读教材找出关键词,归纳动 物细胞培养的流程。 3.激情投入,快乐学习。
2014-3-7
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【自查自纠】(3min)
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1.分散成单个细胞,生长,繁殖; 2.胰蛋白酶,胶原蛋白酶,单个细胞,细胞悬液,原 要求: 代细胞,胰蛋白酶,传代培养; 3.①菌,毒,培养液,所有培养皿,抗生素,换培养 1.深入思考, 总结归纳。 液 2.规范认真, 落到实处。 ②糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素, 血清、血浆; 3. 标注疑难, 准备讨论。 ③温度,pH,36.5±0.5,7.2~7.4 ④气体,CO2,O2,O2,pH;培养皿,松盖,95% 空气,5%CO2; 4.生物制品,基因工程,有毒物质,研究
2014-3-7
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导学案反馈情况
优秀个人:
王宇,孙昊楠, 方明辉,张希宁
存在的问题:
1.学案不够工整。
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2.学案的预习不够充分。 3.没有使用双色笔 。
优秀表现:
1.学案书写规范,认真思考 2.用双色笔对质疑的问题进 行了标注。 3.主动探寻自己的疑惑。
2014-3-7
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为使核移植动物的遗传物质全部来自有利 用价值的动物提供的细胞。
2014-3-7
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2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞,想一想,这是为什么? 培养的动物细胞一般当传代至10~50代左右 时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞
遗传物质可能会发生突变,而10代以内的细
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3.关于动物细胞培养的叙述,错误的是( D ) A.用于培养的细胞大量都取自胚胎或幼龄动物 的器官或组织 B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其 分散成单个细胞 C.在培养瓶中要定期用蛋白酶使细胞从瓶壁上 脱离,制成悬浮液 D.动物细胞培养只能传50代左右,所培育的细 胞会衰老死亡