几种肌酸激酶的检测方法
(完整版)肌酸激酶分析题目
(完整版)肌酸激酶分析题目1. 引言在医学研究中,肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)是一种重要的生物标志物,常被用于评估心肌损伤和肌肉疾病。
本文将对肌酸激酶分析进行全面介绍。
2. 肌酸激酶的功能和作用机制肌酸激酶主要存在于肌肉组织和心肌细胞中,是细胞内储能物质肌酸磷酸化还原系统的重要酶类。
它在能量代谢过程中起着关键的催化作用,并参与肌肉收缩和心肌功能调控等生理过程。
3. 肌酸激酶的检测方法肌酸激酶的检测方法多种多样,常用的有血清酶学方法、免疫分析法、酶联免疫吸附法等。
这些方法基于不同的原理和技术,可以快速、准确地测定肌酸激酶的活性或浓度。
4. 肌酸激酶与心肌损伤的关系肌酸激酶在心肌损伤中起到重要的指示作用。
心肌损伤会导致肌酸激酶释放入血液中,血清中肌酸激酶活性的升高可作为急性心肌梗死、心肌炎等心肌病变的早期诊断指标。
5. 肌酸激酶与肌肉疾病的关系肌酸激酶在肌肉疾病中也具有重要意义。
肌酸激酶活性的升高可以提示骨骼肌炎症、再生、肌肉疾病等病理状态。
通过测定血清中肌酸激酶的水平,可以辅助肌肉疾病的诊断和治疗。
6. 结论肌酸激酶是一种重要的生物标志物,在心肌损伤和肌肉疾病的诊断和治疗中具有重要作用。
准确、快速地测定肌酸激酶的活性或浓度是医学研究和临床实践中的关键一步。
参考文献- 张三,李四,王五,肌酸激酶的研究进展,生物医学工程杂志,2021年3月。
- Wang, X., et al. (2020). Creatine kinase: functional roles in skeletal muscle and brain. Diseases, 8(3), 24.- Smith, J., et al. (2019). The use of creatine kinase as a diagnostic biomarker for muscle and cardiac diseases. Children, 6(5), 68.。
血清肌酸激酶(CK) DGKC推荐方法测定
血清肌酸激酶(CK) DGKC推荐方法测定1.实验原理德国临床化学学会(DGKC)和国际临床化学学会(IFCC)推荐的连续监测法。
ADP + 磷酸肌酸CK→肌酸+ ATPATP + 葡萄糖HK→ADP + 葡萄糖-6-磷酸葡萄糖-6-磷酸+ NADP+G6PD→6-磷酸葡萄糖酸+NADPH +H+NADPH在340nm处有特异吸收,通过测定NADPH 生成速率计算出CK活性。
2. 标本:2.1 病人准备:无特殊要求。
2.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放:稳定性:2~8℃保存稳定7天;15~25℃保存稳定1天;-20℃保存稳定4周(避光保存)。
3天内的活性损失:2~8℃保存24小时或18~22℃保存1小时至少损失10%。
4. 标本运输:常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂欧泰克CK测定试剂盒6.1.1 试剂组成:咪唑缓冲液(pH6.7)100mmol/L 磷酸肌酸30mmol/L葡萄糖20mmol/LN-乙酰半胱氨酸(NAC)20mmol/LEDTA-Na22mmol/LADP 2mmol/LNADP 2mmol/L二腺苷-5'-磷酸10μmol/L 6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6P-DH)2800 U/L 已糖激酶(HK)4000 U/L 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。
不可入口!避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品:使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
肌酸激酶的测定方法
肌酸激酶的测定方法
肌酸激酶(CK)是一种酶类,在测定方法上可依其来源分为三种:肌肉型(CK-MM)、心脏型(CK-MB)和脑型(CK-BB)。
常用的测定方法有以下几种:
1. 酶促动力学法(Enzyme Kinetic Method):利用反应速率随底物浓度变化的特性,建立底物与产物的浓度与时间的关系,从而测定出酶的活性。
2. 免疫学法(Immunoassay):利用抗体与抗原的专一性结合,以抗体为检测物,在酶标仪上测定检测物对底物的反应水平。
3. 电化学法(Electrochemistry):根据电离化原理,将底物及其反应产物经过化学反应后,系统的离子浓度发生变化,测定其电位或电流的变化以推算出酶的活性。
4. 光学法(Optical method):利用光学原理,进而通过化学反应产生的发光等信号,测定酶对底物的反应峰值和面积。
19血清肌酸激酶测定
19血清肌酸激酶测定一、目的肌酸激酶(CK)又称肌酸磷酸激酶(CPK)。
主要存在于骨骼肌、心肌和脑组织的胞质和线粒体中。
正常人血清中CK活性很低,当上述组织受损时,CK进入血中,使血中CK 随即上升。
二、方法连续监测法(N—乙酰半胱氨酸法)三、原理磷酸肌酸肌酸+ATPATP+ 葡萄糖HK 6—磷酸+ADPG6PDH 葡萄糖—6—磷酸+NADP+6—磷酸—葡萄糖酸+NADPH+H +四.标本1.静脉抽取病人空腹血,置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。
2.采血后应立即送到检验科生化室。
3.样品收到后立即分离血清,不能及时测定的血清应于2-80C保存。
4.严重溶血或脂血的标本不能测定。
五.设备及试剂1.希迈全自动生化仪。
2.上海复星长征公司肌酸激酶试剂。
3.肌酸激酶剂应贮存于2—8℃冰箱。
六.操作步骤1.样本的准备:将编好号的样品离心,取血清加入样品杯放到样品盘的规定位置,再把样品盘放到仪器中相应位置。
2.试剂的检查:每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标等情况,认无误后方可进行测定。
3.操作方法:详见希迈生化仪操作手册。
七.质量控制每天操作过程中应使用上海复星长征公司的生化质控血清至少做一次室内质控,每年定期参加海南省临检中心所组织的室间质评。
八、干扰因素1、手术后,反复肌肉注射,剧烈运动等,CK活性会升高。
2、不同年龄、性别存在差异。
3、红细胞内不含CK,但红细胞内含有腺苷酸激酶(AK)能催化ADP直接转化成ATP,使CK增高。
九、参考区间24—195U/L十、实验室解释1、CK主要存在于骨骼肌和心肌,在脑组织中也有存在。
各种类型进行性肌萎缩时,血清CK活性均可增高。
神经因素引起的肌萎缩如脊髓灰白质炎时活性正常,皮肌炎时CK活性可有轻度或中度增高。
急性心梗后2—4小时就开始升高,可高达正常上限的10—12倍。
CK对诊断心梗较AST、LDH特异性高,但此酶增高持续时间短,2—4天就恢复正常。
病毒性心肌炎时也明显升高,对诊断及预后有参考价值。
肌酸激酶质量法生化试剂
肌酸激酶质量法生化试剂
肌酸激酶(CK)是一种酶,也称为肌酸磷酸激酶,它在人体内
起着重要的生物学作用。
肌酸激酶质量法是一种生化试剂,用于测
定体内肌酸激酶的含量,常用于临床诊断和疾病监测。
肌酸激酶质量法生化试剂的主要作用是通过特定的化学反应,
测定体液中肌酸激酶的活性或浓度。
这些试剂通常包括肌酸磷酸激
酶底物、辅酶、缓冲液等成分,能够与肌酸激酶发生特定的反应,
并产生可测量的信号,如颜色变化或光学密度变化等。
通过测量这
些信号的变化,就可以间接地测定肌酸激酶的含量。
在临床实践中,肌酸激酶质量法生化试剂常用于心肌梗死、肌
肉疾病、肝炎等疾病的辅助诊断和疾病监测。
通过监测肌酸激酶的
含量变化,可以帮助医生判断疾病的严重程度、病情的发展趋势以
及治疗效果。
除了临床诊断之外,肌酸激酶质量法生化试剂也在科研领域得
到广泛应用。
科研人员可以利用这些试剂对肌酸激酶进行定量分析,以探究肌酸激酶在生理和病理过程中的作用,从而为新药研发和疾
病治疗提供科学依据。
总的来说,肌酸激酶质量法生化试剂在临床诊断和科研领域具有重要意义,它为医学工作者提供了一种快速、准确测定肌酸激酶含量的方法,有助于疾病的早期诊断和治疗,也为科学研究提供了有力的工具。
肌酸激酶测定方法
肌酸激酶测定方法
肌酸激酶测定方法是一种常见的生化分析技术,用于评估细胞内肌酸激酶(CK)酶活性的水平。
肌酸激酶是一种酶,存在于多种组织和细胞内,包括肌肉、心脏和脑部组织。
肌酸激酶的水平通常被用作一种生物标志物,以帮助诊断心肌梗死、肌无力症、红细胞破裂等疾病。
常用的肌酸激酶测定方法包括酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫荧
光法(IF)、放射性免疫沉淀法(RIA)等。
其中,ELISA法是最常用的
方法之一,它利用特异性抗体与肌酸激酶结合,再通过酶标记技术进行检测和定量。
肌酸激酶测定方法的操作步骤一般包括样品的制备、试剂的配制、反应的进行和结果的读取。
在样品制备中,通常需要将含有肌酸激酶的样品(如血液、尿液等)离心、稀释等处理,以获得适宜的测量浓度。
在试剂配制方面,需要根据具体的检测方法选择合适的试剂,并按照指导书的要求进行配制。
反应的进行通常需要在特定的温度、时间、pH等条件下进行,以保证反应的稳定和准确性。
结果的读取可以通
过光度计、荧光计等仪器进行,也可以通过目视判断等方法进行初步分析。
总的来说,肌酸激酶测定方法是一种简单、快速、可靠的生化分析技术,广泛应用于医学、生物学等领域。
在实际应用中,需要根据具体的研究目的和需求选择合适的检测方法,并注意操作规范和安全。
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肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒说明书
第1页,共2页货号:QS1107 规格:50管/48样肌酸激酶(Creatine Kinase, CK )测定试剂盒说明书紫外分光光度法注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP 之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP 再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。
测定原理:CK 催化磷酸肌酸和ADP 生成肌酸和ATP ,己糖激酶催化ATP 与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH ,导致340nm 光吸收值增加。
自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存,使用前加15mL 蒸馏水溶解。
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。
工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1混合。
使用前37℃温育2min 。
粗酶液提取:1. 组织样本:按照组织质量(g ):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g ,4℃离心15min ,取上清,置冰上待测。
2. 血清样本:直接测定。
CK 活性计算公式:1、按组织蛋白含量计算酶活定义:37℃,pH7.0时,每毫克蛋白质1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。
CK 活性(nmol/min / mg prot )=dA ⨯∆ε×V 反总÷(V 样×Cpr)= 804×△A ÷Cpr 2、按组织样本质量计算:第2页,共2页酶活定义:37℃,pH7.0时,每克样品1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。
肌酸检测方法-概述说明以及解释
肌酸检测方法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述肌酸是一种重要的能量储备物质,可以在高强度运动中提供瞬时能量。
因此,肌酸的检测方法对于运动员的训练调整和健康状况的评估至关重要。
肌酸检测方法是通过定量测量肌肉中肌酸的浓度来评估个体的肌肉能量状态。
传统的肌酸检测方法主要包括肌酸酶活性测定、尿液中肌酸测定、肌酸磷酸测定等。
这些方法有其优势和局限性,但随着科技的不断进步和发展,出现了一些新的肌酸检测方法,如磁共振波谱(MRS)技术、肌酸磷酸肌酸比测定、肌酸结晶测定等。
磁共振波谱(MRS)技术是一种非侵入性、无辐射的检测方法,可以直接测量肌肉中肌酸的浓度。
它通过磁共振的原理来探测不同分子之间的信号,从而得到肌酸的浓度信息。
这种方法具有高精度和准确性,但需要专业的设备和操作技术,因此应用范围有限。
肌酸磷酸肌酸比测定是一种直接测量肌酸和磷酸肌酸浓度比值的方法。
这种方法简便易行,无需特殊设备,适用于现场测试和大规模测量。
然而,由于测量的是肌酸磷酸肌酸比值,需要进一步计算才能得到肌酸浓度的准确值,因此结果的准确性有一定的局限性。
肌酸结晶测定是一种直接观察和计数肌酸结晶的方法。
它可以通过显微镜或扫描电镜来观察肌酸结晶的形态和数量,从而推断肌酸的浓度。
这种方法简单直观,但需要专业的设备和技术,且计数过程存在一定的主观性,可能导致结果的偏差。
综上所述,肌酸检测方法多种多样,每种方法都有其优势和局限性。
选择合适的检测方法需要考虑实际需求、实验条件和设备技术等因素。
随着科技的不断进步,相信未来会出现更加准确、简便的肌酸检测方法,为运动员的训练和健康提供更好的指导和保障。
文章结构是指文章的整体框架和组织方式,它对于文章的逻辑性和层次感至关重要。
本文采用如下结构:1. 引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的2. 正文2.1 肌酸检测方法要点12.2 肌酸检测方法要点23. 结论3.1 总结3.2 展望在文章结构方面,我们采用了三个主要部分,分别是引言、正文和结论。
肌酸激酶同工酶测定方法
肌酸激酶同工酶测定方法肌酸激酶是一种在细胞内起着重要功能的酶,它参与肌肉收缩和能量代谢的调节。
肌酸激酶同工酶测定方法是一种用来测量肌酸激酶同工酶在体内的浓度的技术。
肌酸激酶同工酶是由不同的亚单位组成的复合物。
在人体中,有三种主要的肌酸激酶同工酶,分别是肌酸激酶BB(CK-BB)、肌酸激酶MM(CK-MM)和肌酸激酶MB(CK-MB),它们在组织中的比例不同。
肌酸激酶同工酶的测定方法有很多种,其中最常用的是酶促动力学法。
这种方法是通过测量肌酸激酶同工酶在特定底物上的催化反应速率来确定其浓度。
测定时,首先将待测样品与特定底物相混合,然后在特定条件下进行反应。
反应结束后,通过测量底物浓度的变化来计算肌酸激酶同工酶的浓度。
除了酶促动力学法外,还有其他一些常用的肌酸激酶同工酶测定方法。
例如,电化学法可以通过测量肌酸激酶同工酶的电化学信号来确定其浓度;免疫学方法可以利用特定抗体与肌酸激酶同工酶结合,并通过测量抗体与酶结合的量来确定其浓度。
肌酸激酶同工酶测定方法的选择应根据实际需要来进行。
不同的方法在测量的灵敏度、准确性和成本方面可能存在差异。
因此,在选择方法时,需综合考虑实验条件、所需测定的范围和目的来进行决策。
肌酸激酶同工酶测定方法在医学领域具有重要意义。
临床上,肌酸激酶同工酶的测定可用于诊断心肌梗死、肌肉损伤和其他与肌酸激酶同工酶有关的疾病。
例如,在心肌梗死的早期阶段,肌酸激酶MM和肌酸激酶MB的浓度会显著升高,因此可以通过测定其浓度来对心肌梗死进行诊断。
总之,肌酸激酶同工酶测定方法是一种重要的实验技术,可用于测量肌酸激酶同工酶在体内的浓度。
选择合适的测定方法,并结合实际需要和实验条件进行分析和解读,有助于更好地应用肌酸激酶同工酶测定方法在临床诊断和科学研究中。
肌酸激酶同工酶质量法在正常范围
肌酸激酶同工酶质量法在正常范围引言:肌酸激酶同工酶(CK)是一种关键酶,参与细胞中的肌酸磷酸化过程。
肌酸激酶同工酶质量法是一种常用的检测方法,可以用来评估人体肌肉和心肌的健康状况。
本文将介绍肌酸激酶同工酶质量法的原理、正常范围以及其在临床应用中的意义。
一、原理:肌酸激酶同工酶质量法通过测量血液中肌酸激酶同工酶的质量来评估肌肉和心肌的损伤程度。
该方法基于肌酸激酶同工酶在不同组织中的分布差异,通常将其分为三个亚型:肌酸激酶同工酶MM型(肌肉组织中最常见的亚型)、肌酸激酶同工酶MB型(心肌组织中主要存在的亚型)和肌酸激酶同工酶BB型(脑组织中主要存在的亚型)。
通过测量这三个亚型的质量比例,可以判断是否存在肌肉或心肌损伤。
二、正常范围:肌酸激酶同工酶质量法的正常范围是指在健康人群中,肌酸激酶同工酶的质量比例处于正常水平。
具体来说,正常人体血液中肌酸激酶同工酶的亚型比例为MM型约97%、MB型约2%和BB型约1%。
三、临床应用:肌酸激酶同工酶质量法在临床上被广泛应用于以下情况的诊断和监测:1. 心肌梗死的诊断:心肌梗死是心肌组织坏死的结果,会导致肌酸激酶同工酶MB型的释放增加。
通过检测血液中肌酸激酶同工酶MB型的浓度变化,可以早期诊断心肌梗死并进行及时治疗。
2. 肌肉损伤的监测:剧烈运动或外伤等情况会导致肌肉损伤,进而导致肌酸激酶同工酶MM型的释放增加。
通过检测血液中肌酸激酶同工酶MM型的浓度变化,可以及时发现肌肉损伤并进行适当的休息和治疗。
3. 肌无力的评估:肌无力是一种神经肌肉传导障碍性疾病,会导致肌酸激酶同工酶BB型的释放增加。
通过检测血液中肌酸激酶同工酶BB型的浓度变化,可以评估肌无力的病情进展。
4. 肌肉疾病的监测:某些肌肉疾病,如肌营养不良症和肌无力症等,会导致肌酸激酶同工酶MM型的释放增加。
通过检测血液中肌酸激酶同工酶MM型的浓度变化,可以监测肌肉疾病的病情进展和治疗效果。
结论:肌酸激酶同工酶质量法是一种重要的临床检测方法,可以用于评估肌肉和心肌的健康状况。
肌酸激酶(CK)测定标准操作规程
肌酸激酶(CK )测定标准操作规程1.检验原理:(酶学速率法)采用酶偶联反应测定肌酸激酶的活性浓度。
磷酸计算和腺苷-5-二磷酸二钠(ADP )在肌酸激酶作用下,生成肌酸和腺苷-5-三磷酸二钠(ATP )。
ATP 和葡萄糖在己糖激酶(HK )催化下,生成6-磷酸葡萄糖(G6P ).G6P 在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH )作用下脱氢,同时使氧化型辅酶Ⅰ(+NAD )还原成还原型辅酶Ⅰ(NADH ),后者引起340nm 吸光度的增高。
在340nm 检测NADH 的生成量,即可计算出肌酸激酶的活性浓度。
磷酸肌酸+ADP −−−→−肌酸激酶肌酸+ATP ATP+葡萄糖−−−→−己糖激酶ADP+6-磷酸葡萄糖 6-磷酸葡萄糖++NAD −−−→−PDH G 66-磷酸葡萄糖+NADH+-H3.样本要求:静脉采血。
新鲜无溶血血清。
在22~25℃可保存4小时,2~8℃保8—12小时,-20℃可保存3~4天。
样本应避免反复冻融。
4.检验方法;仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程) 5参考范围:6.检验结果的解释:6.1样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本。
10-6.2.单位换算:ukat/L=U/L×16.67×36.3当样本浓度较大时提高稀释倍数,建议最大稀释不超过10倍。
7.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊,或以水空白在340nm处吸光度大于0.05时不能使用。
7.3检验结果仅供参考,不作为临床诊断唯一依据。
8.产品性能指标8.1空白吸光度:在37℃、340nm波长,光径1cm时,空白吸光度A≤0.05。
8.2试剂空白吸光度变化率:在37℃、340nm波长,光径1cm时,用生理盐水作为样品加入试剂测试时△A/min≤0.002.8.3分析灵敏度:在340nm处,光径1cm时,测定1U/L的肌酸激酶时,吸10-光度变化△AU/L/min≥1.25×48.4线性区间:试剂的线性区间为[25-1000]U/L,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900;b)[25-100]U/L区间内,线性绝对偏差不超过±10U/L。
化学发光法同放射免疫法检测肌酸激酶比较
化学发光法同放射免疫法检测肌酸激酶比较作者:刘芳张勇来源:《中国医药科学》2011年第07期[摘要] 目的探讨化学发光法同放射免疫法检测血清心肌酶的效果。
方法选择80例受检者血清样本分别采用化学发光法及放射免疫法检测肌酸激酶,比较两种检测方法的线性范围及检测结果的差异。
结果两种方法均具有良好的线性关系,但化学发光法的线性范围大于放射免疫法,两种方法的检测结果无统计学意义(P>0.05)。
结论化学发光法同放射免疫法检测心肌酶谱能够取得相似的检验效果。
[关键词] 放射免疫法;化学发光法;血清;肌酸激酶;肌酸激酶同工酶[中图分类号] R446.6 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616(2011)13-143-01化学发光法是近年来开展的检验手段,检测便捷、灵敏度高,广泛用于激素、酶类等指标的临床检测,近年来临床应用发展较为迅速,部分取代了传统的检验手段,放射免疫法是临床检验心肌酶谱的经典方法,临床应用时间较长,检验效果比较稳定,近年来化学发光法检验心肌酶谱在临床应用逐渐增多[1],本研究就化学发光法及放射免疫法检测肌酸激酶的效果进行分析,报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选择贵州省铜仁地区医院2009年1月~2010年12月心内科送检的血液标本80份,标本来源患者男37例,女43例,年龄39~64岁,平均(47.0±16.2)岁,均拟诊为心肌梗死,血液标本均为即时送检标本。
1.2 线性分析将标准液分别按12.50、25.00、50.00、100.00、200.00、400.00和800.00 ng/L的浓度倍比稀释后,采用蒸馏水做对照,分别采用XAKP-2000A/02型γ计数仪(北京中西远大科技有限公司)进行放射免疫法和化学发光法KL1-e411型全自动化学发光仪(北京中西远大科技有限公司)对标本进行检测,分别对两组检测结果做回归分析,分离两种检测方法的线性范围。
1.3 标本检测血液标本采用低温离心机2500 g/L低温离心,分离血清,分别采用放射免疫法(试剂盒购于天津原子能研究所)及化学发光法(试剂盒购与南京建成生物工程研究所)检测,检测过程严格按照试剂及仪器使用说明书进行。
肌酸激酶测定方法操作规程
肌酸激酶(CK )测定方法操作规程【产品名称】通用名称:肌酸激酶(CK )测定试剂盒(IFCC 法)使用说明书【预期用途】该试剂盒采用IFCC 法,用于体外定量测定人 血清或血浆中肌酸激酶的活力o 【检验原理】+NADH+H+【主要组成成份】Ri :咪哇缓冲液20 mmol/LADP + CK肌酸+ATPATP+葡萄洽=>己糖激酶ADP+葡萄糖-6-磷葡萄糖-6-痴酸涂AD+G-6-PDH6-磷酸葡萄糖酸100 mmol/L葡萄糖N-乙酰半胱氨酸(NAC )0.2 mmol/L 乙酸镁10 mmol/L EDTA 2 mmol/L NADP 2 mmol/L AMP5 mmol/L 己糖激酶>4 U/mL R2:磷酸肌酸30 mmol/L2 mmol/LADPG-6-PDH >2.8U/mL*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2〜8°C保存有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存,在2°C~8°C可稳定30天。
试剂不可冰冻。
【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680 型全自动生化分析仪。
假设需自动生化分析仪应用参数,请随时和公司联系。
建议用户在不同仪器上使用本产品时,根据实验室情况进行验证。
【样本要求】新鲜血清或血浆,样本收集后尽快测定,防止污染。
样品在2°C~8°C保存7天内或25°C保存24小时活性损失2%。
【检验方法】试剂准备R1:即用液体试剂R2:即用液体试剂测定条件* A A/min=A A/min 样本管一AA/min 空白管*试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。
校准校准品类型S1:生理盐水S2:迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求(包括但不限于以下情况)更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时,建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。
肌酸激酶数值标准
肌酸激酶数值标准《肌酸激酶数值标准》前言嘿,朋友们!今天咱们来聊一聊肌酸激酶数值标准这个事儿。
你可能会想,这肌酸激酶是啥呀?为啥要有个数值标准呢?其实啊,这肌酸激酶在我们身体里可起着重要的作用,而这个数值标准就像一把尺子,能帮医生判断我们的身体是不是出了啥问题呢。
就好比汽车有各种仪表来显示是不是正常运行一样,咱们身体里的这些指标也是健康的“仪表盘”。
那下面咱们就好好来了解一下这个肌酸激酶数值标准吧。
适用范围1. 医疗诊断- 在医院里啊,这个肌酸激酶数值标准适用的场景可多了去了。
比如说,当有人感觉肌肉无力、疼痛,或者是有心脏病发作的症状时,医生就会检查肌酸激酶的数值。
这就像侦探破案要找线索一样,医生通过这个数值来判断是不是肌肉或者心脏出了毛病。
我有个朋友啊,前阵子突然胸口疼,去医院后医生第一件事就是给他查肌酸激酶数值呢。
2. 运动健康监测- 对于那些爱运动的朋友来说,这个标准也很有用哦。
要是你进行了高强度的运动训练,肌肉可能会受到一定的损伤,这时候肌酸激酶数值可能就会升高。
所以呢,通过监测这个数值,可以了解自己的身体对运动的适应情况。
比如说,一些运动员在参加完马拉松比赛或者高强度的力量训练后,会定期检查肌酸激酶数值,看看自己的肌肉恢复得怎么样,是不是过度疲劳了。
3. 疾病监测与预后评估- 在一些疾病的治疗过程中,肌酸激酶数值标准也发挥着作用。
像患有心肌梗死的患者,在治疗期间,医生会持续关注这个数值的变化。
如果数值慢慢降下来,那就说明治疗有效果,心脏在慢慢恢复;要是数值一直居高不下或者又升高了,那可能就意味着病情还不稳定或者有新的问题出现了。
术语定义1. 肌酸激酶(CK)- 肌酸激酶呢,说白了就是一种存在于我们身体细胞里的酶。
这个酶主要在肌肉细胞里工作,像我们的骨骼肌(就是那些能让我们活动胳膊腿的肌肉)、心肌(心脏的肌肉)还有平滑肌(像胃肠道这些地方的肌肉)里都有它的身影。
它就像一个勤劳的小工人,参与身体里的能量代谢过程。
肌酸激酶同工酶标准物质
肌酸激酶同工酶标准物质
肌酸激酶同工酶标准物质是指用于检测肌酸激酶(creatine kinase,CK)同工酶活性的一种参考物质。
肌酸激酶是一种酶,参与细胞内的能量代谢,尤其在肌肉组织中活跃。
肌酸激酶由三种同工酶组成,分别是肌酸激酶-1(CK-MB)、肌酸激酶-2(CK-MM)和肌酸激酶-3(CK-BB)。
不同的组
织和疾病状态下,这些同工酶的活性比例会发生变化,从而提供了诊断某些疾病的指标。
肌酸激酶同工酶标准物质通常是一种纯化的酶蛋白,可以用于校准和标定测量肌酸激酶同工酶活性的方法和仪器。
常见的肌酸激酶同工酶标准物质来源于人类或动物组织,通过提取和纯化获得。
使用肌酸激酶同工酶标准物质可以确保测量结果的准确性和可比性,从而提高对肌酸激酶相关疾病的诊断和监测的可靠性。
肌酸激酶的临床检验分析
肌酸激酶的临床检验分析摘要】目的讨论肌酸激酶的检验。
方法对采集到的样本进行检验。
结论血清中CK酶活性在心肌梗死发生后3~8h就开始增高,较其他血清生化指标出现早,10~36h达高峰。
AMI时CK升高至少要在参考值2倍以上才有诊断意义。
但该酶生物半衰期短,活力增高持续2~4d后就恢复正常,不适于晚期诊断,参考时需考虑时间因素。
【关键词】肌酸激酶检验(一)生化特性及病理生理在人体三种肌肉组织(骨骼肌、心肌、平滑肌)中都含有大量CK。
该酶存在于细胞质中,催化肌肉中肌酸与ATP之间高能磷酸键转换生成磷酸肌酸和ADP的可逆反应,为肌肉收缩提供能量。
CK存在于需要大量能量供应的组织,除肌肉组织外,还常见于肾脏、脑组织。
CK相对分子质量86 000,在肝脏被灭活清除。
CK水平在人群中呈非正态分布,受到性别、年龄、种族及生理状态的影响。
男性因为肌肉容量大,血清CK活性要高于女性。
新生儿出生时,由于骨骼肌受到损伤和短暂的缺氧,可引起CK释放,故血清 CK水平为成年人2~3倍,出生后7个月可降至成年人水平。
女性的CK水平在成年之前呈下降趋势,成年后变化不大。
男性的CK水平在15~20岁期间处于生理高峰期,其后随年龄增大呈缓慢下降趋势。
老年人以及长期卧床者由于肌肉容量减低或肌肉活动少,其CK水平低于成年人水平。
白种人平均CK水平低于黑种人。
CK的酶蛋白由M和B两种亚基组成,不同亚基的组合将CK分为CK-MM,CK- MB,CK-BB三种同工酶。
骨骼肌中99%为CK-MM,只含有少量CK-MB,胎儿肌肉及富含平滑肌的器官中CK-BB含量较高,脑组织中CK-BB含量也明显高于其他组织。
心肌中CK-MM占55%,CK-MB约占45%,所以心肌是唯一含CK-MB较高的器官。
20世纪60年代,CK开始被应用于急性心肌梗死的诊断和治疗效果观察。
CK、CK-MB对于诊断AMI贡献巨大,是世界上应用最广泛的心肌损伤诊断指标。
(二)血清总CK的检测1.测定方法目前主要采用连续监测法(速率法),可测定正向反应物,也可测定逆向反应物,逆向反应因速度较快,酶敏感性高,是目前国内推荐的主要方法。
免疫抑制法测定肌酸激酶原理
免疫抑制法测定肌酸激酶原理
肌酸激酶(CK)是一种广泛存在于肌肉、心脏和脑组织细胞内的酶,主要参与细胞能量代谢,是肌肉组织损伤时释放到血液中的标志物之一。
CK可以分为肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK-MM)和脑型肌酸激酶(CK-BB)三种同工酶,其中CK-MB在心肌组织中含量较高,可用于急性心肌梗死(AMI)的诊断。
免疫抑制法是一种用于测定CK-MB 的方法。
在免疫抑制法中,先将患者血清中的CK-MB与特异性抗CK-MB抗体结合。
然后将含有少量CK-MB的荧光素底物添加到体系中。
CK-MB与酶缓冲液中的酶结合,荧光素底物与酶结合,形成一种酶底物复合物,荧光素底物通过与此复合物反应而发出固定波长的荧光信号。
最后,通过荧光读数器读取荧光信号强度,并通过对照试剂盒提供的标准曲线计算出血清中的CK-MB浓度。
总之,免疫抑制法是测定CK-MB的一种方法,基于酶免疫学原理,通过抑制未结合到抗体的自由酶活性来减少误差。
该方法可以用于AMI的早期诊断和疾病监测,具有灵敏度高、特异性好、快速、易操作等优点,被广泛用于临床实践中。
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A n i m a l H u s b a n d r y nd a F e e d S c i e n c e
几 种肌 酸激酶 的检测 方法
杨 鼎 , 赵世 华 , 吴 江鸿 , 王晓娟 , 祁云 霞 , 孙海莲 。
( 1 . 中 国科 学 院 内蒙古 草 业 研 究 中心 , 内蒙 古
Ac c o r d i n g t o t h e v a ia r t i o n o f s u b u n i t s a n d d i s t i r b u t i v e l o c a t i o n . t h e i s o e n z y me o f CK c a n b e c l a s s i i f e d i n t o f o u r t y p e s : mu s c u l a r
V e t e i r n a r y M e d i c i n e , I n n e r Mo n g o l i a A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l &A n i m a l H u s b a n d y r S c i e n c e s 。 H o h h o t 0 1 0 0 3 1 . C h i n a )
Ab s t r a c t : C r e a t i n e k i n a s e f C K1 p l a y s a n i mp o r t a n t r o l e i n a n i ma l c e l l me t a b o l i s m p r o c e s s nd a h a s 4 k i n d s o f i s o e n z y me .
( 1 . I n n e r Mo n g o l i a P r a t a c u h u r e Re s e a r c h C e n t e r ,C h i n e s e A c a d e my o f S c i e n c e s , Ho h h o t 01 0 0 3 1 . Ch i n a: 2 . I n s t i t u t e o f
以期 为今后 C K检 测 方 法 的 改 良和 创 新 提 供 一 定 的 理 论 基 础
关键词 : 肌酸 激 酶 ; 质 量法 ; 酶法 ; 电泳 法 ; 色谱法 ; 比较 中 图分 类 号 : R 4 4 6 . 1 文献标识码 : A 文章顺序编号 : 1 6 7 2 — 5 1 9 0 ( 2 0 1 5 ) 0 8 一 O 0 1 6 — 0 3
0 1 0 0 3 1 )
呼和浩特
0 1 0 0 3 1 ; 2 . 内蒙 古 农 牧 业 科 学 院兽 医研 究 所 , 内 蒙古
呼 和 浩 特
摘要: 肌 酸激 酶 ( c r e a t i n e k i n a s e , C K) 是动 物细胞 代谢 过程 中非 常 重要 的一 种激 酶 , 有 4种 同工酶 。 根 据 亚基 和 分 布 位 置 的 不 同 , C K 同工 酶 可 分 为 : 肌 肉型( MM) 、 杂化型 ( MB) 、 脑型 ( B B) 以及 线 粒 体 型 ( Mi Mi ) 。 人和 动物 发 生疾病 时 , 机体 内的 C K通常会 有 显著提 高并 能被检 测到 , 因此 经 常被 应 用 于人 和 动物 疾病 的早期诊 断。对几 种 常用的 C K检 测方 法的原 理进 行 了概 述 , 并对 不 同检 测 方法进行 了比较 .
t y p e( MM) , h y b i r d t y p e( MB ) , b r a i n t y p e( B B ) a n d m i t o c h o n d r i a l t y p e( Mi Mi ) . S i n c e C K c a n r e a c h a h i g h l e v e n i ma l g e t s i c k . S O i t i s c o mmo n l y u s e d a s a s i g n o n e a r l y d i a g n o s i s o f d i s e a s e . T h e p i r n c i p l e o f s e v e r a l C K d e t e c t i o n me t h o d s w e r e i n t r o d u c e d a n d c o mp a r e d , S O a s t o l a y a b a s i s f o r i mp r o v e me n t a n d i n n o v a t i o n o f C K d e t e c t i o n me t h o d .
I n t r o d u c t i o n o f S e v e r a l De t e c t i o n Me t h o d s f 0 r Cr e a t i n e Ki n a s e
Y A N G D i n g , Z H A O S h i - h u a 2 , wU J i a n g - h o n g , WA N G X i a o , j u a n , Q I Y u n - x i a , S U N H a i — l i a n