计算机辅助设计的新型胰蛋白酶抑制剂的合成及其抑制活性
大豆中的胰蛋白酶抑制剂及其提取方法解读
大豆中的胰蛋白酶抑制剂及其提取方法解读大豆中的胰蛋白酶抑制剂是一种重要的生物活性物质，它能够抑制胰蛋白酶的活性，从而保护大豆不受胰蛋白酶的分解。
这种抑制剂在食品、医药等领域都有广泛的应用。
为了提取大豆中的胰蛋白酶抑制剂，可以采用以下步骤：1. 制备大豆胰蛋白酶抑制剂初级上清液：将干大豆加水浸泡过夜后磨碎并充分混匀成浆液，然后搅拌后加溶液用3层以上的纱布过滤，得到滤液和豆渣。
接着以2-5:1.5的比例添加柠檬酸钠和磷酸三钠，直至滤液ph值达到4.5～6.0，对添加柠檬酸钠和磷酸三钠后的滤液进行浸提并水浴，水浴后离心去除杂蛋白，得到初级上清液。
2. 制备大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物：将初级上清液加热，并在上清液中添加硫酸铵，直至硫酸铵浓度30%，搅拌后得到次级搅拌液。
将次级搅拌液用滤纸过滤去脂，并将滤液静置过夜，即可得到粗提上清液。
在粗提上清液中加入硫酸铵，直至硫酸铵浓度50%，搅拌沉淀后得到大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物。
以上步骤完成后，就可以提取到大豆中的胰蛋白酶抑制剂。
这种抑制剂的应用可以保护大豆不受胰蛋白酶的分解，同时也可以应用到食品、医药等领域中。
在提取过程中，需要严格控制各个步骤中的条件和操作，以保证提取的质量和效率。
除了作为食品和医药领域的原料，大豆胰蛋白酶抑制剂还可以用于研究胰蛋白酶的活性及其作用机制。
通过进一步纯化大豆胰蛋白酶抑制剂，可以获得更高纯度的抑制剂，从而更好地了解其结构和功能。
此外，大豆胰蛋白酶抑制剂的研究还可以与人工智能技术相结合，开发出更加智能化的方法来提取和纯化这种抑制剂。
例如，可以利用人工智能算法预测大豆胰蛋白酶抑制剂的活性，优化提取和纯化过程，提高抑制剂的产量和质量。
此外，大豆胰蛋白酶抑制剂的活性研究还可以与营养学、生理学等领域相结合，研究其在人体内的生理作用和营养价值。
例如，可以研究大豆胰蛋白酶抑制剂对人体肠道健康的影响，以及其在预防和治疗某些疾病方面的应用。
同时，大豆胰蛋白酶抑制剂的研究还可以与农业领域相结合，开发出更加环保和高效的农业生产方式。
蛋白酶抑制剂
不良反应
Joan Stephenson博士在美国医学会《医学新闻及观点》杂志上发表文章称，美国、加拿大及澳大利亚的研 究者发现，一些接受抗HⅣ治疗的患者在服用蛋白酶抑制剂后出现了脂肪的异常分布。
研究者发现，在服用3个月或以上蛋白酶抑制剂后，一部分患者在体重不变的情况下，出现了脂肪组织的异常 沉积，其表现为“水牛背”（即颈底部的脂肪组织）、壶状腹或“满月脸”。而另外一些患者在服用蛋白酶抑制 剂后却出现了四肢或脸部的脂肪消耗。上述症状在柯兴综合征患者中十分常见。该综合征是由于血清皮质酮异常 升高引起的，但在这些患者中没有发现血清皮质酮升高的证据。引起脂肪异常沉积的蛋白酶抑制剂至少有4种： indinavir、nelfinavir、ritonavir和saquinavir。美国国家健康署（NIH）的研究人员通过对10位出现腹围 增大的患者进行CT扫描发现，在服用indinavir后，脂肪并不是沉积于皮肤下，而是沉积在腹部脏器周围。蛋白 酶抑制剂究竟是如何引起上述症状的原因尚不清楚。一些研究显示蛋白酶抑制剂可能会影响代谢功能，引起甘油 三脂及血糖的升高、胰岛素抵抗以及糖尿病，但在这些出现脂肪沉积的患者并没有发现这些异常。同样，脂肪沉 积在换药后是否是可逆的也尚不清楚。
胰蛋白酶抑制剂及其抗肿瘤活性研究进展
胰 蛋 白酶抑 制 剂 （ｙｓ ｈｂｔｒＴ１ 一 个 功 ｔ ｐｉ ｉ ｉｉ ，Ｉ是 ｒ ｎｎ ｏ
能上 的概念 ，泛指具有胰蛋白酶抑制作用的多肽或 蛋 白质 ， 对胰蛋白酶 、 纤溶酶 、 溶酶体酶等多种蛋 白 酶均有抑制作用。 获得胰蛋 白酶抑制剂 的传统来源 ， 主要是豆科植物和动物内脏。随着实验技术的发展 和研究的深入 ， 胰蛋 白酶抑制剂的来源越来越广泛 ， 获得途径也越来越多。
白酶抑制 剂 ｃｃｒｉ ａｉａｔ ｐｉ ｈｂｔｒ ＭＴ） ｕｕｂｔ ｍ ｘｍ ｙｓ ｉ ｉｉ ． Ｉ ａ ｒ ｎｎ ｏＣ 、 从 牛 肺或 牛 胰 中提 取 的抑 肽 酶 （ ｒｔ ｉ）从 人 尿 中 ａ ｏｉ ｎ、 ｐ ｎ
提取 的人尿胰蛋 白酶抑制剂（ ｎｒ ｔ ｐｉ ｉ ｉ ｔ ． ｕ ａ ｙｓ ｈ ｉｒ ｉ ｒ ｙｒ ｎ ｎ ｂ ｏ ＵＩ Ｔ） 等。另外， 还有人工合成的胰蛋 白酶抑制剂 ， 如 甲磺 酸胍 己苯 酯（ ｂｓｔ ｅｙ ｔ 、ａ ｏｔ ｅ Ｓ— ｇ ｅ ｅ ｓ ａ ）Ｃ ｍ ｓ ｔ ｙ ａ ａ ｍ ｌｅ ａ Ｍｅ
．
对热、 碱 的稳定性 比后一类抑制剂更强。 酸、 １ 根据来源不同， ． ２ 胰蛋 白酶抑制剂可分为多种类 型， 如从黄豆中提取 的大豆胰蛋 白酶抑制剂（ ｙｅｎ ｓ ｂａ ｏ ｔ ｐｉ ｉｈｂｔｒ Ｂ Ｉ、从 南 瓜籽 中提取 的南 瓜胰 蛋 ｒ ｓ ｉｉ 。 Ｔ） ｙ ｎｎ ｏＳ
２ 植物 胰 蛋 白酶抑 制剂 及 其活 性
两个活性中心 ，分别与胰蛋 白酶和糜蛋 白酶结合 。 另一类是 Ｋ ｎ ｚ 抑制剂 ｆｕ ｉ ｙｓ ｈ ｉ ｒ ｕｉ 类 ｔ Ｋ ｎ ｚｒ ｉ ｉ ｉ ｔ － ｔｔ ｐ ｎ ｎ ｂ ｏ Ｋ Ｉ 相对分子质量介于 ２ ５ １ Ｔ） ， ０ ２ ｘ ０ 之间 ， 只有一个 活性 中心 ，特异地与胰蛋白酶作用。前一类抑制剂
蛋白酶抑制剂
蛋白酶抑制剂引言蛋白酶抑制剂是一类用于抑制酶活性的化合物，其中蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶。
蛋白酶在生物体中起着重要的调控作用，参与多种生物反应的调节和控制。
然而，在某些情况下，蛋白酶的过度活化可能导致疾病的发生和发展。
因此，研发蛋白酶抑制剂成为一种重要的医药研究方向。
本文将介绍蛋白酶抑制剂的基本分类、作用机制以及在药物研发中的应用。
分类根据蛋白酶抑制剂对酶活性的抑制方式，蛋白酶抑制剂可分为两大类：1.反式抑制剂：反式抑制剂与酶结合后形成稳定的酶-抑制剂复合物，从而阻止酶催化反应的进行。
典型的例子是蛋白酶抑制剂Aprotinin，它通过与蛋白酶结合形成稳定的复合物，从而抑制蛋白酶的活性。
2.逆式抑制剂：逆式抑制剂通过与酶催化中心结合，改变酶的构象和活性。
这类抑制剂通常是模拟酶底物的分子结构，与酶催化中心发生特异性的相互作用。
逆式抑制剂的典型例子是酶的底物类似物，如硫氰酸酰胺（p-Tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone，TPCK）可以选择性地抑制胰蛋白酶的活性。
作用机制蛋白酶抑制剂能够通过不同的机制来抑制蛋白酶的活性。
以下是几种常见的作用机制：1.受体拮抗作用：某些蛋白酶抑制剂能够与蛋白酶结合并阻断其与受体的相互作用，从而抑制了受体的活化。
这种机制在很多药物设计中都有重要的应用。
2.亲和力增强：一些蛋白酶抑制剂可以增强与酶的结合亲和力，从而阻止酶底物结合，进而抑制了酶的活性。
3.酶底物竞争：逆式抑制剂通过与酶催化中心竞争底物结合位点，从而阻断底物与酶的结合，进而抑制了酶活性的发生。
4.构象改变：某些蛋白酶抑制剂能够与酶发生特异性相互作用，改变酶的构象从而影响酶的活性。
应用蛋白酶抑制剂在医药领域有着广泛的应用。
以下是一些典型的应用示例：1.抗癌药物：蛋白酶在肿瘤细胞中起着重要的作用，因此蛋白酶抑制剂被广泛用于抗癌药物的研发。
例如，蛋白酶抑制剂Paclitaxel可以通过抑制肿瘤细胞内的蛋白酶活性来抑制细胞的增殖。
具有新型核心结构的肽类BACE1抑制剂的设计、合成及活性评价
分辨荧光法测定 目标肽体外对 Ｂ Ｃ １的抑制作用．所合成 化合物对 Ｂ Ｃ １ ＡＥ Ａ Ｅ 有一定 的抑制作用 ， 其中两个 化 合物 Ｌ — ４１和 Ｌ — Ｘ Ｋ ＭＸ Ｋ Ｍ ４２与先导化合 物的活性 相近 ， 其核 心结 构 由 ＬＰ ｅ ｒ —ｈ — Ｐｏ组成 ，可以模 拟 Ｂ Ｃ １ Ｄｅ１ ， （ ｃｅ ） 同时 Ｐ ｓ ｎ 的苯环 与酶 Ｓ 口袋存 在疏水 作用 ． 制剂 中除 Ｐ ｓ 抑 ｎ 以外 的 各种氨基 酸残基 与酶 的活性 中心 也存 在相 互作 用 ．已报道 的肽类 Ｂ Ｃ １抑 制剂 中引入 的 过渡 态类 似 ＡＥ 结构大多 为酰胺结 构 的直 链型生 物 电子 等排体 ， ａｅｓ ｎ课题组 ¨ Ｈ ｎｓｉ ａ 以 Ｏ ９ － Ｍ ９２为先 导物 ， 在酶切 位点
的催 化 中心 与底 物相 互 作 用 的 过 渡 态 ； 含有 该 结 构 的肽 序 列 ， 望 成 为 研 究 肽类 Ｂ Ｅ 有 ＡＣ Ｉ抑 制剂 的另 一 途 径 ，
应用 Ａ ｔ ｏｋ４将所合成化合物与 Ｂ Ｃ １ ｕ ｄｃ ｏ Ａ Ｅ 进行对接 ， 结合体外活性测试结果 ， 对构效关 系进行 了初步探讨 ． 先导化合物及 目标肽用 固相法合成 ， Ｒ — Ｐ Ｃ测定纯度 ，Ｅ Ｉ 经 ＰＨ Ｌ Ｓ— ＭＳ确定 分子量．
渡态 ， 而抑 制 Ｂ Ｃ １ 从 Ａ Ｅ ．为 寻 找新 结 构 的 Ｂ Ｃ １ 制 剂 ， 研 究 以 Ｋ － ８为 先 导 化 合 物 ，分 别 或 同 时 引 ＡＥ 抑 本 ＭＩ ０ ０
入 ４羟基或氨基取代的脯氨酸及苯丙氨酸 ， 一 筛选功能基 的优势构象使其与酶形成氢键 ， 并模拟 Ｐ ｓ ｎ 的疏水作
胰蛋白酶抑制因子的活性测定方法
Tro缓 冲溶液 ,在 涡旋搅
拌器 上 搅拌 3min,然 后加入 10.00ml Tro缓 冲溶液 t室 涅 下静止 10min,待 大部 分固体絮状 物质凝集下来后用滤纸过滤 (豆 粕样 品提取液再用 Tr。 缓冲溶液稀释 0o或 zO倍 )c
4反 应
4,1样 品空 白和试剂 空 白:分 别将 2.00ml样 品稀释液和 2.∞ ml蒸 镭水加 入 1omI试 管 中 。
备注 :由 于分析操作存在难 以避免 的随机误差 ,造 成 同一 样 品在不 同时间 (人 )检 测 时产 生 偏差 ,为 避免分析过程 中的随机实验误 差 ,我 们提示您用 同一 豆粕 样 品做参 比对照 。
■
胰蛋 白酶抑制因子活性测定方法
1原 理
胰蛋 白酶抑制剂 能够 和骧蛋 白酶结合 ,通 过 测定底物
(BAPA)被 未结合 的胰 蛋 白酶酶
解生成 的 产物一对硝基苯孩溶液 妁吸光 度 ,然 后 以它和未加抑制剂 的标准吸光度之差来表示 被抑制 的胰蛋 白酶活性
c
2材 料
2.1Tro缓 冲溶液 :溶 解 6.050g羟 甲基 氨墓 甲烷 itHs)和
试管 内 ,加 入
5。
2,∞ mI稀 释液于 10ml
00ml BAPA溶 液后在 37℃ 下保温 ⒛ min,加 入 2.∞ ml猪 咦蛋 白酶溶液 ,然 后
在水浴 中保温 10min,再 加
1m13o%醋 酸溶液 中止反应 。
5测 量
在
3gsnm(或 410nm)下 用试剂空 自校零和测定标准 、样 品和样 品空 白的吸光值 ,计
在 夕 ℃下保温 ⒛ min,各 加入 5,00ml BAPA溶 液 ,混 合 后在 37℃ 下 倮温 10min,分 别加入
胰蛋白酶抑制剂
植物化学物质，如植酸和胰蛋白酶抑制剂等。 胰蛋白酶抑制剂(STI)具有特殊效能，其生物活 性对治疗由营养过剩产生的疾病(如高血压和癌
症)有促进作用。
• 大豆胰蛋白酶抑制剂是具有抑制胰 蛋白酶作用的类物质，可以调控生 物体内生理反应，具有多种药理活 性,包括抗炎、抗病毒、抗肿瘤等。 对结肠癌、前列腺癌、乳腺癌，子 宫内膜癌，人宫颈癌的研究已经证 实大豆胰蛋白酶抑制剂有明显的抗 肿瘤作用。
大豆胰蛋白酶抑制剂 (soybean trypsi inhibitor，简称STI)是大豆 中主要抗营养因子，是一 种多肽类或蛋白质。组成 多肽氨基酸残基在72～ 197个左右，氨基酸残基 组成及性质差异，决定大 豆胰蛋白酶抑制剂差异。 大豆中胰蛋白酶抑制剂约 有7～1O种 ，目前，从大 豆中已分离出两种类型蛋 白抑制剂：即Kunitz型胰 蛋白酶抑制剂(KsTI)和 Bowman．Birk型胰蛋白 酶抑制剂(BBI)。
作用机理
这两种抑制剂使酶失活机理为：大豆胰蛋白 酶抑制剂链环结构中暴露氨基酸残基(活性部 位)与胰蛋白酶中氨基酸发生络合作用，使蛋 白酶失去酶解能力，抑制该酶活性，防止蛋 白质消化成氨基酸，这样就去除了快速生长 的癌细胞所需要的氨基酸。
现状及前景
目前临床上广泛应用于 急性胰腺炎、外科手术、 脑血管疾病、妇产科疾 病和休克。因此，胰蛋 白酶抑制剂是人类重要 的生化试剂和药物资源。
• 但现在胰蛋白酶抑制剂在抗癌方面只在 临床试验阶段，实验室研究已取得成功， 所以开发这方面的药物很有前景。
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胰蛋白酶抑制剂的研究进展
１ ～ ． ６ ０ ３ ３ ７×１ Ｕ 这 ７种 抑制剂 都 强烈 抑制 ０ ０ ， 【 Ｂ一 牛胰 蛋 白酶 ， 而对 牛糜 蛋 白酶 抑制则 很弱 ．
１２ 从 人尿 中提取 ．
人 尿胰 蛋 白酶抑 制 剂 （ Ｕ Ｉ 是一 种 丝 氨 酸 蛋 Ｈ Ｔ）
１ 胰 蛋 白酶 抑 制 剂 的 制 备
１ １ 从动 物脏器 中提 取 ．
牛肺胰 蛋 白酶 抑制 剂 （ 称 抑 肽 酶 ） 也 的分 子 质 量 为 ６ ２×１ ’ ， 由 ５ ． ０ Ｕ是 ８个氨 基 酸残 基组 成 的碱 性 多肽 ． 的一级结 构和 二级结 构均 已阐明 ， 子 内有 它 分 ３对二硫 键 ， 个 分 子 呈 梨 型 ， 性 中心 为 赖 氨 酸 ， 整 活 位 于分子 的顶端 ． 从分 子质量 看有 两类 ， 一类 是分 子 质量 较大 的 ； 类是分 子质量 较 小的 ． 一 宋扬 等 将 化学 改性 与修 饰壳 聚 糖体 ， 价 偶 共 联 配基 牛胰蛋 白酶 ， 成 固定 化酶 为抑 肽 酶 亲和 吸 制 附剂 ， 直接 对黄 牛肺提 取液一 步层 析纯 化 ， 超滤 脱 再 盐、 浓缩 、 去热原 ， 冻干 即抑肽 酶 ． 肽 酶 比活 ５ ７× 抑 ．
胰 蛋 白酶 抑 制 剂 的 研 究 进 展
谭 竹钧 ， 明 才 ， 沈 张 峰 ， 华 平 胡
（ 广东工业 大学 轻工化工学 院， 广东 广州 ５ ０ ９ ） １０ ０
摘要 ： 胰蛋 白酶抑制剂是对胰蛋 白酶具有抑制作用 的一类物质 ． 综述 了近几年来 ， 用不 同原料制备胰蛋 白酶抑制剂 的研 究进展及 临床应用． 关键词 ： 胰蛋 白酶抑制剂 ； 因工程 ； 基 治疗疾病
一种胰蛋白酶抑制剂活性的检测方法[发明专利]
![一种胰蛋白酶抑制剂活性的检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/b68b0811bdd126fff705cc1755270722192e5966.png)
[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公布说明书[11]公开号CN 101191142A [43]公开日2008年6月4日[21]申请号200710159112.1[22]申请日2007.12.21[21]申请号200710159112.1[71]申请人中国科学院沈阳应用生态研究所地址110016辽宁省沈阳市沈河区文化路72号[72]发明人徐慧 李启平 张忠泽 张颖 李慧 史荣久 韩斯琴 杨伟超 [74]专利代理机构沈阳科苑专利商标代理有限公司代理人许宗富 周秀梅[51]Int.CI.C12Q 1/37 (2006.01)权利要求书 1 页 说明书 4 页 附图 1 页[54]发明名称一种胰蛋白酶抑制剂活性的检测方法[57]摘要本发明涉及酶催化/酶抑制生物技术领域，具体为一种胰蛋白酶抑制剂活性的检测方法。
检测具体过程主要为在胰蛋白酶反应体系中分别加入胰蛋白酶抑制剂提取物和胰蛋白酶作用底物，待反应10－15分钟后，加入反应终止液，而后测定反应终溶液在410nm波长下的吸光度值，根据抑制剂的加入量与吸光度值绘制出曲线，确定胰蛋白酶抑制剂的活性；其中胰蛋白酶作用底物为BAPNA溶液，加入量为每毫升胰蛋白酶反应体系中0.5－1.0ml。
本发明使用仪器简单、操作方便、反应灵敏度高，适用于各类胰蛋白酶抑制剂活性的测定。
200710159112.1权 利 要 求 书第1/1页 1.一种胰蛋白酶抑制剂活性的检测方法，其特征在于：胰蛋白酶反应体系中分别加入胰蛋白酶抑制剂提取物和胰蛋白酶作用底物，待反应10-15分钟后，加入反应终止液，而后测定反应终溶液在410nm波长下的吸光度值，根据抑制剂的加入量与吸光度值绘制出曲线，确定胰蛋白酶抑制剂的活性；其中胰蛋白酶作用底物为BAPNA溶液，加入量为每毫升胰蛋白酶反应体系中0.5-1.0ml。
2.按权利要求1所述的胰蛋白酶抑制剂活性的检测方法，其特征在于：所述反应温度为36-38℃。
蛋白酶抑制剂种类
蛋白酶抑制剂种类
蛋白酶抑制剂是一类能够抑制蛋白酶活性的物质，主要存在于某些植物、动物和一些微生物中。
以下是一些常见的蛋白酶抑制剂种类：
1.胰蛋白酶抑制剂：抑制胰蛋白酶活性的蛋白质，是植物中广泛存在的一类蛋白质。
它们可以抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧基肽酶等，从而影响这些酶所催化的蛋白质的水解。
2.丝氨酸蛋白酶抑制剂：这是蛋白质水解酶中的一大类，主要包括抑胃素、抑胰蛋白酶、抑糜蛋白酶等。
它们能可逆地与相应的丝氨酸蛋白酶形成共价键，因而能够阻断某些内肽酶催化蛋白质水解的能力。
3.天冬氨酸蛋白酶抑制剂：主要存在于豆科植物中，能够抑制枯草杆菌蛋白酶的活性。
4.半胱氨酸蛋白酶抑制剂：这种抑制剂可以与半胱氨酸蛋白酶形成共价键，因而能够抑制这些酶的活性。
5.金属蛋白酶抑制剂：这类抑制剂主要通过与金属蛋白酶的活性中心发生相互作用，从而抑制其活性。
这些抑制剂在生物体的生长、发育和防御等方面有着重要的作用。
同时，在食品工业和医药工业中，它们也有着广泛的应用。
例如，某些蛋白酶抑制剂可以作为防腐剂，用于延长食品的保质期；在医药方面，也可以利用这些抑制剂来研发新药或探索新的治疗手段。
此外，还有一种与蛋白酶抑制剂相似的物质叫做抗蛋白酶，其主要作用是抑制或灭活蛋白酶的活性，以避免食物中的蛋白质被过度分
解或破坏。
例如，胰凝乳蛋白酶抑制剂就是一种抗胰蛋白酶，能抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性，从而保护消化道中的蛋白质。
如需获取更多有关蛋白酶抑制剂的信息，建议查阅相关文献或咨询生物学家获取帮助。
胰酶合成活化及胰腺防止自身消化的生理机制
胰酶合成活化及胰腺防止自身消化的生理机制下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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胰蛋白酶抑制剂及其抗肿瘤活性研究进展
胰蛋白酶抑制剂及其抗肿瘤活性研究进展综述食品研究与并发2o07.V o1.28.NO04胰蛋白酶抑制剂及其抗肿瘤活性研究进展李夏,曾名勇,董士远,刘尊英,宋宏霞(中国海洋大学食品科学与工程学院,山东青岛266003)摘要:简要综述近年来胰蛋白酶抑制剂特别是水生生物胰蛋白酶抑制剂的制备及其抗肿瘤活性方面的研究进展,并对今后的研究方向作了展望.关键词:胰蛋白酶抑制剂;胰蛋白酶;抗肿瘤活性THERESEARCHPR0GRESS0FTRYPSllHlBl'llURADllA'l'l一'l'UM0RACTlVlTY LIXia,ZENGMing-yong,DONGShi—yuan,LIUZun—ying,SONGHong-xia (CollegeofFoodScienceandEngineering,OceanUniversityofChina,Qingdao266003,Sha ndong,China)Abstract:Thisarticlebrieflysummarizestheresearchprogressofthepreparationoftrypsinin hibitorinaquaticorgannismsanditsanti—tumoractivityinthelastfewyears,andaswellasmakesanoutlookto theresearchdirectioninfuture.Keywords:trypsininhibitor;trypsin;anti-tumoractivity胰蛋白酶抑制剂(trypsininhibitor,TI1是一个功能上的概念,泛指具有胰蛋白酶抑制作用的多肽或蛋白质,对胰蛋白酶,纤溶酶,溶酶体酶等多种蛋白酶均有抑制作用.获得胰蛋白酶抑制剂的传统来源,主要是豆科植物和动物内脏.随着实验技术的发展和研究的深入,胰蛋白酶抑制剂的来源越来越广泛,获得途径也越来越多.1胰蛋白酶抑制剂的分类1.1按照氨基酸序列的同源性可将胰蛋白酶抑制剂分为两类:一类是Bowman-Birk类抑制剂fB0wlnan—Birkinhibitor,BBI1,相对分子质量介于610xl0,有两个活性中心,分别与胰蛋白酶和糜蛋白酶结合.另一类是Kunitz类抑制剂fKunitztrypsininhibitor-KTI),相对分子质量介于2025x10之间,只有一个活性中心,特异地与胰蛋白酶作用.前一类抑制剂基金项目:山东省科技发展计划项I~(031070114)作者简介:李夏(1981一),女(汉),在读硕士,研究方向:水产品高值化利用.对热,酸,碱的稳定性比后一类抑制剂更强.1.2根据来源不同,胰蛋白酶抑制剂可分为多种类型,如从黄豆中提取的大豆胰蛋白酶抑制剂(soybean trypsininhibitor.SBTI),从南瓜籽中提取的南瓜胰蛋白酶抑制剂cucurbitamaximatrypsininhibitor.CMTI),从牛肺或牛胰中提取的抑肽酶(aprotinin),从人尿中提取的人尿胰蛋白酶抑制剂(urinarytrypsininhibitor..UTI)等.另外,还有人工合成的胰蛋白酶抑制剂,如甲磺酸胍己苯酯(gabesatemesylate),CamostateMeSy—late等o2植物胰蛋白酶抑制剂及其活性关于植物胰蛋白酶抑制剂的研究主要集中在豆科植物胰蛋白酶抑制剂上,目前对于其作用机制已研究得较为明确.此外,几乎所有的葫芦科植物中都有丝氨酸蛋白酶抑制剂,能够抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的活性【l】.地瓜中的一种贮存蛋白质也具有胰蛋白酶抑制活性,能抑制内源丝氨酸蛋白酶活性[21.李一莉等[31利用多肽合成的方法人工合成了绿.==12oo7.vd.28.NO.04食品研究与开发综述豆胰蛋白酶抑制剂,这是目前非天然的最小多肽类抑制剂.该抑制剂仅由22个氨基酸残基组成,相对分子质量小,其中包括三对二硫键,活力与天然的26肽相当.有报道提出,低浓度的Bowman—Birk类抑制剂在动物体内对直肠癌,肝癌,口腔上皮癌和肺癌等多种癌症都有明显的抑制作用.另有报道,从大豆乳清废水中分离的胰蛋白酶抑制剂具有强抗癌活性且毒性小,因此,开发其抗癌活性具有十分重要的意义.3动物胰蛋白酶抑制剂及其活性动物内脏是提取动物胰蛋白酶抑制剂的主要实验材料.除了较常用的牛胰腺,猪胰腺以外,鸡肝中也存在着两种低相对分子质量的丝氨酸蛋白酶抑制剂[41,其中I型是一个单独的多肽链,对鸡,猪和牛的胰蛋白酶及人的血浆蛋白酶都有抑制活性,而Ⅱ型对所有来源的胰蛋白酶和人的组织蛋白酶C有抑制活性.近年来,动物肌肉,皮肤及其分泌物,寄生虫也逐渐成为制备胰蛋白酶抑制剂研究对象.从小鼠的心肌,骨骼肌和肌肉细胞质以及大鼠平滑肌中都分离出了胰蛋白酶抑制剂[51,且都具有丝氨酸蛋白酶抑制活性.蟾蜍ufoandrewsi)皮肤中存在一种胰蛋白酶抑制剂旧,为单链糖蛋白,能有效地抑制胰蛋白酶的催化活性.从家蝇(Haematobiairritans)的头胸部分离纯化出一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,能抑制牛胰蛋白酶,人的嗜中性粒细胞胰肽酶Em.杜惠芬等IS]证实,牛肺胰蛋白酶抑制剂能明显抑制肿瘤细胞降解基底膜的作用,对SPCA一1细胞株降解人脐静脉内皮细胞株(ECV一304.基底膜的抑制率达54%～61%;对宫颈癌UI4细胞株降解人脐静脉内皮细胞株(ECV一3o4)~底膜的抑制率达47% ～56%.Messina报道,牛肺胰蛋白酶抑制剂对B16黑色素瘤实验性肺转移有明显的抑制作用【9】,且其联合化疗药依托泊甙对小鼠Lewis肺癌的转移也具有抑制作用【-01.因此,牛胰蛋白酶抑制剂作为抗肿瘤药物具有广阔的开发前景.4海洋生物胰蛋白酶抑制剂提取及其活性4.1海洋生物体内胰蛋白酶抑制剂Masahiro等【"】从蓝绿藻(Microcystis础n,中得到两种胰蛋白酶抑制剂,即铜绿菌素98一A和98一B,两者对胰蛋白酶,血浆酶,凝血酶都有很强的抑制活性.海葵nthopleuraaffxanthogrammica)dO有2种蛋白酶抑制剂㈣,都能明显地抑制胰蛋白酶,而且I型抑制剂还能抑制仅一胰凝乳蛋白酶和胰肽酶E的活性.在椎实螺椰n0e的卵黄中含有由57个糖基化的氨基酸残基组成的胰蛋白酶抑制剂㈣,尤其是卵黄周围液体中的含量最大.鱿鱼(Todarodesp)肝脏中含有一种63xl03的胰蛋白酶抑制剂,能有效抑制胰蛋白酶的作用,并可抑制肌原纤维自身的溶解.Penaeusvannamei,P.monodon,P.stylirostris和califomiensisde等四种对虾体内都存在着胰蛋白酶抑制剂【,均对鳕鱼胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶有明显的抑制活性,但却不能抑制猪胰蛋白酶和牛胰蛋白酶.贻贝(MytilusCrassitestaLischke)中含有一种仅对胰蛋白酶特异性抑制的胰蛋白酶抑制剂阳,由253 个氨基酸组成的两条多肽链或亚基聚成,相对分子质量为32.1~10s.白姑鱼(M/cropogonopercularis)肌肉中存在一种蛋白酶抑制剂【堋,对丝氨酸蛋白酶有高度特异性,能抑制同种属鱼肉中的一种能强烈降解鱼肉肌原纤维的丝氨酸蛋白酶一蛋白酶I.在鲣鱼(K~suwoftpelain/s)卵中存在着一种39x10s的胰蛋白酶抑制神.剐,在体内以二聚体的形式存在,在pH4.0 ～10.0范围内有活性,当温度高于40℃时较大程度失活,在不同金属离子如l(+,Na+,M,Ca2+~在时其活性增强,而Cuz+的存在却导致其失活.4.2海洋生物血浆内胰蛋白酶抑制剂仅:一巨球蛋白2M)是重要的血浆蛋白之一,是一种高相对分子质量糖蛋白,含糖量约为8%～11%,相对分子质量725x10s,对酸和热敏感;pH4.0以下易失活,在pH5.08.4范围内比较稳定.:一巨球蛋白具有多种生理功能I嘲,能调节细胞内外的蛋白水解酶水平,清除血中多余的蛋白酶,抑制组织蛋白酶的活性,也是血纤溶酶的抑制剂.r巨球蛋白还可调节许多细胞因子的活性,进而参与肿瘤的转移,抑制和增殖调节.许多鲤科鱼的血浆具有抑制鳕鱼胰蛋白酶和牛胰蛋白酶活性的作用,是由于血浆中存在的巨球蛋白对胰蛋白酶有较强的抑制活性.黄素文等报道Iz",对七种常见的养殖鱼的血清胰蛋白酶抑制活性进行了比较,:一巨球蛋白活性由高到低依次为:黄鳝,草鱼,胡子鲇,加州鲈,鲢鱼,鳙鱼,鲫鱼,而且黄鳝和草鱼的活性明显高于另外几种鱼.牡蛎的血浆提取物中也存在着丝氨酸蛋白酶抑制剂和巨球蛋白[221.牡蛎的淋巴液中含有两种蛋白酶抑制剂[231,一种为小相对分子质量的丝氨酸蛋白食品研究与开发2007.V o/.28.NO.04酶抑制剂,一种为大相对分子质量的一巨球蛋白,都对胰蛋白酶有抑制活性.Elsayed等证明,软贝蛤(Myaarenaria)Ifll浆中的一巨球蛋白可以抑制恶性肿瘤的扩散.在恶性肿瘤的早期阶段,对胰蛋白酶,木瓜蛋白酶和胃蛋白酶都没有明显的抑制活性;而在恶性肿瘤的晚期阶段,对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶有明显的抑制活性.陈识杰等实,在离体培养下,oc2一巨球蛋白对SGC一7901胃腺癌细胞的迁移能力具有明显的抑制作用. 因此,一巨球蛋白可用于肿瘤治疗.5胰蛋白酶抑制剂的抗肿瘤机制胰蛋白酶抑制剂在临床上有广泛的应用,如治疗急性胰腺炎,心脏外科的应用,防治脑血管疾病,防治脑水肿,防治脑缺血和防治脑动脉瘤破裂后的迟发性脑血管痉挛,预防单侧肺缺血再灌注引起的损伤,抑制肿瘤细胞的浸润和转移等.其中,抑制肿瘤细胞的浸润和转移是胰蛋白酶抑制剂抗肿瘤活性的主要表现.肿瘤转移是肿瘤的恶性特征之一,是大多数肿瘤患者死亡的主要原因.肿瘤细胞浸润和转移的标志是细胞外基质中基底膜的破坏.肿瘤细胞对基底膜的浸润可分为粘附,溶解和转移三步,其中溶解过程是在蛋白酶作用下降解肿瘤细胞下方的基底膜. 细胞外基质中的基质蛋白质酶(基质金属蛋白酶,明胶酶和胶原酶等1和丝氨酸蛋白质酶(纤溶酶原激活剂,纤溶酶1都与肿瘤的侵袭和转移有着密切关系. 在许多肿瘤细胞中,基质金属蛋白酶,组织纤溶酶原激活剂和纤溶酶的表达都明显增强.胰蛋白酶可活化一些与肿瘤侵袭相关的蛋白酶,如尿激酶前体,基质金属蛋白酶等.从而导致肿瘤的浸润.纤溶酶是一种由肿瘤细胞分泌的蛋白分解酶,能与肿瘤细胞表面的受体结合,降解基质中的大多数成分,参与肿瘤细胞的浸润和转移过程.纤溶酶的活性与肿瘤细胞的浸润能力成正相关.人体内许多肿瘤细胞上都有胰蛋白酶抑制剂的受体,胰蛋白酶抑制剂与其结合能够调节纤溶酶的活性,抑制其对蛋白质的分解作用,阻断肿瘤细胞的浸润和转移过程,重新修复细胞屏障,从而抑制了肿瘤细胞的浸润和转移.6胰蛋白酶抑制剂的研究前景展望胰蛋白酶抑制剂具有多种生物学功能,如较强的抗肿瘤活性.目前,对于胰蛋白酶抑制剂的研究国内外有一定差距.某些国家已分离出纯度较高,相对分子质量较小,活性较明显的天然胰蛋白酶抑制剂,而且已经借助分子生物学的手段,其在体外进行了表达.我国对于它的研究大多局限于分离纯化及其多种生物活性的研究阶段,所获得的胰蛋白酶抑制剂的相对分子质量较大,对于其结构,功能关系的研究较少.因此,得到较小相对分子质量且抗肿瘤活性较高的肽类胰蛋白酶抑制剂,研究清其结构与功能的关系,是今后的主要研究方向之一.胰蛋白酶抑制剂在自然界的分布十分广泛,但是,目前胰蛋白酶抑制剂主要是从陆生植物,动物中获得,尤其是豆科植物和猪,牛内脏,从海洋生物中提取胰蛋白酶抑制剂的研究还不多,大部分集中于鱼类的血浆和皮肤分泌物上.事实上,进化地位低,具有原始特点的海洋无脊椎动物所含的抗肿瘤活性成分往往是低相对分子质量的,这些低分子广泛存在于生物体内的组织和体液中,是细胞内合成或生化代谢的中间产物,能选择性地抑制肿瘤细胞,对机体的正常细胞几乎没有毒副作用.因此,从低等海洋无脊椎动物中提取低相对分子质量的胰蛋白酶抑制剂,无疑为抗肿瘤功能性食品或药物的研究与开发提供了一条值得重视的新途径.参考文献:【1】JoanneMD,ReneeCS,GaryA T.Phloem-specificexpressionofthe pumpkinfruittrypsininhibitor[J1.Planta,2001,212(1):155-162.【2】Y aoPL,HwangMJ,ChenYM,eta1.Site—directedmutagenesis evidenceforanegativelychargedtrypsininhibitoryloopinsweet potatosporamin[J1.TheFederationofEuropeanBiochemical Societies,2001,496(1):134-138.【3】李一莉,林晓红,崔敷,等.绿豆胰蛋白酶抑制剂片段及其类似物的合成[J】.中国科学(B辑),1994,24(1):42-47.[4】AgnieszkaL,JolantaP,TadeuszW,eta1.Purificationoftwolow—molecular-massserineproteinaseinhibitorsfromchickenliver[J1. JournalofChromatography,1999,852(6):207—216.【5】SangorrinMP'MartoneCB,SanchezJJ.Identificationofamyofi—boundserineproteaseanditsendogenousinhibitorinmouse skeletalmuscle[J].TheInternationalJournalofBiochemistry&Cell Biology,2000,32(8):1213-1222.【6]ZhaoY,JinY,LeeWH.Isolationandpreliminarycharacterizationofa22-kDaproteinw.ithtrypsininhibitoryactivityfromtoadt~ufoandrewsiskin[J].Toxicon,2005,46(1):277-281.【7】SimoneSA,JoyceMC,AdrianaFS,eta1.Purification,charactertion, andcloningofaserineproteinaseinhibitorfromtheectopa-rasite. Haematobiairritans[J1.ExperimentalParasitology,2004,106(2):103-109.【8】杜惠芬,李克生,郭红云,等胰蛋白酶抑制剂体外抑制肿瘤细胞降解细胞外基质的研究[J].中国预防医学杂志,2004,5(2):138～139.-----1662007.V o1.28.NO.04食品研究与开发磷脂的作用与纯化方法研究进展姜霞.张应鹏.刘字.杨云裳(兰州理工大学石油化工学院,有机与药物化学研究所,甘肃兰州730050)摘要:介绍了磷脂的结构,分类,功能,国内外磷脂的提纯分析方法,以及磷脂在各个领域中的应用.关键词:磷脂;结构;功能;分离;应用ADV ANCESINSI'UDIESONPH0SPHAIIJDE'UC'I,lONANDPURl'YIGMEIH0D JIANGXia,ZHANGYing-peng,LIUYu,YANGYun-shang(InstituteofOrganic&PharmaceuticalChemistry,SchoolofPetrochemicalEngineeri ng,LanzhouUniversityofTechnology,Lanzhou730050,Gansu,China)Abstract:Thepapermainlydealswiththephosphatidesstructure,classify,functionand separatingandpurifyingmethod,aswel1.asitsapplication.Keywords:phosphatide;structure;function;separation;application基金项目:兰州理工大学校基金(SB05200403)作者简介:姜霞(1981一),女(汉),硕士,主要从事食品与药物化学研究. I1.*111I◆…◆III1.*1…◆…I◆III1~-II[9】MessinaM,EndeJW.TheRoleofSoyinPreventingandTreating ChronicDisease[J].TheJournalofNutrition,1995,125(1):567-808. 【10】李克生,杜惠芬,施苓,等.胰蛋白酶抑制剂联合抗肿瘤药物对小鼠Lewis肺癌转移的抑制作用册.中国肿瘤生物治疗杂志,2002,9(3):210~212.【11】MasahiroM,KeishiI,TatsufumiO,eta1.Aeruginosins98-AandB, TrypsininhibitorsfromtheBlue-GreenAlgaMicrocystis~ruginosa (NIES-98)[J].TetrahedronLetters,1995,16(36):2785-2788.【12】SonomiM,MasarniI,KuniyoshiS,eta1.IsolationandAminoAcid SequencesofTwoKunitz-Typepmteaseinhibitorsfromthesea anemoneAnthopleuraxantho-gramm/ca叨.Comp.Biochem. Physiol,1997,118(2):381-386.【13】N,cleGT,JongBM,PainterSD,eta1.Stmcture,localizationand potentialroleofanovelmolluscantrypsininhibitorinLyrrmaea[J]. Biochem,2001,268(1):1213-1221.【14】HidekiK,HimkiS,KenjiH.Isolationandcharacteristicsoftrypsin inhibitorfromthehepalopanereasofasquid(Todarodespac/ficus)[pBiochemPhysiol,2001,130(2):117-123.【15】AlbuquerqueC,NavarreteDT,eta1.Trypsinandtrypininhibitors fromponaeidshrimp[J1.JournalofFoodBiochemistry,2002,26(3): 233—251.【l6】杨同成.骀贝胰蛋白酶抑制剂的研究叽海洋,1993,l5(4): 43—48.【17]SangorrinMP,FoleoEJ,MartoneCM,eta1.Purificationand characterizationofaproteinaseinhibitorfromwhitecroaker skeletalmuscle(Micropogonopercularis)[J].TheInternational JournalofBiochemistry&CellBiology,2001.33(1):691-699.【18】JungHC,PyoJP,SoKK.Purificationandcharacterizationofa trypsininhibitorfromtheeggofSkipjacktunakt~.swonuspelamis忉. FjsbSci,2002,68(3):1367—1373.f19】孙红,丁淑敏.动物血活性成分研究现状fJ】.吉林中医药,2005,25 (7):61-62.[20】MariolaWjanG,MalgorzataK,eta1.Characterizationofprotease inhibitorsofseminalplasmaofeyprinids叨.AquatLivingResour,2003,16(1):461-465.[211黄素文,陆承平.七种常见养殖鱼血清胰酶抑制活性的比较叨.水产,2003,27(5):415-419.[22JFaisalM,MaelntyreEA,AdhamKG.Evidenceforthepresenceof proteaseinhibitorsin~aatem(Crassostreavirginlca)andPacific (Crassostrea~gas)oysters忉.ComparativeBiochemistryand Physiology,1998,121(2):161-168.『23IEhabEE,ShawnMM,MohamedF.Proteasoinhibitorsinplasmaof theseftshenclamMyaarenad~identificationandeffectsof disseminatedsarcoma[J].ComparativeBiochemistryandPhysiology, 1999,123(2):427-435.【24】陈识杰,李永和胁一巨球蛋白抑制肿瘤生长的效应[J】.上海医科大学.1995,22(2):85—88.[25】贾洪,张宁.胰蛋白酶抑制剂研究进展叨.中年医学实践杂志, 2003,10(2):891-893.[261张宁,王凤山.胰蛋白酶抑制剂研究概况叨.中国生化药物杂志, 2004,25(2):115-117.【27】欧阳高亮,李祺福,田长海.海洋生物抗肿瘤活性物质及其作用机理研究进展册.海洋科学2003,27(7):21—24.收稿日期:2006-10-26。
卵蛋白源胰脂肪酶抑制肽的制备及其对小鼠体质量控制效果
,
5
高脂 质量
均值〉（正常组均值+ 2#标
）来
成功㈣。造模成功后，各
变，每天同一
时间
10 !L/g（以体质量）,
、肥胖
等
水；阳性
（
）,PLIPA 低、高 量 分别
量 60、400、800
mg/ （kg - d），复合组剂量400 mg/ （kg - d）（复合组
材料与方法
1.1材料与试剂 新鲜鸡蛋:购于陕西省杨凌示范区主要超市
白：北京索莱宝科有限公
；碱
性蛋白、中
白、木瓜蛋白酶、胃白酶:西
安热默尔生物科有限公
；猪
、对
硝基苯酚棕T酯：上海阿拉丁生化科技股份有限
公
；
：萨恩化
有限公
；
茶酚:北京赛 斯仪器系统有限公
；！-
阿拉伯糖：山东福田 业有限公
；花青素:
上海文森生物科技有限公
Tyr-Arg
为氧化
（GSSG）,经测
定,GSSG质量浓度
度的标
方为y=
8.481 1",其中 #2=0.997 9。 1.4.2 PLIPA对肥胖小鼠的体质量控制效果
1）实验分组48只C57BL/6J小鼠用基础饲料
适应性
3 U后 质量分为6 :
对
，
对 ,性
,PLIPA 低、高 量
和
。
以高脂
（高脂 ）,以
收稿日期：2019-11-29 基金项目：陕西省重点产业创新(群)项目(2021ZDLNY02-10)；西安市农业科技创新工程计划项目(20193037YF025NS025)；杨凌示范区
科技计划项目(2016NY-30)。 *通信作者：李志成(1966—),男，博士,副教授，博士研究生导师，主要从事畜产食品研究。E-mail：957976900@
胰蛋白酶的制备及活力的测定-1
胰蛋白酶的制备及活力的测定-1目的要求1．学习胰蛋白酶的纯化及其结晶的基本方法。
2．了解酶的活性与比活性的概念。
实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中，在Ca2+的存在下，被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开，失去一段六肽，分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。
胰蛋白酶原的分子量约为24000，其等电点约为pH8.9，胰蛋白酶的分子量与其酶原接近（23300），其等电点约为pH10.8，最适pH7.6～8.0，在pH=3时最稳定，低于此pH时，胰蛋白酶易变性，在pH>5时易自溶。
Ca2+离子对胰蛋白酶有稳定作用。
重金属离子，有机磷化合物和反应物都能抑制胰蛋白酶的活性，胰脏、卵清和豆类植物的种子中都存在着蛋白酶抑制剂。
最近发现在一些植物的块基（如土豆、白薯、芋头等）中也存在有胰蛋白酶抑制剂。
胰蛋白酶能催化蛋白质的水解，对于由碱性氨基酸（精氨酸、赖氨酸）的羧基与其他氨基酸的氨基所形成的键具有高度的专一性。
此外还能催化由碱性氨基酸和羧基形成的酰胺键或酯键，其高度专一性仍表现为对碱性氨基酸一端的选择。
胰蛋白酶对这些键的敏感性次序为：酯键> 酰胺键> 肽键。
因此可利用含有这些键的酰胺或酯类化合物作为底物来测定胰蛋白酶的活力。
目前常用苯甲酰-L-精氨酸-对硝基苯胺（简称BAPA）和苯甲酰-L-精氨酸-β-萘酰胺（简称BANA）测定酰胺酶活力。
用苯甲酰-L-精氨酸乙酯（简称BAEE）和对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯（简称TAME）测定酯酶活力。
本实验以BAEE为底物，用紫外吸收法测定胰蛋白酶活力。
酶活力单位的规定常因底物及测定方法而异。
从动物胰脏中提取胰蛋白酶时，一般是用稀酸溶液将胰腺细胞中含有的酶原提取出来，然后再根据等电点沉淀的原理，调节pH以沉淀除去大量的酸性杂蛋白以及非蛋白杂质，再以硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原等（包括大量的酸性杂蛋白以及非蛋白杂质，再以硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原等（包括大量糜蛋白酶原和弹性蛋白酶原）沉淀析出。
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ｄ ｉ ｎ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ａ ｓ ｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ （ ３ ｉ ）ｗ ａ ｓ ｓ ｙ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｉ ｚ ｅ ｄ ｂ ｙ ｅｄ ｒ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ４ ａ ｎ ｄ ａ ｐ ｙ ｒ ｉ ｍ ｉ ｄ ｉ ｎ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ａ ｓ ｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ （ ３ ｊ ）Ｗ ａ Ｓ
测试表 明 ： ６ － 甲脒基 － ２ 一 萘酚 ４ － （ ４ 一 氨基 丁酰胺 ） 苯 甲酸酯 （ ３ ｅ ） 对 胰蛋 白酶 有较好 的抑 制活 性 ， 其Ｉ ｃ 卯为 ０ ． ３ ５ ２ ｇ・ ｍＬ ～， 优于奈莫 司他 （ Ｉ Ｃ ５ ０ ０ ． ４ ５ １ Ｉ ． Ｌ ｇ・ ｍ Ｌ ） 。
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２ ０ １ ５年第 ２ ３卷 第 ９期 ， ８ １ １— ８ １ ５
合 成 化 学
Ｃｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｓ ｙ ｎ ｔ ｈ ｅ ｔ ｉ ｃ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ
Ｖ０ １ ． ２３．２ ０１ ５
Ｎｏ ． ９，８ １ １—８ １ ５
关
键
Hale Waihona Puke 词： 胰蛋 白酶抑制剂 ；分子对接法 ；计算机辅助设计 ； 合成 ； 抑制活性
文献标识码 ：Ａ Ｄ ＯＩ ：１ ０ ． １ ５ ９ ５ ２ ／ ｊ ． ｅ ｎ ｋ ｉ ． ｅ ｊ ｓ ｃ ． １ ０ ０ ５—１ ５ １ １ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ９ ． ０ ８ １ １
中图分 类号 ： ０ ６ ２ ５ ． １ ５ ； ０ ６ ２ ６ ． ４ １
ＸＩ Ｙｕ ． １ ａ ｎ ， ＲＥ Ｎ Ｊ ｉ ａ ｎ ． ｄ ｏ ｎ ｇ ２ ， Ｔ Ｉ ＡＮ Ｆ ｕ ． ｚ ｈ ｏ ｕ ， ＨＥ Ｌ ｉ ｎ ｇ
（ １ ．Ｗｅ ｓ ｔ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｙ ，Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｄ ｕ ６ １ ０ ０ ４ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ．Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｄ ｕ Ｍｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｒ ｙ Ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｌ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ，Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｄ ｕ ６ １ ０ ０ ８ ３ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： ６ 一 Ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｘ ｙ － ２ － ｎ ａ ｐ ｈ ｔ ｈ ｉ ｍ ｉ ｄ ａ ｍ ｉ ｄ ｅ ｍ ｏ ｎ ｏ ｍ ｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｅ ｓ ｕ ｌ ｆ ｏ ｎ ａ ｔ ｅ （ ２ ）ｗ ａ ｓ ｐ ｒ ｅ ｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｂ ｙ ａ ｔ ｗ ｏ － ｓ ｔ ｅ ｐ ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｆ ｒ ｏ ｍ ６ － ｃ ｙ ａ ｎ － ２ － ｎ ａ ｐ ｈ ｔ ｈ ｏ １ ．Ｎ ｉ ｎ ｅ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｍ ｅ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｓ （ １ ａ— ｌ ｈ ， ４ ）ｗ ｅ ｒ ｅ ｏ ｂ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｐ — ｎ ｉ ｔ ｒ ｏ ｂ ｅ ｎ ｚ ａ ｌ ｄ ｅ ｈ ｙ ｄ ｅ ．Ｅ ｉ ｇ ｈ ｔ
・
研究论 文 ・
计算机辅助设计 的新型胰蛋 白酶抑制剂的合成及其抑制活性
奚 宇兰 ， 任建 东 ，田伏洲 ， 何 菱
（ １ ．四川大学 华西药学 院， 四川 成都 ６ １ ０ ０ ４ １ ； ２ ．成都军区总医院 ， ￣ １ ） ｌ ｌ 成都 ６ １ ０ ０ ８ ３ ）
摘要 ：以 ６ ・ 氰基－ ２ 一 萘 酚为原 料 ， 经两步反应制得 ６ － 羟基－ ２ － 萘 甲脒 甲磺 酸盐 （ ２ ） ； 以对 硝基苯 甲醛为 原料 ， 合成 了 ９个 中间体 （ １ ａ—ｌ ｈ ， ４ ） 。利 用分 子对接法辅助设计 ， ２分别 与 ｌ ａ一 １ ｈ反应 ， 合成 了 ８个萘 甲脒蛋 白酶抑制 剂（ ３ ａ一 ３ ｈ ） ； ４经还原反应合成 了 １ 个嘧啶胰蛋 白酶抑制 剂（ ３ ｉ ） 。以邻胺基 苯酚为原料 ， 经两步反应 合成 了 １ 个 嘧啶胰 蛋白酶抑 制剂 （ ３ ｊ ） 。 ３ ｂ一 ３ ｆ 为新化合物 ， 其结构经。 Ｈ Ｎ ＭＲ，” Ｃ Ｎ Ｍ Ｒ和 ＨＲ — Ｅ Ｓ Ｉ ． ＭＳ表征 。体外 活性