碱法提取花生粕蛋白质工艺条件的优化
花生粕制备花生蛋白和多肽
前言花生是我国六大油料作物之一[1]，上世纪90年代以来，我国花生生产得到持续发展，年均递增率2.7%，是全球增长最快的国家。
2003年全国花生播种面积达到5056.7 khm2，总产量达15006 kt，总产量居世界首位，种植面积居世界第二位[2]。
目前我国花生加工和综合利用主要用于榨油，且相当大的部分是被众多小型榨油厂消耗掉。
由于技术落后，影响了花生营养的开发利用，蛋白质浪费较大。
花生蛋白的营养价值较高，其生物价（BV）为58，蛋白质有效价（PER）为1.7，比面粉和玉米高[3-4]，它对维护人体健康和幼儿发育具有重要作用[5]。
继大豆蛋白被人们充分认识和深度利用后，花生蛋白开始进人人们的视野并逐渐引起重视，花生正在成为优质食用植物蛋白资源。
我国“十一五”发展目标明确提出2005～2010年，我国花生加工业主要由数量的增长转变为质量的提高，产品品种和经济效益同步增长，提高深加工转化率和利用率；进一步优化产业结构和产品结构，着重提高生产技术水平和产品的科技含量。
因此，就要求在花生加工的过程中高效彻底地分离蛋白和油脂且尽可能减少对原料本身营养成分产生影响。
另一方面，进一步开发花生蛋白产品，加强花生蛋白精深加工技术和设备方面的应用基础研究。
人们研究发现，花生多肽是花生蛋白经酶作用后,再经过特殊处理得到的蛋白质分解物,是由许多分子链长度不等的低分子小肽混合组成的。
多肽有比蛋白质更好的营养性能，蛋白质经酶作用后主要是以低肽的形式吸收的，通过物代谢实验证实出了肽的吸收率比氨基酸高[6]，比氨基酸更易、更快通过小肠粘膜被人体吸收利用[7]。
同时肽具有低渗透压、低抗原性等特点。
此外，蛋白质在酶催化下控制的水解，得到的肽混合物还具有许多重要的功能特性：一是在酸性条件下溶解性大大改善；二是高浓度仍是低粘度的溶液。
虽然国内外对植物蛋白活性肽的研究已经达到一定水平，且相关产品已应用于医疗保健，但主要为大豆活性肽产品，而对于花生活性肽的研究才刚刚起步，相关产品甚少，无法满足食品工业需求[8]．与其它多肽不同的是，花生多肽含有白藜芦醇，它对心血管疾病和动脉硬化有明显抑制效果，亦可藉此促进人类肿瘤细胞的凋亡，或是受过肿瘤抑制因子P53的表现来达到抗肿瘤活性。
花生饼粕制取花生蛋白及其性质的初探
滤，弃去少许初始过滤液，将滤液移至离心管，在４０（Ｏｍｉｎ
下离心ｌＯ分钟，准确移取其上清溶液１０ｍｌ于消化管中。
凯式定氮法测蛋白含量（Ｃ。）与样品蛋白含量（Ｃ２）。
ＮＳＩ＝Ｃｔ／Ｃ２ｘ１００％
１．３．４．２乳化活性（ＥＡ）和孚Ｌ化稳定指数（ＥＳＩ）的测定 采用分光光度法［５１。取一定体积浓度为０．５％的蛋白
蛋白质是人类必需的六大营养素之一。花生粕中的 花生蛋白几乎包括人体必需的８种氨基酸，谷氨酸、天门 冬氨酸较高，与动物蛋白相近，且不含胆固醇，可消化性 高，所以有丰富的营养价值［ｔ－２］。现在采用的低温二次榨油 技术，在获得冷榨花生油的同时，得到了冷榨花生蛋白 粕，其蛋白变性小，更多的活性物质得以保存闭，使得将花 生粕进行广泛利用成为可能。本文采用响应面法对碱提 花生蛋白工艺进行优化，并对所得蛋白的功能性质进行 初步分析与评价。 １材料与方法 １．Ｉ材料
冷榨花生粕粉末＿加水，过胶体磨搅匀＿＋均质机均
质＿＋调ｐＨ值浸提宰＿离心＿＋除去上层油脂与滤渣一滤
液调ｐＨ至中性一喷雾干燥＿＋花生蛋白粉
木浸提时保持所调的ｐＨ
１．３．４花生蛋白及对照蛋白的主要理化性质测定
１．３．４．１氮溶指数（ＮＳＩ）测定【４Ｊ 准确称取６９样品于ｌＯＯｍｌ烧杯中，加入１５％ｊ氯乙
水３０ｎｄ，用磁力搅拌器使样品溶液分散均匀，测量样液的
ｐＨ值，并调ｐＨ至７．０。将装有样液的离心管放在６０℃的 恒温水浴中加热３０ｍｉｎ，然后于冷水中冷却３０ｒａｉｎ。将其于
２０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｒａｉｎ，除去上层清液，称重。若没有上清 液，则应再加水搅匀再离心，至离心后有少量上清液为止。
ＷＨＣ＝Ｗｚ…．－Ｗｔ
碱酶两步法提取米渣中蛋白质的工艺研究
中
国பைடு நூலகம்
油
脂
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文章编号： （!""!） #""& ( )$%$ "&—""*&—"!
中图分类号： +,%-*.$ / $
碱酶两步法提取米渣中蛋白质的工艺研究
王亚林， 陶兴无， 钟方旭， 江贤君
（武汉工业学院生物与化学工程系， -&""!& 武汉市常青花园中环西路特 # 号）
摘要： 先用碱溶法从大米渣中提取蛋白质， 然后用碱性蛋白酶对碱提残渣水解， 进一步提取蛋 白质， 两步提取使米渣蛋白质提取率达到 )1.12 。 关键词： 大米渣； 提取； 酶； 蛋白质 采用碱溶酸沉法从粮食原料中提取植物蛋白已 有较长的历史， 此工艺用于大豆蛋白的生产取得了 较好的效果。许多发酵工厂或食品厂以大米为原料 生产各种产品， 如武汉味精厂， 大米糖化后的副产品 米渣数量较大， 年产大米干渣几千吨， 含蛋白一般在 是一种良好的蛋白质资源。在味精生 -"2 —*"2 ， 产中， 因大米粉在高温条件下水解， 大米蛋白质存在 一定程度的变性， 导致米渣中蛋白质在碱性条件下 溶解性较差， 提取蛋白质较为困难。 本文研究了碱酶两步法提取蛋白质的工艺， 即 先用碱溶法提取部分蛋白质， 然后采用碱性蛋白酶 对残渣轻微水解， 以提高蛋白质溶解性， 进行蛋白质 二次提取， 使蛋白质提取率达到 )1.12 ， 取得了较 好的效果。 ! 材料与方法 #.# 原料 大米渣： 由武汉味全食品有限公司提供， 为大米 糖化后下脚料， 其蛋白质含量为 -*.#2 ， 水分含量 为 ##.*2 。 碱性蛋白酶 （液态） ： 购于无锡酶试剂厂， 活性为 &*" """ 3 ’ 45。 #.! 蛋白质提取方法 碱溶法： 称取一定量的大米渣， 加入一定比例的 水， 搅拌均匀； 加入一定量的氢氧化钠溶液调节溶液 的 67 值至碱性， 控制一定的温度缓慢搅拌， 使蛋白 质在碱性状态下溶解； 离心分离， 得到蛋白液， 残渣 留作酶解提取。 酶解法： 取上述残渣， 补加一定量的水， 调节其 加入一定量的碱性蛋白酶， 在 -"8 恒温水浴 67 值， 锅中慢速搅拌! 9， 然后离心分离得到蛋白液。 取上述蛋白液调节 67 至 &.$ （ 等电点） ， 静置、 沉淀、 干燥得到蛋白质。
从花生蛋白粉中提取花生分离蛋白的条件优化_杨伟强
压 、动脉硬化和心血管等方面的疾病[ 4, 5] 。 我国对花生蛋白的利用很有限 , 开发和利用花
20 09 年第
34 卷
第
1期 CH中IN A国OIL S油AN D脂FATS
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粉碎机 , 835 -50氨基酸自动分析仪 。 1.3 试验方法 1.3.1 花生分离蛋白提取工艺
1.3.2 单因素试验 分别以料液比 、pH、浸提时间 和浸提温度为因素 , 研究其对蛋白质提取率的影响 。 提取率按下式计算 :
34
CH中IN A国OIL S油AN D脂FATS
2 009
Vol.34
No.1
油料蛋白
从花生蛋白粉中提取花生分离蛋白的条件优化
杨伟强 1 , 李 鹏2 , 袁 涛 3 , 王凤舞 2
(1.山 东省花生研究所 , 山东 青岛 266100;2.青岛农业大学 食品学院 , 山 东 青岛 266109; 3.山东出入境检验检疫局 , 山东 青岛 266001)
图 1 料液比对花生分离蛋白提取 率的影响
由图 1可以看出 , 提取率随着料液比的增加而 增加 , 但当料液比大于 1∶8后 , 提取率的增加幅度不 明显 , 因此较适料液比选 1∶8。 2.2.2 温度对花生分离蛋白提取率的影响 选取 料液比 1∶8, pH9.0, 分别在 40、50、60、70℃条件下 搅拌提取 120 min, 考察浸提温度对花生分离蛋白提 取率的影响 , 结果见图 2。 由图 2可知 , 在浸提温度低于 60 ℃时随着温度 的升高提取率增大 , 但当温度高于 60 ℃时 , 提取率 开始下降 。主要原因是温度高于 65℃时蛋白质开 始变性 , 温度高于 80℃时 , 蛋白质会形成凝胶 。 浸 提温度过高 , 不仅会使蛋白质变性 , 影响其功能性 ,
蒸汽闪爆结合碱溶酸沉法提取高温花生粕中的蛋白质_章玉清_杨瑞金_张文斌_华霄_赵
网络出版时间：2013-04-24 14:41网络出版地址：/kcms/detail/11.1759.TS.20130424.1441.026.html蒸汽闪爆结合碱溶酸沉法提取高温花生粕中的蛋白质章玉清，杨瑞金*，张文斌，华霄，赵伟（江南大学食品学院，江苏无锡214122）摘要：以高温花生粕为研究对象，研究了蒸汽闪爆结合碱溶酸沉法提取花生蛋白质的工艺及其产品的功能性质。
通过单因素实验和正交实验确定优化的工艺条件为：高温花生粕首先用0.3%（g/mL）的稀硫酸在60℃条件下搅拌浸泡2h；用清水洗去表面稀酸后沥干再进行蒸汽闪爆处理，条件为：爆破压力1.6MPa、维压时间5min; 最后采用碱溶酸沉法提取蛋白质，条件为：温度60℃、pH9.5、料水比1: l2（g/mL）、浸提时间为2h。
在此工艺条件下,高温花生粕中蛋白质的提取率达到52.6%，比传统碱溶酸沉工艺提高了10.8%，且所得蛋白质产品的持水性、乳化性、起泡性和起泡稳定性有了显著提高，分别增强了67.1%、141.0%、131.3%和107.4%。
结论：蒸汽闪爆技术结合碱溶酸沉法适用于从高温花生粕中提取蛋白质，不仅可以提高蛋白质的提取率，而且能够改善产品的功能性质。
关键词：高温花生粕，花生蛋白，蒸汽闪爆，碱溶酸沉Extraction of protein from high-temperature peanut meal usingcombination process with steam flash-explosion, alkaline-extractionand acid-precipitationZHANG Yu-qing, YANG Rui-jin*, ZHANG Wen-bin, HUA Xiao, ZHAO Wei （School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China）Abstract: A combined process with steam flash-explosion, alkaline-extraction and acid-precipitation was used toextract protein from high-temperature peanut meal. Through single factor and orthogonal test, the optimumconditions were figured out. Firstly, the high-temperature peanut meal was soaked in 0.3%(g/mL) sulfuric acidsolution at 60℃ for 2 h, then drained it and washed with water to remove the acid solution remained in the surfaceof the meal. The pretreated meal was treated with steam flash-explosion at 1.6MPa for 5 mins. The protein in thesteam flash-exploded meal was extracted by alkaline-extraction and acid-precipitation process. The optimalcondition for alkaline-extraction was solid to water ratio: 1:12(g/mL), pH 9.5, 60℃ and 2h. Under these conditions,the protein extraction rate reached 52.6%, which was 10.8% higher than conventional alkaline extraction and acid-precipitation process. The water holding capacity、emulsifying activity index、foaming capacity and foamingstability of the protein extracted using this combined process were significantly improved, which increased by67.1%、141.0%、131.3% and 107.4% respectively . Conclusion: The results showed that the combined process withsteam flash-explosion, alkaline-extraction and acid-precipitation was appropriate for extracting protein fromhigh-temperature peanut meal, which could increase the protein extraction rate and also improve the functionalproperties.Key words:high-temperature peanut meal; peanut protein; steam flash-explosion; alkaline-extraction andacid-precipitation中图分类号：TS229 文献标志码：A文章编号：收稿日期： *通讯联系人作者简介：章玉清（1989-），女，硕士研究生，研究方向：植物蛋白加工。
花生榨油后蛋白的碱提取工艺研究
取冷榨花生饼按料液比 1∶8 加入蒸馏水，设定 体系 pH9，温度 60 ℃，经不同时间提取，经离心 分离得到的初制花生蛋白，冷冻干燥后测定其蛋 白质含量。
蛋白含量/%
90
88
86
84
82
80
78
30
60
90
100
时间/min
图 4 浸提时间对花生蛋白质含量的影响
由图 4 可知，在 60 min 前，花生蛋白质含量 随着浸提时间的延长而增加。但超过 60 min 后，
[11] 陈珊,王宜民,何庭玉,等.茶油脱色新法研究[J].广东化 工,2006,9(33):83-85
[12] 陈文伟,高荫榆,孙志芳.无色茶油的研制[J].中国食品学 报,2008,8(4):85-89
[13] 周建平,郭华.茶籽油的冬化条件研究[J].湖南农业大学 学报,2002,28(5):430-432
R
57.58
15.88
14.48
803.31 826.15 809.31 22.84
综合评分(Y)的计算方法为： Y=b1Y1+ b2Y2 式中：b1 为指标蛋白质含量 Y1 系数；
b2 为残油率 Y2 的系数。 其中 Y1 越高越好，Y2 越低越好，故 b1 取正 值，b2 取负值。并依据各指标的重要性不同，分 别取分值 80 和 20，则 b1=9.88，b2=47.62。从极差 分析看 A>D>B>C，最好因素水平组合为 A1B3C3D2， 即温度 60 ℃，pH9，料液比 1∶8，处理时间为 60 min。按照上述实验条件，对实验结果进行验证， 最终产品花生蛋 白质含量为 89.94%，残油率为 0.27%，花生蛋白质得率为 48.35%。
花生粕提取蛋白质实用工艺地优化地地研究
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某某省研究生科研创新项目
申请书
项目名称：花生粕提取蛋白质工艺的优化的研究
申请者：
所在单位：某某理工大学化学与生物工程学院
所属学科：食品科学
联系：
：
电子信箱：
申请日期：2014年1月4日
某某省教育厅
2014年制
填报说明
一、申请书各项内容，要实事求是，逐条认真填写。
表达要明确、严谨。
外来语要同时用原文和中文表达。
第一次出现的缩写词，须注出全称。
除签名外，项目申请书必须是打印件。
二、申请书一律用A4纸，于左侧装订成册。
第二页起各栏空格不够时，请自行加页。
如有查新报告与其它附件材料，请连同申请书一起装订成册。
三、“所属学科〞按博士、硕士学科专业目录〔2006年修订版〕二级学科名称填写。
〔封2，此页不装订〕
三、研究方案
四、研究根底
五、经费预算
注: 预算支出科目按如下顺序填写: 1. 科研业务费 2. 实验材料费 3. 仪器设备费 4.相关经费。
花生粕蛋白酶解条件的优化
花生粕蛋白酶解条件的优化孙素玲;吴昊;李贤;张干伟【摘要】Peanut meal was hydrolyzed with alcalase alkaline protease. Effects of reaction time, mass ratio of peanut meal, dose of enzyme, reaction temperature and pH on hydrolysis degree of peanut meal protein were studied by single factor tests and orthogonal experiment. The results showed that the optimum hydrolysis conditions were as follows, reaction temperature, 60℃; pH 8.5; mass ratio of peanut meal, 5%; enzyme dose, 7%; and reaction time, 4 h. Under these conditions, the hydrolysis degree of peanut meal protein was 29.18%.%采用Alcalase碱性蛋白酶水解花生粕,设计单因素试验和正交试验考察水解时间、花生粕质量分数、酶用量、温度、pH等因素对水解度的影响,优化提取工艺.结果表明,最佳的水解条件为酶解温度60℃、pH 8.5,反应体系中花生粕和酶的质量分数分别为5％和7％,酶解时间4h.在此条件下花生粕蛋白的水解度可达29.18％.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2012(051)023【总页数】3页(P5460-5462)【关键词】花生粕;水解;碱性蛋白酶【作者】孙素玲;吴昊;李贤;张干伟【作者单位】黄冈师范学院化工学院,湖北黄冈438000【正文语种】中文【中图分类】TS229花生是中国主要的油料作物之一，经传统方式压榨或浸出制油后的花生粕主要用于动物饲料和肥料［2］。
花生分离蛋白制备工艺研究
花生分离蛋白制备工艺研究刘大川;廖晓龙;王祖奎;卢春成;张亮;陈振林【摘要】采用碱提酸沉法从低变性脱脂花生粕中提取花生分离蛋白.探讨了碱提温度、碱提时间、碱提固液比等因素对产品蛋白质含量和得率的影响.通过正交试验优化制备花生分离蛋白的最佳工艺条件为:碱提温度55 ℃,碱提2次,每次1.5 h,碱提固液比1: 9,碱提pH 9.0,酸沉pH 4.5.在此条件下产品的蛋白质含量为90.87%(N×6.25,干基),得率最高可达38.65%.该产品的氮溶解指数为68.46%,持水性2.3 g/g,吸油性1.3 mL/g,乳化性50.4%,乳化稳定性56.55%.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2010(035)010【总页数】4页(P21-24)【关键词】花生;碱提酸沉法;分离蛋白;功能特性【作者】刘大川;廖晓龙;王祖奎;卢春成;张亮;陈振林【作者单位】武汉工业学院,食品科学与工程学院,武汉,430023;武汉工业学院,食品科学与工程学院,武汉,430023;湖北省宜城市天鑫油脂有限公司,湖北,宜城,441400;湖北省宜城市天鑫油脂有限公司,湖北,宜城,441400;湖北省宜城市天鑫油脂有限公司,湖北,宜城,441400;湖北省宜城市天鑫油脂有限公司,湖北,宜城,441400【正文语种】中文【中图分类】TS229;TQ936花生是我国最重要的油料资源之一,据国家粮油信息中心统计,2008年我国花生产量 1 360万 t, 2009年为 1 350万 t,我国花生产量已居世界第一。
花生仁中一般含油脂 46%～52%,油脂中不饱和脂肪酸含量达 80%以上,其中油酸含量为39.2%～65.75%,亚油酸含量为 16.8%～38.2%,是一种营养价值较好的食用油。
花生中含蛋白质25%～30%,花生蛋白含有 8种人体必需氨基酸,除蛋氨酸较低外,其他氨基酸含量均达到联合国粮农组织(FAO)规定的标准。
花生加工副产物的综合利用及精深加工
花生加工副产物的综合利用及精深加工郭曼莉;李晓彤;吴澎;赵路苹;丁秀臻;李向阳【摘要】花生加工后会产生大量的副产物,对其进行综合利用及精深加工,可延长产业链,提高经济价值.对花生加工副产物的综合利用及精深加工进行综述,以期为高值利用花生加工副产物资源,不断开发花生精深加工系列产品提供理论依据与技术指导.【期刊名称】《粮油食品科技》【年(卷),期】2018(026)003【总页数】5页(P27-31)【关键词】花生;副产物;精深加工;营养成分;综合利用【作者】郭曼莉;李晓彤;吴澎;赵路苹;丁秀臻;李向阳【作者单位】山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271018;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271018;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271018;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271018;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271018;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271018【正文语种】中文【中图分类】TS222+.1花生是我国主要的油料作物，国家统计局信息显示2016年我国花生年产量1728.98万t，居世界首位，花生在油料产业具有重要的地位。
花生富含油脂、蛋白、维生素及多种矿物质，营养全面，具有保护心脑血管、降脂、降糖、抗癌、抗衰老等保健作用。
近几年，我国花生用于食品加工的比例在逐年提升，已接近年产量的40%。
目前，我国花生仍以榨油为主，花生加工会产生大量的花生粕、花生红衣、花生壳等副产物，这些副产物中富含酚类、蛋白质、糖类等营养成分，但目前利用率却较低。
对这些副产物进行综合利用及精深加工，不仅可以延长产业链，提高花生的经济价值，还可以减少资源浪费，避免因副产物废弃而造成环境污染。
对花生加工副产物营养成分、活性物质组成进行分析，对花生加工副产物的综合利用及精深加工技术进行综述，以期为高值利用花生加工副产物资源，开发系列花生精深加工产品提供理论依据与技术指导。
大豆饼粕分离蛋白的制取工艺研究
大豆饼粕分离蛋白的制取工艺研究黄来珍，谢伟彬，邵海艳*【摘要】采用碱提酸沉法提取豆粕中的分离蛋白，以蛋白质得率为考察指标，在单因素试验基础上，通过正交试验研究从大豆饼粕中提取分离蛋白工艺条件，并对所获得的分离蛋白的溶解性、乳化性、乳化稳定性和起泡性等功能特性进行分析。
结果显示，提取分离蛋白的最佳工艺参数为：提取温度60℃、提取时间60 min、料液比1∶20、pH8.5。
在此条件下获得蛋白质得率达84.2%，且该分离蛋白具有良好的溶解性、乳化性、乳化稳定性和起泡性。
【期刊名称】食品研究与开发【年(卷),期】2011(032)009【总页数】4【关键词】关键词:豆粕；分离蛋白；提取工艺；功能特性大豆分离蛋白是从大豆脱脂后的低变性脱脂豆粕中提取的蛋白质质量90%以上（以干基计）的蛋白质类食品添加剂[1]，其中有人体必需的8种氨基酸，而且这些氮基酸的组合比较均衡，与动物蛋白近似，易于被人体吸收利用，属于全价蛋白。
作为一种理想优质的植物蛋白来源，大豆蛋白近年来以其应用范围广泛而越来越多受到人们关注。
如在面制品[2]、肉制品[3]、乳制品[4]和饮料制品[5]等多个食品加工领域均受到研究者重视并显示出优越的理化特性。
本文采用碱提酸沉法进行豆粕中大豆分离蛋白的提取，通过实验确定提取分离蛋白的最佳工艺参数并对提取蛋白的理化特性进行分析，以期为脱脂豆粕的进一步开发和应用提供参考。
1 材料与方法1.1 材料豆粕：湛江富虹油品有限公司提供。
1.2 主要仪器PHS-25C pH计：上海康仪仪器有限公司；DK-98-I型电热恒温水浴锅：天津市泰斯特仪器有限公司；JD-2型磁力搅拌器：常州国华电器有限公司；Uv-2102pc型紫外可见分光光度计：尤尼柯（上海）仪器有限公司；GL-10LMD 高速冷冻离心机：湖南星科科学仪器有限公司；101A-2数显电热恒温鼓风干燥箱：上海浦东跃欣科学仪器厂。
1.3 主要试剂牛血清白蛋白：国药集团化学试剂有限公司；硫酸铜、硫酸钾、氢氧化钠、盐酸等试剂均为分析纯。
花生分离蛋白提取工艺优化研究
碱液浸提花生蛋白粉过程中控制体系的温度 40℃、 料液比 1:10(g/mL)、浸提时间 90min，设置不同 pH 值的 碱液。实验前测得实验用花生蛋白粉溶于水显酸性，蛋 白粉溶于 pH 值小于 10.5 的碱液时，显弱碱性或中性， 不会使蛋白变性。碱液 pH 值对花生分离蛋白制备的影 响结果见图 2。花生蛋白主要成分是花生球蛋白和伴花 生球蛋白，还有 10% 左右的清蛋白。全部的球蛋白和 清蛋白都可溶于稀碱溶液中，蛋白质溶解度随 pH 值升 高而增大，蛋白质溶出增多。从图 2 可知，随着碱液 pH 值增加，蛋白纯度及提取率都呈增加的趋势，其中 pH10 时蛋白提取率最高，而蛋白含量在 pH9 时趋于稳 定。综合考虑两评价指标的最佳 pH 值，选取 pH9、9.5、 10 继续做响应面分析以确定最佳的碱液 pH 值。
摘 要：采用碱提酸沉方法从脱脂花生蛋白粉中提取花生分离蛋白，在单因素试验的基础上，应用响应面法优化 花生分离蛋白的提取条件。结果表明：浸提时间和碱液 pH 值对提取的花生分离蛋白纯度都有显著影响，且呈非 线性关系，最佳提取工艺参数为浸提时间 131min、浸提温度 50℃、碱液 pH10、料液比 1:12(g/mL)。在此条件 下，花生分离蛋白的纯度为 95.05%、提取率 71%。响应面法对花生分离蛋白提取条件的优化是可行的。 关键词：花生蛋白粉；花生分离蛋白；碱提酸沉；响应面法
(1. College of Chemistry and Chemical Engineering, Shihezi University, Shihezi 832003, China； 2. Shandong Peanut Research Institute, Qingdao 266100, China；3. Committee on Agriculture of Linyi, Linyi 276000, China；
花生蛋白的提取工艺
碱性蛋白酶提取花生水解蛋白摘要：利用碱性蛋白酶从冷榨花生饼中提取花生水解蛋白。
研究了温度、pH 值、加酶量、液固比、水解时间对蛋白质提取率的影响,确定最佳工艺参数为温度55 ℃、pH9.0、加酶量是0.8%、水解时间3 h、液固比7∶1, 在此条件下蛋白质提取率为81.32%。
1、材料与方法（1）实验材料冷榨花生饼(蛋白质48.09%, 脂肪8.74%, 粗纤维 4.71%); 碱性蛋白酶(2.4 AU/g)；主要仪器设备：SC- A型精密恒温水槽, 868 型酸度计, 78- 1 型磁力搅拌器, UV- 2100 紫外可见光分光光度计, 酶反应器。
（2）实验方法花生水解蛋白的提取：一定质量花生饼(粉碎过80 目筛)与蒸馏水按一定比例加入酶反应器中, 恒温搅拌一定时间, 调节pH 值至适宜, 加入一定量酶进行水解, 并维持反应液pH恒定(变化范围±0.01)。
反应结束后, 沸水浴中灭酶5 min, 3000 r/min 离心20min, 收集上清液, 残渣用2 倍体积水洗涤, 合并两次离心所得上清液, 计量体积, Folin- 酚法，测定其中蛋白含量。
蛋白质提取率的计算：花生蛋白提取率(%)=(提取的上清液蛋白质质量/原料中蛋白质质量)×100%2、结果与分析（1）温度对蛋白质提取率的影响在加酶量0.4%,pH8.0, 液固比7∶1, 水解时间 3 h 时, 考察了温度对蛋白提取率的影响, 结果如图 1 所示。
由图1 可知, 随着温度升高, 蛋白质提取率逐渐提高, 当温度达到55 ℃, 蛋白质提取率最高。
当温度>55 ℃时, 随温度升高蛋白质提取率反而降低, 其原因可能是超过酶最适温度, 酶分子空间结构发生改变, 导致酶活性减弱或丧失。
（2）pH 值对蛋白质提取率的影响在温度55 ℃,加酶量0.4%, 液固比7∶1, 时间3 h 时, 考察了pH值对蛋白提取率的影响, 结果如图 2 所示。
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摘要 ： 采用碱提酸沉法从 花生 粕中提取花生分离蛋 白， 用 蛋 白质提取率作为衡量提取 工艺的指标。在单因素试验 基础上 ， 以料液 比、 ｐ Ｈ值 、 提取温度 和提取 时间为考察因素 ， 采用正交试验优化最佳提取工 艺 ， 确定碱提 的最佳工 艺条 件为 ： 料液 比 １ ｇ ： １ ０ ｍ Ｌ 、 ｐ Ｈ值 １ ０ ． ０ 、 提取 温度 ６ Ｏ℃、 提取 时 间 ２ ｈ 。在此 条件 下 ， 花生 粕蛋 白质 最高 提取 率可 达 ７ ５ ． ８ ８ ％ 。在试验影响 因素 中 ， 影响程度从大到小依次为 ： 提取温度 ＞ ｐ Ｈ值 ＞ 提取时 间 ＞ 料液 比。 关键 词 ： 碱提酸沉 ； 花生蛋 白； 正交设计 ； 提取工艺 中图分 类号 ： Ｔ Ｓ ２ １ ４ ． ９ 文献标志码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ７— ０ ２ ７ ７—０ ３
参 考文 献 ： ［ １ ］ 国家药典委员会． 中华人 民共和国药 典 ： 一部 ［ Ｍ ］ ．北京 ： 中国医
药科技 出版社 ， ２ ０ １ ０： ２ ３ ３ ．
［ ２ ］ 熊海 涛 ， 唐志华 ， 郑行望． 火 焰原子 吸收光谱法 测定 柿 蒂中微量 元素 ［ Ｊ ］ ． 理化检验 ： 化学分册 ， ２ ０ １ ０ ， ４ ６ （ １ ０ ） ： １ ２ １ １ — １ ２ １ ２ ． ［ ３ ］ 潘 旭， 具 敬娥 ， 贾 恒， 魏 娴， 等．柿 蒂化学成 分的分 离与 鉴定 ［ Ｊ ］ ． 嫣， 等． 柿蒂药材的高效液相色谱指纹 图谱 沈 阳药科大学学报 ， ２ ０ ０ ８ ， ２ ５ （ ５ ） ： ３ ５ ６ — ３ ５ ９ ． ［ ４ ］ 周本宏 ， 沈
造成环境 污染 ， 造成 了很大 的资源浪费 。本试验 采用碱提 酸 沉法研究 花生粕 中蛋 白质 的最佳提取工 艺条件 ， 为花生粕 蛋 白质 的工业化生产与利用提供技术参考 。
１ 材 料 与 方 法 １ ． １ 材 料 与仪 器
基金项 目： 国家科技支撑计划 （ 编号 ： ２ ０ １ ２ Ｂ Ａ Ｄ ３ ６ Ｂ ０ ６ ） ； 辽 宁工程技 术 大学国家 自然科 学青年基 金前期 资助项 目（ 编号 ： ｌ １ — １ ４ ９ ） 。 作者简介 ： 孔 涛（ １ ９ ８ １ 一） ， 男， 陕西渭南 人 ， 博 士研究 生 ， 讲师， 从事 食品加工及微生物方面研 究。Ｅ— ｍ ａ ｉ ｌ ： ｋ ｏ ｎ ｇ ｔ ａ ｏ ２ ０ ０ ５ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｎ ｒ 。
研究 ［ Ｊ ］ ． 广东药学院学报 ， ２ ０ １ １ ， ２ ７ （ ２ ） ： １ ４ ７— １ ５ ０ ．
武．高效液相色谱 一光电二极管阵列检测器法 同时
（ Ｒ Ｓ Ｄ＝ ０ ． ７ ４ ％） ， 高于正交设计表 中任一提 取工 艺的试 验结
果， 说 明通 过正交试验得 出的优化条件稳定 、 可靠 。
孔 涛 ， 米 平 ， 赵雪淞 ， 刘 民
（ １ ． 辽宁工程技术大学理学院 ， 辽宁阜新 １ ２ ３ ０ ０ ０ ； ２ ． 中国科学 院沈 阳应用生态研究所 ， 辽宁沈 阳 １ １ ０ ０ １ ６ ； ３ ． 辽 宁工程技术大学矿业学院 ， 辽宁阜新 １ ２ ３ ０ ０ ０ ）
收稿 日期 ： ２ ０ １ ２一 ２—１ ７
５ ９ ， 蛋 白质的净利用率 为 ５ １ ， 纯消化率 可达 ９ ０ ％， 极易 被人 体
消化 吸收 ， 与大 豆蛋 白相 比， 令肠 胃胀 气 因子 和抗 营养 因
子较少 ， 与菜 籽、 棉籽蛋 白相 比， 所 含毒 性物质 较少 ， 经 常 食用可预防高血压 、 动脉硬化 和心血管等方 面的疾病 。我 国对 花生饼粕利用很有限 ， 大部分都作为牲畜饲料 ， 甚至扔弃
花生是世界上主要 的油料 资源之一 ， 种植 面积居 油料作 物第 ２位 …。花生仁约含 ５ ０ ％ 的脂肪和 ３ ０ ％的蛋 白质 ， 是重 要 的食用油资源和植物蛋 白资源 Ｊ 。我 国每年可 产 ２ ０ ０万 ｔ 以上 的花生饼粕 Ｊ ， 花生饼粕 含蛋 白质 ４ ０ ％ 以上 ， 其中 １ ０ ％ 为清蛋 白、 ９ ０ ％为碱性蛋 白 。花生蛋 白是一种 营养价值 较 高 的植 物蛋 白， 含 有人体 所需 的 ８种必 需氨基 酸 ， 生物价 为
江苏农业科 学 ２ ０ １ ３年第 ４ １ 卷第 ７期
孔 涛， 米 平， 赵雪淞 ， 等． 碱法提取花 生粕蛋 白质工艺条件 的优化［ Ｊ ］ ．江苏农业科学 ， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ ７ ） ： ２ ７ ７— ２ ７ ９
． — — —２ ７ ７－ ． — —
碱法提取花生粕蛋 白质工艺条件 的优化
花生饼粕 （ 广 东瑞 丰 粮 油商 贸 公 司 ） 的成 分 包 括灰 分
由表 黄酮的影 响因素主次顺 序为 Ａ＞Ｃ＞Ｄ＞Ｂ， 即提取温 度 ＞料
液 比 ＞乙醇浓 度 ＞提 取时间。表 ３显示 ， 所选取 的 ４个 因素 中， 提取温度对提取效果 影响显著 ， 提取时间影响较小。综合 直观分析 和方差分析 的结果 ， 柿 蒂总黄 酮的最佳提 取工艺条
［ ５ ］ 邹盛勤 ， 陈
件为 Ａ ， Ｂ ： Ｃ ： Ｄ ，即 当 提 取 温 度 为 ７ ０ ℃， 料 液 比 为
１ ｇ： ２ ５ ｍＬ ， 乙醇浓度为 ６ ０ ％， 提取 时 间为 ５ ０ ｍ ｉ ｎ时总 黄酮
提取量最 高。
２ ． ５ 验证 试验
按上述最佳工艺进行验证试验 ， 重复 ３次 ， 提取 的总黄酮 含量分别为 ４ ． ３ ５ ７ 、 ４ ． ３ ９ １ 、 ４ ． ４ ２ ２ ｍ ｇ ／ ｇ ， 平均 值为 ４ ． ３ ９ ０ ｍ ｇ ／ ｇ