过表△2△fosb蛋白促进小鼠原代前成骨细胞的分化(简报)
补肾健脾方增加成肌分化表达促进去睾丸小鼠骨质疏松性骨折愈合的实验研究
补肾健脾方增加成肌分化表达促进去睾丸小鼠骨质疏松性骨折愈合的实验研究目录一、内容描述 (2)1.1 骨质疏松性骨折现状及危害 (2)1.2 补肾健脾方在骨折治疗中的应用 (3)1.3 肌肉分化表达与骨折愈合的关系 (4)1.4 研究目的与意义 (6)二、实验材料与方法 (6)2.1 实验动物 (8)2.1.1 去睾丸小鼠模型建立 (9)2.1.2 分组及给药 (10)2.2 实验药物及试剂 (10)2.2.1 补肾健脾方药物组成及制备 (12)2.2.2 其他试剂与工具 (12)2.3 实验方法 (13)2.3.1 骨折模型建立及手术过程 (14)2.3.2 药物治疗及给药途径 (15)2.3.3 样本采集与处理 (16)2.3.4 检测方法 (17)三、实验结果 (17)3.1 骨折愈合情况观察 (18)3.1.1 X线检查结果 (19)3.1.2 骨折愈合时间比较 (20)3.2 肌肉分化表达情况 (21)3.3 骨密度及生物力学测试 (22)3.3.1 骨密度测定结果 (22)3.3.2 生物力学测试结果 (23)四、讨论与分析 (24)4.1 补肾健脾方对骨折愈合的促进作用 (25)4.2 补肾健脾方对肌肉分化表达的影响 (26)4.3 机制探讨 (27)4.4 与其他研究的比较 (28)五、结论 (29)5.1 主要研究结论 (30)5.2 研究创新点 (30)5.3 研究不足与展望 (31)一、内容描述本研究旨在探讨补肾健脾方在增加成肌分化表达及促进去睾丸小鼠骨质疏松性骨折愈合方面的作用。
通过构建去睾丸小鼠模型,我们评估了补肾健脾方对骨密度、骨小梁结构以及成肌细胞分化的具体影响,并观察了骨折愈合过程中骨组织形态学的改变。
实验结果表明,与对照组相比,补肾健脾方能显著提高去睾丸小鼠的骨密度和骨小梁密度,改善骨小梁结构,显示出良好的骨骼健康状况。
在成肌细胞分化方面,补肾健脾方能够有效促进成肌细胞的增殖和分化,增加肌肉质量。
骨形成蛋白 (BMP)的研究进展
骨形成蛋白 (BMP)的研究进展
骨形成蛋白 (BMP) 是一类在细胞间信号传导中起着重要作用的蛋白质。
BMP 被广泛研究,并且其研究进展主要集中在以下几个方面:
1. 结构和功能研究:BMP 可以通过与其特定的受体结合,启动一系列细胞信号传导通路,调节细胞增殖、分化和存活。
研究人员通过对 BMMp 结构的解析和功能研究,揭示了其在骨形成、关节发育和其他生物学过程中的作用机制。
2. 肿瘤研究:BMP 在肿瘤生成和发展过程中也扮演着重要角色。
一些研究显示,BMP 可以抑制肿瘤细胞的生长和侵袭,并促进肿瘤细胞的凋亡。
因此,研究人员正在探索BMMp 在肿瘤治疗中的潜在应用。
3. 骨再生和修复:BMP 被广泛应用于骨再生和修复领域。
研究人员通过使用基因工程技术或注射外源性 BMP,成功地促进了骨折和骨缺损的修复。
目前,研究人员正在努力
寻找更有效的 BMP 衍生物和载体,以提高骨再生和修复的效果。
4. 疾病相关研究:许多疾病,如骨质疏松症和类风湿性关节炎,与 BMP 的异常调节有关。
因此,研究人员正在研究BMP 在这些疾病发展过程中的作用,并探索利用 BMP 的方法进行相关疾病的治疗。
综上所述,BMP 的研究进展涵盖了其结构和功能的研究,肿瘤研究,骨再生和修复以及疾病相关研究等多个领域。
这些研究有望为治疗与骨骼生长、肿瘤和其他相关疾病有关的问题提供新的线索和治疗方法。
人源重组骨形态发生蛋白
人源重组骨形态发生蛋白
人源重组骨形态发生蛋白(Human Recombinant Bone Morphogenetic Protein,简称rhBMP)是一种在骨组织工程中广泛应用的生物活性物质。
它是一种生长因子,能够刺激骨组织的形成和修复,常用于骨折、骨不连等骨疾病的临床治疗。
人源重组骨形态发生蛋白是在实验室中通过基因工程技术生产的,与天然骨形态发生蛋白在结构和功能上非常相似。
这种蛋白具有强烈的骨诱导活性,能够诱导未分化的间充质细胞向骨细胞分化,促进骨组织的形成和修复。
人源重组骨形态发生蛋白在临床上的应用主要有两个方面。
一方面是局部注射治疗骨折、骨不连等骨疾病。
这种治疗方法可以刺激局部的骨组织快速形成和修复,加速骨折的愈合,提高治疗效果。
另一方面是将人源重组骨形态发生蛋白与生物材料相结合,制作成骨形态发生蛋白复合物,用于骨组织工程中的种子细胞诱导和骨组织再生。
这种复合物可以促进骨组织的形成和修复,提高骨组织的生物力学性能和耐久性。
虽然人源重组骨形态发生蛋白在临床治疗中取得了很好的效果,但也存在一些问题。
其中最主要的问题是它的生产成本较高,导致价格昂贵,限制了其在临床上的广泛应用。
此外,对于人源重组骨形态发生蛋白的安全性和长期使用效果等方面还需要进一步的研究和探讨。
总之,人源重组骨形态发生蛋白是一种具有重要临床应用价值的生物活性物质。
它能够刺激骨组织的形成和修复,用于治疗骨折、骨不连等骨疾病。
虽然存在一些问题需要解决,但随着科学技术的发展和应用研究的深入,相信其应用前景将会越来越广阔。
过表达骨形态发生蛋白2对骨折大鼠的骨愈合和成骨能力的影响及其可能机制
1材料与方法
1.1实验动物60只成年雄性SD大鼠(无特定病
原体级,200 -220 g)购自新疆医科大学实验动物中
心,动物生产许可证号:SCXK(新)2019-002 &实验大
鼠饲养于标准动物房中,正常饮食饮水&大鼠适应环
境两周后进行实验&
1.2 主要试剂 BMP-2过表达的阴性质粒和BMP-2
过表达的质粒购自中国上海基因医药生物技术有限
Urumqi 830001,China ; 3 Department g Paia,Urumqi FOendshO Hospital,Urumqi 830001,China ;
4 School O Basic Medicine,Xiaiang Medical University,Urumqi 830011,China)
as well os elevated expression levels of BMP-2, Smad1, Runx2, p38 MAPK and Smpd3 proteins in bone tissues (hl P <0.05)Conclusion Overexpressionof BMP-2 can accemratv fracture healing in rats, which may be related to BMP-2 reducing infammatoo factors expression, upreyulahng the expression of Smad1 and Runx2 W pomote collagen production in osWocyWs, and ogulahng the expression of Smpd3 though p38 MAPK-
关于成骨细胞(造骨细胞)的特异性标志物.
关于成骨细胞(造骨细胞)的特异性标志物.
关于
2004-10-10 22:37 消息引用分享
刚好前段时间写了一篇这方面的综述(已发表),我提供一点资料如下:
骨代谢的过程就是成骨细胞(osteoblast ,OB)形成新骨和破骨细胞(osteoclast ,OC)吸收旧骨的过程,这种骨质的更新替代常称为骨转换(bone turnover)。
反映成骨细胞活动的标志物与破骨细胞的标志物是相辅相成的。
一些与成骨细胞有关:
1 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase ,ALP)和骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)。
自1923年Robinson发现碱性磷酸酶以来,ALP已作为评价骨形成和骨转换的重要指标,在骨形成过程中,成骨细胞活动增强,大量分泌BALP,BALP作为ALP 的同功酶,特异性来源于骨组织,能反映成骨细胞活性。
2 骨钙蛋白(bone Gla protein, BGP)
又称骨钙素(Osteocalcin,Ocn),是在骨基质矿化过程中由成骨细胞合成的非胶原蛋白,是反映成骨活动和骨转换的重要标志,约占骨组织非胶原蛋白10%~20%。
3 骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein ,BMP)。
BMP的主要生物学作用就是诱导间充质细胞分化为成骨细胞,进而产生新骨。
4 血清I型前胶原C端肽(Procollagen I carboxyterminal propeptide,PICP)
I型胶原是骨组织中唯一的胶原,成骨细胞合成前胶原。
骨形态发生蛋白-2对大鼠脂肪干细胞成骨诱导的作用的开题报告
骨形态发生蛋白-2对大鼠脂肪干细胞成骨诱导的作用的开
题报告
一、研究背景
骨形态发生蛋白-2(BMP-2)是一种重要的细胞因子,在肌肉、骨骼以及软骨中
广泛存在,并且在多种生物学过程中扮演重要的角色。
研究表明,BMP-2除了在骨组
织工程和生物材料方面具有广泛应用外,也能够与成骨细胞和脂肪干细胞相互作用,
调节其增殖和差异化,因此具有成骨诱导的潜力。
脂肪干细胞是来源广泛、易获取且
丰富的成体干细胞,具有成骨诱导的潜力,因此被广泛应用于组织工程和再生医学等
多个领域。
研究发现,BMP-2对脂肪干细胞的成骨诱导效果较好,但其具体作用机制
仍未完全阐明。
二、研究目的
本研究旨在探究BMP-2对大鼠脂肪干细胞成骨诱导的作用机制,为进一步开展
骨组织工程和再生医学等领域的研究提供理论依据和实验依据。
三、研究方法
1.脂肪干细胞的提取和培养:采用酶消化的方式提取大鼠脂肪干细胞,并进行体外培养、复增和净化。
2.BMP-2的添加及成骨评价:将培养好的脂肪干细胞分为两组,一组加入BMP-2,一组不加BMP-2,分别进行体外诱导,通过细胞形态学观察、ALP染色、Alizarin Red
染色和基因表达分析等方法评价其成骨效果,并比较两组细胞的成骨差异。
3.细胞信号途径的检测:通过Western Blot和Real-time PCR等技术检测诱导过程中关键的信号途径的表达情况,并探究BMP-2对这些信号途径的影响。
四、研究意义
本研究将有助于深入了解BMP-2对脂肪干细胞成骨诱导的作用机制,为进一步
推动组织工程和再生医学等领域的发展提供重要实验依据和理论依据。
骨形态发生蛋白2介导甲状旁腺素促进成骨细胞分化的实验研究
徐 莹 田 野 孟 凌 新
( 中国 医 科 大 学 附 属 盛 京 医 院麻 醉 科 , 中 国 医科 大 学 附属 盛 京 医 院 脊 柱 关 节 骨 科 , 阳 10 0 ) 沈 1 0 4 ( 要] 目 的 探 讨 骨 形 态 发 生蛋 白 2 B 2 在 甲状 旁 腺 素 ( TH) 进 成 骨 细胞 分 化 过 程 中的 重 要 介 导 作 用 。方 法 摘 ( MP ) P 促 培 养 MC T 一 1细 胞 , 为 4 :) 水 对 照 组 ;) TH 组 ;3 6[ 一2(- 啶基 ) 氧 基 ] 基 ]3(一 啶基 ) 唑 并 [ ,一] 3 3E 分 组 1盐 2P )-4[ 一1哌 乙 苯 一一4吡 吡 1 5a
mor hi r a m e t p n t e t n ;4) PTH + Do s m o phi t e t e t Ge nd r t i e r s i n e l o ro r n ra m n . ne a p o en xp e so lve s f BM P2, BM P2 d own t e m n s a s e bl s i ne n r t i x e s o r e e t d b a — i s r a ge e nd o t o a tc ge s a d p o e n e pr s i ns we e d t c e y Re ltme PCR
2021间隔性高糖条件对成骨细胞形态、增殖及功能蛋白表达的作用范文1
2021间隔性高糖条件对成骨细胞形态、增殖及功能蛋白表达的作用范文 研究发现,糖尿病患者较正常人更易于发生骨量减少和骨质疏松症。
其发生机理至今尚未明确,多项临床研究显示,与持续性高血糖相比,间歇性高血糖对糖尿病患者的微血管及大血管损伤更为显著,并可增加心血管死亡风险。
然而,间歇性高血糖对成骨细胞乃至骨的影响,目前尚无相关研究。
因此,本实验中我们以小鼠颅骨成骨细胞为研究对象,研究间歇性高糖环境对于成骨细胞的形态、细胞增殖及功能蛋白表达的影响。
1、对象与方法 1.1实验对象 取出生3日内的健康新生KM小鼠(购自福建医科大学动物实验中心),拉颈处死,75%酒精中浸泡20min后,取出颅骨,剔除附着于颅骨上的结缔组织及骨膜,PBS冲洗至其呈白色后,用眼科剪将颅骨剪碎成1mm×1mm×1mm的碎骨片,将其用0.25%胰蛋白酶于37℃恒温下消化10min,吸弃消化液,加入0.2%的Ⅱ型胶原酶中37℃消化20min,收集消化液,重复3次。
将消化液置于离心管中,1500r/min离心8min,去上清,所得白色沉淀即为成骨细胞。
加入含有15%胎牛血清与1%双抗的HDMEM培养基重悬细胞,将其接种于培养瓶中。
细胞在37℃、5%CO2、95%O2、100%湿度的孵箱中培养。
根据细胞生长情况以及培养液pH值变化选择2~3天换液一次,待细胞80%~90%融合时传代,传代后,改用含有10%胎牛血清与1%双抗的LDMEM培养基培养细胞。
BCIP/NBT碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞,细胞传代接种。
对数生长期的第3代成骨细胞随机分为3组:5.5mmol/L正常糖浓度组、25mmol/L持续性高糖组、5.5mmol/L~25mmol/LQD间歇性高糖组,分别检测干预1w、2w及3w后成骨细胞形态学变化,收集上清液OCN及ALP分泌情况取第三代成骨细胞,调整细胞终密度为5000个/孔,细胞接种于96孔板中,共设四块平行培养板置培养箱中培养24h,观察大部分细胞已经贴壁,吸弃培养基。
小鼠成骨相关基因
小鼠成骨相关基因:
小鼠成骨相关基因是指与小鼠骨骼形成和生长相关的基因。
成骨相关基因在骨骼发育中起着关键作用,调控着细胞增殖、分化、迁移和骨形成等过程。
以下是一些与小鼠成骨相关的重要基因:
1. BMP(Bone Morphogenetic Protein)基因家族:BMP基因家族是一组可以促进成骨的信号分子,它们可以促进间充质细胞的增殖和分化,进而形成骨细胞。
2. Wnt/β-catenin信号通路:Wnt/β-catenin信号通路在骨骼发育中起着关键作用,它调控着细胞增殖、分化和迁移等过程。
3. Runx2(runt-related transcription factor 2)基因:Runx2基因是调控骨形成的关键转录因子,它在成骨细胞分化和骨形成过程中起着至关重要的作用。
4. Osx1(osteoblast specific transcription factor 1)基因:Osx1基因是成骨细胞特异性转录因子,它在成骨细胞分化和骨形成过程中起着重要作用。
5. Col1a1(collagen type I alpha 1)基因:Col1a1基因编码Ⅰ型胶原蛋白的α1链是骨基质的主要成分,对骨的形成和维持起到关键作用。
6. Alpl(alkaline phosphatase, liver/bone/pancreas)基因:Alpl基因编码碱性磷酸酶,它在成骨细胞分化和骨形成过程中起着重要作用。
胶原蛋白肽含药血清促进成骨细胞增殖和分化
胶原蛋白肽含药血清促进成骨细胞增殖和分化刘俊丽;宋淑军;司少艳;卢伟鹏;郭燕川【摘要】目的牛骨胶原蛋白肽(collagen peptides,CP)化合物能够显著增加股骨骨密度,并改善股骨的微结构,在骨质疏松症的预防和治疗中发挥重要的作用,它通过口服给药的形式吸收入肠.然而,此过程的分子机制尚不清楚.因此,本研究以阐明牛骨CP化合物血清对成骨细胞增殖与分化的影响.方法制备牛骨CP化合物大鼠血清,牛骨CP化合物处理的实验组和未经处理的对照组大鼠血清浓度为3%、6%、10%,加到无血清的DMEM溶液中,用MTT法和流式细胞术分别检测牛骨CP血清对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响.茜素红矿化染色检测牛骨CP血清对成骨细胞矿化,用Pro Plus 6图像软件定量分析茜素红染色的含量.结果 MTT结果表明,3%、6%及10%的CP化合物含药血清与对照组相比,能够显著促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05).然后将3% CP化合物含药血清,对照组(control,CN)血清分别作用于MC3T3成骨细胞,培养3 d,流式细胞术测定细胞周期.结果表明,与3%CN 血清相比,3% CP血清组G1期比例显著减少,G2/S期比例显著增加(P<0.01),表明牛骨CP通过促进G2/S期的百分含量而促进细胞的增殖.矿化染色结果表明CP血清处理21 d后能显著促进成骨细胞的矿化(P<0.05).结论牛骨CP血清在成骨细胞增殖与分化中起重要作用,为骨质疏松症的防治提供了理论依据.%Objective Bovine collagen peptides (CP) compounds could significantly elevate femoral bone mineral density and improve femoral bone microstructure, thus play an important role in the prevention and treatment of osteoporosis by oral administration and intestinal absorption.However, the molecular mechanisms of this process remain unclear.Therefore, we undertook experiments to clarify the effects of bovine CP compounds inserum on the proliferation and differentiation of osteoblast. Methods CP compounds in serum form were prepared, and rat serum containing bovine CP compounds (experimental groups) at the concentration of 3%, 6%, and 10% or control serum (control (CN) group) was added to DMEM without FBS.The effect of CP in serum on the proliferation and cell cycle of MC3T3 cells were examined by MTT and flow cytometry, respectively. Quantitative analysis of mineralization in osteoblasts using Alizarin red staining was measured by Image Software Pro Plus 6.0. Results We found that MTT values of MC3T3-E1 cells after treatment with bovine CP compounds at a concentration of 3%, 6% and 10% in serum were much higher than the control serum (P<0.05).MC3T3-E1 cells were harvested at 3 d after treatment with 3% CP serum DMEM without FBS or CN serum.Cell cycle distribution analysis of MC3T3-E1 cells was conducted by flow cytometry.3% CP compounds in serum led to increased cell cycle arrest in the G2/S phase at day 3 (P<0.01), and G1phase was significantly reduced compared with control serum.This suggested that CP compounds in serum might play an important role in osteoblast proliferation.Calcium deposit test showed that CP in serum significantly increased mineralization in osteoblasts at the 21st day (P <0.05).Conclusion Bovine CP compounds in serum played an important role in osteoblasts proliferation and differentiation, which provides a theoretical basis for the prevention and treatment of osteoporosis.【期刊名称】《中国骨质疏松杂志》【年(卷),期】2018(024)006【总页数】5页(P750-754)【关键词】胶原蛋白肽含药血清;成骨细胞;增殖;分化;骨质疏松;动物实验【作者】刘俊丽;宋淑军;司少艳;卢伟鹏;郭燕川【作者单位】中国科学院理化技术研究所,光化学转换与功能材料重点实验室,北京100190;解放军第306医院特种医学实验研究中心,北京100101;解放军第306医院特种医学实验研究中心,北京100101;中国科学院理化技术研究所,光化学转换与功能材料重点实验室,北京100190;中国科学院理化技术研究所,光化学转换与功能材料重点实验室,北京100190【正文语种】中文【中图分类】R-332骨质疏松症是一种代谢性疾病,其特征是骨形成不足、骨吸收过度而导致骨量减少及骨微结构的恶化,其后果增加了骨脆性和骨折易感性[1]。
重组人骨形成蛋白2和转化生长因子β复合促进骨生长
重组人骨形成蛋白2和转化生长因子β复合促进骨生长司晓辉;金岩;杨连甲【期刊名称】《实用口腔医学杂志》【年(卷),期】1997(13)3【摘要】将重组人骨形成蛋白2(rhBMP2)和转化生长因子β(TGFβ)复合后,对比观察其骨诱导及骨生成过程和促进骨生长的效果。
以一定比例的TGFβ和rhBMP2与陶瓷化牛骨(CBB)复合,埋入小鼠股部肌肉陷窝内,于第3、5、7、14、21d取材后光镜观察新骨生长情况并计算新骨形成面积。
结果发现,rhBMP2和TGFβ复合后其成骨作用比单独应用rhBMP2明显,骨组织较为成熟,新生骨面积14d时2倍于rhBMP2组。
而单独用TGFβ无异位诱导新骨形成的作用,但TGFβ可刺激原有骨的膜内成骨。
认为,BMP和TGFβ在骨生长修复中各自发挥着不同的作用,TGFβ可促进BMP的骨诱导过程,BMP/TGFβ/CBB复合物或BMP/TGFβ/生物陶瓷复合物具有高效的骨诱导性,在临床骨缺损及骨折修复中有良好的应用前景。
【总页数】3页(P166-168)【关键词】人骨形成蛋白;转化生长因子;骨生长【作者】司晓辉;金岩;杨连甲【作者单位】西安第四军医大学口腔医学院病理科【正文语种】中文【中图分类】R329.26【相关文献】1.转化生长因子β1和重组人骨形成蛋白2对成牙本质细胞系MDPC-23牙本质基质蛋白1表达的影响 [J], 逄键梁;吴补领;张亚庆;何文喜;刘鹏;张敬雷;郭鹏2.转化生长因子—β和重组人骨形成蛋白—2刺激骨膜成骨的实验研究 [J], 司晓辉;金岩3.重组人骨形成蛋白-2/转化生长因子-β作用下陶瓷化骨粉/水凝胶与骨髓基质细胞修复自体颅骨缺损 [J], 何大为;金岩;骆凯;李石保4.骨诱导和骨形成机制的研究:β转化生长因子增强人重组骨形态发生蛋白-2在体内的诱导成骨作用 [J], 杜俊杰;罗卓荆;胡蕴玉;李志创;吕荣5.转化生长因子β及重组人骨形成蛋白2对雪旺细胞生物学行为影响的实验研究[J], 张勇杰;金岩;聂鑫;孙慧生;刘源;赵宇;刘鹏因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
骨形态发生蛋白2诱导鼠胚胎间充质干细胞成骨分化的分子机制研究
骨形态发生蛋白2诱导鼠胚胎间充质干细胞成骨分化的分子机制研究摘要】目的探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)诱导鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化能力。
方法培养C3H10T1/2,用20μg/ml BMP2对其诱导一定时间后,Western blotting 检测smad 蛋白及信号通路中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) p38的水平变化,QRT-PCR检测成骨标志基因碱性磷酸酶(ALP)表达情况,茜素红染色,观察诱导晚期细胞矿化情况。
结果经BMP2诱导后,C3H10T1/2细胞成骨终末期分化标志矿化情况(茜素红染色)显著增加,smad 蛋白及p38磷酸化水平有所上升,成骨标志基因ALP表达水平有明显提高。
结论BMP2具有诱导C3H10T1/2细胞成骨分化能力,对BMP、Smad通路有一定依赖性。
【关键词】骨形态发生蛋白 C3H10T1/2细胞成骨分化【中图分类号】R446.8 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)17-0061-02骨形态发生蛋白(BMP),是转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员之一,具有多种生物学功能[1],其中目前研究较多的是与骨的再生及修复相关的BMP2。
在骨组织形成过程中,BMP2有促进成骨细胞分化和诱导体外成骨的能力。
它使未分化的间质细胞经过趋化、分裂和分化三个环节不可逆地分化成软骨细胞和成骨细胞,诱导新骨生成[2]。
C3H10T1/2细胞是鼠胚胎未分化的间充质干细胞,在不同的诱导因素作用下可向不同的细胞系包括成骨细胞,成软骨细胞以及成脂肪细胞分化[3],增殖能力好,本实验选用其做为诱导分化成骨的模型。
BMP2诱导C3H10T1/2细胞成骨分化已见报道[4,5],但未从分子机制进行深入研究,本文从细胞及分子水平分别对BMP2诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化的条件及分子机制进行研究,进一步探讨成骨分化机制。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试剂Western blotting试剂盒(Pierce),DMEM培养基(Tiangen),胎牛血清(Gibco)。
低强度脉冲超声波联合骨形态发生蛋白2促进人牙周膜细胞的成骨分化
低强度脉冲超声波联合骨形态发生蛋白2促进人牙周膜细胞的成骨分化刘俊;胡波;蒋欣益;孙吉成;邓锋;宋锦璘【摘要】BACKGROUND:Both of low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) and bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) can promote the osteogenic differentiation of human periodontal ligament cels, but there is no report on their combination application. OBJECTIVE:To evaluate the biological effect of LIPUS combined with BMP-2 on osteogenic differentiation of human periodontal ligament cels. METHODS:Human periodontal ligament cels were isolated, cultured, passaged and identified. Passage 4 cels were seeded onto 6-wel plates and divided into four groups: control group, LIPUS group, BMP-2 group, LIPUS+BMP-2 group. Alkaline phosphatase activity was detected by alkaline phosphatase activity measurement kit, and the expression of type I colagen and osteopontin was detected by RT-PCR. RESULTS AND CONCLUSION: After LIPUS, BMP-2, and their combination treatment, the activity of alkaline phosphatase was significantly higher than that in the control group (P < 0.05), and the activity of alkaline phosphatase was highest in the LIPUS+BMP-2 group (P < 0.05). RT-PCR results showed that both of LIPUS and BMP-2 could augment the mRNA expression of type I colagen and osteopontin (P < 0.01), but it was more n<br> distinct when they were used together (P < 0.001). In a conclusion, the combined utilization of LIPUS and BMP-2 shows stronger ability in promoting the osteogenic differentiation ofhuman periodontal ligament cels.%背景:低强度脉冲超声波和骨形态发生蛋白2均可促进人牙周膜细胞成骨分化,但两者联合应用尚未见报道。
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• Geraghty等人最近发表的一项研究描述了一种新的,可行的骨软骨异体移植物,其包含 能够刺激MSC的细胞外基质(ECM)蛋白和软骨形成生长因子(即TGF-β1和3, BMP2,4,7,bFGF和IGF1),完成山羊模型中的体内软骨修复。
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上述研究显示使用与MSC相关的BMP促进关节软骨修复带来有限的有利结果。同时, 使用其他软骨形成诱导因子例如TGF-β蛋白或者诸如PRP或Geraghty等人描述的嵌 入新的骨软骨同种异体移植物中的因子的异质混合物已经证明了更好的结果。可能是 因为这些因素以及包含BMPs,比单独使用BMPs软骨修复更有希望。事实上,BMP 与MSC一起在体内显示比成软骨细胞更高的骨诱导能力。
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结论
BMP已经在再生医学和组织工程领域中展示出巨大的潜力。它们已经在许多临床前和临床研 究中测试,探索它们在几种动物模型缺陷和人类疾病中的软骨形成或骨诱导潜能。特别是 BMP2和BMP7,已经被完全用于治疗许多软骨和骨缺损,并且最近被批准用于不连骨断裂 的协议作为辅助治疗。 该领域目前仍是分子细胞研究领域的热门,越来越多的文献和近年来的研究结果表明,为骨 替换生产理想的移植物这一目标确实可以实现,并且未来的BMP和MSC将参与特别设计的 植入物的生产用于骨组织工程。
1、由于对调节其活性的因素的理解有限; 2、缺乏对这些细胞和它们的生态微环境的组分之间的复杂相互作用的了解。 由于以上两个因素,MSC的临床应用受到限制。仍有待相关研究进一步探索。
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MSCS在致癌和生殖细胞分化中的应用
• 当在一个或多个(转化生长因子-β)TGF-β超家族成员的存在下将MSC以无血清的3D培 养形式(为细胞提供一个更加接近体内生存条件的微环境的培养技术)接种时,发生软骨 形成分化。在该条件中,细胞放弃典型的成纤维细胞形态并开始产生软骨特异性基质组分。 细胞通常在不超过2-3周内分化成分泌蛋白多糖的软骨细胞样细胞。
龟板调控BMSCs增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏松症的研究进展
中国骨质疏松杂志2020 年 12 月第 26 卷第 12 期 Ch$ J Osteoporo , December 2020,V0 26, No 12Published online doi : 10. 3969/j.issn. 1006-7108. 2020. 12.024 1847-综谨-龟板调控BMSCs 增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏 松症的研究进展余翔1任辉“沈耿杨1张鹏2余富勇2尚奇2汤凯2张志达2招文华2梁德1江晓兵1,3**基金项目:国家自然科学基金项目(81904225 ),广东省自然科学基金项目(2018A030310615),广东省教育厅基础研究及应用基础研究项目(2018KZDXM021),广州中医药大学第一临床医学院优秀博士论文培育项目(YB201702) o* 通信作者:任辉,renhuRpine@ ;江晓兵,spinedrjxb@1. 广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科,广东广州5104052. 广州中医药大学,广东广州5104053. 广州中医药大学岭南医学研究中心,广东广州510405中图分类号:R259 文献标识码:A 文章编号:1006-7108( 2020) 12-1847-05摘要:近年来,中医药在抗骨质疏松症方面显示出独特优势。
龟板被证实可通过miRNA 及其靶基因、信号通路及相关因子调 控BMSCs 功能,从而抗骨质疏松症)本文对龟板调控BMSCs 增殖、迁移和成骨分化及其抗骨质疏松症的研究进展进行综述,发现龟板体外可通过调节BMP-4、VDR 、RAR +、Id1等表达调控BMSCs 增殖;可上调HGF/c-met 轴、SDF-1/CXCR4轴促进BMSCs 迁移;可通过调节成骨相关因子、miRNAs 和信号通路调控BMSCs 成骨分化)此外,龟板体内可有效抗PM0P 、GI0P 和SOP 。
本文旨在为中医药防治骨质疏松症提供相关参考。
关键词:中医药;龟板;骨质疏松症;干细胞;综述Research progress of plastrum testudinis in regulating BMSCs ' proliferation , migration andosteogenic differentiotion and itr antnosteoporsisYU Xiang 1, REN Hui 1! , SHEN Gengyang 1 , ZHANG Peng 2, YU Fuyong 2, SHANG Qi 2, TANG Kai 2, ZHANG Zhida 2, ZHAOWenhua 2, LIANG De 1, JIANG Xaobing 1,3!1.Department of Spinal Surgery , First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine , Guangzhou510405, China2. Guangzhou Universite of Chinese Medicine , Guangzhou510405, China3.Lingnan M&dicaiR&sarch C&ntrofGuangzhou Univ&rcity ofChin&s&M&dicin&, Guangzhou510405, China* Corresponding authors : REN Hui , Emaii : renhuispine@ ; JIANG Xiaobing , Emaii : spinedijxb @ Abstract : Recently , traditional Chinese medicine has shown unique advantages in anti-osteoporosis. Plastrum testudinis (PT ) hasbeen shown to affect the function of BMSCs through regulating osteoblast-related miRNAs ' target genes , signaling pathways and related-factors , thereby achieving anti-osteoporosis effect. In this paper , we reviewed the effects of PT on the proliferation , migration , and o steogenic differentiation of BMSC s andR s mechanim on anti-os t eoporo s R , providing reference s for antifosteoporosR in traditional Chinese medicine. It have been found that PTcen regulate BMSCs ' proliferation through BMP-4, VDR ,RAR + and Id1 in vitro. PT cen up-regulate the axis of HGF/c-met and SDF- 1/CXCR 4 to promote the migration of BMSCs. PT cenregulate BMSCs ' osteogenic differentiation through osteoblast-related factors,miRNAs and signaling pathways In addition , PT caneffectively resist PMOP , GIOP and SOPin vivo.This wiH provide references for anti-osteoporosis using traditionai ChinessmeditinecKey words : traditional Chinese medicine ; plastrum testudinis ; osteoporosis ; stem cells ; review骨质疏松症(osteoporosis, OP )是易导致骨折等严重并发症的一种全身性系统性骨代谢疾病,严重 威胁患者生命健康,给家庭、社会带来了沉重负担-T 。
选择性剪接中的剪接模式
选择性剪接中的剪接模式有几种不同的剪接模式(见图1-1)[1,6].最常见的模式是在成熟的mRNA中跳过外显子,使其包括或者剔除盒式外显子(也称为跳过的外显子)。
跳过外显子的一个著名的例子是果蝇性别致死的基因(SXL),这是一个由性别决定的转变。
跳过SXL基因的第3外显子,可以保持雌性的分化。
SXL的第3外显子包含一个早提前的终止密码子,这个外显子的存在合成出截短的、也有可能是非功能的蛋白质[7,8].另一个剪接模式是外显子互斥,这使得两个相邻外显子中,仅有一个出现在最终产物中.人类成纤维细胞生长因子受体二号(FGFR—2)基因含有外显子IIIB和IIIC,这两者是互斥的。
从外显子IIIB得到的的基因产物,具有比纤维细胞生长因子低得多的聚合吸引力[9].不仅可以作用于整个外显子,不同的剪接方式也可以只剪接外显子的某一部分。
5’或3’选择性剪接位点的选择,通过加上、或者不加上与外显子侧面相连的支链而生成,从而造成多样性。
果蝇无子(FRU)和双性别(DSX)基因包含了雌性特有的选择性剪接位点,前者在5‘端,而后者在3'端.由于选择性剪接位点的不同,造成支链的细小差异[10,11]。
选择性剪接可发生在转录体的任意一端。
选择性终止外显子不仅改变最后一个外显子的包含性,而且还影响聚腺苷酸化位点的选择。
在许多情况下,它可以在最后的外显子中生成提前的终止密码子,并且生成功能性截短的多肽或者产生无意义介导衰变(NMD,即,由于终止密码子位于最后外显子与外显子的结点上游超过50—55碱基对处,从而造成的mRNA的降解)[2,12,13]。
钙调节激素(降钙素)基因包括6个外显子。
成熟的的降钙素转录体包括前四个外显子,并使用位于第4外显子上的多聚腺苷酸化位点,从而生成甲状腺C细胞中超过98%的基因产物。
同时,在大脑和周围神经系统中,通过将前三个、第五和第六个外显子编码成降钙素相关肽的前体,并利用下游的腺苷酸化位点(CGRP),从而产生差异[14,15].同样,选择性启动子的使用使得可以选择不同的转录启动子,这样通常会影响到第一个外显子。
人参皂苷促进小鼠成骨细胞增殖的作用及机制
人参皂苷促进小鼠成骨细胞增殖的作用及机制姚曼;梁淑芳;程彬彬;凌昌全【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2015(035)009【摘要】Objective To observe the effect of ginsenoside (GSS) on the proliferation of mouse osteoblast and explore the underlying mechanisms. Methods Mouse osteoblast MC3T3-E1 cells were incubated with different concentrations of GSS (3.125-50 μg/mL), and then the effect of GSS on proliferation was measured by MTT assay. The mRNA and protein levels of p21 and p27 were detected by real time RT-PCR and western blot respectively. Results Compared with the blank control group, different concentrations of GSS (3.125~50 μg/ml) all significantly promoted the proliferation of mouse osteoblast after treatment for 24 h and 48 h(P<0.01 or 0.05), the effects possess a dose- and time-dependent manner.50 μg/mL and 25 μg/mL GSS significantly inhibited p21 and p27 mRNA levels (P<0.01), while 12.5 μg/mL GSS showed little effect on the its levels.50 and 25 μg/mL GSS inhibited the expression of p21 and p27 protein and increased the level of Cyclin D1 (P<0.01 or P<0.05). Conclusion GSS can promote mouse osteoblast proliferation by increasing the Cyclin D1 expression and decreasing the p21 and p27 expression.%目的观察人参皂苷(Ginsenoside,GSS)对小鼠成骨细胞增殖活性的影响,并探讨其作用机制. 方法采用MC3T3-E1小鼠成骨细胞系, 加入不同浓度的GSS (3.125~50 μg/mL) 培养后,MTT法检测GSS对成骨细胞增殖的影响, 荧光定量RT-PCR法检测不同浓度各组细胞内p21和p27 mRNA的表达水平, 并采用Western-blot检测细胞周期相关蛋白表达. 结果与空白对照组相比,3.125~50 μg/mL的GSS在24、48 h时均能够显著促进成骨细胞的增殖(P<0.01或0.05),其作用具有时间依赖性和浓度依赖性. 50、25 μg/mL的GSS能够显著抑制p21和p27的mRNA表达(P<0.01),而12.5 μg/mL的GSS对其表达无影响.50、25 μg/mL的GSS抑制了细胞周期抑制蛋白p21及p27表达水平并上调Cyclin D1表达(P<0.01或0.05).结论 GSS能够通过上调Cyclin D1表达,抑制p21和p27表达,进而促进小鼠成骨细胞增殖.【总页数】4页(P16-19)【作者】姚曼;梁淑芳;程彬彬;凌昌全【作者单位】第二军医大学长海医院中医肿瘤科,上海 200433;第二军医大学长海医院中医肿瘤科,上海 200433;第二军医大学长海医院中医肿瘤科,上海 200433;第二军医大学长海医院中医肿瘤科,上海 200433【正文语种】中文【中图分类】R284;R681【相关文献】1.人参皂苷下调IL-1受体相关激酶1基因表达抑制肝癌细胞增殖及促进其凋亡作用及机制 [J], 王娜;刘刚;刘欢;王策;张德新2.乳铁蛋白促进大鼠成骨细胞增殖及作用机制 [J], 王军;张碧玉;宗川曰3.超宽带微波促进成骨细胞增殖的作用及其机制 [J], 龚茜芬;白光兴;杨学森;张广斌4.人参皂苷Rg1对丙二醛抑制小鼠间充质干细胞成骨分化的保护作用 [J], 黄思洋;陈继尧;王逸安;张君;李烨5.人参皂苷Rh1对MC3T3-E1细胞增殖和分化的促进作用及其机制 [J], 毛天娇;孙铎;高幸;魏溦;李熙恒;姜可新;姜秋;李江因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
骨形态发生蛋白-2、-3对胚胎小鼠椎间盘细胞的成软骨及成骨作用
and osteogenesis of prenatal mouse intervertabral disc ceUs and pro、,ide experimental for me applicadon of BMPs in t11e merapy of disc diseases.Methods The prenatal mouse inten,ertabral disc cells
ofChina(81001197)
作者简介:周建武,硕士,E—mail:zhou印0110@163.com 通信作者:刘传康,硕士生导师,副教授,E—mail:liuchuaIlkang@126.com
(AF)和髓核(NP)细胞,探索成骨作用较强且已经商品 化的BMP一2和成骨抑制作用的BMP.3对其成软骨基 质及成骨蛋白的合成影响,希望在临床利用相关BMPs
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Abshact:objective Tb invesngate t11e effect of recoIr山inant adeno、,ims—mediated bone morphogenetic protein(BMP)-2 and一3
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I),collagen帅e II(ColⅡ),aggrec越,osteocal血,oste叩rotegerin
detected with ALP reading and ALP staining.Reslllts BMP一2 and一3 overexpression did not
骨桥蛋白体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化中的作用的开题报告
骨桥蛋白体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化中的作用的开题报告一、研究背景和意义干细胞是具有自我更新和分化能力的一类细胞,有着广泛的应用前景。
骨髓基质干细胞(BMSCs)是一类成熟的干细胞,具有向多种细胞类型分化的能力,包括成骨细胞。
BMSCs在组织工程和再生医学领域具有重要的应用价值。
骨桥蛋白(BMP)是一类生长因子,能够促进骨组织的修复和再生。
通过体外诱导,BMP可以驱动BMSCs向成骨细胞分化,促进骨组织的生长和修复。
因此,研究BMP体外诱导BMSCs向成骨细胞分化的机制,可以为骨组织工程和再生医学的应用提供理论基础和实践指导。
二、研究内容和方法本研究将利用大鼠的BMSCs,加入适当的培养基和BMP,进行体外诱导实验,研究BMP对BMSCs向成骨细胞分化中的作用。
具体内容如下:1. 建立大鼠BMSCs培养体系。
将大鼠骨骼肌骨骼通过胶原酶和胰酶消化,分离出BMSCs。
将BMSCs培养在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中,进行培养和扩增。
2. BMP体外诱导BMSCs向成骨细胞分化。
将BMSCs转移到含有10ng/ml BMP-2的培养基中,进行体外诱导实验。
分析BMP诱导下BMSCs向成骨细胞分化的程度和机制。
3. 检测BMSCs分化成骨细胞的标志物。
通过qPCR、免疫荧光染色和转化器活性检测等方法,检测分离出的BMSCs分化后相应细胞表面标志物、胞内蛋白表达和酶活性。
三、研究预期结果本研究旨在探讨BMP体外诱导BMSCs向成骨细胞分化的机制,预期结果如下:1. 成功建立大鼠BMSCs培养体系。
2. BMP可以促进BMSCs向成骨细胞分化,且BMP-2的作用效果较好。
3. BMP-2作用下,BMSCs分化为成骨细胞的标志物表达量和酶活性均会显著增加。
四、研究意义和应用前景本研究可以为骨组织工程和再生医学的应用提供理论基础和实践指导,包括:1. 为BMP在骨组织工程和再生医学中的应用提供理论支持,指导体外反应器的优化设计和制备。
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第4 卷 1
第 3期
分 子 细 胞 生 物 学 报
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F S的 O ME 培 养 基 中 ,3  ̄ B t M — 7 C、5 O 、饱 和湿 %C 2 度 条件下 培养 ,2 3天换培 养液一 次 。 — 茜 素 红染 色 方 法 :当前 成 骨 细胞 诱 导 分 化 2 3 天 后 ,分 化后 的细胞 中形成 磷酸钙 .茜 素红染 色可 以使磷 酸钙 中的 C a离子 染 为橙 红 色 。染色 时 ,先 去 掉 培养 液 ,用无 C C Mg 1的 P S将 细 胞洗 a 1和 C B
小 鼠 骨 肉 瘤 基 因 B ( i e — i i— ikn Fn l Bs s Jn is k k
mti ¥e¥lo zB.f b tn otoac t ̄ Fe 'n o )是具亮 氨 酸拉链 结 构 s 的 转 录 因 子 激 活 剂 蛋 白 一 (cia rpo i — . 1 at t rt n J vo e A 一 )家 族 的 成员 之 一 。 P1 6基 因在 转 录 拼 接 过 程 中会 自发地 发 生 剪 切 截 去 C端 的 1 1个 富 含 脯 0 氨酸的氨基酸 区域 而形成  ̄ ob f s .被截 断的区域 包括 转 录激活结 构域 .但 是  ̄ob基 因仍 然保 留 N端 的 fs fs同型结 构域 (o o ooydma H .并 能 o F s m l o i F D) h g n
郑 惠玲 袁 超 包黎 娟 安 俊 辉 祝 珍珍 杨 公 社
72 0 ) 1 10 ( 北 农林 科 技 大 学 动 物科 技 学 院 ,陕 西杨 凌 西
关键 词 : 成骨 细胞
分 化 f s 茜素 红染 色 ob
的细胞漂 浮时 ,收集 细胞及 培养液 .然 后在液氮 中
冷 冻 、3 C温 水 中解 冻 ,共 3次循 环处 理 ,然 后 7。 用 微 孔离 心 过 滤 器将 病 毒 浓缩 .放 于 一 0 c冰 箱 8o