两种酶底物法监测水中(粪)大肠茵群商品化制品的比较

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现行两种水质粪大肠菌群测定方法的比较

现行两种水质粪大肠菌群测定方法的比较作者：马旭东赵锋来源：《绿色科技》2015年第10期摘要：指出了由国家环境保护总局主持修订的第三版地表水环境质量标准《地表水环境质量标准》（GB3838—2002）2002年4月发布，其中粪大肠菌群也被列为24项基本项目之一。

然而直到2007年3月才由国家环境保护总局发布了行业标准《水质粪大肠菌群的测定多管发酵发和滤膜法》（HJ/T347-2007）（以下简称“行业标准”）。

之前环境监测部门一直都是在使用卫生部发布的《生活饮用水标准检验方法微生物指标》（GB/T5750.12-2006）（以下简称“国家标准”）。

主要通过对这两个标准的异同点的比较，探究了将这两种方法的优点用在实际的环境监测工作中。

关键词：地表水环境质量标准；粪大肠菌群；环境监测中图分类号：X832文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2015）10-0216-021 概述大肠菌群并非细菌学分类命名，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌，粪大肠菌群则是大肠菌群的一部分主要来自于粪便，因此粪大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。

国家标准和行业标准中都对粪大肠菌群的检测（多管发酵法）作出了比较详细的规定，现就其两个标准中的异同作出如下探讨。

2 相同点适用范围相同：行业标准和国家标准都适用于地表水、地下水和污水中的粪大肠菌群的检测。

原理相同：多管发酵法是以最可能数简称MPN来表示试验结果的。

实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠菌群密度和卫生质量的一种方法。

如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。

不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。

酶底物法检测水中粪大肠菌群方法验证

酶底物法检测水中粪大肠菌群方法验证摘要：本文对《水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定酶底物法》HJ1001 -2018、《生活饮用水标准检验方法》GB/T5750-2006进行了方法验证，以评价该两种检测方法是否适用于水中粪大肠菌群的检测工作，以确保该方法能够满足水中粪大肠菌群的测定。

关键词：粪大肠菌群；质控样品。

引言：试样与固定底物酶底物法（DST）采用大肠菌群能产生β—半乳糖苷酶分解ONPG使培养液呈黄色的原理，来判断水样中是否含耐热大肠菌群，大肠菌群的培养温度是44.5℃。

1.测定方法与参数（注：方法为酶底物法法，参数为质控样品）2.仪器与设备2.1恒温培养箱2.2冰箱2.3高压蒸汽灭菌锅2.4烘箱2.5量筒2.6吸管2.7程控定量封口机2.8 51孔或97孔定量盘2.9无菌水样瓶（100mL）2.10阳性比色盘2.11干热灭菌器3培养基和试剂3.1无菌水3.2科立德（固定底物技术酶底物法）检测试剂：MMO-MUG培养基。

4.样品的采集和保存4.1采样前准备：4.1.1采样瓶：高压灭菌瓶。

4.2样品采样及注意事项4.2.1将已灭菌和封包好的采样瓶，无论在什么条件下采样时，均要小心开启包封纸和瓶盖，避免瓶盖及瓶子颈部受杂菌污染。

4.2.2在采集江，河湖，库，地表水时，可握住瓶子底部直接将采样瓶插入水中，约距水面10-15厘米时，瓶口朝来水方向，使水样灌入瓶内。

如果没有水流，可握住瓶子水平前推，直至充满水样为止。

采样后，迅速盖上瓶盖和包装纸。

采样后，采样瓶内上不应留有一些空隙，一边检验前充分混匀水样。

4.2.3从自来水龙头采集样品时，不要选用漏水的水龙头，采水前可先将水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌或用75﹪酒精溶液消毒水龙头，然后将水龙头打开，放水数分钟后除去水管中的滞流杂质。

采水时控制水流速度小心接入瓶内。

4.2.4在同一采样点进行分层采样时，应自上向下进行，以免不同层次的干扰；同一采样点与理化检测项目同时采样时，应先采集细菌等检验样品，否则样品可能被污染，采样前，不得用水样刷洗采样瓶。

现行两种水质粪大肠菌群测定方法的比较

中。培养后立即观察，发酵管产气则证实为粪大肠菌群
阳性。而国家标准中规定若复发酵有产气者，则转种于伊红美蓝琼脂平板上，置４４．５ ℃培养１８～２４ｈ，凡平板上有典型菌落者，则证实为粪大肠菌群阳性。即国家标准中在复发酵试验发酵管产酸或产气之后还需要进行
摘要：指出了由国家环境保护总局主持修订的第三版地表水环境质量标准《地表水环境质量标准》
（ＧＢ３８３８２００２）２００２年４月发布，其中粪大肠菌群也被列为２４项基本项目之一。然而直到２００７年３月才由国家环境保护总局发布了行业标准《水质粪大肠菌群的测定多管发酵发和滤膜法》（ＨＪ／Ｔ３４７ —２００７）（以下简称 “ 行业标准” ）。之前环境监测部门一直都是在使用卫生部发布的《生活饮用水标准检验方法微生物指标》（ＧＢ／Ｔ５７５０．１２ —２００６）（以下简称“ 国家标准” ）。主要通过对这两个标准的异同点的比较，探究了将这两种方法的优点用在实际的环境监测工作中。关键词：地表水环境质量标准；粪大肠茵群；环境监测中图分类号：Ｘ８３２文献标识码：Ａ文章编号：１６７４ — ９９４４（２Ｏ１５）１０ — ０２１６一Ｏ２

滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析

滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析摘要粪大肠菌群是污水中常见的指标菌，其检测与评价对于污水处理过程的监测和卫生保障非常重要。

本研究采用滤膜法和酶底物法两种方法对污水中的粪大肠菌群进行了比较分析。

结果表明，滤膜法具有操作简单、准确性高的优点，适用于对粪大肠菌群进行定量检测；而酶底物法快速、便捷，适用于快速筛查和初步评价。

两种方法在不同场景和实际应用中具有各自的优缺点，应根据具体需求选取合适的检测方法。

1. 引言粪大肠菌群是一类常见的从属于大肠杆菌科的细菌，广泛存在于土壤和水体中，为评估环境水质状况提供了一种重要的指标。

粪大肠菌群来源于人体和动物的消化系统，其存在与污水中表明该水源可能受到了粪便污染。

因此，对于污水处理厂和水源地的管理和监测，粪大肠菌群的检测是必不可少的。

2. 滤膜法检测粪大肠菌群滤膜法是一种常用的粪大肠菌群定量检测方法。

其基本原理是通过滤膜将样品中的粪大肠菌群分离并聚集，然后用染色剂进行着色，并在显微镜下进行计数。

滤膜法的优点是操作简单、准确性高，可以快速定量检测粪大肠菌群的数量。

其缺点是耗时较长，需要使用显微镜进行观察和计数，有一定的操作难度。

3. 酶底物法检测粪大肠菌群酶底物法是一种基于粪大肠菌群特定酶的检测方法，通过检测粪大肠菌群特异酶的活性来间接反映其存在量。

常用的酶底物法是利用3-苯基-六胺葡萄糖（X-GAL）和X-α-半乳糖苷酶（β-galactosidase）进行检测。

该方法操作简单、迅速，只需在特定培养基中添加相应底物，通过观察底物转化后的色素变化来判断是否存在粪大肠菌群。

酶底物法的优点是快速、便捷，适用于大规模样品的筛查和初步评价。

然而，酶底物法只能定性判断粪大肠菌群的存在与否，无法精确定量。

4. 比较分析滤膜法和酶底物法是常用的粪大肠菌群检测方法，两种方法在检测原理、操作步骤、检测结果及适用范围等方面存在一定差异。

两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比论述

两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比论述发布时间：2021-03-23T04:11:47.963Z 来源：《学习与科普》2020年19期作者：邱磊[导读] 文章首先分析了实验时所使用的材料和试验方法，其次阐述了试验结果，最后对试验结果进行了总结。

谱尼测试集团江苏有限公司摘要：文章首先分析了实验时所使用的材料和试验方法，其次阐述了试验结果，最后对试验结果进行了总结。

通过结果，得出结论，在水中，对总大肠菌、大肠埃希氏菌进行实际试验检测的过程中，通过两种方法来对其检测，这两种方法是酶底物法和多管发酵法。

通过试验检验结果来看，酶底物法检测的时间比较短，操作简单，方便进行观察，是值的普及和推广的一种检测方法。

关键词：大肠埃希氏菌；总大肠菌；酶底物法；多管发酵法1.材料和方法1.1使用材料、仪器试验检测的过程中，使用材料及仪器有MMO-MUG培养基，EC-MUG、乳糖蛋白胨培养基。

还有培养箱36℃±1、44.5℃±0.5℃；紫外灯，其波长是366m.1.2方法（1）试验前准备在试压之前，要先做好相应的准备工作，试验正式开始前，准备好实用性菌株和加标水样等，同时还要准备培养基粉末（2.7±0.4）g；然后在结合配置有关要求，将EC-MUG、乳糖白胨培养液制作好。

（2）方法原理在检测总大肠菌的时候，应用MMO-MUG来检测，能够产生胨半乳糖苷酶，其能够分解ONPG，分解完成后，这个时候，会出现颜色上的变化，在检测大肠埃希氏菌的时候，应用MMO-MUG及EC-MUG培养基来检测，这个时候会产生β-葡萄糖醛酸酶，然后在进行分解，分解后挥释放荧光，而且通过紫外线照射，特征性荧光也十分的明显[1]。

（3）试验方法在进行适用性实验的时候，要先把分装好的MMO-MUG以及EC-MUG等培养液取出来，取出来后，将混悬液分别加入到各个管中，其结果要在二十四小时后来进行观察。

①灵敏度试验在试验之前，将培养后的侵袭性培养物取出来，这种培养物培养了二十四个小时，取出来之后，在将制成0.5适度菌液，然后在进行稀释，稀释的时候要对其菌液进行十倍稀释，一直稀释到1500MPN/100mL～1MPN/100mL，在开始灵敏度试验。

水中粪大肠菌群测定方法的比较研究分析——酶底物法与多管发酵法

测部门采用的标准检测方法为膜过滤法（ＭＦ）和多
酶底物法（Ｅｎｚｙｍｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）是利用
大肠菌群能分解培养液，使之呈黄色，以及大肠埃
希氏菌使培养液在波长３６６ｎｌｎ紫外光下产生荧光
ＷａｎｇＹａｎ，ＬｏｎｇＪｉａｈｏｎｇ，ＸｕＸｉｏｎｇｆｅｉ，ＬｉＪｉｎｇ
（ＣｈａｎｇｓｈａＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇＣｅｎｔｒｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００１，Ｃｈｉｎａ）
第３８卷第７期２０１３年７月
环境科学与管理
ＥＮＶＩＲ０Ｎ佃ＮＴＡＬＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＭＡＮＡＧＥＭＥＮＴ
Ｖ０１．３８ＮＯ．７
Ｊｕｌｙ２０１３
文章编号：１６７４— ６１３９（２Ｏ１３）Ｏ７— ０１２６— ０３
结果ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ稳定，满足环境监测技术要求，可用以评价水质微生物污染程度。
关键词：酶底物法；多管发酵法；粪大肠菌群中图分类号：Ｘ８３０．２文献标识码：Ｂ
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＦｅｃａｌＣｏｌｉｆｏｒｍｉｎＷａｔｅｒｂｙＥｎｚｙｍｅＳｕｂｓｔｒａｔｅＴｅｃｈｎｉｑｕｅａｎｄＭｕｌｔｉｐｌｅ— — ｔｕｂｅＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＴｅｃｈｎｉｑｕｅ

酶底物法与纸片快速法测定地表水中粪大肠菌群的比较分析

1. 实验部分
稀释，再将每个样品按三个不同的接种量接种，每个接种
1.1 试剂材料与仪器设备
量分别接种 5 张纸片，共接种 15 张纸片。接种水样应均
1.1.1 试剂材料
匀涂布于纸片上，纸片充分浸润、吸收水样，做好标记。
水质（粪）大肠菌群快速检验纸片（绿洲生化）；科在 44.5℃ ±0.5℃的条件下培养 18 ～ 24h 后观察结果。结
于地表水中粪大肠菌群的检测。但酶底物法操作更简便，
分析方法
表1 两种方法配对变量统计
平均值
分析样本量
标准偏差
标准误差
酶底物法
2.0214
16
0.63558
0.15889
纸片快速
法
1.9954
16
0.64250
0.16062
表2 两种方法配对变量相关性统计
分析方法
分析样本量
相关性
P值
酶底物法与纸片
快速法
容量的 80% 左右。样品采集完毕后，迅速扎上无菌包装纸。的数据结果经以 10 为底的对数转换即取 lg 值来表示，以
1.3 实验方法
便进行比对。两种方法检测粪大肠菌群结果 lgMPN 值见
1.3.1 酶底物法
图 1。
·71·
72
生态·环境
化就可对是否产酸产气做出判断，从而确定是否有粪大肠
菌群存在。在这里需要注意的是，若样品呈酸性，则需在
2. 水样检测结果比较分析
约距水面 10 ～ 15cm 处，瓶口朝水流方向，拔瓶塞，使
采集巢湖湖区及环巢湖河流共 16 个地表水样，分别
样品灌入瓶内然后盖上瓶塞，将采样瓶从水中取出。如果用酶底物法和纸片快速法进行测定。根据标准 HJ 1001-

环境水样中粪大肠菌群的两种方法的比较

的测定原理和实验步骤，比较固定底物酶底物法与多管发酵法对于水中粪大肠菌群的检测，即使用科立得ＴＭ（Ｃｏｌｉｌｅｒｔ）试剂和传统方法检测比
较两种方法试验结果，最终得出结论。
【关键词】粪大肠菌群多管发酵法ｉ固定底物酶底物法
３实验结果
选用粪大肠茵群标准茵株０６２０１６一Ｈ对两种方法进行比
对。比对结果如表ｌ。
袭ｌ两种方法的可储度检验
验步骤繁琐．实验环境要求较高．所以我们需要寻找和选择快
速简便的检测方法是十分必要的。此外还有最新发布了一个
１．２设备和材料
科立得ＴＭ（Ｃｏｌｉｌｅｒｔ）试剂，１００ｍＬ无菌瓶（合有１．５％硫代硫酸钠），封口机，９７孔定量盘，９７孔阳性标准比色盘，乳糖蛋
白胨，ＥＣ肉汤，３ｍｍ接种环，酒精灯，培养箱（控温精确± Ｏ．５ ℃）、恒温振荡水浴锅，压力灭菌器．移液枪等。
【中图分类号】Ｘ８３２
【文献标识码】Ａ
【文章编号】２０９５ — ２０６６（２０１７）１０ — ００１５ — ０２
引言
①用无菌样品瓶量取１００ｍＬ混匀水样（或用无菌水适度
，并加入科立得ＴＭ（Ｃｏｌｉｌｅｒｔ）试剂充分摇匀溶解。粪大肠菌群又称耐热大肠茵群．是一群在４４．５ ℃培养２４～稀释的水样）

酶底物法与多管发酵法和纸片法测定水中粪大肠菌群方法比较

酶底物法与多管发酵法和纸片法测定水中粪大肠菌群方法比较背景介绍随着人口的不断加添和城市化的进程，水诘责题也越来越受到关注。

其中水中粪大肠菌群是判定水质是否达标的指标之一、因此，快速、精准地测定水中粪大肠菌群已成为保障公共卫生和水环境安全的紧要工作。

在测定水中粪大肠菌群时，目前紧要有三种方法：酶底物法、多管发酵法和纸片法。

本文将对这三种方法进行比较，以便选择适合的方法进行水质检测。

酶底物法酶底物法是利用粪大肠菌群分泌的β—D—半乳糖苷酶对其底物苯基—β—D—半乳苷（X—Gal）水解，产生可见的蓝色色素。

实在试验步骤如下：1.接受分光光度计，读取X—Gal水解产生的蓝色产物的吸取值。

吸取值越高，表明样品中粪大肠菌群的数量越多。

该方法具有快速、精准等优点，但存在确定的局限性，比如无法区分大肠杆菌和其他肠道菌，仅仅只能检测粪生源的水体样品。

多管发酵法多管发酵法是利用粪大肠菌群在固体培育基中进行培育，利用二氧化碳生成的压力变化判定粪大肠菌群的数量。

实在试验步骤如下：1.将含有气管的玻璃管一端紧贴于固体培育基上。

2.向不同的玻璃管中分别加入不同的水样，并进行固体培育。

3.通过察看玻璃管顶端气泡的产生和数量，判定样品中粪大肠菌群的数量。

该方法不仅可以检测含有粪便的水产品中的粪大肠菌群，而且适用范围广，可以检测非点源污染和净化污水等水产品中的粪大肠菌群，但操作多而杂、时间较长。

纸片法纸片法是将覆盖了0.5～1.0 ml水体样品的纤维素纸分别带入含有荧光素β—D—葡萄糖苷（MUG）的细菌培育基中，然后在黑暗中孵育后，通过紫外线灯照射MUG荧光显带样品，察看荧光显带情况，得出粪大肠菌群数量。

实在试验步骤如下：1.制备含有MUG的培育基。

2.将确定数量的水样加入到带有MUG的培育基中并进行培育。

3.在黑暗中察看培育基上产生的荧光显带情况，得出样品中粪大肠菌群的数量。

该方法具有灵敏度高、操作简便等优点，但也有局限性，例如无法检测混合大肠杆菌和其他的大肠杆菌感染和污染的水样。

两种检验水质粪大肠茵群方法的比较研究

两种检验水质粪大肠茵群方法的比较研究摘要：粪大肠菌群是评价水环境质量的重要卫生指示菌之一,水质粪大肠菌群的监测检验对保障人体健康和维护良好的生态环境有着重要的意义。

本文对实际水样分别用多管发酵法和滤膜法进行检验比较。

关键词：粪大肠菌群；多管发酵法；滤膜法；检测水样abstract: the fecal coliform over the water environmental quality evaluation, is one of the important health instructions bacteria, water quality monitoring inspection of fecal coliform over to protect the human health and maintain good ecological environment has important significance. this paper respectively with more actual water pipe, fermentation and the membrane filter method for the inspection comparison.keywords: fecal coliform bacteria; many tube fermentation; the membrane filter method; testing water中图分类号： r378.2+1 文献标识码：a 文章编号：水中病原微生物对人体健康形成的危害历史悠久，受病原微生物污染的水体中含有大量的致病菌，可引起伤寒、痢疾、霍乱和腹泻等肠道疾病，历史上曾发生过一些大城市因水源水质受到污染而造成的致命传染病的爆发和蔓延。

虽然人们现在通过采用加氯消毒的方式，已基本上控制了水致传染病的问题，但水体中还是不断发现新的病原微生物种，病原微生物至今仍是威胁人类健康和生命的重要原因。

水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)两种检测方法的比较研究

水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)两种检测方法的比较研究摘要：本文采用固定底物酶底物法与传统多管发酵法对水中粪大肠菌群进行比对试验，比较两者检测结果的一致性。

结果表明，两种方法在结果一致性方面相关性好，无统计学意义上的显著性差异，与多管发酵法相比，酶底物法具有简便快速、结果准确、特异、实验过程污染的可能性低、无二次污染等优点。

关键词：固定底物酶底物法多管发酵法粪大肠菌群Comparative Study on Two Detection Methods of Fecal Coliform in Water (Thermotolerant Coliforms )Luo Yun Liuzhou Environmental Protection Monitoring Station, Guangxi 545001Abstract: This paper conducts a comparative test on fecal coliform in water with Defined Substrate Technology(DST) enzyme substrate technique and traditional Multiple-tube fermentation technique and compares the consistency of detection results. The result shows that both methods have a good correlation in the consistency of results and there is no significant difference in statistical sense. Compared to multiple-tube fermentation technique, enzyme substrate technique has such advantages as simplicity, rapidness, accurate result, specificity, low possibility of pollution in the experimental process and secondary pollution avoided.Key words: Defined Substrate Technology(DST) enzyme substrate technique; Multiple-tube fermentation technique; Fecal coliform粪大肠菌群（耐热大肠菌群）是水质污染的重要指标之一。

酶底物法与多管发酵法测定水中粪大肠菌群的对比分析

地震等自然灾害过后水体会被大量微生物所污染,特别是被粪便污染。

如水体中含有肠道病原菌株,人饮用后会暴发严重疾病。

粪大肠菌群是一类能使乳糖发酵、产酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌,是水体受人畜粪便污染的最直接指标。

对于粪大肠菌群检测的方法主要为滤膜法和多管发酵法,但试验过程较为繁琐,因此亟需一种快速简便的检测方法。

酶底物法也可用来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌,操作方便,检测时间短,无需确认试验。

但该方法尚未正式列入国家标准,因此,该文通过与多管发酵法相比较,对酶底物法进行验证分析。

1材料与方法1.1试验材料仪器及试剂:乳糖蛋白胨;EC 肉汤;灭菌锅;科立得TM (Colilert R )试剂(美国爱德士生物科技股份有限公司);酒精灯;100mL 无菌取样瓶(里面装有1.5%硫代硫酸钠去除水样中的余氯);3mm 接种环;无菌培养定量盘(97孔);封口机(带97孔定量盘橡胶托垫);97孔阳性标准比色盘;培养箱。

1.2试验方法1.2.1多管发酵法。

参考《生活饮用水标准检验方法(GB/T5750.12-2006)》和《水和废水监测分析方法(第四版)》,将水样分别接种到发酵管中,发酵管中盛有乳糖蛋白胨,在(37±0.5)℃条件下培养(24±2)h ,如果试管产酸或产气,说明试验呈阳性(初发酵试验),将呈阳性结果的发酵管轻微振荡,用灭菌棒或3mm 接种环将培养物转接至EC 培养液中,在(44.5±0.5)℃水浴下培养(24±2)h ,如果发酵管产气即可确认呈阳性(复发酵试验)。

1.2.2酶底物法。

将科立得TM (Colilert R )试剂加入100mL 装有水样的取样瓶中,待试剂完全溶解后,倒入无菌培养定量盘(97孔)中,对其进行封装,然后置于(44.5±1)℃恒温培养箱中培养24h 。

取出后与97孔阳性标准比色盘进行比较,如果为阳性反应,则黄色孔颜色较标准比色盘深,如果有疑虑,可将可疑阳性的试管继续培养4h ,然后观察,之后出现的颜色反应无效。

滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析

滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析一、引言随着城市化进程的加速和人口的不断增长，污水处理成为一项重要的环保任务。

污水中的粪大肠菌群是评估水质和卫生水平的重要指标之一。

为了准确快速地检测污水中的粪大肠菌群，科学家们发展了各种检测方法。

其中，滤膜法和酶底物法是常用的两种方法，本文将对这两种方法进行比较分析。

二、滤膜法滤膜法是通过将粪大肠菌群附着在滤膜上，再通过计数形状与颜色进行检测。

其操作包括取样、滤膜萃取、滤膜染色和计数四个步骤。

滤膜法具有简单、直观、操作便捷等优势，被广泛应用于实际工作中。

然而，滤膜法的检测结果容易受到环境因素的干扰，例如水质的浑浊度、背景物质的影响等，这可能导致结果的不准确。

三、酶底物法酶底物法是通过检测粪大肠菌群特有的酶活性来间接测定其存在。

常用的指示剂是3-indoxyl-β-D-glucuronide（X-Gluc），它能与酶β-D-葡萄糖苷酸酶反应产生可见的蓝色产物。

这种方法的优势在于结果的准确性较高，而且不受环境因素的影响。

但是，酶底物法需要较长的检测时间，操作较为复杂，并且对仪器设备要求较高。

四、比较分析（1）准确性方面：滤膜法和酶底物法在检测粪大肠菌群方面均有较高的准确性，但是酶底物法的结果更为精确。

滤膜法容易受到环境因素的影响，导致结果的偏差。

（2）操作方面：滤膜法操作简便，流程清晰，不需要特殊的仪器设备，适用于现场快速检测。

酶底物法的操作较为复杂，需要仪器设备支持，所需时间较长。

（3）受环境因素影响方面：滤膜法受环境因素影响较大，如水质浑浊度、背景物质等因素会干扰检测结果。

酶底物法不受环境因素的影响，结果更为稳定。

（4）适用范围方面：滤膜法适用于对大量样品进行快速筛查，特别是现场检测。

酶底物法适用于对粪大肠菌群的高灵敏度检测，尤其适合于研究或实验室内的检测。

五、结论综上所述，滤膜法和酶底物法是常用于检测污水中粪大肠菌群的两种方法。

酶底物法在水中粪大肠菌群分析中的应用研究

酶底物法在水中粪大肠菌群分析中的应用研究粪大肠菌群是判断水体污染状况的重要指标，在环境质量评介、环境卫生监督等方面具有重要的意义。

它的主要来源就是粪便，粪便当中有诸多的病原微生物、病毒和原生动物蠕虫，上述污染源能够引起肠道传染疾病的广泛传播。

人们普遍应用粪大肠杆菌群来评价水体的污染状况，从而了解水质对人体健康的影响程度。

从检测角度来看，使用粪大肠杆菌群酶底物法进行水质监测，对科研探究有着及其重要的作用，其具有快速和方便等诸多优势。

酶底物法《HJ 1001 — 2018》适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。

本方法的检出限为10MPN/L。

以下将对它的重要的事项进行详细介绍。

1.方法原理在特定温度下培养特定的时间，粪大肠菌群能产生β-半乳糖苷酶，将选择性培养基中的无色底物邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷（ONPG）分解为黄色的邻硝基苯酚（ONP）。

统计阳性反应出现数量，查MPN表，计算样品中粪大肠菌群的浓度值。

2.干扰和消除活性氯具有氧化性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集时加入硫代硫酸钠溶液消除干扰。

重金属离子具有细胞毒性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集时加入乙二胺四乙酸二钠溶液消除干扰。

3.选择试剂和材料的注意事项ONPG-MUG培养基每100ml样品需使用培养基粉末2.7g±0.5g，可采用市售商品化培养基制品。

97孔定量盘：含49个大孔，48个小孔。

其中，每个小孔可容纳 0.186ml样品，大孔中48个大孔每个可容纳1.86ml样品，一个顶部大孔可容纳11ml样品。

也可采用经环氧乙烷灭菌的市售商品化成品。

一定选择标准阳性比色盘，无菌水的制备是取适量实验用水，经121℃高压蒸汽灭菌 20 min，备用。

4.仪器和设备的选择采样瓶选用具螺旋帽或磨口塞的100ml、250ml、500ml广口玻璃瓶。

如果在采集不存在或不考虑余氧、金属离子干扰的样品时，可以采用市售无菌采样瓶或无菌采样袋。

酶底物光谱法与酶底物法检测水中大肠菌群的比较分析

酶底物光谱法与酶底物法检测水中大肠菌群的比较分析
王莉莉
【期刊名称】《净水技术》
【年(卷),期】2024(43)3
【摘要】采用新型酶底物光谱法和酶底物法对不同类型水样中总大肠菌群、大肠埃希氏菌及粪大肠菌群指标进行同步检测。

两种方法各有优势,采用SPSS软件对检测结果处理后进行配对t检验,结果显示:两组总大肠菌群的数据P=0.057,相关系数r=0.904;两组大肠埃希氏菌的数据P=0.593,相关系数r=0.972;两组粪大肠菌群的数据P=0.136,相关系数r=0.986,表明两种检测方法具有相关性,且没有统计学意义上的显著性差异。

采用酶底物光谱法检测有证质控样品,总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪大肠菌群的检测结果均在质控样真值范围内,证明该方法检测准确度符合要求。

酶底物光谱法与酶底物法相比,反应原理类似,操作更加简便,具有仪器自动化和智能化快速检测、判读、存储、联网传输数据等优点,可满足实验室常规检测需求,在应急突发事件现场检测方面有较强的运用前景和优势。

【总页数】7页(P187-193)
【作者】王莉莉
【作者单位】广西北投环保水务集团有限公司;南宁市水安全工程技术研究中心【正文语种】中文
【中图分类】TU991
【相关文献】
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3.饮用水中总大肠菌群的检测方法应用--滤膜法和酶底物法的比较分析
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水环境粪大肠菌群监测2种分析方法的对比

水环境粪大肠菌群监测2种分析方法的对比粪大肠菌群是监测水体是否被粪便污染的指示菌,是监测地表水尤其是饮用地表水的重要指标之一。

它是总大肠菌群的一部分,其基本性状和总大肠菌群相似。

在实验时,将培养温度提高到44.5C,我们把可以在此条件下生长并发酵产酸产气的,称粪大肠菌群。

经典的粪大肠菌群的监测方法是采用多管发酵法,但这种方法具有前期准备时间长、任务繁重;培养过程中操作繁琐的缺点,并且事后还要清洗大量的试管,浪费人力、物力、财力。

为此很多厂家研发了大肠菌群的快检纸片。

采用纸片法,大大缩短了实验的时间,并且根本不需要再清理大量的试管,减轻了劳动强度,也节约了宝贵的水资源。

那么,多管发酵法和纸片法的数据究竟有没有相关性?作者采用某厂生产的大肠菌群的快检纸片通过对比实验旨在探讨这个问题。

一、分析方法1、多管发酵法(1)培养基单倍和三倍乳糖蛋白胨培养液(培养液的成分与制备略,下同)EC培养液(2)步骤①水样接种量：将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样的接种量,每个样品至少用3个不同的水样量接种,同一接种水样量要有五管。

如果接种的体积为10ml,则接种于含有三倍浓度5ml的乳糖蛋白胨培养液的试管内,如果接种量为1ml或者小于1ml,则接种于含有单倍浓度10ml的乳糖蛋白胨培养液的试管内。

②初发酵：将接种了水样的试管,在370.5C下培养242h,产酸和产气的发酵管表明实验阳性。

如产气不明显,可轻拍试管,有小气泡升起的为阳性。

③复发酵试验轻微振荡初发酵阳性的发酵管,用3mm接种环将培养物转接到EC培养液中。

在440.5C水浴中培养242h,培养后立即观察。

发酵管产酸产气表明确信试验阳性。

④计算和报告结果根据不同接种量的发酵管所出现的阳性结果的数目,从MPN表中查相应的MPN 指数,计算出每升水中粪大肠菌群的MPN值。

2、纸片法采用某厂生产的大肠菌群快检纸片①水样接种量：将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样的稀释倍数,每个样品至少用3个不同的水样量接种,同一接种水样量要有五个纸片。

两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比阐述王佳

两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比阐述王佳发布时间：2021-11-02T02:04:35.347Z 来源：《中国科技人才》2021年第21期作者：王佳[导读] 通过多管发酵的检测法与酶底物检测法去研究水中所存在的总大肠菌群大肠埃希氏菌的变化情况，再将两种检测方法进行对比（适用性、灵敏度等），并了解多管发酵法和酶底物法这两种方法对水中菌群的检测结果。

通标标准技术服务有限公司南京分公司摘要：通过多管发酵的检测法与酶底物检测法去研究水中所存在的总大肠菌群大肠埃希氏菌的变化情况，再将两种检测方法进行对比（适用性、灵敏度等），并了解多管发酵法和酶底物法这两种方法对水中菌群的检测结果。

最终结果展示，两种方法（多管发酵法和酶底物法）对适用性菌株检测方面存在差异；在每100毫升的浓度中存在1MPN，酶底物检测法和多管发酵法相比较来说，酶底物检测法更加灵敏；而在加标样和平行样检测过程中，酶底物检测法则更为稳定。

总的来说，可以通过多管发酵法和酶底物法去检测两种菌群在水中的含量，但通过实践表明酶底物法的检测优势较为显著，此方法检测时间快、方法操作便捷、观察步骤简单，可以大范围应用在相关实验当中。

关键词：多管发酵检测法；酶底物检测法；检测结果1、材料与方法1.1材料与仪器此实验将运用到美国生物公司生产MMO-MUG培养基；中国青岛生物技术有限公司生产的乳糖蛋白胨培养基和EC- MUG培养基以及培养箱（36C+1C、44.5C士0.5C）；紫外线灯。

1.2 方法1.2.1 试验前准备菌株，EIEC的培养物，普通的含菌水样品，3克左右的MMO- MUG培养基粉末，根据实验配备调制的物质（EC- MUG培养基与乳糖蛋白胨培养液）。

1.2.2方法原理①多管发酵法。

多管发酵法试验应先接种水样到乳，糖蛋白胨培养基，于36℃培养箱内培养24h，如所有培养管均不产酸产气，则可报告为总大肠菌群阴性；如有产酸产气者，则需要转种于伊红美蓝平板，对可疑菌落进行革兰氏染色、镜检和证实试验以。