大豆油理化指标检验1

• 三.实验仪器：减压蒸馏装置、具刻度尾管的浓缩瓶、 层析槽：a）24cm×6cm×4cm b）20cm×13cm×8cm 玻璃板5cm×20cm、 10cm×20cm 微量注射器：10.0ul 四.实验步骤
• 标准溶液作内标，比较Rf值，见表1
• 方法三 比色法 • 一.实验原理：试样通过水蒸气蒸馏，使BHT分离， 用甲醇吸收，遇邻联二茴香胺与亚硝酸钠溶液生 成橙红色，用三氯甲烷提取，与标准比较定量。 • 二.实验试剂：无水氯化钙、甲醇、三氯甲烷、甲 醇（50%）、亚硝酸钠溶液（3g∕L）：避光保存、 邻联二茴香胺溶液：称取125mg邻联二茴香胺溶 液于50ml棕色容量瓶中，加25ml甲醇，振摇使 全部溶解，加50mg活性炭，振摇5min过滤，取 20.0ml滤液，置于另一50ml棕色容量瓶中，加盐 酸（1＋11）至刻度，临用时现配并避光保存。 BHT标准溶液：准确称取0.0500gBHT，用少量 甲醇溶解，移入100ml棕色容量瓶中，并稀释至 刻度，避光保存。此溶液品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)与 2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)的测定
• 方法一 气相色谱法 • 一.实验原理：
• 二.实验试剂：
• 8.2气相色谱参考条件： • 色谱柱：长1.5m，内径3mm玻璃柱，质量 分数为10％QF-1的Gas Chrom Q（80目 ~100目） • 检测器：FID • 温度：检测室200℃，进样口200℃，柱温 140℃ • 载气流量：氮气70ml∕min；氢气50ml∕min； 空气500ml∕min
• 50ml环己烷提取一次，合并环己烷提取液，每次用 100ml水振摇，洗涤两次，收集环己烷于50℃~60℃水 浴上浓缩至25ml，加适量无水硫酸钠脱水
• 方法二 目测比色法 • 一.实验原理：试样经提取、净化后于乙酰 化滤纸上层析分离苯并（a）芘，分离出的 苯并（a）芘斑点，在波长365nm紫外灯下 观察，与标准斑点进行目测比色概略定量。 • 二.实验试剂：苯（重蒸馏）、环己烷（或 石油醚，沸程30℃~60℃，重蒸馏或经氧化 铝柱处理无荧光）、二甲基甲酰胺或二甲 基亚砜、无水乙醇（重蒸馏）、乙醇（95 ％）、无水硫酸钠、氢氧化钾、丙酮（重 蒸馏）、展开剂（乙醇95％-二氯甲烷2：1）
硅镁型吸附剂：将60目~100目筛孔的硅镁吸附剂水洗 四次（每次用水量为吸附剂质量的4倍）于垂融漏斗 上抽滤干后，再用等量的甲醇洗（甲醇及吸附剂的量 克数相等），抽滤干后吸附剂铺于干净瓷盘上，在 130℃干燥5h后，装瓶贮存于干燥器中，临用前加5 ％水减活，混匀并平衡4h以上，最好放置过夜。层析 用氧化铝（中性）：120℃活化4h
• 方法二 薄层色谱法 • 一.实验原理：用甲醇提取油脂或食品中的抗氧化剂， 用薄层色谱定性，根据其在薄层板上显色的最低检出 量与标准品最低检出量比较而概略定量，对高脂肪食 品中的BHT、BHA、PG能定性检出。 • 二.实验试剂：甲醇、石油醚（30℃~60℃）、异辛烷、 丙酮、冰乙酸、正己烷、二氧六环、硅胶G：薄层用、 聚酰胺粉200目、可溶性淀粉、BHT、BHA、PG混合 标准溶液的配制：分别标准称取BHT、BHA、PG（纯 度99.9％以上）各10mg分别用丙酮溶解，转入三个 10ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度。每毫升含 1.0mgBHT、BHA、PG，吸取BHT（1.0mg∕ml）1.0ml， BHA(1.0mg∕ml)、PG（1.0mg∕ml）各0.3ml置同一5ml 容量瓶中，用丙酮稀释至刻度。此溶液每毫升含 0.20mgBHT、0.060mgBHA、0.060mgPG。显色剂： 2,6-二氯醌-氯亚胺的乙醇溶液（2g∕L）
硅镁型吸附剂：将60目~100目筛孔的硅镁吸附剂水洗 四次（每次用水量为吸附剂质量的4倍）于垂融漏斗 上抽滤干后，再用等量的甲醇洗（甲醇及吸附剂的量 克数相等），抽滤干后吸附剂铺于干净瓷盘上，在 130℃干燥5h后，装瓶贮存于干燥器中，临用前加5 ％水减活，混匀并平衡4h以上，最好放置过夜。层析 用氧化铝（中性）：120℃活化4h
• 50ml环己烷提取一次，合并环己烷提取液，每次用 100ml水振摇，洗涤两次，收集环己烷于50℃~60℃水 浴上浓缩至25ml，加适量无水硫酸钠脱水
• 减压浓缩至0.1ml~0.5ml【可根据试样中苯 并（a）芘含量而定，应注意不可蒸干】 • 9.3测定：吸取5、10、15、20或50ul试样 浓缩液【可根据试样中苯并（a）芘含量而 定】及10、20ul苯并（a）芘标准使用液 （0.1ug∕ml），点于同一条乙酰化滤纸上， 按5.3.1展开，取出阴干。于暗室紫外灯下 目测比较，找出相当于标准斑点荧光强度 的试样浓缩液体积，如试样含量太高，可 稀释后再重点，尽量使试样浓度在两个标 准斑点之间
• 三.实验仪器：水蒸气蒸馏装置、甘油浴、分光光度计 • 四.实验步骤：
大豆油理化指标检验
1.食品中苯并（a）芘的测定； 2.食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)与2,6-二 叔丁基对甲酚(BHT)的测定 3.实验要求：方法；原理；仪器及试剂；步 骤；结果分析；注意事项
1.食品中苯并（a）芘的测定
• 方法一 荧光分光光度法 • 一.实验原理：试样先用有机溶剂提取，或经造化后提 取，再经提取液经液-液分配或色谱柱净化，然后在乙 酰化滤纸上分离苯并（a）芘，因苯并（a）芘在紫外 光照射下呈蓝紫色荧光斑点，将分离后有苯并（a）芘 的滤纸部分剪下，用溶剂浸出后，用荧光分光光度计 测荧光强度与标准比较定量。 • 二.实验试剂：苯（重蒸馏）、环己烷（或石油醚，沸 程30℃~60℃，重蒸馏或经氧化铝柱处理无荧光）、 二甲基甲酰胺或二甲基亚砜、无水乙醇（重蒸馏）、 乙醇（95％）、无水硫酸钠、氢氧化钾、丙酮（重蒸 馏）、展开剂（乙醇95％-二氯甲烷2：1）