第二章 微生物常规鉴定技术
微生物常规鉴定技术(带图片)
微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。
２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。
不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。
，以此可以对不同微生物加以区别鉴定。
因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要容。
１）细菌的培养特征包括以下容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。
在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。
半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。
２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。
液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。
霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。
霉菌的基菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基菌丝褐色。
霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。
革兰氏染色:革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。
G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。
微生物的鉴定(精)
引言概述：微生物的鉴定是微生物学中的一个重要课题，它涉及到鉴定和分类微生物的种类、特性和功能等方面。
微生物的鉴定对于环境保护、农业生产、医学诊断等领域起着重要的作用。
本文将从微生物的分离培养、形态学特征、生理生化特性、分子生物学鉴定和抗生素敏感性等五个大点进行详细阐述微生物的鉴定方法和技术。
正文：一、微生物的分离培养1. 选择培养基：根据待鉴定微生物的特性，选择合适的培养基，如富含营养物质的寒天培养基、蔗糖琼脂培养基等。
2. 分离培养：采用传统的分离培养方法，如涂布法、稀释法等，将微生物分离为单个菌落。
3. 纯化培养：通过多次传代培养，并观察菌落形态和特性，将单菌落转移到新的培养基上，获得纯种微生物。
二、微生物的形态学特征1. 形态学观察：利用显微镜观察微生物的形态特征，如形状、大小、颜色、胞壁结构等。
2. 细胞结构分析：通过染色方法，观察微生物的细胞结构，如细胞壁、细胞膜、核质、细胞器等。
3. 胞内含物分析：利用染色剂或特定试剂，观察微生物胞内含物，如颗粒、颜色、气泡等。
三、微生物的生理生化特性1. 新陈代谢特性：通过培养微生物在不同营养条件下的生长情况观察其代谢特性，如需氧性、产酸性、产气性等。
2. 饮食特性：测定微生物对不同营养物质的利用情况，如碳源、氮源、矿物质等。
3. 酶活性分析：应用酶学方法检测微生物体内的酶活性，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。
四、微生物的分子生物学鉴定1. 16S rRNA基因测序：提取微生物的基因组DNA，并进行PCR 扩增和测序分析，根据16S rRNA基因序列比对和构建系统发育树，进行物种鉴定。
2. 基因组学方法：通过全基因组测序和比较基因组学分析，探索微生物的基因组特征，如基因组大小、基因编码等。
3. 荧光原位杂交技术：利用具有特异性的探针标记微生物的特定序列，通过荧光显微镜观察微生物的存在和分布情况。
五、微生物的抗生素敏感性1. 抗生素敏感试验：采用纸片扩散法或高通量平板法，将不同浓度的抗生素施加在微生物生长培养板上，观察不同抗生素对微生物生长的影响。
2020年(生物科技行业)微生物常规鉴定技术
（生物科技行业）微生物常规鉴定技术微生物常规鉴定技术壹、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。
２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。
不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同壹种的细菌在壹定条件下，培养特征却有壹定稳定性。
，以此能够对不同微生物加以区别鉴定。
因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的壹项重要内容。
１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性仍是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。
在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。
半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。
２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。
液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。
霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。
霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。
霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。
革兰氏染色:革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）俩大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这俩类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。
G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。
第一章微生物检验基本知识
第一章微生物检验基本知识包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。
接种、分离纯化和培养技术一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
１、接种工具和方法接种和分离工具1．接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种：１）划线接种这是最常用的接种方法。
即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。
常用的接种工具有接种环，接种针等。
在斜面接种和平板划线中就常用此法。
２）三点接种在研究霉菌形态时常用此法。
此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。
除三点外，也有一点或多点进行接种的。
３）穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。
做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。
用的培养基一般是半固体培养基。
它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
４）浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。
待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。
５）涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。
６）液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。
７）注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。
８）活体接种活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。
微生物常规鉴定技术课件 (一)
微生物常规鉴定技术课件 (一)微生物常规鉴定技术是微生物学领域中的一项重要技术，在许多领域中具有广泛的应用。
微生物常规鉴定技术的课件包括什么内容？以下是关于“微生物常规鉴定技术课件”的详细介绍。
一、细菌培养基在微生物常规鉴定技术中，选择适合微生物生长的培养基是非常重要的。
在微生物课件中，常规菌落计数法和筛选比较常用的培养基有营养琼脂平板、大肠杆菌选择性培养基、血液琼脂平板、青霉素和链霉素琼脂平板等。
二、细菌涂片染色方法细菌涂片染色是细菌鉴定中的重要步骤。
在这里，我们需要掌握常见的染色技术，如革兰染色法、酸快染色法、氧化肽染色法、吉姆萨染色法等。
在微生物常规鉴定技术中，我们还需要学习用于特殊细胞结构和菌种的染色方法，如荧光染色法、免疫染色法等。
三、细菌鉴定在微生物常规鉴定技术中，我们需要通过观察细菌形态、菌落形态、培养特性和生化特征等方面的特点来鉴定细菌种类。
这里，微生物课件中常用的鉴定方法有革兰氏阳性和阴性鉴定、氧化能力测试、葡萄糖结果测试等。
四、抗生素敏感性试验抗生素敏感性试验是细菌鉴定中的另一项重要的测试。
在这里，我们需要学习抗生素敏感性试验的原理和方法。
这种方法可以帮助医生们选择最合适的抗生素来治疗感染。
五、它盘分析它盘分析是微生物课件中的另一个重要方面。
它可用于确定抗生素的最低抑制浓度（MIC），这对于选择最佳的治疗方案非常重要。
总之，微生物常规鉴定技术是微生物学领域的一个非常重要的技术，它可以帮助我们确定微生物的种类、特征和抗生素敏感性等方面的信息。
掌握微生物常规鉴定技术的课件是学习微生物学的必要步骤，也是在微生物领域中取得成功的关键所在。
微生物的常规鉴定技术共23页文档
1、战鼓一响，法律无声。——英国 2、任何法律的根本；不，不成文法本 身就是 讲道理 ……法 律，也 ----即 明示道 理。— —爱·科 克
3、法律是最保险的头盔。——爱·科 克 4、一个国家如果纲纪不正，其国风一 定颓败 。—— 塞内加 5、法律不能使人人平等，但是在法律 面前人 人是平 等的。 ——波 洛克
Thank youБайду номын сангаас
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
微生物的鉴定与鉴别方法
微生物的鉴定与鉴别方法微生物是一类微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们在自然界中广泛存在，对人类的生活和健康有着重要的影响。
鉴定和鉴别微生物是微生物学研究的基础，也是保障食品安全和公共卫生的重要手段。
本文将介绍一些常用的微生物鉴定和鉴别方法。
一、形态学鉴定法形态学鉴定法是通过观察微生物的形态特征来进行鉴定和鉴别的方法。
在细菌的鉴定中，常用的方法包括显微镜观察细菌形态、染色和培养基特性等。
例如，革兰氏染色可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，进一步缩小了鉴定范围。
二、生理生化鉴定法生理生化鉴定法是通过检测微生物的生理和生化特性来进行鉴定和鉴别的方法。
这些特性包括生长要求、代谢产物和酶活性等。
比如，葡萄糖发酵试验可以区分肠道埃希菌和沙门菌，鉴定其是否具有肠道致病性。
三、分子生物学鉴定法分子生物学鉴定法是通过检测微生物的基因组DNA或RNA序列来进行鉴定和鉴别的方法。
这些方法包括PCR、序列分析和基因芯片等。
PCR技术可以扩增微生物的特定基因片段，通过比对序列来确定微生物的种属和亚种。
这些方法具有高度的准确性和灵敏度，已经成为微生物鉴定的重要手段。
四、免疫学鉴定法免疫学鉴定法是通过检测微生物与宿主之间的免疫反应来进行鉴定和鉴别的方法。
这些方法包括免疫荧光、酶联免疫吸附试验和免疫印迹等。
免疫荧光技术可以通过标记抗体来检测微生物的特定抗原，从而确定微生物的种类和数量。
五、质谱鉴定法质谱鉴定法是通过检测微生物样品中的分子质量来进行鉴定和鉴别的方法。
质谱仪可以将样品分子离子化，并根据其质量-电荷比进行分析和鉴定。
质谱鉴定法具有高度的准确性和灵敏度，已经成为微生物鉴定的重要手段。
总结起来，微生物的鉴定和鉴别方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中，常常需要结合多种方法进行综合分析，以提高鉴定的准确性和可靠性。
微生物的鉴定和鉴别工作对于食品安全、疾病预防和环境保护等方面都具有重要意义，值得我们继续深入研究和应用。
微生物的鉴定方法
微生物的鉴定方法微生物是一类广泛存在于各种环境中的生物，包括细菌、真菌、病毒等。
通常情况下，鉴定微生物首先需要通过一系列的实验室技术和方法进行，以便确定其种类和特征。
下面将介绍一些常用的微生物鉴定方法。
一、形态学鉴定法：形态学是鉴定微生物的基础方法之一、通过观察微生物的形态特征，可以初步判断其种类。
细菌通常可以通过对菌落形状、色素、大小、边缘、透明度等进行观察和比较，以确定其菌属；真菌则可以通过判断菌落的形状、颜色、质地等特征，以及孢子形态和产孢器的形式来进行鉴定。
二、生理生化鉴定法：生理生化鉴定是通过测试微生物在培养基上的生理和生化特征来确定其种属。
这些特征包括生长条件（如温度、pH值）、营养需求（如对碳源、氮源的利用）、代谢产物（如气体产物和酸碱指数）等。
通过对微生物的这些表现进行定性、定量和定位观察，可以推断其种属。
三、分子生物学鉴定法：随着分子生物学技术的快速发展，分子鉴定已成为现代微生物学中重要的鉴定方法之一、其中，16SrRNA基因序列分析是最常用的鉴定细菌的分子生物学方法。
通过从微生物中提取总RNA，然后使用聚合酶链反应（PCR）扩增16SrRNA基因，在测序后与数据库进行比对，可以准确地鉴定细菌的种类。
对于真菌的鉴定，通常使用ITS区域（内转录间隔序列）进行分析。
四、免疫学鉴定法：免疫学鉴定法是通过检测微生物的免疫特异性反应来进行鉴定。
具体方法包括免疫荧光检测、酶联免疫吸附试验（ELISA）、凝集反应和免疫印迹等。
这些方法可以检测微生物中的抗原和抗体，并通过与特异性抗体的结合来确认微生物的种属。
五、基因测序鉴定法：随着测序技术的迅速发展，基因测序已经成为鉴定微生物的重要手段之一、通过对微生物基因组的整个或部分DNA序列进行测序分析，可以确定微生物的种属。
目前，全基因组测序、宏基因组测序、特定基因测序等方法已经成为微生物鉴定常用的手段。
综上所述，微生物的鉴定方法包括形态学鉴定法、生理生化鉴定法、分子生物学鉴定法、免疫学鉴定法和基因测序鉴定法等。
最新微生物常规鉴定技术
微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。
２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。
不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。
，以此可以对不同微生物加以区别鉴定。
因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。
１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。
在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。
半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。
２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。
液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。
霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。
霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。
霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。
革兰氏染色:革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。
G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。
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27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪2Leabharlann 、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
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29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
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30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
谢谢！
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微生物常规鉴定技术
31、别人笑我太疯癫，我笑他人看不 穿。(名 言网) 32、我不想听失意者的哭泣，抱怨者 的牢骚 ，这是 羊群中 的瘟疫 ，我不 能被它 传染。 我要尽 量避免 绝望， 辛勤耕 耘，忍 受苦楚 。我一 试再试 ，争取 每天的 成功， 避免以 失败收 常在别 人停滞 不前时 ，我继 续拼搏 。
▪
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
33、如果惧怕前面跌宕的山岩，生命 就永远 只能是 死水一 潭。 34、当你眼泪忍不住要流出来的时候 ，睁大 眼睛， 千万别 眨眼!你会看到 世界由 清晰变 模糊的 全过程 ，心会 在你泪 水落下 的那一 刻变得 清澈明 晰。盐 。注定 要融化 的，也 许是用 眼泪的 方式。
35、不要以为自己成功一次就可以了 ，也不 要以为 过去的 光荣可 以被永 远肯定 。
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微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。
２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。
不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。
，以此可以对不同微生物加以区别鉴定。
因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。
１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。
在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。
半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。
２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。
液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。
霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。
霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。
霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。
革兰氏染色:革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。
G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。
微生物鉴定技术
微生物鉴定技术微生物是指在人类肉眼无法看到的范围内，以细菌、真菌、病毒、原生动物等单细胞或微小生物为代表的一类生物群体。
微生物既是自然界中生命的组成部分，也对人体及其周围环境有着重要的贡献。
但是，不同种类的微生物也可能成为疾病的传播介质，给人类健康和社会安全带来威胁。
微生物鉴定技术的出现，大大提高了我们对微生物的认识，也有利于微生物研究和应对微生物相关的健康问题。
微生物鉴定技术广泛应用于实验室、食品安全、临床医学等领域。
通常，微生物鉴定技术可以分为传统菌落计数法和分子生物学技术两大类。
传统菌落计数法是一种传统的微生物鉴定技术，通过分离、培养、鉴定菌落数量和形态来确定菌种的种类、密度和特征。
该方法需要培养细菌并分离，对于不易培养的菌种则难以鉴定。
同时，这种方法需要对细菌进行培养，需要一定的时间。
另外，细菌培养的条件需要有严格的控制，包括在不同类型的培养基、不同的温度、湿度和气体等条件下的培养，以保证细菌可以正常生长。
这些条件的控制需要复杂的设备和实验技能，所以这种方法的成本较高。
随着分子技术的发展，分子生物学技术已被广泛应用于微生物鉴定。
基于该技术的微生物鉴定可以通过特定DNA序列、RNA或蛋白质来识别和区分不同的微生物。
与传统的菌落计数法相比，基于分子生物学技术的微生物鉴定方法简单、快速、准确。
同时，这种方法可以进行高通量的处理和分析，可以在短时间内同时检测多个微生物。
另外，这种方法对细菌的培养要求较低，可以直接从样品中提取细菌DNA或RNA而不用培养，省去了时间和成本。
基于分子生物学技术的微生物鉴定方法面向的应用场景较广，包括环境污染、食品安全、生物医学和农业等领域。
基于分子生物学技术的微生物鉴定方法并非没有挑战。
微生物的多样性和复杂性往往使得进行细粒度鉴定比较困难。
一些微生物鉴定工具也可能出现“假阳性”和“假阴性”等误判结果。
因此，需要对微生物鉴定技术进行持续的改进和优化，以提高其准确性和可靠性。
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华南农业大学 食品学院 王丽
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华南农业大学 食品学院 王丽
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玻璃器材的干热灭菌方法
(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸 包好，或装入特制的铁筒中。 (2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留 有一定的空隙以便流通空气。 (3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。 (4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔， 继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定 温度，在160℃—165℃保持2小时即可。 (5)待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃 器皿。
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手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法
（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。
（2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌 锅中，关上器盖。
（3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内 的空气，再关闭活门。 （4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度 下保持所需的时间。
2014-10-30 华南农业大学 食品学院 王丽 48
2、含菌试管的清洗
• 高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干 或晾干备用。
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3、含菌平皿的灭菌
（1）、底盖分开放，放入桶中，高压 灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干 备用。
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(二)、用过的玻璃器皿
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1、含油脂器材的清洗
（1）、单独高压灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上， 置100 ℃烘箱中烤0.5h; （4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次， 再用肥皂水刷洗干净。
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（三）匀质器
匀浆机
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无菌均质器 高速匀浆机
该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化 妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制 备，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、 不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装在特 制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，预防交 叉污染。
2014-10-30 华南农业大学 食品学院 王丽 5
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（二）、培养箱
1. 智能隔水恒温培养箱 2. 隔水培养箱 3. 电热培养箱 4. 生化培养箱
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1、普通恒温培养箱
电热恒温培养箱
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（四）、超净工作台
三大类 型： 侧流式、直流式和外流式
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垂直流超净工作台
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水平单向流洁净工作台
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4、抑制剂
1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待 检菌的检出率 2、种类： 盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、 亚硒酸钠等 染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加 拉红、玫瑰红 胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、 去氧胆酸盐、胆石酸盐 抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素
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二、常用玻璃仪器及用具
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（一）量器类 1、移液管
1ml，2ml，5ml，10ml，25ml
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2、容量瓶
50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml
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4、含菌吸管的清洗
（1）、把含菌吸管投入3%的来苏尔液 内浸泡30min以上杀菌； （2）、用肥皂水洗涤一次； （3）、最后用清水冲洗干净即可。
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华南农业大学 食品学院 王丽51来自5、载玻片及盖玻片的清洗
（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5 %的来
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第二节 培养基和实验室基本操作技术
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一、培养基中的主要成分及其作用 N源、C源、无机盐、生长因子、水
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1、常用的N源物质
蛋白胨 牛肉膏 肉浸汁 酵母膏
苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；
（2）盖片用软布擦干即可； （3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮
沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后 用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。
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思考题
1、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注 意哪些问题? 2、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注 意哪些问题? 3、如何正确使用超净台? 4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭 菌? 5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法 6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?
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超净台的使用和注意事项
1、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射时间40~60分钟； 2、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭， 请用含水棉布檫拭； 3、请保持超净台整洁，不要堆积杂物； 4、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯； 5、请做好使用记录。 6、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员联系， 尽早排除故障。 7、学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使用。平 时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符 合无菌要求。
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2、糖、醇类物质
单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖 双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖 多糖：淀粉、纤维素、菊糖 醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油
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3、凝固剂
• 琼脂、明胶、血清等 要求：清一色、杂质少
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卧式恒温振荡培养箱
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电热恒温培养箱
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2、生化培养箱
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培养箱的配置和使用
配置：22（℃）、30（℃）、37（℃）培养箱各一个 使用注意事项： (1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速 进行并做到随手关闭箱门。 (2)内放一杯水，以保持湿度。 (3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。 (4)每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清 水擦净。 (5)不得当烘箱使用。
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1、培养皿
3.5cm,7cm，9cm，15cm
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2、试管
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各种试管的使用
• 13mmX100mm ：生化反应及凝集 反应 • 15mmX150mm ：斜面培养 • 18mmX180mm：检样稀释
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3、量筒
容量（ml）10、25、50、10、25、500、 1000、2000
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数字型可调移液器P型
4、微量取样器
固定体积移液器
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（二）、其他常用玻璃器皿
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（五）、离心机 • 离心机的类型： • 普通离心机 • 高速离心机 • 超速离心机
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类型
普通离心机
高速离心机 25000
超速离心机 可达75000以上
最大转速(r/min) 6000
最大RCF（g） 6000
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2、高压灭菌锅
• 用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样 器、纱布、衣物的灭菌。 • 种类：手提式、立式、卧式杀菌锅
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不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）
全自动高压灭菌器
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台式高速冷冻离心机
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（六）、灭菌器
• 干热灭菌器 • 湿热灭菌器