第六章 器官培养
第六章 营养器官培养
英东生命科学学院 白音
主要内容及其要求
1、掌握植物组织分化过程。 2、理解试管苗的移栽过程及管理措施。
器官培养主要是指植物根、茎、叶、 花及小果实的无菌培养。 器官培养的特点在于能保持它们所 具有的特征性结构，通过器官培养可快 速大量的繁殖。
风信子的克隆花芽
第一节 根的培养
马铃薯炼苗棚
3、移栽方式与管理
移栽方式：容器移栽和大田移栽。
（1）容器移栽
基质：主要为田园土，配以松针土， 腐植土，营养土：有时需加入锯末， 河沙或蛭石等。
容器：多选朔料营养杯，特别是废旧再生 朔料通过简单的工艺吹塑而成的软营养杯。 首先在营养杯中装入基质至1/4处，左手轻 拿试管苗，右手将苗根均匀分布于营养杯中； 然后，左手扶苗，右手在杯中填土。 接下来，用两手捏住杯沿两边轻轻在地上 墩几下营养杯，使苗根与营养土帖紧。刚刚移 入杯后小苗，应该经过短期遮荫，一般以3d为 宜，当然也与移栽季节，天气状况有关，应该 灵活掌握。
● 根培养多用于探索植物根系的生理及其代 谢活动。 ● 通过由单个直根衍生而来，并经继代培养 而保持遗传性一致的根的培养物，可称为离 体根的无性系。 ●根培养时一般从根尖一端切取1.0cm长的根 尖接种于培养基上。
第二节 茎的培养
茎的培养可分为茎尖培养和茎段培养。茎段培养 是指带有腋（侧）芽或叶柄、长数厘米的茎节段进行 离体培养。 茎段—不定芽（萘乙酸NAA低浓度）—再生苗—生 根—盆栽 愈伤组织（NAA高浓度）——芽分化
（二）组培苗的移栽及管理
1、组培苗的特点
₪根与输导系统不通。没有根毛或根毛很少。 ₪叶表保护组织不发达甚至完全没有。 ₪组织幼嫩。结构较松散。细胞含水率高 。机 械组织很不发达。
第六章 动植物细胞培养
第一节
动植物细胞培养的特性
一、动物细胞培养的特性
技术发展历史：
1907年，美国，Harrison首次将蛙的神经组织在试管内培养 成功。 1950年，Enders及同事发表第一篇在培养细胞中生长病毒的 报告。 1972年，Knazek等创立中空纤维细胞培养技术，使细胞体外 培养扩展为大规模培养。 1986年，Demo生物公司用微囊化技术大规模培养杂交瘤细胞 生产单克隆抗体获得成功。 随后，动物细胞培养技术日趋完善。
维生素：是维持细胞生长的一种生物活性物质，它 们在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶，对细胞的代 谢有重大的影响。 糖类：多数合成培养基都含有葡萄糖，它主要由糖 酵解作用代谢形成丙酮酸，并可转化乳酸或乙酰乙 酸进入柠檬酸循环形成CO2。对胚胎细胞和转化细胞， 乳酸在培养基中的积累特别明显。 无机离子：是细胞的重要组成部分之一，参与了细 胞的代谢活动。培养基中的无机离子除K+、Na+等外， 还含有Fe2+、Zn2+、Cu2+等微量离子。
生物反应工程原理
李艳 教授
生物科学与工程学院 lymdh5885@ ly5885@
第六章 动植物细胞培养
动植物细胞培养技术：将动植物组织、器官在适当 的培养基上进行离体培养的技术。 组织：指由结构和功能相似的细胞和细胞间质组成， 具有一定形态和生理功能的聚集体。 器官：指机体中具有特殊结构和完成特殊功能的分 化部分。 组织与器官培养：在人工条件下，使它们得以继续 生存或发展的一种培养方法。
1、动物细胞培养的环境要求 2、培养基组成 3、常用的合成培养基 4、培养基制备应考虑的因素
类器官培养步骤
类器官培养步骤
类器官培养步骤包括以下几个步骤：
1.选取适当的细胞株：根据研究需要选取合适的细胞株。
一般来说，类器官培养中选择的细胞株应具有较好的生长能力、易于培养和容易形成球体等特点。
2.培养细胞：将选定的细胞株在含有类器官培养液的培养皿中培养，直至其生长到合适的密度。
3.形成类器官：将细胞转移到无低附着性的培养皿中进行类器官培养。
一般来说，可以使用含有低浓度琼脂的培养液，使细胞在表面自由生长并形成球体。
4.处理类器官：根据研究需要，可对形成的球体进行处理。
例如，可以添加药物或改变培养条件，观察其对类器官的影响。
5.观察类器官：使用显微镜等仪器观察类器官的形态和状况。
可以通过染色等方法进一步研究其细胞成分和功能。
6.记录结果：对类器官的形态、细胞成分和功能等进行记录，以便于后续的数据分析和研究。
第六章_器官的培养
湿度：在干燥季节还应注意培养室内湿度的 管理，以防培养基内的水分散失过多而对培养不 利。
2．芽的增殖
茎尖微繁主要通过顶芽、腋芽的形成和发展以 及培养茎尖组织不定芽产生而使苗在数量上迅速增 殖。
（l）顶芽和腋芽的发育: （2）诱导不定芽的产生
（3）原球茎的发育
（l）顶芽和腋芽的发育:
顶芽和腋芽在微繁殖培养中都能被诱 导发育，可以诱导出单一的苗或多个苗。原 理：利用细胞分裂素来抑制植物原有的顶端 优势,而使侧芽和顶芽能够共同生长。对于 顶端优势的植物，通常采用切除顶芽和适当 的增加细胞分裂素浓度两项措施来克服其顶 端优势。
（2）诱导不定芽的产生
不通过愈伤组织直接形成不定芽的途径更优 越一些，因为植物在脱分化形成愈伤组织中可能 会出现一些变异。但直接形成的不定芽并不总能 保持原品种的特性，有时在繁殖中还能出现严重 的质量问题。
（2）诱导不定芽的产生
观赏植物中有不少 遗传学上的嵌合体。如 一些带镶嵌色彩的叶子、 花、带金边、银边的植 物等，在通过不定芽繁 殖时，再生植株就失去 了这些富有观赏价值的 特性。
4.壮苗和生根
在生根阶段，培养基中的糖浓度要降低到1.0％～ 1.5％，以促使植株增强自养能力，同时降低了培养基 的渗透势，有利于完整植株的形成和生长；
另一方面应增加光强，达到33 00～10 000lx。在 这样的条件下，植物能较好的生长，对水分的胁迫和 对疾病的抗性将有所增加，植株可能在强光照下表现 出生长延缓和较轻微的失绿，但事实证明，这样的幼 苗，要比在低光强条件下的绿苗有较高的移植成活率。
2．芽的增殖
（2）诱导不定芽的产生
一.不定芽由外植体直接产生，这类不定芽通 常是从表皮细胞或表皮以下几层细胞产生的， 有时带有少量的愈伤组织
器官培养技术
器官培养技术
嘿，朋友们！今天咱来聊聊器官培养技术这神奇的玩意儿。
你说这器官培养技术啊，就好像是一个超级厉害的魔法！想象一下，我们身体里的器官要是出了啥毛病，以前可能就得干等着合适的捐赠，那得多难啊！可现在有了器官培养技术，那就不一样啦！就像是有了个专门为我们打造器官的小工厂。
这可不是开玩笑哦！科学家们就像一群神奇的魔法师，在实验室里摆弄着各种仪器和细胞，一点点地把器官给培养出来。
这多了不起啊！
你看啊，要是有人的心脏不好了，咱就可以用这个技术培养出一个健康的心脏来替换。
这就好比给车子换个新零件，让它又能跑得飞快。
而且啊，这是用自己的细胞培养的，那就不用担心会有排斥反应啦，多棒啊！
再说了，这技术以后说不定还能让我们长生不老呢！虽然这听起来有点夸张，但谁知道未来会发生什么呀！也许有一天，我们就真的能不断地更新自己的器官，一直保持年轻健康呢。
而且哦，这器官培养技术还能帮助我们更好地研究疾病呢。
科学家们可以通过培养出有病的器官，来深入了解疾病的发生和发展，这样就能找到更好的治疗方法啦。
这就像是给疾病来了个大揭秘，让它们无处可逃！
不过呢，这技术也不是一下子就能变得完美的啦。
就像学走路一样，得一步步来。
现在还有很多难题等着科学家们去解决呢，比如说怎么让培养出来的器官功能更强大，怎么提高成功率等等。
但是咱可不能小瞧了人类的智慧呀！我相信，随着时间的推移，这器官培养技术肯定会越来越厉害，给我们的生活带来更多的惊喜和改变。
反正我觉得吧，器官培养技术就是未来医学的希望之星，它会让我们的生活变得更加美好和健康。
咱就等着看它大显身手吧！
原创不易，请尊重原创，谢谢!。
6第六章 营养器官培养
第一节 根的培养 第二节 茎的培养 第三节 叶的培养
器官培养（Organ cul、果实等器官在离
体条件下，在无菌的人工环境种做进一步培养
发育，最终长成幼苗的过程。
特点：能保持它们所具有的特征性结构，通过
器官培养可快速大量地繁殖。
第一节 根的培养
再接种到不定芽诱导和增殖培养基(MS+2～3mg/LBA
+0.3～0.4mg/LNAA)后， 3～4周形成不定芽， 切割小芽继续培养，每4周可增殖4～6倍。
总结：
复习思考题：
1.茎段培养与茎尖培养有何区别？ 2.茎段培养的含义、意义及实质是什么？ 其大致步骤怎样？ 3.叶片培养大致过程如何？
+5mg/L BA+1mg/LNAA，50天培养后 6.9%的茎段变褐后死亡， 44.8%形成一个侧枝并再生成植株， 20.4%产生丛苗 27.9%分化出原球茎。
举例：怀山药茎段的培养途径:
不定芽途径：MS+ 2mg/L KT+1～2mg/LPP333 +
0.02mg/L NAA，20天后从边缘突起部位形成3～5个不定 芽，40天成苗。 愈伤组织：MS+6mg/LBA+ 0.02～2mg/LNAA上，培养7 天后在切口处形成白色愈伤组织。
叶培养的意义：
1）研究叶形态建成、光合作用、叶绿素形成的好方法
2）通过叶组织的脱分化与再分化证实叶细胞的全能性
3）通过叶组织培养，探索离体叶组织培养的条件和影 响因素
4）建立体细胞快速无性繁殖体系 5）叶细胞培养物经诱变筛选突变体。
叶培养的分化途径
叶原基
叶 叶 子 叶 鞘 片 叶 柄 愈 伤 组 织
器官培养名词解释
器官培养名词解释1. 器官培养呀，简单来说就是在体外让器官生长发育呢！就好比你养一盆花，给它合适的环境和营养，它就能茁壮成长，器官培养也是这样的道理呀。
比如在实验室里培养肝脏细胞，让它们慢慢形成类似肝脏的组织。
哇塞，这是不是很神奇呢！2. 器官培养不就是尝试在体外创造出一个器官生长的小天地嘛！就像给小器官安个家，提供它们需要的一切。
好比培养心脏细胞，看着它们一点点变得有活力，就像看着宝宝长大一样兴奋呢！3. 嘿，器官培养就是让器官在体外也能好好的呀！这就好像给器官搬了个新家，还精心布置好。
比如说培养肾脏组织，期望着有一天能帮助到那些需要肾脏的人，多棒呀！4. 器官培养啊，不就是把器官放到体外的环境里去培养嘛！跟在大自然里养动物似的。
像培养胰腺细胞，说不定就能为治疗糖尿病带来新希望呢，这多让人期待啊！5. 哎呀呀，器官培养不就是想办法让器官在体外也能生长嘛！就如同给器官开个特训班。
比如培养肺脏的细胞，要是成功了，那对肺病患者来说可是大好事呀！6. 器官培养，简单讲就是让器官在体外也能活起来呀！这就好像训练一支特殊的队伍。
像培养皮肤组织，能帮助烧伤的人恢复美丽，这多有意义呀！7. 器官培养嘛，就是在体外照顾器官让它们长大呀！跟照顾小朋友一样细心。
比如培养眼睛的细胞，也许未来能让失明的人重见光明呢，想想都激动！8. 器官培养呀，不就是在体外给器官一个成长的机会嘛！如同给它们一个魔法空间。
像培养肠道细胞，要是能解决肠道疾病问题，那可太牛了！9. 嘿哟，器官培养就是体外的器官成长计划呀！就好像给器官一个专属的舞台。
比如培养神经细胞，说不定能解开神经系统疾病的谜团呢，这多厉害呀！10. 器官培养啊，说白了就是让器官在体外也能好好活下去呀！这跟给器官打造一个温馨小窝似的。
像培养生殖器官的细胞，为生育难题带来突破，那可太重要啦！我的观点结论是：器官培养是一项非常有前景和意义的研究领域，虽然目前还有很多挑战，但它为医学的发展带来了巨大的希望，值得我们持续关注和探索。
幼儿掌握人体器官能力培养教案设计
幼儿掌握人体器官能力培养教案设计引言：幼儿时期是儿童认识和了解自身的重要时期，而人体器官是构成人体的重要组成部分。
在幼儿园阶段，通过有针对性的教育活动，培养幼儿对人体器官的认知和理解能力，不仅有助于儿童全面发展，还能为他们打下科学学习的基础。
本文将针对这一主题，设计一份幼儿掌握人体器官能力培养的教案。
一、教学目标：1. 培养幼儿对常见人体器官的认知，并能够正确命名它们。
2. 培养幼儿对不同器官的功能有一定的了解，能够简单描述它们的作用。
3. 培养幼儿对人体的保护意识，知道如何保护自己的身体。
二、教学重点：1. 身体器官的名称、位置和功能。
2. 不同器官的特点和作用。
三、教学内容：第一课：认识身体的基本部位1. 教学目标：- 通过引导，帮助幼儿初步认识身体的基本部位。
- 培养幼儿观察和描述身体特征的能力。
2. 教学内容：- 引导幼儿观察自己的身体，了解头、背、手、腿等基本部位。
- 利用图片或模型，帮助幼儿识别和命名这些部位。
3. 教学方法：- 观察法：让幼儿观察自己和他人的身体部位。
- 模仿法：通过模仿教师动作，加深幼儿对不同身体部位的认识。
- 游戏法：设计一些与身体部位相关的游戏，让幼儿在玩中学。
4. 教学步骤：- 观察自己的身体，让幼儿边观察边用手指指出头、背、手、腿等部位。
- 利用图片或模型，引导幼儿识别和命名身体的基本部位。
- 进行一些简单的身体部位模仿动作游戏，如伸手、弯腰等。
第二课：认识人体器官1. 教学目标：- 帮助幼儿初步认识与五官、四肢等有关的人体器官。
- 培养幼儿对不同器官功能的理解和描述能力。
2. 教学内容：- 根据幼儿园阶段的认知水平，重点介绍眼、耳、鼻、口等常见五官以及手、脚等四肢。
3. 教学方法：- 模型法：通过模型或图片，让幼儿观察和命名五官和四肢。
- 情景法：设计一些情景，让幼儿通过观察和体验，理解不同器官的功能。
- 绘本法：利用绘本讲解不同人体器官的功能和作用。
4. 教学步骤：- 通过模型或图片，引导幼儿观察和命名眼、耳、鼻、口等五官，手、脚等四肢。
器官培养 器官培养概述共47页文档
46、我们若已接受最坏的，就再没有什么损失。——卡耐基 47、书到用时方恨少、事非经过不知难。——陆游 48、书籍把我们引入最美好的社会，使我们认识各个时代的伟大智者。——史美尔斯 49、熟读唐诗三百首，不会作诗也会吟。——孙洙 50、谁和我一样用功，谁就会和我一样成功。——莫扎特
器官培养 器官培养概述
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
பைடு நூலகம்
第六章植物器官培养
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⑤其它条件
胚培养中除要求较高的蔗糖（4.5%）浓度、高 渗透压以外，还要求较高浓度的氨基酸及无机盐 。
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(三)胚珠培养
１.定义： 胚珠培养是将授粉的子房在无菌条件下解剖后，取胚 珠置于培养基培养的过程。有时也把胚珠连同胎座一 起取下来培养。
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第三节 生殖器官的培养
一、花器官的培养 二、种子的培养 三、胚胎的培养*
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一、花器官的培养
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一、花器官的培养（花蕾）
1. 定义： 花器官培养指整个花器 及其组成部分如花托、 花瓣、花丝、花柄、子 房、花药等的无菌培养 。
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2、意义：
通过离体花芽培养可了解整体植物和内源激素在花芽性别 决定中所起的作用 可以了解花器各部分对果实和种子发育的作用 内、外源激素在果实种子发育过程中的调控作用 生产上也可用于珍贵品种的扩大繁殖。
暗光和温度25-27℃。
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二、茎尖的培养*
（一）茎尖培养概念及类型 （二）病毒在植物体内的分布 （三）茎尖培养方法及步骤
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(一)茎尖培养概念及类型
茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行无 菌培养。
茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： ①微茎尖培养: 带有1-2个叶原基的生长点, 其长度不超过 0.5mm。
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二、种子培养
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1. 定义：
种子培养是指受 精后发育完全的 成熟种子和发育 不完全的未成熟 种子的无菌培养。
植物组织培养与器官培养
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植物离体无性繁殖的意义（优越性）
繁殖速度快，经济效益高
占用空间小，不受地区季节限制， 便于工厂化育苗
• 离体繁殖周期：1～
3个月
• 繁殖系数：几十～ 几百倍
• 又称快繁
4. 无菌水冲洗4~5次
5. 沥水待用 Flash
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常用消毒剂消毒灭菌效果比较
消毒剂 使用浓度% 去除的难易 消毒时间min 效果
次氯酸钙 9~10
次氯酸钠
2
漂白粉 饱和溶液
溴水
1~2
过氧化氢 10~12
升汞
0.1~1
酒精
70~75
抗生素 4~5(mg/L)
3.1.4.2 褐变问题
• 成因
– 酶促----酚氧化成醌及聚合 – 非酶促----醌聚合
• 时段
– 初代培养 – 继代培养
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减轻褐变现象发生的方法
① 选择合适的外植体 一般来说，最好选择生长处于旺盛的外植体，这 样可以使褐变现象明显减轻。
硝酸银
1
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易 易 易 易 最易 较难 易 中 较难
5~30 5~30 5~30 2~10 5~15 2~10 0.2~2 30~60 5~30
• 器官发生型(organogenesis type) • 胚状体发生型(embryogenesis type) • 不定芽型（adventitious bud type)
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5．试管苗的移植 （炼苗）
第四，要注意光、温管理。试管苗移出后，尽量 避免阳光直射，以强度较高的散射光为好，光线太强 会使叶绿素受到破坏，叶片失绿，发黄或发白，使小 苗成活迟缓。同时，过强的光刺激蒸腾加强。光照强 度也可随移出时间的延长而增加。试管苗移植后温度 要适宜，喜温植物 花叶芋、花叶万年青、巴西铁树 等，以26℃左右为宜；喜凉的植物如马铃薯、文竹、 菊花等以18～22℃为宜。温度过高，使蒸腾加强，并 易滋生菌类；温度过低，幼苗生长迟缓，不易成活。
(1) 外植体的制备
用于快速繁殖的茎尖材料，一般比用于 脱毒的茎尖组织要大。可带2～4个叶原基 或更多，经消毒后剥离的茎尖及时转入到 培养基中
除茎尖组织外，一些植物的茎切段 和一些鳞茎植物的鳞茎切块、块茎、 球茎等还可以通过培养产生不定芽而 进行繁殖。
（2）培养基
目前用于快速繁殖的基本培养基很多。常用的有 MS、B5、 White培养基等。木本植物多用B5培养基。 糖浓度:一般为 2％～3％，固化剂选用琼脂。 天然有机物：椰子汁有利于兰花的增殖。麦芽汁 有利于柑橘属的分化，水解乳蛋白或水解酪蛋白则 有助于许多植物不定芽和不定胚的分化。
三、培养基 低盐培养基：WHITE，其它培养基2/3MS， 1/2MS，B5
一、离体根的培养
四、影响离体根因素 1．基因型 无限继代生长：番茄、烟草、马铃薯、小麦 有限继代生长：胡萝卜、向日葵、豌豆、荞麦 2．营养条件：离体根培养可利用唯一氮源。 VB1是番茄离体培养不可缺少的。适宜的浓度范围 内，对生长的促进作用与浓度成正比。去掉VB1，根 生长立刻停止。若缺少VB1时间较长，生长潜力发生 不可逆转的丧失。
5．试管苗的移植 （炼苗）
是将第四阶段形成的小植株转移到土壤的过程， 也是微繁殖中最关键的一步。 第一，应保持小苗的水分供需平衡，试管中的小 苗，因湿度大，茎叶表面防止水分散失的角质层等几 乎全无，根系也不发达，移栽后除了根系周围有适宜 的水分供给外，还特别应保持空间的空气湿度，减少 叶面的蒸腾。原则是在小苗移出的初期，外部温度条 件要接近于培养瓶内，以后逐步向自然状态过度。这 一工作又叫炼苗。
湿度：在干燥季节还应注意培养室内湿度的 管理，以防培养基内的水分散失过多而对培养不 利。
2．芽的增殖
茎尖微繁主要通过顶芽、腋芽的形成和发展以 及培养茎尖组织不定芽产生而使苗在数量上迅速增 殖。
（l）顶芽和腋芽的发育: （2）诱导不定芽的产生
（3）原球茎的发育
（l）顶芽和腋芽的发育:
顶芽和腋芽在微繁殖培养中都能被诱 导发育，可以诱导出单一的苗或多个苗。原 理：利用细胞分裂素来抑制植物原有的顶端 优势,而使侧芽和顶芽能够共同生长。对于 顶端优势的植物，通常采用切除顶芽和适当 的增加细胞分裂素浓度两项措施来克服其顶 端优势。
茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段:
1 无菌培养的建立。 2 芽的增殖。
3 中间繁殖体的增殖。
4 诱导生根。 5 试管苗的移栽。
1．无菌培养的建立 (1) 外植体的制备 （2）培养基 （3）培养条件
1．无菌培养的建立
(1) 外植体的制备 用于培养的茎尖可来自正在生长的芽或侧芽， 也可以从试管无菌小植株取得。供试母株应生长旺 盛、枝条健壮、无病。
4.壮苗和生根
在生根阶段，培养基中的糖浓度要降低到1.0％～ 1.5％，以促使植株增强自养能力，同时降低了培养基 的渗透势，有利于完整植株的形成和生长；
另一方面应增加光强，达到33 00～10 000lx。在 这样的条件下，植物能较好的生长，对水分的胁迫和 对疾病的抗性将有所增加，植株可能在强光照下表现 出生长延缓和较轻微的失绿，但事实证明，这样的幼 苗，要比在低光强条件下的绿苗有较高的移植成活率。
二、叶片组织的脱分化和再分化培养
（一）叶组织培养的一般方法
（二）影响叶组织培养的因素
（2）诱导不定芽的产生
不通过愈伤组织直接形成不定芽的途径更优 越一些，因为植物在脱分化形成愈伤组织中可能 会出现一些变异。但直接形成的不定芽并不总能 保持原品种的特性，有时在繁殖中还能出现严重 的质量问题。
（2）诱导不定芽的产生
观赏植物中有不少 遗传学上的嵌合体。如 一些带镶嵌色彩的叶子、 花、带金边、银边的植 物等，在通过不定芽繁 殖时，再生植株就失去 了这些富有观赏价值的 特性。
4.壮苗和生根
很多草本植物不定根的形成很容易，但木本一般 较难，从成年树上得到的材料生根更难。对于这类生 根较困难的植物，可试用以下几种方法：先用高浓度 （100g／L左右）的生长素处理嫩茎几小时到一天，用 无菌水冲洗后再接入到培养基中；如苹果、苹果砧木、 梨等，可在生根培养基中加入适量的根皮苷或根皮酚 以促进根的形成，浓度约为150mg／L。
2．芽的增殖
（2）诱导不定芽的产生
一.不定芽由外植体直接产生，这类不定芽通 常是从表皮细胞或表皮以下几层细胞产生的， 有时带有少量的愈伤组织
二.外植体诱导产生愈 伤组织，愈伤组织上产生 不定芽。
（2）诱导不定芽的产生
这两种途径的首要条件就是外植体的细胞要进行 脱分化，由分化状态的细胞回复到具有分裂能力的分 生细胞。第二步由已经脱分化的细胞或新形成的愈伤 组织细胞形成一些分生细胞团。这些细胞有时呈较有 规律的排列。较大的细胞在外，愈向内细胞愈小，排 列也愈紧密。细胞质浓厚，核相对较大，中心的一些 细胞可以认为是分生组织，以后由这些分生组织形成 器官原基，进一步发育成不定芽。
一、离体根的培养
激素：研究较多的是生长素。影响可以分以下几 种情况： 抑制离体根生长：如樱桃、番茄、红花槭。 促进离体根生长：欧洲赤松、白羽扇豆、 矮豌豆、玉米、小麦。 生长依赖于生长素：黑麦、小麦的一些变 种。 激动素:能增加根分生组织的活性，有抗老化的 作用。
第二节 茎尖的培养
一、概念和意义 二、茎尖培养的一般方法 三、影响茎尖培养微繁殖的因素
第六章 器官培养
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根的培养
茎尖的培养 叶的培养
器官培养
概念：指植物的根、茎、叶、花器 官和幼小果实的无菌培养。
器官培养具有重要的理论意义：
利用器官培养可以研究器官的功 能及器官间的相关性、器官的分化以 及更好的认识植物生命活动的规律、 控制植物的生长发育，为人类实践服 务。
第一节 根的培养
4．芽在植株上的部位
5．供试植株的年龄 6. 培养基 7. 褐变
三、影响茎尖培养微繁殖的因素
8. 玻璃化
9. 极性
10．后生变化 11．中间繁殖体的形态发生能力 12．遗传稳定性
第三节 叶的培养
一、叶原基培养
二、叶片组织的脱分化和再分化培养
离体叶培养
离体叶培养是指包括叶原基、叶柄、叶 鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。由 于叶片是植物进行光合作用的器官，又是 某些植物的繁殖器官，因此离体叶培养在 植物器官培养中占有重要地位
4.壮苗和生根
中间繁殖体增殖到一定数量后，就要将增殖 的嫩枝进行壮苗和生根，产生完整植株，以 便移植。
4.壮苗和生根
一般认为，矿质元素浓度高时有利于发展茎叶，较低时有 利于生根，所以生根培养时一般选用无机盐浓度较低的培养基 作为基本培养基。用无机盐浓度较高的培养基时，应稀释一定 的倍数。如MS培养基，在生根、壮苗时，多采用1／2MS或1／ 4MS。 一般生根培养基中要完全去除或用很低的细胞分裂素。并 加入适量的生长素，最常用的是NAA。一部分植物由于生长的嫩 技本身含有丰富的生长素，因此也可以在无生长素的培养基上 生根。
一、概念和意义
分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。 茎尖分生组织培养主要是指对茎尖长度不超过 0.lmm的茎尖进行培养，这种培养可获得无病毒植株。 普通茎尖培养是指对几毫米乃至几十毫米长的茎 尖、芽尖及侧芽的培养。
普通茎尖培养与繁殖技术
微繁技术的概念：
通过茎尖培养进行植物的快速无性繁殖在 一些植物中已经成为一门成熟的技术而被应用。 由于这一技术是在无菌条件下，且又是在一个 非常小的范围内来大量进行繁殖的。因而，人 们又把这种繁殖技术称之为微繁技术
5．试管苗的移植 （炼苗）
除上面的措施之外，有时在试管苗移植之前先将 培养容器的盖子打开或松动，使空气进入容器，待锻 炼三四天后再移植，会得到好的结果。小苗移植后2～ 4周左右，即可长出根系和新叶，可逐渐通风锻炼，后 将成活的幼苗移入田间。
三、影响茎尖培养微繁殖的因素
1．基因型
2．外值体的大实践意义：
一、它是研究叶形态建成，光合作用，叶绿素形 成等理论问题的良好方法 二、通过叶片组织的脱分化和再分化培养，以证 实叶细胞的全能性。 三、通过离体叶组织、细胞的培养、探索离体叶 组织、细胞培养的条件和影响因素，为叶片原生质体 培养和原生质体融合研究提供理论依据。
离体叶培养理论和实践意义：
应先将材料进行消毒。由于植物的种类及 材料的来源不同，可采取不同的消毒方法。
(1) 外植体的制备
首先对材料进行流水清洗，干净后迅速加入75％ 的酒精中漂洗几秒到十几秒钟；然后用0.1%的升汞或 20倍的次氯酸钠液消毒。对于嫩茎的茎尖，消毒时间 宜短（5～8min即可）。对于来自较老枝条上的顶尖 和侧芽及有芽鳞片保护的芽消毒时间可长达8～12min。 也可以在用75％酒精消毒后，用两种消毒剂连续消毒。 消毒后的材料用无菌水洗3次，后臵于无菌条件下进 行常规剥离。
一、离体根的培养
（一）、理论和实践意义：
是进行根系生理代谢研究的最优实验体系。 研究器官分化、形态建成的良好体系。建立快 速生长的根无性系。对根细胞培养物进行诱变 处理，可筛选突变体。
一、离体根的培养
（二）、培养方法： 一般方法：无菌种子萌发 （多采用液体培养） 侧根
根离体培养 扩大繁殖。
一、离体根的培养
四、利用离体叶组织的再生特性，建立植物 体细胞快速无性繁殖系，提高某些不易繁殖植物 的繁殖系数。 五、叶细胞培养物是良好的遗传诱变系统， 经过自然变异或者人工诱变处理可筛选出突变体 而应用于育种实践。