0088培养基及增菌培养基的配制、保管与质量控制操作规程

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培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制一、背景介绍培养基质量控制是在微生物实验室中非常重要的一项工作,它直接关系到微生物培养实验的准确性和可靠性。

培养基质量控制旨在确保培养基的质量稳定,保证实验结果的可重复性和可比性。

本文将详细介绍培养基质量控制的标准格式,包括培养基配制、质量检验和记录等方面的内容。

二、培养基配制1. 配制原则培养基的配制应遵循一定的原则,包括准确称量、严格控制pH值、高温高压灭菌等。

在配制过程中,应使用高纯度的试剂和蒸馏水,避免任何污染。

2. 配制步骤(1)准备所需试剂和培养基配方;(2)根据配方准确称量试剂;(3)将试剂溶解于蒸馏水中,搅拌均匀;(4)调整溶液的pH值,确保符合实验要求;(5)用蒸馏水补足溶液至所需体积;(6)高温高压灭菌,确保培养基的无菌性;(7)冷却后,分装到适当的容器中,密封保存。

三、质量检验1. 外观检验检查培养基的外观,应为清澈透明,无悬浮物和沉淀。

2. pH值检测使用pH计检测培养基的pH值,确保其在规定范围内。

3. 灭菌效果检验取一部分培养基,进行无菌培养试验,观察培养基是否有菌落生长,以确定灭菌效果。

4. 营养成分检测可使用化学方法或仪器检测培养基中各种营养成分的含量,确保其符合实验要求。

5. 结晶点检测在培养基中加入适量的酚红指示剂,观察是否出现结晶点,以判断培养基中是否存在污染。

四、记录与保存1. 记录要求每一批次配制的培养基都应有详细的记录,包括配方、配制日期、配制人员、检验结果等信息。

记录应存档备查,以便追溯和比对。

2. 保存要求配制好的培养基应密封保存,避免受潮和污染。

同时,应标明保存期限和适宜的保存温度,以确保培养基的质量稳定。

五、培养基质量控制的意义培养基质量控制是微生物实验室工作中的重要环节,它对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。

通过严格控制培养基的质量,可以保证实验结果的可重复性和可比性,提高实验的准确性和可靠性。

六、总结培养基质量控制是微生物实验室中不可或缺的一项工作。

培养基的制备贮存及质量控制方法

培养基的制备贮存及质量控制方法

培养基的制备、贮存及质量控制方法!培养基是微生物试验的基础,直接影响微生物试验结果。

适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。

培养基的配制培养基可按处方配制,也可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基。

在制备培养基时,应选择质量符合要求的脱水培养基或单独配方组分进行配制。

脱水培养基应附有处方和使用说明,配制时应按使用说明上的要求操作以确保培养基的质量符合要求,不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。

脱水培养基或单独配方组分应在适当的条件下储存,如低温、干燥和避光,所有的容器应密封,尤其是盛放脱水培养基的容器。

商品化的成品培养基除了应附有处方和使用说明外,还应注明有效期、贮存条件、适用性检查试验的质控菌和用途。

为保证培养基质量的稳定可靠,各脱水培养基或各配方组分应准确称量,并要求有一定的精确度。

配制培养基最常用的溶剂是纯化水,特殊情况下,可能需要用去离子水和蒸馏水。

应记录各称量物的重量和水的使用量。

配制培养基所用容器和配套器具应洁净,可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质的残留。

对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌,以保证培养基的无菌性。

脱水型培养基应完全溶解于水中,再行分装与灭菌。

配制时若需要加热助溶,应注意不要过度加热,以避免培养基颜色变深。

如需要添加其它组分时,加入后应充分混匀。

应按照生产商提供或使用者验证的参数进行培养基的灭菌。

商品化的成品培养基必须附有所用灭菌方法的资料。

培养基灭菌一般采用湿热灭菌技术,特殊培养基可采用薄膜过滤除菌。

培养基若采用不适当的加热和灭菌条件,有可能引起颜色变化、透明度降低、琼脂凝固力或 pH 的改变。

因此,培养基应采用验证的灭菌程序灭菌,培养基灭菌方法和条件,应通过无菌性试验和促生长试验进行验证。

此外,对高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证,以保证在一定装载方式下的正常热分布。

温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基的过热,过度灭菌可能会破坏绝大多数的细菌和真菌培养基促生长的质量。

培养基使用操作规程

培养基使用操作规程

培养基使用操作规程培养基使用操作规程一、实验目的培养基是进行细菌、真菌、细胞等生物体的培养和研究的重要工具,合理、正确地使用培养基是保证实验结果准确可靠的基础。

本操作规程的目的是规范培养基的使用,提高实验操作的效率和质量。

二、实验准备1. 准备所需的培养基和辅助设备,包括培养皿、试管、平板、移液器、蒸汽灭菌器等。

2. 检查培养基的颜色、透明度和保存情况,如有异常,应及时更换。

3. 检查辅助设备的清洁及消毒状态,确保无杂质和污染。

4. 执行无菌操作,包括洗手消毒、穿戴无菌手套等。

三、实验操作步骤1. 取出所需的培养基,检查其批号和有效期,如过期或批号异常,应立即更换。

2. 打开培养基瓶盖,注意不要将瓶盖放在工作台上,以防培养基被污染。

3. 使用移液器或注射器等无菌工具,将培养基均匀地移液到培养皿、试管或平板中,避免气泡的产生。

4. 关闭培养基瓶盖,以免污染其他培养基。

5. 将已加入培养基的培养皿、试管或平板进行标记,包括标注样品信息、培养基类型和培养日期等。

6. 将标记好的培养皿、试管或平板进行分类放置,如需高温、低温或其他特殊条件下培养,应放置在相应的设备中。

7. 操作完成后,清洁工作台,将未使用的培养基存放在适当的条件下,防止曝光、高温或低温等因素影响其质量。

四、实验安全措施1. 操作时要穿戴好无菌手套,以免细菌和其他微生物污染培养基。

2. 注意培养基的防护,避免被培养基溅到眼睛或其他敏感部位。

3. 注意实验室的清洁和消毒,保持操作环境的无菌状态。

4. 注意对培养基的正确处理和保存,避免因保存不当而导致培养基的污染或变质。

五、实验记录在培养基使用过程中,应做好详细、准确的实验记录,包括培养基的批号和有效期、使用日期、实验操作的细节、实验结果等。

记录应保存在指定的实验记录本中,并及时整理和归档,以备后续参考和查阅。

六、实验结果分析对培养基使用过程中出现的异常和特殊结果,应及时进行分析和解释。

如对培养结果的质量和效果有问题,应排除可能的技术和非技术原因,确保实验的准确性和可靠性。

培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制引言概述:培养基质量控制在生物科学研究和工业生产中起着至关重要的作用。

它涉及到培养基的配制、质量评估和调整等方面。

本文将从培养基配制、质量评估、调整、储存和记录等五个大点来详细阐述培养基质量控制的重要性和方法。

正文内容:1. 培养基配制1.1 确定培养基成分:根据所需培养细胞或微生物的特性,确定培养基成分,如碳源、氮源、无机盐等。

1.2 量化培养基成分:根据配方比例,精确称取各种成分,确保培养基的准确配制。

1.3 消毒处理:通过高温高压灭菌或化学消毒方法,确保培养基无菌。

2. 培养基质量评估2.1 pH值测定:测定培养基的pH值,确保适合细胞或微生物的生长。

2.2 渗透压测定:测定培养基的渗透压,确保适合细胞或微生物的生长。

2.3 营养成分测定:测定培养基中各种营养成分的含量,确保满足生物生长的需求。

3. 培养基调整3.1 pH调整:通过添加酸碱溶液,调整培养基的pH值,使其适合细胞或微生物的生长。

3.2 营养成分调整:根据生物生长的需要,添加或调整培养基中的营养成分。

3.3 温度调整:根据细胞或微生物的生长温度要求,调整培养基的温度。

4. 培养基储存4.1 无菌储存:将配制好的培养基经过消毒处理后,密封保存,避免细菌或真菌的污染。

4.2 低温储存:将培养基存放在低温环境中,如冰箱或冷冻库,延长其有效使用期限。

4.3 避光储存:将培养基存放在避光的环境中,避免光照引起的化学反应和降解。

5. 培养基记录5.1 记录配制过程:详细记录培养基的配制过程,包括成分、量化、消毒处理等,方便后续的质量评估和调整。

5.2 记录使用情况:记录培养基的使用情况,包括使用时间、使用量、使用者等,方便追溯和质量控制。

5.3 记录质量评估结果:记录培养基的质量评估结果,包括pH值、渗透压、营养成分等,方便后续的质量调整和改进。

总结:培养基质量控制是生物科学研究和工业生产中不可或缺的一环。

通过正确的培养基配制、质量评估、调整、储存和记录等措施,可以确保培养基的质量稳定和可靠性,为生物实验和生产提供良好的基础条件。

培养基和检定菌管理制度

培养基和检定菌管理制度

培养基和检定菌管理制度一、概述为了保障实验室内培养基和检定菌的质量,确保实验结果的准确性和可靠性,特制定本管理制度。

本制度适用于实验室内培养基和检定菌的采购、储存、保管、使用和处理等各个环节。

二、培养基的管理1. 培养基的采购1.1 实验室内所需的培养基应由专门负责采购的人员进行统一采购,采购前应审核供应商的资质和质量保证协议。

1.2 采购人员应根据实验需要的类型和用途,选择合适的品牌和规格的培养基。

1.3 采购人员应对采购的培养基进行验收,并及时将验收结果登记在培养基验收记录表上。

2. 培养基的储存和保管2.1 培养基应储存在干燥、阴凉、通风的环境中,避免高温和潮湿。

2.2 培养基在储存和保管过程中应避免受到日光直射,应放在避光的柜子或箱子内。

2.3 储存室内应有定期检查的制度,确保培养基的有效期和质量。

2.4 培养基的容器上应贴有标签,标注培养基的名称、批号、保质期和储存日期等信息。

3. 培养基的使用和处理3.1 使用培养基前应先进行检查,验证培养基的标签和有效期。

3.2 使用培养基时应遵循相应的操作规程,确保使用过程中的洁净和无菌。

3.3 使用完的培养基应按照规定的程序进行处理,避免对环境和人员造成污染。

4. 培养基的废弃4.1 培养基使用过程中产生的废弃物应按照实验室内的废弃物管理制度进行处理。

4.2 废弃的培养基应分类存放,并在指定的时间内送到指定的处理单位进行处理。

5. 培养基的检定5.1 对新购的培养基应进行检定,确保其质量符合要求。

5.2 对储存一段时间的培养基应进行定期的检定,确保其有效期和质量。

三、检定菌的管理1. 检定菌的采购和保存1.1 实验室所需的检定菌应由专门负责采购的人员进行统一采购,采购前应审核供应商的资质和质量保证协议。

1.2 采购人员应根据实验需要的类型和用途,选择合适的品种和规格的检定菌。

1.3 采购人员应对采购的检定菌进行验收,并及时将验收结果登记在检定菌验收记录表上。

培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制引言概述:培养基质量控制是微生物实验室中至关重要的一环。

它涉及到培养基的制备、质量检测、贮存等多个方面。

良好的培养基质量控制能够确保实验结果的准确性和可重复性。

本文将从培养基制备、质量检测、贮存、使用和记录等五个大点详细阐述培养基质量控制的重要性和方法。

正文内容:1. 培养基制备1.1 选择适当的配方:根据实验需求选择合适的培养基配方,包括碳源、氮源、无机盐、维生素等成分。

1.2 精确称量:使用精密天平进行精确称量,确保每个成分的比例准确。

1.3 溶解和调节pH:将成分溶解在适当的溶剂中,并使用pH计调节溶液的pH 值至理想范围。

1.4 灭菌:使用高温高压灭菌器或滤器对培养基进行灭菌,以杀灭其中的细菌、真菌和病毒。

2. 培养基质量检测2.1 pH值测定:使用pH计测定培养基的pH值,确保其在理想范围内,以维持微生物生长的最佳条件。

2.2 渗透压测定:使用渗透计测定培养基的渗透压,确保其与微生物细胞内外的渗透压相适应。

2.3 灭菌效果检测:将一部分培养基接种不同的微生物,观察其生长情况,以确认培养基的灭菌效果。

2.4 营养成分检测:使用化学分析方法检测培养基中各种营养成分的浓度,确保其满足微生物生长的需求。

3. 培养基贮存3.1 适当的温度:将培养基贮存于适当的温度下,通常为4℃,以防止其中微生物的生长和培养基成分的分解。

3.2 防止污染:使用无菌技术操作,避免培养基受到外界细菌和真菌的污染。

3.3 包装密封:将培养基装入无菌试管或瓶中,并严密封闭,以防止湿气和细菌的进入。

4. 培养基使用4.1 培养条件控制:根据不同微生物的生长要求,控制培养基的温度、湿度、光照等条件。

4.2 培养时间控制:根据微生物的生长速度和实验需求,控制培养时间,以获取适当的菌落数量。

4.3 培养方法标准化:制定培养方法的标准操作规程,确保每次实验的培养条件和操作步骤一致。

5. 培养基记录5.1 培养基配方记录:详细记录每个培养基的配方,包括成分名称、质量和比例等信息。

培养基配制使用操作规程0

培养基配制使用操作规程0

培养基配制使用操作规程0一、实验前准备1.确定所需的培养基种类和配制量。

2.准备所需的实验材料和设备,如试剂、培养基成分、量筒、称量器具等。

3.检查所使用的设备和容器,确保其干净无污染。

二、配制培养基1.根据培养基配方,按照比例准确称取所需的培养基成分。

不同的培养基成分可能有不同的配比,应根据具体要求进行配制。

2.准确称取培养基成分后,将其放入一个干净的容器中。

如果配制的培养基成分较多,可以选择使用一个混合容器,将不同的成分分批加入。

3.加入一定量的去离子水,使培养基成分溶解均匀。

注意搅拌培养基溶液,以确保成分充分溶解。

4.根据培养基配方需要,调整培养基的pH值。

可以使用酸碱溶液进行调节,pH值应根据具体要求控制在适宜范围内。

5.根据培养基配方需求,加入一定量的琼脂或琼脂糖,使培养基凝胶化。

注意在加热溶化琼脂时要确保充分溶解,并避免过热。

6.将配制好的培养基溶液均匀地倒入培养皿或试管中,封装好,并在密封处涂抹石蜡或添加适量的抗生素用于防止污染。

三、消毒和灭菌处理1.培养基配制完成后,应进行标本消毒处理,以确保培养基无菌。

可以使用自主炉、高压灭菌器或紫外线灯进行消毒处理,处理时间和方法应根据具体要求进行。

2.检查消毒后的培养基容器,确保无菌。

如果发现有污染或者其他异常情况,需要重新消毒处理。

四、记录1.培养基配制完后,需要记录相关信息,如培养基种类、配制日期、配制人员等。

这些记录有助于追溯和分析培养基的质量问题,也方便后续使用和管理。

以上是培养基配制的操作规程,这些规程主要是为了确保培养基质量的可靠性和可重复性。

执行这些规程可以减少操作失误和污染的风险,保证实验结果的准确性和可靠性,同时也有助于规范实验室管理和操作流程。

培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制一、背景介绍培养基质量控制是在细胞培养和微生物培养等实验中非常重要的一环,它直接影响到实验结果的准确性和可重复性。

培养基质量控制主要包括培养基配制、无菌操作、质量检测和保存等方面。

本文将详细介绍培养基质量控制的标准操作流程和相关要点。

二、培养基配制1. 材料准备:准备所需的培养基成分和溶剂,确保材料的质量和纯度。

2. 称量和混合:按照配方比例称取固体成分,并加入适量的溶剂,用搅拌器充分混合,直至溶解均匀。

3. 调整pH值:使用pH计测量溶液的pH值,根据实验要求调整pH值,通常在7.0-7.4之间。

4. 灭菌:将配制好的培养基装入培养瓶或试管中,经过高温高压灭菌处理,确保培养基的无菌状态。

三、无菌操作1. 实验环境准备:在无菌操作室或无菌工作台中进行操作,确保操作环境的洁净和无菌。

2. 空气消毒:打开紫外灯,对操作区域进行紫外线照射,消毒空气中的微生物。

3. 手部消毒:用75%酒精或其他消毒剂对双手进行彻底消毒,确保手部无菌。

4. 器具消毒:将需要使用的培养器具经过高温高压灭菌处理,或使用消毒液进行消毒,确保器具无菌。

5. 避免污染:在操作过程中,避免培养基接触到非无菌物品或受到空气中的污染。

四、质量检测1. 外观检查:检查培养基的颜色、透明度和悬浮物等外观特征,确保培养基无异常。

2. pH值检测:使用pH计测量培养基的pH值,确保其符合实验要求。

3. 灭菌效果检测:将一部分培养基在无菌条件下保存一段时间后,进行培养基涂布法或倒扣培养法,观察是否有菌落生长,以判断灭菌效果。

4. 营养成分检测:使用适当的方法检测培养基中的营养成分含量,确保其符合实验要求。

五、保存与使用1. 存储条件:将配制好的培养基保存在干燥、阴凉、避光和密封的容器中,避免受潮和污染。

2. 有效期限:根据培养基的成分和质量要求,确定其有效期限,过期的培养基不得使用。

3. 标签标识:在培养基容器上标注清晰的标签,包括培养基名称、配制日期、有效期限等信息。

培养基制备规程及使用规程

培养基制备规程及使用规程

培养基制备规程及使用规程一、培养基制备规程1.实验室环境准备:a.准备洁净的实验室,保持室内的洁净度和通风良好。

b.检查实验室设备,确保所有设备都处于良好的工作状态。

2.实验室操作准备:a.准备所需的培养基成分,如葡萄糖、氨基酸、盐类和维生素等。

b.准备所需的试剂和溶液,如酚红指示剂和加热消毒用的稀盐酸等。

c.准备所需的实验器材,如计量容器、培养皿和pH调节器等。

3.培养基制备步骤:a.按照配方准确称取所需成分,并加入适量的蒸馏水中。

b.用适当的方法加热溶解所需成分,如用水浴或高压灭菌锅加热至沸腾。

c.将溶解后的培养基过滤,以去除可能存在的微生物污染。

d.在制备过程中,确保培养基的pH值在所需范围内,如需调节pH值可使用氢氧化钠或盐酸等酸碱调节剂。

e.将制备好的培养基分装到适当的容器中,并密封保存。

4.培养基质量控制:a.制备好的培养基应进行质量检查,如外观、pH值、无菌性和有效成分浓度等。

b.注册并记录所用的培养基成分和制备过程,以备后续参考。

二、培养基使用规程1.实验室操作准备:a.检查所需的培养基是否已经过期,如已过期应立即报废。

2.培养基使用步骤:a.将需要处理的样品制备成适当浓度的悬浮液或溶液。

b.使用无菌的技术将培养基分装到试管或培养皿中。

d.将处理好的样品加入培养基中,保持无菌操作。

e.在使用过程中,必要时对培养基进行保温或恒温操作。

f.记录实验过程中的有关数据和观察结果。

3.培养基处理和存储:a.使用完毕的培养基应按照实验室规定的方法进行处理,防止污染和传播病原微生物。

b.剩余未使用的培养基应密封保存,存放于适当的温度和湿度条件下,以保证培养基的质量和有效性。

c.定期检查存储的培养基是否已过期,如已过期应立即报废。

d.记录所用培养基的批号和过期日期,以备后续参考。

总结:培养基的制备与使用直接关系到实验结果的准确性和可靠性。

制备过程中需要注意材料的准确称量和溶解、过滤的无菌操作。

使用过程中要注意无菌操作,以保证培养物的纯度和有效性。

培养基的配制标准操作规程

培养基的配制标准操作规程

培养基的配制标准操作规程1.目的选取天然或纯化的营养物质及其相应的渗透压、酸碱度等理化条件,经过加工,制成不同的营养基质,藉以在人工条件下培养供检验用的微生物。

2.适用范围适用于培养基的配制操作。

3.责任者操作员。

4.仪器硅胶塞、试管、平皿、吸管、漏斗、高压锅、三角瓶、天平。

5. 内容5.1 准备5.1.1 玻璃器皿洗涤5.1.1.1 制备培养基所用吸管、试管,三角瓶和平皿等新玻璃器皿,因有灰尘和游离碱性物质,先用水冲洗干净。

然后置3%的盐酸中浸泡约12H。

取出后,用清水冲洗干净,再用纯化水冲洗1~2次,晾干后备用。

5.1.1.2 凡各种装量大而又不宜高压的含糖培养基,所用的玻璃器皿应事先灭菌,以免因一次性低压灭菌不彻底而染菌。

5.1.2 用具包装与灭菌5.1.2.1 硅胶塞:应用水冲洗干净,再以纯化水冲洗1~2次,烘干备用。

5.1.2.2 试管:各种试管最好先配上合适的硅胶塞,待高压灭菌后再分装培养基,可防止污染。

5.1.2.3 平皿:取洗净晾干的平皿,每7 套作一个包装,121℃ 30分钟灭菌后烘干备用;也可用160℃ 2小时干热灭菌后备用。

5.1.2.4 吸管:供染菌限度检验用的吸管,应防止堵塞,故选用红刻度粗下口的。

用前洗净烘干,上口塞进少许普通棉花,松紧适度,以防污染。

然后按其容量大小,分别放在用双层牛皮纸做成的纸袋或者金属盒内,包严经121℃ 30分钟灭菌后烘干备用。

5.2 操作5.2.1 根据用途选择培养基,按其用法进行准确称量和加纯化水,并填写配制记录如名称、配制量、配比、配制日期、配制者。

5.2.2 培养基完全溶解后,进行过滤和分装,液体培养基一般应澄清无沉淀,否则影响观察细菌生长结果。

过滤时可用滤纸或脱脂棉。

5.3 分装5.3.1 各种液体培养基分装试管时,每支应按试管大小及用途不同定量分装,可用吸管或注射器分装,也可用漏斗分装。

一般漏斗下口连接一段橡胶管,管口插一小段玻璃管,再加上一个弹簧夹控制流量,分装时将漏斗放在支架上,内装培养基,然后将下口插入试管中即可按量将培养基逐管分装,注意,不同品种的培养基用过漏斗,应充分洗净后再用,以防两种培养基互相混淆,影响使用效果。

培养基的配制及质量控制

培养基的配制及质量控制
培养基的配制及质量控制
一、培养基的配制
培养基是绝大多数微生物试验的基础。因 此,培养基的质量是微生物试验成功与否 的关键因素。适宜的培养基制备方法、贮 藏条件和质量控制试验是提供优质培养基 的保证。
⑴培养基可按处方制备也可使用按处方生 产的符合规定的商品化成品培养基,脱水 培养基除附有处方和使用说明外还应注明 有效期、贮存条件、适用性试验的质控菌 株和用途。配制时应按使用说明上的要求 操作,受潮结块不能使用,以确保培养基 的质量符合要求。
称量 配制 分装 矫正pH
2、培养基的灭菌
灭菌方法及条件不当可直接影响培养 基质量,培养基灭菌方法和条件,应通過 无菌性试验和促生长试验进行验证,验证 方法同《中國药典2010年版》附录灭菌 法。。
不同种类培养基应采用不同的灭菌方 法,配制好的培养基灭菌一般多用流通 蒸汽灭菌和滤膜过滤除菌. 流通蒸汽灭菌 滤膜过滤除菌
培养基的有效期是指已通过促生长试验的 培养基在整个有效期内均需符合这些相应 的标准。每批培养基储存的时间将取决于 一定存放条件(包括容器和密封性)的培 养基组成成分的稳定性。
当批培养基不符合促生长试验,应寻找造 成不合格的原因。这个调查包括采取适当 的行动以防止问题的重复出现。如果未找 到原因或还没有解决有关培养基的促生长 问题,那么任何不符合要求的批次均不能 使用。
⑷ 配制培养基最常用的溶剂是纯化水, 特殊情况下需要用去离子水和蒸馏水, 对热敏感的培养基应用灭菌水和无菌容 器配制与分装,配制时若需加热助溶应 注意温度不要过高
⑸、对配制培养基的过程作详细的记录, 记录内容包括:配制日期、培养基名称、 成分、配制数量、质量监控结果等进行全 面详细记录。
1、培养基的制备方法
菌悬液制备后在室温下放置应在2小时 内使用,若保存在2~8℃可以在24小时 内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 2~ 8℃,在验证过的贮存期内使用。

培养基配制操作规程

培养基配制操作规程

1.目的:本规程规范了微生物实验室培养基的配制操作。

2.范围:适用于微生物检测使用的各类培养基配制。

3.职责:微生物检验员对本规程的实施负责。

质量部负责人负责监督。

4.内容4.1 培养基定义指人工配制的生物营养物质,即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。

通常指干粉培养基和配制好的琼脂、肉汤、稀释液等。

4.2 培养基制备前准备工作4.2.1 准备配制培养基用的天平、三角瓶、量筒、称量纸、小勺、电阻炉和所需的纯化水等,新的玻璃器皿(首次使用)和再次使用的玻璃器皿分别按各自批准的规程洗涤、干燥。

4.2.2 按照所检项目微生物限度的种类,准备相应的培养基。

4.3 培养基的制备4.3.1溶解:根据培养基瓶上标签说明和所需配制量称取干燥培养基,置烧杯中,加入适量纯化水,放到电炉上加热,使溶解。

如有沉淀,应于溶化后趁热过滤。

4.3.2 校正酸碱度:根据培养基瓶上标签说明,用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠调节pH值达到规定的要求。

如与所需pH不符,可用酸或碱液加以校正,试剂规格应为化学纯以上。

4.3.3 培养基分装:培养基一般在高压灭菌前分装,将配制好的培养基分装到若干个三角形瓶或试管中,分装量不宜超过该容器的2/3,以免灭菌时外溢。

瓶口塞好塞子,盖上牛皮纸并用绳子捆扎好。

硫乙醇酸盐流体培养基,分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基的氧化层(粉红色)不超过培养基深度的1/2。

4.3.4 培养基的灭菌:配制好的培养基依据说明书规定时间、方法进行灭菌,配制后宜在2小时内灭菌,避免微生物滋生避免细菌繁殖。

培养基应只能进行一次蒸汽灭菌处理。

4.3.5 培养基的使用尽量做到现配现用。

4.4 培养基的保存和使用。

4.4.1 灭菌后的培养基应保存在2~25℃(一般放入冰箱中保存),防止被污染,可在三周内用毕。

临用时,取出,用水浴加热使溶化。

已溶化的培养基应一次用完。

培养基质量控制规程

培养基质量控制规程

培养基质量控制规程1.目的规范本中心微生物实验室培养基的内部质量控制工作。

2.范围适用于实验室微生物培养基使用前的质量验收、使用过程中的质量控制。

3.职责3.1 检验人员:按照本规程规对培养基使用前及使用过程中进行质量控制,确保培养基符合相关标准的要求。

3.2 科室负责人:负责指导、监督检验人员对培养基进行质量控制。

4.程序4.1培养基采购微生物科制订采购计划,经批准后选定合格的供应商,培养基的采购执行《服务和供应品的采购程序》4.2培养基接收4.2.1生产企业提供的材料培养基生产厂家随产品应提供下列文件(电子版也可):培养基、独立成分、添加成分名称;产品编号;最终pH;储藏信息和有效期;标准要求及质控报告;必要的安全和(或)危害数据(SDS)。

4.2.2 验收实验室接收到培养基之后应检查培养基的名称和批号、接收日期、有效期、包装的完整性,填写《培养基实验室验收记录表》。

4.3 贮存4.3.1 概述应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行培养基的保存和使用。

4.3.2脱水合成培养基及其添加成分的质量管理和质量控制新购培养基及添加成分保存在密闭容器中,培养基的购买应有计划,掌握先购先用原则,实验室应保存有效的培养基目录清单,包括以下内容:容器密闭性复查、首次开封日期、内容物的感官检查,记录《培养基目录清单》。

对于新开封的脱水培养基,应对其质量进行检查。

通过粉末的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化判断脱水培养基的质量变化。

若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变不应再使用。

4.3.3 商品化即用型培养基应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行保存和使用。

4.3.4 实验室自制的培养基在保证其成分不会改变条件下保存,即避光、干燥保存。

必要时在5℃+3℃冰箱中保存,通常建议平板不超过2周-4周,瓶装和试管装培养基不超过3个月-6个月,除非某些标准或者实验结果表明保质期比上述的更长。

微生物检验科培养基的配制、保管制度

微生物检验科培养基的配制、保管制度

微生物检验科培养基的配制、保管制度
1、所用化学药品必须纯净,称量准确,并应按成份中指定的规格使用,如规定为无水药品,改用结晶水时必须折算至无水的重量。

2、制备及盛置培养基均不宜用铜锅,因金属离子能影响细菌和生长或毒素的产生。

一般可用搪瓷或玻璃容器作融化、混合配制。

成置培养基用玻璃器皿。

3、培养基须有适合细菌生长的酸碱度,因此在制备培养基时,酸碱度的测定必须非常准确。

4、培养基在加热煮沸后所蒸发的水分,必须用蒸馏水补足,煮沸前可先量总量,煮沸后再量一次,补足失去水分的量。

5、盛培养基用的试管或烧瓶口须用脱脂棉花(必要时棉花外面包一层纱布)塞住。

脱脂棉花可于蒸汽灭菌过程中吸入水分而使培养基变质。

6、培养基分装时不宜超过容器的2/3以免灭菌时溢出。

7、分装培养基的试管、烧瓶等,若排列于铁丝筐中进行灭菌时,不宜排列过挤,以免受热不均,影响灭菌效果。

8、某些不耐热的培养基如含糖、血清或鸡蛋培养基等,宜采用低热灭菌或用滤菌器除菌;既使耐高热的培养基也应尽量减少灭
菌次数,以免破坏其中营养物质或影响其凝固力。

9、培养基制成后应置37℃孵育箱内孵育24小时,证明无菌后,方可应用。

10、培养基制成后不宜保存过久,以免减低其营养价值;更须预防在贮存过程中水分的蒸发和成分的变质。

0088培养基及增菌培养基的配制、保管与质量控制操作规程

0088培养基及增菌培养基的配制、保管与质量控制操作规程

贵州明湖药业股份有限公司GMP文件目的培养基的配制操作程序,确保培养基的质量。

依据《中国药典》2010版一部附录。

范围本标准适用于微生物检验用培养基的配制和质量监控的操作程序。

责任人QC负责人、化验员。

内容1 培养基及增菌培养基的保管所有干燥的培养基及增菌液培养基均应放置在干燥通风处,避免受潮结块。

2 培养基、增菌液培养基的配制各培养基、增菌液培养基的配制均应按照各品种干燥培养基及增菌液培养基瓶签规定称量克数称量或按比例称量,配制成所需毫升数。

1)营养琼脂培养基配制取营养琼脂试药38g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,于121℃高压灭菌15分钟,保存备用。

2 )虎红琼脂培养基配制取虎红琼脂试药28.5g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,于116℃高压灭菌30分钟,保存备用。

3)BL增菌液培养基配制取胆盐乳糖试药36g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀每瓶100ml 分装,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

4)蛋白胨水培养基配制取蛋白胨水试药15g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

5)伊红美蓝琼脂培养基配制取伊红美蓝琼脂试药4.2g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,于116℃高压灭菌20分钟,60℃注皿(按每皿25ml),放入培养箱中,于30~35℃培养48小时,应无菌生长,4℃冰箱保存备用。

6)磷酸盐葡萄糖胨水培养基配制取磷酸盐葡萄糖胨水试药1.58g,加100ml蒸馏水,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

7)枸橼酸盐琼脂培养基配制取枸橼酸盐琼脂试药22g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

8)营养肉汤培养基配制取营养肉汤试药22g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,,于121℃高压灭菌15分钟,保存备用。

培养基配制流程和注意要点

培养基配制流程和注意要点

培养基配制流程和注意要点培养基配制程序如下:1. 将贮存的各种母液按顺序依次放好。

2. 将各种洁净的玻璃器皿如培养瓶、量筒、烧杯、吸管、玻璃棒、漏斗等,放在指定的位置。

准备好蒸馏水或无离子水及瓶盖或封口膜、包纸、橡皮筋等。

3. 称取规定量的琼脂和蔗糖,将琼脂置于精钢锅或者电饭煲中,加水至培养基最终容积的3/4或1/2,随之加热使之溶解,注意防止煳锅底和溢出。

琼脂必须完全溶化,以免造成浓度不均。

琼脂不能过多,不然会导致培养基太硬,含水太少,通气不良;反之,培养基太软,植物材料则难以固定。

由于琼脂较难溶解,所以在制备培养基时,应首先加热溶解。

4. 按母液顺序,根据不同母液的浓缩倍数移取规定的量,如配制1L MS培养基移取浓缩10倍的大量元素母液为100mL。

母液加完后,再经过计算加入所需要的植物生长调节剂。

在加入母液或生长调节剂时,应事先检查这些药品是否已经变色或产生沉淀,若出现这些现象就停止使用。

加完后一并倒入已溶化的琼脂中,并再加入蔗糖。

5. 加蒸馏水定容至培养基的最终容积。

6. pH值调整。

培养基的pH值(酸碱度)直接影响培养物对离子的吸收,所以过酸或过碱都会影响植物的生长。

此外,琼脂培养基的pH 值还影响到其凝固程度,所以当培养基配制好以后,应随即进行pH值的调整(一般pH值为5.6-6.0)。

最好是用酸度计测试,即快又准,如无此设备也可以用精密pH试纸(应在干燥容器中保存,以免吸潮而失效)。

若培养基偏酸就用1mol/L的氢氧化钠来调节,偏碱则用1mol/L的盐酸来调节。

经高压蒸汽灭菌后,由于某些成分的分解(如蔗糖)或氧化,使培养基的pH值会降低(一般会降低0.2左右)。

有时玻璃皿质量较差,其中一部分物质溶解,也会影响酸度的变化,这些再调整培养基的pH值的时候都要考虑进去。

一般在比较成熟的情况下,会在培养基高压蒸汽灭菌前调高一定的pH值,以便适应灭菌后pH值下降的问题,具体调高多少可根据自身实验摸索。

培养基配制操作规程

培养基配制操作规程

培养基配置操作规程目的:本规程规范了微生物实验室培养基的申购、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等。

范围:本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基职责:QC检验员对本标准的实施负责。

执行标准:《中国药典》2020年版四部内容:1、培养基(Media)是指人工配制的生物营养物质,即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。

通常指干粉培养基(Dehydrated Medium)和配制好的琼脂(Agar)、肉汤(Broths)、稀释液(Diluents)等等。

3.程序3.1. 购买3.1.1. 质量控制部提出采购计划,并填写《采购计划》,注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等,由相关人员审核,交采购部采购。

3.1.2. 培养基买回后,由使用部门填写领料单,由物流部发出。

3.1.3. 领回后的干粉培养基,开瓶后应贴上《开启标签》,注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件,并且不得把原标签覆盖。

使用时填写《干粉培养基使用记录》。

3.1.4. 检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制,并填写《培养基配制使用记录》,配制记录上注明所用培养基的批号;盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》,标签应注明:名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。

批号编号方式为年XX,月XX,日XX,流水号XX。

3.1.5. 配制好的培养基应在一定时间内,按说明书规定时间进行灭菌,避免微生物滋生。

3.1.6. 必要时,灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。

3.2. 培养基质量控制3.2.1. 为了保证微生物检验的质量,在使用前,每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。

3.2.2.进行培养基质量控制检查应填写相应的记录,如《计数用培养基适用性检查记录》、《控制菌检查用培养基适用性检查记录》。

3.2.3菌种复活、传代用的培养基不需进行适用性检查。

培养基配制及适用性检查标准操作规程

培养基配制及适用性检查标准操作规程

精心整理建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程,规范实验人员的2.1培养基到货后,微生物室检验员应进行验收。

验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商,应与申购单一致;检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。

2.2验收合格后,登记于《培养基领用台账》(附记录文件编号:SMP-10-QC-009-02(00))。

3培养基的贮藏3.1未开封的脱水培养基贮存于阴凉室,使培养基处于低温、干燥、和避光条件下。

已开封的脱水培养基应盖紧,贮存于阴凉库。

3.2灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后,置4~8℃冷藏保存待用。

灭菌后培养基储存期为7天。

4培养基的配制4.1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》(附记录文件编号:SMP-10-QC-009-02(00))。

4.2培养基配制批号原则:原材料批号-配制日期:比如2011年1月1日配制的培养基,培养基干粉批号000000,配制批号为:000000-110101。

配制好的培养基贴《培养基标签》(附记录文件编号:R-SMP-10-QC-009-03)。

(注:同一天同一培养基配置多次的,在原批号后加“-”加“数字”表示,如000000-110101-01)4.33.14.3.2以4.3.34.4pHpH值采用于50ml灭菌前可使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液进行缓慢调整,避免反复调整而增加离子浓度。

灭菌后培养基不符合标准时视为不合格,不进行使用。

4.5培养基灭菌培养基和试剂应采用湿热灭菌法或过滤除菌法。

湿热灭菌在高压灭菌锅或蒸汽灭菌柜中进行,容器具若需湿热灭菌时,灭菌条件为121℃灭菌30min。

培养基严格按说明书条件进行灭菌。

培养基灭菌后应立即取出,不得存放于高压灭菌器中。

5培养基的质量控制5.1计数培养基适用性检查5.1.1菌种及菌液制备菌种:试验用菌株的传代次数不得超过5代(从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代),并采用适宜的菌种保藏技术进行保存,以保证试验菌株的生物学特性。

培养基 配制方法

培养基 配制方法

培养基配制方法
要配制培养基,首先需要准备以下原料和设备:蒸馏水、琼脂、葡萄糖、氨基酸、无机盐、pH计、计量瓶、培养皿、加热器等。

1. 准备培养基的配方,包括所需的成分及比例。

2. 用计量瓶将适量的蒸馏水加入容器中。

3. 将容器中的蒸馏水加热至将琼脂完全溶解。

4. 将琼脂溶液冷却至50-60摄氏度后,加入葡萄糖、氨基酸、无机盐等其他成分。

5. 使用pH计检测培养基的pH值,根据需要进行调整。

6. 将培养基倒入培养皿中,并在倒入后迅速将培养皿密封。

7. 将培养皿放置在加热器上进行高温高压灭菌。

8. 灭菌后,将培养基冷却至室温,即可用于培养细菌。

以上就是培养基的配制方法,需要严格按照操作步骤和配方进行。

配制过程中要注意卫生和灭菌,确保培养基的质量和无菌性。

培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制标题:培养基质量控制引言概述:培养基是微生物学实验中不可或缺的重要实验材料,其质量直接影响到实验结果的准确性和可重复性。

因此,进行培养基质量控制是非常重要的。

本文将从培养基成分、制备方法、贮存条件、灭菌方式和pH值等方面进行详细介绍。

一、培养基成分1.1 合理选择基础成分:培养基的基础成分包括碳源、氮源、无机盐和生长因子等,合理选择这些成分可以满足微生物的生长需求。

1.2 添加适量的添加剂:在基础成分的基础上,还需要添加适量的添加剂如琼脂、蔗糖等,以增加培养基的凝胶性和营养成分。

1.3 控制成分比例:不同微生物对培养基成分比例的需求不同,因此需要根据具体微生物的生长特性来合理控制成分比例。

二、制备方法2.1 严格按照配方制备:在制备培养基时,需要严格按照配方来添加各种成分,避免因误差导致培养基质量下降。

2.2 灭菌前注意无菌操作:在制备培养基的过程中,需要注意无菌操作,避免细菌、真菌等杂质的污染。

2.3 控制制备过程条件:制备培养基的过程中需要控制温度、搅拌速度等条件,以确保培养基的均匀性和质量。

三、贮存条件3.1 低温保存:制备好的培养基需要在低温条件下保存,避免因高温导致成分分解或微生物的生长。

3.2 避光保存:培养基在贮存过程中需要避光保存,避免光照导致培养基成分的变化。

3.3 注意湿度控制:贮存培养基时需要注意湿度控制,避免受潮导致培养基失效。

四、灭菌方式4.1 高压灭菌:常用的培养基灭菌方式包括高压灭菌,通过高温高压可以有效杀灭培养基中的微生物。

4.2 过滤灭菌:还可以采用过滤灭菌的方式,通过微孔滤膜将培养基过滤,去除其中的微生物。

4.3 紫外线灭菌:另外,紫外线灭菌也是一种常用的培养基灭菌方式,可以有效杀灭培养基中的细菌、真菌等微生物。

五、pH值5.1 控制pH值范围:培养基的pH值对微生物的生长有重要影响,因此需要控制培养基的pH值范围。

5.2 pH值调节方法:在制备培养基时,可以通过添加酸碱溶液来调节培养基的pH值,使其适合特定微生物的生长。

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贵州明湖药业股份有限公司GMP文件
目的培养基的配制操作程序,确保培养基的质量。

依据《中国药典》2010版一部附录。

范围本标准适用于微生物检验用培养基的配制和质量监控的操作程序。

责任人QC负责人、化验员。

内容
1 培养基及增菌培养基的保管
所有干燥的培养基及增菌液培养基均应放置在干燥通风处,避免受潮结块。

2 培养基、增菌液培养基的配制
各培养基、增菌液培养基的配制均应按照各品种干燥培养基及增菌液培养基瓶签规定称量克数称量或按比例称量,配制成所需毫升数。

1)营养琼脂培养基配制
取营养琼脂试药38g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,于121℃高压灭菌15分钟,保存备用。

2 )虎红琼脂培养基配制
取虎红琼脂试药28.5g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,于116℃高压灭菌30分钟,保存备用。

3)BL增菌液培养基配制
取胆盐乳糖试药36g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀每瓶100ml 分装,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

4)蛋白胨水培养基配制
取蛋白胨水试药15g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,,于
116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

5)伊红美蓝琼脂培养基配制
取伊红美蓝琼脂试药4.2g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,于116℃高压灭菌20分钟,60℃注皿(按每皿25ml),放入培养箱中,于30~35℃培养48小时,应无菌生长,4℃冰箱保存备用。

6)磷酸盐葡萄糖胨水培养基配制
取磷酸盐葡萄糖胨水试药1.58g,加100ml蒸馏水,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

7)枸橼酸盐琼脂培养基配制
取枸橼酸盐琼脂试药22g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

8)营养肉汤培养基配制
取营养肉汤试药22g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,摇匀分装,,于121℃高压灭菌15分钟,保存备用。

9)沙门、志贺菌属琼脂培养基配制
取沙门、志贺菌属琼脂试药60g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,于116℃高压灭菌20分钟,60℃注皿(按每皿25ml),放入培养箱中,于30~35℃培养48小时,应无菌生长,4℃冰箱保存备用。

10)麦康凯琼脂培养基配制
取麦康凯琼脂试药60g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,于116℃高压灭菌20分钟,60℃注皿(按每皿25ml),放入培养箱中,于30~35℃培养48小时,应无菌生长,4℃冰箱保存备用。

11)四硫磺酸钠亮绿培养基配制
取四硫磺酸钠亮绿培养基试药56g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

12)三糖铁琼脂培养基配制
取三糖铁琼脂培养基试药65g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

13)脲琼脂培养基配制
取脲琼脂培养基试药29g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

14)氰化钾培养基配制
取氰化钾培养基试药13.8g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

15)赖氨酸脱羧酶培养基配制
取赖氨酸脱羧酶培养基试药4.5g,加1000ml蒸馏水,煮沸,使其完全溶解,于116℃高压灭菌20分钟,保存备用。

3 培养基的保管
各品种培养基配制好后,按规定温度进行高压蒸汽灭菌,取出待凝,将制备好的培养基放置在2~25℃避光环境条件置冰箱中5℃低温保存,但应在最多三周内使用,若保存于密闭容器中,可在一年内使用。

4质量控制
4.1 各种专一和特殊用途的培养基,特别是生化鉴别试验培养基,在初次使用前,必须用已知菌株作对照,测定各种生化及其它反应的质量效果,以保证培养基各种鉴别反应的灵敏度和准确性。

4.2 供菌种保存用培养基,每次使用前均应做相应的无菌检查,证明灭菌彻底方可使用。

5 培养基的质量检查
以上培养基均应按其特点进行阴性培养,无菌落生长后才能使用。

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