激光捕获显微切割技术应用研究新进展
细胞生物学习题库(附答案)
细胞生物学习题库(附答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、以下哪种激素可以直接穿过细胞膜调控靶细胞分化状态,无需膜受体参与A、生长激素B、胰岛素C、甲状腺素D、雌激素E、肾上腺素正确答案:D2、目前已知的最小细胞是A、立克次体B、杆菌C、衣原体D、支原体E、球菌正确答案:D3、下列能够进行自我装配的细胞结构是A、染色体B、线粒体C、脂质双层D、糖蛋白E、胰岛素正确答案:C4、男性,29岁,视物不清10年,双上睑下垂8年,眼球运动障碍7年半,眼球固定6年,无晨轻暮重现象,无复试。
未正规治疗,近5年出现四肢无力,易疲劳。
眼底检查显示视网膜色泽青灰,呈污秽样外观,可见虫蚀样色素紊乱,黄斑区网膜呈金箔样反光。
肌电图显示:肌源性损害,重复电刺激无衰减。
心电图:完全右束支和左前分支传导阻滞。
基因检测显示mtDNA 4977bp的缺失。
上述检测结果提示该患者可能为A、Leber遗传性视神经病B、闭角性青光眼C、Kjer病D、Kearns-Sayre综合征E、Leigh综合征正确答案:D5、新生肽链导入糙面内质网需要一系列的蛋白质分子帮助完成,下列物质中与这个过程无关的是A、SRP受体B、GTP结合蛋白C、蛋白二硫键异构酶D、信号肽E、SRP正确答案:C6、胚胎发育过程中,中胚层在哪一个时期出现A、卵裂期B、原肠胚期C、器官形成期D、囊胚期E、神经轴胚期正确答案:B7、下列不属于残余小体的结构是A、多泡体B、髓样结构C、含铁小体D、类核体E、脂褐素正确答案:D8、在附着核糖体上合成的蛋白质不包括A、血红蛋白B、膜整合蛋白C、抗体蛋白D、分泌蛋白E、溶酶体蛋白正确答案:A9、可用于观察完整组织或细胞三维立体结构的显微镜技术是A、透射电子显微镜B、荧光显微镜C、激光共聚焦显微镜D、普通光学显微镜E、扫描电子显微镜正确答案:C10、根据利用爪蟾卵母细胞核重建体系的研究发现,关于重建的没有核纤层的细胞核,下列哪项叙述不正确A、抑制核孔复合体围绕染色体的组装B、能够进行DNA复制C、能够把DNA复制过程所需的蛋白质运输到细胞核内D、抑制间期核的组装E、不能够形成新的核膜正确答案:B11、下列关于rRNA合成的叙述不正确的是A、由RNA聚合酶Ⅰ负责转录B、转录产物的3'端形成RNP颗粒C、位于核仁组织区的rDNA是合成RNA的模板D、形成明显的“ChristmasE、转录产物的5'端形成RNP颗粒正确答案:B12、关于组蛋白的错误叙述是A、是真核细胞特有的结构B、富含带负电荷的氨基酸C、在细胞周期的S期合成D、不同种属的组蛋白具有极大的相似性E、在细胞周期的S期与DNA组装成核小体正确答案:B13、下列哪一种结构主要由微丝构成A、联会复合体B、核纤层C、纺锤体D、收缩环E、中心体正确答案:D14、有关发育过程中三个胚层作用说法正确的是A、三个胚层各自独立分化互不影响B、三个胚层的分化完成于囊胚期C、中胚层首先独立分化D、在卵裂期就已经决定了三个胚层的发育前途E、胚胎诱导发生在胚层之间而非胚层内部正确答案:C15、假设你乘坐一艘微型的能进入细胞的潜水艇来观察细胞内的囊泡运输过程,那么会发现下列哪种运输路径不存在囊泡运输A、内质网到高尔基体B、细胞外到细胞内C、细胞核内到细胞核外D、细胞内到细胞外E、高尔基体到细胞膜正确答案:C16、在用琼脂糖凝胶电泳检测细胞内的DNA时,发现DNA呈梯状条带,则此细胞可能发生A、细胞分化B、细胞癌变C、细胞坏死D、细胞衰老E、细胞凋亡正确答案:E17、低分化细胞和正常细胞相比,细胞周期的哪一时期比较短A、GB、M期C、GD、GE、S期正确答案:A18、分泌性蛋白质合成与运输需要多种细胞器的参与协作才能完成,以下哪组细胞器正确A、细胞核、微管、内质网B、线粒体、内质网、高尔基复合体C、核糖体、内质网、高尔基复合体D、细胞核、内质网、溶酶体E、线粒体、内质网、溶酶体正确答案:C19、下面哪项不属于胞吞作用A、基团转移B、受体介导的胞吞作用C、吞噬作用D、吞饮作用E、通过网格蛋白有被小泡介导的胞饮作用正确答案:A20、以下染色体,常见次缢痕结构的是A、2号染色体B、Y染色体C、21号染色体D、1号染色体正确答案:D21、平衡沉降离心根据组分的何种特性将其分离A、密度B、构象C、等电点D、电荷E、分子量正确答案:A22、在一个细胞中发现下述复杂的大分子:DNA与RNA聚合酶相连、DNA 与延伸的RNA链相连、DNA与核糖体相连、DNA与两个tRNA相连、DNA与延伸的氨基酸链相连。
激光捕捉显微切割技术操作流程
激光捕捉显微切割技术操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!激光捕捉显微切割技术(Laser Capture Microdissection,LCM)是一种在显微镜下从组织切片中精确地分离特定细胞群或单个细胞的技术。
激光捕获微切割技术在肿瘤基础研究中的应用进展
关键词 : 肿瘤 ; 光捕获微 切割 ; 激 基础研究
中 图分 类 号 : 7 0 5 R 3 7 文 献 标 识 码 : B
膜与组 织 切片的接 触面部控 制在 宽约 4 的窄带 中 . 0… 从而减 少 由于吸收的光 能在 膜 f ~的扩 散 而造 成 周边 “ 质 ”出胞 的黏 杂 妻 附, 提高 r准确性 。 l 、 具有简便 高效的特点 , M ( 儿乎所有操 作 0、 0 5 0、 0 g
文章编 号 :0 15 3 (0 2 0 —4 50 10 —9 0 2 0 )40 4 —2
显微 切割 ( co i et n 是 2 世 纪 9 mi ds ci ) ( r s o ) O年 代 出现 的 新 技
l L M 的 原 理 和 方 法 C
损 伤的光 化学 反应 。
1 3 EVA 膜 .
E VA 膜厚约 10 0 n , 吸收近红 外激光 产生 的大部 0 ~2 0H l可 分能量 一 可在 瞬间将激光束 所照射 区域 的温度 提高 到9 并 8, 0
保持数 毫秒 , 不仅 使局部 的薄膜融化 并快速再 塑型 , 而且瞬间温
1 1 细 胞 显 微 切 割 的 过 程 J .
L CM 的切片范 围很 广 , 以是新鲜 冷冻组织 也可 以是 石蜡 可 包埋组织 。切片准备情 况 直接 影响 微切 割 的效果 , 如脱 水 不完 全就会 造成组织 与载玻片 的黏 附 力增加从 而 不能获得细胞 组 织 的保 存及切 片的 固定 、 染色 主要 有 以下 步骤 : 手术 及活检标
度变化 不会引起膜 下方细胞 中 D NA 、 RNA、 白质的变 化 蛋
l 4 组 织 切 片 的 准 备
激光切割技术国内进展及应用案例论文
激光切割技术国内进展及应用案例学院:机械工程学院系:机械制造班级:11机制2班制作人:刘卓聿、雷丰源指导老师:龚老师【摘要】随着我国国民经济的快速发展,我国正从一个制造大国向制造强国迈进。
激光加工制造技术是一项集光、机、电于一体的先进制造技术,在许多行业中已得到了越来越普遍的应用。
而在工业生产中,激光切割占激光加工的比例大约在70﹪以上,是激光加工行业中最重要的一项应用技术。
本文深入浅出地介绍了目前常用的激光切割技术,而且内容丰富、实用性强。
【关键词】激光加工、激光切割技术目录一、激光切割的基本技术二、激光切割技术的优点三、激光切割技术的发展四、国内激光技术现况五、激光切割技术的分类5.1汽化切割5.2熔化切割5.3氧化融化切割5.4控制断裂切割六、激光切割技术的应用七、参考文献一、激光切割的基本技术激光:(LASER-Light Amplification of Stimulate Emission Radiation)是利用原子或分子受激辐射的原理,使工作物质受激而产生的一种单色性高,方向性强,亮度高的光束。
激光器:激活介质、激活装置、光学谐振腔激光器按工作介质来分类分为固体激光器、液体激光器、气体激光器、半导体激光器,此为,还有化学激光器和自由电子激光器等。
原理:利用高功率密度的激光束来穿过材料表面,在极短的时间内将材料加热到几千甚至上万度,使材料融化或者气化,并用高压气体将融化或者汽化的物质从切缝中吹走,以达到切割材料的目的。
经过30多年的发展,现已开发的激光器超过200多种,种类繁多,特点各异,用途也各不相同。
虽然激光器的种类繁多,但目前适用于激光切割的工业化和YAG激光器。
激光器主要是CO2激光加工技术是利用激光束与物质相互作用的特性对材料(包括金属与非金属)进行切割、焊接、表面处理、打孔、微加工等的一门技术。
二、激光切割技术的优点激光加工技术与传统加工技术相比具有很多优点,所以得到如此广泛的应用。
【国家自然科学基金】_激光捕获显微切割技术_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
2011年 科研热词 推荐指数 激光捕获显微切割 2 葡萄胎(hm) 1 肺鳞癌 1 等位基因 1 短串联重复序列(str) 1 激光解吸电离飞行时间质谱技术 1 激光捕获显微切割技术(lcm) 1 激光捕获显微切割技术 1 差异蛋白质 1 定量蛋白质组学 1 基因芯片 1 喉肿瘤 1 卵巢肿瘤 1 免疫磁珠技术 1 itraq 1
2012年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32
科研热词 血管生成拟态 显微切割 高等植物 遗传学 蛋白质组学 蛋白质组 葡萄胎 膜联蛋白a2 胚胎和胎儿发育 胃肿瘤 肿瘤干细胞 肾小球肾炎 肝细胞肝癌 肝细胞癌 肝癌干细胞 结直肠肿瘤 细胞分离 短串联重复序列 猪,雏型 激光捕获显微切割技术 激光捕获显微切割 流式细胞仪 模型,动物 密度梯度离心 大鼠 受体,fc 原生质体分离 内皮相关分子 乙酰化标记 cd34 cd133 barx1
2008年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
科研热词 推荐指数 激光捕获显微切割 3 蛋白质组 2 骨桥蛋白 1 质谱分析法 1 表浅性膀胱移行细胞癌 1 蛋白质 1 肿瘤异质性 1 肺肿瘤 1 癌,鳞状细胞 1 癌,肝细胞 1 生物通路 1 琼脂糖凝胶电泳 1 牙齿发育 1 激光捕获显微切割技术 1 比较基因组杂交芯片 1 显微切割 1 数据库 1 寡核苷酸序列分析 1 喉肿瘤 1 免疫组织化学 1 光谱法,质量,基质辅助激光解吸电离 1 rna质控 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9
激光微纳加工技术创新与发展动态
激光微纳加工技术创新与发展动态激光微纳加工技术是一种利用激光对微米和纳米尺度的物质进行加工和制造的科技手段。
近年来,随着纳米科技和微纳制造的快速发展,激光微纳加工技术在材料科学、生物医学、光电子学等领域展现出巨大的潜力。
本文将从技术创新和发展动态两个方面,分析激光微纳加工技术的最新成果与前景。
一、技术创新1. 激光直写技术激光直写技术是一种通过激光束直接进行材料加工的方法。
在过去,激光直写技术主要用于光纤与集成光子芯片的制造。
然而,最近的研究表明,激光直写技术也可以用于制造微纳结构和生物医学器械。
通过控制激光束的功率和聚焦点,激光直写技术可以实现对材料的高精度加工,如微米级的结构和孔洞。
此外,激光直写技术还可以用于制造微纳流体器件和生物芯片,为生物医学研究和临床诊断提供了新的手段。
2. 超快激光加工技术超快激光加工技术是一种利用超快激光脉冲对材料进行高精度加工的方法。
与传统的激光加工方法相比,超快激光加工技术具有更高的加工精度和效率。
通过调节激光脉冲的幅度和频率,可以实现对材料的微纳结构加工。
超快激光加工技术在光电子器件、光学元件和光电子材料等领域有着重要的应用。
例如,通过超快激光加工技术可以制造出高效的光伏材料和光学元件,有助于提高光电转换效率和光学传输性能。
二、发展动态1. 激光微纳加工技术在材料科学中的应用激光微纳加工技术在材料科学中的应用越来越广泛。
通过激光微纳加工技术可以制造出具有特殊结构和性能的材料,如纳米线、纳米点阵和纳米图案等。
这些材料具有很高的比表面积和各向异性特性,可以在催化、传感和能源存储等领域发挥重要作用。
此外,激光微纳加工技术还可以用于制造高强度、高硬度和高导热性能的材料,如金属合金和陶瓷材料,为航空航天、汽车工业和能源领域的发展提供了新的材料支持。
2. 激光微纳加工技术在生物医学中的应用激光微纳加工技术在生物医学中的应用也备受关注。
通过激光微纳加工技术可以制造出微米级别的生物芯片和医学器械,如微流控芯片和植入式生物传感器。
显微分析技术在材料研究中的应用与发展趋势
显微分析技术在材料研究中的应用与发展趋势摘要:显微分析技术在材料研究中起着至关重要的作用。
它利用不同的原理和方法对材料进行深入观察和分析,以揭示其组织结构、成分特征和功能性能。
本文概述了光学显微镜、电子显微镜和扫描探针显微镜等常见的显微分析技术。
光学显微镜通过可见光的折射、散射和吸收现象实现样品的显微观察和形貌表征。
电子显微镜则利用高速电子束与样品相互作用,获得更高分辨率和详细的图像信息。
扫描探针显微镜可以利用扫描探针对样品表面进行拓扑和化学成分的显微观察。
这些技术在材料研究中具有不同的优势和局限性,并满足不同研究需求。
光学显微镜适用于表面形态和颗粒分析,电子显微镜适用于高分辨率和深度分析,扫描探针显微镜则提供高精度的化学成分信息。
显微分析技术在材料研究中有着广泛的应用,有助于揭示材料的微观性质和特征。
随着先进显微镜技术的发展和改进,未来的显微分析技术将更加强大和多样化,为材料科学的深入研究提供更广阔的空间。
基于此,本篇文章对显微分析技术在材料研究中的应用与发展趋势进行研究,以供参考。
关键词:显微分析技术;材料应用分析;发展趋势分析引言材料研究是现代科学与工程领域的重要组成部分,对于开发新材料、改进现有材料以及解决实际问题具有重要意义。
而显微分析技术作为材料研究中不可或缺的分析工具,具有深入了解材料微观结构和性能的能力。
它可以对材料进行高分辨率观察和深度分析,并揭示其组织结构、成分特征和功能性能。
随着科学技术的不断进步,显微分析技术也得到了极大的发展。
同时,对于显微分析技术的发展趋势的探讨,也有助于我们认识到改进和创新的机会,提高材料研究的效率和质量。
因此,本文旨在为材料科学领域的学者和研究人员提供有关显微分析技术应用与发展的综合指南和参考,促进材料研究的进一步发展与创新等。
1显微分析技术概述显微分析技术是一种广泛应用于材料研究领域的重要工具。
它根据不同的原理和方法,对材料进行深入观察和分析,以揭示其组织结构、成分以及功能性能。
显微切割技术章
第七章显微切割技术人体组织是由相互作用的不同的细胞群体组成的,这些细胞群体彼此组成复杂的三维结构,每种细胞均有自己的独特的mRNA与蛋白质表达(表现型)。
因此在复杂的组织中取得同质性的样本是相当困难的。
尤其在肿瘤的病理学研究中,样本的同质性是经常遇到的问题。
例如,霍奇金病的肿瘤细胞——Reed-Sternberg细胞和Hodgkin细胞(R-S/H细胞),通常单个分散在大量的反应性细胞(如淋巴细胞、组织细胞、嗜酸性粒细胞和浆细胞)组成的背景之中,给R-S/H细胞起源的研究带来很大的困难。
随着分子病理学研究的深入,需要分离的样本越来越小,从大块的组织精确到单个的细胞,甚至细胞器或者染色体。
常规的研究方法对此无能为力,而显微切割技术的出现解决了上述难题。
在显微切割技术(microdissection technique)发展之前,进行原位的细胞表型的研究方法是免疫组化和原位杂交。
但是免疫组化和原位杂交方法一般只能局限于一种或是几种基因表达的分析,而且难以进行DNA、mRNA和蛋白质的定量分析(如突变、缺失)。
显微切割技术能够对于组织病理学上确定的细胞群(甚至精确到一个特定的细胞,或特定的细胞器或特定的染色体)进行分子病理学研究,达到高度敏感性和高度特异性的统一。
尤其是在需研究的细胞只占样本中细胞的少数时,以及需研究的细胞呈散在分布时,显微切割的重要性尤为明显。
加之现在的免疫组织化学和原位杂交等技术可以在切片上特异性定位所需的细胞,因此显微切割技术在最近几年中得到了迅速地发展。
由于和高通量(high-throughput)基因分析(基因芯片)以及蛋白分析技术结合,显微切割技术显示出良好的发展前景(图7-1)。
图7-1一、显微切割技术发展的回顾组织显微切割的概念尤为简单,即直接在光学显微镜下从异质性的组织样本中选取某一特定的细胞群。
实际上,要达到这一目的在技术上经历了以下几个阶段:早期是从冰冻组织切片上在肉眼下用解剖刀刮去不需要的部分,剩下感兴趣的组织。
激光捕获显微切割技术及其在肿瘤基础研究中的应用进展
激光捕获显微切割技术( C 是 2 L M) O世纪 9 o年代末期 由
美 国 国立 卫 生 研 究 院 开 发 , 由 A c rs 司 商 品 化 发 展 起 并 rt u 公 u
基 本 上 由软 件 控 制 , 作 者 无 需 手 动切 割 。 整个 过 程 在 显 微 操
镜下进行 , 可以直观地选取 目的细胞 , 具有 “ 所见 即所得 ” 的
显微镜与 电脑相连接 以便对 激光进 行控制及 获得相 应 的图 像资料。 将 专用组织切片放置在倒置显微镜 的载物 台上 , 在一个
与 标 准 E pn of 配 套 的 扁 平 盖 子 上 贴 附 一 层 直 径 约 6 p edr 管
于 L M 仪器集普通光学 显微 镜和 荧光 显微镜 于一体 , C 故除 了常规染料外也可把荧光染料 ( A IFT hdmi ) 如 P 、IC、o a n等 用 于样品的分离 , 样不仅可以依据组织细胞的形态而且 可以 这
3 L M 技 术 在 肿 瘤 基 础 研 究 中 的 应 用 C
细胞上 。E A膜受 照射后 瞬间温 度升 高使薄膜溶 解并 与其 V
下方的细胞 紧密粘连 , 其黏附力远大于组织与载玻 片的黏附 力, 与薄膜相连 的细胞 可以被完整地从组织切片 中取 出而不
会损伤。这一过 程 可以在 盖 子表 面重 复进行 , ~ 张 E A 用 V 膜可以在切片的不 同部位快 速选取 大量被 选细胞 。然后将 黏 附有 细胞 的 盖 子 盖 在 装 有 微 量 缓 冲 液 的 E p nof 上 , p edr 管 通 过洗 脱 使 细胞 与 薄 膜 分 离 而 获 得 完 整 的 细 胞 。 利 用 此 管
特 点 。而 且 速 度 快 , 割 过 程 可 以 在 几 秒 内完 成 , 练 的 操 切 熟
蛋白质组学技术的研究
1439科研进展蛋白质组学技术的研究欧阳学剑湖北中医药高等专科学校(434020)摘要:本文讨论了蛋白组学对人体疾病研究的意义。
采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳、激光捕获显微切割、质谱技术等研究方法。
结合数据库和分析软件对实验结果的分析,探索在蛋白质水平上的作用模式、功能机理、调节、调控,以及蛋白质群组内相互作用。
为各种全身疾病的早期诊断,进展监测,新靶点的确定提供了重要依据。
关键词:蛋白质组学;技术;研究St udy of pr ot eom e t echni cal A ut hor O uyang X ue-j i an,chi nes e m edi ci ne m oder n di st ance educat i on of chi na.J our nal i s t N o Z2208002A ddres s Ji ngzhou ar ea peopl e r oad N o.10of hubei,434020,C hi na.Em ai l i bggg@.A bs t r act:St udy s ens e of t hi s t ext di s cus s ed pr ot eom e t o t he hum an body di seas e.R es ear ch m et hod of adopt t he t w o-di m ens i onalpol yacr yl am i de gel el ect r o-phor es i s;t he l aser capt ur es m i cr odi s s ect i on;t he m as s spect r a t echni cal.R esul t anal ys es of com bi nedat a l i br ary and s of t w ar e t o experi m ent,i nt er pl ay m ode of expl or e prot ei n m ol ecul ar l evel up;f unct i on m echani s m;r egul at e;r egul at or y and r eci proci t y of pr ot ei n crow d s et.Earl y s t age di agnos e of for vari ous di s eas e and m oni t or w i t h det er m i ne provi des ci ent i f i c bas i s for s t h of new t ar get.K ey w or ds:pr ot eom e,t echni cal,st udy蛋白质组学(prot eom e)系基因所能表达的全部蛋白质,它能更为清楚的表达细胞或机体在特定时间和空间上表达的所有蛋白质。
激光捕获显微切割技术在食管鳞癌蛋白质组学研究中的应用
mes nlp  ̄ ni a o o
l ie gle c h r i ( - E tcnq ea d cmptras t m g a s ee ue o aa z e a d e l t oe s 2 D ) hiu , o ue-sie ia e al i w r sd t nl e t m e mp s e n sd n ys y h
ige oycy mie glReut: ̄e atr m coi etn o tn d p r ojcv e s n ye e iae o l ma so p l rl d e . sl I sr cpu ir s co ba e ue bet e cl . a zd t m g p y f a a s s. e ds i i i lA l h f o —
.
 ̄u I o s c l c r i o el n d n r l s p a e p t ei el e e o ti e y LC , rt i r e a ae b wo d — an u el acn ma c i a o ma e o h s g a e i l c l w r ba n d b M p o en we e s p r t y T i l h a l s
【 bt c] bet eT xld h iub o i d cl t e,c u e h ma sp aelsumos cl crio a cl n A s atOjcv :o ec e te ds r fmx e y saq i u n eoh ga q a u e acnm es ad r i u t e l p r l l
维普资讯
重 庆 医科 大 学 学 报 20/ 第 3 0 "年 2卷 第 2期 (o ma f o g igMe i l nv ri 0 " V 1 2No2 J u l n qn dc i st 2 0 . o. .l o Ch aU e y / 3
激光显微切割在肿瘤研究中的应用
32 蛋 白质组学研究 _ LD M 技术与与二维凝胶电泳和生 物质谱等技术结合 , 组成 了蛋 白质 组学技术 。该技术对人类基 因组在不同病理条件下所表达的蛋 白质组进 行研究 ,建立蛋白 “ 指纹 ”库 ,对疾病的早期诊断 、早期治疗具有深远 意义 。L w i a r 等采用L D e M 对结肠癌标本进行切割 ,分离 出结肠癌细胞和 正常 的结肠上皮细胞 , 通过二维凝胶电泳 和质谱技术确定了细胞角蛋 白 8(y kr i 8 等3 ct e t ) 种在结肠癌 中特异改变的蛋 白质 ,可以进一步来确 o an 定新的分子标志物或蛋 白质靶 ,对癌症进行早期诊断。
o n l el fo c mp e i u s B o e h i u s 1 9 f i gec l r m o lxt s e . it c nq e , 9 9; 2 : 3 8 3 5 s s s 6 2 —3 .
【] it A, u k ME Wes , t 1 Ioain o ellrm tr l n e 5 Lot L B c , i R e . s l o f l a ae i d r a s a t c u au m co cpcvs a z t n It I 6 A 1 - 2A 1 一 0 A 1 一 — 0J irso i i l ai . n C :[] O N 1 0 , O N l 0 , O N 3 0 [ . ui o 1
mo e u a a y i o t s e S i n e 1 9 ,7 :4 1 48 . l c lra lss f i u . ce c , 9 72 8 1 8 —1 3 n s
[] ae— ua A C ls i R P hd , t . ae pue c d sc—i 4S rz Q i C , o t nS , o i T e a L sr a tr mi o i e t n u n de a 1 c r s o
激光捕获显微切割技术及其在肿瘤研究中的应用
激光捕获显微切割技术及其在肿瘤研究中的应用激光捕获显微切割技术(Laser Capture Microdissection,LCM)是一种通过激光束精确切割组织样本的技术,可以在细胞水平上收集纯净的细胞或组织。
它主要应用于肿瘤研究中,可以帮助研究人员获取纯净的肿瘤细胞,分析和研究这些细胞的特征和功能。
激光捕获显微切割技术的原理是利用激光微束直接切割目标细胞,然后将切割下的细胞收集到特殊材料上,通过滤纸迅速吸附,最后可以用于进行进一步的分析,如基因组测序、蛋白质组学分析等。
这种技术可以避免传统切片技术中细胞混合的问题,保证提取到纯净的细胞或组织。
在肿瘤研究中,激光捕获显微切割技术具有以下几个重要的应用:1.分离肿瘤细胞:利用激光捕获显微切割技术可以选择性地分离肿瘤细胞,从而研究和分析这些细胞的生物学特征。
相比传统方法,LCM可以更准确地分离肿瘤细胞,避免混杂其他细胞的污染。
2.基因组学研究:通过激光捕获显微切割技术可以获取纯净的肿瘤细胞,进一步进行基因组测序分析。
这有助于了解肿瘤的发生机制和基因表达变化,寻找潜在的致癌基因或抑癌基因。
3.蛋白质组学研究:激光捕获显微切割技术可以用于收集肿瘤细胞,然后进行蛋白质分析,如蛋白质组学研究、质谱分析等。
这有助于寻找和鉴定肿瘤细胞中的蛋白质标志物,为肿瘤诊断和治疗提供新的靶点。
4.生物标记物研究:通过激光捕获显微切割技术可以选择性地获取肿瘤组织中的特定细胞或区域,研究和鉴定细胞内的生物标记物。
这有助于开发针对特定细胞亚群的个体化治疗策略。
尽管激光捕获显微切割技术在肿瘤研究中有许多优势,但它也存在一些限制。
首先,该技术需要专业的仪器设备和经验丰富的操作人员,成本较高。
其次,激光捕获显微切割技术在样本处理过程中可能导致细胞或组织的染色质、RNA和蛋白质的损失。
因此,在应用该技术时需要在实验设计和操作中严格控制条件。
总之,激光捕获显微切割技术是一种非常有潜力的技术,在肿瘤研究中具有重要应用价值。
显微切割技术
能够确保后续试验成果旳可靠性!
例如
霍奇金淋巴瘤中瘤组织成份多样, 特征性旳瘤细胞(R—S细胞及其变异型) 占细胞成份旳2%左右,且呈散在性分布, 假如常规地用组织匀浆旳方式从组织中 提取蛋白质或核酸,则既包括了来自瘤 细胞旳成份,又包括了来自淋巴细胞、 浆细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、 组织细胞等多种非瘤细胞旳成份,这么 所提旳蛋白质或核酸来自何种细胞并不 清楚,而假如用显微切割技术则能够选 择我们需要旳细胞,以使研究对象旳背 景明确;
1. 2. 怎样对已切割旳细胞进行分析
2.
显微切割后取得旳材料能够用于提取
蛋白质、DNA和RNA等用于Western Blot,
Southern Blot,Northern Blot,PCR等蛋白
质和核酸旳有关分析。
4.
3. 活细胞显微切割后还能够继续培养
(五)显微切割旳影响原因 1. 一切与显微切割结合旳技术中旳影响原因均为显微切
Building 10, 9000 Rockville Pike, Bethesda, MD 20892, USA. Comment on: Abstract
2024年基因科技领域的突破之年
通过改造或引入新的基因来治疗疾病的方法,已经在多种 疾病治疗中展现出巨大潜力,如罕见病、癌症等。
发展趋势及未来展望
01
个体化医疗的普及
随着基因测序成本的降低和数据分析技术的进步,个体化医疗将逐渐普
及,实现根据每个人的基因组信息制定个性化的治疗方案。
02 03
合成生物学的崛起
合成生物学将工程原理应用于生物系统,设计和构建新的生物部件、设 备和系统,以及对生物系统进行有目标的干预,将在未来引领生物技术 的创新。
当前基因科技领域的主要成果
基因编辑技术的突破
CRISPR-Cas9等基因编辑技术的广泛应用,使得科研人员 能够精确、高效地进行基因编辑,为治疗遗传性疾病、改 良农作物等提供了有力工具。
基因测序技术的飞速发展
随着测序技术的不断进步,基因测序的速度、准确性和可 负担性都得到了显著提高,推动了精准医疗和个性化治疗 的发展。
免疫学研究
单细胞测序技术可用于研究免疫细胞的多样性和功能,揭示免疫应答的机制和调控网络。这对于疫苗设计和免疫治疗 具有重要意义。
发育生物学研究
单细胞测序技术可用于研究胚胎发育和器官形成的过程,揭示细胞命运决定的分子机制和调控网络。
单细胞测序技术对未来医学的影响
个性化医疗
单细胞测序技术可揭示个体差异 和疾病特异的基因表达和变异特 征,为个性化医疗提供精准的诊
国际合作与法规协调
随着基因科技的全球化发展,国际合作和法规协调将变得越来越重要,以确保技术的安全 、有效和可持续发展。
02
基因编辑技术的创新 与突破
CRISPR-Cas9系统及其改进型技术
CRISPR-Cas9系统的基本原理
CRISPR-Cas9是一种基于细菌免疫系统的基因编辑技术,通过靶向特定DNA序列实现 基因敲除、插入或修复。
分子生物学研究新进展
03
具有共价闭合环状结构的RNA分子,可作为miRNA海绵或参与
基因表达调控。
非编码RNA在肿瘤发生发展中的作用
促癌作用
某些非编码RNA可通过抑制抑癌 基因或激活原癌基因的表达,促 进肿瘤细胞的增殖、肿瘤 发生发展的作用,如通过抑制肿瘤 细胞增殖、诱导细胞凋亡或抑制血 管生成等方式。
非编码RNA功能与调控机制揭
05
示
非编码RNA分类及功能概述
长链非编码RNA(lncRNA)
01
长度超过200个核苷酸,参与转录调控、表观遗传调控和细胞分
化等过程。
小非编码RNA
02
包括microRNA、siRNA和piRNA等,通过碱基互补配对与靶
mRNA结合,抑制其翻译或降解。
环状RNA(circRNA)
国内外研究现状及趋势
国内研究现状
近年来,我国在分子生物学研究领域取得了长足进步,特别是在基因组编辑、合成生物学 、干细胞研究等方面取得了重要突破。同时,我国也在积极推动分子生物学研究成果的转 化和应用,为经济社会发展提供了有力支撑。
国外研究现状
国际分子生物学研究在近年来也取得了显著进展,特别是在基因治疗、细胞疗法、精准医 学等领域。此外,随着人工智能等技术的不断发展,国际分子生物学研究也在向智能化、 自动化方向发展。
应用
该技术已广泛应用于基因功能研究、基因治疗、农作物遗传改良等领域,如利用 CRISPR-Cas9技术治疗遗传性疾病、提高农作物产量和抗逆性等。
其他基因编辑技术简介
ZFNs
锌指核酸酶(ZFNs)是一种人工合 成的蛋白,能够识别并切割特定的 DNA序列,从而实现基因编辑。
TALENs
转录激活因子样效应物核酸酶( TALENs)是一种基于转录激活因子样 效应物(TALEs)的基因编辑技术,具 有高度的靶向性和灵活性。
显微技术在生物医学领域中的应用最新进展
显微技术在生物医学领域中的应用最新进展近年来,随着科学技术的不断进步与发展,显微技术成为了生物医学领域中极为重要的一种研究工具。
显微技术的应用已经涵盖了生物医学的各个方面,其中包括细胞生物学、分子生物学、免疫学、神经科学等等。
本文将介绍显微技术在生物医学领域中的最新进展。
一、显微技术的发展历程显微技术的发展历程从17世纪开始,最初的显微镜采用光学原理对微小结构进行观察,但是由于受到光学分辨率的限制,很多微小结构无法被观察到。
随着电子技术的发展,电子显微镜的出现有效解决了这个问题,可以获得更高分辨率的图像。
此外,近年来还涌现出了许多新型显微技术,包括去模糊显微镜、多光子显微镜、共焦激光显微镜等等。
这些新技术有助于进一步拓展显微技术在生物医学领域的应用范围。
二、显微技术在细胞生物学中的应用显微技术在细胞生物学中的应用十分广泛,除了传统的荧光显微技术之外,新兴的技术也不断涌现。
举例来说,近年来出现的STED显微镜可以提高荧光显微技术的分辨率,帮助研究人员更好地观察细胞内的各种结构和分子之间的相互作用。
仿生学研究中,荧光显微作为一种非侵入式的观察手段,促进了细胞和材料的仿生结合,使得这一领域得到了快速的发展。
三、显微技术在分子生物学中的应用显微技术在分子生物学中也有重要的应用。
单分子显微镜能够同时跟踪单个分子,观察其在生命过程中的行为,从而获得关于生物分子的概念性和定量性信息。
近年来,另一种新技术,即超分辨率显微镜逐渐成为研究人员的热点。
超分辨率显微镜具有更高的分辨率,能够观察更小的分子和更加复杂的生物系统,具有广阔的应用前景。
四、显微技术在免疫学中的应用在免疫学领域,流式细胞术和显微技术能够取得非常重要的结果。
随着时间的推移,显微技术对免疫学的影响日益增加。
例如,在研究T细胞和B细胞的亚型和组织学上,显微技术已经取得了很大的成功。
半自动的细胞显微镜、荧光激光显微镜和多光子激光显微镜都能够进一步研究细胞结构和组织学特征。
激光多光子显微镜技术的研究与应用
激光多光子显微镜技术的研究与应用激光多光子显微镜技术是一种高分辨率的显微镜技术,能够实现对生物体内组织和细胞的三维成像,并且具有非侵入性和高灵敏度等特点。
一、技术原理激光多光子显微镜技术是利用超短脉冲激光在生物材料中的非线性光学效应实现的。
当光束穿过生物组织时,其非线性光学效应会导致组织中的光子被非常高效地吸收,导致局部光子密度的增加。
在这种情况下,光子之间的非线性相互作用导致光子的再吸收,引起光子浓度的非线性扩增,最终导致了光子的串扰和二次谐波产生。
通过侦测这种二次谐波信号,我们可以获取生物组织中的高分辨率图像。
二、技术特点1. 高分辨率激光多光子显微镜技术可以实现亚细胞级别的图像分辨率。
这与其原理有关,其原理涉及上文提到的光子的非线性相互作用和二次谐波的产生,这与传统光学显微镜的成像原理完全不同。
2. 非侵入性传统的成像技术对样本的处理通常需要使用染料或标记物,这种处理过程会对样本的结构和性质产生影响,甚至损坏样本。
而激光多光子显微镜技术是一种非侵入性的成像技术,不需要处理样本,可以直接在生物样品中进行成像。
3. 高灵敏度由于生物样品本身的荧光很弱,因此传统的显微镜技术无法获得高质量的图像。
激光多光子显微镜技术可以利用非线性光学效应使荧光信号变得更强,并且在较低的光强下使用超短脉冲激光作为刺激源,从而获得高信噪比的图像。
三、研究进展1. 生物学应用激光多光子显微镜技术已经被广泛地应用于生物学领域。
例如,在神经科学中,它可以用于对神经元的三维成像,以及对神经元体成像。
在胚胎学中,激光多光子显微镜技术也可以用于对胚胎发育的三维成像。
在肿瘤学中,它可以用于对癌细胞的动态成像,以及对癌症的早期诊断。
2. 材料科学应用除生物学之外,激光多光子显微镜技术在材料科学领域也有广泛的应用。
它可以用于对纳米材料的表面形态、化学组成和物理性质的研究。
此外,激光多光子显微镜技术还可以在金属、半导体和生物陶瓷材料等领域进行材料的研究和标记。
肿瘤组织中免疫细胞分离方法
肿瘤组织中免疫细胞分离方法
1.机械研磨与酶消化法:
-将新鲜或冷冻的肿瘤组织切碎并使用酶如胶原酶、胰蛋白酶和DNA酶进行消化,以破坏细胞间的连接和降解细胞外基质,释放其中的免疫细胞。
2.流式细胞术结合酶消化:
-首先通过酶消化处理将组织内的细胞分散成单细胞悬液,随后加入抗体标记肿瘤细胞和各类免疫细胞表面标志物,通过流式细胞分选机进行高精度分选,获取纯化的免疫细胞亚群。
3.免疫磁珠分选法:
-使用特异性针对免疫细胞表面抗原的抗体偶联到磁珠上,当组织细胞消化后的悬液与磁珠混合后,带有相应抗原的免疫细胞会被磁珠捕获,通过磁场作用实现免疫细胞与其它细胞的分离。
4.激光捕获显微切割技术:
-对于需要精确分析肿瘤微环境中特定区域免疫细胞的研究,可以采用LCM技术,在显微镜下直接选取包含免疫细胞的肿瘤区域,确保获取的细胞来源于特定空间位置。
5.密度梯度离心法:
-通过将组织消化液与适当的密度梯度介质(混合,离心后不同密度的细胞会分布在不同的层次,从而实现免疫细胞与其他细胞类型的分离。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
峰, 等 & 激光捕获显微切割技术应用研究新进展 经 染色 的 用 于 存 档 的 切 片 也可 被 成 功 进行显微切割。 尽管Байду номын сангаас234 应用广泛, 但对于常规染 色、固定且不加盖玻片的组织切片,其 视觉分辨率受到很大限制。而对于那些 本身缺乏一定结构特点的复杂组织(如 淋巴组织, 广泛浸润的腺癌等 ) , 要准确 分 离出 某 一 类 细 胞 几 乎 是 不可 能 的 。 IB:D 等
破性的进展,现已广泛应用于肿瘤研究, 包括前列腺癌 -0J #% / 、 肾癌 -## / 、肺癌 - #. / 、甲 状腺癌
-#>J #H/
!
"#$ 的优缺点
234 最 显 著 的 优 点 在 于 其 迅 速 、
、食管癌 、胃癌 、 肝癌
-#’/ -#"/
- #K /
、
胆管癌 - #! / 、 结肠癌 - #0J .% / 、 乳腺癌 - .# / 、 胶质 瘤 -../ 、 恶性胸膜间皮瘤 -.> / 、 淋巴瘤 -.H / 、 卵巢 癌 -.’ / 等。此外, 234 还成功应用于其它 一些疾病的研究中, 如 378L: 病 获得性免疫缺陷综合征 丙型肝炎
- ’J " /
!"#
直接进行标准的聚合酶链反应 (;8(O$B79AB 6L95: 7B96=58:, , 从而在 G3P) MN+ 水平上进行基因改变的分析。 前列腺癌是严重威胁男性健康的 一种恶性疾病,其发病率及病死率均较 高,但有关前列腺癌发生的分子机制尚 未明确。3LB: 等
-0 /
成功将 234 技术应
通过采用特殊染色, 尤其是
免疫组化方法,使目标细胞或想要去除 的细胞变得更加醒目,从而解决了上述 难题。 应用 234,偶尔会出现无法将选择 的细胞从切片上移走的情况,出现这种 结果有两种原因: ? # @ 细胞与热塑膜之 间的粘合力不足,通常是由于组织未完 全脱水或激光的能量设置过低造成的; ? . @ 组织切片与载玻片间的粘合力过强, 通常发生在显微切割干燥时间过长的冰 (包括免疫组 冻切片。针对不同样本组织 化染色的组织切片) ,一些研究小组分别 详尽报道了采用适合的处理方法, 以达到 最佳的显微切割条件 - ’J KJ ! / 。
用于前列腺癌的研究中,分别捕获了前 列腺癌癌巢细胞和癌前病变细胞,对其 线粒体基因组(一种敏感的细胞质 进行基因分析。 结果发现 J 0%Q 前 MN+) 列腺癌标本中存在有体细胞突变,突变 发生在线粒体基因组调控区,从而证实 了 在前 列 腺 癌 和 其 癌 前 病 变内 存 在 有 诱发线粒体突变的机制。 检 测 杂 合 子 丢 失 ((8AA 8R LB=B78S TOE8A5=O,2UV)是 MN+ 分析的一项重要 已有许 内容。 应用 234 进行 2UV 检测, 多成功的报道。 3L979RBSW9<RR7B= 等 - .# / 对 ’> 例乳腺癌标本应用 234 提取肿瘤细 胞,进行基因分析,发现有 . F > 的肿瘤 细胞在 !;##S.# 区域内存在 2UV,而在 肿瘤周围的组织中未检测到 2UV 发生, 这对于乳腺癌的早期诊断有重要意义。 495=79 等 - >. / 分析比较了皮肤黑色素瘤与 良性黑色素细胞痣发生 2UV 的情况。 应 用 234 从 >H 例黑色素细胞性损害 (#0 例恶性黑色素瘤和 #’ 例黑色素细胞痣, 后者中有 #. 例是出生后发生的, 其余 > 例 是先 天 性 的 ) 捕 获 肿 瘤细 胞 或 痣 细 胞,分别对其 ’ 个染色体区域 (#;>"J "X..S.>& >J !;..S.HJ #%X.>J 9:D ##X.> ) 进行 2UV 检测分析。结果发现 (0’Q ) 存 #0 例恶性黑色素瘤中有 #! 例 在 2UV, #’ 例黑色素细胞痣中有 0 例存 ("%Q ) ,但在 > 例先天性黑色素 在 2UV 细胞痣中没有一例发生 2UV,而且黑色 素细胞痣中所发生的 2UV 并非是随机 性的,其发生区域与恶性黑色素瘤基本 一致。这些结果从分子水平上证实了黑 色 素细 胞 痣 是 皮 肤 黑 色 素 瘤的 癌 前 病 变。 肾血管肌脂肪瘤是一种少见的血 管源性肿瘤,偶发于女性肺淋巴管肌瘤 病 ? (O$;L9:E58$O8$9=8A5A, 2+4 @ 和结节 性硬化症。 血管肌脂肪瘤包含 ’ 种不同 形态学特点的血管:细胞性( 6B((<(97 ) 、 胶原性 ? 68((9EB:8<A @ 、血管外皮细胞性 (LB$9:E58;B756O=56) 、 血 管 球 性
R% S
关键词: 激光捕获显微切割;[HU 分析;基因表达分析 中图分类号: \$>6>> 文献标识码: U (<##& ) 文章编号: %### ; &"$] #$ ; #!"# ; #D
出激光捕获显微切割技术(:8+*) /8,0I)* 。次年,美国 A3/)(.3++*/03(-, 2’T) U)/0I)I+ @-53-**)3-5 公司成功研制激光 捕获 显 微 切 割系 统 , 并 实 现 商 品化 销 售。应用该技术可以在显微镜直视下快 速、准确获取所需的单一细胞亚群,甚 至单个细胞,从而成功解决了组织中细 胞异质性问题。这项技术现已成为美国 “肿瘤基因组解剖计划 ” (/8-/*) 5*-(A* 8-80(AV ,)(W*/0, ’XUY) 的一项支撑技 术。
开发
闫 镜、固态红外激光二极管、激光控制装 (固定载玻片) 置、 控制显微镜载物台 的操 纵杆、 电耦合相机及彩色显示器。用于捕 获目标细胞的热塑膜直径通常为 " $$, 覆在透明的塑料帽上, 后者恰与后继实验 所用的标准 %& ’ $( 离心管相匹配。 机械臂悬挂控制覆有热塑膜的塑 料 帽, 放 到 脱 水 组 织 切 片上 的 目 标 部 位。显微镜直视下选择目标细胞,发射 激光脉冲,瞬间升温使 )*+ 膜局部熔 化。 熔化的 )*+ 膜渗透到切片上极微小 的 组织 间 隙 中 , 并 在 几 毫秒 内 迅 速 凝 固。组织与膜的粘合力超过了其与载玻 片间的粘合力,从而可以选择性地转移 目标细胞。 激光脉冲通常持续 %& ’ , ’& % 毫秒,并且可在整个塑料帽表面进行多 次重复,从而可以迅速分离大量的目标 细胞。将塑料帽盖在装有缓冲液的离心 管 上, 将 所 选 择 的 细 胞 转移 至 离 心 管 中,从而可以分离出感兴趣的分子进行 实验 。
G%( H-(.> 5’ I#(.JH%(. % &’()*&#) + !"#$%&’#( #) *+,- &%,.-&-/ 0-$$" ’" %( ’1*#,&%(& %(/ -""-(&’%$ "&-*
)#, &2- 1#$-0+$%, %(%$3"’" #) &’""+- $-"’#( #00+,,-/ ’( &2- *,#.,-""’#( #) /’"-%"-4 5%"-, 0%*&+,- 1’0,#/’""-0&’#( 6 578 9 ’" % (#:-$ &-02(’;+- &2%& 0%( <- %**$’-/ &# #<&%’( *+,- &%,.-&-/ 0-$$ "+<.,#+* #, -:-( % "’(.$- 0-$$ ;+’0=$3 %(/ *,-0’"-$3 +(/-, &2- 1’0,#"0#*-> &2+" &2- *,#<$-1 #) &’""+- 2-&-,#.-(-’&3 ’( 1#$-0+$%, %(%$3"’" 0%( <- &%0=$-/ "+00-"")+$$34 !( &2’" %,&’0$-> &2- *,’(0’*$-"> %/:%(&%.-" %(/ /’"%/:%(&%.-" #) 578 ?-,- ’(&,#/+0-/4 @-? /-:-$#*1-(&" ’( &26 B@C %(%$3"’" %(/ .-(%**$’0%&’#( #) 578 ?-,- "+11%,’A-/ ’( &?# )’-$/" /-:-$#*1-(&" #) 578 ?-,- *+& )#,?%,/4 ,-./0*1(2 5%"-, 0%*&+,- 1’0,#/’""-0&’#( -D*,-""’#( %(%$3"’" 【摘 要 】 对疾病发生过程中的组织损害要进行分子水平分析, 首要步骤就是纯净 6 578 9 E B@C %(%$3"’"E F-(-
!
"#$ 的原理及技术基础
2’T 的 基 本 原 理 是 通 过 一 低 能 红
外激光脉冲激活热塑膜—— — 乙烯乙酸乙 (*0KV:*-* F3-V:8/*080* , (其 烯酯 膜 @ZU) 最大吸收峰接近红外激光波长 ) ,在直 视下 选 择 性 地将 目 标 细 胞 或 组 织碎 片 粘到该膜上 R % S 。2’T 系统包括倒置显微