应用环磷酰胺构建断奶仔猪免疫抑制模型
FAA的在机体中作用及其作用机制
• 首先，Gln上皮细胞的再生提供能源和氮源， 肠粘膜上皮细胞对Gln的利用超过其它任何氨 基酸，应激时更为明显。
• 其次，Gln间接刺激了肠道营养作用的激素分 泌，正常肠遭的结构和功能的维持需一定的胃 肠道激素的作用。
• 第三，GSH在Gln的营养中也起一定作用。仔 猪在断奶后，肠道的组织结构会发生明显的变 化，表现为小肠上皮细胞吸附大分子能力下降， 以及小肠上皮细胞合成消化酶的功能及吸收氨 基酸和葡萄糖的功能丧失。
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（2）BCAA与外周疲劳
• 引起运动性疲劳的外周机制很多, 但细胞及细胞器结 构的完整及功能的良好与运动能力有着密切的关系。 线粒体结构及功能的良好是能量代谢的重要前提, 而 生物膜的流动性变化将影响线粒体的电子传递和氧化 磷酸化的进行。
• 补充 BCAA可明显降低大鼠急性运动后骨骼肌线粒体 膜黏度系数, 增加线粒体膜的流动性, 保护线粒体膜的 脂双层的稳定性, 保证线粒体的生物功能的正常发挥, 起到减轻运动性疲劳, 提高运动能力的作用。其研究 同时也表明 BCAA 能抑制游泳大鼠血乳酸浓度、LDH 活性及骨骼肌 LPO 的升高幅度。补充 BCAA 能显著 降低长时间运动后血浆CK 和 LDH 活性, 表明 BCAA 补充能减少耐力运动引起的肌细胞破坏, 从而延缓运 动性疲劳。
激素分泌而影响机体蛋白质代谢。 • 4.我国学者认为外源性补充BCAA可以增加血清BCAA
的水平, 运动使骨骼肌摄取 3H-Leu 显著增加,更深入 研究认为Leu的代谢产物β-羟-β-甲基丁酸( HMB) 具 有调节蛋白质代谢的作用。
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2.3.2BCAA与运动疲劳
• 大量研究表明,运动性中枢疲劳与机体某 些氨基酸的代谢有密切关系, 其研究多集 中在BCAA 的补充方面;外周疲劳的研究 多与物质代谢、细胞结构的完整及功能 有密切关系。
环磷酰胺在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制的研究
环磷酰胺在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制的研究目的探讨环磷酰胺（CTX）在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制。
方法建立小鼠实体瘤模型和腹水瘤模型:分别在昆明系小鼠皮下接种S180肉瘤细胞、腹腔接种鼠源性H22肝癌细胞，同时给予环磷酰胺处理小鼠，其后观察各组肿瘤生长大小，小鼠存活率的变化；应用Western blot技术检测凋亡抑制基因（Bcl-2）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）含量、抑癌基因P53及P21的蛋白表达。
结果环磷酰胺组肿瘤重量明显低于模型组（P ＜0.05），其抑瘤率为88.55%；小鼠存活天数均较模型组长，其生命延长率为57.73%；环磷酰胺可明显诱导P53的表达，抑制BCL-2的表达，从而促进肿瘤细胞的凋亡，但对P21没有作用；对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平亦有抑制作用。
结论环磷酰胺可通过激活抑癌基因P53，抑制抗凋亡基因Bcl-2和促血管生成因子VEGF等多种途径，发挥抗肿瘤活性，为抗肿瘤动物模型尤其为调节抗肿瘤相关基因表达方面的阳性药物对照提供重要的实验依据。
标签：环磷酰胺；Western blot；S180肉瘤；H22肝癌细胞；抗肿瘤相关基因肿瘤目前是危害人类健康的主要疾病，环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）作为一种抗癌谱广、疗效较好的抗癌药物，已广泛应用于临床。
由于该药物的良好抗癌性能，尤其是具有对癌细胞与正常细胞杀伤力差别很大这一特性，使得其在临床得到了广泛应用。
环磷酰胺在细胞水平以及联合用药等方面的研究较多[1-2]，目前肿瘤化疗所应用的大多数药物，都经移植性动物肿瘤试验而被发现，并以此为模型进行疾病发生机制和药物筛选的研究，因此它是筛选抗肿瘤新药中最常用的模型[3]，对研究肿瘤的病因、发病机制、抗癌药物筛选及肿瘤防治等都具有非常重要的意义[4]。
现阶段进行的抗癌药物动物实验研究过程中，多采用环磷酰胺作为阳性对照药物，然而，关于环磷酰胺是否具有调节肿瘤相关基因表达而发挥抗肿瘤作用，尚鲜有人报道。
应用环磷酰胺对免疫抑制模型的建立及免疫抑制模型的检测
应用环磷酰胺对免疫抑制模型的建立及免疫抑制模型的检测摘要目的：应用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型并检测免疫抑制模型建立是否成功方法：十六只小鼠分为四大组，每组四只。
将四只小鼠平均分为两组，分别为对照组和免疫抑制组，第一天对两组的四只小鼠进行初次免疫，对照组小鼠分别注射0.4mlNS和0.4mlOVA-AL(OH)3，免疫抑制组小鼠分别注射0.4mlNS 和0.4mlOVA-AL(OH)3。
此后分别于第8、10、12、14天给对照组小鼠注射0.4mlNS，给免疫抑制组小鼠注射100mg/kg的CTX。
于第十五天对两组小鼠加强免疫，对照组小鼠分别注射0.4mlNS和0.4mlOVA-AL(OH)3，免疫抑制组小鼠分别注射0.4mlNS和0.4mlOVA-AL(OH)3，即四组分别为NS-NS组、OVA-NS组、NS-CTX组、OVA-CTX组，免疫抑制模型建立。
用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬墨汁试验对天然免疫功能进行检测，淋巴细胞转化试验对细胞免疫功能进行检测，双向免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验对体液免疫功能进行检测。
结果：细胞免疫的检测（淋转实验）结果全为阴性，吞噬细胞功能的检测（吞噬实验）结果为阴性，体液免疫的检测（双扩实验和ELISA）结果有三项测定项目为阳性。
结论：虽然本实验不足以证明CTX对免疫功能的抑制作用，但从一些数据可以看出CTX的免疫抑制功能。
AbstractObjective:cyclophosphamide was applied to establish the mice immunos uppression model and detection whether the immunosuppression model s uccess or not.Meyhod:Divid the 16 mice into four groups, each group of four. Divid the four mice into two groups, control group and immunosuppressive gro ups. On the first day giver primary immune to the two groups of fou mic e, Control group mice were injected NS 0.4ml and OVA - AL (OH) 3 0.4 ml, Immunosuppressive mice were injected NS 0.4ml and OVA - AL (O H) 3 0.4 ml. In 8, 10, 12, 14 days inject 0.4 ml NS to the control group mice, inject 100 mg/kg CTX to the immunosuppressive mice. In the fift eenth day give strengthen immunity to the two groups of mice. Control g roup mice were injected NS 0.4 ml and OVA - AL (OH) 3 0.4 ml, Immu nosuppressive mice were injected NS 0.4ml and OVA - AL (OH) 3 0.4ml, which means the four groups were NS-NS group, OVA-NS grpoup, NS -CTX group, OVA-CTX group.,Immunosuppression model is established. Use macrophage cell in abdominal cavity of mice phagocytosis ink expe riment to test the natural immune function, The lymphocyte transformatio n test to test the cellular immune function, double immunodiffusion test, ELISA to test the humoral immune function.Result: The results cellular immune detection (lymphocyte transformation test) were all negative, the result Phagocytes function detection (Consuming experiment) was all negative, three of the results of humoral immunity test ( double immunodiffusion test and ELISA) are positive.Conclusion：Although this experiment is not enough to prove that CTX ‘s inhibitory effect on the immune function, but the CTX’s immunosuppressive function can be seen from some of the datas.关键词：免疫抑制环磷酰胺固有免疫体液免疫细胞免疫引言目前化疗仍是临床上治疗肿瘤的三大有效手段之一,化疗在杀灭患者体内的癌细胞方面有很好的效果,但均有不同程度的毒副作用,如化疗后往往会出现白细胞减少,特别是中性粒细胞减少,血小板减少等情况，严重的会造成人体免疫功能降低甚至是免疫功能缺陷[1],随着肿瘤化疗的不断发展，肿瘤的治疗效果有了很大提高，但其免疫抑制的毒副作用却难以克服。
甘露寡糖
甘露寡糖甘露寡糖是一种寡聚糖,甘露寡糖是寡聚糖中最具前景的一个。
其作为一种安全有效的饲料添加剂在养殖生产上具有重要的作用。
1甘露寡糖的理化性质甘露寡糖(Mannose-oligosaccharides,MOS),又称甘露低聚糖或葡甘露寡聚糖。
甘露寡糖是寡聚糖中最具前景的一个,主链的连接方式为α-1,6糖苷键,侧链主要通过α-1,2和α-1,3糖苷键连接,一般在生理pH 值和通常饲料加工条件下较为稳定,易溶于水和其他极性溶剂。
当溶液中加入有机溶剂时会使其沉淀或结晶,甜度低于蔗糖。
甘露寡糖广泛存在于魔芋粉、瓜儿豆胶、田菁胶及多种微生物细胞壁内(葡萄糖甘露寡聚糖)。
目前商品用甘露寡糖主要通过酶解法进行生产。
饲料用甘露寡糖主要来源于酵母细胞壁提取物,多为二糖、三糖、四糖等结构的混合物。
甘露寡糖不为单胃动物消化道酶分解,而且由酵母细胞壁提取而来的甘露寡糖能承受饲料加工的高温处理(121 ℃,20 min)而保持其结构和功能的完整性不被破坏。
2甘露寡糖的作用机理甘露寡糖化学性质稳定,不被动物消化也不能被有害菌利用,只能被消化道有益菌群如双歧杆菌和乳酸菌利用,通过优化肠道微生物生态系对宿主起有益的保健功能。
改善肠道微生物组成、形成以双歧杆菌和乳酸杆菌为优势菌的肠道菌丛,抑制病原菌。
MOS对病原菌有识别、粘附和排除作用,同时有利于排除内毒素保持动物健康。
加速细菌从肠道排出,促进肠道正常微生物区系的平衡,增强动物非特异性免疫,提高动物抵抗力,从而提高动物日增重和饲料转化率,降低胃肠道疾病的发生率和死亡率。
马志红等[1]以甘露寡糖为饲料添加剂进行鲤鱼的对比饲喂试验,通过测定和比较对照组和试验组鲤鱼的生长性能和免疫功能指标,探讨甘露寡糖对鲤鱼生长及免疫功能的影响。
结果显示,试验组鲤鱼的饲料系数、相对增重率、白细胞吞噬率、吞噬指数、脾脏指数和血清溶血素活力较对照组均显著提高;周淑芹[2]研究了甘露寡糖对肉鸡后期(5～7周)大肠杆菌病的控制效果,结果表明饲粮中添加MOS显著降低了肉鸡感染大肠杆菌后的发病和死亡率。
科研课题研究_猪传染性胸膜炎药效评价模型的建立与应用
猪传染性胸膜炎药效评价模型的建立与应用本文报道麻保沙星等24种抗菌药物对血清学1型猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）的体外最小抑菌浓度（MIC）及麻保沙星对实验性猪传染性胸膜肺炎的药效学研究，同时对血浆药物浓度进行了监测。
以试管两倍稀释法测定麻保沙星等抗菌药物对猪胸膜肺炎放线杆菌的体外MIC。
结果表明，对APP高度敏感的药物有麻保沙星、环丙沙星、单诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星、氧氟沙星、洛美沙星及头孢噻呋，其MIC值分别为0.01、0.01、0.03、0.03、0.03、0.03、0.06和0.01mg/ml；敏感的药物有青霉素G、恩诺沙星、氨苄西林、阿莫西林、头孢氨苄、盐酸土霉素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素及氟甲砜霉素，其MIC值分别为0.12 IU/ml、0.12、0.12、0.25、1、0.5、0.5、0.5、0.5和0.5mg/ml；较不敏感或耐药的药物有硫酸红霉素4mg/ml、盐酸林可霉素8mg/ml、硫酸卡那霉素32mg/ml和SM2、SMD、SMZ，对APP的MIC均大于128mg/ml。
体外抑菌试验结果表明，麻保沙星对猪胸膜肺炎放线杆菌具有良好的抗菌活性，其作用与环丙沙星、头孢噻呋相同，优于恩诺沙星、单诺沙星和氧氟沙星及其它对照药物。
60头健康杜洛克×长白×大白三元杂交断奶仔猪，7~8周龄，随机分为6组，每组10头。
按每kg体重颈部气管接种7.5×10~6菌落形成单位的猪胸膜肺炎放线杆菌，可诱发出具有典型猪传染性胸膜肺炎临床症状的疾病模型。
表现为接种后2~3h，猪呼吸困难、精神沉郁、体温升高，部分猪出现短暂性呕吐。
接种后4~6h，猪直肠体温达到最高值，平均升高1.5~2℃。
接种后10天，从前腔静脉采血分离血清，经酶联免疫吸附法检测呈阳性抗体反应，证明猪感染了传染性胸膜肺炎。
感染猪用麻保沙星进行治疗（高、中、低剂量治疗组的给药剂量分别为 5.0、2.5、1.25mg/kg），以恩诺沙星作对照（2.5mg/kg），一天一次，连续用药4天。
环磷酰胺构建动物免疫抑制模型的研究进展
Chinese Journal of Veterinary Medicine中国兽医杂志㊀2019年(第55卷)第2期环磷酰胺构建动物免疫抑制模型的研究进展伍维高,钟金凤(湖南环境生物职业技术学院,湖南衡阳421005)中图分类号:O571.21+1㊀㊀㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀㊀㊀文章编号:05296005(2019)02008703收稿日期:20180528基金项目:湖南省教育厅项目(16C0563);湖南省科技厅项目(2017JJ5026)作者简介:伍维高(1979-),男,畜牧师,硕士,研究方向为动物繁殖与生产,E-mail:30942422@通讯作者:钟金凤,E-mail:498379002@㊀㊀近几年来,动物疫病肆意流行,免疫接种成为预防传染病的有效措施之一,而免疫反应过程相当复杂,诸多因素会影响接种效果,如免疫抑制性疾病㊁不良的饲养环境㊁微量元素和蛋白质的缺乏等,常导致免疫接种失败,给生产带来不可挽回的重大损失㊂为提高机体抗病力,增强动物免疫力,免疫增强剂得以广泛运用㊂为了进一步研究此类制剂,人为构建免疫抑制模型的研究手段得到了诸多研究者的青睐㊂而环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX),以其诱导动物产生免疫抑制作用效果显著,且成本低廉,越来越广泛地运用到制备动物免疫抑制模型中㊂为此,本文对环磷酰胺构建免疫抑制模型进行综述㊂1㊀环磷酰胺的药理作用经口服或静脉注射的环磷酰胺主要在肝脏进行代谢,生成低毒性的4-羟基环磷酰胺和醛磷酰胺,分布全身,进一步降解为磷酰氮芥㊁丙烯醛和去甲氮芥,结合于快速生长细胞的DNA 上,产生强烈的细胞毒性㊂极少部分可进一步氧化成4-酮环磷酰胺和羧基环磷酰胺,无毒性,随尿排出[1]㊂2㊀CTX 免疫抑制机理2.1㊀环磷酰胺对免疫基因的影响2.1.1㊀抑制抗菌蛋白基因表达㊀内源性抗菌蛋白是天然免疫的重要组成部分,其中杀菌/渗透增强蛋白(Bactericidal /permeability increasing protein,BPI)㊁防御素(Defensins,DF)以及血小板型磷脂酶A 2(Phospholipase A 2,PLA 2)备受关注[2]㊂大鼠连续5d 腹腔注射环磷酰胺40mg /kg㊃bw,对照组注射等体积生理盐水,结果显示,对照组大鼠的睾丸㊁附睾㊁胸腺㊁肝㊁小肠㊁大肠6种器官均表达BPI㊁β-DF-1㊁血小板型PLA 2;而环磷酰胺组胸腺㊁肝无BPI 表达,睾丸㊁胸腺㊁肝无β-DF-1表达,睾丸㊁胸腺无血小板型PLA 2表达,其他有表达的组织中其含量比对照组低[3],试验提示,环磷酰胺可抑制体内抗菌蛋白基因表达㊂2.1.2㊀影响免疫相关基因的表达㊀环磷酰胺对免疫相关基因有一定影响㊂经环磷酰胺处理的荷瘤鼠脾脏㊁骨髓和血浆相关多种免疫调节因子基因上调,包括危险信号㊁模式识别受体㊁炎症介质㊁生长因子㊁细胞因子㊁趋化因子和趋化因子受体[4]㊂通过基因芯片技术检测环磷酰胺干预的胚胎干细胞发现:自体免疫激活和移植排斥相关基因如CD 3㊁CD 28㊁CTLA 4㊁MHC II ㊁PRF 1㊁GZMB 和IL-2R 基因下调,而免疫相关受体基因如IL 1R 2㊁IL 18R 1和FLT 3上调[5]㊂2.2㊀环磷酰胺对动物转录水平的影响2.2.1㊀抑制骨髓细胞相关mRNA 表达㊀环磷酰胺诱导骨髓抑制,造成骨髓细胞(BM)降低㊂雄性昆明种小鼠连续3d 腹腔注射150mg /kg㊃d 环磷酰胺,7d 后采骨髓细胞通过Real time PCR 检测发现,试验组BM 细胞钙敏感受体(Calcium-sensing recep-tor,CaSR)和丝裂素活化蛋白激酶(Mitogen-activa-ted protein kinase,MAPK)mRNA 水平极显著高于对照组(P <0.01),引起BM 造血干细胞㊁间充质干细胞和内皮祖细胞增殖㊁分化和动员产生明显障碍[6]㊂2.2.2㊀调节细胞凋亡相关mRNA 表达㊀环磷酰胺对细胞凋亡的影响主要体现在两方面:增加促凋亡基因mRNA 表达而抑制抗凋亡基因mRNA 表达,从而诱导细胞凋亡㊂SPF 级NIH 雄性小鼠于试验期第9㊁11㊁13天腹腔注射环磷酰胺10mg /kg,于14d㊁28d 取脾脏采用半定量RT-PCR 检测促凋亡基因-Caspase-9mRNA 和抗凋亡基因-B 淋巴细胞基因2(B-cell lymphonma gene 2,BCL-2)的表达,两次结果均显示,模型组Caspase-9mRNA 表达较对照组显著升高而BCL-2mRNA 表达显著降低[7]㊂8~12周远78中国兽医杂志㊀2019年(第55卷)第2期Chinese Journal of Veterinary Medicine交系昆明种小鼠腹腔注射环磷酰胺100mg/kg,1次/d,连续3d,第10天取小鼠脾脏测定凋亡相关基因,结果显示,BAX(Bcl-2associated X protein)mR-NA表达水平明显上升,而BCL-2mRNA表达明显下降[8]㊂2.2.3㊀降低免疫相关受体mRNA表达㊀环磷酰胺可降低免疫相关受体mRNA的表达㊂树突状细胞相关C-型凝集素-1(Dectin-1)和Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)主要表达在免疫细胞上,为免疫相关受体,与免疫状态有关[9]㊂给予150mg/kg环磷酰胺的BALB/c小鼠与第4㊁7㊁9天取肺组织测定Dectin-1mRNA,结果显示,在第4㊁7天肺组织Dec-tin-1mRNA表达较对照组明显下降(P<0.05)[10]㊂24只昆明种小鼠(雌性)腹腔注射环磷酰胺150 mg/kg,4h后肺泡巨噬细胞TLR2mRNA表达与对照组相比极显著下降(P<0.01);8h后TLR4mR-NA表达极显著降低(P<0.01)[11]㊂2.2.4㊀影响免疫因子mRNA表达㊀环磷酰胺对Th1㊁Th2类细胞因子mRNA表达均有不同程度影响㊂汪祯等[12]用SPF级昆明种小鼠按50mg/kg㊃bw剂量隔日腹腔注射环磷酰胺,共7次,14d后,无菌取脾脏测定IL-2mRNA㊁IL-10mRNA,结果显示, IL-2mRNA㊁IL-10mRNA表达水平与对照组相比显著下降;易有金等[13]腹腔注射40mg/kg㊃d环磷酰胺,结果显示,脾脏和胸腺中IL-2㊁IL-10㊁IL-12㊁IL-4㊁TNF-α和IFN-γmRNA的表达量降低,以上试验提示,环磷酰胺对Th1㊁Th2类细胞因子表达均呈现下调现象[14]㊂2.3㊀环磷酰胺对动物蛋白水平的影响2.3.1㊀抑制细胞周期相关蛋白表达㊀环磷酰胺降低着丝粒蛋白B(Centromere Protein,CenpB),Cen-pB是染色体着丝粒/动粒复合体上一种最重要的功能蛋白,其特异性结合位点位于着丝粒α1-卫星DNA上17bp的CenpB盒,参与着丝粒异染色质的形成,环磷酰胺可致CenpB蛋白含量异常,致细胞无法正常分裂㊂昆明种小鼠连续7d腹腔注射50 mg/kg㊃bw环磷酰胺,5d后取血通过Western Blot-ting方法检测CenpB蛋白,其含量显著低于对照组[15]㊂2.3.2㊀增加细胞凋亡相关蛋白表达㊀环磷酰胺可通过增加细胞凋亡蛋白的表达影响Fas/Fas L系统介导的凋亡蛋白㊂SPF级ICR纯种雄性小鼠腹腔注射环磷酰胺100mg/kg㊃bw,用流式细胞术检测Fas 抗原(CD95)介导细胞凋亡的蛋白,其表达量与对照组相比显著升高[16]㊂人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat加入环磷酰胺3mg/L,于12㊁24㊁48h收取细胞,Western Blot检测FasL(Fas ligand,fas配体)和FADD(Floationg Point Addition,胞浆死亡信号衔接蛋白)表达,结果表明,未处理的细胞无FasL和FADD表达,而环磷酰胺处理组表达FasL和FADD,且表达水平随环磷酰胺刺激时间延长而增加[17]㊂除此,环磷酰胺能显著诱导Fas/Fas L下游蛋白Caspases产生[18],使凋亡不可逆进行㊂3 环磷酰胺在动物上的应用因环磷酰胺主要作用于快速生长细胞的DNA,并能从基因转录㊁翻译和蛋白表达等多方面产生细胞毒性㊂免疫细胞属于快速生长细胞,因此,环磷酰胺对免疫系统影响甚大,故可用环磷酰胺作为免疫抑制剂构建免疫抑制模型,这是环磷酰胺在动物上的主要用途㊂3.1㊀环磷酰胺抑制动物免疫器官㊀在环磷酰胺作用下鸡表现出形态退行性改变,包括腔上囊囊泡不发达,即腔上囊初级滤泡严重萎缩,皮质和髓质间隔不明显且滤泡间结缔组织严重增值[19]㊂Marsh J 研究发现,脾脏内正常椭球相关细胞在环磷酰胺作用后1周变为空泡[20]㊂3.2㊀环磷酰胺降低动物免疫细胞数量㊀连续3d 给7~8周龄雌性尼古拉斯火鸡注射环磷酰胺(0~ 100mg/kg㊃bw),测定血液学指标发现,环磷酰胺在初始注射后24~72h引起明显的白细胞减少㊁淋巴细胞减少㊁血小板减少和白细胞减少㊂但对单核细胞循环数㊁细胞体积㊁血浆蛋白无明显影响㊂同时,无法确定对嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞的变化,因为它们在机体内的数量微量[21]㊂3.3㊀环磷酰胺减少免疫分子产生㊀研究表明,环磷酰胺可减少免疫分子产生:用80mg/kg㊃bw环磷酰胺腹腔注射小鼠,同位素标记法显示24h和48h其肠道蛋白损失显著高于对照组,连续2d注射环磷酰胺(50mg/kg㊃bw),可造成肠黏膜SIgA损伤,肠道固有层IgA表达量减少[22]㊂环磷酰胺(10mg/ kg㊃bw)与单剂量长春新碱(0.025mg/kg㊃bw,静脉注射)和单剂量的L-天冬酰胺酶(400IU/kg㊃88Chinese Journal of Veterinary Medicine中国兽医杂志㊀2019年(第55卷)第2期bw,静脉注射)同时注射狗,3d后抗体反应受抑制[23]㊂环磷酰胺在抑制免疫系统的同时,其他新陈代谢旺盛的组织如胃肠㊁毛发等亦会受影响,因此,用环磷酰胺造模的同时,动物可出现采食量降低㊁生长性能受阻㊁毛发脱落等现象[24-25]㊂4 小结环磷酰胺主要作用快速生长细胞DNA,并从基因水平㊁转录水平和蛋白水平影响免疫系统,它可下调抗菌蛋白基因㊁免疫相关基因的表达,增加促凋亡基因mRNA和抑制抗凋亡基因mR-NA转录,降低着丝粒蛋白B含量,抑制细胞正常分裂;诱导促凋亡蛋白Caspases产生,促使凋亡不可逆进行,从而广泛引起细胞周期改变㊁诱导细胞凋亡发生,最终表现出免疫器官㊁免疫细胞和免疫分子的现象,可广泛应用在动物免疫抑制模型上㊂参考文献:[1]㊀钟金凤,方热军.环磷酰胺免疫抑制机制及在动物模型上的应用[J].中国免疫学杂志,2016,10(32):15411546. 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姜黄素对早期断奶仔猪回肠黏膜形态、紧密连接蛋白和炎性因子基因表达以及血清免疫球蛋白水平的影响
姜黄素对早期断奶仔猪回肠黏膜形态、紧密连接蛋白和炎性因子基因表达以及血清免疫球蛋白水平的影响荀文娟;周汉林;侯冠彧;曹婷;施力光;赵春萍【摘要】本试验旨在研究姜黄素对早期断奶仔猪回肠黏膜形态、紧密连接蛋白和炎性因子基因表达以及血清免疫球蛋白水平的影响。
选取50头胎次、体重相近的21日龄“杜×长×大”健康断奶仔猪，公母各占1／2，随机分为5组，每组10个重复，每个重复1头猪。
对照组饲喂基础饲粮，试验组分别饲喂在基础饲粮中添加50 mg／kg喹烯酮及200、300和400 mg／kg姜黄素的饲粮。
预试期7 d，于第4天接种大肠杆菌；正试期21 d。
结果表明：1）与对照组相比，300和400 mg／kg姜黄素组回肠绒毛高度和绒毛高度／隐窝深度显著提高（ P＜0．05），绒毛宽度和隐窝深度显著降低（ P＜0．05），回肠黏膜紧密连接闭锁蛋白（ occludin）、闭锁小带蛋白（ ZO-1） mRNA相对表达量显著提高（ P＜0．05），白细胞介素－1β（ IL-1β）、肿瘤坏死因子－α（ TNF-α）、白细胞介素－6（IL-6）和Toll样受体4（TLR4） mRNA相对表达量显著降低（P＜0．05），白细胞介素－10（ IL-10） mRNA相对表达量、血清免疫球蛋白G （ IgG）和免疫球蛋白M（ IgM）水平显著提高（ P＜0．05）；2）喹烯酮组回肠绒毛宽度和TLR4 mRNA相对表达量显著低于对照组（ P＜0．05），其余各项指标与对照组相比差异不显著（ P＞0．05）。
结果显示：添加300或400 mg／kg姜黄素可改善回肠黏膜上皮形态，增加肠黏膜屏障完整性，提高仔猪免疫力，其作用效果优于喹烯酮。
%This experiment was conducted to study the effects of curcumin on ileum mucosal morphology, gene expression oftight junction proteins and inflammatory cytokines, and serum immunoglobulin levels of early weaning piglets.FiftyDuroc×Landrace×Large White healthy piglets ( male to female ratio w as 1∶1) with simi-lar parity and body weight, weaned at 21 days of age, were randomly allocated into 5 groups with 10 replicates in each group and 1 pig in each replicate.The dietary treatments were the basal diet ( control group) , and the basal diet supplemented with 50 mg/kg quinocetone, or 200, 300 or 400 mg/kg curcumin ( experimental groups) .The preliminary trial lasted for 7 days and piglets were orally challenged with enterotoxigenic Esche-richia coli on the fourth day.The experiment lasted for 21 days.The results showed as follows:1) compared with the control group, supplementation with 300 or 400 mg/kg curcumin significantly improved villus height and villus height/crypt depth ratio ( V/C) ( P<0.05) , significantly reduced crypt depth and villus width( P<0.05) , significantly increased the relative expression levels of occludin and zonula occluden-1( ZO-1) mRNA (P<0.05), significantly decreased the relative expression levels of interleukin-1β( IL-1β), tumor necrosis factor-α( TNF-α) , interleukin-6 ( IL-6) , and toll-like receptor 4 ( TLR4) mRNA ( P<0.05) , and significant-ly increased interleukin-10 ( IL-10) mRNA relative expression level, serum immunoglobulin G ( IgG) and im-munoglobulin M ( IgM) levels ( P<0.05) .2) The villus width and TLR4 mRNA relative expression level were significantly decreased by quinocetone supplementation( P<0.05) , but the other indicators were not signifi-cantly affected compared with the control group ( P>0.05) .It is suggested that 300 or 400 mg/kg curcumin supplementation was more effective than quinocetone inimproving ileum mucosal barrier integrity, morpholo-gy, and immune status of weaning piglets.【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2016(028)003【总页数】8页(P826-833)【关键词】姜黄素;断奶仔猪;回肠黏膜形态;紧密连接蛋白;炎性因子;免疫球蛋白【作者】荀文娟;周汉林;侯冠彧;曹婷;施力光;赵春萍【作者单位】中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，儋州 571737;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，儋州 571737;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，儋州 571737;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，儋州 571737;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，儋州 571737;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，儋州 571737; 海南大学农学院，海口 570228【正文语种】中文【中图分类】S816.7;S828在现代养猪生产中，仔猪早期断奶是普遍采用的先进技术之一。
环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立及其免疫功能的测定
环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立摘要:[目的]建立环磷酰胺对小鼠的免疫抑制的动物模型，从天然免疫功能和获得免疫功能两方面检测对小鼠的影响。
[方法]初次免疫设立实验组给予OVA-AL(OH)3(0.5/只)和对照组给予NS（0.5/只）；8d,10d,12d,14d分别给实验组和对照组注射NS和CTX(100mg/kg);与15d加强免疫分别注射NS和OVA-AL(OH)3(0.5/只)；22d检测免疫功能[结果]与NS-NS组相比，CTX-NS组的SI值，双向免疫及ELISA的效价无明显差别，但吞噬细胞指数及吞噬细胞百分率明显降低；与NS-OVA相比CTX-OVA组的SI 明显降低，双向免疫剂ELISA效价都降低[结论]环磷酰胺对小鼠的T淋巴细胞，B淋巴细胞以及吞噬细胞有抑制作用Abstract:[aims] To establish animal model of cyclophosphamide in mice immunosuppression , test in mice from two aspects of natural immune function and immunity function [methods] Primary immune to set up the experimental group given OVA-AL(OH)3 and The control group given NS ; the 8th,10th,12th,14th day give the experimental group NS and the control group CTX ,and the 15th strengthen the immune;the 22th test the immune function [results] Compared with NS - NS group, the SI value of CTX - NS group, bidirectional immune potency and ELISA has no obvious difference, but the phagocyte index and phagocytes percentage decreased obviously; Compared with NS - OVA CTX - SI of OVA group was obviously lower, bidirectional immune agent ELISA titer were reduced [conclusion] Cyclophosphamide in mice of T lymphocyte, B lymphocyte and phagocytes have inhibition关键词：环磷酰胺 CTX 免疫抑制动物模型淋巴细胞建立一种环磷酰胺免疫抑制小鼠模型，并将其与正常小鼠进行对照，通过检测小鼠的天然及获得免疫功能对比其改变与不同，从而可知环磷酰胺对免疫抑制的作用，有利于进一步进行对临床应用抗肿瘤的研究。
猫爪草多糖对环磷酰胺致小鼠免疫低下模型免疫功能的影响
表 1 猫爪草多糖对 CY 致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响( x s ) Tab 1 Effects of Radix Ranunculi Ternati polysaccharide on peritoneal macrophage phagocytosis in immunosuppression model mice induced by cyclophosphamide ( x s )
465200, China; 2.Henan College of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou, 450008, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To explore the effects of the Radix Ranunculi Ternati polysaccharide(RRTP) on immunological function of the immunosuppressive model mice induced by cyclophosphamide(CY). METHODS Establish the immunosuppressive model mice by using injection of CY. The effects of RRTP on model mice were observed following these indexes, such as peritoneal macrophage phagocytosis function, formation of hemolysin or plaque, and lymphocyte transformation. RESULTS The large and medium dose RRTP group can increase phagocytosis percentage and phagocytic index of peritoneal macrophages in immunosuppressive model mice significantly. The medium dose RRTP and lentinan group can promote the formation of hemolysin significantly. The large, medium and small-dose RRTP, and lentinan group can promote the formation of plaque and lymphocyte transformation significantly. CONCLUSION The RRTP can obviously improve immunological function of the immunosuppressive model mice induced by CY. KEY WORDS: Radix Ranunculi Ternati polysaccharide; cyclophosphamide; immunosuppressive model mice; immunological function
断奶仔猪腹泻防治药物的研究进展_由昭红
［14］［15］［16］column experiment of tidal flow constructed wetland system ［J ］.Journal of Biotechnology.2005,115（2）：189-197.Daumer M L,B éline F,Guiziou F ,et al.Effect of nitrificationon phosphorus dissolving in a piggery effluent treated by a sequencing batch reactor ［J ］.Biosystems Engineering ，2007,96（4）：551-557.Canizares R O,Dominguey A R .Growth of spirulina maximaon swine waste ［J ］.Bioresource Tech ，1993，45（1）：73-75.Olguin E J,Hern 仳ndey B,Araus A ,et al.Simultaneous high -biomass protein production and nutrient removal using spir -ulina maxima in sea water supp lemented with anaerobic efflu -ents ［J ］.World J Microbio Biotech,1994，10（5）：576-578.□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□断奶仔猪腹泻防治药物的研究进展由昭红（枣庄学院，山东枣庄271000）摘要：断奶仔猪腹泻是一类严重危害养猪业发展的疾病。
抗生素的滥用导致了耐药菌的产生、抗生素效力的下降及在畜产品中的残留等诸多问题，大大限制了其在防治断奶仔猪腹泻中的应用。
应用环磷酰胺对免疫抑制模型的建立及免疫抑制模型的检测
应⽤环磷酰胺对免疫抑制模型的建⽴及免疫抑制模型的检测应⽤环磷酰胺对免疫抑制模型的建⽴及免疫抑制模型的检测摘要⽬的：应⽤环磷酰胺建⽴⼩⿏免疫抑制模型并检测免疫抑制模型建⽴是否成功⽅法：⼗六只⼩⿏分为四⼤组，每组四只。
将四只⼩⿏平均分为两组，分别为对照组和免疫抑制组，第⼀天对两组的四只⼩⿏进⾏初次免疫，对照组⼩⿏分别注射0.4mlNS和0.4mlOVA-AL(OH)3，免疫抑制组⼩⿏分别注射0.4mlNS 和0.4mlOVA-AL(OH)3。
此后分别于第8、10、12、14天给对照组⼩⿏注射0.4mlNS，给免疫抑制组⼩⿏注射100mg/kg的CTX。
于第⼗五天对两组⼩⿏加强免疫，对照组⼩⿏分别注射0.4mlNS 和0.4mlOVA-AL(OH)3，免疫抑制组⼩⿏分别注射0.4mlNS和0.4mlOVA-AL(OH)3，即四组分别为NS-NS组、OVA-NS组、NS-CTX组、OVA-CTX组，免疫抑制模型建⽴。
⽤⼩⿏腹腔巨噬细胞吞噬墨汁试验对天然免疫功能进⾏检测，淋巴细胞转化试验对细胞免疫功能进⾏检测，双向免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验对体液免疫功能进⾏检测。
结果：细胞免疫的检测（淋转实验）结果全为阴性，吞噬细胞功能的检测（吞噬实验）结果为阴性，体液免疫的检测（双扩实验和ELISA）结果有三项测定项⽬为阳性。
结论：虽然本实验不⾜以证明CTX对免疫功能的抑制作⽤，但从⼀些数据可以看出CTX的免疫抑制功能。
AbstractObjective:cyclophosphamide was applied to establish the mice immunos uppression model and detection whether the immunosuppression model s uccess or not.Meyhod:Divid the 16 mice into four groups, each group of four. Divid the four mice into two groups, control group and immunosuppressive gro ups. On the first day giver primary immune to the two groups of fou mic e, Control group mice were injected NS 0.4ml and OVA - AL (OH) 3 0.4 ml, Immunosuppressive mice were injected NS 0.4ml and OVA - AL (O H) 3 0.4 ml. In 8, 10, 12, 14 days inject 0.4 ml NS to the control group mice, inject 100 mg/kg CTX to the immunosuppressive mice. In the fift eenth day give strengthen immunity to the two groups of mice. Control g roup mice were injected NS 0.4 ml and OVA -AL (OH) 3 0.4 ml, Immu nosuppressive mice were injected NS 0.4ml and OVA - AL (OH) 3 0.4ml, which means the four groups were NS-NS group, OVA-NS grpoup, NS -CTX group, OVA-CTX group.,Immunosuppression model is established. Use macrophage cell in abdominal cavity of mice phagocytosis ink expe riment to test the natural immune function, The lymphocyte transformatio n test to test the cellular immune function, double immunodiffusion test, ELISA to test the humoral immune function.Result: The results cellular immune detection (lymphocyte transformation test) were all negative, the result Phagocytes function detection (Consuming experiment) was all negative, three of the results of humoral immunity test ( double immunodiffusion test and ELISA) are positive.Conclusion：Although this experiment is not enough to prove that CTX ‘s inhibitory effect on the immune function, but the CTX’s immunosuppressive function can be seen from some of the datas.关键词：免疫抑制环磷酰胺固有免疫体液免疫细胞免疫引⾔⽬前化疗仍是临床上治疗肿瘤的三⼤有效⼿段之⼀,化疗在杀灭患者体内的癌细胞⽅⾯有很好的效果,但均有不同程度的毒副作⽤,如化疗后往往会出现⽩细胞减少,特别是中性粒细胞减少,⾎⼩板减少等情况，严重的会造成⼈体免疫功能降低甚⾄是免疫功能缺陷[1],随着肿瘤化疗的不断发展，肿瘤的治疗效果有了很⼤提⾼，但其免疫抑制的毒副作⽤却难以克服。
环磷酰胺致大鼠免疫抑制和免疫亢进模型的建立与评价
环磷酰胺致大鼠免疫抑制和免疫亢进模型的建立与评价张俊;Yong-Seong Shin;胡安君;杜芳芳;李永亮;王学兵;张红英【摘要】目的：用环磷酰胺（ cyclophosphamide，Cy）建立大鼠免疫抑制和免疫亢进模型，并从免疫器官、免疫细胞、抗体和细胞因子等方面对该模型进行评价。
方法 SD大鼠随机分为A、B、C三大组，所有大鼠腹腔注射100μg鸡卵清白蛋白（ ovalbumin，OVA）进行免疫，B组大鼠于免疫OVA后6 h，以不同的方式腹腔注射不同剂量的Cy， C组大鼠于免疫OVA前3 d，以不同的方式腹腔注射不同剂量的Cy，A组为对照组。
结果免疫OVA后6 h，一次性注射不同剂量Cy （125、100 mg／kg），能使大鼠产生明显的免疫抑制，免疫OVA前3 d注射不同剂量Cy，超大剂量时（225 mg／kg）依然会引起动物的免疫抑制，小剂量（20 mg／kg）一次注射或者更小剂量（每天5 mg／kg，连续3d）注射在不同时间点均能引起机体免疫亢进。
结论为免疫抑制和免疫亢进模型的建立提供方法和数据支持具有重要参考意义。
%Objective The aim of this study was to establish rat models of immunosuppression and immune hyper-function.Methods Sixty-four SPF Sprague-Dawley rats were randomly divided into groups A, B, and C.All rats were immunized with intraperitoneal injection of 100 μg ovalbumin ( OVA) .The group A was used as control.At 6 hours after immunization, the rats of group B were injected with different doses of cyclophosphamide (Cy) at different time points.The rats of group C were injected with Cy in different ways at 3 days before immunization.Results Immunosuppressed rats were successfully induced by Cy (125 mg/kg or 100 mg/kg) at 6 h after immunization and also by injection of 225 mg/kg Cy at 3 days before immunization withovalbumin.Small dose (20 mg/kg) of Cy injected once or a smaller dose (5 mg/kg/d) injected once a day for consecutive 3 days can also result in immune hyperfunction.Conclusions Rat models of immunosuppression and immune hyperfunction are successfully established, which provide methodological and data support for establishment of such animal models and useful reference for related research.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】6页(P395-400)【关键词】环磷酰胺;卵清白蛋白;大鼠模型;免疫亢进;免疫抑制【作者】张俊;Yong-Seong Shin;胡安君;杜芳芳;李永亮;王学兵;张红英【作者单位】河南农业大学牧医工程学院，郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院，郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院，郑州 450000;河南省动物性食品安全重点实验室，郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院，郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院，郑州 450000; 河南省动物性食品安全重点实验室，郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院，郑州 450000; 河南省动物性食品安全重点实验室，郑州 450000【正文语种】中文【中图分类】Q95-33抗癌药环磷酰胺(cyclophosphamide，Cy)是临床上广泛应用的烷化剂类化疗药物之一，由于其高度且广谱的细胞毒性作用，除了用于治疗急慢性白血病、多发性骨髓瘤、恶性淋巴瘤，也常常被用作免疫抑制药，例如在骨髓移植时的免疫抑制治疗以及治疗一些自身免疫性疾病［1－2］。
刺五加多糖对断奶仔猪血液免疫指标的影响
刺五加多糖对断奶仔猪血液免疫指标的影响韩杰;边连全;刘显军;张飞;杨侃侃【摘要】本试验旨在探讨刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)对断奶仔猪血液免疫指标的影响.试验选用96头(28±3)日龄的“长白×约克夏”二元杂交断奶仔猪,随机分成6组(每组4个重复,每个重复4头猪).对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮中分别添加150、300、500、800和1 000 mg/kg ASPS的试验饲粮,试验期21d.结果表明:饲粮中添加ASPS 对仔猪外周血红细胞数量和中性粒细胞数量无显著影响(P＞0.05),但能显著增加外周血白细胞数量和淋巴细胞数量(P＜0.05),且随ASPS添加水平增加,白细胞数量和淋巴细胞数量呈二次曲线变化(P＜0.01).添加ASPS能显著提高仔猪血清细胞因子白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)含量(P＜0.05),对白细胞介素-4含量无显著影响(P＞0.05),且随ASPS添加水平增加,IL-2(P＜0.05)和IFN-γ含量(P＜0.01)呈二次曲线变化.ASPS对仔猪血清免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M抗体水平均无显著影响(P＞0.05).ASPS对仔猪外周血白细胞数量和淋巴细胞数量及血清IL-2和IFN-γ含量的影响存在剂量依赖关系,500～1000 mg/kg的ASPS能显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)提高仔猪外周血白细胞数量、淋巴细胞数量,促进IFN-γ分泌,800 mg/kg的ASPS能显著促进IL-2分泌(P＜0.05),而当剂量低于500 mg/kg时,这种影响效果不显著(P＞0.05).由此可见,ASPS可剂量依赖性地提高断奶仔猪外周血白细胞数量和淋巴细胞数量,增加血清细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌,提高仔猪的免疫功能.%This experiment was conducted to investigate the effects of dietary Acanthopanax senticosus polysac-charide ( ASPS) on blood immune parameters of weaner piglets. This experiment was a 21-d growth assay, in which 96 ' Landrac x Yorkshire' crossbred weaner pigletsaged (28 ± 3) days were randomly allotted to 6 diet-ary treatments supplemented with 0, 150, 300, 500, 800 and 1 000 mg/kg of ASPS, respectively. Each treatment was replicated in 4 pens containing 4 pigs per pen. The results showed that compared with the con-trol , diets supplemented with ASPS did not significantly affect the number of red blood cell (RBC) and neu-trophil in peripheral blood, the content of IL4. and the antibody levels of IgG, IgA and IgM in serum (P > 0. 05) , but significantly increased the number of white blood cell (WBC) and lymphocyte in peripheral blood and the contents of IL-2 and IFN-7 in serum (P < 0. 05). With the increase of dietary ASPS supplemental lev-el, the number of WBC (P <0. 01) and lymphocyte in peripheral blood (P <0.01) , and serum IL-2 (P < 0. 05) and IFN-7 contents ( P <0. 01) were increased quadratically. The effects of dietary ASPS on the num-ber of WBC and lymphocyte in peripheral blood and the contents of IL-2 and IFN-7 in serum had a dose-de-pendent relationship, 500 to 1 000 mg/kg ASPS significantly affected them ( P < 0. 05 or P < 0. 01) except that serum IL-2 content was only affected by 800 mg/kg ASPS (P < 0. 05) , while the effects were not signifi-cant when the supplemental level was less than 500 mg/kg (P >0. 05). The results indicate that the number of WBC and lymphocyte in peripheral blood, and the contents of IL-2 and IFN-7 in serum are improved in a dose-dependent manner, and as a consequence, ASPS can enhance immunological function of weaner piglets.【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2012(024)012【总页数】6页(P2444-2449)【关键词】刺五加多糖;断奶仔猪;免疫功能;细胞因子【作者】韩杰;边连全;刘显军;张飞;杨侃侃【作者单位】沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳 110866;洛阳师范学院生命科学系,洛阳 471022;沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳 110866;沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳 110866;沈阳农业大学科研种猪场,沈阳 110866;沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳 110866【正文语种】中文【中图分类】S816.7免疫应激能够使畜禽在行为和代谢上发生改变，如出现厌食、嗜睡，将用于生长的营养物质转向用于维持免疫反应，最终导致畜禽生长抑制[1-2]。
应用环磷酰胺构建C57BL_6J小鼠免疫抑制模型_杨宪勇
Taian City Central Hospital, Taian 271000, Shandong Province, China Yang Xian-yong★, Master, Technicianin-charge, Taian City Central Hospital, Taian 271000, Shandong Province, China yang_xianyong@ Received: 2012-06-08 Accepted: 2012-06-18
。环磷酰胺是治疗
恶性肿瘤最常用的烷化剂代表药物，其作用主要是破坏 DNA 的结构，从而阻断其复制，导致细胞死亡，具有 广谱抗癌作用，是联合化疗、手术和放疗辅助化疗的常 用药物之一[12]。 环磷酰胺作为一种免疫抑制剂，已有大量研究表 明其能抑制动物的体液和细胞免疫应答，造成动物的 免疫抑免疫增强剂的研究中，常用到免疫抑制模型，如何建立免疫抑制模型成为免疫增强剂作用评价的关键。 目的：应用环磷酰胺构建 C57BL/6J 小鼠免疫抑制模型。 方法：将小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺 50 mg/kg 5 d 组，环磷酰胺 80 mg/kg 3 d 组，环磷酰胺 80 mg/kg 5 d 组，环磷酰胺 100 mg/kg 5 d 组和环磷酰胺 100 mg/kg 隔天给药组。正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水 0.1 mL，连 续 5 d。环磷酰胺 50 mg/kg 5 d 组，环磷酰胺 80 mg/kg 3 d 组，环磷酰胺 80 mg/kg 5 d 组和环磷酰胺 100 mg/kg 5 d 组小鼠分别以环磷酰胺 50，80，80，100 mg/kg 腹腔注射连续 5，3，5，5 d。环磷酰胺 100 mg/kg 隔天给药组小 鼠腹腔注射 100 mg/kg 环磷酰胺，隔天 1 次，共注射 3 次。 结果与结论：与正常对照组比较，腹腔注射环磷酰胺可导致小鼠外周血中 CD3+T，CD3+CD4+T 及 CD3+CD8+T 细胞 明显下降(P < 0. 05)； 谷丙转氨酶(除环磷酰胺 50 mg/kg 5 d、 80 mg/kg 3 d 组)、 谷草转氨酶、 尿素显著升高(P < 0.05)， 其中环磷酰胺 80 mg/kg 5 d 组、环磷酰胺 100 mg/kg 5 d 组和环磷酰胺 100 mg/kg 隔天给药组对肝肾功能的影响更 为明显。提示腹腔注射环磷酰胺可建立 CD3+T，CD3+CD4+T 及 CD3+CD8+T 细胞明显下降的免疫抑制模型，其中以 环磷酰胺 50 mg/kg 5 d 和 80 mg/kg 3 d 方式对肝肾功能的损伤较小。
不同浓度环磷酰胺和地塞米松对小鼠免疫抑制模型建立的影响
不同浓度环磷酰胺和地塞米松对小鼠免疫抑制模型建立的影响张涵淇;王娇;崔圆圆;胡鑫;王德彬【摘要】目的以不同浓度的环磷酰胺(CY)和地塞米松(DEM)建立小鼠免疫抑制模型,研究建模的最适剂量.方法 CY组腹腔注射不同浓度的CY溶液(25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg),DEM组腹腔注射不同浓度的DEM溶液(25mg/kg,50mg/kg和100mg/kg),连续3d,于第7d检测脏器指数、血清中NO 含量和NOS活力.结果 DEM中剂量组和CY高剂量组脾脏指数、NO含量以及NOS活力较正常组有明显升高;胸腺指数较正常组显著降低.结论 50mg/kg的DEM、100mg/kg CY为建立小鼠免疫抑制模型的最适剂量.【期刊名称】《湖北科技学院学报（医学版）》【年(卷),期】2015(029)006【总页数】3页(P461-462,465)【关键词】环磷酰胺;地塞米松;NO;NOS【作者】张涵淇;王娇;崔圆圆;胡鑫;王德彬【作者单位】中南民族大学药学院,湖北武汉430074;中南民族大学药学院,湖北武汉430074;中南民族大学药学院,湖北武汉430074;中南民族大学药学院,湖北武汉430074;中南民族大学药学院,湖北武汉430074【正文语种】中文【中图分类】R967**通讯作者，E-mail:****************作为应用广泛的抗癌药物，环磷酰胺对多种肿瘤均有抑制作用，同时大量实验证实，环磷酰胺能通过抑制细胞增殖来降低机体的免疫功能，因此常用来建立免疫抑制模型[1,2]。
也有相关研究表明地塞米松可通过诱导白细胞和淋巴细胞数量的减少起到免疫抑制的效果。
因此本研究以不同浓度环磷酰胺和地塞米松诱导小鼠建立免疫抑制模型，通过检测模型的胸腺指数、脾脏指数、血清中NO含量和NOS活力，来评价两种药物诱导建模的最佳剂量。
1.1 实验材料1.1.1 动物昆明种小鼠70只，体质量18~22g。
环磷酰胺对断奶仔猪免疫功能的影响
环磷酰胺对断奶仔猪免疫功能的影响韩杰;刘玉兰;洪宇;吴志锋【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2010(000)010【摘要】本试验旨在探讨环磷酰胺(CY)对断奶仔猪免疫功能的影响.选取12头(28±3)d的杜×长×大断奶仔猪,随机分为对照组和CY组.第1天和第7天,给CY组仔猪注射50 mg/kg Bw的CY,对照组仔猪注射等量的生理盐水;第7天和第14天,前腔静脉采血待测;第14天,测定迟发型超敏反应.结果表明:(1)CY可降低第7天断奶仔猪的中性粒细胞数量(P<0.1)及第14天白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞(P<0.05)和单核细胞数量(P<0.1);(2)CY可降低第14天牛血清白蛋白抗体水平(P<0.05);(3)CY可降低第7天干扰素-γ水平(P<0.05).本研究结果表明,CY可抑制断奶仔猪的免疫功能.【总页数】4页(P27-30)【作者】韩杰;刘玉兰;洪宇;吴志锋【作者单位】武汉工业学院动物营养与饲料科学湖北省重点实验室;武汉工业学院动物营养与饲料科学湖北省重点实验室;武汉工业学院动物营养与饲料科学湖北省重点实验室;武汉工业学院动物营养与饲料科学湖北省重点实验室【正文语种】中文【中图分类】S816.7【相关文献】1.天麻多糖对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠体液免疫功能的影响 [J], 李晓冰;展俊平;张月腾;谢忠礼;朱艳琴;陈玉龙;程凯;王君明;李瑞琴2.桂圆益气补血汤与不同剂量龙眼肉多糖配伍用药对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响 [J], 农真真; 蒋洁; 蒙法艳; 何舟; 李雪华3.调肝颗粒剂对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下模型免疫功能的影响 [J], 张秋云;丁相海;刘绍能;章红英;钱英;黄娟;陈忻;段延萍4.楮实子对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响 [J], 王玉凤;凤良元;鄢顺琴;袁静5.双白半水提浸膏对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响 [J], 杨奕樱;潘春;张秋方;叶森梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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活率的影响［Ｊ］．湖北农业科学，２００７，４６（２）：２７８－２８０．
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ｉｎｉｔｉａｌｆｅｅｄｉｎｇｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌｏｆＳｉｂｅｒｉａｎ ｓｔｕｒｇｅｏｎ ｌａｒｖａｅ
动物营养与免疫研究。Ｅ－ｍａｉｌ：４９８３７９００２＠ｑｑ．ｃｏｍ。 通信作者：伍维 高，硕 士，畜 牧 师，主 要 从 事 畜 禽 生 产 方 面 的 研 究。
等用 ０、４０、８０、１６０ｍｇ／ｋｇ的剂量连续 ３ｄ腹腔注射 １日龄的 雏鸡构建模型［２］；Ｈａｒａｄａ等以 １５ｍｇ／ｋｇ的剂量连续 ５ｄ腹腔 内注射的方 式 构 建 猪 的 免 疫 抑 制 模 型 ［３］。 第 二 种 是 间 隔 多 次施药，如 Ｈｕｙａｎ等采用 ５０～２００ｍｇ／ｋｇ分 ２次注射，一次在 第 １天，另一次在第 ４天 。 ［４］ 第三种施药方式是单次用药，
［１８］ＤｅｎｇＤＦ，ＫｏｓｈｉｏＹ，ＹｏｋｏｙａｍａＳ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｆｅｅｄｉｎｇｒａｔｅｏｎ ［２５］徐连伟，邹作宇，董宏伟，等．匙吻鲟仔鱼期饵料的研究［Ｊ］．渔
ｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒａｎｃｅｏｆｗｈｉｔｅｓｔｕｒｇｅｎ（Ａｃｉｐｅｎｓｅｒｔｒａｎｓｍｏｎｔａｎｕｓ）ｌａｒｖａｅ
生猪生产带来重大经济损失。为进一步研究这类免疫抑制性 是众多的构建免疫抑制模型的药物之一。因其作用机制复
疾病，构建稳定的仔猪免疫抑制模型模拟生产中免疫低下现 杂，用环磷酰胺构建免疫抑制模型时，没有统一的标准。纵观
象显得尤为关键。
文献，主要有 ３种指导方案，第一种是连续多次施药，如冯焱
收稿日期：２０１７－０８－２１ 基金项目：湖南省教育厅科研项目（编号：１６Ｃ０５６３）。 作者简介：钟金凤（１９８０—），女，四川南充人，博士，副教授，主要从事
近年来，随着生猪养殖的飞速发展，猪场仔猪的免疫抑制
环磷酰胺 （ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，简称 ＣＴＸ），全称 Ｐ－［Ｎ，
性疾病频频发生。这类疾病致使仔猪群处于免疫抑制状态， Ｎ－双（β－氯乙基）］－１－氧 －３－氮 －２－磷 杂环 己 烷 － 不仅导致猪群疫苗免疫接种失败，而且阻碍仔猪正常生长，给 Ｐ－氧化物，是一种非特异性体液和细胞免疫毒性抑制剂 ， ［１］
１９８５，４７：１８５－１９２．
ｚｙｍｏｇｒａｍ ｏｆｐｒｏｔｅａｓｅ，α －ａｍｙｌａｓｅ，ａｎｄｌｉｐａｓｅｉｎ ｔｈｅｐａｄｄｌｅｆｉｓｈ
［１６］曹志华，邓伦飞，李 萍．不同开口饵料对中华鲟仔鱼生长及成
Ｐｏｌｙｏｄｏｎｓｐａｔｈｕｌａ［Ｊ］．ＦｉｓｈＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１２，３８
（１．湖南环境生物职业技术学院，湖南衡阳 ４２１００５；２．湖南农业大学，湖南长沙 ４１００００）
摘要：为研究环磷酰胺对断奶仔猪免疫抑制效果的影响，选取体质量一致、健康的杜 ×长 ×大、３５日龄断奶仔猪 ４０头，随机分为 ４个处理组，分别为：Ａ对照组，不注射环磷酰胺；Ｂ试验组，连续 ３ｄ注射 ６０ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺；Ｃ试验 组，连续 ２ｄ注射 ９０ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺；Ｄ试验组，一次性注射 １８０ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺。试验 ７、１４、２１ｄ前腔静脉采血，用 于血细胞检测。结果显示，与 Ａ组相比，Ｂ、Ｃ、Ｄ组平均日增质量显著降低（Ｐ＜０．０５），Ｂ、Ｃ、Ｄ组间无显著差异；Ｂ、Ｃ、Ｄ 组 ７、１４ｄ的血清白细胞和淋巴细胞数量显著低于 Ａ组（Ｐ＜０．０５）；７ｄ时 Ｂ、Ｃ、Ｄ组外周血 ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋ Ｔ细胞 显著低于 Ａ组（Ｐ＜０．０５），１４ｄ时外周血 ＣＤ４＋ Ｔ细胞数显著低于 Ａ组（Ｐ＜０．０５）。由此可见，总剂量为 １８０ｍｇ／ｋｇ 的环磷酰胺可减少断奶仔猪白细胞和淋巴细胞浓度，抑制 ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋Ｔ细胞的成熟，具有免疫抑制作用，可用 于构建仔猪免疫抑制模型。因一次性注射操作简便，在 ０～２１ｄ内免疫抑制效果较稳定。因此，建议采用一次注射 １８０ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺构建仔猪免疫抑制模型。 关键词：环磷酰胺；免疫抑制；断奶仔猪；外周血淋巴细胞；白细胞；Ｔ细胞 中图分类号：Ｓ８５２．４ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０１８）０９－０１８０－０４
— １８０—
江苏农业科学 ２０１８年第 ４６卷第 ９期
钟金凤，伍维高，吴支要，等．应用环磷酰胺构建断奶仔猪免疫抑制模型［Ｊ］．江苏农业科学，２０１８，４６（９）：１８０－１８３． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１８．０９．０４３
应用环磷酰胺构建断奶仔猪免疫抑制模型
钟金凤１，伍维高１，吴支要１，汤小朋２
Ｅ－ｍａｉｌ：３０９４２４２２＠ｑｑ．ｃｏｍ。
Ｄｅｒｂｙｓｈｉｒｅ采用 １００ｍｇ／ｋｇ的剂量对 ５周龄无特定病原体仔
櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄
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