安捷伦液质使用中注意
安捷伦高效液相色谱仪操作说明
安捷伦高效液相色谱仪操作说明（一）
一、校枪及样品处理
1. 校枪
仪器：两个小烧杯、分析天平、移液枪1000μL、100μL
步骤：打开分析天平预热，一只烧杯放到称量盘上调零，一只装入纯水。将移液枪1000μL、100μL调至950μL、50μL，分别吸取纯水称质量，如偏大或偏小，调节移液枪直至准确到0.001g。（如枪使用过久或气密性不好，可以准备一个小烧杯装入纯水，每次先轻轻沾湿枪口，甩掉水或在用卫生纸吸取口上的水，再插上枪头使用。）注意慢吸慢放，不要挂珠。
2. 样品处理：用1.5mL离心管取0.5mL发酵液，取出样品后，首现在离心机上离心（13000rap/min 3min）。然后将样品稀释20倍，取950μL纯水、50μL发酵液于离心管中。混匀后在离心机上离心（13000rap/min 3min）。准备自动进样瓶（瓶中放上内衬管），取200μL待测液盖紧盖子。按顺序放到自动进样盘中。
二、开机
1、仪器各组件
将在线脱气器、泵：四元、进样器：自动进样器（六通阀）、柱温箱、检测器：示差折光检测器开关打开。
打开计算机,进入Windows XP 画面,并运行CAC Server程序，打开色谱仪各组件电源，待显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online ，图标打开工作站。化学工作站自动与1200LC通讯。
流动相:将流动相（一般不主张使用偏酸、偏碱的流动相）放入溶剂瓶中，打开冲洗阀，设流速为2ml/min，单击确定，再依次单击泵→控制，选中启动，单击确定，则系统开始冲洗，至管路无气泡为止，切换管路反复操作至所需管路均无气泡。在“控制”选项中选“关闭”，关闭泵，关闭冲洗阀。单击泵下面瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。
安捷伦液相维护之溶剂使用篇
安捷伦液相维护之溶剂使用篇
简介
使用溶剂时，请遵循以下建议。
•遵循阻止藻类生长的建议。
•小颗粒可能会永久堵塞毛细管和阀。因此，始终通过0.4um过滤器过滤溶剂。
•避免或尽量减少可腐蚀流路部件的溶剂。考虑部件的不同材料所能耐受的不同PH范围，如流通池和阀的材料等。
流路材料
安捷伦液相泵流路中使用了一下材料：
1.提供超净管线，配合高端MS监测器使用。它们还与THF兼容。
2.Jet Weaver，换热器
PEEK
PEEK（聚醚醚酮）综合了与生物相容性，抗化学腐蚀，机械和热稳定性相关的极佳属性。因此，PEEK是适用于UHPLC和生化仪器的材料的最佳选择。
其在pH值范围内非常稳定，对许多一般溶剂具有惰性。
还与许多已知化学物质不相容，如氯仿，二氯甲烷，THF，DMSO，强酸（硝酸>10%，硫酸>10%，磺酸，三氯乙酸），卤素或卤水溶液，苯酚和衍生物（甲酚，水杨酸等）。
聚酰亚胺
安捷伦在阀中的转子密封垫和自动进样器中的针底座上使用了半晶状的聚酰亚胺。DuPont是一家聚酰亚胺供应商，其聚酰亚胺产品的商标为Vespel，安捷伦也使用他们的产品。
聚酰亚胺在pH值为1至10的环境及大多数有机溶剂中稳定。它与浓无机酸（如硫酸），冰醋酸，DMSO和THF不相容。它在像氨（如基本状态下的铵盐）这样的亲核物质或醋酸铵中性能会下降。
聚乙烯（PE）
安捷伦将UHMW（超高分子量聚乙烯）-PE/PTFE混合物用于黄色活塞和冲洗密封垫（用于1290 infinity 泵和1260 infinity 泵中的正相应用)。
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪（Agilent HPLC）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域。其操作流程和注意事项如下：
操作流程：
1. 准备样品溶液：根据分析目的选择适当的溶剂，将样品溶解或稀释至所需浓度。
2. 准备色谱柱：根据分析需求选择合适的色谱柱，并按照柱床规定的要求进行预处理，如洗涤、调pH等。
3. 连接系统：将色谱柱安装在仪器上，连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件，确保连接紧密无漏。
4. 设置方法参数：根据分析需求，设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。
5. 系统平衡：启动泵和检测器，运行空白试验，确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。
6. 样品进样：将样品进样器插入样品瓶中，抽取足够的样品并注入进样器，按下进样按钮进行进样。
7. 进行分离：启动泵，使流动相通过柱床，样品分离过程中不断采集检测器的信号。
8. 数据处理：分析和处理检测器输出的信号，得出对应的峰面积、峰高度等结果，进行数据分析和解释。
注意事项：
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器，遵循操作规程，避免误操作和事故发生。
- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好，防止泄漏和污染。
- 选择适当的溶剂和流动相，避免与柱材和样品相互作用，影响分析结果。
- 定期检查和维护仪器，如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等，确保仪器正常运行。
- 样品处理过程中，注意避免光线、温度和湿度的影响，尽量保持稳定的分析环境。
- 使用仪器前，需提前熟悉相关方法和仪器操作，做好实验前的准备工作。
安捷伦液相操作维护保养规程
安捷伦液相操作维护保养规程
一、安全操作规范：
1.操作前必须穿戴个人防护装备，包括实验服、手套、护目镜等。
2.在操作液相设备时，要保证周围环境干燥、清洁无尘。
3.不得将有机溶剂直接排放到下水道中，应按照相关规定进行处理。
4.避免与有机溶剂发生直接接触，防止引起火灾和爆炸。在操作过程
中要小心避免溢漏。
二、操作准则：
1.严密密封液相系统，避免泄漏。
2.在使用气溶胶短管时，注意定期更换新管，并将废弃管进行妥善处理。
3.当不使用设备时，要关闭电源，并将设备清洁干净，避免灰尘和污渍。
4.设备放置时要水平摆放，不可放置在湿润或有机溶剂易波及的地方。
5.使用过程中，要定期检查设备的密封部分是否正常，如有破损应及
时更换。
三、操作流程：
1.根据实验要求，合理选用相关仪器设备，并调整好设备的参数。
2.操作前先进行设备的预热，保持设备恒定的温度。
3.将待测样品注入进样装置中，确保样品完全进入进样管。
4.打开进样阀，将样品注入到色谱柱中，观察色谱曲线并记录相关数据。
5.实验结束后，使用合适的溶剂将色谱柱进行洗脱，防止发生堵塞现象。
6.将设备进行清洗，除去可能残留下来的污物。
7.对设备进行维护检查，保证下次使用时设备处于良好状态。
四、设备保养：
1.定期检查设备的电源线和数据线，如有破损应及时更换。
2.定期清洗仪器的进样口和进样管，防止堵塞。
3.对仪器设备进行定期润滑，确保设备的正常运转。
4.定期校准仪器的测量参数，确保仪器的准确性。
5.确保仪器设备的周围环境干燥，避免设备受潮。
五、事故及处理方法：
1.发生溢漏情况时，立即关闭设备，及时清理溢漏物，并通风排气。
安捷伦液相操作规程
安捷伦液相操作规程
开机
1）打开计算机，登陆windows操作系统。
2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。3）把各流动相放入溶剂瓶中。
4）旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法” 选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。
5）依此切换到B C、D溶剂分别排气。
6）将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80% B=20% 关闭排气阀（顺时针）。
7）再将泵的流量设到0.8ml/min ,2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20—30分钟。
8）把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。二数据米集方法编辑
1）编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名等。
2）编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设
^定。
3）四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中B输入80%（A=100-B-C-D）,在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”
Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程
Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪
的标准操作规程
Ⅰ目的：制定Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液质联用。
Ⅱ范围：适用于Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的使用。
Ⅲ规程：
1.使用条件：使用安捷伦6460质谱仪时，要求使用220V（+5% ~ -10%，50 ~ 60Hz）
单相交流电。注意！因为任何原因造成的断电，请关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。
2.气体供应：仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力
为0.6 ~ 0.7 MPa。气体一般由液氮罐供应，在仪器开机时，可以将罐体上部的两个绿色阀门开到最大后，向回转半圈。注意！在仪器开机（即使处于休眠）时如果长时间停止气体供应，会造成真空腔体内部污染。实验开始前，如果发现液氮罐液体存量不足，请及时联系管理员。另外，仪器需要高纯氮气作为碰撞气，输出压力为0.1 ~ 0.2 MPa。注意！过高的碰撞气分压有可能损坏仪器内部的电磁阀。
3.仪器开机：仪器从断电状态开机时，确认电源已经连接而且气振阀处于关闭
后，打开仪器左侧板上的总电源，随后将前面板左下方的电源按键按下，真空泵即开始工作。大约2~3分钟后，仪器内置的系统启动完毕，可以开启Masshunter软件与仪器通讯。等待四极杆温度达到100℃，高真空达到4 x10-5 Torr之后，即可进行调谐或开始实验。注意！在仪器开始抽真空时，请不要打开前级泵上的气振阀，否则可能因为回油污染真空腔体内部。
安捷伦1260 6120液质联用仪操作规程
Agilent 1260/6120液质联用-单四级杆质谱操作规程
一、目的
建立Agilent LCMS的标准操作规程，使分析人员的操作具有规范性和确保检测数据的准确可靠性。
二、应用范围
所有参与Agilent LCMS操作的分析人员和操作人员。
三、使用标准
Agilent LCMS 化学工作站标准操作培训中文版
四、责任人
分析部负责制作规程；
分析部主管审核；
研发部总监批准；
研发部分析人员和操作人员负责执行
五、概述：
A、工作原理
LCMS的工作原理是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，进入离子源后，试样被离子化，然后聚焦于质谱的质量分析器中，根据质荷比不同而被分离检测，获得各种色谱和质谱数据。色谱信号由色谱工作站进行记录处理。
B、仪器的主要组成部分
Agilent 1260 6120液质联用色谱仪主要由G1311B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B二极管阵列检测器、6120单四极杆质谱检测器和Open LAB
共12 页，第 2 页起草人：审核人：批准人：
生效日期
起草日期：审核日期：批准日期：
起草部门分发部门
修订号批准日期执行日期
六、操作规程：
6.1. 开机
6.1.1 打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力为0.56-0.69Mpa。
6.1.2 准备LC流动相，泵柱塞冲洗溶剂，检查管线连接状态，确认粗真空泵和喷雾室
安捷伦液相操作规程
安捷伦液相操作规程
一开机
1)打开计算机，登陆windows操作系统。
2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪
器1联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。
3)把各流动相放入溶剂瓶中。
4)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”
选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。
5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；
关闭排气阀（顺时针）。
7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱
柱20—30分钟。
8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情
况。
二数据采集方法编辑
1)编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样
品数据文件名等。
2)编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击
“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。
3)四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中
B输入80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250bar，在“时间表”添加编辑梯度。
安捷伦液相操作方法
安捷伦液相操作方法
安捷伦官网提供以下常见操作方法供参考：
1. 样品制备
（1）将样品溶解在有机溶剂中，使样品完全溶解。
（2）将溶液过滤，去除悬浮固体和大分子。
（3）根据需要用纯化柱、弱离子、强离子或其他柱纯化样品。
2. 样品装载
（1）通过注射器或进样器将样品送入流动相中。
（2）流动相的选择根据柱类型和样品特性而定。
（3）保持流速低于柱的最大运行压力。
3. 补偿溶液
（1）根据实验需要选择适当的补偿溶液。
（2）将补偿溶液通过补偿管加入到进样器中，与样品混合。（3）注意不要过度稀释样品。
4. 柱温度
（1）根据柱的材料和分离条件选择合适的柱温。
（2）柱温过高可能会导致溶剂气化和柱效率下降。
5. 流速
（1）根据柱的尺寸和材料选择适当的流速。
（2）保持流速低于柱的最大运行压力。
6. 检测器设置
（1）根据样品的特性选择合适的检测器。
（2）检测器设置包括波长选择、灵敏度、峰宽等参数。
7. 数据处理
（1）数据处理包括样品峰面积、峰高、保留时间、分辨率等参数的测定。（2）根据结果进行数据分析和报告撰写。
液质联用仪原理与操作注意事项安捷伦6410
3
和键合相的坍塌。（特殊柱子除外，如T3柱， 因具有三相键合相，所以高耐水性，用于分
析丙酸、EDTA、三聚氰胺等）
三、液质操作系统的注意事项
紫外检测器 UV
检
测
质谱检测器 MS
器
的
选
择
二极管阵列 检测器DAD
示差检测器 RID
荧光检测器 FLD
蒸发光散色 检测器ELSD
三、液质操作系统的注意事项
2.清洗电喷雾雾化室 将仪器设置为standby,待离子源温度冷却后，用50%异
丙醇-水溶液浸湿无尘布，擦拭弧形电极和喷雾挡盖以 及周围。（切禁直接对着毛细管末端冲洗，压力会增 大，造成涡轮泵负载急剧增加，容易损坏涡轮泵）
液质联用各系统的操作注意事项 质谱系统的维护
一、质谱的系统结构示意图
质谱系统各部件介绍
离子化 传输 12..离毛子细毛C源管V细aopl管ti：la：l电agre产压y离压毛生F子细ra管g导m出入e口nt电通or 道，，并将将离产子C生源e碰onll撞e的i产sr能gio离y生n 子的在离电子场电的压子倍作EM增进V用电入下质进谱入，毛同细管 时隔离外部的常压与质谱内部的高真空
LDD
高效液相色谱质谱联用（HPLC/MS）是指高效液 相色谱与质谱串联的技术，是将应用范围极广的 高效液相分离方法与灵敏、专属、能够提供分子 量和结构信息的质谱法结合起来的一种现代分析
三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程
6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程
Ⅰ目的：制定 6460 三重串联四级杆液质联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液质联用。
Ⅱ范围：适用于 6460 三重串联四级杆液质联用仪的使用。Ⅲ规程：
1.使用条件：使用安捷伦6460质谱仪时，要求使用220V（+5% ~
-10%，50 ~ 60）单相交流电。注意！因为任何原因造成的断电，请关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。
2.气体供应：仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干
燥气，输出压力为0.6 ~ 0.7 。气体一般由液氮罐供应，在仪器开机时，可以将罐体上部的两个绿色阀门开到最大后，向回转半圈。注意！在仪器开机（即使处于休眠）时如果长时间停止气体供应，会造成真空腔体内部污染。实验开始前，如果发现液氮罐液体存量不足，请及时联系管理员。另外，仪器需要高纯氮气作为碰撞气，输出压力为0.1 ~ 0.2 。注意！过高的碰撞气分压有可能损坏仪器内部的电磁阀。
3.仪器开机：仪器从断电状态开机时，确认电源已经连接而且
气振阀处于关闭后，打开仪器左侧板上的总电源，随后将前面板左下方的电源按键按下，真空泵即开始工作。大约2~3分钟后，仪器内置的系统启动完毕，可以开启软件与仪器通
讯。等待四极杆温度达到100℃，高真空达到4 x10-5 之后，即可进行调谐或开始实验。注意！在仪器开始抽真空时，请不要打开前级泵上的气振阀，否则可能因为回油污染真空腔体内部。
4.仪器调谐：仪器距离上次调谐超过一个月，或者重新开机预
安捷伦LC1260液相色谱操作规程及使用注意事项
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项
一、操作规程
㈠开机
1．把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。
2．打开计算机，打开主机各模块电源（从上至下），再双击桌面“LC1260(联机)”图标，进入化学工作站。
3．旋开排气阀（逆时针），右键单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。将泵流量设为“5mL/min”，溶剂A设为“100%”，打开泵，排出管路中的气体，直到由贮液瓶到泵入口整个管路中无气泡为止，此过程约需要5min。
4．依次切换到溶剂B、C、D，分别排气。
㈡数据采集
1. 编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据，文件名等。
2. 编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，单击“确定”进入“方法注释”，编辑好单击“确定”。在“选择进样源”中选择“手动进样”单击“确定”，在“设置方法”中进行参数设定。
3. 四元泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1mL/min，在“溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数，在右侧注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”,在
“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子，在“时间表”添加编辑梯度。
4. TCC（柱箱）参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”，使柱箱的温度左右一致。
5. VWD检测器参数设定：在“波长”右侧的空白处输入所需的检测波长，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，再设置“停止时间”和“后运行时间”。
安捷伦液相色谱仪使用问题与解决方法 液相色谱常见问题解决方法
安捷伦液相色谱仪使用问题与解决方法液相
色谱常见问题解决方法
Agilent液相色谱仪是一种应用特别广泛的有机多组分化学分析仪器。它具有分别效能高,分析速度快,样品用量少,可进行多组分测量等优点。Agilent液相色谱仪在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪器。但是由于人员素养样品的性质以及仪器本身等方面的原因,常常显现这样那样的分析故障严重影响了正常的生产分析。所以把握一种精准、快速的排出Agilent液相色谱仪故障的方法特别紧要。
安捷伦液相色谱仪1260
1 、如何成为真正的液相高手
（1）、确定要珍惜仪器厂商供应的各种培训，由于他们的培训很有针对性，而且很专业。
（2）、要多做，液相是一个比较多而杂的系统，在做样的过程中，总会碰到各种问题，通过本身的大脑解决问题，渐渐积累就会穴道很多东西。其次要敢于动手，不要总挂念会把仪器弄坏，拆仪器的时候细心一点就好了，记着各个部件的次序，连接方式。动手次数多了，成功的机会就多了，也就更有信念了。
（3）、要看一些相关理论的书籍，要了解一些关于液相的分别原理，如何优化色谱系统和峰形，能够本身解决一些分别的问题。这样才是一个液相高手。
假如只是会很娴熟的使用工作站和维护和修理仪器，排出故障，我觉得这只是一个操作高手，而不是一个真正的液相高手。
2、新装82341 GPIB 板，如何与ChemStation 通讯？
液质联用仪原理及操作注意事项安捷伦ppt课件
二、定量方法的开发
逻辑顺序：
MRM Product Ion Scan
4多重反应监测MRM 定量，使用已优化好 的fragmentor,优化 每个子离子的碰撞能
MS2 SIM
MS2 Scan
1.全扫描scan,确认 得到化合物离子质量 数
2.选择离子模式，优 化毛细管出口电压 (fragmentor),保证 母离子的传输效率
三、液质操作系统的注意事项
紫外检测器 UV
检 测 器 的 选 择
质谱检测器 MS
二极管阵列 检测器DAD
示差检测器 RID
荧光检测器 FLD
蒸发光散色 检测器ELSD
三、液质操作系统的注意事项
正 负 离 子 模 式 选 择 的 一 般 原 则 ：
适用于碱性样品，可用乙酸或 甲酸对样品甲乙酸化。样品中 含有仲氨或叔氨时可优先考虑 使用正离子模式（如磺胺类、 喹诺酮类物质）
4. MRM
优化子离子碰撞能
三、液质操作系统的注意事项
•流动相以及样品必须过膜 （有机滤膜、水系膜） •流动相应超声脱气 10~20min,否则压力易 波动（装有在线脱气机， 影响会小一些） •反相常用流动相为甲醇、 乙腈、水以及缓冲盐溶液。
• 注意：LC中常采用无机缓冲 盐，LC/MS中则应该使用挥 发性的缓冲盐，如甲酸铵、 乙酸铵；或挥发性酸碱甲酸、 乙酸、氨水等调节pH
安捷伦12606120液质联用仪操作规程
Agilent 1260/6120液质联用■单四级杆质谱操作规程
目的
建立Agilent LCMS的标准操作规程，使分析人员的操作具有规范性和确保检测数据的准确可靠性。
二、应用范围
所有参与Agilent LCMS操作的分析人员和操作人员。
三、使用标准
Agilent LCMS化学工作站标准操作培训中文版
四、责任人
分析部负责制作规程；
分析部主管审核；
研发部总监批准；
研发部分析人员和操作人员负责执行
五、概述：
A、工作原理
LCMS的工作原理是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，进入离子源后，试样被离子化，然后聚焦于质谱的质量分析器中，根据质荷比不同而被分离检测，获得各种色谱和质谱数据。色谱信号由色谱工作站进行记录处理。
B、仪器的主要组成部分
Agilent 1260 6120液质联用色谱仪主要由G1311B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B二极管阵列检测器、6120单四极杆质谱检测器和Open LAB 色谱工作站
等部件组成。
共12页，第2页
起草人：
审核人：
批准人：
生效日期
起草日期：
审核日期：
批准日期：
起草部门
分发部门
修订号 批准日期 执行日期
六、 操作规程:
6.1. 开机
6.1.1 打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力为
0.56-0.69Mpa 。
6.1.2 准备LC 流动相，泵柱塞冲洗溶剂，检查管线连接状态，确认粗真空泵和喷雾室 的废气排到实验室外部。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
J. W. Dolan and P. Upchurch.
Color Red Green Blue
LC/GC Magazine 6:788 (1988)
i.d. 0.12 mm 0.17 mm 0.25 mm
谢谢！
100,000 分 10,000 子 量 1000 APCI
ESI
nonpolar
Very polar
ESI
低流速 窄径柱
高流速 常规柱
fragmentor Vcap
高电压
源参数为什么重要？
•确认喷雾气/干燥气/鞘流气设置正常。
Tips: 使用含水量高的流动相要适当提高气体流量和温度。
• 确认喷雾针是否缺损或者堵塞，必要时更换。
Agilent 质谱日常维护 -真空系统 -ESI -APCI -毛细管的清洗和钝化 -八级杆的清洗
质谱维护时间表
任务 冲洗样品通路 清洁喷雾室 检查前级真空泵油的液面 开启气镇阀 检查并清空排污瓶 清洁或钝化毛细管 更换在线过滤器筛板 每日 X X X X X X X 每周 每6个月 根据需要
Agilent 1100 自动进样器工作原理
HPLC常用的色谱柱接头及管路
Swagelok
0.090 in.
Waters
0.130 in.
Parker
0.090 in.
Rheodyne
0.170 in.
Valco
0.080 in.
Uptight
0.090 in.
Troubleshooting LC Fittings, Part II.
Agilent 1100在线脱气机工作原理
Tips: •G1322A通道内部体积12 mL， G1379A/B内部体积1 mL 。更换溶剂后 请冲洗2倍通道体积后再开始实验。 •使用G1379，冲洗通道时的流量最好不 要大于2 mL/min。
Agilent 1100/1200 在线脱气机及溶剂管理
• 开机和放空之前，必须确认前级泵气镇 阀处于关闭状态。
• 分子涡轮泵降速时需要散热，所以应避 免采用直接关电源关机或突然停电。 • 前级真空典型值为2 torr。过高的前级 真空可能源于长期未开气镇阀或者泵油需 要更换。
HPLC
在线脱气机 四元泵／二元泵 自动进样器
柱温箱
检测器
Agilent 1100/1200 在线脱气机及溶剂管理
防止堵塞溶剂过滤器
污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将缩短溶剂过滤器的使用寿命 ，并且影响色谱泵的运行。另外，其分泌物会很容易在质谱上表 现为干扰或者离子化抑制。这在水相溶剂中尤其如此。下列建议 将会防止质谱分析受到影响并延长溶剂过滤器的使用寿命。 - 使用棕色的溶剂瓶来减缓藻类生长。
- 每两天更换水相溶剂。
更换前级泵泵油
更换喷雾针 清洁离子光学
1年
1-2 年 1-2 年
更换电子倍增器
2-3 年
Agilent 6400 QQQ MSD 日常维护
前级泵的日常维护
Tips: • 当质谱开机时，就应通干燥气，尽量避 免抽入空气。 • 定期检查前级泵废气过滤器，如果存有 较多泵油，打开气振阀可以促使泵油回流。 为防止停电或误操作导致泵油反抽到系统 内部，请在泵油回流后及时关闭气镇阀。
几个名词
• • • • • TIC、EIC、ECC、BPC Tune、Calibration CID( 传输区、碰撞池)、SIM Mass accuracy（ppm=mass error/MW*106) Quasi-molecular ion（[M+H]+\ [M+Na] +）
注意事项：
• • • • 1 双蒸水、三蒸水？ 2 表面活性剂？ 3 三氟乙酸（TFA），三乙胺（TEA）? 4 关机
Tips: 毛细管电流、喷雾室电流是否稳定也能判定喷雾和干燥的状况。另外， to MS/to waste压力差和废液桶中残留溶剂的积存状况也可以显示喷雾针的问题。
关注参数：
• 真空
• 毛细管电流(capillary current) • 喷雾式电流(chamber current) • HPLC泵压
Agilent 1100/1200 在线脱气机及溶剂管理
检查溶剂过滤器 －拧开脱气机出口或比例阀入口管线，此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶 剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。
－查看过滤器是否变色．
－临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常． 清洁溶剂过滤器
将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。将堵塞的过滤器放在装有浓 硝酸 （35％）的烧杯里浸一小时。 Tips: 用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。 • 如何简单判断脱气机腔体或溶 剂过滤头是否堵塞？ 将过滤器重新装好。
- 避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。
Tips: • 如果经常使用同一方法，可以将平时放置水相的A瓶，更换为预先 配好的流动相（等度分析）或者初始比例的混合流动相（梯度分 析）。当流动相中有机溶剂比例大于10%时，微生物生长会被抑制， 可以保存较长时间。 • 较长时间不使用系统时，请用甲醇将水相管路中溶剂冲洗替换之后 再停机，防止微生物生长。
安捷伦液质培训
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
质谱特点：
• 1 样品必须离子化
• 2 必须具有一定的真空 • 3 必须测量质荷比（m/z）
质谱仪的组成
inlets
Ion source
Ion Optics
Mass analyzer
Detector
数据处 理
Vacuum system
离子源
• ESI、APCI、复合源、 其它（APPI,MALDI）
注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统． • 关闭泵，拧开脱气机出口或比 例阀入口管线，此时溶剂会因 为重力流出，脱气机或溶剂过 滤头堵塞时，溶剂会流出不畅 或不流出。
Agilent 1100/1200 四元泵／二元泵
Agilent 1100/1200 色谱泵工作原理
Agilent 1100/1200 自动进样器