黄芪和白术对庆大霉素肾毒性的保护作用_王景霞

【关键词】 庆大霉素； 肾毒性； 黄芪； 白术
Protective effects of huangqi and baizhu on kidney injury of rat induced by gentamicin WANG Jing-xia ， DENG Wen-wei， QI Ya-ling， LI Yao， LIU Yue-xia， WANG Shu-ying， YUANG De-xin． Dpartment of histology and embryology， College of Basic medicine， Jiamusi University， Jiamusi 154007 China
有 文 献 报 道 尿 NAG 的 测 定 能 评 价 庆 大 霉 素 引 起 的 肾 毒 性 作 用 ［6］。 本 实 验 证 实 黄 芪 和 白 术 能 减轻庆大霉素导致的尿 NAG 增高幅度 ，使已增高 的尿 NAG 值较快地恢复至基线 ，从而间接 推 测 黄 芪和白术能减轻庆大霉素导致的肾毒性。 本实验 形态学检查证实黄芪、 白术可以减轻庆大霉素的 肾毒性， 对肾近曲小管上皮细胞微绒毛的保护作 用， 使微绒毛早期水肿减轻， 此结果与肾皮质匀 浆、尿生化指标改变一致，实验结束后，模型组肾 皮质匀浆 MDA 较正常对照组和各预防组增高。 肾 皮 质 匀 浆 中 GSH-Px 活 性 较 正 常 对 照 组 和 各 预 防 组下降因为 MDA 是脂质过氧化指标之一，GSH-Px 是 清 除 H2O2 的 抗 氧 化 酶 ， 模 型 组 的 MDA 升 高 和 GSH-Px 活 性 下 降 ，提 示 庆 大 霉 素 所 致 的 肾 损 害 有 脂 质 过 氧 化 和 氧 自 由 基 的 参 与 ，在 清 除 H2O2 的 过 程 中 GSH-Px 被 消 耗 ，黄 芪 、白 术 组 肾 皮 质 匀 浆 中 MDA 升 高 不 明 显 ，GSH-Px 值 下 降 减 轻 ，提 示 这 种 预防作用可能与黄芪、 白术清除自由基和抗脂质 过 氧 化 损 伤 有 关 。 上 述 结 果 提 （下转第 197 页）
解 剖 学 研 究 2009 年 第 31 卷 第 3 期 Anat Res, 2009, Vol． 31, No．3
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· 论著 ·
黄芪和白术对庆大霉素肾毒性的保护作用
王景霞 邓文伟 1 齐亚灵 李尧 刘月霞 王淑英 原得新 （佳木斯大学基础医学院， 黑龙江 佳木斯 154007）
【摘要】 目的 为减轻庆大霉素的肾毒性，应用中药黄芪、白术进行了防治肾毒性的研究。 方法 给大鼠腹腔注射庆 大霉素制成中毒模型，分别注射黄芪、白术预防肾毒性，用药前、后检测大鼠的肾功能、尿酶等指标，实验结束后进行肾光 镜 、电 镜 检 查 。 结 果 各 实 验 组 尿 （N-乙 酰-β-D 氨 基 葡 萄 糖 苷 酶 ）NAG 酶 均 比 正 常 组 增 高 ，其 中 模 型 组 明 显 增 高 。 模 型 组 肾 皮 质 中 丙 二 醛 （MDA）含 量 比 其 它 各 组 增 高 ，而 预 防 组 与 正 常 组 之 间 差 异 不 显 著 。 肾 皮 质 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶 （GSH-Px）活 性较正常对照组下降，且模型组较各预防组下降明显。 光镜检查发现模型组肾近曲小管上皮细胞广泛变性与坏死，各预防 组有灶状至片状变性，偶见坏死。 结论 黄芪、白术对庆大霉素的肾毒性有保护作用。
硫酸庆大霉素注射液（佳木斯大学药厂）、黄芪 为市售生药制成浸剂每毫升含生药 1．5 g、白术为市 售生药制成浸剂每毫升含生药 1 g。 1．2 方 法
各组动物在实验前及实验第 7 天分别放入代 谢 笼 中 取 尿 ， 测 N-乙 酰-D-氨 基 葡 萄 糖 苷 酶 （NAG）在 最 后 一 次 注 射 庆 大 霉 素 24 h 后 ，大 白 鼠 经巴比妥钠麻醉后将左侧 肾 组 织 分 别 固 定 于 10％ 甲醛及 2％戊二醛中，进行光镜及电镜检查，右肾 测 定 丙 二 醛 （MDA）及 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶 （GSHPx ） ， 检 测 方 法 如 下 。
1 材料和方法
1．1 动物及分组 大 白 鼠 40 只 ，体 重 280 g 随 机 分 为 4 组 每 组
10只，1 组为空白对照组腹腔注射生理盐水 3 mL· kg·d －1 ×项目：佳木斯大学汤玉福基金 1． 佳 木 斯 大 学 口 腔 医 学 院 154007
【Key words】 Gentamicin； Nephrotoxicity； Huangqi； Baizhu
庆大霉素为一种抗生效果好、抗菌谱广、价格 低廉且应用广泛的抗生素， 文献指出庆大霉素在 使 用 过 程 中 肾 毒 性 的 发 病 率 达 10％～20％，限 制 了 庆大霉素的使用范围，因此，对庆大霉素肾毒性的 机制及防治方法的研究具有重要的临床意义。 我 们拟运用黄芪及白术防治庆大霉素肾毒性， 并对 其机制进行初步探讨。
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尿 NAG（U ／ g cr）的 测 定 参 照 大 连 金 港 制 药 有 限 公 司 NAG 试 剂 盒 说 明 操 作 。 肾 皮 质 匀 浆 MDA （nmol ／ mg）测 定 参 照 莫 间 ［1］的 方 法 操 作 。
【Abstract】 Objective An experiment study was carried out in rats on effects of huangqi and baizhu on nephrotoxicity cause by gentamicin． Methods Rats were allocated randomly into 1．normal group 2． model group 3． huangqi group 4． baizhu group． The toxil models were made by abdominal injection of gentamicin． In experimental 3 ， 4 group， huangqi or baizhu were intragastric administrated respectively after giving the gentamicin． Renal function ， vorkinase and morphological were detected at different intervals． Results Urine NAG and MDA were significantly higher in group 2 －4 ， especially in group 2， than that in group1． GSH-Px activity decreased singnificantly in all groups ， especially in group 2， than that in normal group． Extensive degeneration and necrosis in proximal tubule epithelial cells and vacuolization in distal tubules were found in modle group． However， only focal to patch degenration was found in tissues of huangqi and baizhu groups and necrosis was seldom observed ． Conclusion Huangqi and baizhu may play a role in the protection of gentamicin nephrotoxicity．
3讨论
庆大霉素导致肾损害的详细机制尚未研究清 楚 ，目 前 有 线 粒 体 损 伤 、 溶 酶 体 损 伤 、Na-KATPsea 受抑制和自由基损伤学说， 其中自由基损伤学说 能较好解释庆大霉素肾毒性的发病过程。 庆大霉
表 1 用 药 后 大 鼠 肾 皮 质 匀 浆 MDA、GSH-Px 及
尿 NAG 变 化
高， 模型组与对照组相比差异有统计学意义 （P＜ 0．01）， 模 型 组 比 对 照 组 高 3 倍 ， 而 各 预 防 组 中 NAG 略有升高，但比模型组明显降低（P＜0．01）。 2．2 肾皮质匀浆 MDA 与 GSH-Px 的变化
肾 皮 质 匀 浆 中 MDA 含 量 模 型 组 均 较 其 他 各 组 有 显 著 增 高 （P＜0．01）， 其 他 各 组 间 差 异 比 较 无 统计学意义。 肾皮质匀浆中 GSH-Px 活性下降，模 型 组 均 较 其 他 各 组 下 降 明 显 （P＜0．01）， 黄 芪 组 和 白 术 组 较 对 照 组 显 著 下 降 （P＜0．01 ） 。 2．3 组织形态学改变
肾 皮 质 匀 浆 GSH-Px （U ／ mg） 活 性 检 测 ， 参 照 南京建成生物工程研究所试剂室提供的方法操 作。 1．3 统计学处理
数据以 x ± s 表示，用 t 检验进行统计学分析。
2结果
2．1 尿 NAG 变化 实 验 结 束 后 模 型 组 和 各 预 防 组 尿 NAG 值 升
*与Ⅰ组 相 比 P＜0．01
素经肾小球滤过后在近曲小管内积聚并与近曲小 管刷状缘泡状结构上的酸性磷脂受体结合。 庆大 霉素绝大多数被膜上富含酸性磷脂的初级溶酶 体吞饮摄取，它能抑制溶酶体内磷脂 A 和 C 的活 性 ［2］， 使 磷 脂 降 解 障 碍 ， 导 致 磷 脂 堆 积 ， 使 膜 结 构 改变，造成溶酶体通透性增高，膜破裂和多种水解 酶溢出并引起细胞的继发性损伤。 有实验证明黄 芪、 川芎嗪有清除自由基和抗脂质过氧化损伤的 作用。 黄芪具有扩张血管、降压、利尿作用，能增加 血流量， 反馈性抑制肾素－血管紧张素－醛固酮系 统，达到改善肾功能的目的［2］。 黄芪的主要成分之 一为黄芪总黄酮， 具有明显清除超氧化物阴离子 自 由 基 和 羟 自 由 基 等 多 种 自 由 基 功 能 ［3，4］，白 术 能 提 高 12 月 龄 小 鼠 红 细 胞 超 氧 化 物 歧 化 酶 （SOD） 活 性 ， 有 清 除 氧 自 由 基 作 用 ［5］。