血性胸腹水涂片制作技术的探讨.

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血性体液标本涂片制作方法探讨

组经１％盐酸处理后显示：细胞几乎消失或淡染，它各０红其细胞完整不变形，胞结构清晰，色鲜艳，景清晰（细着背图
３）。
３讨论
Ａ组是作者日常工作中，用的制片染色方法，然能常虽够保持细胞形态的完整性，色结果也比较满意，染但是对于
．
赫？
血性体液标本，次量＞０ｌ每２０ｍ。１２方法用吸管吸取标本底部液体ｌｌ离心管，．５ｍ入２００ｒｒｉ，心１ｎ倒掉上清液，沉渣均匀地涂片３０ａｎ离／０ｍｉ，取
２２２２０３
［］熊正文，２胡海霞，李春光，．盐酸水解暴露抗原促进组织化学等反应的研究［］Ｊ．中国组织化学与细胞化学杂志，９６，（）１９５１：
７．１
作者简介：韩
磊，，男主管技师。Ｅｍｉｈｎｅａ１．ｏ・ａ：ａｇｄ＠６ｔｍｌ３
文章编号：０１７９（００００６０１０ — ３９２１）６— ７５— ｌ
一
‘ ：，临床送检的血性体液标本（如血性胸水、腹水、血尿等）涂片作ＨＥ染色后，镜下可见
较多的红细胞，景深染成红色，响结果的观察，何既去背影如
临床与实验病理学杂志
－ＣｉＥｐＰｔｌ２１ｅ；６６，ｌｘａｈ００Ｄｃ２（）ｎｏ
・６７５・

血性胸腹水涂片中红细胞去除方法的探讨

ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐ，ａｄｄｉｎｇ０．５％ｐｉｃｒｉｃａｃｉｄｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｏｇｕｐ，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｒｏｇｕｐｗｉｔｈｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔ．ＲｅｓｕｌｔｓＡｌｒｇａｅｎｕｍｂｅｒｏｆｒｅｄｂｌｏｏｄｃｅｌｌｓｗｅｒｅｏｕｆｎｄｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｏｇｕｐｈａｄａｃｌｅｒａｂａｃｋｇｒｏｕｎｄｗｉｔｈｏｕｔａｎｙｒｅｄｂｌｏｏｄｃｅｌｌｓ，ａｎｄｄｉｄｎｏｔａｆｆｅｃｔｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｙｇｆｏｏｔｈｅｒｃｅｌｌｓ．Ｃｏｎｄｕｓｉｏｎｓ０．５％ｐｉｃｒｉｃａｃｉｄｃａｎｒｅｍｏｖｅｔｈｅｒｅｄｂｌｏｏｄｃｅｉｌｓｉｎｔｈｅｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｃｈｅｓｔｗａｔｅｒｓｍｅａｒ，ｉｓｈｅｌｐｆｕｌｔｏｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｂｌｏｏｄｙｐｌｅｕｒａ１ｅｆｆｕｓｉｏｎｃｙｔｏｌｏｙ，ｇｗｏｒｔｈｙｆｏｐｏｐｕｌａｉｒｚａｔｉｏｎａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎ

胸腹水沉积物涂片结合切片在肿瘤细胞学中的应用.

胸腹水沉积物涂片结合切片在肿瘤细胞学中的应用【关键词】胸腹水【摘要】目的探讨胸腹水沉积物涂片结合切片检查在肿瘤细胞学诊断中的意义。

方法对临床送检可疑肿瘤患者110例，做胸腹水沉积物涂片进行涂片和石蜡切片观察，采用瑞-姬姆萨氏染色，HE染色。

结果 110例涂片中肿瘤细胞阳性者55例，可疑6例，阳性率59.4%，切片中肿瘤细胞阳性者60例，可疑3例，阳性率66%。

涂片阳性病例切片无1例阴性，最后结果证实切片阳性率高于涂片。

结论胸腹水沉积物切片避免了单一涂片取材的局限性。

切片上细胞相对集中，易于观察肿瘤的组织形态，可增加肿瘤细胞学的诊断价值。

提高检出的阳性率，也可有效地降低假阳性率，为临床诊断提供可靠的依据。

【关键词】胸腹水肿瘤涂片切片胸腹水脱落细胞学检查是诊断肿瘤的重要方法。

由于此项检查损伤小，方法简易，结果准确而受到重视。

然而，单一的涂片方法受到多种因素影响，阳性率低，分类困难，给诊断带来了不少困扰。

切片技术在脱落细胞学中的应用，提高了肿瘤细胞的阳性检出率。

笔者在工作中经过实践探索，对胸腹水沉积物用涂片结合切片检查，取得了较满意的效果。

1 资料与方法1.1 资料本组对临床送检可疑肿瘤患者的胸腹水110例分别做涂片和石蜡切片。

男80例，女30例，年龄33～83岁。

1.2 方法取送检胸腹水50ml置于离心管内，2500r/min，离心10min，弃去上清液，吸取沉积物涂片2张待干，剩余的沉积物全部用纱布或滤纸包裹，中性甲醛固定45min。

切片制作:将固定好的沉积物于梯度乙醇脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋、4～6μm厚切片，HE染色。

2 结果本组110例胸腹水标本中，涂片检查肿瘤细胞阳性者54例，可疑6例，阴性50例。

切片检查肿瘤细胞阳性者60例，可疑5例，阴性45例。

涂片阳性病例切片检查无1例阴性，最后结果切片检查阳性率高于涂片检查。

见表1。

表1 110例胸腹水涂片与切片癌细胞检查结果比较（略）胸腹水中不仅可以看到各种原发肿瘤的细胞，也可以看到各种转移性肿瘤的细胞，人体各种恶性肿瘤细胞基本上都可能在胸腹水中看到，常见的有腺癌（分化好的、分化差的），鳞癌（分化好的、分化差的），未分化癌（大细胞型、小细胞型）等。

提高血性胸、腹水阳性检出率的制片法

� 材料与方法
取粤北人民医院病理科近 2 年来 200 例血性胸腹水进行涂片找异常细胞和石蜡包埋切片对比试验.
� � � � � 一组取新鲜 � � 血性 � � 胸 � 腹水 5 1 0 L 倒入试管中在离心机内 ( =3 500 4 0 00 / 离心 1 5 3 0 , 离心后
光学显 � 微镜 1 0 1 0 倍及 1 0 40 倍分别分级涂片观察 . 另一组对这 20 0 例胸腹腔积液的离心沉淀物进行沉淀物石蜡包埋切片观察.
� 结果判� 断镜下观察到 1 个或 1 个以上癌肿细胞或不典型增生细胞均为阳性
� 表 2 检出的转移性腺癌及低- 未分化癌占 2 0 0 例中总癌肿阳性结果为 5% .
表血性胸 �腹水离心后不同方法及部位检测结果 ( � � � � � ) 阳性例数 / 例 � � 石蜡包埋阴性例数 /例 1 14
� 上清- 沉淀中间层 � 4 1 0 沉淀物中份沉淀物底份 � � 22 1 � 5 15
镜下未观察到癌肿
或不 � 典型增生 � 细胞为阴性. 采用 P 13 .0 软件分析取 �<0 . 05 有统计学差异 �<0.01 有显著统计学差异.
�
试验结果
涂片找异常细胞组的镜 � 下观察情况如表 1 所示. 上清液与沉淀物之间灰白色部分的细胞涂片可见较
0. 0 0 0 ,有显著统计学差异沉淀物中,底层之间
0. 00 1 ,有显著统计学差异.

一种血性胸腹水细胞预处理液的制备

章栽良平金良
顾元忻
（湖州市中心医院，浙江湖州３１３０００）
【摘要】目的寻找一种既能有效去除红细胞又能保存肿瘤细胞的血性胸腹水预处理液。方法取血性标本适量（１５～２ＯａｒＬ）分别倒入６组离心管，其中Ａ～Ｅ组为有不同剂量的８０％乙醇、甲醇、冰醋酸组成５种细胞预处理液，Ｆ组按传统
肠蠕动，促进排便。如平时有便秘患者，可予口服
福松、杜密克等缓泻剂，必要时给予开塞露塞肛，但
要避免给予强泻药，以免使肠道敏感性减弱，加重
便秘；（３）膳食结构应合理，增加高膳食纤维食物的
摄取，避免刺激性食物的摄人，增加流食，减少不易消化食品的摄取，以少食多餐为原则Ｌ５Ｊ。
离心方法制备含血涂片，观察同１例胸腹水不同浓度处理液处理后，涂片背景及细胞情况。结果Ｄ组细胞涂片背景最干净，肿瘤细胞结构最清晰。结论效果最佳。当混合液中８０％乙醇和甲醇比例为２：１，冰醋酸浓度占２０％时，血性胸腹水涂片背景制片
【关键词】细胞预处理液
血性胸腹水
细胞涂片
在胸腹水涂片制片过程中，血性胸腹水经常会使涂片被红细胞覆盖，给细胞学诊断带来一定的困难，甚至会导致漏诊。现介绍一种胸腹水预处理液，经其处理后制作的胸腹水涂片消除了背景模糊的现象，肿瘤细胞显示更清晰，从而提高了血性标本中癌细胞的检出率，现将相关实验情况报道

血性胸水细胞蜡块制作的体会

黑龙江医学
１０６
第４ｌ卷
２０１７年
第２期
ＨＥＩＬＯＮＧＪＩＡＮＧＭＥＤＩＣＡＬＪＯＵＲＮＡＬＶｏ１．４１Ｎｏ．２Ｆｅｂ．２０１７
血性胸水细胞蜡块作的体会
林旭，周强
（南京大学附属鼓楼医院病理科，江苏南京２１０００８）摘要：目的研究血性胸水细胞蜡块制作的效果。方珐南京大学附属鼓楼医院病理科２０１３－２０１５年临床２ｈ内送检新鲜血性胸水２０例，每份标本均分３份，９５％乙醇固定３种不同时间进行细胞蜡块制作，常规切片ＨＥ染色观察结果。结果本研究方法制作的细胞蜡块常规ＨＥ切片完整、镜下细胞结构清楚、背景干净；三种不同时间做出细胞蜡块个数率并无统计学意义，但从获取细胞量和时间上综合考虑９５％乙醇固定４ｈ的制作效果最好。结论
ＴｏｗｅｒＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｏｆＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ，２１０００８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｂｌｏｏｄｙｐｌｅｕｒａｌｅｆｆｕｓｉｏｎｃｅｌｌｂｌｏｃｋｅｆｅｃｔ．ＭｅｔｈｏｄＳｅｌｅｃｉｔｎｇｆｒｅｓｈｂｌｏｏｄｙｐｌｅｕｒａｌｅｆｕ —

胸腹水细胞块切片结合免疫组化用于病理诊断的价值体会

论著·临床辅助检查CHINESE COMMUNITY DOCTORS 中国社区医师2019年第35卷第30期胸腹腔积液属于临床发生率较高的一种疾病，表现出复杂的发病机制。

对其良恶性实施判定，对于疾病的诊治及预后具有显著价值。

在进行诊断期间，胸腹水脱落细胞学检查方法的应用较为普遍，但是细胞形态学的单纯采用无法对病理诊断准确性做出保证，并且对于正确诊断会产生一定程度的影响[1]。

本次研究将探讨进行病理诊断期间胸腹水细胞块切片+免疫组化方法的应用可行性，为疾病临床顺利诊治奠定基础。

资料与方法2017年1月-2019年2月收集临床送检胸腹水标本140例，男90例，女50例；年龄19～73岁，平均(45.29±2.35)岁。

方法：①合理展开常规细胞涂片操作：对140例送检胸腹水标本，每例均约为100mL，于阴凉位置保持5min 静置，之后选择50mL 自然沉淀标本于离心管中进行安置，之后保持2500r/min 转速进行10min 离心，并且将上清液进行吸出。

选择沉淀物展开涂片操作，利用乙醇(95%)展开10min 固定操作，利用苏木素进行3min 染色。

之后利用盐酸酒精(1%)进行5s 分化，并且保持5min 流水反蓝，5s 伊红染色，进行1次水洗；利用梯度酒精展开脱水操作，二甲苯透明以及中性树胶封片操作。

安排高年资细胞病理医生2名展开涂片形态学观察[2-3]。

②合理完成细胞沉渣切片制作：针对常规细胞涂片疑似的23例恶性胸腹腔积液标本，将完成常规细胞学检查所剩余的细胞学标本于离心管(20～50mL)移入，之后保持2500r/min 进行10min 离心。

完成后，针对上清液利用吸管吸掉，并且准备中性福尔马林(10%，20mL)于含沉淀物离心管中加入，将振荡仪放入保持10min 振荡。

完成后，继续进行10min 离心，将上清液祛除，针对沉淀物利用镊子取出，并且利用擦镜纸进行包装。

依据常规完成脱水以及透明等系列操作。

血性胸腹水液基涂片中红细胞去除方法探讨

血性胸腹水液基涂片中红细胞去除方法探讨李亚辉，代爱军，李会平，张帆银(洛阳东方医院〔河南科技大学第三附属医院〕病理科，河南洛阳471003)【摘要】目的探讨去除疑似肿瘤血性胸腹水液基涂片、细胞块中红细胞的方法，为提高临床病理细胞学诊断阳性率提供参考。

方法收集河南科技大学第三附属医院临床送检病理科的新鲜血性疑似肿瘤胸腹水标本65例为研究样本。

每例分为对照组与实验组，实验组分别加入95%酒精、85%酒精、75%酒精、50%酒精、30%酒精、10%酒精，与不做任何处理并按照传统方法行液基涂片、细胞块的对照组进行比较。

结果液基细胞学和组织沉渣包埋染色显示，随着酒精浓度的降低红细胞溶解呈上升趋势，当酒精浓度降低到50%以后，红细胞完全溶解，然后随着酒精浓度的进一步降低细胞开始出现退变，切片染色评分有统计学意义(P<0.01)遥50%酒精处理组免疫组化阳性信号更强(P<0.05或0.01)，肿瘤细胞阳性检出率显著升高渊P<0.05或0.01)。

结论50%酒精能去除血性胸腹水液基涂片、细胞块背景中的红细胞,提高肿瘤血性胸腹水细胞学的阳性率。

揖关键词】血性胸腹水;细胞块;50%酒精;苏木素-伊红染色中图分类号:R361+.2文献标志码:A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.12.009Investigation on red blood cell removal method in liquid-basedsmear of bloody hydrothorax and ascitesLI Yahui,DAI Aijun,LI Huiping,ZHANG F葬灶银(Department of Pathology,Lu燥yang Oriental Hospital—The Third Affiliated Hospitalof Henan,University of Science and Technology,Luoyang471003,Henan,China)揖Abstract]Objective To explore the method of removing red blood cells from liquid-based smear of bloody hydrothorax and ascites and cell blocks of suspected tumors,so as to provide reference for improving the positive rate of clinical pathological cytology diagnosis.Methods65cases of fresh bloody hydrothorax and ascites of suspected tumors from the department of pathology of The Third Affiliated Hospital of Henan University of Science and Technology were collected as study samples.Each case was divided into control group and experimental group.The experimental group were added with95%alcohol，85%alcohol，75%alcohol，50%alcohol，30%alcohol，10%alcohol，respectively，and compared with the control group which did not receive any treatment and performed liquid-based smear and cell block according to traditional method.Results Liquid-based cytology and tissue sediment embedding staining showed that erythrocyte dissolution increased with the decrease of alcohol concentration.When the alcohol concentration dropped to50%，erythrocyte dissolved completely，and then cells began to degenerate with the further decrease of alcohol concentration，and the section staining score was statistically significant(P<0.01).Immunohistochemical positive signal was stronger in the50%alcohol treatment group(P<0.05or P<0.01),and the positive detection rate of tumor cells significantly increased(P<0.05or P<0.01).Conclusion50%alcohol can remove red blood cells from the background of liquid-based smear of bloody hydrothorax and ascites and cell blocks，and improve the positive rate of cytology in hemothorax and ascites of tumor.揖Key words]hemorrhagic pleural and ascites；cell block；50%alcohol；hematoxylin-eosin staining基金项目：洛阳市科技计划项目(1812002A)作者简介:李亚辉，男，主管技师，医学学士，研究方向：病理技术。

胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进

胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进【摘要】临床对于胸腹水脱落细胞学的常规检测主要以涂片检查为主，此方法可以准确快速的得出是否存在恶性肿瘤细胞情况，此检测法便捷且不易对患者造成明显的痛苦，是当前临床疾病诊断的重要措施。

然而在具体的实施过程中，通常由于涂片过厚、细胞退变或是细胞重叠等相关因素造成涂片检测细胞数量不够以及结构不清的情况，此类现象若发生于恶性肿瘤的血性胸腹水标本时，因一些红细胞对涂片质量造成干扰，从而使诊断结果受到影响，如若疑难病患者在进行细胞免疫组织化学染色，同样也会影响判断阳性结果。

基于此，在实施检验工作时应当避免涂片质量的各类影响因素，可使用改进方法来处理疑似病例的胸腹水沉淀物，以此获得了准确的检验结果，下面我们具体对胸腹水脱落细胞学检查涂片的改进方法进行总结。

【关键词】胸腹水；脱落细胞学检查；涂片方法；改进方法一．血性胸腹水涂片红细胞破坏法血性胸腹水涂片的制作方法的重要作用不仅仅可以对红细胞进行破坏，而且还能维持其它细胞的完整度。

而常规的制作方式沉淀物内易见较多红细胞，因此，也会对肿瘤细胞的检测结果产生影响，使用低渗氯化钾溶液能使红细胞被破坏，加入甲醇能起到一定的固定效果，而加入冰醋酸则可起到凝固蛋白的作用。

当百分之五十的乙醇与胸腹水混合之后，低渗的酒精可以破坏绝大多数的红细胞，并且还能固定癌细胞，如此一下，肿瘤细胞的阳性检出率也会因此而提升，具体的操作方法如下：低渗氯化钾液与甲醇共有两类操作方法，其一：乙醇（50%）红细胞破坏法。

将乙醇（50%）与血性胸水同等量混合均匀，使用离心机以每分钟2000转的速度离心处理10分钟，将上层灰白色沉淀物取出，并将其涂在胶片上(APES)；其二：冰醋酸液红细胞破坏法，取氯化钾溶（4.8g）与蒸馏水（1000ml）混合形成低渗氯化钾液(0.66mol/L)。

首先，取15ML血性胸腹水，并将其倒至离心管中，同样以每分钟2000转的速度进行10分钟的离心处理，留沉淀物。

胸腹水脑脊液细胞形态学检查的染色方法

胸腹水脑脊液细胞形态学检查是临床医学中常用的一种检查手段，通过对患者的脑脊液细胞形态学进行染色观察，可以帮助医生对患者的疾病进行诊断和治疗。

下面将介绍胸腹水脑脊液细胞形态学检查的染色方法。

一、 Wright染色1. 染色原理：Wright染色是一种包括甲苯胺蓝和伊曼红的染色方法，主要用于显微镜下观察细胞的形态学特征，包括细胞核、胞质和颗粒物质的染色效果较好。

2. 染色步骤：- 取一片玻片，将脑脊液滴在玻片上，用另一片玻片将其涂匀。

- 将玻片放入固定液中固定3-5分钟，取出晾干。

- 将玻片交替浸入甲苯胺蓝染色液和伊曼红染色液中，每次浸渍2-3分钟。

- 洗净后用96酒精脱水、透明化，然后加盖玻片。

二、涂片染色法1. 染色原理：涂片染色法主要通过染色剂对细胞进行着色，以突出不同细胞组织的形态学特征，包括核、胞质和颗粒物质的染色效果。

2. 染色步骤：- 取一片玻片，将脑脊液滴在玻片上，用另一片玻片将其涂匀。

- 将玻片置于涂片架上，用梗丝将玻片固定在架上，使玻片表层水平。

- 将玻片交替浸入不同染色剂中，每次浸渍2-3分钟。

- 洗净后用96酒精脱水、透明化，然后加盖玻片。

三、细胞学特殊染色法1. 染色原理：细胞学特殊染色法主要通过对细胞特定结构或成分的选择性染色，突出这些特定结构，有利于细胞的形态学观察和诊断。

2. 染色步骤：- 根据需要选择不同的特殊染色剂，如抗酸菌染色、铁染色等。

- 按特殊染色剂的使用说明进行染色步骤，严格控制染色时间和温度。

- 洗净后用96酒精脱水、透明化，然后加盖玻片。

以上就是胸腹水脑脊液细胞形态学检查的染色方法的介绍，希望对您有所帮助。

在进行染色时，请严格按照操作规程进行，以保证染色效果和检查结果的准确性和可靠性。

也希望医学工作者能够不断学习和改进，提高细胞学检查的水平，为临床诊断和治疗提供更加可靠的依据。

在胸腹水脑脊液细胞形态学检查中，染色方法是非常关键的一步。

不同的染色方法有助于突出细胞的不同结构和成分，从而为医生提供更加清晰的细胞形态学特征，有利于诊断和治疗。

涂片的制作方法

涂片的制作方法涂片是在实验室中常用的一种技术，用于观察和分析生物样品中的细胞结构和组织形态。

制作涂片的过程需要经过详细的步骤和操作，下面将逐步介绍涂片的制作方法。

材料准备在制作涂片之前，我们需要准备以下材料：•细胞样本（如细胞悬液、细胞培养物等）•甲醇•96% 乙醇•碱性溶液（如10% KOH 或 10% NaOH）•干燥培养皿•玻璃载片•显微镜片（生物基片）•玻璃棒•涂片架制作步骤1. 样本收集和预处理首先，我们需要收集细胞样本，并根据实验的需要进行预处理。

这可能包括细胞培养、细胞离心、细胞固定等步骤。

确保样本的质量和纯度是制作涂片的关键。

2. 固定细胞将样本中的细胞固定在载片上，这样可以保持细胞的形态结构并防止细胞断裂。

将一个或多个玻璃载片放入干燥的培养皿中，然后滴加足够的甲醇来覆盖载片表面。

将载片浸泡在甲醇中，固定细胞至少10分钟。

3. 去除甲醇倾倒甲醇，并用96% 乙醇润湿载片。

注意不要Bertrand井形淀粉团在载片上滴下。

重复这个步骤至少两次，以彻底去除甲醇，使细胞完全暴露在乙醇中。

4. 使细胞透明化将乙醇倾倒，并加入10% KOH 或 10% NaOH溶液，使细胞透明化。

加入的溶液量取决于样本的类型和厚度。

浸泡时间应根据实验要求进行调整，通常介于2-5分钟。

5. 清洗涂片倾倒透明化溶液，并用蒸馏水冲洗载片，以去除任何残留的溶液。

6. 上染色剂在涂片上添加染色剂。

不同的样本需要不同的染色剂，如伊红染色、甲苯胺蓝染色等。

将染色剂滴加到载玻片上，覆盖整个细胞区域。

7. 倒置涂片将带有染色剂的载玻片倒置到一块干净的玻璃片上，使染色剂与玻璃片接触。

然后，使用涂片架将载玻片垂直放置在室温下晾干。

8. 封存涂片涂片干燥后，使用合适的胶水或胶带封存涂片。

这样可以保护涂片并防止染色剂褪色。

结论涂片制作是一种常见的实验技术，用于观察和分析生物样品中的细胞结构和组织形态。

通过正确的步骤和操作，可以制作出高质量的涂片。

血性胸腹水涂片制作技术的探讨.

血性胸腹水涂片制作技术的探讨关键词胸腔积液腹水；涂片；细胞学技术分类号R446.8 文献标识码A文章编号1001-7399(1999)05-0466-01在胸腹水细胞涂片制作中，尤其是血性胸腹水涂片作HE染色后，镜下可见较多的红细胞，背景深染成红色，给查找癌细胞造成一定的困难。

一些作者用低渗液或其它化学试剂加入胸腹水中，以达到消除红细胞的目的，这些方法虽然去除了红细胞，背景染色清晰，但却使其它细胞形态有所改变，尤其是癌细胞的结构不够清晰，给诊断造成困难。

为探讨一种较理想的血性胸腹水涂片制作方法，我们做了以下实验。

1 材料与方法收到送检的血性胸腹水后立即分别作如下处理：①离心后加生理盐水洗；②加入等量的10％福尔马林；③加入等量的50％乙醇；④不加任何试剂；分别摇匀混合后作2 000 r/min离心10 min，倾去上清液，将沉渣作涂片，待半干时入乙醚乙醇（1∶1）固定，经固定的涂片稍水洗后作常规HE染色。

2 结果与体会4种不同处理的血性胸腹水细胞经HE染色后，结果见表1。

表1 4种不同处理胸腹水细胞HE染色结果制作血性胸腹水涂片时，既要避免太多的红细胞背景影响对癌细胞的观察，又要避免完全去除红细胞而造成人为掩盖了胸腹水的血性特点，以利于细胞学诊断。

为此，我们对标本做了4种不同方法的处理，并进行比较。

结果显示：50％乙醇处理的血性胸腹水，细胞保存完整，不变形，核染色质清，背景清晰，红细胞消失或淡染。

由于50％乙醇与胸腹水液体混合后，低渗酒精可使大部分红细胞迅速溶解，红细胞破裂溶解释出血红蛋白，经伊红染色后背景呈淡红色，从而可判断是否血性胸腹水。

此外乙醇对癌细胞具有固定作用，能使癌细胞染色清晰，结构完整。

特别是人手少，标本多的病理室，加入50％乙醇的血性胸腹水如来不及离心涂片，可置于4℃冰箱保存数小时后再制片，不会影响其细胞结构及染色效果。

我们认为，用50％乙醇对血性胸腹水进行处理，可制出较满意的细胞涂片，给病理诊断带来很大的帮助。

液基薄层细胞制片技术在胸腹水标本中的有效运用

液基薄层细胞制片技术在胸腹水标本中的有效运用总结报告如下。

1资料与方法1.1一般资料选择我院2010年10月～2014年5月的胸腹水标本380例，其中胸水275例，腹水105例，分别采取传统涂片技术和液基薄层细胞制片技术对胸腹水标本进行细胞学检查。

其中，男210例，女170例，年龄为22～89岁。

1.2方法1.2.1传统涂片技术取新鲜胸腹水置于2个10 mL 离心管内，每管8 mL，2000 r/min，离心10～15 min，弃上清液，然后把沉淀物仔细涂抹在涂片上（血性标本取红细胞沉淀与上清液之间的细胞层），通常涂片的数量以3张为宜，接下来使用浓度为95%的乙醇对涂片进行固定，大约10 min以后再进行巴氏染色，中性树胶对涂片进行封固，最后将处理好的涂片送至显微镜下进行观察。

1.2.2液基薄层细胞制片技术取新鲜胸腹水置于2个10 mL 离心管内，每管8 mL，2000 r/min，离心10～15 min，弃去上清1/ 4液，保留管底有用细胞，再加入大约细胞团体积3倍的细胞基液。

在漩涡混匀器上混匀10 s后，用移液器吸取15 ml在脱脂载玻片上涂片，涂片面积直径为1.5 cm。

涂片干燥后用95% 乙醇固定30 min，巴氏染色，中性树胶封固，最后将处理好的涂片送至显微镜下进行观察。

1.3诊断方法采取传统涂片技术和液基薄层细胞制片技术对胸腹水标本进行细胞学检查以后，由同一组细胞学专家来进行阅片，对涂片的细胞进行相应的分级和分型。

本次实验研究采用3级诊断法，将实验的结果分为阳性、阴性和可疑。

检出率=阳性的例数/总例数×100%。

1.4统计学分析采用SPSS 13.0统计学软件，计数资料采用χ2检验，差异有统计学意义（P0.05）。

2结果传统涂片技术的肿瘤细胞检出率为11.32%；液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率为22.63%，因此液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率比传统涂片技术的肿瘤细胞检出率高，且差异均有统计学意义（P0.05），见表1。

液基薄层细胞涂片在胸腹水诊断中的应用价值

液基薄层细胞涂片在胸腹水诊断中的应用价值禹乐;孟加榕;朱启淦;杨立民;温路生;魁国菊;潘羡心【摘要】目的探讨液基薄层细胞涂片法在胸腹水诊断中的应用价值.方法选取临床科室送检的可疑阳性胸腹水107例,分别采用液基薄层细胞涂片法和传统细胞涂片法制片,必要时分别行免疫细胞化学染色,比较两种方法的涂片质量及恶性肿瘤的确诊率.结果应用液基薄层细胞涂片技术获得的细胞涂片及免疫细胞化学染色效果均优于传统涂片法,统计结果显示液基薄层细胞涂片法的恶性肿瘤确诊率为30.8％,高于传统细胞涂片法的11.2％,两组确诊率差异有统计学意义(P＜0.05).结论液基薄层细胞涂片法在胸腹水诊断中可以提高恶性肿瘤确诊率,且涂片质量、染色效果均优于常规涂片法.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2017(048)002【总页数】4页(P149-152)【关键词】胸水;腹水;细胞学;免疫细胞化学染色【作者】禹乐;孟加榕;朱启淦;杨立民;温路生;魁国菊;潘羡心【作者单位】解放军第175医院,厦门大学附属东南医院病理科,漳州363000;解放军第175医院,厦门大学附属东南医院病理科,漳州363000;解放军第175医院,厦门大学附属东南医院病理科,漳州363000;解放军第175医院,厦门大学附属东南医院病理科,漳州363000;解放军第175医院,厦门大学附属东南医院病理科,漳州363000;解放军第175医院,厦门大学附属东南医院病理科,漳州363000;解放军第175医院,厦门大学附属东南医院病理科,漳州363000【正文语种】中文【中图分类】R446胸腹水是常见的临床体征，病因非常复杂，其良恶性的鉴别也是临床上的难点，恶性胸腹水常见于原发性或转移性肿瘤，胸腹水的良恶性鉴别诊断对临床医生在治疗上有重要的指导意义[1]。

由于传统的胸腹水制片方法易受到胸腹水的新鲜程度、细胞数量、退变程度、血细胞含量多少、固定状态以及染色情况等因素的影响，给病理诊断带来较大的困扰，特别是对于高度增生的间皮细胞、良恶性间皮瘤细胞以及转移性腺癌细胞的鉴别诊断更为困难[2]，因此经常需要借助免疫细胞化学染色加以辅助鉴别诊断，现行基于传统细胞涂片上的免疫细胞化学染色效果总是不能令人满意。

血性体液细胞学涂片及包埋方法的改进

血性体液细胞学涂片及包埋方法的改进关键词：血性体液细胞学涂片；冰醋酸；包埋切片；阳性定位；非特异性背景细胞学检查诊断胸、腹水等恶性肿瘤已成为病理科一项常规检查项目，其具有取材方便、易行、患者痛苦少等优点。

日常中，胸腹水等细胞诊断难度很大，尤其是腺癌、间皮瘤和间皮增生的鉴别诊断。

提高细胞制片质量，做出稳定可靠的细胞片，是保证诊断准确性的前提条件。

但多数体液细胞学标本中含有大量红细胞，难以制作优良的细胞涂片，常影响结果观察，采取何种方法除去红细胞？获得良好的细胞学涂片及包埋制片，以提高阳性检出率。

为此，我科经过长期反复摸索，对传统的血性体液细胞学涂片及包埋方法进行了改进，将血性体液细胞离心后，加入10%冰醋酸振荡处理，除去红细胞，再行沉渣涂片及包埋制片，收到了满意的效果，现将方法介绍如下。

2结果对照组未处理的涂片，背景一片红染，模糊不清，细胞结构显示不清晰，见图1。

由于大量红细胞存在，易造成涂片厚薄不均，染色效果不佳，甚至涂片在染色水洗过程中脱片，大量红细胞遮挡或覆盖肿瘤细胞、间皮细胞、炎细胞等有诊断价值细胞，造成漏诊或误诊；沉渣包埋切片由于红细胞过多，加做的免疫酶标及特殊染色的，出现严重的非特异性背景染色，致阳性定位不清，见图2。

实验组经10%冰醋酸处理沉渣的涂片中红细胞几乎消失或淡染，背景干净，肿瘤细胞、间皮细胞、炎细胞等核膜、染色质、核仁结构清晰，染色分明，细胞无变形，亦无脱片掉片现象，见图3；沉渣包埋切片加做免疫酶标及特殊染色，非特异性背景染色少，对肿瘤细胞、间皮细胞等阳性定位准确。

阳性率明显提高，见图4。

3讨论血性体液标本，离心后沉渣经过10%冰醋酸处理，低渗冰醋酸可使部分红细胞迅速破裂溶解[3]。

冰醋酸能固定核蛋白，使细胞核形态清晰，便于辨认[4]。

涂片中红细胞几乎消失，肿瘤细胞染色清晰，结构保存完好；剩余沉渣做包埋后常规石蜡切片，增加了细胞量，避免细胞涂片由于细胞量少，造成漏诊现象。

《阿克曼外科病理学》中提到腹水细胞学诊断存在两个最困难的问题，①反应性间皮和肿瘤性间皮的鉴别，②恶性间皮瘤与转移癌的鉴别。

两种制片方法在胸腹水细胞学诊断中联合应用

我们92·
临床与实验病理学杂志 J Clin Exp Pathol 2012 Nov； 28（ 11）
一种适用于胸腹水细胞诊断的液基薄层制片技术
江涛1 ，马世婧2 ，张程2 ，邹积骏1
关键词：胸腹水细胞；液基薄层；细胞诊断；离心涂片机中图分类号： R 361． 3 文献标志码： B 文章编号： 1001 － 7399（ 2012） 11 － 1292 － 02
临床与实验病理学杂志 J Clin Exp Pathol 2012 Nov； 28（ 11）
·1291·
两种制片方法在胸腹水细胞学诊断中联合应用
孙春龙
关键词：胸腹水；细胞学；液基；细胞块中图分类号： R 361． 3 文献标志码： B 文章编号： 1001 － 7399（ 2012） 11 － 1291 － 02
1 材料与方法
1． 1 标本来源收集 2010 年 11 月～ 2012 年 3 月武汉市第一医院各科送检胸腹水标本 643 份。使用设备：兰丁高科 TDX3 细胞离心涂片机，此机器特点是带过滤纸的转头，过滤纸可缓慢吸走多余的液体，制出不带多余液体成分的单层细胞片。 1． 2 方法（ 1）送检标本，轻轻摇匀，吸取标本置于 15 ml 离心管内（细胞量少可先用 50 ml 离心管富集细胞，弃大部分上清后，再用同样方法离心），2 000 r / min 离心 5 min［4］；（ 2）离心后，吸取适量（约 5 ml）上清液置于一干净试管中待用，弃去剩余上清液，吸取离心底部沉淀物（血性标本取红细胞沉淀与上清液之间的细胞层），取 1 ～ 2 滴置于已装好的离心转头里，并加上清液 0. 5 ml 与之混匀，离心涂片机 1 300 r / min，离心 3 ～ 4 min，根据需要制出若干张涂片；（ 3）涂片固定，玻片在潮干的状态下 95% 乙醇固定 15 min 以上［1］，再做巴氏染色。

制作血性胸腹水涂片染色的方法与体会

制作血性胸腹水涂片染色的方法与体会
王希萍;蔡爱英
【期刊名称】《齐齐哈尔医学院学报》
【年(卷),期】2002(023)010
【摘要】@@ 细胞涂片染色查找癌细胞法,具有取材方便,易行,病人痛苦少等优点而用于临床.但在血性胸腹水涂片常规染色后,镜下可见较多的红细胞,背景深染成红色,不利于癌细胞的查找,直接影响诊断.为此,我们要用几种不同的试剂加入胸腹水中,以达到消除红细胞的目的,并进行对比染色,结果发现,50%乙醇加入后的效果优于其他化学试剂.
【总页数】1页(P1193)
【作者】王希萍;蔡爱英
【作者单位】福建省莆田市医院病理科,351100;福建省莆田市医院病理科,351100【正文语种】中文
【中图分类】R36
【相关文献】
1.血性胸腹水涂片中红细胞的去除方法 [J], 颜亚晖;郑晖;张革进
2.血性胸腹水涂片中红细胞去除方法的探讨 [J], 阮君;罗丽花;张婉仪
3.血性胸腹水液基涂片中红细胞去除方法探讨 [J], 李亚辉;代爱军;李会平;张帆
4.血性胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的比较 [J], 支喜兰
5.自动细胞离心涂片机制作胸腹水细胞学涂片应用体会 [J], 肖同浩;彭正银;熊丽萍;陈昕薇
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自动细胞离心涂片机制作胸腹水细胞学涂片应用体会

自动细胞离心涂片机制作胸腹水细胞学涂片应用体会
肖同浩;彭正银;熊丽萍;陈昕薇
【期刊名称】《华南国防医学杂志》
【年(卷),期】2004(18)3
【摘要】胸腹水细胞学检查,已成为临床诊断肿瘤不可缺少的方法之一[1、2].由于手工涂片的不稳定性,如细胞重叠、厚薄不匀等原因引起假阴性,从而出现一定的误诊率.因此,标本的采集利用,既是细胞学检查的基础,又是成败的关键.我们用自动细胞离心涂片机制作胸腹水细胞涂片62例,同时手工涂片作为对照比较.
【总页数】2页(P30-31)
【关键词】涂片;胸腹水细胞;肿瘤;误诊率;离心;细胞学检查;应用体会;自动;重叠;不稳定性
【作者】肖同浩;彭正银;熊丽萍;陈昕薇
【作者单位】广州军区武汉总医院病理科
【正文语种】中文
【中图分类】R446;R749.3
【相关文献】
1.液基细胞学离心沉淀涂片法与传统巴氏直接涂片法应用于宫颈疾病筛查的比较[J], 陈建华;邹华英
2.细胞离心涂片机在宫颈薄层细胞涂片中的应用 [J], 陈萍倩;赵华;张蓉;陆敏华;印永祥
3.自动涂片细胞离心机制作宫颈细胞学薄层涂片与传统手工涂片质量的对比观察[J], 陆以农;詹惠英;陆敏华;印永祥
4.自动细胞离心涂片机在细胞学诊断中的价值 [J], 苗英;李文生;田旭阳;李洁;李永茂
5.自动细胞离心涂片机制作阴道、宫颈细胞学的应用体会 [J], 王继红;姜彦多;孙德飞;张丽梅
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胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术的应用

胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术的应用发布时间：2021-07-01T07:30:34.945Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2021年第3期作者：鞠学萍[导读] 目的分析胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术的应用。

方法抽取本院2019年09月-2020年12月的30例胸腹水标本展开研究，均实行细胞沉渣石蜡切片法和常规细胞涂片法制片，分析应用效果。

结果两种制片方法检出率分别为6.67%、33.33%，差异明显（P<0.05）。

结论在相比于常规细胞涂片法，胸腹水细胞沉渣石蜡切片可以进一步提高腺癌细胞检出率。

鞠学萍大庆市第四医院 163712【摘要】目的分析胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术的应用。

方法抽取本院2019年09月-2020年12月的30例胸腹水标本展开研究，均实行细胞沉渣石蜡切片法和常规细胞涂片法制片，分析应用效果。

结果两种制片方法检出率分别为6.67%、33.33%，差异明显（P<0.05）。

结论在相比于常规细胞涂片法，胸腹水细胞沉渣石蜡切片可以进一步提高腺癌细胞检出率。

【关键词】胸腹水；细胞沉渣石蜡切片技术；应用[Abstract]Objective To analyze the application of paraffin section technique in pleural and ascites cell sediment. Methods 30 cases of pleural effusion and ascites samples from September 2019 to December 2020 in our hospital were selected for research. The paraffin section method of cell sediment and conventional cell smear method were used to analyze the application effect. Results the detection rates of the two methods were 6.67% and 33.33%，respectively，with significant difference（P < 0.05）. Conclusion compared with the conventional cell smear method，paraffin section of pleural and ascites cell sediment can further improve the detection rate of adenocarcinoma cells. [Key words]pleural effusion and ascites；cell sediment paraffin section technique；application对于送检胸腹水标本，离心后涂片并使用浓度为95%乙醇固定染色后进行阅片是对其进行处理的重要方式【1】。

胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进

胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进胸腹水脱落细胞学检查，具有结果快速，诊断准确等特点。

但是，恶性肿瘤的血性胸腹水标本，由于有大量的血细胞，影响制片质量和诊断结果。

现在工作中对血性胸腹水的涂片制作方法进行了改进，介绍如下。

一般方法用吸管吸取血性胸腹水底部的沉淀物入离心管，离心后直接涂片，染色，观察结果。

结果评价，玻片上血细胞满视野，间皮细胞很少。

改进方法低渗氯化钾液+甲醇：冰醋酸液破坏法，取4.8g氯化钾溶于1000ml蒸馏水中，制成低渗氯化钾液(0.66mol/L)。

①吸取血性胸腹水16ml入离心管内，1500r/分，离心7分钟，弃上清液；②加入氯化钾溶液16ml，用吸管将沉淀物吹打混匀，室温下静置20分钟；③甲醇:冰醋酸(3∶1)混合液滴加10滴，混匀后1500r/分，离心7分钟，弃上清液；④离心管加入甲醇：冰醋酸混合液16ml，将沉淀物吹打混匀后，室温下静置15分钟，弃上清液(2次)；⑤将沉淀物均匀涂抹于玻片上，固定染色，观察结果。

结果评价，玻片上很少见到红细胞、间质细胞、肿瘤细胞、淋巴细胞较完整，细胞轮廓清楚，胞膜完整，胞质及胞核染色清晰。

讨论血性胸腹水涂片制作的关键是如何既破坏红细胞，又保持其他细胞的完整性。

一般的制作方法由于沉淀物中主要为红细胞，从而影响对肿瘤细胞的观察。

低渗氯化钾液+甲醇∶冰醋酸混合液的方法，效果较好。

该方法除能完全破坏红细胞外，还能较好的保持其他细胞的完整性，有利于提高阳性检出率。

低渗氯化钾液+甲醇:冰醋酸法每一步均有不同的原理。

第1步加入低渗氯化钾液后静置，液体逐渐进入细胞内，离心时滴加甲醇:冰醋酸液、甲醇能起到固定的作用，而冰醋酸能迅速凝固蛋白(如果血性胸腹水非常黏稠，不需加甲醇∶冰醋酸液，可直接离心再加入氯化钾低渗液，静置20分钟，离心时再加入甲醇：冰醋酸液，否则会全部成黏稠状)。

第2步加入甲醇:冰醋酸液，主要起到固定作用。

经上述处理后的血性胸腹水涂片，肿瘤细胞、间质细胞、淋巴细胞较完整，红细胞几乎完全消失。