envision
免疫组化EnVision二步法染色
石蜡切片免疫组化EnVision二步法染色第一组2组一、实验目的:1.掌握石蜡切片免疫组化EnVision二步法染色的原理、步骤及结果分析2.了解石蜡切片免疫组化EnVision二步法染色的临床应用二、实验原理:免疫组织化学技术是应用抗原与抗体接触后可形成“抗原-抗体复合物”的化学反应,以检测组织或细胞内抗原(或抗体)的技术。
EnVision二步法染色是通过一个葡聚糖分子,将多个抗小鼠或抗兔的二抗与多个辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)聚合在一起,形成一个免疫组化检测系统。
显色原理:将抗原抗体结合的部位显示出来。
常用DAB(3’3-二氨基联苯胺):阳性细胞染成棕黄色(HRP显色剂),苏木素复染,核淡兰色,显色反应稳定,不褪色,应用最广。
显色原理:酶--催化剂H2O2--底物DAB--供氢体反应原理:HRP+H2O2----HRP.H2O2DAB↓(第一复合物)HRP.H2O2----HRP+H2O+电子供体(氧化型)生成不溶于水和有机溶剂的有色终产物(棕褐色颗粒)和水,沉着在原来的位置上。
三、实验试剂与器材:试剂:二甲苯试剂,梯度乙醇(70%、80%、90%、100%、),蒸馏水,3%H2O2,柠檬酸盐缓冲液,PBS(磷酸盐缓冲液),鼠抗人CK,鼠抗人C-erbB-2,HRPanti-Mouse/Rabbit,DAB显色剂,苏木素试剂,1%盐酸乙醇,中性树胶,自来水器材:试剂缸、试剂瓶若干;载玻片及盖玻片若干;架子;石蜡切片;微波炉;37度恒温箱;显微镜四、实验地点:科技十楼,病理实验室五、实验时间:2011.12.21六、组员及分工:11120062申海涛,11120111黄冉冉,11120114谭辉,11120140谭丽,11120145张力,分别参与各步骤操作与计时。
七、记录人:黄冉冉八、实验步骤:1.二甲苯10minX 2 次2.梯度梯度乙醇水化,100%、90%、80%、70%由高到低每缸浸泡1min3.蒸馏水洗片刻4. 3%H2O2 去除内源性酶,室温10min5.蒸馏水洗3minX 2 次6.食管癌(CK)、乳腺癌(C-erbB-2)切片微波抗原修复(将切片放入柠檬酸盐缓冲液放入微波炉待煮沸后沸腾15min,室温冷却)7.蒸馏水洗3minX 2 次8.PBS洗3minX 2 次9.加鼠抗人CK(50微升)孵育1小时37°C,鼠抗人C-erbB-2(50微升)孵育1小时37°C10.PBS洗3minX 2 次11.(CK、C-erbB-2):加HRPanti-Mouse/Rabbit孵育30min 37°C12.PBS洗3minX 2 次13.DAB显色(棕褐色),镜下控制;(镜下观察细胞膜染色即可冲洗)14.自来水冲洗5min15.苏木素复染,水洗16.1%盐酸乙醇分色2s,水洗17.梯度梯度乙醇脱水,70%、80%、90%、100%由低到高每缸浸泡2min18.切片风干后中性树胶封片九、实验结果与分析:食管癌CK:结果:低倍显微镜下观察染色阳性染色强,阳性颗粒定位性佳,组织结构清晰,除了出血部位和炎性区域有轻度背景外,多数组织片均无显著背景染色。
enVision产品介绍
目录1RSA ENVISION产品介绍.......................................................1.1RSA EN V ISION产品结构.....................................................1.1.1ENVISION功能组件.....................................................1.1.2部署架构 .............................................................1.2RSA EN V ISION功能特色.....................................................1.2.1LogSmart Internet Protocol Database(IPDB).............................1.2.2基线.................................................................1.2.3Reports ..............................................................1.2.4相互关联的警报 .......................................................1.2.5法律需要Forensics....................................................1.2.6事件浏览器Event Explorer.............................................1.2.7通用设备支持UenVisionversal Device Support........................... 2ENVISION产品特点...........................................................2.1系统分析................................................................2.1.1产品可以根据需要进行灵活架构 .........................................2.1.2安全性 ...............................................................2.1.3数据可靠性 ...........................................................2.1.4易用性 ...............................................................2.1.5可维护性 .............................................................2.1.6可扩展性 .............................................................2.2客户收益................................................................2.2.1产品竞争力分析 .......................................................2.3安全审计数据的存储建议..................................................2.3.1安全审计数据存储 .....................................................2.3.2安全审计数据符合性存储 ...............................................2.4安全运维的建议..........................................................2.5本地服务与支持..........................................................2.5.1RSA SecuCare 技术支持服务 ............................................2.6案例分析................................................................2.6.1JPMorgan Chase .......................................................2.6.2EDS..................................................................2.6.3Fifth Third Bancorp .................................................. 3RSA简介 ...................................................................3.1RSA信息安全公司简介....................................................3.2被EMC收购后的情况......................................................3.2.1产品.................................................................3.2.2行业标准 .............................................................3.2.3战略性伙伴 ...........................................................3.2.4全球支援服务 .........................................................3.2.5业务遍及全球 .........................................................1 RSA enVision产品介绍RSA enVision经市场证明,是SIEM产品的全球领跑厂商。
2007年英语一阅读
2007 Text 2第一段①For the past several years, the Sunday newspaper supplement Parade has featured a column called “Ask Marilyn.”②People are invited to query Marilyn vos Savant, who at age 10 had tested at a mental level of someone about 23 years old; that gave her an IQ of 228—the highest score ever recorded. ③IQ tests ask you to complete verbal and visual analogies, to envision paper after it has been folded and cut, and to deduce numerical sequences, among other similar tasks. ④So it is a bit confusing when vos Savant fields such queries from the average Joe (whose IQ is 100) as, What’s the difference between love and fondness? ⑤Or what is thenature of luck and coincidence? ⑥It’s not obvious how the capacity to visualize objects and to figure out numerical patterns suits one to answer questions that have eluded some of the best poets and philosophers.在过去的几年里,星期日报纸的增刊《游行》有一个名为“问玛丽莲”的专栏。
enVision产品介绍
enVision产品介绍目录1 RSA enVision产品介绍 21.1 RSA enVision产品结构 31.1.1 ENVISION功能组件31.1.2 部署架构31.2 RSA enVision功能特色 41.2.1 LogSmart Internet Protocol Database(IPDB) 41.2.2 基线41.2.3 Reports 错误!未定义书签。
1.2.4 相互关联的警报51.2.5 法律需要Forensics 错误!未定义书签。
1.2.6 事件扫瞄器Event Explorer 错误!未定义书签。
1.2.7 通用设备支持UenVisionversal Device Support 错误!未定义书签。
2 enVision产品特点72.1 系统分析72.1.1 产品能够按照需要进行灵活架构7 2.1.2 安全性82.1.3 数据可靠性82.1.4 易用性82.1.5 可爱护性82.1.6 可扩展性92.2 客户收益92.2.1 产品竞争力分析92.3 安全审计数据的储备建议102.3.1 安全审计数据储备112.3.2 安全审计数据符合性储备122.4 安全运维的建议132.5 本地服务与支持142.5.1 RSA SecuCare 技术支持服务14 2.6 案例分析152.6.1 JPMorgan Chase 152.6.2 EDS 162.6.3 Fifth Third Bancorp 173 RSA简介 193.1 RSA信息安全公司简介 193.2 被EMC收购后的情形193.2.1 产品203.2.2 行业标准223.2.3 战略性伙伴223.2.4 全球支援服务233.2.5 业务遍及全球23RSA enVision产品介绍RSA enVision经市场证明,是SIEM产品的全球领跑厂商。
公司的Lo gSmart®Internet Protocol Database™(IPDB)通过专门的架构设计,能够高效的收集和爱护数据,无需任何代理或过滤器。
en-构词法
前缀en-和后缀-en的构词功能一、前缀en-的构词功能1.加在某些名词前面构成动词,有“置于……之中”含义。
例如:encage(把……关于笼中),encase(把……装入箱中),encave(把……藏入洞中),entomb (埋葬),enroll(把……记入名册中),entrain(使上火车,上火车),enplane (使上飞机,上飞机),enthrone(使登上王位),enshrine(把……藏于神龛中)等。
2.加在另一些名词前面构成动词,有“用…来做某事”、“饰以…”、“配以…”等含义。
例如:enchain(用链锁住),entrench(用壕沟围,用壕沟防御),encloud(阴云遮蔽),enframe(给画配以框架), enlace(用带缚住),entitle(给[书、文章]题目,给…以称号),entrap(用陷阱诱捕)等。
3.加在某些形容词或名词前面构成动词,有“使……成某种状态”、“致使……”、“使……如同……”、“作为”等含义。
例如:enlarge(使……扩大,放大), endear(使……受喜爱)enˈdɪə], enable(使……能够), enrich (使……富裕),ensure(保证,使……安全),enslave(使……成为奴隶,奴役),enrage(使……发怒,激怒),ensnare(使……入圈套),endanger (使……遭危险),encourage(使……有勇气,鼓励),envision(想象,展望),engrail(使……成波纹),encode(把……译成电码)等。
4.加在某些动词前面构成新的动词,表示in之意或只作加强意义。
例如:enwind (缠绕,卷),enforce(强迫,迫使), enclose(围入,关进),enfold(把……包入),enact(饰演,扮演)),encircle(环绕,绕……行一周),enwrap (把……包入),entrust(信托,委托),enkindle(点火,燃起……之火),等等。
ENVISION《易美逊》显示器
電影
Gamma
運動 Gamma1 Gamma2 Gamma3
關 DCR
影像設定 時序
• 遇有雷雨天氣或長時間不使用時,應拔掉設備的電源線。 這樣做可以
防止因電壓突變而損壞監視器。
• 不要使電源板或延長線超載。 超載可能導致火災或電擊。
• 切勿將任何異物塞入監視器機殼的開槽內。 否則會導致電路短路而引
起火災或電擊。 切卸機蓋時有高壓或其他危險。 請委託
1. 取下底座。 2. 按照廠商說明安裝牆壁裝配架。 3. 將牆壁裝配架放到監視器後部。 使裝配架上的孔與監視器後部的孔對
準。 4. 將四個螺絲插入孔中並擰緊。 5. 重新連接電纜。 有關安裝到牆壁上的說明,請參見選購的牆壁裝配架
附帶的用戶手冊。 注意 : 非所有機種後殼自帶壁掛設備安裝鎖附螺孔, 請購買時確認經銷商或諮詢 ENVISION 官方機構.
能(僅針兩種輸入信號及以上機型),連續按信號源快捷鍵來選擇資訊欄 中顯示的信號源,按功能表/進入鍵調整為選擇的信號源。
• 自動調整快捷鍵: 當沒有 OSD 功能表時,持續按自動調整快捷鍵 2 秒啟
動自動調整功能
10
功能控制說明
明亮度 亮度 對比度
調整範圍 0-100 0-100
標準 節能
亮度模式 網際網路 遊戲
7
設置最佳解析度
此顯示器的推薦解析度是 1920x1080。要將顯示器設置成此解析度,請執行下面 的步驟。
1. 點選開始。 2. 點選設置。
3. 點選控制面板。
4. 點選顯示。 5. 點選設置。 6. 將解析度點選設置在1920x1080。
8
外部控制
按電源開關即可開關顯示器。 其他功能按鍵位於前面板 下方 。 通過調節這些功 能鍵可得到您需要的畫面。 * 接好電源線。 * 按電源開關即可開關顯示器,電源指示燈亮。
Envision多标签板读机产品说明书
IntroductionPhotometric assays are widely used for biochemical or cell based studies. Here we show on examples, NADH and Methyl-red, the possibility of performing those studies using absorbance mode on an EnVision ® Multilabel Plate Reader. NADH is a biomolecule, which participates in a number of biochemical reactions. Therefore it is widely studied among researchers.Methyl-red is commonly used as a pH indicator. If the pH of the solution is less than 4.2, methyl-red appears as red. If the pH of the solution is above 6.3, it appears as yellow. This indicator can be used to follow, e.g., the bacteria medium growth.EnVision in photometric applicationsEnVision plate reader is an instrument with modular design, supporting all of the following technologies: AlphaScreen ®/AlphaLISA ®, luminescence flash and glow, fluorescence intensity, time-resolved fluorescence, fluorescence polarization and absorbance (UV/Visible). Absorbance measurements can be performed in the range of 240-850 nm with a speed of less than 3 min per 1536 well plate.In absorbance measurements the light is directed through a light guide to the bottom-measuring head where the intensity of the light is measured using a reference photodiode. The light is then directed through the bottom of the plate and focused into the sample. The signal is detected with a photodiode, which islocated above the plate.Multilabel DetectionPhotometric Assays with EnVision Multilabel Plate ReaderThe absorbance value is calculated by the equation A = -log(I/I o )where I o is the light intensity without any sample and I is the intensity after an absorbing or reflecting medium.MethodsDilution series of beta-NADH (Sigma-Aldrich ®, N8129) was prepared in TSA, pH 7.4 buffer. The samples were pipetted into a black and clear 1536-well plate (Greiner ®, 782096) (7.5 μL/well), 6 replicates. The plate was measured with the EnVision instrument using a photometric filter for 340 nm (PerkinElmer, 2100-5190).Dilution series of methyl-red was prepared in PBS-buffer. Samples were pipetted into a Greiner ® black and clear 1536-well plate (7.5 μL/well), 6 replicates. The plate was measured with the EnVision instrument using a photometric filter for 492 nm (PerkinElmer, 2100-5220).Dilution series of BSA was prepared into PBS buffer. Samples were pipetted into a 96-well plate (Corning ®, 3615), 200 μL/well. The plate was measured with theEnVision instrument using a photometric filter for 280 nm (PerkinElmer, 2100-5350).Label propertiesExcitation filterAbsorbance 340/492/280Number of flashes3 flashes for 340 nm 100 flashes for 492 nm and 280Number of flashes per A/D Conversion 1ConclusionIn the two examples of NADH and Methyl-red, we show that the EnVision microplate reader is ideally suited to run photometric assays. Its optical range from 240-850 nm and the wide dynamic range of 4 OD combined with its short measurement times provide maximum flexibility, sensitivity and speed.For a complete listing of our global offices, visit /ContactUs Copyright ©2002-2012, PerkinElmer, Inc. All rights reserved. PerkinElmer ® is a registered trademark of PerkinElmer, Inc. All other trademarks are the property of their respective owners. 010481_01 Aug 2012 Printed in USA PerkinElmer, Inc. 940 Winter Street Waltham, MA 02451 USA P: (800) 762-4000 or (+1) Figure 1. Beta-NADH dilution series measured with EnVision, 3 flashes/well, abs. 340 nm, 1536-well plate.Figure 2. Methyl-red dilution series measured with EnVision, 100 flashes/well, abs. 492 nm, 1536-well plate.Figure 3. BSA dilution series measured with EnVision, 100 flashes/well, abs. 280 nm, 96-well plate.。
envision的词根词缀
envision的词根词缀"envision"这个词的词根是"vis",它来自于拉丁语中的"videre",意为"看"或"见"。
在"envision"中,"en-"是一个前缀,表示"使"或"进入"的意思。
因此,"envision"的字面意思是"使看见"或"使想象"。
这个词根词缀的含义可以从以下几个角度进行解析:1. 视觉,词根"vis"与"envision"的意思都与视觉有关。
"envision"表示通过思考、想象或预测来形成对未来或抽象事物的视觉化表达。
它强调了通过内在的想象力来构建图像或观念。
2. 想象力,"envision"强调了通过思考和想象来形成对未来或理想状态的清晰图像。
这个词传达了一种主动参与和创造的意义,强调了个人的想象力和预见能力。
3. 规划和预测,"envision"还可以表示通过规划和预测来构想或设想未来的情景。
这个词强调了对未来的思考和计划,以及对可能发生的事情进行预测和设想的能力。
4. 愿景和目标,"envision"也可以表示对未来的愿景和目标的设想。
它强调了对个人、组织或社会的未来发展方向和目标的清晰构想。
总的来说,"envision"这个词的词根词缀表达了与视觉、想象力、规划和预测相关的意义。
它强调了通过思考、想象和预见来形成对未来或抽象事物的清晰图像。
这个词在描述创造力、远见和目标设定时非常有用。
英语作文畅想未来60词
英语作文畅想未来60词English: In the future, I envision a world where technology has advanced to unimaginable levels, making our lives more convenient and efficient. Self-driving cars will be the norm, reducing traffic congestion and accidents. Virtual reality will revolutionize the way we learn and entertain ourselves, creating immersive experiences that were once only possible in science fiction movies. Renewable energy sources will dominate the energy sector, helping to combat climate change and preserve our planet for future generations. Medical breakthroughs will prolong our lifespan and improve our quality of life, while space exploration will become more accessible to ordinary people, inspiring a new generation of astronauts and scientists. Despite these advancements, I hope that humanity will not lose sight of the importance of compassion, empathy, and environmental stewardship, ensuring a harmonious coexistence between technology and nature.中文翻译: 在未来,我设想一个科技发展到难以想象水平的世界,使我们的生活更加方便和高效。
未来2025英语作文八年级
未来2025英语作文八年级In 2025, I envision a world that is more connected and sustainable. Technology will have advanced significantly, with artificial intelligence playing a crucial role in daily life. Smart homes will be the norm, equipped with devices that can manage energy use, enhance security, and improve comfort. Transportation will also evolve, with electric vehicles dominating the roads and public transport becoming more efficient and eco-friendly.Education will be transformed through online learning platforms, allowing students from all over the globe to access quality education. Additionally, the focus on mental health and well-being will be prioritized, leading to a more balanced lifestyle for individuals.Moreover, environmental awareness will drive innovations in renewable energy and waste management, creating cleaner cities. Overall, 2025 holds the promise of a more interconnected, sustainable, and healthier world for future generations to thrive.中文翻译:在2025年,我设想一个更加联系紧密和可持续的世界。
envision用法及固定搭配
envision用法及固定搭配Envision是一个常见的动词,意味着“预想”、“设想”、“想象”。
它可以用来描述一个人展望未来或将来的某种情景、愿景或计划。
在本文中,我们将探讨envision的用法和一些固定搭配,以及如何在写作中正确地运用这个词。
首先,envision可以用来描述一个人对未来发展的预测或看法。
当我们想要表达一个人对未来某个方面的设想时,可以使用以下句型:“I envision [noun/verb/phrase].”例如:1. I envision a world without poverty and inequality.我设想一个没有贫困和不平等的世界。
2. He envisions a future where renewable energy powers all our needs.他设想一个未来,可再生能源满足我们的一切需求。
3. The architect envisions a community that promotes sustainable living.建筑师设想了一个鼓励可持续生活的社区。
此外,envision还可以用来描述对某个特定场景或情境进行思考和构想。
以下是一些示例:1. The artist envisions a peaceful landscape with vibrant colors and gentle brushstrokes.艺术家构想了一个色彩鲜艳、画笔柔和的宁静风景。
2. The scientist envisions a breakthrough in medical research that could cure previously untreatable diseases.科学家设想了医学研究的突破,可以治愈以前无法治疗的疾病。
3. The entrepreneur envisions a successful startup that disrupts the traditional market.创业者构想了一家成功的初创企业,颠覆传统市场。
envision翻译
envision翻译
envision的中文翻译为"设想、想象、展望"等。
envision可以用来描述一种对未来的想象或展望。
它是一个动词,表示通过思考和想象来形成一个清晰而明确的想法。
envision可以用于描述一个人对未来的计划和目标,也可以用于描述一个人对世界的看法和理念。
在英语中,envision经常用于商业、政治、教育和科技等领域。
例如,一个创业者可能会envision一种新的商业模式,一个政治家可能会envision一个更加繁荣和和谐的社会,一个教育家可能会envision一种更加普及和优质的教育体系,一个科学家可能会envision一种更加创新和高效的科学方法。
总之,envision是一个用来描述未来的动词,它表示通过思考和想象来形成一个清晰而明确的想法。
无论是商业、政治、教育还是科技领域,envision都是一种重要的思维和行动方式。
免疫显色试剂说明书
免疫显色试剂说明书免疫显色试剂说明书提供了一些关于免疫显色试剂的基本信息和使用说明。
具体内容可能因不同产品而有所不同,以下是一份免疫显色试剂说明书的示例:一、产品名称通用名称:免疫显色试剂英文名称:EnVision™ FLEX Mini Kit, High pH(Dako Omnis)二、包装规格150测试/盒三、预期用途免疫显色试剂在免疫组化反应中与首要抗原抗体结合,通过染色,将靶点进行标记。
四、使用方法1. 抗原修复完毕后自然冷却的切片,用自来水清洗。
2. 除去切片上组织周围的液体,用免疫组化笔圈定玻片上的待测组织区域并放入PBST 缓冲液中。
3. 取出切片,除去PBST缓冲液,滴加内源性过氧化物酶阻断剂(试剂A)(视切片大小以完全覆盖切片组织为宜),于组织上孵育10分钟,用PBST清洗切片。
4. 除去PBST缓冲液,滴加100μL左右一抗工作液(视切片大小以完全覆盖切片组织为宜),于组织上进行孵育(按照各自一抗说明书操作)。
五、注意事项1. 请按照本说明书使用免疫显色试剂,如有疑问请咨询专业人士。
2. 本试剂仅用于免疫组化反应或原位杂交反应中,不得用于其他用途。
3. 使用前请确认试剂的有效期和包装完整性,过期或破损的试剂不得使用。
4. 请将试剂存放在干燥、阴凉、避光的地方,避免阳光直射和高温。
5. 避免试剂直接接触皮肤和眼睛,如不慎接触,请立即用清水冲洗。
6. 使用过的试剂和废弃物应按照相关规定处理。
六、售后服务与支持如有任何关于本产品的疑问或需要技术支持,请联系我们的客户服务部门。
我们将竭诚为您服务。
以上仅为免疫显色试剂说明书的一个示例,具体内容可能因产品不同而有所差异。
在使用任何免疫显色试剂之前,请务必仔细阅读说明书并按照说明书进行操作。
如有疑问,请咨询专业人士。
envision造句
envision造句【释义】envisionv.想象,预想第三人称单数envisions现在分词envisioning过去式envisioned过去分词envisioned【例句】1I don't envision working with him again.我想象不出再与他一起工作的可能。
2We envision the camera becoming so small that it integrates into clothing,such as the button of a shirt,a brooch,or a pendant.我们想象一下,如果这个摄影机非常小巧,我们就可以把它放进衣服里,像衬衫扣子、胸针、或是项链的坠子一样。
3IQ tests ask you to complete verbal and visual analogies,to envision paper after it has been folded and cut,and to deduce numerical sequences,among other similar tasks.智商测试要求你完成语言和视觉上的类比,想象纸张折叠和剪切之后的样子,推断数字序列,以及其他类似的任务。
4In the future we envision a federation of companies.我们设想将来会有公司联盟。
5They didn't envision any problems with the new building.他们没想到这栋新楼会有什么问题。
6They envision an equal society,free of poverty and disease.他们向往一个没有贫穷和疾病的平等社会。
7They envision an equal society,free from poverty and disease.他们向往一个没有贫穷和疾病的平等社会。
envision 翻译
envision 翻译envision是一个动词,意思是“设想”、“想象”、“预见”、“展望”等。
它常用于表示对未来或未来情景的预测、设想或展望。
下面是一些用法和中英文对照的例句:1. I can envision a future where technology has transformed every aspect of our lives.(我可以设想一个未来,科技已经改变了我们生活的方方面面。
)2. The architect envisioned a modern and sustainable city with green spaces and efficient transportation.(建筑师设想了一个有绿地和高效交通的现代可持续城市。
)3. She envisioned herself as a successful businesswoman, running her own company.(她设想自己成为一位成功的女商人,经营自己的公司。
)4. We need to envision different scenarios and plan accordingly.(我们需要设想不同的情景,并做出相应的计划。
)5. The artist's paintings allow us to envision a world filled with vibrant colors and emotions.(艺术家的画作让我们能够设想一个充满活力的色彩和情感的世界。
)6. The CEO envisions expanding the company's operations to new markets in the next five years.(首席执行官预计在未来五年内将公司的业务扩展到新市场。
)7. It is important for leaders to envision a better future for their organizations and inspire others to work towards it.(领导者为组织设想一个更美好的未来,并激励他人为之努力是非常重要的。
envision用法
envision用法
envision是一个英语单词,意为“想象、预见、设想”,在日常生活中常用于表达预测、设想未来等意义。
以下是一些使用envision的例句:
1. 我们应该envision一个更加美好的未来,而不是一味地沉迷于现实的困境中。
2. 他成功了,因为他能够envision自己的梦想并为之努力奋斗。
3. 作为一个企业家,你需要envision未来市场的趋势和需求,并据此制定相应的商业策略。
4. 这个项目的成功,要求我们能够envision每一个细节,尽可能地做到完美。
5. 作为一个领导者,你需要envision你的团队的未来,为他们设定明确的目标和路线图。
总之,envision是一个非常实用的词汇,可以帮助我们更好地预见未来,为个人和事业的成功奠定基础。
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(3)每张切片加1滴3% H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。
(4)除去PBS液,每张切片加1滴相应的第一抗体(相应稀释倍数),室温下孵育2小时。
(5)PBS冲洗3×5’。除去PBS液,每张切片加1滴聚合物增强剂(试剂A),室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。
免疫组织化学工作流程
1 石蜡切片脱蜡和水化后,用PBS(PH7.4)冲洗三次,每次5分钟。
PBS配制 (2000ml)PH7.4
氯化钠: 17g
磷酸二氢钠:0.4g
磷酸氢二钠:6.3g
2 根据每一种抗体的要求,对组织抗原进行相应的修复。我科采用压力锅进行抗原修复,取一定量的修复液于压力锅中,加热至沸腾,
8) EnVisionTM孵育10-30分钟
9) TBS漂洗10分钟
10) 色源底物溶液孵育10分钟
11) 蒸馏水漂洗
12) 复染及封片
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注:即用型第二代免疫组化Elivision plus广谱试剂盒,购自福州脉新生物技术开发有限公司。
包括:生物素化抗兔二抗、亲和素(Reagent A)、生物素-辣根过氧化物酶(Reagent B)、二氨基联苯胺(DAB)
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将脱蜡水化后的组织切片置于不锈钢或耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,盖上锅盖,扣上压力阀,继续加热至喷气,
从喷气开始计时,2分钟后,压力锅离开热源,冷却至室温(也可以稍冷后,在自来水龙头下加速冷却)。
取出玻片,先用蒸馏水冲洗两遍(用蜡在组织周围划圈,防止抗体跑散,但圈要大一点),之后用PBS(PH7.4)冲洗三遍。每次5分钟。
EnVision是DAKO公司推出的一种两步法免疫组化技术,又称为ELPS法。
EnVision比SP,ABC一般的显色比较:
1 要敏感很多,定位比较好:EnVision系统是将二抗和酶联接成一个多聚体(即EnVision)直接放大信号40-50倍,
再与已经结合的一抗反应,最后显色剂显色。采用该法可将一抗稀释度提高1~2倍,尤其对抗原表达较弱组织。
免疫组化(Elivison二步法)
(1)石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。
(2)取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,
放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,
每次还应带上阳性对照和阴性对照,以保证结果的可靠性。每张切片滴加足够量的一抗并放入湿盒,防止切片干燥影响结果,
室温孵育2小时。抗体稀释液的配制 牛血清白蛋白:2mg
叠氮钠: 10~20ml
双蒸水: 10ml
7 PBS冲洗三次,每次5分钟。
8 滴加二步法EnVision TM孵育30分钟。
4 PBS冲洗三次,每次5分钟。
5 滴加4 %羊血清封闭,室温30分钟,以减少非特异性染色。
PBS10 ml+正常羊血清400 ul
6 甩去羊血清,根据不同的项目配制并滴加不同的一抗,浓缩型的抗体一定要在购买后先用已知的阳性片做梯度实验,
根据结果情况找出最佳稀释浓度再用到临床诊断。工作液也应该在购买后先用已知的阳性片检测抗体的染色效果,直接滴加即可。
(6)除去PBS液,每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物(试剂B),室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’
(7)除去PBS液,每张切片加1滴新鲜配制的DAB液,显微镜下观察5分钟。
(8)苏木素复染,0.1%HCl分化,自来水冲洗,蓝化,切片经梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固,晾干后观察。
柠檬酸缓冲液的配制(PH6.0)
0.1M柠檬酸:(4.2g+200ml蒸馏水)
0.1M柠檬酸三钠 (14.7g+500ml蒸馏水)
取柠檬酸三钠41ml+柠檬酸9ml加入450ml蒸馏水中,总量为500ml即可。
3 配制3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶,孵育十分钟。
PBS90 ml+30 %过氧化氢10 ml,现用现配并摇匀,盖上盖子,防止见氧分解挥发。
3 比较省时:染色步骤为两步,且第二抗体孵育时较短片。
2) 预处理组织切片
3) 蒸馏水漂洗,置于TBS中。
4) 阻断内源性过氧化物酶(仅用于EnVision TM)
5) 蒸馏水漂洗,置于TBS,10分钟
6) 一抗孵育10-30分钟
7) TBS漂洗10分钟
9 PBS冲洗三次,每次5分钟。
10 甩去PBS液,每张切片滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,阳性信号为棕黄色或棕褐色。一般显色时间为5分钟左右,
终止反应,自来水充分冲洗。
11 苏木素复染,0.1%盐酸酒精分化,氨水返兰或自来水返兰(自来水返兰时间要稍长些,应该在显微镜下看以下苏木素复染情况),
也有人说SP法敏感度比EnVision高1-2倍,但SP法毕竟不宜用于富含亲生物素物质的组织。
2 非特异性背景少: EnVision法是多聚物上连接二抗和酶,在组织中不含有这种多聚物,从而避免了组织中生物素的干扰。
在含生物素较丰富的组织中,用EnVision法比较好。除血细胞较丰富的组织和坏死组织外,其实可省略内源性过氧化物封闭步骤。
自来水冲洗。
12 梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,阅片并总结染色结果。