第3章消毒灭菌与生物安全

易变性、湿热穿透力强、湿热的蒸汽释放潜 热，可以迅速提高被灭菌物体的温度。
热力灭菌法二
干热灭菌法 焚烧：尸体。 烧灼：接种环。 干烤：耐高温物品。 红外线：同干烤。 巴氏消毒法：牛奶、酒类等。 煮沸法：消毒食具等。 流动蒸气消毒法： 间歇蒸气灭菌法：不耐高温的培养基。 高压蒸气灭菌法：最有效的灭菌方法。 预真空压力蒸汽灭菌器：灭菌速率快。
滤过除菌法
机理：机械阻挡，获得无菌的液体或气体，但 是不能除去小型的微生物，如病毒等。 用具：滤菌器、滤膜孔径0.22-0.45微米。 应用：不耐高温灭菌的液体（血清、抗生素等）、 超净台（层流工作柜）、无菌病房等。
滤过除菌法的常用器具
其它物理消毒灭菌法
干燥抑菌法：停止代谢、保存食物（盐腌）。
二级
三级
四级
P3实验室
生物安全三级实验室。 实验室完全密封，室内处 于负压状态。内部的气体， 不会污染外界环境。 实验者穿戴特殊的防护服。
思考题
简述使用高压蒸气灭菌法的注意事项和
适应范围。
简述紫外线杀菌的作用机制和注意事项。
简述特定情形下的消毒灭菌措施。
消毒和灭菌的相互比较。
影响消毒灭菌效果的因素
消毒剂：杀灭机制各异（有的放矢）；浓度增加，时间延
长，作用提高（例外是醇类物质，如70%乙醇的
消毒效果最好）。
微生物：种类（细菌、芽胞、病毒、朊粒等）、数量。
温度：一定范围内，杀菌效果随温度增加而提高。 酸碱度：具体消毒剂，各有侧重。 有机物：脓液、痰液、血液等影响消毒效果。
干扰DNA的复制与转录。
用途：空气消毒、不耐热物品的表面消毒。
缺陷：穿透力弱（玻璃、黑纸等）、细菌
变异、对皮肤和眼睛有损伤。
辐射杀菌法二
电离辐射：主要是β、γ射线，尤其是γ射线
穿透力强，不升高温度，对各种细菌均有致死
作用，应用于一次性医用塑料制品、食品、生
物制品等的消毒灭菌。 微波：热效应杀菌，穿透力强于紫外线。
生物安全：biosafety
狭义概念：指现代生物技术的研究、开发、应用
及转基因生物可能对生物多样性、生态环境
和人类健康产生潜在的危害。
广义概念：指与生物有关的各种因素对社会、经
济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜 在风险。
病原微生物实验室的分级
级别 一级 处理对象 对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动 植物致病的致病因子。 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致 病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害， 具有有效的预防和治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶 使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环 境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径 传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防 治疗措形的消毒灭菌应用
空气：紫外线照射、化学消毒剂喷雾或熏蒸、如肝炎 病房的过氧乙酸喷雾或熏蒸。 皮肤：2.5%碘酒+70%乙醇，浅表创伤使用2%-4%龙胆紫。 黏膜：冲洗尿道等用合适浓度的氯已定或高锰酸钾。 排泄物：次氯酸钠或漂白粉浸泡处理。 饮水：氯、漂白粉消毒。
低温抑菌法：降低代谢、保存菌种，一般放 置-20℃或-70℃冰箱，最好方法是冷冻 真空干燥法，保存时间可达数十年。
消毒剂的杀菌机制
细菌蛋白质变性或凝固：醇类、醛类、过
氧化物等。
干扰细菌的酶系统和代谢过程：含氯消毒 剂、过氧化物消毒剂等。
损伤细菌的细胞膜：表面活性剂等。
化学消毒剂的种类
其它情形的消毒灭菌应用：室内空气、皮肤和
黏膜、排泄物与分泌物、污染物品、环境 的消毒等。
高危器械物品的消毒灭菌
特性：使用时需进入无菌组织的物品。 种类：针头、注射器、手术器械、导管等。 处理：所有这些物品都应该灭菌，最好采用高压
蒸汽灭菌法灭菌，对于不耐热的物品，使
用高效消毒剂处理。
消毒与灭菌的方法
物理消毒灭菌法：热力灭菌法、辐射杀菌法、
滤过除菌法、干燥与低温抑菌法 化学消毒灭菌法：消毒剂的杀菌机制、消毒剂 的主要种类、使用范围。
热力灭菌法一
原理：高温对细菌的致死效应（蛋白凝固变性）。
分类：干热灭菌法、湿热灭菌法。
效果：湿热灭菌效果好，原因是含水量多的蛋白质
生长繁殖的方法，所用药品称为防腐剂。
无菌：asepsis、无活菌意思，多是灭菌结果。 无菌操作：Aseptic operation 、防止细菌进
入人体或其它物品的操作技术。
相互比较
灭菌与消毒的比较：杀菌更彻底。 消毒与防腐的比较：浓度和时间。 无菌：本身无菌或灭菌处理。
无菌操作：保持着原生态的环境。
湿热灭菌法
高压蒸汽灭菌法
基本方法：103.4kPa（15磅）压力下，温度 达到121.3℃,维持20分钟。
灭菌效果：杀灭包括芽胞在内的所有微生物。
适用范围：耐高温、不怕潮湿的物品，如基础 培养基、手术敷料等。
高压蒸汽灭菌器
辐射杀菌法一
紫外线：波长265-266nm杀菌作用最强。 原理：作用于DNA，形成胸腺嘧啶二聚体，
高效消毒剂：可杀灭所有种类的微生物；包括含
氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛类消毒剂、
环氧乙烷等。
中效消毒剂：能杀灭除芽胞以外的微生物，包括
含碘消毒剂、醇类消毒剂等。
低效消毒剂：杀死细菌繁殖体，包括季铵盐类、
氯已定、高锰酸钾。
消毒灭菌的运用
医疗器械物品的消毒灭菌：高危、中危、低危
器械物品、快速周转的医疗器械。
中危器械物品的消毒灭菌
特性：不进入无菌组织，但需接触黏膜的器械。
种类：胃镜、阴道窥器、体温计等。
处理：采用消毒即可，如合适消毒剂的浸泡（使
用前彻底去除消毒剂）、最好采用高压蒸 汽灭菌法灭菌（器械允许）。
低危器械物品的消毒灭菌
特性：只接触未损伤的皮肤，不进入无菌 组织或不接触黏膜的物品。 种类：治疗盘、治疗车、食品器皿等。
第三章
消毒灭菌与生物安全
消毒灭菌常用术语一
灭菌：sterilization、杀灭物体上所有微生物 的方法，经过正规灭菌程序处理过的物 品，称为无菌物品。 消毒：disinfection、杀死物体上或环境中的病
原微生物的方法，所用药品称为消毒剂。
消毒灭菌常用术语二
防腐：antisepsis、防止或抑制皮肤表面细菌