D-双功能蛋白在大鼠和裸鼠肝细胞癌生长中的作用 路欣
青蒿素及其衍生物抗肿瘤作用实验研究进展
虫和免疫调节等多种重要药理作用和潜在应用价 值…。其抗肿瘤作用逐渐引起人们的关注，本文就
例垂体大腺瘤患者，每日１次口服蒿甲醚４０ ｍｇ，１２ 个月后患者临床症状明显改善，受损的视力、听力逐
目前国内外学者对青蒿素类药物的抗肿瘤作用的实 渐恢复。ＣＴ扫描显示瘤体密度明显降低，肿瘤体积
验研究进展予以综述。
胞ＨｅＬａ及卵巢癌细胞ＳＫＯＶ３和ＯＶＣＡＲ３均有明显 肝脏血供等均显著改善，患者疼痛等症状也减轻明
的抑制和杀伤活性。在白血病方面，国内外相继报 显。张祖贻等¨叫在试用青蒿琥酯联合长春瑞滨与顺
道青蒿素及其衍生物对Ｐ，明、Ｕ，，，、Ｋ，葩、ＨＬ－６０及 铂治疗中晚期ｔＨ，细胞肺癌的临床随机对照试验中
Ｍｏｌｔ－４等白血病细胞株均有明显的抑制或诱导凋亡 发现，联合用药组可显著提高患者的疾病控制率，同
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｎｔｉｍａｌａｒｉａｌ ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ（Ａｒｔ）ｐｏｓｓｅｓｓ ｖａｒｉｏｕｓ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｐｈａｒｍａｅｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃ— ｔｉｖｉｔｉｅｓ．ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ａｒｔ ｏｎ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｃｏｎｃｅｒｎｅｄ，ａ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｈｅｒ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅ－ ｓｅａｒｃｈｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ Ｓｏｍｅ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｈａｖｅ ｓｈｏｗｎ ｔｈａｔ Ａｒｔ ｐｌａｙ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｏｒ ｋｉｌｌｉｎｇ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ，ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ，ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｔｈｅ ａｐｅｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｎ－ ｈｉｂｉｔｉｎｇ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ａｒｔ ａｌＳｏ ｈａｖｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｌｅｔｈａｌ ｅｆｆｅｆ－ｔ ｔｏ ｔｕｍｏｒ，＇ｅｌｌｓ．ｍｏｒｅｏｖｅｒ．Ａｒｔ ｆ：ａｎ ａｎｔａｇｏｎｉｚｅ．ｔｈｅ ｍｕｆｔｉ－ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（ＭＤＲ）ｏｆ ｔｕｍｏｒ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ａｒｔ ａｒｅ
细胞周期调控
2.cdc基因 Leland Hartwell、 Paul Nurse分别以不同的酵母为实验材料，发现了许多与细胞分裂
有关的基因(cell division cycle gene，CDC)。如芽殖酵母的cdc28、裂殖酵母cdc2基因。 进一步研究发现：P34cdc2与P34cdc28是同源物，二者本身并不具有激酶活性，只有当其与有 关蛋白结合后，其激酶活性才能够表现出来。例如：P34cdc2必须与另一种蛋白P56cdc13结合 后才具有激酶活性。
表皮生长因子（EGF)受体 集落刺激因子－1（CSF-1)受 体 神经生长因子（NGF)受体
酪氨酸激酶 丝氨酸激酶 GTP/GDP结合蛋白
转录因子（AP-1) DNA结合蛋白 类固醇受体家族成员
3．抑癌基因 抑癌基因可抑制细胞周期于静止期，并使DNA复制不完全或损伤的细胞不能进入分裂期，
避免细胞的癌变。
（1）Ink4(Inhibitor of cdk 4) 如P16ink4a、P15ink4b、P18ink4c、P19ink4d，专一地与CDK4、CDK6结合，阻止CDK和 cyclinD的结合。使细胞周期不能从G1期的调控点进入到下一个时相。
（2）Cip/Kip
包括P21cip1 (cyclin inhibition protein 1)、P27kip1(kinase inhibition protein 1)、 P57kip2等，能与多种cyclin - CDK复合物包括cyclinE–CDK2、cyclinD–CDK6、cyclinD– CDK4结合，抑制cyclin - CDK复合物的蛋白激酶活性，使一些细胞增殖所需要的蛋白质磷 酸化受阻，细胞停留在G1期。
此外P21cip1还可与DNA聚合酶δ亚单位PCNA (proliferating cell nuclear antigen, PCNA )相互作用， 抑制DNA复制，但不影响DNA修复。
甘草酸二铵脂质复合物对小鼠化学性肝损伤的保护作用
甘草酸二铵脂质复合物对小鼠化学性肝损伤的保护作用于锋;刘春;董丽萍【期刊名称】《中国临床药理学与治疗学》【年(卷),期】2006(11)10【摘要】目的研究甘草酸二铵脂质复合物(α-diammonium glycyrrhizinate phosphatidylcholine complex,DG-LL)对D-氨基半乳糖(D-GalN)以及CCl4所致小鼠化学性肝损伤的保护作用及其机制。
方法采用在体和离体两种方法观察在体以D-GalN诱导小鼠急性肝损伤模型,测定各组肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,及肝组织丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、诱生型一氧化氮合酶(iN-OS)含量。
体外实验采用小鼠离体肝细胞原代培养,并建立CCl4诱导肝细胞坏死性损伤模型,检测DGLL对其的影响。
结果DGLL 能显著降低小鼠血清中升高的ALT、AST,降低XOD活力和过氧化物终产物MDA 的含量。
对氧化应激引起的肝脏GSH含量下降具有升高作用。
DGLL可以显著降低离体培养中染毒肝细胞中的ALT水平。
结论提示DGLL对小鼠化学性肝损伤具有显著的保护作用。
【总页数】5页(P1185-1189)【关键词】甘草酸二铵脂质复合物;肝损伤;肝原代培养细胞【作者】于锋;刘春;董丽萍【作者单位】中国药科大学药理研究室【正文语种】中文【中图分类】R965.2【相关文献】1.甘草酸二胺脂质复合物对D-半乳糖胺诱导小鼠肝损伤的保护作用 [J], 陈勇;李晶;于峰;刘春;刘兴祥;丁蔚茅;张尔康2.甘草酸二铵脂质复合物肠溶胶囊与甘草酸二铵胶囊对照治疗慢性病毒性肝炎687例荟萃分析 [J], 凌青霞;金宏慧;郑建铭;施光峰3.螺旋藻对急性化学性肝损伤小鼠肝组织脂质过氧化作用的影响 [J], 张小强;陆琮明;翟成凯4.藏药波棱瓜子总木脂素对四氯化碳(CCl4)致化学性肝损伤小鼠保护作用 [J], 赵兴冉;章雷;李佳川;顾健5.甘草酸二铵磷脂复合物对小鼠慢性肝损伤的保护作用 [J], 茹仁萍;陈晓瑾;尤琳雅;唐红英;蔡汉萍;匡荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
某科研项目拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析
某科研项目拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1. 技术路线备注：蓝色背景填充部分为前期已完成工作。
2. 研究方法2.1 X、Y在结肠癌发生、发展中的作用和预后相关性1)回顾性收集肠癌临床标本500例，取手术切除的肠癌组织、匹配的肝脏转移灶手术和穿刺标本，新鲜组织液氮保存标本200例，石蜡块300例，全部病例均通过临床、影像学、病理诊断，术前未进行辅助治疗，来自某某医院2008-2013年临床收治病例，随访资料齐全。
2)免疫组化检测组织切片中X、Y蛋白的表达及定位，分别设立阴性对照、肿瘤对照、肝转移对照。
3)SPSS16.0统计软件对X、Y表达及定位与临床标本进行病理关联性分析和预后统计分析，了解X、Y表达情况与相关临床资料之间的关系，单因素生存分析对临床各项指标与结肠癌生存期进行相关性分析，建立Cox比例风险回归模型，综合探讨临床各因素和X、Y表达与结肠癌肝转移、转移灶形成及预后的相关性。
2.2 体外、体内水平研究X、Y基因在肠癌肝转移中的调节功能1)制备X-shRNA慢病毒，建立X稳定沉默的细胞株，以无义序列作为阴性对照，利用MTT实验观察X沉默后细胞的生长曲线；克隆形成实验检测X沉默后细胞的克隆形成能力；流式细胞术结合PI单染、Annexin-V双染检测细胞周期和凋亡情况；细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞运动能力的变化。
与此同时，制备过表达X的慢病毒载体。
2)在稳定沉默X的结肠癌细胞中，导入过表达Y的慢病毒载体，利用细胞生长曲线观察X沉默且Y过表达后细胞的增殖能力变化；细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞运动能力的变化。
同样地，在稳定沉默Y的结肠癌细胞中，导入过表达X的慢病毒载体，利用细胞生长曲线观察Y沉默&X过表达后细胞的增殖能力变化；细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞运动能力的变化。
3)制备结肠裸鼠皮下移植瘤模型，观察肿瘤生长情况，建立生长曲线，统计分析Y和X对结肠癌细胞体内成瘤能力的影响，明确Y和X在结肠癌恶性增殖的作用。
地塞米松降低紫杉醇对肺癌细胞化疗作用的实验研究
地塞米松降低紫杉醇对肺癌细胞化疗作用的实验研究高雅茹;王玮;袁夏;贾婷婷;张蝶;袁易;曾海荣【摘要】目的研究地塞米松(dexamethasone,Dex)降低紫杉醇对肺癌细胞的化疗作用.方法 MTT法考察不同浓度的紫杉醇,以及地塞米松(10μmol·L-1)与不同浓度的紫杉醇联用,对肺癌细胞A549、Calu-1存活率的影响;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测地塞米松对糖皮质激素受体(GR)、P-糖蛋白(P-gP)、多药耐药蛋白1(MRP-1)表达的影响;裸鼠移植瘤实验考察地塞米松降低紫杉醇对肺癌细胞的化疗作用.结果与紫杉醇单独作用相比,地塞米松(10μmol·L-1)联合紫杉醇降低了紫杉醇对肺癌细胞A549、Calu-1的敏感性,使IC50明显提高(A549细胞:IC50由0.58μmol·L-1提高到1.35μmol·L-1;Calu-1细胞:IC50由1.10μmol·L-1提高到2.10μmol·L-1);地塞米松使GR蛋白表达增高,同时使P-gP、MRP-1蛋白的表达明显升高;地塞米松联合紫杉醇明显降低紫杉醇对裸鼠移植瘤的抑瘤效果.结论地塞米松联合紫杉醇可能使肺癌细胞产生耐药性,降低紫杉醇的化疗效果.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2019(035)003【总页数】6页(P382-387)【关键词】地塞米松;紫杉醇;联合用药;肺癌;化疗;多药耐药;糖皮质激素受体;P-糖蛋白【作者】高雅茹;王玮;袁夏;贾婷婷;张蝶;袁易;曾海荣【作者单位】上海中医药大学附属普陀医院药学部,上海 200062;上海中医药大学附属普陀医院药学部,上海 200062;上海中医药大学附属普陀医院药学部,上海200062;上海中医药大学附属普陀医院药学部,上海 200062;上海中医药大学附属普陀医院药学部,上海 200062;上海中医药大学附属普陀医院药学部,上海 200062;上海中医药大学附属普陀医院药学部,上海 200062【正文语种】中文【中图分类】R-332;R282.71;R392.11;R734.205;R977.6;R977.11随着社会的发展，环境污染的日益严峻，以及人类生活方式的改变，癌症已经成为威胁人类生命健康头号杀手。
胃癌发生、发展和治疗相关microRNAs及其作用靶点的研究进展
胃癌发生、发展和治疗相关microRNAs及其作用靶点的研究进展郭梦舟;崔越宏;刘天舒【摘要】MicroRNAs( miRNAs)are a family of endogenous noncoding small RNA molecules that are approximately 20 nucleotides in length. Aberrant expression or dysfunction of miRNAs and subsequent dysregulation of their target genes might be involved in the occurrence and developmentof various cancers. Gastric cancer is a leading malignant disease worldwide. Recent studies have shown that some miRNAs are closely associated with the proliferation,migration,invasion, apoptosis and chemosensitivity of gastric cancer cells by regulating their target genes. Advances in study on gastric cancer-related miRNAs,their target genes,and the use of miRNAs-targeted therapy in gastric cancer were reviewed in thisarticle.%MicroRNAs（ miRNAs）是一类长约20个核苷酸的内源性非编码小分子RNA，其表达紊乱或功能异常可导致其靶基因调节异常，从而参与肿瘤发生、发展。
【分生】第五章 细胞信号传导 第三 四节
名词解释 1、信号分子 3、G蛋白偶联受体 5、受体失敏
2、受体 4、受体滞留
第五章 细胞信号转导基础
第三节 细胞信号转导的特性
学习内容
一、信号转导一过性与记忆性 二、信号转导效应的调控 三、信号转导途径之间的相互作用
一、信号转导一过性与记忆性
（一）信号转导一过性 什么叫做“信号转导一过性”
在细胞信号转导链中，连续不断的配体可刺激连续多次 的信号转导，在每一个节点，接收到上游一次信号并把 信号传导至下游后，该节点的信号会及时终止，并恢复 到未接信号的初始状态，以便接受下一次信号。
（二）信号转导的网络
❖通过不同的膜受体间的相互作用； ❖通过不同的信号转导分子间的相互作用； ❖通过不同转录因子与顺式作用元件的相互作用；
（三）信号网络中信号传递专一性 ❖配体-受体之间的专一性； ❖细胞内信号转导的专一性； ❖基因转录的专一性；
第四节 信号转导与分子靶向药物
细胞信号转导异常： 是指由于信号转导蛋白量或结构的改变，导致信号转导的过强或 过弱，并由此引起细胞增殖、分化、凋亡或机能代谢的改变。
细胞信号转导异常与疾病
1. 受体异常与疾病 2. G蛋白异常与疾病 3. 胞内信号转导分子、转录因子异常与疾病 4. 多个环节细胞信号转导与疾病
G 蛋白与临床疾病
G 蛋白与心脏疾病
G蛋白的信号转导在心脏心肌收缩力、心率、心 律和心肌细胞生长的调节方面起着重要作用
心力衰竭：
Gs的生物活性降低。 Gi亚基的含量增加。
考试：试述G蛋白的结构与功能的关系
5.表达核内蛋白类
某些癌基因如myc、fos、jun的表达产物位于核内，能与DNA 结合，具有直接调节转录活性的转录因子样作用，激活基因转 录，促进肿瘤发生。
小鼠原代肝细胞培养及细胞增殖的分子机制研究
小鼠原代肝细胞培养及细胞增殖的分子机制研究细胞增殖是生物体生长和发育的重要过程，也是生物体不断更新、修复和再生的关键环节。
肝脏是一个细胞增殖活跃的器官，在肝脏组织受到损伤时，原代肝细胞从G0期重新进入G1期，进行增殖复制，以恢复受损组织。
因此，研究原代肝细胞的培养和细胞增殖分子机制，对于治疗肝脏疾病和肿瘤有重要的意义。
一、小鼠原代肝细胞培养方法小鼠原代肝细胞培养可采取悬浮培养法或贴壁培养法，其中贴壁培养法是最常用的方法之一。
贴壁培养法分为单层培养和三维培养两种方式。
单层培养法是将小鼠肝细胞分离和培养在含有培养基和血清等营养物质的培养皿上，细胞可以黏附于培养皿底部形成单层肝细胞。
这种培养方法常用于细胞增殖和分化实验中。
三维培养法则是将肝细胞培养在类似于肝实质的支架中，使之形成三维结构，这种培养方法可用于肝脏疾病和肝细胞转化研究。
二、小鼠原代肝细胞增殖与细胞周期细胞增殖是一种高度有序的生物过程，受到一系列分子间相互作用的调节。
在小鼠原代肝细胞中，增殖过程主要分为细胞周期的四个时期：G1期、S期、G2期和M期。
其中，S期是DNA合成期，在这期间，DNA聚合酶启动并开始合成新的DNA链。
细胞周期主要受到细胞因子、信号转导途径和细胞周期蛋白等分子的调节。
其中CDK4和CDK6是G1期调节蛋白，它们与细胞周期蛋白D（CyclinD）结合，促进细胞从G1期进入S期。
细胞周期调节蛋白CDK1和CyclinB主要调节细胞从G2期进入M期。
同时，Tp53，Rb等一些肿瘤抑制蛋白也起到重要作用，它们在癌症等疾病中的失调造成了DNA损伤修复的延迟和细胞周期的异常。
三、小鼠原代肝细胞增殖的信号通路小鼠原代肝细胞增殖不仅受到细胞周期调节蛋白的调节，在信号通路的调节下也会发生变化。
目前已知的信号通路包括Wnt/β-catenin信号通路，TGF-β信号通路，VEGF信号通路等。
Wnt/β-catenin信号通路的激活可以促进小鼠原代肝细胞增殖，同时也与肝癌细胞的形成有关。
双氢青蒿素抗乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤作用实验研究
双氢青蒿素抗乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤作用实验研究李静;陈永顺;贾晓栋;梁建梅;杨斌【摘要】目的研究双氢青蒿素(alpha-Dihydroartemisinin,DHA)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤的抗瘤作用.方法将裸鼠随机分为阴性对照组、DHA低剂量组(DHA给药剂量为50 mg·kg-1·d-1)、DHA中剂量组(DHA给药剂量为100 mg·kg-1·d-1)和DHA高剂量组(DHA给药剂量为200 mg·kg-1·d-1),建立人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤模型,测定不同浓度的DHA对裸鼠的体重、抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数的影响,免疫组化检测移植瘤P53蛋白的表达.结果 DHA可明显抑制移植瘤的生长,DHA低剂量、中剂量和高剂量对移植瘤的抑制率分别为20.25%、31.01%和46.20%,DHA各组胸腺指数和脾脏指数较阴性对照组均有不同的的提高,与阴性对照组比较,DHA高、中剂量组小鼠胸腺指数和脾脏指数均有显著性差异(P<0.05);免疫组化结果显示DHA可下调移植瘤细胞P53蛋白的表达.结论 DHA对人乳腺癌MDA-MB-231细胞移植瘤有显著的抑制作用,其抗癌机理可能是调节机体免疫和下调P53蛋白的表达.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2013(017)012【总页数】3页(P2031-2033)【关键词】双氢青蒿素;抗肿瘤【作者】李静;陈永顺;贾晓栋;梁建梅;杨斌【作者单位】商丘医学高等专科学校,河南,商丘,476100;商丘医学高等专科学校,河南,商丘,476100;广西医科大学药学院,广西,南宁,530021;商丘医学高等专科学校,河南,商丘,476100;广西医科大学药学院,广西,南宁,530021【正文语种】中文乳腺癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤，在西方发达国家已成为妇女的第一位死亡原因，在我国也是女性最常见的恶性肿瘤，且发病率呈逐年上升的趋势［1-3］。
国自然-面上项目标书范例讲解学习
申请代码H1606受理部门收件日期受理编号解除保护国家自然科学基金申请书(2010版)资助类别：面上项目亚类说明：附注说明：项目名称：Pyk2促进肝癌细胞迁移的一个新的分子机制研究：结合并磷酸化E-cadherin?申请人：电话：依托单位：通讯地址：邮政编码：266021 单位电话：电子邮箱：申报日期： 2010年2月26日国家自然科学基金委员会基本信息yoKWT/OQ申请人信息姓名性别男出生年月1973年4月民族汉族学位博士职称副主任医师每年工作时间（月） 8 电话电子邮箱传真国别或地区中国个人通讯地址工作单位主要研究领域肿瘤分子生物学依托单位信息名称联系人电子邮箱电话网站地址合作研究单位信息单位名称复旦大学[在此录入修改］项目基本信息项目名称Pyk2促进肝癌细胞迁移的一个新的分子机制研究：结合并磷酸化Ｅ-cadherin?资助类别面上项目亚类说明附注说明申请代码H1606:肿瘤复发与转移H1617:消化系统肿瘤基地类别研究年限2011年1月— 2013年12月研究属性基础研究申请经费35.0000万元摘要(限400字)：E-cadherin的丧失与肝癌转移密切相关。
其丧失的主要原因是由于其酪氨酸残基被磷酸化后蛋白被降解。
我们通过酵母双杂交发现一个新的能与E-cadherin相互作用的非受体型酪氨酸激酶Pyk2。
Pyk2活性增强可促进肝癌细胞迁移。
本课题假设Pyk2结合并磷酸化E-cadherin，导致E-cadherin蛋白降解，细胞迁移性增加。
本课题设计首先通过GST pulldown、免疫共沉淀证明二者相互作用可靠；其次通过磷酸化实验确证Pyk2可以磷酸化E-cadherin；然后应用细胞迁移实验和裸鼠成瘤实验确定：Pyk2通过磷酸化E-cadherin而影响肝癌细胞迁移和肿瘤转移；最后分析在人肝癌标本中二者表达的相关性以及与转移的关系。
本课题新发现Pyk2可以直接磷酸化E-cadherin，促进肝癌细胞迁移和肿瘤转移，具有国际先进性。
基于IL-17
doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2024.01.013·论著/中医中药与免疫·基于IL-17/NF-κB信号通路探讨敦煌医方大补脾汤联合奥沙利铂对胃癌荷瘤小鼠炎症免疫的影响曾元丁苏韫龚红霞牛世伟张晗（甘肃中医药大学基础医学院，甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室，兰州 730000）中图分类号R285.5 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2024）01-0092-05［摘要］目的：研究敦煌医方大补脾汤对胃癌荷瘤小鼠的抑瘤作用以及基于IL-17/NF-κB信号通路探讨大补脾汤联合奥沙利铂对胃癌荷瘤小鼠炎症免疫的影响。
方法：建立MFC胃癌皮下荷瘤小鼠模型，随机分为模型组、奥沙利铂组、大补脾汤高、中、低剂量联合奥沙利铂组［21.58、10.79、5.40 g/（kg·d）］，每组10只，雌雄分笼饲养，接种8 d后开始给药，连续给药14 d；末次给药后次日眼球取血，处死小鼠，摘取肿瘤组织称重，计算抑瘤率；ELISA检测小鼠血清IL-17和IL-6含量，免疫组化（IHC）、RT-qPCR和Western blot分别检测小鼠肿瘤组织IL-17、IL-6、NF-κB和pNF-κB mRNA和蛋白表达。
结果：奥沙利铂组、大补脾汤高、中、低剂量联合奥沙利铂组抑瘤率分别为33.02%、52.92%、46.33%和39.52%，各给药组肿瘤质量均较模型组显著降低（P<0.01），大补脾汤高、中、低剂量联合奥沙利铂组显著高于奥沙利铂组（P<0.01）；与模型组相比，各给药组血清IL-17和IL-6含量、肿瘤组织IL-17、IL-6、NF-κB p65和pNF-κB p65 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01，P<0.05）；与奥沙利铂组相比，大补脾汤高、中剂量联合奥沙利铂组血清IL-17和IL-6含量、肿瘤组织IL-17、IL-6、NF-κB p65和pNF-κB p65 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01，P<0.05）。
D-双功能蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及意义
D-双功能蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及意义路欣;孔令玉【摘要】目的检测子宫内膜癌组织中D-双功能蛋白(DBP)表达水平,及其与血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)检测结果的相关性,探讨DBP对子宫内膜癌诊断和治疗的临床意义.方法选取2013年1月～2015年12月在河北省唐山市妇幼保健院(以下简称“我院”)进行子宫内膜癌切除术患者30例作为实验组,选取我院同期健康体检的正常者20名作为对照组,应用化学发光法检查血清肿瘤标志物CEA和CA125的表达水平,免疫组织化学法检测子宫内膜癌组织和癌旁组织DBP的表达水平,测量积分光密度值(IOD),采用Pearson相关分析法分析DBP与肿瘤标志物CEA、CA125的相关性.结果子宫内膜癌组织中DBP的IOD值表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05),且DBP与肿瘤标志物CEA(r=0.837,P＜0.01)和CA125(r=0.787,P＜0.01)的表达水平呈线性正相关.结论子宫内膜癌患者DBP的表达升高,并且与子宫内膜癌的发生发展密切相关.CEA、CA125和DBP联合检测对子宫内膜癌早期诊断有重要的意义,并为子宫内膜癌的治疗和预后提供了一个新的研究靶点.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2019(016)004【总页数】5页(P161-163,168,封4)【关键词】子宫内膜癌;D-双功能蛋白;癌胚抗原;糖类抗原125;基因诊断【作者】路欣;孔令玉【作者单位】河北省唐山市妇幼保健院检验科,河北唐山063000;河北医科大学中西医结合学院,河北石家庄050017【正文语种】中文【中图分类】R737.33子宫内膜癌（endometrial carcinoma，EC）是门诊和住院患者中常见的妇科肿瘤，临床发病率近年呈现升高趋势，甚至在一些地区发病率超过子宫颈癌，严重影响着女性的生活和健康[1]。
因此，EC的早期诊断和预后监测就变得尤其重要。
CDCA5在裸鼠肝细胞癌中的作用及临床价值
CDCA5在裸鼠肝细胞癌中的作用及临床价值作者：李德新李华李飞赵晓晨李茂德安祥兰戴天来源：《医学信息》2020年第18期摘要：目的 ;探讨不同程度CDCA5表达在裸鼠肝细胞癌中的作用及临床价值。
方法 ;取HepG2正常细胞组、CDCA5低表达组、CDCA5高表达组、HepG2肝癌细胞株，将高表达组、低表达组CDCA5高效转染人肝癌HepG2细胞，并设阴性对照组（NC组）。
免疫印迹法检测转染24 h后各组CDCA5蛋白的表达水平，CCK-8法检测转染24、48、72、96、120 h 各组细胞的增殖能力，Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测低表达组转染48 h的凋亡情况;将HepG2正常细胞组，CDCA5低表达组的细胞分别注射于裸鼠成瘤，观察成瘤时间，第30天处死小鼠，观察瘤体状态。
免疫组化检测CDCA5在裸鼠肿瘤中的表达。
结果 ;高表达和低表达组的CDCA5蛋白水平均高于NC组（P关键词：CDCA5;肝癌;裸鼠;预后中图分类号：R735.7 ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 文献标识码：A ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.18.015文章编号：1006-1959（2020）18-0048-03The Role and Clinical Value of CDCA5 in Nude Mice Hepatocellular CarcinomaLI De-xin，LI Hua，LI Fei，ZHAO Xiao-chen，LI Mao-de，AN Xiang，LAN Dai-tian（Sichuan Academy of Medical Sciences/Hepatobiliary Surgery，Sichuan Provincial People's Hospital<East Hospital>，Chengdu 610010，Sichuan，China）Abstract：Objective ;To explore the role and clinical value of different levels of CDCA5 expression in nude mice hepatocellular carcinoma.Methods ;HepG2 normal cell group， CDCA5 low expression group， CDCA5 high expression group and HepG2 hepatocarcinoma cell lines were selected. The high expression group and low expression group CDCA5 were efficiently transfected into human liver cancer HepG2 cells， and a negative control group （NC group） was established. Western blotting was used to detect the expression level of CDCA5 protein in each group after 24 h of transfection. CCK-8 method was used to detect the proliferation ability of cells in each group after transfection 24， 48， 72， 96， 120 h. Annexin V-FITC/PI double label flow Cytometry was used to detect the apoptosis of the low expression group for 48 h after transfection; the HepG2 normal cell group and the CDCA5 low expression group were injected into nude mice to form tumors， and the tumor formation time was observed. The mice were killed on the 30th day and the tumors were observed body state. Immunohistochemistry was used to detect the expression of CDCA5 in tumors of nude mice.Results ;The CDCA5 protein levels of the high and low expression groups were higher than those of the NC group （PKey words：CDCA5;Liver cancer;Nude mice;Prognosis肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是临床常见的恶性肿瘤，患者就诊时往往病情严重、预后较差，病死率高，目前主要以手术治疗、放疗、化疗、生物治疗等综合治疗为主[1]。
乳腺癌患者D双功能蛋白表达与肿瘤标志物CEA和CA153关系的临床研究
㊀㊀ʌ摘㊀要ɔ㊀目的㊀探讨乳腺癌组织中Ｄ￣双功能蛋白(ＤＢＰ)表达及其与血清肿瘤标志物ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３水平的相关性ꎬ及对乳腺癌诊断和治疗的临床意义ꎮ方法㊀选取２０１２年１月￣２０１５年１２月唐山市妇幼保健院住院的２０例乳腺癌切除术患者作为试验组ꎬ同期２０例健康体检的正常者作为健康对照组ꎬ应用化学发光法检查血清肿瘤标志物ＣＥＡ和ＣＡ１５３的表达水平ꎬ免疫组织化学法检测乳腺癌组织和癌旁组织ＤＢＰ的表达水平ꎬ分析比较其差异㊁相关性ꎮ结果㊀试验组血清肿瘤标志物ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３水平均显著高于正常对照组ꎬ差异均有统计学意义(ｔ＝３９.２２㊁４２.８７ꎬＰ均<０.０１)ꎬ乳腺癌组织中ＤＢＰ表达水平高于癌旁组织ꎬ乳腺癌组织ＤＢＰ的灰度值为(９６.３ʃ１１.４)ꎬ癌旁组织为(２９.８ʃ５.７)ꎬ差异具有统计学意义(ｔ＝２.３０１ꎬＰ<０.０５)ꎮ试验组患者中ꎬＤＢＰ的表达与血清ＣＥＡ和ＣＡ１５３水平均呈正相关(ｒ＝０.８００ꎬＰ<０.０１ꎻｒ＝０.７０９ꎬＰ<０.０１)ꎮ结论㊀ＤＢＰ表达在乳腺癌的发展进程中具有重要的意义ꎬ并为乳腺癌的诊疗提供了一个新的研究靶点ꎮʌ关键词ɔ㊀乳腺癌ꎻＤ￣双功能蛋白ꎻ癌胚抗原ꎻ糖类抗原１５３ʌＤＯＩɔ㊀１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１６７１￣６４５０.２０１９.０２.０１４ＣｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｙｏｆＤＢＰｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｓＣＥＡａｎｄＣＡ１５３ｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ㊀ＬＵＸｉｎ∗ꎬＫＯＮＧＬｉｎｇｙｕꎬＱＩＵＮｉｎｇ.∗ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙꎬＴａｎｇｓｈａｎＭａｔｅｒｎａｌａｎｄＣｈｉｌｄＨｅａｌｔｈＨｏｓｐｉｔａｌꎬＨｅｂｅｉＰｒｏｖｉｎｃｅꎬＴａｎｇｓｈａｎ０６３０００ꎬＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ:ＫＯＮＧＬｉｎｇｙｕꎬＥ￣ｍａｉｌ:５０６９０５７６６＠ｑｑ.ｃｏｍ㊀㊀ʌＡｂｓｔｒａｃｔɔ㊀Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＤ￣ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｔｅｉｎ(ＤＢＰ)ｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ(ＢＣ)ａｆｔｅｒｏｐ￣ｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｔｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｓｅｒｕｍｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｓＣＥＡａｎｄＣＡ１５３ꎬａｎｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｏｆＤＢＰｏｎｅａｒｌｙｄｉａｇ￣ｎｏｓｉｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀ＴｗｅｎｔｙｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｒｅｓｅｃｔｉｏｎａｄｍｉｔｔｅｄｔｏｔｈｅＴａｎｇｓｈａｎＭａｔｅｒ￣ｎａｌａｎｄＣｈｉｌｄＨｅａｌｔｈＨｏｓｐｉｔａｌｆｒｏｍＪａｎ.２０１２ｔｏＤｅｃ.２０１５ｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐꎬａｎｄ２０ｎｏｒｍａｌｈｅａｌｔｈｙｓｕｂｊｅｃｔｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ.ＴｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｓｅｒｕｍｍａｒｋｅｒｓＣＥＡａｎｄＣＡ１５３ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｍｅｔｈｏｄꎬａｎｄｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ.ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＤＢＰｉｎｔｉｓｓｕｅｓａｎｄａｄｊａｃｅｎｔｔｉｓ￣ｓｕｅｓｗａｓａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｆｏｒｔｈｅｉｒｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｎｄｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀ＴｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆＣＥＡａｎｄＣＡ１５３ｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎ￣ｔａｌｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｓｉｎｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ(ｔ＝３９.２２ꎬ４２.８７ꎬＰ<０.０１).ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＤＢＰｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎａｄｊａｃｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓꎬｔｈｅｇｒａｙｖａｌｕｅｏｆＤＢＰＩＮｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅａｎｄａｄｊａｃｅｎｔｔｉｓｓｕｅｗａｓ(９６.３ʃ１１.４)ａｎｄ(２９.８ʃ５.７)ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬｔｈｅｒｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ(ｔ＝２.３０１ꎬＰ<０.０５).ＴｈｅｒｅｗａｓａｌｉｎｅａｒｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＤＢＰａｎｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｓＣＥＡａｎｄＣＡ１５３(ｒ＝０.８００ꎬＰ<０.０１ꎻｒ＝０.７０９ꎬＰ<０.０１).Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＤＢＰｈａｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒꎬａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓａｎｅｗｔａｒｇｅｔｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ.㊀㊀ʌＫｅｙｗｏｒｄｓɔ㊀ＢｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒꎻＤ￣ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｔｅｉｎꎻＣａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉｅａｎｔｉｇｅｎꎻＣＡ１５３㊀㊀乳腺癌是常见的恶性肿瘤ꎬ在妇科系统肿瘤中长期居于首位ꎮ乳腺癌早期的症状不易发现ꎬ很多患者就诊时已经到中晚期ꎮ术后转移是造成乳腺癌患者死亡的重要原因ꎬ对妇女的健康构成了极大的威胁ꎬ如果能发现乳腺癌更好的早期预警手段ꎬ提高早期诊断水平ꎬ就可以降低乳腺癌患者的致死风险ꎬ提高生存周期[１￣２]ꎮＤ￣双功能蛋白(Ｄ￣ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｔｅｉｎꎬＤＢＰ)ꎬ也称为１７β￣雌二醇脱氢酶ＩＶ(１７β￣ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅ￣ｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅＩＶꎬＨＳＤ１７Ｂ４)ꎬ是一种过氧化物的酶蛋白ꎬ在类固醇激素的代谢中发挥着重要作用ꎮ最近的研究报道ＤＢＰ在前列腺癌㊁肝癌等肿瘤中表达水平明显升高[３]ꎮ笔者在前期基础实验和临床研究结果显示ꎬＤＢＰ在肝癌细胞㊁动物组织以及肝癌患者的肿瘤组织中高表达ꎬ通过诱导雌二醇(ｅｓｔｒａｄｉｏｌꎬＥ２)脱氢失活机制ꎬ因而促进肝癌细胞的增殖[４]ꎮ所以考虑ＤＢＰ水平升高也可能和某些与雌激素相关肿瘤有很大的关系ꎮ本课题对乳腺癌肿瘤组织ＤＢＰ水平进行检测ꎬ同时观察乳腺癌患者和健康女性外周血癌胚抗原(ＣＥＡ)以及糖类抗原１５３(ＣＡ１５３)的表达ꎬ探讨研究ＤＢＰ在乳腺癌中的表达水平及其与发病的关系ꎬ以及早期诊断的临床相关性ꎬ报道如下ꎮ１㊀资料与方法１.１㊀临床资料㊀选取２０１２年１月 ２０１５年１２月在唐山市妇幼保健院施行乳腺癌手术的２０例女性患者为试验组ꎬ年龄３５~６５(３８.５ʃ４.９)岁ꎻ随机抽选同期进行健康查体的２０例正常女性为健康对照组ꎬ年龄２７~６５(４３.０ʃ６.５)岁ꎮ乳腺癌患者全部经病理和临床证实ꎬ手术前未经过放化疗等治疗ꎬ无其他特殊病史ꎮ２０例乳腺癌女性患者术后的肿瘤组织和距离肿瘤边缘１ｃｍ以上的癌旁正常组织留取病理标本ꎮ并且经２名资深的病理科医师确认病理结果ꎮ２组年龄等差异无统计学意义(Ｐ>０.０５)ꎬ具有可比性ꎮ本研究经医院医学伦理委员会审批通过ꎬ全部受试者知情同意并签署知情同意书ꎮ１.２㊀检测指标与方法㊀２组试验对象晨起空腹采取静脉血液ꎬ在离心机上离心分离血清后用ＤＸ￣８００ｉ化学发光仪ꎬ采用化学发光免疫法测量ＣＥＡ和ＣＡ１５３的表达水平ꎬ所用试剂购买自美国贝克曼公司ꎻ癌组织和癌旁正常组织标本石蜡包埋后用莱卡组织切片机切片ꎬ组织切片后先用ＨＥ染色进行初步确认对比后ꎬ然后应用免疫组织化学检测试剂盒(北京中杉金桥生物公司)检测ＤＢＰ表达水平ꎬＤＢＰ表达水平用积分光密度(ＩＯＤ)表示ꎮ１.３㊀统计学方法㊀采用ＳＰＳＳ１７.０统计软件进行有关分析ꎮ符合正态分布的计量资料以均数ʃ标准差( ｘʃｓ)表示ꎬ采用ｔ检验ꎻ相关性采用Ｓｐｅａｒｍａｎ等级相关分析ꎮ以Ｐ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ２㊀结㊀果２.１㊀试验组与健康对照组血清ＣＥＡ和ＣＡ１５３水平比较㊀试验组血清肿瘤标志物ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３水平显著高于健康对照组ꎬ２组比较差异有统计学意义(Ｐ<０.０１)ꎬ见表１ꎮ表１㊀试验组与健康对照组血清ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３水平比较㊀( ｘʃｓ)组㊀别例数ＣＥＡ(ｎｇ/ｍｌ)ＣＡ１５３(Ｕ/ｍｌ)健康对照组２０２.５５ʃ１.６７５.０５ʃ２.８６试验组２０８６.９１ʃ１３.４９５１.６３ʃ１２.８１ｔ值３９.２２４２.８７Ｐ值<０.０１<０.０１２.２㊀乳腺癌肿瘤组织和癌旁正常组织ＤＢＰ表达水平比较㊀免疫组化染色结果显示癌组织ＤＢＰ表达水平显著高于癌旁组织ꎮ进一步通过灰度值分析ꎬ乳腺癌组织ＤＢＰ表达的灰度值为(９６.３ʃ１１.４)ꎬ癌旁组织为(２９.８ʃ５.７)ꎬ差异具有统计学意义(ｔ＝２.３０１ꎬＰ<０.０５)ꎮ２.３㊀试验组ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３与ＤＢＰ表达水平的相关性㊀对试验组ＣＥＡ和ＣＡ１５３表达水平与ＤＢＰ表达水平进行了相关性分析ꎬ结果显示ꎬＤＢＰ与ＣＥＡ和ＣＡ１５３的表达量均呈正相关(ｒ＝０.８００ꎬＰ<０.０１ꎻｒ＝０.７０９ꎬＰ<０.０１)ꎬ见图１ꎮ图１㊀ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３与ＤＢＰ表达水平的相关性３㊀讨㊀论㊀㊀乳腺癌是门诊和住院中常见的妇科恶性肿瘤ꎬ目前仍没有敏感性特别好的非创伤性检测方法ꎬ除了影像学诊断和病理诊断ꎬ血清肿瘤标志物检测是临床最为常用的肿瘤诊断方法之一ꎬ但与影像学诊断和病理相比血清肿瘤标志物检测简单快捷ꎬ因此有较好的临床实用意义[５]ꎮＣＡ１５３是乳腺癌诊断应用较为普遍的监测因素ꎬ有研究显示大约有１/３的乳腺癌患者血清ＣＡ１５３水平升高ꎬ并且升高和变化与乳腺癌的好转或恶化有关ꎬ本研究也表明乳腺癌患者的ＣＡ１５３水平较健康对照组有显著升高ꎮＣＥＡ常作为腺癌的非特异性诊断标记物ꎬ在其他恶性肿瘤的鉴别诊断㊁疗效监测中有重要的临床意义ꎬ但是由于ＣＡ１５３为非特异性指标ꎬ常与其他指标联合检测[６]ꎮ虽然乳腺癌的血清学检测方法较为简便快捷ꎬ但是血清肿瘤标志物检测的敏感性和特异性并不高ꎬ况且血清学检测也受到外部和体内诸多环境的影响ꎬ因此如果血清学肿瘤标志物检测联合应该能够更好地提升乳腺癌检出准确率ꎮ㊀㊀ＤＢＰ基因是一种与炎性反应㊁脂肪酸代谢㊁性类固醇代谢密切相关的酶蛋白分子ꎮ最近研究显示ꎬＤＢＰ与肿瘤有密切关系ꎬＤＢＰ在前列腺癌组织比癌旁正常组织高表达ꎬ并可以作为前列腺癌预后差独立标记物[７]ꎮ另外其他肿瘤组织如肝细胞肝癌㊁直肠癌中都高度表达ꎬＤＢＰ在卵巢高表达和通过对雌激素失活的作用防止Ｅ２在卵巢积聚ꎬ为卵巢癌的预防和治疗提供了新靶点[８￣１３]ꎮ㊀㊀本课题在前期研究基础上ꎬ率先以ＤＢＰ为切入点ꎬ探索和揭示了乳腺癌ＤＢＰ与ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３的关系ꎬ与前期肝细胞肝癌㊁子宫内膜癌的研究结果表现出一致性ꎬ研究结果不仅证实乳腺癌肿瘤组织ＤＢＰ的表达显著升高ꎬ并且显著高于癌旁正常组织ꎬ乳腺癌的血清ＣＥＡ和ＣＡ１５３水平表达显著高于正常女性(Ｐ<０.０１)ꎬ进一步研究显示ꎬ试验组肿瘤组织ＤＢＰ的表达水平与患者血清ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３水平呈正相关ꎮ由于ＤＢＰ在血液中几乎不表达ꎬ能够作为良好的基因检测和治疗观察靶点ꎬ这恰恰补充了血清肿瘤标志物检测的不足ꎬ结果清晰地表明乳腺癌患者ＤＢＰ联合血清学肿瘤标志物ＣＥＡ和ＣＡ１５３的检测能够更好地提高乳腺癌早期的诊断率ꎬ此外ＤＢＰ还可以作为乳腺癌术后观察和病情监测的新基因靶点ꎮ利益冲突:无作者贡献声明路欣:设计研究方案ꎬ实施研究过程ꎬ论文撰写ꎬ论文修改ꎻ孔令玉:设计研究思路ꎬ分析试验数据ꎬ论文审核ꎻ邱宁:实施研究过程ꎬ资料搜集整理参考文献[１]㊀ＳｍｉｔｈＲＡꎬＳａｓｌｏｗＤꎬＳａｗｙｅｒＫＡꎬｅｔａｌ.Ａｍｅｒｉｃａｎｃａｎｃｅｒｓｏｃｉｅｔｙｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓｆｏｒｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇ[Ｊ].ＣＡＣａｎｃｅｒＪＣｌｉｎꎬ２００３ꎬ５３(３):１４１￣１６９.[２]㊀ＥｔｚｉｏｎｉＲꎬＵｒｂａｎＮꎬＲａｍｓｅｙＳꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｃａｓｅｆｏｒｅａｒｌｙｄｅｔｅｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＮａｔＲｅｖＣａｎｃｅｒꎬ２００３ꎬ３(４):２４３￣２５２.[３]㊀Ｒ.ＭｉｎｄｎｉｃｈꎬＧ.ＭüｌｌｅｒꎬＪ.Ａｄａｍｓｋｉ.Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆ１７ｂｅｔａ￣ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅ￣ｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓ[Ｊ].ＭｏｌＣｅｌｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌꎬ２００４ꎬ２１８(１):７￣２０. [４]㊀ＬｕＸꎬＭａＰＰ.ＮＦ￣κＢｉｎｃｒｅａｓｅｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ１７β￣ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅ￣ｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ４ｐｒｏｍｏｔｅｓＨｅｐＧ２ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｖｉａｉｎａｃｔｉｖａｔｉｎｇｅｓｔｒａｄｉｏｌ[Ｊ].ＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄＣｅｌｌｕｌａｒＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ１ꎬ１１(５):４０１￣４１１.[５]㊀郑平燕.外周血ＣＥＡ㊁ＣＡ１５３㊁ＣＡ１２５在乳腺癌临床筛查中的应用[Ｊ].中国妇幼保健ꎬ２０１５ꎬ３０(１６):２５２０￣２５２２.[６]㊀ＤｕｆｙＭＪꎬＳｈｅｒｉｎｇＳ.ＣＡ１５３:ａｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｍａｒｋｅｒｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＩｎｔＭａｒｋｅｒｓꎬ２０００ꎬ１５(４):３３０￣３３３.[７]㊀ＲａｓｉａｈＫＫꎬＧａｒｄｉｎｅｒ￣ＧａｒｄｅｎＭ.ＨＳＤ１７Ｂ４ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎꎬａｎｉｎｄｅ￣ｐｅｎｄｅｎｔｂｉｏｍａｒｋｅｒｏｆｐｏｏｒｐａｔｉｅｎｔｏｕｔｃｏｍｅｉｎｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＭｏｌＣｅｌｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌꎬ２００９ꎬ３０１(１):８９￣９６.[８]㊀ＥｎｇｌｉｓｈＭＡꎬＫａｎｅＫＦꎬＣｒｕｉｃｋｓｈａｎｋＮꎬｅｔａｌ.Ｌｏｓｓｏｆｅｓｔｒｏｇｅｎｉｎａｃｔｉ￣ｖａｔｉｏｎｉｎｃｏｌｏｎｉｃｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＪＣｌｉｎＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌＭｅｔａｂꎬ１９９９ꎬ８４(３):２０８.[９]㊀李旭ꎬ黄尚科ꎬ安改丽ꎬ廖子君ꎬ赵新汉.乙醛脱氢酶１在乳腺癌组织中的表达及其临床意义的Ｍｅｔａ分析[Ｊ].疑难病杂志ꎬ２０１６ꎬ１５(７):７４７￣７５１.ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１６７１￣６４５０.２０１６.０７.０２２. [１０]㊀ＮａｇａｙｏｓｈｉＹꎬＯｈｂａＴ.Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆ１７ｂｅｔａ￣ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅ￣ｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｔｙｐｅ４ｉｎｈｕｍａｎｏｖａｒｉａｎｓｕｒｆａｃｅｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＭｏｌＨｕｍＲｅｐｒｏｄꎬ２００５ꎬ５５(１１):６１５￣６２１.[１１]㊀ＭａｌｅｋｉＪꎬＮｏｕｒｂａｋｈｓｈＭꎬＳｈａｂａｎｉＭꎬｅｔａｌ.１７ｂｅｔａ￣ＥｓｔｒａｄｉｏｌＳｔｉｍ￣ｕｌａｔｅｓＧｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆＲｅａｃｔｉｖｅＳｐｅｃｉｅｓＯｘｙｇｅｎａｎｄＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅｉｎＯ￣ｖａｒｉａｎＡｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａＣｅｌｌｓ(ＯＶＣＡＲ３)[Ｊ].２０１５:ｅ２３３２. [１２]㊀ＷｕＸꎬＬｕｋａｃｉｋＰꎬＫａｖａｎａｇｈＫＬꎬｅｔａｌ.ＳＤＲ￣ｔｙｐｅｈｕｍａｎｈｙｄｒｏｘｙｓ￣ｔｅｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｓｔｅｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎꎬＭｏｌ.Ｃｅｌｌ[Ｊ].Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌꎬ２００７ꎬ２６５/２６６(１):７１￣７６.[１３]㊀Ｌｕｕ￣ＴｈｅＶꎬＴｒｅｍｐｌａｙＰꎬＬａｂｒｉｅＦꎬＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎｏｆｔｙｐｅ１２１７￣ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅꎬａｎｉｓｏｆｏｒｍｏｆｔｙｐｅ３１７￣ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅ￣ｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒｅｓｔｒａｄｉｏｌｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎｗｏｍｅｎ[Ｊ].Ｍｏｌ.Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌꎬ２００６ꎬ２０(５):４３７￣４４３.(收稿日期:２０１８－１０－０９)«疑难病杂志»开通微信公众平台我刊已开通微信公众平台并取得认证ꎬ借助该平台可以即时查询我刊简介㊁阅读稿约㊁浏览杂志全文或摘要ꎬ学习论文写作知识和技巧ꎬ并可在微社区进行互动交流ꎮ为加强作者㊁读者和编者之间的联系提供了更为方便快捷的手段ꎬ欢迎大家予以关注!关注方法:扫描中文目次首页的二维码ꎬ或直接搜索公众号 疑难病杂志 ꎮ。
维生素K2干预肝癌的实验研究
维生素K2干预肝癌的实验研究周小芸;王艳红;薛琼;孙瑞霞;陈洁;陈军;韩丹【期刊名称】《中国临床医学》【年(卷),期】2009(016)001【摘要】目的:研究维生素K2对人肝癌细胞的凋亡诱导作用,并探讨其作用机制;研究维生素K2的干预对荷瘤裸鼠肝癌肺转移及生存期的影响.方法:用流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR方法检测凋亡相关基因caspase-3、bcl-2及bax的tuRNA表达.建立人肝癌裸鼠原位移植模型,给予荷瘤裸鼠口服维生素K2(30 mg·kg-1·d-1),另设对照组,观察两组裸鼠肝癌肺转移和生存期变化.结果:100μmol·L-1的维生索K2与细胞共育6 h后细胞的凋亡率为(28.5±1.6)%,与对照组(2.8±4.8)%比较,有显著差异(P＜0.05).caspase-3 mRNA的表达随着维生素K2浓度及作用时间的增长而增强;当100μmol的维生素K2分别作用细胞24 h 和72 h后,caspase-3 mRNA的表达分别为(0.495±0.250)和(0.603±0.098),与对照组比较(0.270±0.132)均有显著差异(P＜0.05).人肝癌细胞中未检测到bel-2 mRNA表达.bax mRNA的表达于用药前后无变化.维生素K2干预荷瘤裸鼠后,其生存期(83.6±5.18 d)较对照组(58.2±9.47 d)明显延长(P＜0.05);其肺转移灶(4.6±1.95个)较对照组(12±6.6个)明显减少(P＜0.05).结论:维生素K2对人肝癌细胞有凋亡诱导作用,凋亡相关基因easpase-3参与了凋亡的调控;维生素K2能减少裸鼠肝癌肺转移率,能延长荷瘤裸鼠的生存期.【总页数】5页(P75-79)【作者】周小芸;王艳红;薛琼;孙瑞霞;陈洁;陈军;韩丹【作者单位】复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032;复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.维生素 K2抑制肝癌细胞增殖的机制研究 [J], 王光丽;周小辉2.乙醇激活细胞色素P450 2E1增强维生素K2抑制肝癌细胞活力 [J], 李璐;董斌;宋睿;王璐;韩伟3.维生素K2调控Wnt/β-catenin信号对肝癌细胞侵袭、凋亡的影响及机制研究[J], 张锋;苗江永4.维生素K2 通过降低D-双功能蛋白活性抑制肝癌的实验研究 [J], 孔令玉; 路欣; 姜玲玲5.维生素K2通过降低D-双功能蛋白活性抑制肝癌的实验分析 [J], 王佳;赵卿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
植物Dof转录因子及其生物学功能
植物Dof转录因子及其生物学功能徐慧妮;王康;李昆志【摘要】Dof(DNA binding with one finger)蛋白是植物特有的一类转录因子,包含一个C_2- C_2锌指,其N-末端保守的Dof结构域是既与DNA又和蛋白相互作用的双重功能域.在过去10多年的研究中,Dof蛋白在多种单子叶和双子叶植物中被分离.Dof蛋白作为转录的激活子或抑制子在植物的生长和发育中发挥重要作用.就Dof转录因子及其生物学功能的进展进行了综述.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2010(000)001【总页数】6页(P19-23,29)【关键词】Dof;转录因子;转录调控【作者】徐慧妮;王康;李昆志【作者单位】昆明理工大学,生物工程技术研究中心,昆明,650224;昆明理工大学,生物工程技术研究中心,昆明,650224;昆明理工大学,生物工程技术研究中心,昆明,650224【正文语种】中文Abstract: Dof(DNA-bindingwith one finger)domain proteins asplant-specific transcription factors,presumably include a single C2-C2zinc finger.Dof domain proteinsmediate bothDNA-binding and protein-protein interactions.During the past decade,numerousDof domain proteins havebeen identified in both monocots and dicots.Dof domain proteins play critical roles as transcription activators or repressors in plants growth and development.In this paper,the Dof domain protein and its biological functionswere summarized.Key words: Dof Transcription factor Transcription regulationDof转录因子是植物特有的一类转录因子,因其具有一个单锌指结构,因此被称为Dof(DNA binding with one finger)。
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符合实验室动物管理与使用准则。
录，之后进行目的片段扩增。扩增引物设计如表１。
１． ２ 实验材料 人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２ 来源于中国医学科
学院肿瘤医院肿瘤研究所。实验用ＤＥＮ（Ｓｉｇｍａ 公司，美 国）；实验室奥德赛Ｏｄｙｓｓｅｙ 双光扫描系统（ＧＥＮＥ 公司，美 国）；兔抗大鼠ＤＢＰ、β － ａｃｔｉｎ 单克隆抗体（Ｓａｎｔａ 公司）；山羊
饲养条件为（２７ ± ）１ ℃ ，湿度（７０ ± ）４ ％ 。每天自然光 ６． ０ 软件对照片的积分光密度（ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｏｐｔｉｏｎ ， ｄｅｎｓｉｔｙ
照，正常饮食喂养。本研究方案经由唐山市妇幼保健院 ＩＯＤ）进行检测和统计分析。
动物伦理委员会审批［批号：ＳＣＸＫ（冀）２０１３ － １ － ００３］， １． ３． ５ ＲＴ － ＰＣＲ 检测 实验提取总的ＲＮＡ 进行反转
有促进ＨＣＣ 生长的作用。以期为肝癌细胞生长功能监 １． ３． ４ 免疫组化分析 石蜡脱水、包埋冷冻切片，用山
测和阻止肝癌的形成及发展提供新的基因靶点。 羊血清封闭，用ＤＢＰ 一抗处理后放于保湿盒４ ℃ 孵育过
１ 材料与方法
夜。次日室温用山羊抗兔二抗（生物素）标记，ＰＢＳ 冲洗
１． １ 实验动物 ２２ 只雄性ＳＤ 大鼠和１４ 只雄性ＳＰＦ 级 玻片，然后用过氧化酶标记物温孵育，进行再次漂洗玻片
ｄ收基作ｏｉ者稿金：１简日 项０．介期 目３９：：：６２断路究河９０／１研。欣北ｊ９． ｉ究二（省ｓ－ｓ１０ｎ；者２９２．刘０８１对１－５０英８０２本－１０（年）；文１－修９医，５７贡女２回５学５献－，６日科主．相）２期学，０要同女１：研９从２，，．０同究主０事１７９为重要．临－０第点从２床０２３一课事检－作题肿１验９者计瘤诊。。划流断（行和２病肿０１及瘤８１实检３１验验７）诊研
１． ３ 检测方法
ＤＢＰ 高表达质粒以及同样浓度的Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００ＴＭ分
ＢＡＬＢ／ ｃ － ｎｕ 小鼠来源于河北省实验动物中心（河北医科 后采用ＤＡＢ 染色，苏木精复染，结果中的癌细胞应为深
大学实验动物学部），大鼠体质量均为２００ ～ ２２０ ｇ，小鼠 棕色或者黄褐色，阳性颗粒应表现在细胞核及细胞质。
体质量均为６０ ～ １００ ｇ。所有实验鼠均达到清洁级标准， 在显微镜下查看和图像拍照。利用Ｉｍａｇｅｐｒｏ － Ｐｒｏ － Ｐｌｕｓ
Ｐ ＜ ０． ０５）。 ＤＢＰ 过表达组的裸鼠肿瘤体积显著大于空质粒组，差异具有统计学差异［（７５９０． ５０ ± １８６７． ９７） ｍｍ３ ｖｓ （１６６３ ７８ ± ４２０ ２４）
结论 ｍｍ３ ，ｔ ＝ － ３９． ７８， Ｐ ＜ ０． ０１］。 高表达的 ＤＢＰ 在大鼠肝癌的发展进程中发挥了促进作用，并且为肝癌的治疗和抑制药物的研
基因
１８ＳｒＲＮＡ
抗兔－二抗免疫组化试剂盒以及ＤＡＢ 显色液（中杉金桥生 ＤＢＰ
物技术有限公司，中国北京）；大鼠总ＲＮＡ 的提取、ｃＤＮＡ 的
表１ ＰＣＲ 引物 引物
’ ’ ５ － ＡＴＣＣＣＴＧＡＡＡＡＧＴＴＣＣＡＧＣＡ － ３ ’ ’ ５ － ＣＣＣＴＣＴＴＧＧＴＧＡＧＧＴＣＡＡＴＧ － ３ ’ ’ ５ － ＴＴＧＧＧＣＣＧＡＧＣＣＴＡＴＧＣ － ３ ’ ’ ５ － ＣＣＣＣＴＣＣＣＡＡＡＴＣＡＴＴＣＡＣＡ － ３
， ， ， （ ， ， ， ＬＵ Ｘｉｎ ＬＩＵ Ｙｉｎｇ ＪＩＡ Ｌｅｉ ｅｔ ａｌ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｔａｎｇｓｈａｎ Ｍａｔｅｒｎａｌ ａｎｄ Ｃｈｉｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｔａｎｇｓｈａｎ Ｈｅｂｅｉ ， ） ０６３０００ Ｃｈｉｎａ
， ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｌａｓｍｉｄ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｓｉｚｅ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｆｏｒ ｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ． Ｔｈｅ ｔ － ｔｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｄａｔａ ｂｅｔｗｅｅｎ （ ： ｇｒｏｕｐｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ＨＣＣ ｈａｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＤＢＰ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｔｈａｎ ｎｏｒｍａｌ ｒａｔｓ ｐｒｏｔｅｉｎ ， ， ； ： ， ， ） １． １０ ± ０． ３５ ｖｓ ０． ６７ ± ０． １２ ｔ ＝ － ７． ４８ Ｐ ＜ ０． ０５ ｍＲＮＡ ３． ７０ ± ０． ８５ ｖｓ １． １７ ± ０． ７２ ｔ ＝ － ２０． ４６ Ｐ ＜ ０． ０５ ． Ｔｈｅ ＤＢＰ ｈｉｇｈ － ｅｘ ［（ ） （ ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｌａｓｍｉｄ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ａ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｕｍｏｒ ｖｏｌｕｍｅ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｅｍｐｔｙ ｐｌａｓｍｉｄ ｇｒｏｕｐ ７５９０． ５０ ± １８６７． ９７ ｍｍ３ ｖｓ １６６３． ７８ ± ） ， ， ］ ４２０． ２４ ｍｍ３ ｔ ＝ － ３９． ７８ Ｐ ＜ ０． ０１ ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｈｉｇｈｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ＤＢＰ ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＣＣ ｉｎ ｒａｔｓ ａｎｄ ｔｈｕｓ ｐｒｏｖｉｄｅｓ
发提供新的靶点。
关键词：癌， 肝细胞； Ｄ － 双功能蛋白；大鼠， Ｓｐｒａｇｕｅ － Ｄａｗｌｅｙ； 小鼠， 近交 ＢＡＬＢ Ｃ； 动物实验 中图分类号：Ｒ７３５． ７ 文献标志码：Ａ 文章编号： （ ） １００１ － ５２５６ ２０１９ ０７ － １５３２ － ０４
Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｄ － ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｒａｔｓ ａｎｄ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ
１５３２
临床肝胆病杂志第 卷第期 年月 ， ， ３５ ７ ２０１９ ７ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｈｅｐａｔｏｌ Ｖｏｌ．３５ Ｎｏ．７ Ｊｕｌ．２０１９
Ｄ － 双功能蛋白在大鼠和裸鼠肝细胞癌生长中的作用
路 欣１，刘 英２，贾 蕾３，孔令玉３，刘殿卿１
（１ 唐山市妇幼保健院检验科，河北唐山０６３０００；２ 华北理工大学附属医院，河北唐山０６３０００； ３ 河北医科大学，石家庄０５００１７）
注射造成大鼠的肝癌生长模型，测量大鼠肝组织中ＤＢＰ
路欣，等． Ｄ － 双功能蛋白在大鼠和裸鼠肝细胞癌生长中的作用
１５３３
的表达，以及检测过表达ＤＢＰ 的ＨｅｐＧ２ 细胞诱导裸鼠 ＩＡＭＧＥ Ｊ 软件对图片进行灰度值分析，记录各个条带的
成瘤情况。证实在大鼠肝脏组织中，高表达的ＤＢＰ 具 灰度值，然后与内参灰度值进行比较，进行统计学分析。
： （ ） （ ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｄ － ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ＤＢＰ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ＨＣＣ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ｒａｔｓ
ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ＤＢＰ － ｉｎｄｕｃｅｄ ＨＣＣ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ２２ ｍａｌｅ Ｓｐｒａｇｕｅ － Ｄａｗｌｅｙ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｎｏｒｍａｌ
合成以及逆转录－ 聚合酶链式反应（ＲＴ － ＰＣＲ）扩增试剂盒 １． ３． ６ 细胞转染 将肝癌ＨｅｐＧ２ 细胞铺于２４ 孔板，于
（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ 公司，美国）；ＤＢＰ 质粒（早稻田大学赠送）；Ｌｉｐｏ
转染试剂（ 公司，美国）。 ｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００ＴＭ
Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
３行７细℃胞、５转％染Ｃ。Ｏ２按培照养转箱染中试培剂养，说生明长，到将适７０％量的～ ８空０ 质％ 粒时和进
ＨｅｐＧ２ 细胞，将 ２ 组细胞分别注射于裸鼠皮下，空质粒对照组 ８ 只，ＤＢＰ 高表达组 ６ 只，检测 ２ 组裸鼠成瘤的大小。 计量资料 ２ 组间
结果 比较采用 ｔ 检验。 肝细胞癌模型组大鼠肝癌组织中 ＤＢＰ 的蛋白表达高于正常大鼠肝脏，差异具有统计学意义（１． １０ ± ０． ３５
ｖｓ ０． ６７ ± ０． １２，ｔ ＝ － ７． ４８， Ｐ ＜ ０． ０５）；ｍＲＮＡ 表达也高于正常大鼠肝脏，差异具有统计学意义（３． ７０ ± ０． ８５ ｖｓ １． １７ ± ０． ７２，ｔ ＝ － ２０． ４６，
肝细胞癌（ＨＣＣ）恶性程度高，预后差，病死率居全 氧化还原酶［４］，普遍存在于哺乳动物各种组织器官的
球第二位［１ －３］。对于ＨＣＣ 的发生机制和靶向治疗的 细胞过氧化物酶体内，尤其在肝脏组织表达较高［５］。
研究具有重要的临床意义和应用价值，近年来受到了越 最新一些研究［６ －７］显示，ＤＢＰ 除了在肝癌组织中表达
来越多的重视。Ｄ － 双功能蛋白（Ｄ － ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｏ 增加外，在前列腺癌、乳腺癌等癌组织和细胞中的表达
Байду номын сангаас， ），又称 ｔｅｉｎ ＤＢＰ
１７Ｂ
－
雌二醇脱氢酶Ⅳ，是一种重要的
水平也明显增加。本课题组前期的细胞实验结果［８］也
证实，ＤＢＰ 在ＨＣＣ 系ＨｅｐＧ２ 中的表达水平明显升高，而