荧光及ESI质谱法研究溶菌酶与磷酰化黄酮的相互作用

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LC MS方法鉴定黄酮类化合物

黄酮骨架上结合位点的不同可能与其酶抑制活性抗氧化活性有关在Manach 的研究中;大剂量 Quercetin 给以大鼠后;其甲基化代谢产物 Isorhamnetin 含量很高而已知 Isorhamnetin对黄嘌呤氧化酶的抑制能力强于Quercetin
黄酮类化合物的MS鉴定
电轰击Electron impact;EI质谱法
糖 Glucose is the most commonly sugar
Galactose; rhamnose; xylose and arabinose are not uncommon
Mannose; fructose; glucuronic and galacturonic acids are rare
1 对心血管系统的作用芦丁橙皮苷降低血管脆性及异常通透性；芦丁槲皮素有明显扩冠作用等
2 抗肝脏毒作用水飞蓟素等治疗急慢性肝炎;肝硬化;中毒性肝损伤等疾病
3 抗炎作用 4 雌激素样作用
HO
O
HO
大豆素
O OH
5 抗菌抗病毒作用
6 致泻作用
7 解痉作用
OH
己烯雌酚
机理：抗氧化活性
黄酮C环取代情况对DPPH自由基清除能力影响显著;B环上的相邻羟基对抗氧化也有影响
四黄酮化合物的生物功能 1 使植物免除紫外线对植物的辐射损伤； 2 抵抗昆虫病原菌； 3 络合有毒金属离子； 4 参与光敏过程与能量转移； 5 调节植物生长等生理活动等
同种不同属植物的化学何成分有一定相似性;故在植物化学分类学上作为Chemotaxonomic markers
五黄酮的生物活性
Stobiecki; M ; et al ; Profiling of phenolic glycosidic conjugates in leaves of Arabidopsis thaliana using LC/MS Metabolomics; 2006 24: p 197219

UPLC-ESI-MS-MS同时检测水产品中的激素残留

UPLC-ESI-MS-MS同时检测水产品中的激素残留Ying Jiang XU;Xiu Hui TIAN;Xiu Zhen ZHANG;Xiang Hong GONG;Shi Juan ZHANG;Hui Hui LIU;Li Min ZHANG【摘要】本文建立了一种UPLC-ESI-MS-MS联用的分析方法来同时检测水产品中的24种激素.该方法鉴定和定量水产品中激素的检出限可达μg/kg级水平.与传统的液相色谱相比,UPLC运行时间短,每个样品分析只需要12 min,从而使得这种方法对激素分析更具吸引力.这种方法证明具有很好的灵敏度、线性、精密度和准确性,这些特点对于水产样品中的激素检测非常有利.【期刊名称】《生命科学仪器》【年(卷),期】2010(008)004【总页数】5页(P19-23)【作者】Ying Jiang XU;Xiu Hui TIAN;Xiu Zhen ZHANG;Xiang Hong GONG;Shi Juan ZHANG;Hui Hui LIU;Li Min ZHANG【作者单位】Marine Fisheries Research Institute of Shandong Province, No. 216, Changjiang River Rd., Yantai City,Shandong Province 264006, PR China;Marine Fisheries Research Institute of Shandong Province, No. 216, Changjiang River Rd., Yantai City,Shandong Province 264006, PR China;Marine Fisheries Research Institute of Shandong Province, No. 216, Changjiang River Rd., Yantai City,Shandong Province 264006, PR China;Marine Fisheries Research Institute of Shandong Province, No. 216, Changjiang River Rd., Yantai City,Shandong Province 264006, PRChina;Marine Fisheries Research Institute of Shandong Province, No. 216, Changjiang River Rd., Yantai City,Shandong Province 264006, PRChina;Marine Fisheries Research Institute of Shandong Province, No. 216, Changjiang River Rd., Yantai City,Shandong Province 264006, PRChina;Marine Fisheries Research Institute of Shandong Province, No. 216, Changjiang River Rd., Yantai City,Shandong Province 264006, PR China【正文语种】中文激素，诸如雄激素(AS)、雌激素(ES)和孕激素(PS)等，在生命体中扮演了非常重要的角色。

生物质谱技术在腺相关病毒（AAV）载体制剂质量控制中的应用

学报Journal of China Pharmaceutical University 2023，54（6）：682 - 694682生物质谱技术在腺相关病毒（AAV）载体制剂质量控制中的应用李孟效，李惠琳*（中山大学药学院，广州 510006）摘要腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）是一种基因治疗中常用的病毒载体。

由于其安全性较高且能够靶向多种细胞，在临床前和临床研究中得到了较多的应用。

不过在设计和生产的过程中，AAV载体有着诸多会影响其安全性和疗效的关键质量属性。

生物质谱技术的发展和应用为生物大分子的研究提供了一个便捷的平台，尤其是在蛋白质序列、结构和相互作用方面。

对于AAV载体而言，质谱技术可以实现衣壳蛋白比率、翻译后修饰、血清型、空衣壳比率的测定或表征，从而协助对AAV载体的质量控制。

与现有方法相比，质谱技术具有样品需求量少、分析快速灵敏、适用于完整AAV载体的分析和质量分辨率高的优点，并且可以区分空衣壳、满衣壳和部分包封的衣壳。

未来，通过将更加高效的蛋白质分离技术与质谱技术联用、开发新的信息处理软件平台和新的质谱检测方法，质谱技术有望在AAV载体的设计和生产中发挥更加重要的作用。

关键词腺相关病毒；质谱；质量控制；非变性质谱；电荷检测质谱中图分类号R392 文献标志码 A 文章编号1000 -5048（2023）06 -0682 -13doi：10.11665/j.issn.1000 -5048.2023062901引用本文李孟效，李惠琳.生物质谱技术在腺相关病毒（AAV）载体制剂质量控制中的应用［J］.中国药科大学学报，2023，54（6）：682–694.Cite this article as：LI Mengxiao，LI Huilin. Application of biological mass spectrometry in quality control of adeno-associated virus carrier preparations［J］.J China Pharm Univ，2023，54（6）：682–694.Application of biological mass spectrometry in quality control of adeno-asso⁃ciated virus carrier preparationsLI Mengxiao, LI Huilin*School of Pharmaceutical Science, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510006, ChinaAbstract Adeno-associated virus (AAV) is a common viral vector used in gene therapy.Because of its high safe⁃ty and its ability to target a variety of cells, it has been widely used in preclinical and clinical studies.However, during the design and production, AAV vectors have many key quality attributes that affect their safety and efficacy. The development and application of biological mass spectrometry technology provides a convenient platform for the research on biological macromolecules, especially in the aspects of protein sequence, structure and interac⁃tion.For AAV vectors, mass spectrometry can facilitate the determination or characterization of capsid protein ratio, post-translational modification, serotype, and empty capsid ratio, thus assisting in the quality control of AAV pared with the existing methods, mass spectrometry has the advantages of smaller amount of sample size, faster and more sensitive analysis, being more suitable for the analysis of complete AAV vectors with higher mass resolution, and can distinguish empty capsids, full capsids and partial capsids.In the future, mass spectrometry technology is expected to play a more important role in the design and production of AAV vectors through the coupling of more efficient protein separation technology with mass spectrometry, the development of new information processing software platforms and new mass spectrometry detection techniques.Key words adeno-associated virus (AAV); mass spectrometry (MS); quality control; native MS; charge detec⁃tion MS收稿日期2023-06-29 *通信作者Tel：138****4968E-mail：lihlin6@基金项目国家自然科学基金资助项目（No.81872836，No.91953102）；广东省自然科学基金资助项目（No.2019A1515011265）第 54 卷第 6 期李孟效，等：生物质谱技术在腺相关病毒（AAV ）载体制剂质量控制中的应用This study was supported by the National Natural Science Foundation of China (No.81872836, No.91953102) and the National Nat⁃ural Science Foundation of Guangdong Province (No.2019A1515011265)1 腺相关病毒(AAV)概述基因治疗是指为了治疗目的而修改操纵基因表达或改变活细胞的基因，基因治疗的方式可以划分基因补充和基因编辑，基因补充是指将遗传物质导入需要治疗的靶细胞，基因编辑是指对细胞已有的缺陷基因进行修改和调控，但无论哪种方式都需要依赖特定的递送载体才能完成[1]。

水母雪莲花中黄酮成分的ESI—MSn分析

５
６
ｏＨ
ｏＨ
Ｈ
Ｏ— ｈｃｓｇｉｏｅ
Ｈ
Ｈ
￣ＵＯＣＩ￣Ｓ
ＯＨ
个化合物，表１所示，结构见图３。如其
参考文献
７
ＯＨ
Ｏ－ｌｃｓ－ｌｌｆｏｅＨｇｕｏｅｒａｌｌｓ１＇
ＯＨ
【】中国科学院西北高原所．藏药志【．青海人民出１Ｍ】
水母雪莲花中黄酮成分的ＥＩＭｎ析Ｓ— Ｓ分
张剑光ｚ・青琳森２丁立生ｚ廖循达娃卓玛２张志锋，３
（．南民族大学少数民族药物研究所，１西四川成都６０４；１０１２中国科学院成都生物研究所，川成都６０４；．四１０１３藏自治区食品药品检验所，西西藏摘拉萨８０ｏ）５００
效的依据，传统藏药的深入研究具有积极意义。对１实验部分１１仪器和测试条件：ｈｒｏｕｓＦｎｉｎＬＱ电喷．ＴｅＱｅｔｉｇｃ。ｍｎａ
电喷雾离子源（Ｓ）为一个非常软电离技术，ＥＩ作通常只产生准分子离子峰，此质谱图谱较易解析，其因尤是对混合物样品而言。黄酮类化合物在电喷雾质谱正、负粒子扫描模式下均有明显的准分子粒子信号出现，可通过样品中各成分的的准分子离子峰确定其相应的分子量。由于黄酮类化合物的羟基较多，因此相对于正离子扫描模式，

【国家自然科学基金】_电喷雾质谱(esi-ms)_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140801

推荐指数 6 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
2012年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
ms/ms l-天冬氨酸 friedel-crafts反应 dna 4″-烷氧基-1 4′-溴-4-羟基-1 1′:4 1′-联苯 12-氨基乙酰脱氢枞胺
1 1 1 1 1 1 1 1 1
2011年科研热词推荐指数电喷雾质谱 4 质谱 2 药物化学 2 脂三肽 2 电喷雾串联质谱 2 环六脂肽 2 氧载体 2 氧合反应 2 抗真菌剂 2 卡泊芬净 2 黄酮类成分 1 鸡骨草 1 高效液相色谱 1 青天葵 1 锰配合物 1 钴 1 配伍 1 解离常数 1 血管紧张肽ⅲ 1 肠内菌代谢 1 细胞色素c 1 组氨酸 1 磷酸酯 1 相思子碱 1 相互作用 1 皂苷 1 甘遂 1 甘草附子汤 1 甘草 1 水解产物 1 氨基甲酸酯 1 氟虫腈 1 毒性 1 次乌头碱 1 杀虫活性 1 术附汤 1 晶体结构 1 微波辅助提取 1 固相反应 1 合成 1 化学合成 1 乙二胺钴 1 乌头碱 1 中乌头碱 1 下箴刺桐碱 1 三氮唑 1 n-苯甲酰基-脱氢枞胺衍生物 1

N-磷酰化多巴胺与溶菌酶相互作用的ESI-MS研究

武现丽等：Ｌ酰化多巴胺与溶茵酶相互作用的ＥＩ研究＾磷Ｓ— ＭＳ
神经传递物质多巴胺（Ａ）Ｄ由酪氨酸衍生而来，是继肾上腺素和去甲肾上腺素后第３种内源性儿茶酚胺，在体内为合成去甲肾上腺素的前体．不同剂量的多巴胺具有不同的药理特性，至今仍是治疗心力衰竭和休克的重要药物，广泛应用于临床Ｊ多巴胺半衰期短、作用时间短，只能静脉注被．但射，应用范围受到一定的限制．近年来，多巴胺副作用的报道逐渐增多，如最新的临床研究结果表对
明，小剂量多巴胺（Ｄ）ＬＤ不仅对肾脏功能没有保护作用，而且对重症患者的内分泌、消化和呼吸系统都有不同程度的不良影响．因此，Ｊ寻找体内半衰期长、生物利用度高、活性强且毒副性小的多巴胺
类新型药物是目前研究的重要方向．对原有药物分子进行结构修饰是提高其性能的一种有效途径．磷酸酯常被用作前药来增加药物的水溶性进而提高其生物利用率，因此对多巴胺进行磷酰化是改善其生物活性的一种方式，因为磷酸基团的引入可以改变其母体分子的某些物理和化学性质，而增加或减从弱分子间相互作用．我们在前期工作中合成了６种磷酰化多巴胺类化合物，结构见Ｓｈｍｅ１其ｃｅ．
一
ｃ２Ｈ２Ｈ２Ｈ（）一ｃＣＣ３２６ＨＣＣＣ３５，Ｈ２Ｈ（Ｈ）（）

荧光法研究磷酰化黄酮与牛血清白蛋白的相互作用

２１４－ｍＵＢＡｍ．ｘ６Ｌ溶液，Ｌ１ｏＳ７０最后在其中７支
试管中分别加人不同量的２５－ｍｌ的化合．ｘ５Ｌ１ｏ０／
物ＩＩ溶液，将试管置于恒温仪中分别调节水温至２一７以２０作ＢＡ的激发波长，０３ ℃，８ｍｎＳ记录ＢＡＳ的荧光光谱及化合物１对蛋白的荧光碎灭光谱１
Ｌｏ＂，／Ｌｓｍ根据实验所得凡值及式（）可以算出化、１，合物ＩＢＡ的荧光碎灭速率常数分别为：ＩＳ对
ＫＯ＝・ｘＩｏ・Ｋ７＝．ｘｑ３６１２Ｌｓ ℃ ３３１２２ ℃ ５１Ｊ０ｍ，（＇３３＇０
Ｌｏ＂ＪＬｓｍ；远大于各类碎灭剂对生物大分子的最大扩散碰撞碎灭速率常数。由此可以进一步证明，化合物ＩＢＡ的碎灭是由于形成了复合物而引起ＩＳ对的静态碎灭，文献「］８推导出利用有机物分子对蛋
（１。图）
为静态碎灭。因为动态碎灭是由分子的扩散碰撞导致的，随着温度的升高，分子的扩散速度加快，荧光碎灭会更严重，碎灭常数应更大。另外，据文献「」６报道生物大分子的荧光寿命约为１－ｓ０８，各类碎灭剂对生
物分子的扩散碰大最大撞碎灭常［２ｘ数为＇．０１１００＇
Ｖｌ２．．ｏ．Ｎ４４ｏ
２０５一４０
与受能体足够接近，最大距离不超过７ＢＡｍａ在ｎＳ
２０的激发波长下有较强的荧光，８ｍｎ并且与化合物且的吸收光谱有较大程度的重叠（图４中１是化合物Ｉ的吸收光谱图，是蛋白Ｉ２质的荧光谱图）。
Ｒ｀８－（２ｎ４Ｊ６＝．ｘ２＇＇＇）８１５Ｋ０－０（）４Ｒ为能量转移效率为５％时的临界距离，：偶。０Ｋ为极空间取向因子，是介质折射指数，ｎ巾为供能体的荧光量子产率，为供能体的荧光光谱和受能体Ｊ

天然药物活性成分与溶菌酶相互作用的研究进展

天然药物活性成分与溶菌酶相互作用的研究进展溶菌酶是一种广泛存在于生物体内的小分子碱性蛋白，具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力等多种药理作用。

能够和许多外源和内源性物质结合，运载多种药物。

该文综述了不同种类的天然药物活性成分与溶菌酶的相互作用，对于全面认识天然药物的药理机制，了解药物在生物体内的转运和代谢过程以及优化药物分子结构、提高天然药物的生物利用率和生物效应等都具有重要的意义。

标签：溶菌酶；天然药物活性成分；相互作用1溶菌酶的结构特征溶菌酶（lysozyme，LYSO）又称为胞壁质酶（muramidase）或N乙酰胞壁质聚糖水解酶（Nacetylmuramide glycanhydrolase），是由18种129个氨基酸组成的小分子碱性蛋白。

分子中含有6个色氨酸残基，其中4个在酶分子表层部位，2个包埋在酶分子的内部，在分子中的4对含硫氨基酸Cys间形成4个SS 键，是1种结构比较稳定的蛋白质[3]。

Phillips等人1965年用X射线晶体结构分析法阐明了L YSO的三维结构，L YSO分子近椭圆形，构象复杂，内部几乎都为非极性的，疏水作用在L YSO的折叠构象中起到重要作用，其分子表面有一个容纳多糖底物6个单糖的裂隙，这是L YSO的活性部位[4]。

2溶菌酶的药理作用及应用作为生物体内重要的非特异性体液免疫因子，LYSO具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力等多种药理作用[5]。

L YSO能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖，使细菌细胞壁变得松弛，失去保护细胞的作用，从而导致细胞溶解死亡。

对于革兰氏阳性菌，L YSO有直接杀灭作用，在分泌型免疫球蛋白和补体的参与下，还能杀灭大肠杆菌等革兰氏阴性菌。

LYSO与抗生素和其他抗菌药物合用时，可改善组织基质的黏多糖代谢，增强药物抗炎和修复的疗效[6]。

另外，LYSO能与带负电荷的病毒蛋白直接作用，并与DNA，RNA及脱辅基蛋白结合成盐，使病毒失活。

LYSO还可改善和增强巨噬细胞的吞噬消化功能，激活其他白细胞吞噬功能，降低细胞抑制剂导致的白细胞减少，结合细菌脂多糖，减轻内毒素作用，从而增强机体的免疫抵抗力[7]。

电喷雾质谱研究甲醇诱导的溶菌酶构象变化

ｔｒｉｒｔｕｃｕｅｏｙｏｙｅｗａｓｒｙｅｅｔａｙｓｒｔｒｆｌｓｚｍｓｄｅｔｏｄ．Ｍｅｎａｗｈｉｅ，ＣＤｐｅｔａｓｗｅｈａｈｅｐｒｌｓｃｒｈｏｄｔｔｔｅ —
ＥｌｃｒｓｒｙＩｎｉａｉｎＭａｓＳｅｔｏｅｒｅｔｏｐａｏｚｔｏｓｐｃｒｍｔｙ
ＣＨＵｎｑｕ，ＷＵＹａ — ｉＢｏ，ＤＩＮＧＣｈｕａｆｎｎ—ａ
（ｈｎｈｉｙＬｂｒｔｒｆＭｏｅｕａａａｙｔａｄＩｎｖｔｅｔｉｌ，ｈｓｃｌｈｍｉｒｎｔｕｅＳａｇａａｏａｏｙｏｌｌｒＣｔｌｓｎｎｏａｉｅａｓＰｙｉａｅｓｙＩｓｔｔ，ＫｅｃｓｖＭａｒＣｔｉ
电喷雾质谱研究甲醇诱导的溶菌酶构象变化
储艳秋，吴波，传凡丁
（旦大学化学系物理化学研究所，海市分子催化和功能材料重点实验室，海复上上２０３）０４３
摘要：了研究甲醇诱导对溶菌酶构象的影响，电喷雾质谱（Ｓ－）合圆二色性光谱（Ｄ在ｐ．为用Ｅ／ＭＳ结Ｃ）Ｈ２０的条件下测定不同甲醇浓度的溶菌酶构象。在甲醇浓度上升到７前，菌酶的ＥＩ谱图中电荷状态分Ｏ溶Ｓ质布没有太大的变化。然而，当甲醇浓度超过７％，１＋为中心的高电荷态分布开始出现，可以观察到５以６并

生物质谱技术在中药研究中的应用

生物质谱技术在中药研究中的应用生物质谱技术为中药研究尤其是大分子药物的研究提供大量的结构信息，因而近几年发展比较快速。

本资料从生物质谱技术在中药药学研究、中药作用相关蛋白研究、中药与生物大分子的相互作用研究、中药治疗的蛋白质组学研究以及代谢组学研究等几个方面综述了近几年生物质谱技术在中药研究中的进展，以供同行参考。

标签：生物质谱；中药；电喷雾质谱；基质辅助激光解吸电离质谱；飞行时间质谱质谱技术能够通过测定离子化后分子的质荷比得到相关分子的质量。

近年来，质谱技术已经广泛用于各学科研究中。

20世纪80年代，电喷雾电离（ESI）和软激光解吸（SLD）电离技术的发展则使得质谱技术应用于高分子量分子的研究中。

这些新的质谱技术在生命科学中的应用，逐步形成了独具特色的生物质谱技术（biological mass spectrometry）。

生物质谱技术是将质谱技术用于精确测量生物大分子，如蛋白质、核苷酸和糖类等的分子量，并提供分子结构信息的新技术[1]。

近年来，生物质谱已经广泛用于中药研究领域，推动了中药现代化及中药作用机制等更深层次的研究，本资料综述了近几年生物质谱技术在中药研究中的进展，现报道如下。

1 中药的药学研究质谱技术应用于中药单体化合物的结构鉴定与解析的基本思路和做法与用于小分子化学药物相同，此方面已有大量的文献报道[2]。

本资料重点介绍生物质谱用于动物药材中大分子蛋白和多肽测定。

王若光等[3-6]采用饱和硫酸胺沉淀，透析脱盐冻干法获得中药阿胶、地龙、龟甲胶、羚羊角的蛋白/肽，利用蛋白质芯片为载体，激光解析-离子化-飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）技术，分析阿胶、地龙、龟甲胶的蛋白质、肽分子量分布及其相对分子质量，发现不同质量浓度稳定获得的有意义蛋白、肽。

如将蛋白进一步分析鉴定，可以形成中药材蛋白质，肽成分质量指纹图，可为数字化质控标准提供依据。

但是，由于中药材地域来源不同，大分子物质的指纹图谱也不尽相同，此项工作未对不同来源的中药材进一步考察，故还需要进一步完善。

39551黄酮质谱特征天然药物化学

O
[M-28]+
O A
C OH+
[A1+H]+
.+
B
O A
-H. [M-1]+
途径1+H转移
O 途径1
途径2
O +. A
C O
120 A1.+
-CO
[A1-28] .+
+.HC CB Nhomakorabea+
OC
B
B1.+
102
+
B2 105
-CO
[B2-28]+
（一）黄酮类基本裂解途径
2、黄酮苷、黄酮醇苷的质谱一般不用EI-MS法测定，目前通常采用ESI-MS、FD-MS等进行测定。
质谱法在黄酮结构鉴定中的应用
黄酮苷元可直接用EI-MS测定黄酮苷类成分测定
1、需要作成甲基化或三甲基硅烷化衍生物才能用 EI-MS测定； 2、近年来不需要再作成衍生物即可利用FD-MS、 FAB-MS或ESI-MS法测定。
（一）黄酮类基本裂解途径
1、黄酮、黄酮醇类苷元的质谱黄酮类化合物的EI-MS谱中，除分子离子峰外，在高场区对鉴定有用的离子，是含有A环和B环的碎片离子。 A1+碎片离子与B1+碎片离子质荷比之和等于分子离子峰[M]+ 的质荷比。
休息一下

基于UPLCESI-Q TRAP-MSMS技术分析酸枣仁中黄酮类化合物

Academy of Agricultural and Forestry Sciences, Shijiazhuang 050051, China)
Abstract: Flavonoids are the main bioactive components in Ziziphi spinosae Semen, which have sedative, hypnotic and heart-strengthening effects. In order to study the types and quantities of the flavonoids in Ziziphi spinosae Semen, the flavonoids in Ziziphi spinosae Semen wereanalyzed and identified using the UPLC/ESI-Q TRAP-MS/MS. The separation was performed on a Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C18 column with mobile phases of water (0.04% acetic acid) and acetonitrile (0.04% acetic acid). The extraction of flavonoids compounds was evaluated under electrospray ionization (ESI) and triple quadrupole (QQQ) in Ziziphi spinosae Semen. The mass spectrometry data were processed by Analyst 1.6.3 software, and the obtained metabolite spectra were analyzed based on MWDB database.The results showed that 83 flavonoids compounds were identified from Ziziphi spinosae Semen in this study, including 3 chalcones, 5 dihydroflavonoids, 2 dihydroflavonols，5 anthocyanins, 18 flavonoids, 22 flavonoid carboglycosides, 14 flavonols, 9 flavanols and 5 isoflavones. This study enriched the variety and quantity of flavonoids compounds in Ziziphi spinosae Semen，which would provide a base for the study of pharmacodynamic components and quality control of Ziziphi spinosae Semen. Key words: Ziziphi spinosae Semen; UPLC; MS; Flavonoids compound

细菌基因组上DNA磷硫酰化修饰位点的定量分析

2023-11-05•引言•材料与方法•结果与讨论目录•结论•参考文献01引言目的研究细菌基因组上DNA磷硫酰化修饰位点的定量分析，了解其生物学意义和作用机制。

背景DNA磷硫酰化是一种重要的化学修饰，在细菌基因组中广泛存在，对基因表达和细菌生命活动具有重要调控作用。

目的和背景已有研究表明，DNA磷硫酰化修饰在细菌基因组中具有重要功能，但在不同物种和不同生长条件下，其作用机制和生物学意义尚不明确。

已有研究目前对DNA磷硫酰化修饰位点的定量分析方法尚不完善，缺乏有效的分析手段和模型，对其生物学意义和作用机制的理解还存在很大局限性。

研究不足研究现状研究意义理论意义通过对DNA磷硫酰化修饰位点的定量分析，有助于深入了解其在细菌基因组中的调控作用和生物学意义，为微生物学和遗传学研究提供新的理论依据。

实际应用通过对DNA磷硫酰化修饰位点的定量分析，可以为研究细菌耐药性和致病性等实际问题提供新的思路和方法，有助于开发新的抗菌药物和治疗策略。

02材料与方法选用具有代表性的细菌菌株，如大肠杆菌（Escherichia coli）等。

细菌菌株基因组DNA试剂与仪器提取细菌基因组DNA，作为实验检测的模板。

包括D N A 测序试剂、D N A 聚合酶、引物、PCR仪等。

03实验材料0201实验方法数据预处理对原始数据进行过滤、去噪等预处理，提高数据质量。

定量分析对检测到的磷硫酰化修饰位点进行定量分析，比较不同菌株或不同条件下的修饰水平。

磷硫酰化修饰位点检测利用生物信息学方法，对预处理后的数据进行磷硫酰化修饰位点检测。

基因组测序采用高通量测序技术，对细菌基因组进行测序，获得原始序列数据。

CD数据统计对实验获得的数据进行统计，整理成表格或图表形式。

聚类分析根据修饰水平相似性，对不同菌株或不同条件下的数据进行聚类分析。

生物信息学分析利用生物信息学方法，对实验结果进行深入挖掘和分析，如基因组学、转录组学等相关研究。

差异分析比较不同菌株或不同条件下的磷硫酰化修饰位点数量和修饰水平，进行差异分析。

质谱技术在中药小分子与生物大分子相互作用研究中的应用_王兆伏

收稿日期:2010-01-10;修回日期:2010-04-07基金项目:国家自然科学基金(30672600,20873137,20905067,20953001)、国家科技部创新方法工作专项项目(2009IM 030400)、吉林省科技发展计划项目(20080736)和长春市科技计划项目(2007GH27)资助作者简介:王兆伏(1982～),男(汉族),博士研究生,药物与生物质谱学专业。

E -mail :wangzh aofu @sohu .com通信作者:刘志强(1962～),男(汉族),研究员,博士生导师,从事天然药物化学与有机质谱学研究。

E -m ail :liu zq @ciac .jl .cn第31卷第3期2010年5月质谱学报Journal o f Chinese M ass Spectro me try So cietyVo l .31　N o .3M ay 2010质谱技术在中药小分子与生物大分子相互作用研究中的应用王兆伏1,2,宋凤瑞1,刘志强1,刘淑莹1(1.中国科学院长春应用化学研究所质谱中心,吉林长春　130022;2.中国科学院研究生院,北京　100039)摘要:中药发挥药理作用具有多组分,多靶点的重要特点。

研究中药化学成分与生物大分子之间的相互作用不仅能够为阐明中药发挥药理作用的机理和物质基础提供科学依据,而且能够为新药设计提供理论指导。

软电离质谱技术,尤其是电喷雾质谱(ESI -M S )和基质辅助激光解吸电离质谱(M A L DI -M S )在一定条件下能够使药物与生物大分子形成的复合物完整地转移到气相中并被检测到,在中药小分子与生物大分子相互作用的研究中具有很大的优势。

同时,色谱-质谱联用技术在中药复杂体系与生物大分子相互作用的研究中也显示出很大的应用潜力。

本文介绍了质谱技术在药物与生物大分子相互作用研究中的应用原理,并总结了近年来软电离质谱技术在中药小分子与生物大分子相互作用研究中的应用。

黄花菜中总黄酮的提取及其药理作用初步观察

第33卷第1期Vol.33No.1南华大学学报·医学版Journal of Nanhua University(Medical Edition)2005年1月Jan.2005　黄花菜中总黄酮的提取及其药理作用初步观察詹利生1,李贵荣2,李少旦2,吴仕艳2(1.南华大学医学院,湖南衡阳421001;2.南华大学公共卫生学院)摘　要:目的　提取黄花菜中总黄酮并初步观察总黄酮的清除羟自由基和抑菌作用。

方法　总黄酮提取采用乙醇索氏提取器粗提,聚酰胺柱层析精制;采用比色法测定总黄酮对OH·的清除作用,采用细菌培养抑制法检验总黄酮的抑菌作用。

结果　黄花菜总黄酮对OH·清除率可达48.7%,总黄酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念球菌抑制率随含量增加而增大。

结论　黄花菜总黄酮对OH·有良好的清除能力,对细菌生长有抑制作用。

关键词:黄花菜;　黄酮;　羟自由基(OH·);　抑菌作用中图分类号:R961 文献标识码:A 文章编号:1672-7444(2005)01-0112-03Study on Extraction of Flavonids in H emerocallis CitrinaB aroni and Its Medical E ffectsZH AN Li-sheng,LI G ui-rong,LI Shao-dan,et al(Medical College,Nanhua Univer sity,Hengyang,Hunan421001,China)Abstract:Objective　T o study extraction of flav onids in hemerocallis citrina baroni and its medical effects.　Methods Flav onids was is olated by S oxhlet extracted method with ethanol,and purificated by abs orbent with P olymide column and eluted with hot ethanol.　R esults　Scavenge rate to OH·with the HC BF were38.7%.The killing rates of Staphylocaccus aureus,Escherichia coli and Candida albicans for30min at37℃were30.25%,48. 12%and61.22%,respectively;and its germicidal efficacy increased with containing.　Conclusion　The HC BF was shown with scavenging action to OH·and germicidal effect.K ey w ords:　Hemerocallis citrina baroni;　flav onids;　hydroxyl free radical;　G ermicidal effect 黄花菜(Hemerocallis citrina baroni)具有补脑健智、化瘀止血、通络止痛、抗菌消炎等功效1。

药物青蒿素与溶菌酶相互作用研究

药物青蒿素与溶菌酶相互作用研究张海容;刘晓燕;李慧卿;陈金娥【期刊名称】《分析科学学报》【年(卷),期】2013(29)4【摘要】应用荧光光谱、紫外-可见光谱法研究了青蒿素与溶菌酶的相互作用,发现青蒿素对溶菌酶荧光有猝灭作用。

以Lineweaver-Burk双倒数方程和能量传递原理分别计算了二者反应的结合常数(K25℃=646.4L/mol,K35℃=518.8L/mol)和作用距离(r=3.08nm)。

实验表明,随着温度升高,溶菌酶与青蒿素的猝灭曲线斜率降低,证明了二者的相互结合作用为单一的静态猝灭过程,其作用机制属能量转移机制。

通过测定热力学参数,判断了青蒿素和溶菌酶之间的作用力类型,青蒿素与溶菌酶以疏水作用力相结合,导致溶菌酶内源荧光的静态猝灭。

通过青蒿素与溶菌酶的结合反应,探讨了药物青蒿素在生物体内与蛋白酶的相互作用机理。

【总页数】4页(P539-542)【关键词】青蒿素;溶菌酶;荧光猝灭;Forster能量传递【作者】张海容;刘晓燕;李慧卿;陈金娥【作者单位】忻州师范学院生化分析技术研究所【正文语种】中文【中图分类】O657.3【相关文献】1.荧光光谱法研究青蒿素及双氢青蒿素与肝微粒体的相互作用 [J], 孙坤;张爱平;王锐利;李赟;张淑秋2.青蒿素类抗疟药的药物代谢动力学与药物相互作用 [J], 严虹霞;张丽锋;张淑秋3.卵清溶菌酶激活剂的研究Ⅱ：溶菌酶与激活剂LLA,底物相互作用... [J], 秦淮;项明4.聚乙烯醇与溶菌酶的相互作用及其对溶菌酶构象的影响 [J], 王改珍;贺进田;闫慧源;周志涛;周香莲;侯笑娜;崔艳5.蛋清溶菌酶与萝卜溶菌酶复合制剂研究--评《生物药物合成学》 [J], 宋凯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄酮质谱正离子负离子

黄酮质谱正离子负离子黄酮是一类具有丰富生物活性的有机化合物，广泛存在于天然植物中，被认为是一种具有治疗作用的天然药物。

质谱是一种强大的分析技术，在黄酮的分析中有着重要的应用。

本文将从黄酮的概念及其生物活性、质谱技术的介绍、黄酮分析中的正离子负离子模式以及质谱在黄酮分析中的应用等方面进行详细阐述。

一、黄酮的概念及其生物活性黄酮是一类范德华相互作用力比较强的化合物，具有芳香骨架结构。

它们在天然界中广泛存在，主要存在于植物种子、叶片、花、根、果实等部位。

黄酮被广泛研究是因为它们具有多种生物活性，例如抗氧化、抗肿瘤、抗菌、抗炎症、解热、保肝，降低胆固醇等。

已有很多文献报道了黄酮的丰富生物活性，例如白藜芦醇、儿茶素、花青素、异黄酮等，这些黄酮都具有良好的抗氧化作用。

二、质谱技术的介绍质谱技术是一种重要的分析技术，通过Ionsource将化合物分子转化为离子，然后通过离子质谱质谱进行分析，可以获得化合物分子的分子量、化学结构以及元素组成等信息。

质谱技术广泛应用于化学、生物、医学等领域，尤其在新药研发中具有着重要的应用。

三、黄酮分析中的正离子负离子模式黄酮分子中普遍存在着数个羟基或酚羟基。

在质谱分析中，黄酮可以产生正离子和负离子两种模式。

由于黄酮分子中含有丰富的氧原子，因此常常遵循质谱化学的原则，在多数情况下，黄酮分子的质谱分析中采用负离子模式进行分析。

在这种模式下，分子会失去负电荷，形成负离子分子。

这种方法可以获得分子的更多有关质子降解的信息。

此外，对于有些化合物，例如儿茶素等，还可以采用正离子模式进行分析，在这种模式下，分子会失去正电荷，形成正离子分子。

在微量水平的分析中，正离子模式比负离子模式更加灵敏，也更加适用于化合物结构不复杂、分子量不太大的化合物分析。

四、质谱技术在黄酮分析中的应用质谱技术在黄酮分析中应用广泛，其作用主要体现在以下几个方面：1. 测定黄酮的精确分子量：通过质谱技术可以获得黄酮的精确分子量，从而通过计算公式进行结构推断。

N-磷酰化多巴胺与牛胰岛素弱相互作用的ESI-MS研究

N-磷酰化多巴胺与牛胰岛素弱相互作用的ESI-MS研究韩国胜;冯聪;王珍;廖新成;武现丽【期刊名称】《中山大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(051)006【摘要】用ESI-MS研究了一系列结构具有可比性的N-磷酰化多巴胺与牛胰岛素的非共价相互作用,比较了磷上不同烷氧取代基对相互作用影响.结果表明烷氧取代基上烷基碳原子个数和其排列顺序对二者相互作用有较大影响.取代基上碳链越长溶液中胰岛素的构象越趋于收缩,易于形成高计量比复合物;而支链或直链取代对胰岛素构象的影响程度差别不大.磷酰化多巴胺与胰岛素形成复合物的稳定性随着取代基的增长而增强;直链取代的磷酰化多巴胺与胰岛素形成的复合物比支链取代的磷酰化多巴胺与其形成的复合物稳定.这一结论对设计合成新型多巴胺类化合物有一定的指导意义.%ESI-MS is an effective way to study intermolecular interaction. In this paper, the non-covalent interaction between a series of synthesized N-phosphoryl dopamine and insulin was studied by using ESI-MS. The effects of different groups of P on N-phosphoryl dopamine were compared. The results showed that length and sequence of alkyl group of alkoxyl group on P were very important for the interaction under ESI-MS conditions. N-phosphoryl dopamines with longer carbon chains could contract the protein configuration more greatly and form complex with higher stoichiometric proportion in solution, while the sequence of carbon chain with a same number carbon atom have no obvious difference on contraction of protein. The result also showed that the length of carbonchain also had an obvious effect on the stability of complexes. Straight chain was more beneficial for the stability than branched chain when the number of carbon was equal. This conclusion was valuable for design of new active dopamine molecules.【总页数】5页(P73-77)【作者】韩国胜;冯聪;王珍;廖新成;武现丽【作者单位】郑州大学化学系//河南省化学生物学与有机化学重点实验室,河南郑州450001;郑州大学化学系//河南省化学生物学与有机化学重点实验室,河南郑州450001;郑州大学化学系//河南省化学生物学与有机化学重点实验室,河南郑州450001;郑州大学化学系//河南省化学生物学与有机化学重点实验室,河南郑州450001;郑州大学化学系//河南省化学生物学与有机化学重点实验室,河南郑州450001【正文语种】中文【中图分类】O657.61;O625.51【相关文献】1.N-磷酰化肽酯及小肽与氨基酸相互作用的ESI-MS研究 [J], 强黎明;杨柳;曹书霞;卢奎;赵玉芬2.α-乳白蛋白与磷酰化黄酮弱相互作用ESI质谱研究 [J], 吴建丽;陈晓岚;屈凌波;卢建莎;赵玉芬3.N-磷酰化多巴胺与溶菌酶相互作用的ESI-MS研究 [J], 武现丽;韩国胜;王珍;曹书霞;廖新成4.7-羟基黄酮及磷酰化7-羟基黄酮与DNA的弱相互作用荧光法研究 [J], 郭玉华;陈晓岚;张婷;屈凌波;赵玉芬;郁有祝5.N-磷酰化氨基酸生成五配位磷中间体过程中氨基酸侧链立体化学效应的理论研究 [J], 赵丽娇;钟儒刚;甄岩;赵玉芬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

【高中生物】蛋白质可控荧光标记研究方面取得新成果

【高中生物】蛋白质可控荧光标记研究方面取得新成果9月21日，angewandtechemieinternationaledition发表了中科院生物物理研究所王江云研究组和林庆研究组合作成果geneticallyencodedcyclopropenedirectsrapid,photoclickchemistrymediatedproteinl abelinginmammaliancells。

该最新研究通过扩展基因密码子，实现了具有光点击活性的非天然氨基酸环丙烯赖氨酸在哺乳动物中的基因编码。

光照条件下，特异位点整合了环丙烯赖氨酸的蛋白质与小分子四唑化合物发生环加成反应，生成荧光活性基团，从而实现了时空可控的对哺乳动物细胞内蛋白特异位点的标记。

与在蛋白质的N端或C端引入融合荧光蛋白的标记方法相比，编码生物正交非天然氨基酸的基因具有许多优点。

例如：（1）小的非天然氨基酸可以插入蛋白质的任何暴露部位，而不会影响蛋白质的活性；（2）通过基因编码可以实现多种标记，可用于研究各种蛋白质翻译后修饰，如糖基化、乙酰化、甲基化、泛素化、磷酸化等；（3）生物正交标记法可以实时、原位调节蛋白质的功能。

点击化学（clickchemistry）也叫链接化学、速配结合组合式化学，主旨是通过小单元的拼接，来快速可靠地完成形形色色分子的化学合成。

光点击化学的优点是不需要cu(i)催化，而是通过光诱导引发反应。

由于四唑类化合物在光照条件下很容易原位生成氰亚胺1,3-偶极子，该偶极子能够很快与烯烃发生环加成反应，生成具有荧光性质的吡唑啉环加成产物。

基因编码非天然氨基酸的方法在蛋白质中引入非常小的荧光基团，对蛋白质本身的结构和功能几乎没有影响，并且能够更真实地反映蛋白质的行为。

由于环丙烯赖氨酸仅在光照条件下与四唑类化合物反应，该方法为哺乳动物细胞中的时空可控蛋白质标记提供了新的策略和手段。

本文共同第一作者为博士研究生潘彦超。

该研究得到科技部国家重点基础研究973计划、国家自然科学基金委和中国科学院的资助。