小鼠侧脑室埋管给药方法的优化

体质 量 ２２～２６ ｇ，由上海 斯莱 克实验 动物 有 限责 任公 司提 供 ［ＳＣＸＫ（沪 ）２００８—００１６］ 饲养 于第 二军 医大 学 实验 动物 中心屏 障设 施 ［ＳＹＸＫ（沪）２００７．０００３］，饲养 １周 使其适 应环 境后进 行 实验 。实 验分两 部分进 行 ： 第 一 部分，分 为传 统埋 管组和 实 时纠偏 埋管 组 ２组 ， 每 组 １０只 ，进 行 两 种 埋管 法 成 功 率 比较 ：第 二 部 分 ，使 用 实 时纠 偏 埋 管法 埋 管 ，然后 分 为 ５、 １０、 ２０、３０ ｌ四个 注 射 剂 量 组 ，每 组 １０只 小 鼠 。 １．２ 实 验器 材
实验动物 与比较 医学 Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅ￣ｃｉｎｅ
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颅骨 表 面标 志 （如前 囟、人 字 点 、矢状 缝 等）来 确 定 脑 内神 经 结 构位 置 ，对 其 进 行 定 向刺 激 、毁 损 、 注 射 药 物 、 引导 电位 等 的实 验 技 术 ，广 泛 应 用 于 神 经 解 剖 ［５］、 生 理 ［６】、 药 理 【 ，７】和 外 科 等 领 域 。
【中图分 类号】Ｑ９５－３３ ［文 献标 识码 ］Ｂ ［文 章编号 】１６７４．５８１７（２０１４）０２．０１５３—０３
采用 脑立 体定 向仪对 实验动物 进行侧 脑室 给药 是 一等 的研 究 ｓ】。直 接进 行 侧 脑 室给 药 优 点 显 著 。首先 ，能够 直 接对 研 究 区域 进行 准 确 的部 位 限 制 性给药 ，方便确 切 掌握给 药剂 量和浓 度 ；其 次能 得 出更 接近 正常 生理 状 态 下 的 实验 结 果 。
方法 如下 ：（１）采用 戊 巴 比妥钠 （浓度 ７．５ ｍｇ／ｍ１） ＯＡ ｍｌ／１０ ｇ腹 腔注射 麻醉 小 鼠；（２）小 鼠头顶部剃 毛 ， 固定 于脑 立体 定 向仪 ， 调节 门齿 杆 ，使其 顶部 呈 水 平 状；（３）头顶 皮肤 消毒后 沿 中线切 开 ，剥离筋 膜，以 无 菌棉签 蘸少 量双 氧水 涂擦颅 骨表 面 ，暴 露 Ｂｒｅｇｒｎａ （前 囟）点；（４）根据 Ｐａｘｉｎｏｓ等【 】所 著 《小 鼠脑 立体 定
Ａｐｒ．２０１４，３４（２）
实验动物与 比较 医学 Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４—５８１７．２０１４．０２．０１５
小 鼠侧脑室埋 管给药方法 的优 化
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赵 勇 ，张 璐 ，蔡丽萍 ，徐 晨 ： （１．上海实验动物研究中心，上海 ２０１２０３；２．第二军 医大学实验动物 中心，上海 ２００４３３）
［摘要 】 目的 优 化 小 鼠侧 脑 室埋 管给 药方 法。 方法 通 过 两种 不 同埋 管方 法比较 其成 功率 ，通 过不同注射剂量组死亡率观察探索给药剂量范围。结果 实时纠偏埋管法成功率可达 １００％，侧 脑 室注射剂量为 ５－１０ ｍ 时死亡率较低 。 结论 实时纠偏埋管法成功率 高于传统埋管法，侧脑室 注射剂量建议范围为 ０￣ｌ０ Ｉｘｌ。 【关键 词】Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠；侧 脑 室；实时纠偏 埋管 法；剂 量 范 围
［收稿 日期】２０１４－０３－０４ ［基金项 目】上海市科委 基金 资助项 目（１２１４０９００７００） ［作者简介】赵 ￣（１９７４．），男，讲师，
Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｏｙｏｎｇｓｌａ ｒｃ＠ １６３．ｃｏｒ ｎ
１ 材 料 与 方 法
１．１ 实验 动物 与分 组 ＳＰＦ级雄 性 Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小 鼠 ６０只 ，７～８周 龄 ，
实 验 中使用 ＡＬＣ．Ｈ 电动数 显动 物脑 立体 定 向 仪 、ＡＬＣ．ＩＰ６００型 微量 注射 泵 、ＡＬＣ。ＣＥＤ８型 动 物 颅骨钻（以上均 由上海 奥尔科特 生物科技有 限公 司 生 产），埋 置 套管 使用 ２．５ ｍ１无 菌注射 器 针头 自制 ， 内芯 使 用 相 配 不 锈 钢 丝 自制 ， 与 套 管 适 配 的 ＰＥ 管 、 内注射 针 及 直径 １ ｍｍ、长 度 ２ ｍｍ 的 固定 用 螺 丝（购 自深圳 市瑞 沃德 生命 科 技有 限公 司）。 自凝 牙托水和牙托粉均为市购 。实验用螺丝、套管等 与 小 鼠体 内接 触 器材 采 用 新 沽尔 灭 浸 泡 消毒 。 １．３ 手术 方法
侧脑 室 给 药通 常有 两种 实 验设 计 ，一 种是 仅 需 单次给药的实验，可 以直接进行侧脑室注射；另一种 是需 要连 续给 药 的实验 ，通 常进 行侧 脑 室埋管 给药 的 方 法 。采 用 侧 脑 室 埋 管 给 药 方 法 的实 验 ， 能够 得到 的可 靠数据 量 与埋 管成 功率密 切相 关 。 小 鼠的 侧脑 室 较大 鼠小 ，埋 管 成 功率 亦较 低 ，很容 易 造成 因埋 管不 成功而 影 响实验 数据 的科 学性 ，实验 效率 较 低 。这 种 无 法 实 时 调 整 、 无 导 向 、“盲 目 ” 的 传 统埋 管 ，往往 需 要靠成 倍增 加 实验动 物数量 来 保 证取得 足够 的实 验数 据量 ， 预 防性 的增加 实验动 物 量对 实验 资源和 实验 人 员均 造 成无谓 的浪 费。 作者 在长 期侧 脑室埋 管 实验 中摸索 出一 种 “实时纠 偏埋 管法 ”， 即可 以在 埋 管 操作 过 程 中对 所 埋套 管 是 否 进 入侧 脑 室进行 判 断并实 时调 整 ，直 至进入 侧脑 室 为 止 ，从 而 大 幅 提 高 侧 脑 室 埋 管 成 功 率 。 目前 ， 关 于侧 脑室 给药 的剂量 亦有 争议 ，本 实验通 过不 同 注 射剂 量 导致小 鼠死 亡率 的 比较 ，拟对 小 鼠侧脑 室 注 射 时采 用 的药 物 剂量 范 围提 供 实 验参 考 数据 。