先天性巨结肠与RET基因的相关研究进展

㊀㊀基金项目:国家自然科学基金资助项目(８１３００２６６ꎬ８１７７１６２０)ꎻ北京市自然科学基金资助项目(７１４２０２９)ꎻ北京市优秀人才培养个人基金资助项目(２０１３Ｄ００３０３４０００００７)ꎻ北京市科技新星基金资助项目(Ｚ１５１１０００００３１５０９１ꎬＺ１７１１００００１１１７１２５)作者单位:１０００２０㊀北京ꎬ首都儿科研究所遗传研究室通讯作者:姜茜ꎬ副研究员ꎬ硕士生导师ꎬ电子信箱:ｔｅａｃｏ＠１２６.ｃｏｍ先天性巨结肠与ＲＥＴ基因的相关研究进展王㊀慧㊀姜㊀茜摘㊀要㊀ＲＥＴ原癌基因编码酪氨酸激酶受体ꎬ在细胞的增殖分化和迁移过程中发挥重要作用ꎮ先天性巨结肠(ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅꎬＨＳＣＲ)是由于肠神经嵴细胞(ｅｎｔｅｒｉｃｎｅｕｒａｌｃｒｅｓｔｃｅｌｌｓꎬＥＮＣＣｓ)在肠道内的移行㊁种植过程中发生异常ꎬ致使远端肠道缺乏神经节细胞ꎬ是最常见的先天性小儿消化道畸形ꎮ研究证实ＲＥＴ原癌基因为主要易感基因ꎮ本文就近年来ＲＥＴ基因与ＨＳＣＲ发生㊁发展关系的国内外研究进行综述ꎮ关键词㊀先天性巨结肠㊀ＲＥＴ基因㊀肠神经系统中图分类号㊀Ｒ７２㊀㊀㊀㊀文献标识码㊀Ａ㊀㊀㊀㊀ＤＯＩ㊀１０.１１９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１６７３￣５４８Ｘ.２０１９.０３.０３３㊀㊀ＲＥＴ蛋白是由ＲＥＴ原癌基因编码的一种跨膜蛋白ꎬ属于酪氨酸激酶受体ꎬＲＥＴ蛋白在肠神经系统发育过程中发挥重要作用ꎮ胚胎发育时期多种因素共同作用导致肠神经嵴细胞在肠道中的迁移㊁增殖和分化发生异常ꎬ致使远端肠道神经节细胞缺如ꎬ导致ＨＳＣＲ的发生ꎮ本文就ＲＥＴ基因的结构㊁功能及其调控网络的异常表达对ＨＳＣＲ的影响等近期研究进展进行综述ꎮ㊀㊀一、ＲＥＴ原癌基因１.ＲＥＴ的分子的结构:ＲＥＴ原癌基因位于１０号染色体长臂ꎬ全长６００００ꎬ由２１个外显子组成ꎬ编码一种含有１１１４个氨基酸的酪氨酸激酶受体超家族蛋白[１ꎬ２]ꎮＲＥＴ蛋白包含３个结构域:细胞外配体结合结构域(ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｒｅｇｉｏｎｓ)㊁跨膜结构域(ｔｒａｎｓｍｅｍ￣ｂｒａｎｅｄｏｍａｉｎꎬＴＭＤ)以及细胞内的酪氨酸激酶(ｔｙｒｏ￣ｓｉｎｅｋｉｎａｓｅꎬＴＫ)结构域(图１)ꎮ不同结构域内的碱图１㊀ＲＥＴ基因的结构示意图及突变位置Ａ.箭头所示第１０６２位置之后连接９个或５１个氨基酸ꎬ为ＲＥＴ蛋白的２种主要形式ꎻＢ.所示突变均经过体外细胞功能验证４４１基突变导致的ＨＳＣＲ的机制有所不同(表１)ꎮＲＥＴ基因的３ᶄ－端的可变剪接形成３种转录本ꎬ分别被命名为ＲＥＴ５１㊁ＲＥＴ４３和ＲＥＴ９[３]ꎮ其中ＲＥＴ５１和ＲＥＴ９为主要形式ꎬ在各物种间高度保守ꎮＲＥＴ５１和ＲＥＴ９相关的信号复合物并不完全相同ꎬ表明不同ＲＥＴ亚型介导的生理功能也不尽相同ꎮ２.ＲＥＴ蛋白的表达和激活:ＲＥＴ原癌基因编码跨膜酪氨酸激酶受体ꎬ在人体大部分组织中均有表达ꎬＲＥＴ蛋白与相应配体如ＧＤＮＦ(ｇｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ－ｄｅ￣ｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ)等结合ꎬ促进受体二聚化ꎬ激活下游信号通路ꎬ进而刺激细胞增殖㊁分化和迁移ꎮ相关功能研究显示ꎬＲＥＴ蛋白的磷酸化及其受体－配体复合物的形成是ＲＥＴ信号通路转导中的重要步骤ꎮＲＥＴ蛋白的磷酸化即其活化形式ꎬ发挥生物学功能ꎮ人体内有４种配体可诱导其活化ꎬ分别是ＧＤ￣ＮＦ㊁ａｒｔｅｍｉｎ(ＡＲＴＮ)㊁ｐｅｒｓｅｐｈｉｎ(ＰＳＰＮ)和ｎｅｕｒｔｕｒｉｎ(ＮＲＴＮ)ꎬ统称为ＧＤＮＦ配体家族(ＧＤＮＦｆａｍｉｌｙｌｉｇ￣ａｎｄｓꎬＧＦＬｓ)[４]ꎮ二㊁先天性巨结肠肠神经嵴细胞在胎儿期５~１２周时由神经嵴细胞(ｎｅｕｒａｌｃｒｅｓｔｃｅｌｌꎬＮＣＣ)移行种植于整个肠道ꎮ如ＮＣＣ在肠道内移行㊁种植过程发生异常引起远端肠道缺乏神经节细胞ꎬ即可导致先天性巨结肠(Ｈｉｒｓｃｈｓ￣ｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅꎬＨＳＣＲ)ꎮＨＳＣＲ是最常见的小儿消化道畸形ꎬ属于典型的肠神经系统(ｅｎｔｅｒｉｃｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓ￣ｔｅｍꎬＥＮＳ)发育异常疾病ꎮＨＳＣＲ在活产婴儿中的平均发生率约１/５０００ꎬ存在明显种族差异ꎬ亚洲人群发病率最高ꎬ为１/３５７１ꎮ中国属高发生率国家ꎬ男性与女性发生率之比为(２~４)ʒ１[５]ꎮ１.先天性巨结肠的分类:按照肠道缺失神经节细胞的长度可将ＨＳＣＲ分为３种类型ꎬ即短段型(ｓｈｏｒｔ－ｓｅｇｍｅｎｔｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅꎬＳ－ＨＳＣＲ)㊁长段型(ｌｏｎｇ－ｓｅｇｍｅｎｔｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅꎬＬ－ＨＳＣＲ)以及全结肠型巨结肠(ｔｏｔａｌｃｏｌｏｎｉｃａｇａｎｇｌｉｏｎｏｓｉｓꎬＴＣＡ)ꎬ另有罕见的累积全肠型巨结肠[６]ꎮ此外ꎬ按照有无合并其他畸形以及染色体异常ꎬ可将ＨＳＣＲ分为单纯型和综合征型两种[５]ꎬ后者最常见合并２１三体畸形ꎬ另有１８％患儿同时存在其他器官系统先天畸形ꎬ如胃肠道畸形㊁唇腭裂㊁泌尿生殖道畸形㊁先天性心脏病以及颅面部畸形等[７]ꎮ根据患者其他家族成员中有无ＨＳＣＲ患者ꎬ可分为家族型和散发型ＨＳＣＲ两种[８]ꎮ２.先天性巨结肠的相关基因:遗传学研究表明与ＨＳＣＲ相关的易感基因主要来自ＥＮＳ发育过程中两条主要的信号通路及与其相关的转录因子[２]:ＲＥＴ㊁ＧＤＮＦ㊁ＮＲＴＮ㊁ＰＳＰＮ㊁ＥＤＮＲＢ㊁ＥＤＮ３㊁ＥＣＥ１㊁ＮＴＦ３㊁ＮＴＲＫ３㊁ＳＯＸ１０㊁ＰＨＯＸ２Ｂ㊁Ｌ１ＣＡＭ㊁ＺＦＨＸ１Ｂ㊁ＫＩ￣ＡＡ１２７９㊁ＴＣＦ４㊁ＰＲＯＫ１㊁ＰＲＯＫＲ１㊁ＰＲＯＫＲ２㊁ＧＦＲＡ１㊁ＮＲＧ１㊁ＮＲＧ３㊁ＳＥＭＡ３Ａ㊁ＳＥＭＡ３Ｃ和ＳＥＭＡ３Ｄ[５ꎬ６]ꎮ但这些基因异常只能解释部分ＨＳＣＲ患者的发病原因ꎬ且大多为综合征型或临床表现较为严重的患者ꎮ随着高通量测序和基因分型技术的广泛应用ꎬ全基因组关联分析研究(ＧＷＡＳ)被逐渐运用在包括先天性巨结肠在内的各种复杂疾病易感基因的发掘上ꎬ越来越多的ＨＳＣＲ潜在易感基因被发现ꎬ如最近Ｚｈａｏ等[９]报道的ＶＡＭＰ５和ＭＣＣ基因多态性与中国南方儿童ＨＳＣＲ之间有一定的相关性ꎮ此外ꎬ基因相互作用也在逐渐进入研究者的视野ꎬ如ＲＥＴ基因编码区罕见突变与ＮＲＧ１基因内常见变异的共同作用ꎬ修饰基因ＮＲＧ３㊁ＭＡＰＫ１０㊁ＺＥＢ２㊁ＳＯＸ２等的调控作用等[５]ꎮ三㊁ＲＥＴ基因与先天性巨结肠的关系目前ＨＳＣＲ患者检出的已知致病性突变中约有８０％来自ＲＥＴ基因ꎬ其中含有大量功能失活(ｌｏｓｓ－ｏｆ－ｆｕｎｃｔｉｏｎꎬＬＯＦ)突变和新发突变(ｄｅｎｏｖｏｍｕｔａ￣ｔｉｏｎｓꎬＤＮＭｓ)ꎬ且靶向外显子测序和全外显子组测序(ｗｈｏｌｅｅｘｏｍｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇꎬＷＥＳ)结果均显示ＲＥＴ基因的有害性变异在ＨＳＣＲ患者中呈明显富集现象[４ꎬ１０ꎬ１１]ꎮ虽有研究提示环境因素在疾病促发中也可能发挥一定作用ꎬ如ＨＳＣＲ的发生与患者母亲怀孕期间的ＢＭＩ值增高及胎儿早产均有一定关系ꎬ但遗传因素在ＨＳＣＲ的发病中依然占据重要地位[１２]ꎮ与ＨＳＣＲ可能相关的致病性基因有２４个ꎬ但以ＲＥＴ基因为主ꎮ利用ＣＲＩＳＰＲ/Ｃａｓ９基因编辑技术在离体细胞模型中修正患者所携带的突变后ꎬ可明显恢复肠神经嵴细胞的正常功能ꎬ进一步说明ＲＥＴ基因突变在ＨＳＣＲ发病中的重要致病作用[１３]ꎮＲＥＴ基因突变导致ＲＥＴ蛋白表达定位异常㊁糖基化或磷酸化水平异常ꎬ以及一些其他基因或调节因素如ｍｉＲＮＡ或基因的甲基化调控异常导致ＲＥＴ表达降低时ꎬ都将影响ＲＥＴ蛋白在细胞内的功能ꎬ进一步影响细胞的增殖分化和迁移ꎬ从而导致ＨＳＣＲ的发生[６ꎬ１４~１６]ꎮ１.ＲＥＴ蛋白在肠神经系统发育中的作用:ＲＥＴ蛋白及其信号通路参与调节细胞的增殖㊁迁移和分化ꎮＲＥＴ基因表达异常将导致ＥＮＣＣｓ在肠道内异常定植ꎬ甚至可促进ＥＮＣＣｓ的凋亡引起ＨＳＣＲ的发生ꎮ５４１既往动物模型实验表明ＲＥＴ蛋白表达降低可导致小鼠结肠内的肠神经元细胞广泛死亡ꎬ当基因表达量低于３０％时即表现出明显的无神经节细胞缺陷表型ꎬ表明ＨＳＣＲ的发生㊁发展与ＲＥＴ基因的表达水平或功能活性存在明显剂量依赖效应[１７]ꎮ２.ＲＥＴ基因编码区变异:编码区(ｃｏｄｉｎｇｓｅ￣ｑｕｅｎｃｅｓꎬＣＤＳ)突变主要包括同义突变㊁无义突变㊁移码突变和错义突变等ꎮ其中同义突变虽然没有改变基因编码的氨基酸ꎬ如ＲＥＴ基因的ｃ１３５Ｇ>Ａ(ｐ.Ａ４５Ａ)㊁ｃ２３０７Ｔ>Ｇ(ｐ.Ｌ７６９Ｌ)和ｃ１２９６Ｇ>Ａ(ｐ.Ａ４３２Ａ)ꎬ但等位基因的分布和ＨＳＣＲ的发生㊁发展及严重程度密切相关[１８]ꎮ无义突变导致ＲＥＴ基因编码的ＲＥＴ蛋白提前终止ꎬ形成的截短蛋白对功能影响较大ꎮＨＳＣＲ患者中的ＲＥＴ基因突变以错义突变为主ꎬ突变后多数导致ＲＥＴ蛋白在细胞内定位发生改变ꎬ或影响ＲＥＴ蛋白的糖基化㊁磷酸化ꎬ进而不同程度地影响ＲＥＴ蛋白活性[１４]ꎮ不同位置的ＲＥＴ基因突变导致的ＲＥＴ蛋白功能改变不一(表１)ꎮＲＥＴ基因的ｃ.３４１Ｇ>Ａ(ｐ.Ｒ１１４Ｈ)突变在中国６％~７％的ＨＳＣＲ患儿中被发现ꎬ但在高加索人群中并未发现这一变异ꎬ推测为中国人群的创始者突变(ｆｏｕｎｄｅｒｍｕｔａｔｉｏｎ)[１９]ꎮ表１㊀不同位置ＲＥＴ突变影响蛋白质功能的主要机制突变位置突变导致ＲＥＴ蛋白所受影响细胞外结构域突变使ＲＥＴ蛋白糖基化水平下降ꎬ干扰ＲＥＴ蛋白成熟并阻碍其向细胞膜转运ꎬ破坏其与配体的结合细胞外半胱氨酸结构域突变破坏ＲＥＴ蛋白的糖基化ꎬ使蛋白插入至细胞膜受损酪氨酸激酶结构域降低ＲＥＴ细胞内酪氨酸激酶活性ꎬ影响ＲＥＴ下游信号的转导Ｙ１０６２附近氨基酸Ｙ１０６２位置突变破坏了ＲＥＴ与其信号分子的结合ꎬ阻碍ＲＥＴ信号通路的激活调节序列ＲＥＴ基因增强子区域突变将影响ＲＥＴ基因的表达量ꎬ导致细胞内ＲＥＴ基因的ｍＲＮＡ水平降低㊀㊀某些ＲＥＴ基因的ＬＯＦ突变在ＨＳＣＲ患者发病过程中属于必要不充分条件[６]ꎮ如单独的ＲＥＴ基因编码区突变可能并不足以导致ＨＳＣＲ发生ꎬ需累积其他微效基因[２０]ꎮＲＥＴ基因编码区突变在合并内含子变异时ꎬ可显著增加患病风险ꎮ２０１７年开展的一项跨种族全基因组Ｍｅｔａ分析结果显示ꎬＲＥＴ基因编码区错义突变ｐ.Ａｓｐ４８９Ａｓｎ(ｒｓ９２８２８３４)与增强子ｒｓ２４３５３５７的风险等位基因共存时ꎬ其患病风险的ＯＲ值从１.１增加至１６.７[１６]ꎮ随着测序技术的成熟ꎬ更多的ＲＥＴ基因罕见突变在ＨＳＣＲ患者中被发现ꎬ其中近５年发现的ＲＥＴ新发突变详见表２ꎮ表２㊀近５年报道的先天性巨结肠患儿的ＲＥＴ基因新发突变碱基变化氨基酸变化突变类型患者性别巨结肠类型参考文献ｃ.２２９Ｃ>Ｔｐ.Ａｒｇ７７Ｃｙｓ错义突变男全[１１]ｃ.２５４Ｇ>Ａｐ.Ｔｒｐ８５Ｘ无义突变男全[１１]ｃ.７５４Ｇ>Ｔｐ.Ｇｌｕ２５２Ｘ无义突变男全[１１]ｃ.７８９Ｃ>Ｇｐ.Ｔｙｒ２６３Ｘ无义突变女长[１１]ｃ.２３０８Ｃ>Ｔｐ.Ａｒｇ７７０Ｘ无义突变男全[１１]ｃ.２３３３ｄｅｌＴｐ.Ｖａｌ７７８Ａｌａｆｓ∗１移码突变男短[１１]ｃ.２５７８Ｃ>Ｔｐ.Ｇｌｎ８６０Ｘ无义突变男全[１１]ｃ.２００ｉｎｓＴＣＣｐ.Ａｒｇ６７ｉｎｓＬｅｕ插入突变女全[１１]ｃ.２８０２－２Ａ>Ｇ－剪接位点突变女短[１１]ｃ.２７６５Ｃ>Ａｐ.Ｓｅｒ９２２Ｔｙｒ错义突变女短[２１]ｃ.３５２ｄｅｌＣｐ.Ｌｅｕ１１８Ｃｙｓｆｓ∗１０５移码突变∗∗[２２]ｃ.１１９６Ｃ>Ｔｐ.Ｐｒｏ３９９Ｌｅｕ错义突变∗∗[２０]ｃ.４３１Ｇ>Ａｐ.Ａｒｇ１４４Ｈｉｓ错义突变男短[１４]ｃ.２２６７Ｃ>Ｔｐ.Ａｌａ７５６Ｖａｌ错义突变男短[１４]ｃ.８０９Ｃ>Ｔｐ.Ｐｒｏ２７０Ｌｅｕ错义突变未知未知[１４]ｃ.２３５Ｃ>Ｔｐ.Ａｒｇ７９Ｔｒｐ错义突变男短[１４]ｃ.１８８０－４Ａ>Ｇ－剪接位点突变男短[１４]㊀㊀∗表示携带该突变的患者中男女均有受累ꎬ且巨结肠类型不一ꎻ－表示预测为剪接位点突变ꎬ但并未进一步验证 ６４１㊀㊀３.ＲＥＴ基因的甲基化与ＨＳＣＲ:自２０世纪９０年代以来ꎬＣｐＧ岛甲基化水平对基因表达的影响已经引起人们的广泛重视ꎮＲＥＴ基因启动子区富含５ᶄ－ＣＧ－３ᶄ序列ꎬ其表达受ＤＮＡ甲基化的高度调控ꎮ研究表明维甲酸可通过调节ＲＥＴ基因启动子区５ᶄ－ＣＧ－３ᶄ富含区的ＤＮＡ甲基化水平来调控ＲＥＴ基因的表达ꎮ另有研究证实ＲＥＴ基因启动子区的ＣｐＧ岛甲基化程度可能是指示结肠癌患者预后的一个重要标志ꎬ表明ＲＥＴ基因的表达受其启动子区ＣｐＧ岛甲基化的调控ꎬ推测这一机制有可能在ＨＳＣＲ疾病发生中也发挥一定作用[２１]ꎮ４.ＲＥＴ基因与其他基因之间的相互作用:ＲＥＴ蛋白的表达不足或功能异常都将影响ＥＮＣＣｓ在肠道内的增殖㊁迁移和分化ꎮ很多基因可通过复杂的网络作用干扰ＲＥＴ信号通路ꎬ进而导致ＨＳＣＲ的发生ꎮ如Ｎｒｇ１可干扰ＧＤＮＦ对神经元分化的诱导作用ꎬ且ＧＤＮＦ能通过下调其受体ＥＲＢＢ２基因的表达水平来负向调控Ｎｒｇ１信号传导[２２]ꎻ另外一些基因则可通过直接调控降低ＲＥＴ基因的表达导致ＨＳＣＲ的发生ꎬ如先天性中枢性低通气综合征(ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｃｅｎｔｒａｌｈｙ￣ｐｏｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎｓｙｎｄｒｏｍｅꎬＣＣＨＳ)中ꎬＰＨＯＸ２Ｂ基因变体降低了ＲＥＴ基因启动子的反式激活作用ꎬ从而导致ＲＥＴ基因的表达下降致使患者出现ＨＳＣＲ的表型[２３]ꎮ近期研究表明Ｌ１ｃａｍ作为ＳＯＸ１０的修饰基因可调控ＳＯＸ１０的表达ꎬ后者可直接参与调控ＲＥＴ基因的表达ꎬ因此Ｌ１ｃａｍ也被列为ＨＳＣＲ的候选基因之一[６ꎬ２２]ꎮ图２㊀ＨＳＣＲ发生模式图ＲＥＴ基因的表达受ｍｉＲＮＡ㊁ＧＡＴＡ２㊁ＲＡＲＢ㊁ＳＯＸ１０及ＲＥＴ的ＣｐＧ岛的甲基化水平等多种因素调控ꎮ此外ꎬＲＥＴ基因的编码区突变可通过直接影响蛋白在细胞膜上的定位及其磷酸化水平和受体与ＧＤＮＦ㊁ＧＦＲａ１的相互作用影响下游蛋白ＥＲＫ和ＳＴＡＴ３蛋白的磷酸化水平及其功能ꎮ上述功能发生缺陷时均可导致ＥＮＣＣｓ在肠道内的异常定植７４１㊀㊀５.ｍｉＮＲＡ对ＲＥＴ的调控作用:ＭｉＲＮＡ是小的非编码ＲＮＡꎬ研究表明ꎬｍｉＲＮＡ通过与靶基因互补结合触发后者ｍＲＮＡ的降解或抑制其翻译来调控靶基因的表达ꎮ目前研究表明ꎬｍｉＲ－２１８－１可通过调控ＲＥＴ和ＰＬＡＧ１基因异常表达导致ＨＳＣＲ的发生ꎮ进一步分析显示ꎬ在ＨＳＣＲ患者的狭窄段肠组织中５种ｍｉＲＮＡ(ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ㊁ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ㊁ｈｓａ－ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ㊁ｈｓａ－ｍｉＲ－３６９－３ｐ和ｈｓａ－ｍｉＲ－４２９)表达水平显著上调(Ｐ<０.０５)ꎬ而ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－３ｐ则明显下调ꎮ这些差异表达的ｍｉＲＮＡ均参与ＲＥＴ信号通路的调控[１５]ꎮ此外ꎬｌｎｃＲＮＡ在ＨＳＣＲ发生中的作用也被逐渐发现ꎬ但其具体机制有待于进一步研究ꎮ６.基因调控网络(ｇｅｎｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋꎬＧＲＮ)异常与ＨＳＣＲ:基因表达调控是生物个体发育的重要基础ꎬ因此基因在生物个体发育过程中的作用应该作为ＧＲＮ的一部分来看待ꎬ而不是孤立地研究基因的功能ꎮ２０１６年经体外实验㊁胎鼠实验及人类胎儿肠道样本表达的研究表明ꎬＲＥＴ基因的３个顺式调控原件(ｃｉｓ－ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｅｌｅｍｅｎｔｓꎬＣＲＥｓ)中的风险等位基因组合可协同降低ＲＥＴ基因的表达ꎬ同时调节ＲＥＴ基因相应转录因子的表达致使ＲＥＴ基因的ＧＲＮ失常[６]ꎮ该研究还发现ꎬ分别与ＲＥＴ－７㊁ＲＥＴ－５.５㊁ＲＥＴ＋３相结合的转录因子ＲＡＲＢ㊁ＧＡＴＡ２㊁ＳＯＸ１０在胎鼠体内的表达具有时空特性ꎬ且每一种转录因子的作用时间各不相同ꎮＲＡＲＢ表达水平降低时引起的ＲＥＴ基因表达降低程度不如ＳＯＸ１０和ＧＡＴＡ２明显ꎬ提示ＲＡＲＢ可能还有其他可替代的未知转录因子在体内发生作用ꎮ该项研究还表明ꎬＳＯＸ１０基因表达量的轻微下降就可导致ＲＥＴ基因表达明显减少ꎬ表明ＳＯＸ１０在ＲＥＴ基因中的转录调节作用最强ꎮ在人类胎儿肠道样本的检测中还发现ꎬ不同的ＣＲＥ组合虽然造成一定程度的ＲＥＴ基因及其转录因子ＳＯＸ１０和ＧＡＴＡ２的降低ꎬ但在ＲＥＴ信号转导通路中ＧＤＮＦ和ＧＦＲＡ１组分的表达却明显增加ꎬ表明胚胎发育期人类肠道中可能还有其他转录因子或增强子在ＲＥＴ基因的ＧＲＮ中发挥作用ꎮ７.ＲＥＴ基因的嵌合体变异:近年来研究表明ꎬ越来越多的遗传性疾病的发生㊁发展与嵌合体变异密切相关ꎮ２０１４年Ｊｅｓｕｓ和Ｈａａｓｅ分别在两个先天性巨结肠家系中的非巨结肠患者中检测出嵌合体突变ꎮ同年ꎬＭｏｏｒｅ和Ｚａａｈｌ等通过对５６个石蜡包埋肠组织标本ＲＥＴ基因两个ｓｎｐ的基因型分析认为ꎬＲＥＴ基因的体细胞突变可能存在于无神经节细胞的肠组织中ꎮ２０１７年本课题组的最新研究显示ꎬ在９例ＨＳＣＲ患儿中检出ＲＥＴ基因突变ꎬ其中对８例患者父母有ＤＮＡ样本的家庭做了进一步Ｓａｎｇｅｒ测序检测ꎬ在其中２个家庭患者父母外周血样本中检出与先证者相同位点的较小的突变峰ꎬ表明这两个家庭的亲本属于嵌合体变异[１１]ꎮ进一步深度测序发现另外６个家系中两个患儿体内多组织ＲＥＴ突变等位基因频率各不相同且显著偏离５０％ꎮ由此可见ꎬ这两个患儿的突变不是发生在受精卵结合前ꎬ而应是由胚胎发育早期合子形成后的变异造成的ꎻ另有两个家庭的亲本ＤＮＡ中发现了极低水平的突变等位基因(频率为１％~４％)ꎮ因此既往ＨＳＣＲ患者中ＲＥＴ基因嵌合体变异的频率和程度存在被严重低估的可能ꎮ对于新发突变(尤其是严重突变)携带者所在家庭ꎬ应采用具有足够敏感度的深度测序来验证其父母或患者自身是否存在嵌合体变异ꎬ从而为疾病再发风险评估以及患者后代临床表型的严重程度预测提供更加可信的依据ꎮ综上所述ꎬＨＳＣＲ是典型的多个基因共同参与的复杂人类遗传病ꎬ同时与环境因素如孕母的肥胖㊁胎儿早产等也有一定关系[１２]ꎮＲＥＴ基因在肠神经嵴细胞的发育过程中占据重要作用ꎬ当ＲＥＴ蛋白在细胞内的定位发生改变ꎬ或其糖基化㊁磷酸化水平出现异常时ꎬ将导致ＲＥＴ功能失常并进一步影响ＥＮＣＣｓ在肠道内的定植ꎬ最终引起相关表型ꎮＭｉＲＮＡ㊁ＲＥＴ基因内含子㊁增强子区域及ＳＯＸ１０㊁ＲＡＲＢ㊁ＧＡＴＡ２㊁ＰＨＯＸ２Ｂ等转录调控基因因子也可调节ＲＥＴ的表达ꎬ这些元件功能出现异常时也可引起ＨＳＣＲ临床表型ꎮ随着基因检测技术和相关功能研究手段的发展ꎬ越来越多的罕见突变在ＨＳＣＲ患者中被鉴定ꎬ使人们对ＨＳＣＲ的发病机制有了更深入的了解ꎬ这对ＨＳＣＲ的临床治疗㊁遗传咨询以及肠神经系统发育的研究都将具有重大意义ꎮ参考文献１㊀ＧｒｅｙＷꎬＨｕｌｓｅＲꎬＹａｋｏｖｌｅｖａＡꎬｅｔａｌ.ＴｈｅＲＥＴＥ６１６Ｑｖａｒｉａｎｔｉｓａｇａｉｎｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎｍｕｔａｔｉｏｎｐｒｅｓｅｎｔｉｎａｆａｍｉｌｙｗｉｔｈｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｍｕｌｔｉｐｌｅｅｎｄｏｃｒｉｎｅｎｅｏｐｌａｓｉａ２Ａ[Ｊ].ＥｎｄｏｃｒＰａｔｈｏｌꎬ２０１７ꎬ２８(１):４１－４８２㊀ＳｅｒｇｉＣＭꎬＣａｌｕｓｅｒｉｕＯꎬＭｃＣｏｌｌＨꎬｅｔａｌ.Ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇᶄｓｄｉｓｅａｓｅ:ｃｌｉｎ￣ｉｃａｌｄｙｓｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙꎬｇｅｎｅｓꎬｍｉｃｒｏ－ＲＮＡｓꎬａｎｄｆｕｔｕｒｅｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ[Ｊ].ＰｅｄｉａｔｒＲｅｓꎬ２０１７ꎬ８１(１－２):１７７－１９１３㊀ＰａｎＺＷꎬＬｉＪＣ.Ａｄｖａｎｃｅｓｉｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｇｅｎｅｔｉｃｓｏｆｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇᶄｓｄｉｓ￣ｅａｓｅ[Ｊ].ＡｎａｔｏｍｉｃａｌＲｅｃｏｒｄＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＩｎｔｅｇｒａｔｉｖｅＡｎａｔｏｍｙａｎｄＥｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙＢｉｏｌｏｇｙꎬ２０１２ꎬ２９５(１０):１６２８－１６３８４㊀ＢａｈｒａｍｉＡꎬＪｏｏｄｉＭꎬＭｏｅｔａｍａｎｉ－ＡｈｍａｄｉＭꎬｅｔａｌ.Ｇｅｎｅｔｉｃｂａｃｋ￣８４１ｇｒｏｕｎｄｏｆＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ:ａｂｒｉｄｇｅｂｅｔｗｅｅｎｂａｓｉｃｓｃｉｅｎｃｅａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ[Ｊ].ＪＣｅｌｌＢｉｏｃｈｅｍꎬ２０１７ꎬ１１９(１):２８－３３５㊀ＭｃＫｅｏｗｎＳＪꎬＳｔａｍｐＬꎬＨａｏＭＭꎬｅｔａｌ.Ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ:ａｄｅｖｅｌ￣ｏｐｍｅｎｔａｌｄｉｓｏｒｄｅｒｏｆｔｈｅｅｎｔｅｒｉｃｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍ[Ｊ].ＷｉｌｅｙＩｎｔｅｒｄｉｓｃｉｐＲｅｖＤｅｖＢｉｏｌꎬ２０１３ꎬ２(１):１１３－１２９６㊀ＣｈａｔｔｅｒｊｅｅＳꎬＫａｐｏｏｒＡꎬＡｋｉｙａｍａＪＡꎬｅｔａｌ.Ｅｎｈａｎｃｅｒｖａｒｉａｎｔｓｓｙｎｅｒ￣ｇｉｓｔｉｃａｌｌｙｄｒｉｖｅｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆａｇｅｎｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋｉｎＨｉｒｓｃｈｓ￣ｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ２０１６ꎬ１６７(２):３５５－３６８７㊀ＺｈａｎｇＪＲ.ＺｈａｎｇＺＢ.ＳｙｎｄｒｏｍｉｃＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇᶄｓｄｉｓｅａｓｅａｎｄｉｔｓｍｏｄｅｏｆｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＣｏｎｔｅｍｐＰｅｄｉａｔｒꎬ２０１８ꎬ２０(５):４２８－４３２８㊀ＨｅｎｄｅｒｓｏｎＤꎬＺｉｍｍｅｒＪꎬＮａｋａｍｕｒａＨꎬｅｔａｌ.Ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇᶄｓｄｉｓｅａｓｅｉｎｔｗｉｎｓ:ａｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗａｎｄｍｅｔａ－ａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].ＰｅｄｉａｔｒＳｕｒｇＩｎｔꎬ２０１７ꎬ３３(８):８５５－８５９９㊀ＺｈａｏＪꎬＸｉｅＸꎬＹａｏＹꎬｅｔａｌ.ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＶＡＭＰ５ａｎｄＭＣＣｇｅｎｅｔｉｃｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｅｄｒｉｓｋｏｆＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌ￣ｉｔｙｉｎＳｏｕｔｈｅｒｎＣｈｉｎｅｓｅｃｈｉｌｄｒｅｎ[Ｊ].Ａｇｉｎｇ(ＡｌｂａｎｙＮＹ)ꎬ２０１８ꎬ１０(４):６８９－７００１０㊀ＧｕｉＨꎬＳｃｈｒｉｅｍｅｒＤꎬＣｈｅｎｇＷＷꎬｅｔａｌ.Ｗｈｏｌｅｅｘｏｍｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｃｏｕ￣ｐｌｅｄｗｉｔｈｕｎｂｉａｓｅｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｓｎｅｗＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓ￣ｅａｓｅｇｅｎｅｓ[Ｊ].ＧｅｎｏｍｅＢｉｏｌꎬ２０１７ꎬ１８(１):４８－６０１１㊀ＪｉａｎｇＱꎬＬｉｕＦꎬＭｉａｏＣꎬｅｔａｌ.ＲＥＴｓｏｍａｔｉｃｍｕｔａｔｉｏｎｓａｒｅｕｎｄｅｒｒｅｃｏｇ￣ｎｉｚｅｄｉｎＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].ＧｅｎｅｔＭｅｄꎬ２０１８ꎬ２０(７):７７０－７７７１２㊀ＬöｆＧｒａｎｓｔｒöｍＡꎬＳｖｅｎｎｉｎｇｓｓｏｎＡꎬＨａｇｅｌＥꎬｅｔａｌ.Ｍａｔｅｒｎａｌｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓａｎｄｐｅｒｉｎａｔａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｆｏｒｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓꎬ２０１６ꎬ１３８(１):ｅ２０１５４６０８１３㊀ＬａｉＦＰꎬＬａｕＳＴꎬＷｏｎｇＪＫꎬｅｔａｌ.Ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎｏｆｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇ－ａｓｓｏｃｉａｔ￣ｅｄｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｎｈｕｍａｎｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｖｉａｃｌｕｓｔｅｒｅｄｒｅｇｕｌａｒｌｙｉｎｔｅｒｓｐａｃｅｄｓｈｏｒｔｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃｒｅｐｅａｔｓ/Ｃａｓ９ꎬｒｅｓｔｏｒｅｓｎｅｕｒａｌｃｒｅｓｔｃｅｌｌｆｕｎｃｔｉｏｎ[Ｊ].Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙꎬ２０１７ꎬ１５３(１):１３９－１５３１４㊀ＷｉｄｏｗａｔｉＴꎬＭｅｌｈｅｍＳꎬＰａｔｒｉａＳＹꎬｅｔａｌ.ＲＥＴａｎｄＥＤＮＲＢｍｕｔａｔｉｏｎｓｃｒｅｅｎｉｎｇｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ:ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｓｔｕｄｉｅｓａｎｄｉｔｓｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒｇｅｎｅｔｉｃｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ[Ｊ].ＥｕｒＪＨｕｍＧｅｎｅｔꎬ２０１５ꎬ２４(６):８２３－８２９１５㊀ＬｉＳꎬＷａｎｇＳꎬＧｕｏＺꎬｅｔａｌ.ｍｉＲＮＡｐｒｏｆｉｌｉｎｇｒｅｖｅａｌｓｄｙｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＲＥＴａｎｄＲＥＴ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓｉｎＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇᶄｓｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１６ꎬ１１(３):ｅ０１５０２２２１６㊀ＴａｎｇＣＳꎬＧｕｉＨꎬＫａｐｏｏｒＡꎬｅｔａｌ.Ｔｒａｎｓ－ｅｔｈｎｉｃｍｅｔａ－ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｅ￣ｎｏｍｅ－ｗｉｄｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓｔｕｄｉｅｓｆｏｒＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].ＨｕｍＭｏｌＧｅｎｅｔꎬ２０１６ꎬ２５(２３):５２６５－５２７５１７㊀ＵｅｓａｋａＴꎬＮａｇａｓｈｉｍａｄａＭꎬＹｏｎｅｍｕｒａＳꎬｅｔａｌ.ＤｉｍｉｎｉｓｈｅｄＲｅｔｅｘｐｒｅｓ￣ｓｉｏｎｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｓｎｅｕｒｏｎａｌｓｕｒｖｉｖａｌｉｎｔｈｅｃｏｌｏｎａｎｄｃａｕｓｅｓｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｇａｎｇｌｉｏｎｏｓｉｓｉｎｍｉｃｅ[Ｊ].ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔꎬ２００８ꎬ１１８(５):１８９０－１８９８１８㊀Ｇａｒｃｉａ－ＢａｒｃｅｌóＭＭꎬＳｈａｍＭＨꎬＬｕｉＶＣꎬｅｔａｌ.ＣｈｉｎｅｓｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｐｏｒａｄｉｃＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇᶄｓｄｉｓｅａｓｅａｒｅｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｌｙｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄｂｙａｓｉｎｇｌｅＲＥＴｈａｐｌｏｔｙｐｅ[Ｊ].ＪＭｅｄＧｅｎｅｔꎬ２００３ꎬ４０(１１):ｅ１２２１９㊀ＣｏｒｎｅｓＢＫꎬＴａｎｇＣＳꎬＬｅｏｎＴＹꎬｅｔａｌ.Ｈａｐｌｏｔｙｐｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｓａｐｏｓ￣ｓｉｂｌｅｆｏｕｎｄｅｒｅｆｆｅｃｔｏｆＲＥＴｍｕｔａｔｉｏｎＲ１１４ＨｆｏｒＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇᶄｓｄｉｓ￣ｅａｓｅｉｎｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１０ꎬ５(６):ｅ１０９１８２０㊀ＳｒｉｂｕｄｉａｎｉＹꎬＣｈａｕｈａｎＲＫꎬＡｌｖｅｓＭＭꎬｅｔａｌ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｖａｒｉａｎｔｓｉｎＲＥＴａｎｄＩＨＨｐａｔｈｗａｙｍｅｍｂｅｒｓｉｎａｌａｒｇｅｆａｍｉｌｙｗｉｔｈｈｉｓｔｏｒｙｏｆＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙꎬ２０１８ꎬ１５５(１):１１８－１２９２１㊀ＴｏｒｒｏｇｌｏｓａＡꎬＡｌｖｅｓＭＭꎬＦｅｒｎａｎｄｅｚＲＭꎬｅｔａｌ.ＥｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓｉｎＥＮＳｄｅ￣ｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].ＤｅｖＢｉｏｌꎬ２０１６ꎬ４１７(２):２０９－２１６２２㊀ＷａｌｌａｃｅＡＳꎬＳｃｈｍｉｄｔＣꎬＳｃｈａｃｈｎｅｒＭꎬｅｔａｌ.Ｌ１ｃａｍａｃｔｓａｓａｍｏｄｉｆｉｅｒｇｅｎｅｄｕｒｉｎｇｅｎｔｅｒｉｃｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ[Ｊ].ＮｅｕｒｏｂｉｏｌＤｉｓꎬ２０１０ꎬ４０(３):６２２－６３３２３㊀ＤｉＺａｎｎｉＥꎬＡｄａｍｏＡꎬＢｅｌｌｉｇｎｉＥꎬｅｔａｌ.ＣｏｍｍｏｎＰＨＯＸ２Ｂｐｏｌｙ－ａｌａ￣ｎｉｎｅｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎｓｉｍｐａｉｒＲＥＴｇｅｎｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎꎬｐｒｅｄｉｓｐｏｓｉｎｇｔｏＨｉｒ￣ｓｃｈｓｐｒｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａꎬ２０１７ꎬ１８６３(７):１７７０－１７７７(收稿日期:２０１８－０６－２０)(修回日期:２０１８－０７－０４)(上接第１３９页)４㊀范志松ꎬ左静ꎬ李勇ꎬ等.实体肿瘤中Ｇ－ＣＳＦ和Ｇ－ＣＳＦＲ的表达及作用的研究进展[Ｊ].临床与实验病理学杂志ꎬ２０１５ꎬ３１(１０):１１４５－１１４７５㊀顾昊ꎬ钱亚云ꎬ刘延庆ꎬ等.集落刺激因子－１通路对肿瘤相关巨噬细胞的调节作用[Ｊ].中华全科医学ꎬ２０１５ꎬ１３(１０):１６８７－１６９０６㊀ＭｏｒｉｔｚＡꎬＬｉＹꎬＧｕｏＡꎬｅｔａｌ.Ａｋｔ－ＲＳＫ－Ｓ６－ｋｉｎａｓｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｎｅｔ￣ｗｏｒｋｓａｃｔｉｖａｔｅｄｂｙｏｎｃｏｇｅｎｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｓ[Ｊ].ＳｃｉＳｉｇｎａｌꎬ２０１０ꎬ３(１３６):ｒａ６４７㊀王凤琴ꎬ章许晶.黏着斑激酶在鼻咽癌细胞系６－１０Ｂ中的表达及其对Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ表达的影响[Ｊ].中国老年学杂志ꎬ２０１６ꎬ３６(２３):５８４４－５８４６８㊀孙春凤.基质金属蛋白酶－２的结构和功能[Ｊ].安徽医科大学学报ꎬ２０１３ꎬ４８(３):３３０－３３２９㊀张波ꎬ李航ꎬ杨永生ꎬ等.基质金属蛋白酶及其抑制物与乳腺癌关系的研究进展[Ｊ].中国实验诊断学ꎬ２０１３ꎬ１７(８):１５３４－１５３７１０㊀张明明ꎬ徐玉清.ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９在恶性肿瘤中的研究进展[Ｊ].国际肿瘤学杂志ꎬ２０１２ꎬ３９(１１):８２０－８２３１１㊀曹敏ꎬ卢宁.ＣＤ１４７与ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９在乳腺癌中的研究进展[Ｊ].医学综述ꎬ２０１５ꎬ２１(７):１２０９－１２１１１２㊀ＨｕａｎｇＬꎬＸｕＸꎬＨａｏＹ.ＴｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｔｕｍｏｒｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｖｉａＣＳＦ－１/ＣＳＦ－１Ｒｐａｔｈｗａｙａｃｔｉｖａｔｉｏｎ[Ｊ].ＲｏｍＪＭｏｒｐｈｏｌＥｍ￣ｂｒｙｏｌꎬ２０１４ꎬ５５(Ｓｕｐｐｌ２):５０１－５０６１３㊀ＡｌｌａｖｅｎａＰꎬＭａｎｔｏｖａｎｉＡ.Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙｉｎｔｈｅｃｌｉｎｉｃｒｅｖｉｅｗｓｅｒｉｅｓꎻｆｏ￣ｃｕｓｏｎｃａｎｃｅｒ:ｔｕｍｏｕｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ:ｕｎｄｉｓｐｕｔｅｄｓｔａｒｓｏｆｔｈｅｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｔｕｍｏｕｒｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎ－ｍｅｎｔ[Ｊ].ＣｌｉｎＥｘｐＩｍｍｕｎｏｌꎬ２０１２ꎬ１６７(２):１９５－２０５１４㊀ＬｅｅＣＬꎬＢｌｕｍＪＭꎬＫｉｒｓｃｈＤＧ.Ｒｏｌｅｏｆｐ５３ｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｉｓｓｕｅｒｅ￣ｓｐｏｎｓｅｔｏｒａｄｉａｔｉｏｎｂｙｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ[Ｊ].ＴｒａｎｓｌＣａｎｃｅｒＲｅｓꎬ２０１３ꎬ２(５):４１２－４２１１５㊀ＤａｉＷꎬＫｌｏｎｅｒＲＡ.Ｐｏｔｅｎｔｉａｌｒｏｌｅｏｆｒｅｎｉｎ－ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｓｙｓｔｅｍｂｌｏｃｋ￣ａｄｅｆｏｒｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａ/ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙａｎｄｒｅｍｏｄｅ￣ｌｉｎｇａｆｔｅｒｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＰｏｓｔｇｒａｄＭｅｄꎬ２０１１ꎬ１２３(２):４９－５５(收稿日期:２０１７－０８－１２)(修回日期:２０１７－０９－１９)９４１。