HIV检测试剂的发展及应用
体外诊断试剂分类和常见产品技术原理及应用
体外诊断试剂的分类(三)
按照技术方法分: 1.比色法(颜色反应);2.分光光度法; 3.凝集法;4.散射法(沉淀反应); 5.透射比浊法(沉淀反应);
6.速率法、终点法(产物或底物量);
7.标记技术;8.生物亲和;9.免疫技术; 10.发光技术;11.荧光技术;12. 放射技术;
13.形态分析; 14.流式细胞;15.电泳技术;
普通生化类试剂(清洁环境)
★原理:与普通生化试剂(十万级要求)类相同。 ★产品涉及:无机离子检测、血气电解质类、血液分析仪用试剂类等试剂。
★ 工艺要求:除生产可在清洁环境中进行操作外,生产工艺和关键控制点与普通生化试剂(十万级要求)类相同。
(第十四类) 干化学类试剂
干化学试剂(条、卡或盒):干化学尿液分析试纸条; 尿微量白蛋白(UALB)测试卡
常见的体外诊断产品技术原理及应用
在实际应用中,单一技术往往不能满足检测需要,因此,诊断试剂会联合使用多种技术。常见的体外诊断产品:
1.生化分析仪、生化试剂;
2.酶标仪、酶免试剂; 3.免疫化学发光仪及试剂;
4.胶体金(乳胶、荧光)免疫层析试剂;
5.血细胞分析仪、细胞检测试剂;
6.尿液分析仪、尿液检测试剂(试纸);
注:*号的品种,预期用途为血源筛查时按药品受理和审评,为临床诊断时,按第三类医疗器械进行管理。
体外诊断试剂的分类(二)
二、 按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂 :
1、临床血液学和体液学检验试剂
2、临床化学检验试剂 3、临床免疫学检验试剂 。 4、微生物学检验试剂 5、组织细胞学检验试剂 6、变态反应、自身免疫诊断检验试剂(盒) 7、遗传性疾病检验试剂 8、分子生物学检验试剂 9、其它检验试剂(盒)
HIV-1病毒载量试剂1技术参数
HIV-1病毒载量试剂1技术参数1.名称:人类免疫缺陷病毒(1型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)。
2.用途:用于定量检测人血浆中人类免疫缺陷病毒(1型)。
3.原理:应用实时荧光定量聚合酶链式反应原理。
4.检测项目:HIV-1RNA定量检测。
5.检测亚型:HIV-1M、O组。
6.检测方法:全自动核酸分离纯化,全自动核酸扩增和实时荧光PCR方法。
7.适用样品种类:非肝素抗凝血浆。
8.定量方式:内部标准品定量。
9.质控品:提供阴性、弱阳性、强阳性对照质控品。
10.技术要求:a.检测灵敏度:≤20copies/ml,置信度≥95%。
b.检测范围:20-1×107copies/ml。
c.检测特异性:100%。
d.重复性:CV值≤0.3log。
e.规格:48T/盒。
f.即开即用型液体试剂。
11.试剂储存条件:2-8℃保存。
12.试剂组份:包括核酸提取、纯化、扩增和检测的全部试剂。
13.抗污染方案:采用UNG酶防止PCR产物污染。
14.样品处理能力:可以同时进行检测1-72个样品15.备件:含完整实验过程中所需的相关耗材及洗液。
16.适用设备:适用于CobasAmpliprepCobasTaqman全自动病毒载量检测系统。
17.认证文件:中国医疗器械进口注册证等文件。
18.供货计划:按用户要求数量准时分批供货,试剂到货时有效期大于10个月。
HIV-1病毒载量试剂2技术参数1.名称:人类免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸(RNA)提取及检测试剂盒2.用途:用于定量检测人血浆中人类免疫缺陷病毒(1型)。
3.检测方法:应用RT-PCR和Real-time实时荧光定量检测技术HIV-1型各组病毒载量。
4.检测项目:HIV-1RNA定量检测。
5.检测亚型:HIV-1型M组(A-H)、O组、N组。
6.适用设备:m2000sp自动核酸提取仪,m2000rt实时荧光定量PCR仪; 7.定量方式:外部标准品定量8.技术要求8.1检测灵敏度:≤40copies/mL(0.6mL、1.0mL样本体系)8.2特异性:100%(95%CI99.28-100%)8.3检测范围:40-107copies/mL8.4适用样本种类:血浆(ACD-A或EDTA抗凝)8.5检测样本体积:可选0.2mL、0.5mL、0.6mL和1.0mL8.6检测方式:96孔PCR反应板8.7检测批量:一次检测批量可选24,48,72和968.8内测标准差(SD):≤0.25log copies/mL8.9内参要求:与样本一起提取和扩增,质控整个实验过程;9.认证文件:中国医疗器械进口注册证等文件。
(必备)第五代HIV抗体试剂临床应用
HIV抗体检测
试剂盒本身的问题 n 最好选用经国家药品监督管理局批准或注册, 以及中国药品生物制品检定所批批检合格,国 家艾滋病预防与控制中心参比实验室评估质量 优良的试剂。 n 要注意所用试剂盒的效期,一定要使用有效期 内的产品。 n 在效期内的试剂盒要注意批号,因为不同批号 的试剂盒中有一些试剂是不能混用的。
HIV抗体检测
实验开始前准备工作 n 酶标板、稀释液等需要一定的室温平衡时间,所以
一定要在上机前提前从冰箱中取出
HIV抗体检测
加样环节 n 仪器加样:要选择一次性吸头,不要用钢针加样;
样本离心时间要充分,离心后要观察是否还有凝块, 及时处理,以免引起加样误差导致的假阴性。 n 手工加样
HIV抗体检测
温育条件 n 如果加样后温育时采用水浴法,注意水面不要没过
酶标板,酶标板不能叠放,以免温度不均,放置酶 标板前应将温度提前调至实验所需温度,以免温育 时间不够,封板用的膜不能反复使用。
HIV抗体检测
洗板问题 n 洗板时洗板次数、浸泡时间及洗液量要完全按照说
明书要求设定,另外,要经常通一下洗板机的吸液 孔,以防被洗液中的结晶或是标本中的纤维蛋白丝 堵塞,确保洗板时所有洗液孔和吸液孔工作状态正 常,否则由于洗板不干净可能造成假阳性结果。
室间质评
n 质量控制是临床检验的最重要的环节,所以除了每天 做好室内质控外,还要参加卫生部临床检验中心以及 CDC的室间质量评价活动
快速检测试剂
n 与ELISA和发光法相比,快速法所需时间短,一般半小 时内即可报告结果,快速检测试剂敏感性和特异性均 低于酶联免疫试验试剂,仅用于某些特定条件下。对 于酶联免疫试验中吸光度值较低的感染者可能用快速 条很难判断结果,容易漏检。另外由于其特异性低于 酶联免疫试验,所以临床检测中也存在快速检测阳性, 而酶联免疫试验阴性的结果,造成了受检者不必要的 恐慌。
雅培Determine诊断试剂简要描述
雅培Determine诊断试剂简要描述美国雅培公司作为全球诊断产品的领先者,在其110多年的发展中,不断为临床检验领域提供高技术含量的产品和完善的服务,美国雅培公司也是全球第一个开发出HIV检测试纸的的实验室,其产品(AP180-185)开法原理是"硒标法",其产品获得美国FDA认证、通过了欧洲CE、EN46001、ISO13485、SDA (中国食品与药品监督管理局认证)等国际以及国家相关单位的认可,美国雅培公司生产的HIV检测试纸,不但可以检测出我国法定检测型号HIV-1/HIV-2艾滋病病毒,还可以检测出HIV-O型艾滋病病毒. 美国雅培公司生产的HBsAg检测试纸,以操作简便、结果快速、灵敏度和特异性高、应用广泛、保存方便和硒标记显示结果干扰小并可长期保存备案等特点,已成为乙肝病毒检测的首选。
人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂盒(胶体硒法)AIDS(获得性免疫缺陷综合症)是一种在人群中出现T-淋巴细胞改变的疾病。
在感染的人群中,病毒会使T-辅助细胞耗尽,使人容易获得感染的机会和一些恶性疾病。
目前所知的引起AIDS感染的病毒有HIV-1和HIV-2二种类型,而O-亚型为HIV-1中较独立的亚型。
由此AIDS病毒所产生的抗体主要有HIV-1和HIV-2二种抗体。
美国雅培Determine HIV(1+2+0)胶体硒法试纸条是一种用层析法定性被检物质的测试。
此产品的灵敏度为100%;特异性为99.8%。
能检测出所有的HIV-1型、HIV-2和O亚型的样品。
Determine HIV胶体硒法试纸条的主要特点:1.双抗原夹心法可同时检出IgG和IgM。
缩小了早期检测存在的“窗口期”。
2.纸条的捕捉位点包被有HIV-1,HIV-2和O亚型抗原,可最大限度的检测出感染者,最大限度的避免漏检。
3.采用“硒”标记HIV抗原,使层析的条带更为清晰。
4.可以单个测试,也可成批检测;15分钟判读结果,且结果稳定(可最长到60分钟内判读);无须另外的设备;试剂可室温保存。
hiv试纸原理
hiv试纸原理
HIV试纸是一种常用的HIV感染筛查工具,其原理是利用抗
体与抗原的特异性结合来检测人体内是否存在HIV抗体。
HIV试纸通常由两个部分组成:测试线和控制线。
测试线上包含着对HIV抗体具有高度敏感性的抗原,而控制线上则使用
了与HIV无关的抗原。
当试纸与被检测者的血液样本接触后,如果样本中含有HIV抗体,那么血液中的HIV抗体会与测试
线上的抗原结合。
这种结合会导致试纸上形成一个可见的彩色线条。
同时,为了验证试纸的有效性和被测试者样本的质量,控制线上的抗原也会与被检测者血液中的其他部分(非HIV抗体)
结合,形成另一个彩色线条,即控制线。
如果控制线未出现,那么试纸可能无效,需要重新测试。
通过观察试纸上是否出现测试线和控制线的形成情况,就可以初步判断被检测者是否感染了HIV病毒。
需要注意的是,HIV试纸只能作为初步筛查工具,在初步结果呈阳性的情况下,需要进一步进行专业的实验室检测来确认感染情况。
此外,试纸的使用方法和操作细节也需要根据具体的产品说明进行。
hiv胶体金法原理
HIV胶体金法(HIV colloidal gold assay)是一种常用于检测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的诊断试剂盒。
它基于胶体金技术,利用特定抗原与HIV抗体之间的免疫反应来检测HIV感染。
该方法的原理如下:
1. 准备试剂:试剂盒中包含两个主要组分:胶体金颗粒和特定的HIV 抗原。
胶体金颗粒是微小的金纳米颗粒,其表面被某种生物活性物质包覆,使其呈现出稳定的胶体状态。
特定的HIV抗原则能与HIV感染者体内产生的抗体发生特异性结合。
2. 样本处理:将待测血清或血浆样本与试剂中的HIV抗原混合,使其充分接触。
3. 抗原-抗体结合:如果样本中存在HIV抗体,那么它们将与试剂中的HIV抗原发生特异性结合。
这种结合形成了抗原-抗体复合物。
4. 胶体金标记:在抗原-抗体复合物形成后,胶体金颗粒会与复合物结合,形成更大的复合物。
这一过程被称为胶体金标记。
5. 可视化结果:将混合物滴在试剂盒提供的试纸上,胶体金颗粒会沿着试纸流动。
当复合物通过试纸上的检测线时,复合物中的胶体金
颗粒会与试纸上固定的抗体发生结合,形成可见的彩色线条。
如果样品中存在HIV抗体,则出现相应的阳性结果线条。
否则,只会显示一个阴性结果线条。
通过观察试纸上的线条形成情况,可以初步判断样本是否含有HIV抗体,从而进行HIV感染的初步筛查。
需要注意的是,HIV胶体金法是一种辅助诊断方法,阳性结果需要进一步进行确认和确诊。
hiv学发光法
HIV学发光法1. 引言HIV(人类免疫缺陷病毒)是一种引起艾滋病的病毒,世界各地都面临着HIV感染的挑战。
为了准确快速地检测HIV感染,科学家们开发了多种方法。
其中,HIV学发光法是一种广泛应用的检测技术,本文将详细介绍该方法的原理、应用以及优缺点。
2. 原理HIV学发光法是一种基于化学反应产生荧光信号的检测方法。
其原理基于以下步骤:1.样本制备:从患者血液中提取DNA或RNA,并进行适当处理以去除可能干扰的物质。
2.检测试剂盒:购买商用的HIV学发光试剂盒,其中包含了特定的引物和探针。
3.扩增反应:将样本与检测试剂盒中的引物和探针混合,在恒温条件下进行PCR(聚合酶链式反应),扩增目标序列。
4.荧光信号生成:在PCR过程中,如果样本中存在目标序列,则引物和探针会与目标序列结合。
当PCR反应进行到荧光信号检测阶段时,荧光信号会被产生。
5.信号检测:使用专门的设备(如荧光分析仪)来检测荧光信号的强度。
荧光信号的强度与样本中目标序列的数量成正比。
6.结果解读:根据荧光信号的强度,可以判断样本是否存在HIV感染。
通常,试剂盒厂商会提供参考值范围,用于结果判定。
3. 应用HIV学发光法在HIV感染的早期诊断、疾病监测以及筛查等方面具有广泛应用:3.1 早期诊断HIV学发光法可以在感染后的早期阶段检测到病毒存在,比传统方法(如ELISA)更敏感。
早期诊断对于及时采取治疗和预防传播至关重要。
3.2 疾病监测患者接受抗逆转录病毒治疗后,通过定期监测HIV RNA水平可以评估治疗效果。
HIV学发光法可以准确测量HIV RNA水平的变化,并帮助医生调整治疗方案。
3.3 筛查HIV学发光法可以用于大规模人群的筛查,例如在血液供应中心、孕妇产前筛查等场所。
其高灵敏度和快速检测时间使其成为广泛应用的筛查方法。
4. 优缺点4.1 优点•高灵敏度:HIV学发光法可以检测到非常低浓度的病毒,尤其是在感染早期。
•快速结果:相比传统方法,HIV学发光法通常更快获得结果,有助于及时采取治疗和预防措施。
全国艾滋病检测技术规范
全国艾滋病检测技术规范第一章样品的采集和处理1 范围本章规定了用于艾滋病病毒(HIV)检测的血清、血浆和全血样品的采集和处理方法,适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 规范性引用文件Guidelines for Using HIV Testing Technologies in Surveillance WHO/CDS/CSR/EDC/2001.16 UNAIDS/01.22E ISBN 9713-92-063-7.3 操作步骤3.1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
常用的血液样品的采集和处理方法如下:3.1.1 血清样品采集和处理3.1.1.1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置12h,待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min,吸出血清备用。
3.1.1.2 如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
3.1.2 抗凝血样品采集和处理3.1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
3.1.2.2 应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。
3.1.2.3 用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在48h内分离PBMC和血浆,否则应在2448h内分离血浆和血细胞。
病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2;CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。
3.1.3 采集样品注意事项3.1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
艾滋病检测试纸与HIV暴露后预防
艾滋病检测试纸与HIV暴露后预防艾滋病检测试纸与HIV暴露后预防学生姓名:唐堂学号: 2011312398学院:中国经济与管理研究院专业:数理经济与数理金融内容摘要本文介绍并评价了艾滋病检测试纸和HIV暴露后预防(HIV Post-exposure Prophylaxis, PEP),作者还总结了自己对将“艾滋病检测试纸”和“HIV暴露后预防”引入同伴教育活动中的一些建议。
关键词:艾滋病艾滋病病毒暴露预防措施检测试纸A B S T R A C TThis paper introduced and evaluated AIDS test paper and HIVPost-exposure Prophylaxis, the author also summed up his suggestions to introduce "AIDS test paper”and “HIV Post-exposure Prophylaxis “into youth peer education activity.KEY WORDS:aids hiv exposure prophylaxis detection test艾滋病检测试纸与HIV职业暴露应急措施在网上查到了以前YPE中未曾涉及的关于艾滋病检测试纸和HIV职业暴露应急措施的一些知识。
我整理下来,并自己进行了一些分析。
希望对大家以后的同伴教育活动能有所帮助。
一、介绍:艾滋病检测试纸(一)分类目前分为两种,一种是血液检测试纸,一种是唾液检测试纸。
(二)技术发展历史2002年11月7日,美国政府批准的快速检测试剂盒只需一滴血,就可在20分钟内检测检查者是否感染了HIV。
2004年3月26日,布什政府已经批准了唾液快速检测艾滋病毒(HIV)法。
这种方法能够在20分钟内提供结果,准确率达到99%。
(三)常见品牌血液检测试纸一般有雅培HIV试纸,艾康艾滋病检测试纸等。
血液HIV筛查检测中第三代和第四代试剂的结果观察
血液HIV筛查检测中第三代和第四代试剂的结果观察目的研究分析血液HIV筛查检测中第三代与第四代试剂的结果。
方法分别应用第三代、第四代HIV检测试剂对我站无偿献血者标本进行平行检测,2012年1月~2013年12月,共筛查35198份无偿献血者标本,对筛查结果为阳性,或者可疑标本送上级艾滋病确证实验室确证,结合确证结果和第三代、第四代HIV初筛试剂加以比较。
结果35198份标本中,第三代HIV试剂筛查出16例阳性,阳性率为0.05%(16/35198);第四代HIV试剂筛查出24例阳性,阳性率为0.07%(24/35198),其中双试剂阳性10份,单试剂阳性20份,共送艾滋病确证实验室30份标本。
10份双试剂阳性标本经免疫印迹法(WB)确证有8份阳性,1份为不确定,1份为阴性。
20份单试剂阳性均确证为阴性。
结论两代HIV试剂的阳性检出率无显著性差异(P>0.05),第四代HIV初筛试剂应用于HIV近期或者早期感染中,能够在一定程度缩短窗口期,两代试剂联合检测能提高HIV 的检出率,确保血液安全。
标签:血液HIV筛查检测;第三代试剂;第四代試剂;输血安全现阶段,国内艾滋病病毒感染者、艾滋病患者的患病率逐渐上涨[1],安全输血是一个严骏的考验,卫生部不但要求采供血机构对献血人员血液实施人类免疫缺陷病毒(HIV)初筛,而且要求各医疗机构对输血或手术前患者均要进行HIV初筛。
但因为某些因素的影响、窗口期的存在均会限制检测方法,检测HIV 的ELISA试剂发展很快,血站应选择灵敏度高、特异性好的试剂,减少血液浪费,保证血液安全。
我站应用第三代、第四代HIV检测试剂对无偿献血者标本进行平行检测,2012年1月~2013年12月,共筛查35198份无偿献血者血液标本,对比第三代与第四代试剂的检测结果,具体如下。
1 资料与方法1.1一般资料2012年1月~2013年12月共筛查我站无偿献血者血液标本35198份。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒 说明书
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(胶体金法)【药品名称】通用名:人类免疫缺陷病毒抗体诊断剂盒(胶体金法) 商品名:无英文名:Human Immunodeficiency Virus antibodies Diagnostic Kit 汉语拼音:REN LEI MIAN YI QUE XIAN BING DU KANG TI ZHEN DUAN SHI JI HE【使用目的】用于检测人血清或者血浆中的HIV(1+2)抗体 【试验原理】本试剂盒应用双抗原夹心胶体金免疫层析法检测血清/血浆中的HIV(1+2)抗体。
将通过基因工程技术制备的针对不同结合位点的两组HIV 重组抗原gp41、gp36分别用于标记和包被。
用纯化的兔抗gp41、gp36抗体作为质控线。
当样本通过层析作用在试纸条上迁移时,样本中如果含有HIV-1或HIV-2抗体,则在检测线区域将生成Ag-Ab-Ag-AU 复合物从而形成一条明显的红色线条。
无论样本中是否含有HIV 抗体,在质控线区域都将生成Ab-Ag-AU 复合物,从而形成另一条明显的红色线条。
【主要组成成分】 1)50人份/盒 1. 检测试纸条50个2. 说明书 1份 2)1人份/盒试剂条,稀释液,采血针,采血管,消毒棉球,说明书各一份。
【适用仪器】不需要任何仪器。
【标本要求】血清/血浆 【试验方法】1、试剂盒如从冰箱中取出后应平衡到室温后再从铝塑袋中取出检测卡,水平放置;2、向圆形加样孔中滴加待检样本;3、样本用量为50微升;4、在30分钟内读取椭圆形观察窗内结果 【对试验结果的解释】【该试验方法的局限性】本品仅适用于HIV (1+2)抗体的体外检测。
【产品性能指标】质控线区域的红色条带必须出现否则实验不成立。
【注意事项】 1、 全部检测工作必须符合生物安全守则规定,严格防止交叉感染。
2、 操作时须戴手套,穿工作衣,严格执行消毒隔离制度。
3、 使用前请检查本产品是否在有效期内,以及铝塑袋的密封状况; 4、 样本使用量多于200微升有可能导致溢出、流速缓慢、高背景、假阳性等结果;5、 如果样本过于粘稠有可能导致质控线暗淡甚至缺失;6、试纸条如从寒冷环境(冰箱)中取出后应平衡到室温后再使用;7、请使用新鲜的检测样本; 8、无论检测结果如何必须按照HIV 阳性污染物处理检测卡。
2024年HIV诊断试剂盒市场规模分析
2024年HIV诊断试剂盒市场规模分析1. 引言艾滋病病毒(HIV)是目前全球关注的重要公共卫生问题之一。
为了有效控制HIV 的传播,HIV诊断试剂盒的发展和市场规模成为广泛关注的研究领域。
本文旨在对HIV诊断试剂盒市场的规模和发展趋势进行分析和研究。
2. HIV诊断试剂盒市场概述HIV诊断试剂盒是用于检测HIV感染的重要工具。
随着世界各地对HIV传播的关注度提高,HIV诊断试剂盒市场迅速崛起。
市场上各类HIV诊断试剂盒品牌不断涌现,市场竞争逐渐加剧。
3. 2024年HIV诊断试剂盒市场规模分析根据市场研究数据显示,近年来HIV诊断试剂盒市场规模不断扩大。
全球范围内,HIV感染人数逐渐增加,这进一步推动了HIV诊断试剂盒市场需求的增长。
据预测,未来几年HIV诊断试剂盒市场将继续保持稳定增长的趋势。
3.1 市场规模根据统计数据,2019年全球HIV诊断试剂盒市场规模约为XX亿美元。
随着各国政府对艾滋病防控工作的更加重视以及医疗技术的不断进步,HIV诊断试剂盒市场规模有望进一步扩大。
3.2 市场分布HIV诊断试剂盒市场主要分布在发展中国家和部分发达国家。
这些国家中,HIV 感染率较高,对HIV诊断试剂盒的需求量巨大。
尤其在一些亚洲和非洲国家,HIV诊断试剂盒市场规模较大。
3.3 地区市场细分根据地区市场细分数据显示,亚洲和非洲地区HIV诊断试剂盒市场规模最大。
这主要是由于这些地区艾滋病感染率较高。
而北美和欧洲地区HIV诊断试剂盒市场规模相对较小,主要是由于艾滋病在这些地区的感染率较低。
4. HIV诊断试剂盒市场发展趋势4.1 技术进步随着医疗技术的不断进步,HIV诊断试剂盒的准确性和敏感性逐渐提高。
新型的HIV诊断试剂盒不仅能够快速检测HIV感染,还具备更高的准确度和稳定性。
这进一步推动了HIV诊断试剂盒市场的发展。
4.2 政府政策支持各国政府对HIV感染的关注度不断提高,加大了对HIV诊断试剂盒市场的政策支持。
HIV实验室检测技术
HIV实验室检测技术
30
操作方法
• 实验准备:试验开始前将试剂和样品放置在 室温(18~23℃), 按实验室SOP做好试剂准 备。
• 备好试剂盒、待检样品和外部对照质控血 清后,严格按试剂盒说明书以及质控和安全 防护要求进行筛查检测.
1/3/2021
HIV实验室检测技术
31
注意事项
• ELISA 是目前公认的抗-HIV 较佳的筛选方 法,但在实际工作中,ELISA抗-HIV的检测 受诸多因素影响。
艾滋病期:保持和发展AIDS早期症状,出现多种机 会性感染,神经细胞和功能损伤的表现,易发生 多种肿瘤
* AIDS的病程通常2年
1/3/2021
HIV实验室检测技术
2
关于检测抗-HIV的残余危险度
含义:在目前条件下,筛查后仍具感染性的机率 称为残余危险度。
影响因素: * 窗口期和检测时机的选择问题 * 实验室质控 * 个别人免疫功能低下,对HIV无反应 * 试剂质量和保存问题 * 是否在有效期内使用 * 试验操作错误:标本或结果登记的差错、仪器校准否、 错误的操作
第4代试剂
• 从理论上来讲,这种试剂是很完美的,但其 敏感度和特异度尚需通过大量的临床评估加 以确认。在初筛诊断试剂上还发展了特异的 HIV IgA,用作围产期儿童诊断,敏感度达 93.1%,特异度在1月龄以上的婴儿可达 100%。此外,在对抗HIV IgM的诊断也正在 积极研究,并取得了可喜的成绩,无形中可 缩短窗口期7—10天。
B
± ±或 + 再次采样,做确证实验
C
±-
报告抗-HIV阴性
D
- 不必复检 报告抗-HIV阴性
1/3/2021
HIV实验室检测技术
HIV初筛实验室试剂管理制度2
HIV初筛实验室试剂管理制度一、采购与审批科主任根据需要定期拟定采购计划, 交由院领导审批, 批核后由科主任与供应商联系进货。
二、验收与登记仓管负责人根据供应商提供的试剂及清单对数量、品种、品牌、包装等进行验收, 并将入库数据登记。
三、贮存冷藏试剂统一存放在HIV实验室专用的冰箱内, 冷箱保管及温度控制由负责人负责。
HIV试剂一般应2~8℃避光保存, 在有效期内使用。
四、出库管理各室提出试剂申领, 仓管人填写出库单据, 认领人签名后出库。
五、其它1.试剂的保存应严格按照要求存放, 以保证有效期内能有效地使用, 杜绝浪费现象。
2.仓管人应对试剂库存定期检查, 不使用过期变质的试剂。
3、易燃, 易爆试剂应分开存放远离火源和电源。
4、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责保存, 放保险箱内, 使用时应有两人在场, 并做好登记。
HIV初筛实验室保密程序制度1、HIV检测实验室的所有工作人员要具有高度的保密意识。
不得对无关人员透漏任何实验室内部的信息。
2.HIV检测实验室要有专人负责妥善保存与HIV/AIDS相关检测项目的所有资料(包括送检单、各种实验记录、感染者档案、报告单的发放), 不得擅自修改和销毁。
未经省级卫生行政部门许可, 不得向无关人员或单位提供任何情况。
严格遵守保密制度, 杜绝泄密事件的发生。
2.我院HIV实验室属于筛查实验室, 检测的结果也不是最终结果, 检测到阳性结果应及时启动应急预案, 根据WHO提出的三级包装系统送到上级实验室作进一步确认。
此时, 不能出具HIV抗体阳性的结果报告, 更不能告知受检者本人。
3、确认实验室确认阳性结果, 以机密级向送检单位出具阳性报告;送检单位接到报告后, 由专人负责接收, 并应及时会同医院感染科上报县卫生防疫站和卫生局。
在对阳性者告知检测结果时要先做好法律、医学、生活等方面的咨询。
4.经确认的阳性标本, 包括在实验室留存的标本, 应送省级HIV抗体确认中心或省级卫生行政部门指定的单位保存, 不得擅自处理。
四代HIV酶免检测试剂的应用初步评价
确 认 为 HI 阳性 的 7 V O例样 本 , 三代 、 四代 HI 酶 V 免 检测试 剂均 无漏 检 , 敏感 度为 1 0 ; 2 0 30 9例 临 床可疑样本 , 三代 、 四代 HI 试 剂 特 异 度 分 别 为 V
9 . 和 9. , i e ’ 98 9 7 Fs r S确 切 概 率 为 0 6 7 特 h .0 , 异 度 差 异无 统 计 学 意义 ; 叉 反 应 测试 , 交 2种试 剂
对 丙 肝抗 体 、 面抗 原 阳性 样本 均 无 交叉 反应 , 表 自 身 免 疫性 疾病 样 本 , 四代 有 1例交 叉 反应 , 阳性 假 率 为 0 5 ( 5 可 信 区问 : . 3 ~ 0 7 。结 . 9 0 7 .7 A) 0
果 见 表 1 。
代 检测 试剂 由北京 万泰提 供 。
1 0 其 中阴阳性 以 WB确认试 验为 标准 。 0, 抗干扰 能 力 的评价 通过对 丙肝 抗体 、 表面抗 原 阳性样 本 的检 测, 看有无 交叉 反应 。
稳 定性 , HI 感染初 期 已经存 在 。 在 V 四代试 剂基 于 此 特性 , 通过 HI 抗体和 P 4抗原 的联合检 测 , V 2 缩 短 “ 口期 ” 窗 。为 此 , 我们 选用 四代 HI 试 剂 对 3 V 5 0例 样 本 进 行 了 检 测 , 与 三 代 试 剂 进 行 了 比 0 并
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus HIV)是导致人类获得性免疫缺陷综合征(Acquired Immunodeficiency Syndrome AIDS)的病原体。
HIV通过血液传播、性传播和母婴传播三种途径在人群中流行和扩散。
1981年美国报道第一例艾滋病病例,至2009年年底,全球有存活的HIV感染者大约3330万例。
我国1985年报告第一例艾滋病传入病例,截止2009年12月,估计有存活的HIV感染者74万人。
HIV进入人体以后,感染和破坏人体的CD4+T淋巴细胞,快速复制繁殖,病毒数量迅速增加。
在感染的初期,病毒载量的水平很高,传染的危险大,急性期以后,病毒载量下降到相对稳定的定点(Set point)水平,在长达5~10年的临床潜伏期内,病毒载量和CD4+T淋巴细胞数量都保持相对稳定,这实际上是一种动态平衡,身体内每天有上亿个病毒被清除,也有相同数量的病毒产生,同样也有大约上亿个CD4+T淋巴细胞被破坏,有相同数量的细胞再生。
到了病程晚期,免疫细胞被耗竭,病毒大量复制,病毒载量升高,免疫功能崩溃,病人因发生各种机会性感染或肿瘤而死亡。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒是艾滋病防治的有力工具,广泛应用于献血员筛选、临床诊断和流行病学调查。
1985年3月美国FDA批准了第一种人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒,这是艾滋病防治进程中重要的里程碑、开启了科学防治艾滋病的时代。
一、人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus HIV)HIV在分类上属于逆转录病毒科、慢病毒属、灵长类慢病毒群。
病毒呈球形颗粒,被来自宿主细胞膜的脂质双层膜包裹,基因组结构大致是5’LTR,gag,pro,pol,env,3’LTR,5’端有帽状(cap)结构,3’端有多聚腺苷酸Poly (A) 序列,如果去掉Poly (A),基因组全长9100bp。
人类免疫缺陷病毒检测试剂临床研究
附件3人类免疫缺陷病毒检测试剂临床研究注册技术审查指导原则一、前言人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)检测试剂是指利用免疫学及分子生物学等方法原理对人血清、血浆或其他体液中的特定的HIV生物学标记物,包括HIV 1型(HIV-1 )p24抗原、HIV 抗体、HIV核酸、HIV基因耐药突变等进行定量或定性分析的试剂。
据《体外诊断试剂注册管理办法(试行)》(国食药监械〔2007〕229号)的分类原则,该类产品作为第三类体外诊断试剂(In Vitro Diagnostic,IVD)管理,属高风险管理产品。
本指导原则制定的主要目的是让申请人明确在注册申报过程中对本类试剂在临床研究方面重点关注容,同时规注册申请人对于注册申报资料中有关临床研究资料的要求。
本指导原则是对HIV检测试剂临床研究的一般性要求,申请人应依据具体产品的特性对临床研究资料的容进行充实和细化。
申请人还应依据具体产品的特性确定其中的具体容是否适用,若不适用,需具体阐述其理由及相应的科学依据。
本指导原则只是针对HIV检测试剂的特点,强调需重点考虑的问题,临床试验的基本要求应符合《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》(国食药监械〔2007〕240号)的规定,包括临床试验协议、方案、报告的撰写等。
本指导原则不包括行政审批要求,不作为法规强制执行。
本指导原则是申请人和技术审评人员的指导文件,如果有能够满足适合的法规要求的其他方法,也可以采用,但是需要提供详细的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定,随着法规和标准的不断完善、科学技术的不断发展,本指导原则相关容也将进行适时的调整。
二、适用围HIV生物学标记物是指机体在感染HIV后,在不同的感染阶段出现的生物学标记物,包括:HIV抗体、HIV-1p24抗原、HIV核酸、HIV基因耐药突变等。
关于HIV检测试剂盒三代和四代试剂的几个问题解释!
关于HIV检测试剂盒三代和四代试剂的几个问题解释!发布时间:2021-06-04T08:10:24.047Z 来源:《健康世界》2021年5期作者:黄敬[导读] 艾滋病想必大家都不陌生,大家虽然对这种疾病经常抱有恐惧和负面的情绪,但实际上对于艾滋病在临床上的检验方法却知之甚少。
今天,我们所讲述的关于艾滋病病毒检验试剂盒的相关问题,便是带领大家彻底的深入的认识这种疾病的检测手段。
我们先来全面的整理一下关于艾滋病检测试剂盒的相关分类,他主要是根据检测目标的不同来进行划分的,大致可以划分为抗体检验试剂、抗原检验试剂、核酸检验试剂以及艾滋病基因型药检测试剂这几种。
黄敬剑阁单采血浆站(剑阁蜀阳单采血浆有限公司) 6283001.什么是艾滋病检测试剂盒艾滋病想必大家都不陌生,大家虽然对这种疾病经常抱有恐惧和负面的情绪,但实际上对于艾滋病在临床上的检验方法却知之甚少。
今天,我们所讲述的关于艾滋病病毒检验试剂盒的相关问题,便是带领大家彻底的深入的认识这种疾病的检测手段。
我们先来全面的整理一下关于艾滋病检测试剂盒的相关分类,他主要是根据检测目标的不同来进行划分的,大致可以划分为抗体检验试剂、抗原检验试剂、核酸检验试剂以及艾滋病基因型药检测试剂这几种。
我们今天重点要关注的是艾滋病抗体检验试剂这一大的分类,因为在众多的艾滋病检测试剂中,仍然还是要以免疫标志检测为主要的检测方法。
艾滋病抗体检验试剂的种类有很多,目前我们国家采用的大多是第三代的检验试剂盒,也就是ELISA方法进行抗体检测。
ELISA 检测方法如今已经发展到了第四代,所以由此可见第三代检验试剂盒并不是最先进的,因为目前世界上关于艾滋病的检测已经逐渐发展并且开始较多利用第四代的诊断试剂盒,第四代试剂盒已经能够完成抗原抗体的联合检测。
但是大多数人对于三代和四代之间的差别没有一个系统化的认识。
而关于这两代试剂盒之间的迭代关系,又非常的复杂。
那么,我们今天就带大家来详细的了解一下这两代试剂盒都有什么特点,以及他们之间的区别都有哪些。
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作者单位:国家药典委员会(北京100061).通讯作者:王晓娟,wangxiaojuan @.cm中国图书分类号 R 392233 R 512191 文献标识码 A 文章编号 100425503(2008)0420346203【述评】HIV 检测试剂的发展及应用王晓娟 人免疫缺陷病毒(Human immunedeficiency virus ,HI V )是引起人类获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiency syndrome ,AI DS )即艾滋病的病原体。
自1981年美国首次诊断出艾滋病患者以来,艾滋病在全球范围内迅速传播,至今已夺去了2000多万人的生命。
在我国,截至2006年10月底,总计报告艾滋病病毒感染183733例,发病40667例,死亡12464例。
艾滋病的主要传播途径是经血液传播、性传播和母婴传播。
在目前尚无疫苗用于预防艾滋病的情况下,及时正确的诊断HI V 感染是减少艾滋病的传播和控制HI V 扩散的主要途径之一,因此HI V 检测试剂是艾滋病防治的重要武器。
随着检验技术的发展以及检测要求的不断提高,HI V 检测试剂有了较大的发展,敏感性显著提高,窗口期不断缩短,品种也日益丰富,本文对其发展及应用情况进行了概述。
11各类检测试剂的特点111 抗体检测试剂1.1.1 间接酶联免疫试剂第1代HI V 诊断试剂采用纯化裂解病毒抗原,利用间接酶联免疫法原理检测标本中的抗体。
该试剂窗口期大约是3个月,敏感性和特异性不高,易出现假阴性和假阳性。
第1代试剂只含有HI V 21抗原,而HI V 21抗原与HI V 22抗原的核苷酸序列相差40%,因此这种只能检测HI V 21抗体的试剂,对检测HI V 22抗体阳性的标本敏感性低,常发生漏检。
第2代HI V 诊断试剂仍然利用间接酶联免疫法原理检测HI V 抗体,但采用重组或合成多肽抗原。
窗口期比第1代诊断试剂缩短了约20d ,敏感性和特异性也有所提高。
在第2代诊断试剂中,出现了HI V 21/HI V 22抗体试剂盒,在包被的抗原中同时加入了HI V 22抗原(gp36多肽),使得标本中HI V 21或HI V 22抗体均可以检出。
1.1.2 双抗原夹心酶联免疫试剂第3代HI V 诊断试剂一改过去间接法检测原理,利用双抗原夹心酶联免疫法原理检测标本中的抗体,酶标记物也由抗人IgG 抗体(即第二抗体)改为特异性HI V 抗原,同时试剂中加入HI V 21O 群抗原(gp41多肽),因此敏感性提高,窗口期进一步缩短,是目前国际上公认的较好的检测抗体模式。
1.1.3 快速诊断试剂HI V 抗体的快速诊断试剂包括免疫层析、免疫斑点及凝集试验等,所用标本由单纯检测血液发展到可由唾液和尿液中检测。
1.1.3.1 免疫层析试验:免疫层析试验是一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术。
其大部分为一步法,操作简单,容易解释判断结果,是目前快速诊断试剂的主流产品。
还有少数免疫层析试剂在固相载体的不同部位包被不同的抗原来检测HI V 21M 群、HI V 21O 群及HI V 22抗体。
这种可鉴别不同基因型的试剂不仅有助于流行病学调查,还有助于抗病毒药物的选择和病情发展的预测。
1.1.3.2 免疫斑点试验:免疫斑点试验是由免疫印迹试验演变而来的,是以微孔滤膜作为载体,酶免疫反应阳性结果在膜上出现斑点,因此亦称斑点2酶联免疫吸附试验(D ot 2E LIS A )。
它具有简单、快速、特异性强与敏感性高等优点,但这种试验完成需要数个步骤,价格也高于免疫层析试剂。
1.1.3.3 凝集试验:凝集试验是将HI V 抗原包被到乳胶颗粒、明胶颗粒等固相载体上,形成致敏颗粒,检测血清中的抗体。
在血清中含有HI V 抗体时,致敏颗粒上的抗原与抗体发生反应,致使致敏颗粒凝集。
这个试验的敏感性及特异性与E LIS A 法相近,但操作与其他快速试剂相同,不需要仪器设备,也不需要操作人员具备很强的实验技能,缺点为反应时间比其他快速试验时间长。
1.1.4 抗体确证试剂确证试剂包括免疫印迹试验、免疫荧光试验和条带免疫试验等。
目前最常用的是免疫印迹试验,其方法以抗原抗体沉淀带的情况判断结果,如果没有条带,则判为HI V 阴性,而阳性的判断则需出现2条或以上的条带(gp24、gp31、gp41、gp120/gp160)才可以确定。
尽管免疫印迹法敏感性不如酶联免疫・643・ 中国生物制品学杂志2008年4月第21卷第4期 Chin J Biologicals April 2008,V o1.21 N o.4 法,但其特异性很高,出现假阳性的可能性几乎没有。
然而少数样本用免疫印迹法也无法确定,根据判定标准,既非明显阳性也非阴性,在这些病例中,大约有3%在后来表现了HI V 感染,而大多数则有感染HI V 的危险性。
无法确定的结果往往可以通过重新对病人进行E LIS A 和免疫印迹检测来解决,多数真正的HI V 感染者在6个月后,E LIS A 和免疫印迹的检测结果都会呈阳性。
另一个解决办法就是对其进行P24抗原的检测,进行进一步确证。
1.1.5 其他目前常用的方法是检测血清、血浆或全血中的抗体,但也有试剂可检测唾液或尿液中的HI V 抗体,适用于采血比较困难及不具备采血条件的场所。
1.2 抗原检测试剂检测HI V 抗原的试剂是通过检测由HI V 抗原基因(gag )为模板合成的核心蛋白P24来判断HI V 的感染。
该试剂是将HI V P24抗体固定在固相载体上检测标本中的抗原。
1.3 抗原抗体联合检测试剂抗原抗体联合检测试剂是联合检测HI V 21/HI V 22抗体与抗HI V 21O 亚群抗体及P24抗原的方法,被称为第4代HI V 诊断试剂。
这种试剂省去P24抗体检测,而增加P24抗原检测并不影响HI V 抗体的检测。
在对第4代试剂的研究中发现,在P24抗原滴度降低与血清阳转的转变过程中,未发现S/C O 值降低,也没有发现第4代试剂检测阴性而第3代检测阳性的样本,所以没有在P24抗原血症和血清抗体阳转之间产生诊断的第2个窗口期。
第4代试剂进一步缩短了窗口期,其敏感性较第3代试剂也有所提高。
1.4 病毒核酸检测试剂由于感染HI V 后,首先在血中出现的是病毒的核酸,其次是病毒的抗原,最后才是病毒的抗体,所以检测HI V 核酸应该是窗口期最短的诊断方法。
目前多采用PCR 方法检测HI V 病毒的DNA 序列,可使标本中微量的DNA 在数小时内大量扩增(>108)而被检出。
欧美血液中心和血液制品厂家已普遍采用核酸检测试剂筛查献血员和原料血浆。
美国FDA 已经正式批准用于原料血浆筛查的HI V 核酸定量检测试剂。
核酸检测试剂目前有两种,一种是定性检测试剂,常用于HI V 感染的辅助诊断,其自动化程度是发展推广的关键。
另一种是定量方法检测试剂,用于检测病毒载量,可用于监测疾病的病情进展和抗病毒治疗效果。
21各类检测试剂的应用2.1 第1代和第2代HI V 诊断试剂用于检测血液中HI V 抗体,有效地阻断了HI V 经血液传播,为控制HI V 扩散曾经起到过重要作用,但是现在已经被敏感性和特异性更高的第3代试剂所取代。
第3代试剂是目前国内和国际的主流产品,其检测血液或血清中的HI V 21/HI V 22抗体,用于献血员及高危人群中人类免疫缺陷病毒感染的筛查。
2.2 快速诊断试剂由于价格低廉,操作简单快速,在缺乏资源的发展中国家被广泛地应用。
但是快速诊断试剂敏感性和特异性均较酶联免疫法差,目前仅非洲将其用于血源筛查,在我国和美国等国家,均只用于流动献血站的现场筛查。
世界卫生组织(WH O )和联合国艾滋病规划署(UNAI DS )推荐了联合应用几种快速诊断试剂,在HI V 流行率不同的地区针对不同目的进行HI V 诊断的策略(见表1)。
联合使用快速筛查试剂能提高检测结果的可靠性,但与较敏感而且价廉的E LIS A 相比,会增加成本。
因此,用于血库筛查的试验应该尽量使用敏感性较高的快速筛查试剂或更加敏感有效的E LIS A 。
另外,HI V 在发展中国家的快速传播和潜在的HI V 新亚型的出现,也极大限制了快速检测试剂的使用,在一个地区使用哪种筛查试剂,还必须结合当地的实际情况决定。
2.3 用于确证试验,以便最终判定筛查试验阳性的样本是否为HI V 感染者的样本。
2.4 用于P24抗原检测。
P24抗原在感染者血清中的滴度有两个高峰,第一个高峰出现在感染初期尚未产生P24抗体时,其后随着感染者血清中抗体水平不断升高,P24抗原滴度下降。
但在进入到艾滋病期后,由于机体无法产生足够的P24抗体以中和P24抗原,血清中的P24抗原滴度达到第二个高峰。
根据P24抗原在HI V 感染者初期感染的血清中出现的特点,进行P24抗原的检测可用于HI V 早期诊断和病情监测、HI V 21抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断和第四代HI V 21抗原/抗体E LIS A 试剂检测呈阳性反应、但HI V 21抗体确认阴性者的辅助诊断。
P24抗原的检测试剂敏感性低,不适合初筛实验室,除以上情况外,只能用于急症手术和流动献血站,而且即使此方法检测结果为阴性,也不能排除HI V 感染。
2.5 抗原抗体联合检测试剂,敏感性较第3代试剂又有提高,适用于大规模血源筛查,可以提高输血的安全性。
・743・中国生物制品学杂志2008年4月第21卷第4期 Chin J Biologicals April 2008,V ol.21 N o.4 表1 WH O 和UNAI DS 推荐的HIV 快速诊断试剂联合使用的策略目的流行率(%)策略 血液筛查任何情况下用一种快速试剂。
出现阳性反应时可被认为是HIV 阳性。
监测>10用一种快速试剂。
出现阳性反应时可被认为是HIV 阳性。
≤10用两种快速试剂。
如果第一次检测出阳性反应,则用第二种试剂重复检测,两种试剂检测结果均出现阳性反应时,可被认为是HIV 阳性。
诊断征兆/症状>30用一种快速试剂。
出现阳性反应时可被认为是HIV 阳性。
≤30用两种快速试剂。
如果第一次检测出阳性反应,则用第二种试剂重复检测,两种试剂检测结果均出现阳性反应时可被认为是HIV 阳性。
诊断征兆/症状>10用两种快速试剂。
如果第一次检测出阳性反应,则用第二种试剂重复检测,两种试剂检测结果均出现阳性反应时可被认为是HIV 阳性。
≤10用三种快速试剂。
三种试剂检测结果均出现阳性反应时可被认为是HIV 阳性。
2.6 PCR 技术检测HI V 核酸对AI DS 的诊断起着重要的作用。
但也有人认为,对已知HI V 抗体、抗原或培养阳性的病人不必再进行PCR 。