MP人类免疫缺陷病毒(HIV1+2型)抗体检测试剂盒(免疫印迹法)
人类免疫缺陷病毒(HIV12)抗体诊断试剂(胶体金法)
人类免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗体诊断试剂（胶体金法）Diagnostic kit for Antibody to Human lmmunode ficiency Virus （Colloidal Gold）[ 产品名称]通用名称：人类免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗体诊断试剂(胶体金法)英文名字：Diagnostic kit for Antibody to Human lmmunode ficiency Virus （Colloidal Gold）[包装规格] 单支/袋，25/盒；10支/袋，5袋/盒；25支/袋，8袋/盒。
[临床意义] 检测人血清或血浆中的HIV-1、HIV-2特异性抗体。
用于无偿献血的现场筛查，及临床术前的筛查。
[检验原理] 应用免疫层析式双抗原夹心法原理。
[主要组成成分] 由纯化的基因重组HIV-1和HIV-2区段抗原，免抗HIV抗体，固相硝酸纤维膜，胶体金标记的基因重组HIV-1和HIV-2区段抗原及其他试剂组成。
[储存条件及有效期] 4℃-30℃避光干燥处密封储存，切勿冰冻。
有效期24个月。
[样本要求] 采取静脉血1-2ml于干净容器中分离得到血清或血浆样本。
如不及时测试可置4℃冰箱贮存，超过3天应加入0.1%硫柳汞防腐，测试前注意恢复至室温。
不可使用冻干样本。
[使用方法]1、被检样本和测试卡等在室温平衡。
2、沿缺口撕开铝箔袋，取出测试卡。
3、将80微升血清或血浆样本（用吸管滴加2-3滴）加入测试卡加样孔，平置于温室，20分钟内观察显示结果。
[检验结果的解释]阳性：在检测区上、下两端先后出现反应线，即对照线（C）和检测线（T）。
阴性：仅测试区上端有一条反应线，下端无反应线出现。
无效：测试区上、下两端均无红色反应线出现或仅在检测去（T）出现一条红色反应线，表明实验失败或试剂失效。
请用新测试卡重试。
如果问题仍然存在，请停止使用本批产品，并于当地经销商联系。
[检验方法局限性]1、本品仅用于人血清或血浆样本中的HIV抗体检查，其检测结果必须结合其他对于医师有用的临床信息。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus HIV）是导致人类获得性免疫缺陷综合征（Acquired Immunodeficiency Syndrome AIDS）的病原体。
HIV通过血液传播、性传播和母婴传播三种途径在人群中流行和扩散。
1981年美国报道第一例艾滋病病例，至2009年年底，全球有存活的HIV感染者大约3330万例。
我国1985年报告第一例艾滋病传入病例，截止2009年12月，估计有存活的HIV感染者74万人。
HIV进入人体以后，感染和破坏人体的CD4+T淋巴细胞，快速复制繁殖，病毒数量迅速增加。
在感染的初期，病毒载量的水平很高，传染的危险大，急性期以后，病毒载量下降到相对稳定的定点（Set point）水平，在长达5～10年的临床潜伏期内，病毒载量和CD4+T淋巴细胞数量都保持相对稳定，这实际上是一种动态平衡，身体内每天有上亿个病毒被清除，也有相同数量的病毒产生，同样也有大约上亿个CD4+T淋巴细胞被破坏，有相同数量的细胞再生。
到了病程晚期，免疫细胞被耗竭，病毒大量复制，病毒载量升高，免疫功能崩溃，病人因发生各种机会性感染或肿瘤而死亡。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒是艾滋病防治的有力工具，广泛应用于献血员筛选、临床诊断和流行病学调查。
1985年3月美国FDA批准了第一种人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒，这是艾滋病防治进程中重要的里程碑、开启了科学防治艾滋病的时代。
一、人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus HIV）HIV在分类上属于逆转录病毒科、慢病毒属、灵长类慢病毒群。
病毒呈球形颗粒，被来自宿主细胞膜的脂质双层膜包裹，基因组结构大致是5’LTR，gag，pro，pol，env，3’LTR，5’端有帽状（cap）结构，3’端有多聚腺苷酸Poly (A) 序列，如果去掉Poly (A)，基因组全长9100bp。
人类免疫缺陷病毒(HIV 1+2)抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
人类免疫缺陷病毒（HIV 1+2）抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）说明书批准文号：国药准字S2*******本品系用HIV特异性抗原gp160和gp36等包被酶标反应板，用gp160和gp36标记辣根过氧化物酶，应用双抗原夹心法原理（ELISA）检测人血清或血浆中的HIV-1/HIV-2抗体。
【样本要求】人血清和血浆。
【使用方法】1、每次试验设阴性、阳性对照各两孔，分别加入阴性、阳性对照血清100μl，再设一孔空白对照，其余孔加入100μl被测样本，置37℃孵育30分钟。
弃去孔内样本，扣干。
2、用洗涤液注满每孔（至少300μl洗涤液/孔），勿溢出，静置5秒钟后扣干，重复5次。
3、每孔加酶结合物100μl（空白对照孔不加），置37℃孵育30分钟，同上法洗反应板5次。
4、每孔加显色剂A液、B液各50μl，轻轻振荡后，37℃避光静置15分钟。
5、每孔加入终止液50μl终止反应，以空白调零，在酶标仪中读取各孔OD450。
【结果判定】1、 实验设计要求阳性对照平均值大于1.20，阴性对照平均值小于0.10，阳性、阴性对照OD值之差应大于1.20，否则本次实验无效。
2、 若阴性对照读数小于0.05时，按0.05计算。
3、 临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.10。
4、 测试样本的计算值小于Cut off value则为HIV抗体阴性。
5、 测试样本的计算值等于或大于Cut off value则为HIV抗体阳性。
（注意：初试阳性标本应重新取样进行双孔复试，复试阳性者应按“全国艾滋病检测管理规范”送HIV确认实验室进行确认实验）。
【注意事项】1、 本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
2、 整个HIV检测必须符合《HIV实验管理规范和生物安全守则规定》，严格防止交叉感染。
操作时必须戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
3、 HIV抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。
人类免疫缺陷病毒抗体检测(乳胶法)
人类免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗体检测试剂盒（乳胶法）说明书【检测原理】人类免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗体检测盒（乳胶法）采用了高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析乳胶标记技术原理。
试剂上含有事先固定在膜上检测区（T）的重组HIV-1和HIV-2型抗原。
检测时，将样本滴入试剂的加样孔中，样本中的HIV-1，2型抗体与预包被在膜上的重组抗原--乳胶颗粒标记结合物反应，然后，混合物在毛细效应下向上层析，在检测区（T）与固定在膜上的重组HIV-1和HIV-2型抗原反应。
如果样本中含有HIV抗体，在检测区内（T）会出现红色条带，检测区内出现红色线条表明是阳性结果。
如果在检测区内（T）没有出现红色条带，则样本中不含有HIV抗体，表明的是阴性结果。
无论抗HIV抗体是否存在于样本中，混合物都会继续向上层析至质控区(C),出现一条红色的条带。
质控区内（c）所显示的红色条带是判定层析过程中是否正常的标准，同时也是检测试剂的内控标准。
【主要组成成份】本试剂主要原材料包括：包被用重组HIV1型、包被用重组HIV2型抗原、标记用重组HIV1型、标记用重组HIV2型抗原、链霉亲和素结合物、生物素、乳胶颗粒、硝酸纤维塑膜、聚酯纤维塑膜。
检测需要已提供的材料注意：不同批号试剂中各组份不可互相使用，以免产生错误结果。
检测时另需准备样本收集容器和计时器。
【样本要求】静脉采血后离心获得血清/血浆样本，不同的抗凝剂如柠檬酸钠，肝素钠，EDTA，草酸钠，枸橼酸钠的血浆标本均可。
在2—8℃条件下可保存一周，长期保存需-20℃冷冻，以避免反复冻融。
发臭、溶血等异常样本请勿使用。
【检验方法】在进行检验前必须先完整阅读使用说明书，并将试剂、样本、和缓冲液恢复至室温（20℃-30℃）。
1.从原包装铝箔袋中取出试剂。
2.将试剂放在干净的平台上，用一次性塑料管吸取1滴血清/血浆（25μl）于加样孔（S）中，随后加入1滴缓冲液（约40μl），开始计时。
艾滋病检测方法有什么
艾滋病检测方法有什么艾滋病这种传染病一般是通过血液啊，母乳啊或者是性传播的方式传染来的，得了这种疾病的患者一般是治愈率还是比较低的，那么我们从生活中是否也对这方面的疾病有所了解呢，多了解一些关于艾滋病的知识可以更好的进行了解，也可以减少疾病的发生，而艾滋病检测方法有什么呢，很多人都不知道，我们来了解一下啊。
一、酶联免疫吸附试验（ELISA）目前应用的ELISA法有8种之多。
它们的特异性和敏感性超过99%。
二、颗粒凝集法（PA）PA为快速、简便的一种筛选方法。
如属阳性，应经WB 证实。
PA不需任何特殊仪器，其结果用肉眼可判别。
全过程仅需5分钟。
缺点有假阳性，且价格昂贵。
三、快速试剂(一)人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法)雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)是用于体外，肉眼观察，定性的免疫分析，检测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体，用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。
本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用，本品检测阳性者，需进行进一步筛查确认。
(二)InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂InstantCHEKTM-HIV1+2是一种快速、简单、灵敏的检验方法，用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。
该方法适用于初筛检测，凡由该试剂测定为阳性者，需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。
四、HIV-抗体确认实验免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验（LIATEK HIVⅢ）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）。
国内常用的确认试验方法是WB。
(一_免疫印迹实验(westernblot，WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法，就HIV的病原学诊断而言，它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法，WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。
上面就是关于艾滋病检测方法了，是不是对大家都有所认识了呢，很多知识我们都是需要了解的，认识了这些我们就可以及时的预防，而且定期的去检查自己的身体，也是对自己的健康负责，有了好的身体才能有金钱和美好的生活。
CAP CTM HIV version 2.0试剂盒说明书
处理后的样品加入至扩增管(K-tubes)的扩增混合物中，进行逆转录和 PCR 扩增。经加热后退 火，下游引物与 HIV-1 靶 RNA 及 HIV-1 QS RNA 特异结合。在 Mn2＋及过量 dNTPs(包括 dATP、 dGTP、dCTP、dTTP 和 dUTP)存在条件下，Z05 延伸退火后的引物，形成与 RNA 靶互补的 DNA 链。 靶扩增
【临床意义】 人类免疫缺陷病毒(HIV)是获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的致病因子，主要通过性接触、血液 感染、血液制品感染或母婴传播2-4。病人一旦感染该病毒，HIV-1 RNA定量测定就成为疾病评 估和抗逆转录病毒疗法检测的关键工具。多个研究已经证实了高病毒水平和HIV相关疾病的临 床进展风险有正向关系，而血浆内病毒水平的降低可以减低这种风险5-7。抗逆转录病毒疗法中 病毒量监测的临床效用已经经多个临床药物试验确定8,-9。成功治疗的关键病毒端点包括一定 时间内的病毒量减少等级(log10单位)、在关键时间处于监测限值之下时患者表现出的病毒抑制 程度百分比和最后时刻的病毒学反应(抗性或非依附性)8,-9。在对该疗法有反应的患者中，已预 计到存在一种CD4细胞计数的增加与病毒抑制有关。该端点已被选入了所有主要的美国和全球 HIV治疗指导准则之中10-13。已建立起了特定的HIV-1 RNA水平医疗决策点以用于启用抗逆转 录病毒疗法、确定治疗反应度、病毒量监测频率以及决定病毒失败10-13。总之，HIV-1 RNA水 平定量监测依然是抗逆转录病毒反应最重要的替代标记物。 外周血液病毒水平可由血清内HIV p24抗原测定定量测出，或由血浆HIV定量培养得出，或使 用核酸扩增或信号放大技术直接对血浆中病毒RNA进行测定14-19。最初的病毒RNA定量测定使 用了针对PCR或核酸扩增反应的端点测量15,18。PCR终点检测阶段需在扩增后进行并且存在局 限，包括线性范围有限，耗费时间长19。实时目标扩增系统工具的引入使得扩增和检测可以同 时进行，有效改善了终点扩增的局限性17-19。实时PCR技术的优势在于增强了敏感度、线性范 围更宽以及由于反应时间缩短，从而减少了回转处理时间19。 最近，对HIV基因多样性认识的逐步提高凸显了进一步发展新一代实时扩增测试的重要性20。 为了突出突变逃逸的风险，使用了一种新的PCR设计(双目标方法)对HIV-1的两处目标区域进
人体免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法试剂厂家：检验原理：本产品系用纯化基因工程人类免疫缺陷病“1”型和“2”型（HIV-1/HIV-2）抗原包被的微孔板和酶标记的HIV-1/HIV-2抗原及其它试剂组成，应用双抗原夹心法原理检测人血清或血浆中的HIV-1/HIV-2抗体。
检验方法：1.加样：将预包被板条固定于板架。
每次检验设阴性对照3孔，抗-HIV-1阳性对照2孔，抗-HIV-2阳性对照2孔，分别加入阴性，阳性对照各50ul;设空白对照1孔，不加样品。
其余孔加入待测样品50ul.2.温育：置37±1℃温育60分钟。
3.洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置30-60秒，弃去孔内洗液。
重复洗6次后拍干。
4．加酶：空白对照孔不加酶标记物，其余孔加入酶标记物50ul.5.温育：置37±1℃温育30分钟。
6.洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置30-60秒，弃去孔内洗液。
重复洗6次后拍干。
7.显色：每孔加入底物缓冲液50ul,振荡混匀，置37±1℃温育30分钟。
8.终止：每孔加入终止液50ul，轻拍混匀。
9.读值“用酶标仪读值，在单波长450nm(须以空白对照孔校零)或双波长450nm/620nm-700nm下读取各孔A值。
参考值：1.试剂空白标准：试剂空白A值应﹤0.08（空白校零前）2.阴性对照标准：阴性对照A值应≤0.123.阳性对照标准：抗-HIV-1阳性对照A值应≥0.8抗-HIV-2阳性对照A值应≥0.8临界值（C.O.）计算：临界值（C.O.）=阴性对照平均A值+0.15备注：阴性对照平均A值小于0.08按0.08计算，大于0.08按实际值计算。
结果解释：样品A值≥临界值（C.O.）为HIV抗体阳性样品A值≤临界值（C.O.）为HIV抗体阴性备注：初次检验阳性者应重新取样进行双孔复试，如果复试中任何一孔为阳性样品视为HIV抗体阳性，对复试结果为阳性的样本请按《全国艾滋病检测技术规范》处理。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程
1、 检验申请单独检验项目申请：人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV （1+2）]测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ，不抗凝，置普通试管中，或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆，用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml 的全血标本，或少于0.1ml 的血清或血浆。
2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆，避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min ，离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间：室温（15-25℃）下可稳定48h ，普通冰箱中（2-8℃）稳定7d ，在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的标本。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4-8℃冰箱内保存7d 。
2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动。
医院检验科免疫室 体诊断试剂盒（酶联免疫法）标准操作规程 生效日期： 年 月 日版本：第1版第 页，共 页3．方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板，用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。
当待测标本中存在HIV 抗体时，该抗体和固化的抗原结合于反应板上，并进一步与酶结合物相结合，在TMB 底物参与反应的情况下，产生显色反应。
蛋白免疫印迹法(WB)试验结果与HIV感染关系的分析
蛋白免疫印迹法(WB)试验结果与HIV感染关系的分析【摘要】目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。
方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。
结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占1.6%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)3例,占5%;HIV-1型确认试验阳性2例,占3.3%。
结论蛋白免疫印迹法(WB)试验确定个体有无HIV感染以及HIV感染情况提供依据。
【Abstract】Objective Through to western blot assay observation of result of the test, confirm individual infect HIV and HIV infect the state.Methods Safe the positive serum and use western blot assay to confirm to cases of 60 persist-HIV positive for the first time.Results Being measured in the sample, HIV-1 types confirm testing 54 cases of positive,takes 90%.HIV-1 types confirms testing positive,and point outHIV-2 infect one positively,takes 1.6%.HIV-1 types confirm testing weak positive 3,takes 5% HIV-1 type confirm testing negative 2,take 3.3%.Conclusion Western Blot Assay test offers basis on confirm whether individuals have HIV is infected and HIV infect the state.【Key words】HIV infect;Western Blot Assay;Strip艾滋病(AIDS)是一种目前尚无有效治愈方法,病死率极高的传染病,它在全世界的广泛流行已经成为严重的公共卫生问题和社会问题。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒 说明书
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法）【药品名称】通用名：人类免疫缺陷病毒抗体诊断剂盒（胶体金法） 商品名：无英文名：Human Immunodeficiency Virus antibodies Diagnostic Kit 汉语拼音：REN LEI MIAN YI QUE XIAN BING DU KANG TI ZHEN DUAN SHI JI HE【使用目的】用于检测人血清或者血浆中的HIV(1+2)抗体 【试验原理】本试剂盒应用双抗原夹心胶体金免疫层析法检测血清/血浆中的HIV(1+2)抗体。
将通过基因工程技术制备的针对不同结合位点的两组HIV 重组抗原gp41、gp36分别用于标记和包被。
用纯化的兔抗gp41、gp36抗体作为质控线。
当样本通过层析作用在试纸条上迁移时，样本中如果含有HIV-1或HIV-2抗体，则在检测线区域将生成Ag-Ab-Ag-AU 复合物从而形成一条明显的红色线条。
无论样本中是否含有HIV 抗体，在质控线区域都将生成Ab-Ag-AU 复合物，从而形成另一条明显的红色线条。
【主要组成成分】 1）50人份/盒 1. 检测试纸条50个2. 说明书 1份 2）1人份/盒试剂条，稀释液，采血针，采血管，消毒棉球，说明书各一份。
【适用仪器】不需要任何仪器。
【标本要求】血清/血浆 【试验方法】1、试剂盒如从冰箱中取出后应平衡到室温后再从铝塑袋中取出检测卡，水平放置；2、向圆形加样孔中滴加待检样本；3、样本用量为50微升；4、在30分钟内读取椭圆形观察窗内结果 【对试验结果的解释】【该试验方法的局限性】本品仅适用于HIV （1+2）抗体的体外检测。
【产品性能指标】质控线区域的红色条带必须出现否则实验不成立。
【注意事项】 1、 全部检测工作必须符合生物安全守则规定，严格防止交叉感染。
2、 操作时须戴手套，穿工作衣，严格执行消毒隔离制度。
3、 使用前请检查本产品是否在有效期内，以及铝塑袋的密封状况； 4、 样本使用量多于200微升有可能导致溢出、流速缓慢、高背景、假阳性等结果；5、 如果样本过于粘稠有可能导致质控线暗淡甚至缺失；6、试纸条如从寒冷环境（冰箱）中取出后应平衡到室温后再使用；7、请使用新鲜的检测样本； 8、无论检测结果如何必须按照HIV 阳性污染物处理检测卡。
HIV抗体检测确证试验结果分析
HIV抗体检测确证试验结果分析马永娟;王红;周迪【摘要】目的:对本艾滋病确证实验室2007～2015年检测的我市507例HIV抗体待确证样品的WB试验的阳性、阴性、不确定结果分析,了解我市艾滋病流行现状HIV感染者人群分布,分析艾滋病病毒(-HIV)抗体不确定结果的特点提出更加合理的处理方法,对阴性结果分析查找造成筛查假阳性的原因.方法:对初筛阳性血清用双ELISA或ELISA和胶体金试验复检,任一复检试验阳性的血清再用WB试验确证,对确证试验结果不确定者进行随访复检.结果:507例样本经WB确证397份HIV-1抗体阳性,不确定45份,阴性65份.397例确证试验阳性标本经流行病学调查79.8％(317/397)是经男男性行为传播.45例WB不确定样本中要集中在孕产妇占33.3％(15/45)献血员占22.2％(10/45) VCT占20％ (9/45),在随访的25例被检测中有3例明确高危行为者随访4复检进展为WB确证阳性,其余均为阴性.在WB结果阴性的65的样本,采用ELISA+胶体金或双ELISA复检73.8％ (48/65)结果为一阴一阳,并且ELISA的S/CO值在1～6之间.结论:性接触传播尤其是男男性接触者(MSM)是我市报告HⅣ/AIDS的主要传播途径;不确定样品主要集中在孕妇及献血员及VCT人群多是非特异性免疫反应,在低流行人群尤其孕产妇HIV抗体不确定样本最终以阴性转归为主;胶体金和ELISA复检可排除大部分初筛假阳性,但两种复检试验均存在一定的假阳性,初筛实验室应严格进行质量控制选用敏感性和特异性高、质量稳定的试剂.【期刊名称】《黑龙江医药科学》【年(卷),期】2016(039)004【总页数】3页(P79-80,82)【关键词】HIV抗体;确证试验(WB);不确定;筛查试验假阳性【作者】马永娟;王红;周迪【作者单位】佳木斯市疾病预防控制中心,黑龙江佳木斯154002;佳木斯市疾病预防控制中心,黑龙江佳木斯154002;佳木斯市疾病预防控制中心,黑龙江佳木斯154002【正文语种】中文【中图分类】R512.91HIV抗体检测是诊断HIV感染及艾滋病病人(AIDS)的重要依据, HIV抗体检测的流程是对初筛试验呈阳性反应的样品需要进一步做复检试验和确证试验，复检试验应使用原有试剂和另外一种不同原理(或厂家)的试剂，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验[1]。
两种筛查HIV(1+2)抗体试验的性能比较
两种筛查HIV(1+2)抗体试验的性能比较李山;沈德才;李若林;徐明辉;李泰阶;劳小霞;秦雪;陈智平【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2009(016)002【摘要】近年来人类免疫缺陷病毒（HIV）感染率呈上升趋势，成为世界性的防治难题。
因此，在HIV抗体筛查实验室，确保采用高灵敏度的方法和试剂，对预防HIV的传播和控制艾滋病的流行具有重要意义。
本文对酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）和微粒子免疫测定法（microparticle enzyme immunoassay，MEIA）检测呈弱阳性反应的结果进行比对和偏差分析，以判断其检测的临床可接受性能，现报告如下。
【总页数】2页(P123-124)【作者】李山;沈德才;李若林;徐明辉;李泰阶;劳小霞;秦雪;陈智平【作者单位】广西医科大学第一附属医院临床医学实验部,广西医科大学检验系,广西,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院临床医学实验部,广西医科大学检验系,广西,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院临床医学实验部,广西医科大学检验系,广西,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院临床医学实验部,广西医科大学检验系,广西,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院临床医学实验部,广西医科大学检验系,广西,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院临床医学实验部,广西医科大学检验系,广西,南宁,530021;广西医科大学第一附属医院临床医学实验部,广西医科大学检验系,广西,南宁,530021;广西医科大学公共卫生学院,广西,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R446.61;R512.91【相关文献】1.抗-HIV抗体筛查与免疫印迹试验两种检测方法的对比研究 [J], 杨芬兰;穆廷杰;陈涛2.惠州市无偿献血者血液HBV,HCV,HIV(1+2型)核酸筛查汇集检测和单人份检测两种检测模式结果分析 [J], 万小春;钟展华;严凤好;曾演强;曾少丽;湛玉武3.HIV(1+2)抗体/P24抗原联合法与胶体硒法在临床检测HIV中的应用研究 [J], 杨晓亮;詹廷西;李青;张国珍4.HIV抗体筛查试验阳性而确证试验为阴性的艾滋病1例 [J], 曹汴川;黄喆;邹永胜;黄富礼;钟利;黄永茂5.ELISA两种方法检测献血者标本HIV(1+2)抗体比较 [J], 马贵明;朱芸芸;许勇;王云平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
雅培艾滋病检测试纸检测原理、方法、局限性
1、当感染者抗体水平低于产品测试纸灵敏度极限时（比如：早期血清转化样本）
2、当特殊HIV病毒变异株感染样本其抗体不怀此产品包被抗原起反应睦
3、当可能的个别特殊人样本造成的无反应性
4、样本处理不当造成检测误差时
对于阴性的结果，建议结合临床状况（比如：症状或高危因素）综合考虑。
c、等最少15分钟（最多60分钟）然后读取结果
雅培艾滋病检测试纸 检测结果
阴性:一条红线，没有感染HIV；
阳性:二条红线，感染了HIV；
无效:无红线，需要重新购买艾滋病检测试纸检测。因为试纸是通过血液渗透进行检测的，如果血液加的太少，或者血液浓度太高，无法让试纸渗透湿润，就会无效。
（3）对全血样品（静脉血）：
a、加50ul血
b、直至血液吸入样本垫然后加入1滴Chase缓冲液
c、等最少15分钟（最多60分钟）然后读取结果
（4）对全血样本（手指血）：
a、加50ul血于试纸反应垫中
b、直至血被试纸全部吸收后，然后加入1滴Chase缓冲液
注：对全血和血浆样品，必须使用EDTA抗凝管（吸管）
*末梢全血的采集：
在采集末梢血样品前，在清洁干燥处放一个EDTA毛细管
1、对成人和一岁以下的儿童可选择中指，无名指和食指（任何一个胼胝端）采集，用湿热毛巾或热水来温暖手增加血液循环。
2、用酒精洁手指，然后凉干。
3、手掌向上，将穿刺针置于指尖，紧靠手指并刺破皮肤，将穿刺针头丢弃于尖锐危险品容器里。
如果样品中不含有HIV-1/2抗体，硒胶体-抗原结合物将会通过病人窗口而不与固相包被的合成肽和重组抗原结合，则没有一条红线形成。
为了确保结果有效，在反应条中含有质控条带。
人类免疫缺陷病毒抗体检测(乳胶法)
人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测(乳胶法)【样本要求】静脉采血后离心获得血清、血浆样本，不同的抗凝剂如柠檬酸钠，肝素钠，EDTA，草酸钠，枸橼酸钠的血浆标本均可，在2-8℃条件下可保存一周，长期保存需-20C冷冻，应避免反复冻融，发臭、溶血等异常样本请勿使用。
【检验方法】在进行检测前必须先完整阅读使用说明书，并将试剂、样本和缓冲液恢复至室温(20℃-30℃)1.从原包装铝箔袋中取出试剂。
2.将试剂放在干净的平台上，用一次性塑料吸管吸取1滴血清、血(25 Ul)于加样孔(S)中，随后加入1滴缓冲液(的40ul)，开始计时。
3.等待红色条管的出现，检测结果应在15-20分钟判读，20分钟后判读结果无效【检验结果的解释】阳性(+)：两条红色条出现。
一条带位于检测区内(T)，另一条带位于质控区内(C)。
阴性(-)：仅质控区(C)出现一条红色条，在检测区内(T)无红色条带出现。
无效:质控区(C)未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。
在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂新检测。
如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系【检验方法的局限性】1.本试剂仅用于体外诊断2.本试仅用于检测人血清、直浆样本，用其它样本或溶液检测的结果可能有误。
3.本试剂为定性检测。
无法确定样本中HIV抗体的水平。
4.本试剂仅用于HIV抗体初筛检测，HIV抗体确认应遵循相关法规和标准在有资质的HIV确认实验室进行。
5.阳性结果须经相关确证方法的确认或经过国家法定的其他方式处理。
6.受分析灵敏度所限，阴性结果不能完全排除艾滋病毒感染的可能性，可能系样本中抗体浓度低于本产品的灵敏度所致，对于有怀疑的结果建议采用灵数度更高的其他类方法进行复核。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法试剂厂家：英科新创（厦门）科技有限公司本试剂盒采用抗原夹心两步法检测人血清或血浆中的HIV1/HIV2型抗体。
在微孔板预包被基因重组HIV（1+2）抗原，当加入的待检测样本中存在HIV抗体时，将反应形成抗原抗体复合物，再与加入的酶标记基因工程HIV（1+2）抗原反应，最后形成“固相HIV抗原-HIV抗体-酶标记HIV 抗原”的免疫，复合物，加入底物后形成显色反应。
标本要求；1采用血清或血浆样本，血浆样本可以使用常规用量的肝素，枸橼酸钠或者EDTA抗凝。
2样本不能用叠氮钠防腐，以免抑制酶的活性。
3样本保存在2-8C。
如需长期保存，需置-15-20C冻存，并避免样本反复冻融。
4高血脂，高胆红素及溶血样本可能会影响试验结果的准确性，建议不使用。
检验方法：1.平衡：将试剂合各组分从盒中取出，平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。
2配液：浓缩洗涤液配前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。
3.编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。
4.加样：按顺序分别在相应孔中加入50ul待测样本及阴.阳性对照。
5.温育：覆上封板膜，置37℃温育60分钟。
6.洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
7.加酶：分别在每孔中加酶标抗原30分钟。
8.温育：覆上封板膜，置37℃温育30分钟。
9.洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
10.显色：每孔加底物A，B和50ul,轻拍混匀，37℃暗置30分钟。
11.终止：每孔加入终止液50ul,混匀。
12测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时，需用空白对照孔调零），并记录结果。
结果判定；1.样本OD值S/CO≧1者为HIV抗体反应初筛阳性样本OD值<1者，为HIV抗体反应阴性。
MP人类免疫缺陷病毒（HIV1+2型）抗体检测试剂盒（免疫印迹法）
MP人类免疫缺陷病毒（HIV1+2型）抗体检测试剂盒（免疫印迹法）新加坡MP生物医学亚太有限公司生产的HIV-1+2抗体免疫印迹试剂(HIVBLOT 2．2)1)原理wB是将HIV蛋白经SDS-PAGE，由于蛋白分子大小不同而分离开来，然后再把这些已分离的不同蛋白带转移到硝化纤维膜上，以后用不同的方式，包括非常敏感的免疫酶法，检测HIV抗体。
每一条硝化纤维膜上均含有经电泳分离过的HIV抗原。
若有相应抗体就会与硝化纤维膜条上的抗原带相结合。
然后与抗人的IgG酶结合物反应。
在底物作用下，硝化纤维膜条带上呈现紫色，表示阳性反应。
2)基本检测程序(1)准备试剂：配制稀释洗涤液、印迹缓冲液、工作酶结合溶液。
(2)湿润膜条：用镊子从塑料管中小心取出所需的硝化纤维膜条，其中包括3条对照(强阳性、弱阳性、阴性对照各1条)，并且将有编号的膜面向上放入分析槽中，随后加人2 ml 已经稀释好的洗液，室温(22～28℃)振荡浸泡至少5 min，然后吸干槽内液体。
(3)加样：每槽中加入2 ml印迹缓冲液和20ul待检标本或对照血清(每个标本都需换新的移液头)。
(4)孵育：盖上盖子，室温振荡1 h(也可采用室温振荡16～18 h)。
(5)洗涤：小心打开盖子，吸干槽内液体，避免标本交叉污染。
加入2 ml已经稀释的洗涤液，室温浸泡振荡5 min，再吸干槽内液体。
如此反复洗涤3次。
(6)酶结合：加入2 ml工作酶结合溶液，盖上盖子，室温振荡1 h(如果在6步骤中采用室温振荡16～18 h的，则此步酶反应步骤中室温振荡30 min)。
(7)洗涤：吸干槽内液体，再洗涤3次。
(8)显色：加入2 ml底物溶液，室温振荡15 min。
(9)终止：吸干槽内液体，加入蒸馏水终止反应，反复3次，随后用镊子小心取出膜片于滤纸巾上，并开始读膜片结果。
(10)结果判定标准：每次实验须设立对照血清，如阳性对照必须全部条谱带均出现；弱阳性对照可以谱带不全，但必须够判定阳性的结果；阴性对照则无反应谱带。
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新加坡MP生物医学亚太有限公司生产的HIV-1+2抗体免疫印迹试剂(HIVBLOT 2．2)
1)原理wB是将HIV蛋白经SDS-PAGE，由于蛋白分子大小不同而分离开来，然后再把这些已分离的不同蛋白带转移到硝化纤维膜上，以后用不同的方式，包括非常敏感的免疫酶法，检测HIV抗体。
每一条硝化纤维膜上均含有经电泳分离过的HIV抗原。
若有相应抗体就会与硝化纤维膜条上的抗原带相结合。
然后与抗人的IgG酶结合物反应。
在底物作用下，硝化纤维膜条带上呈现紫色，表示阳性反应。
2)基本检测程序
(1)准备试剂：配制稀释洗涤液、印迹缓冲液、工作酶结合溶液。
(2)湿润膜条：用镊子从塑料管中小心取出所需的硝化纤维膜条，其中包括3条对照(强阳性、弱阳性、阴性对照各1条)，并且将有编号的膜面向上放入分析槽中，随后加人2 ml 已经稀释好的洗液，室温(22～28℃)振荡浸泡至少5 min，然后吸干槽内液体。
(3)加样：每槽中加入2 ml印迹缓冲液和20ul待检标本或对照血清(每个标本都需换新的移液头)。
(4)孵育：盖上盖子，室温振荡1 h(也可采用室温振荡16～18 h)。
(5)洗涤：小心打开盖子，吸干槽内液体，避免标本交叉污染。
加入2 ml已经稀释的洗涤液，室温浸泡振荡5 min，再吸干槽内液体。
如此反复洗涤3次。
(6)酶结合：加入2 ml工作酶结合溶液，盖上盖子，室温振荡1 h(如果在6步骤中采用室温振荡16～18 h的，则此步酶反应步骤中室温振荡30 min)。
(7)洗涤：吸干槽内液体，再洗涤3次。
(8)显色：加入2 ml底物溶液，室温振荡15 min。
(9)终止：吸干槽内液体，加入蒸馏水终止反应，反复3次，随后用镊子小心取出膜片于滤纸巾上，并开始读膜片结果。
(10)结果判定标准：每次实验须设立对照血清，如阳性对照必须全部条谱带均出现；弱阳性对照可以谱带不全，但必须够判定阳性的结果；阴性对照则无反应谱带。
如果对照血清的结果未出现正确的谱带，则此次实验无效，须重做。
同时，每条膜片上有一血清条带，此带未出现说明有可能漏加标本；那么此条带为无效实验，也须重做。
(11)结果判定：阴性标本，在膜片上不出现有颜色的谱带。
阳性血清标本可在膜上呈现水平的深紫色谱带。
小分子量蛋白谱带在膜片下端，高分子量的谱带在膜片上端。
谱带颜色的深浅与血清中HIV抗体的浓度呈正比。
典型的反应谱带可参照标准图谱判断(试剂盒中备有)。
中国疾病预防控制中心2004：年版的《全国艾滋病检测技术规范》WB检测的判定标准如下。
HIV-1抗体阳性：至少有2条env带(gp41和gpl60／gpl20)出现；
至少有1条env带和P24带同时出现。
HIV-1抗体阴性：无抗体特异带出现。
HIV-1抗体不确定：出现HIV特异性抗体带，但带型不足以确认阳性的。
上述标准为判读WB检测结果的基本原则，在实际工作中还应参照所用试剂的说明综合判断，遇疑难情况应报上级实验室解决。
如膜片上出现特异性HIV-2 gp36带，则须进一步用检测HIV-2抗体的WB药盒进一步检测。
HIV-2抗体血清学阳性：至少有2条env带(gp36和gpl40／gpl50)。
HIV-2抗体阴性和HIV-2抗体不确定的判断，类同于HIV-1的判断。