放线菌和霉菌形态的观察——显微图整理
细菌、酵母菌、霉菌和放线菌接种方法和形态观察
注意：由于实验内容较多，所以我们只要把蓝色字体部分写在实验报告上即可，黑体字部分自己看一下。
由于11-13周为教学质量检查周，督导随时可能来查，所以预习报告还是要写。
细菌、酵母菌、放线菌和真菌接种方法和形态观察一、微生物的接种技术1 目的1.1学习掌握微生物的几种接种技术1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节2 基本原理将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上的操作技术称为接种。
接种的关键是严格进行无菌操作。
常用的接种方法有斜面接种、液体接种、穿刺接种、平板接种和固体接种等。
3 实验材料3.1 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、玫瑰暗黄链球菌、曲霉、荨麻青霉的斜面培养物3.2 培养基：营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基及高氏1号培养基的斜面和平板3.3 试剂：5ml无菌生理盐水试管3.4 仪器与其他用品酒精灯、记号笔、试管、橡胶塞、试管架、接种环、培养皿、超净台等。
4 操作步骤4.1 斜面接种法斜面接种法主要用于传代活化、纯化培养、鉴定或保存菌种。
通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，液体培养基中的纯培养物接种到斜面培养基上。
操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行。
4.1.1准备工作将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在外侧，接种管在内侧，斜面向上管口对齐，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。
4.1.2接种环灭菌右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。
镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍。
4.1.3拔管塞和烧烤试管口用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。
4.1.4接种环冷却和取菌将灼烧灭菌的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养基上，待冷却后再从斜面上刮取少许菌苔取出。
实验三霉菌放线菌形态观察及微生物菌落观察
观察青霉菌 丝和分生孢 子着生情况：
1.单轮生青霉群；2.对称二轮 生青霉群；3.多轮生青霉群；4. 不对称生青霉群
担子菌担孢子的观察
切片标本的制作：现场演示
下次实验准备
每组两个平板，分别是马铃薯培养基（培养 真菌），另一个高氏培养基（培养放线菌）
实验室环境中微生物的检查 用棉签取实验室环境条件下的微生物进 行涂板。
一、实验目的
了解放线菌、霉菌、酵母菌和大型真菌的特点 并观察其形态特征
学习掌握霉菌染色的基本方法
二、实验原理
原核微生物
放线菌：
由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细 胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入 培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝） 和生长在培养基表面的气生菌丝。有些 气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波 浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆 形或杆状。气生菌丝及孢子的形状和颜 色常作为分类的重要依据。
真核微生物
酵母菌：酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或
柠檬形。酵母细胞核与细胞质有明显的分化，个体直 径比细菌大几倍到十几倍。繁殖方式也较复杂，无性 繁殖主要是出芽生殖，有些酵母能形成假菌丝。有性 繁殖是通过接合形成子囊及子囊孢子。
霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网
形丝状菌体的真菌，统称为霉菌。霉菌包括分类学上 许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻状菌纲、子 囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。
常见大型真菌：在分类上属于子囊菌纲和担子菌纲，
均为丝状真菌。
三、实验材料
放线菌和真菌培养物
1. 放线菌培养物：青色链霉菌四天插片培养物。 2. 啤酒酵母24至28h液体培养物。 3. 黑曲霉和根霉4d搭片培养物。 4. 各种真菌示范片。 5. 市售平菇
放线菌和霉菌的形态结构观察(共26张PPT)
、乳酸石
炭酸溶液
、载片及盖
片、显
微
示(一无)霉隔菌菌菌丝落、特假征根的、观匍察匐枝镜、孢、子囊接梗、种孢子环囊 、接种针、酒精灯、蒸馏水等。
实验内容（放线菌）
(一)菌落形态的观察
观察放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边缘，以及 有无色素分泌到培养基内等；
并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情 况。
并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。
(二)其他物品 (三)孢子形状的观察（印片染色法）
并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。 高倍镜(400×)下观察灰色链霉菌和淡紫灰链霉菌的孢子及孢子丝。
图2-100为根霉属的接合孢子
％美蓝染液 实 验 二
孢子囊破裂后能观察到囊托及囊轴。
灰色 链霉菌
印片法或 直接观察法
个体形态及生殖方式图
(三)描述产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的菌落 的颜色及特征
与培养
微生物 名称
大小
表面 形状
菌丝 颜色
孢子 颜色
菌丝 高矮
生长 密度
基 结合程
嗅 味
度
黑根霉
产黄青霉
黄曲霉
(四) 绘制产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的个体 形态及生殖方式图
微生物名称
菌丝结构（及分化结构）
无性孢子
黑根霉(糖化酶、 示无隔菌丝、假根、匍匐枝、
酿酒)
孢子囊梗、孢子囊
产黄青霉(青霉素 示有隔菌丝、分生孢子梗及其
)
分枝方式、小梗
黄曲霉(蛋白酶、ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ示有隔菌丝、足细胞、顶囊、
制酱油)
分生孢子梗及小梗
孢囊孢子 分生孢子 分生孢子
实验五放线菌、霉菌及真菌的形态观察
对实验结果的理解与思考
• 通过本次实验，我们观察到了放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 了解了它们在形态学上的差异。这些微生物在自然界中广泛分 布，对环境和生物体产生重要影响。例如，某些放线菌可以产 生抗生素，对人类医疗和农业具有重要意义；而某些霉菌可以 引起食品和物品的霉变，对人类生活造成困扰。因此，对微生 物形态学的深入了解有助于我们更好地认识和利用这些微生物 资源。
放线菌
放线菌是一种呈辐射状排列的细菌，其菌落形态通常为圆形或不规则形，表面粗糙、干燥 ，颜色多样。放线菌的细胞壁厚，呈革兰氏阳性。
霉菌
霉菌的菌落形态通常为绒毛状、絮状或蜘蛛网状，颜色多样，包括白色、灰色、褐色等。 霉菌的菌丝体非常发达，且具有分支。
真菌
真菌的形态多种多样，包括酵母、霉菌和大型真菌。真菌的菌落形态通常为圆形或椭圆形 ，表面光滑、湿润，颜色多样。真菌细胞壁薄，呈革兰氏阳性或阴性。
04 结果分析
放线菌形态分析
01
02
放线菌的形态多样，包 括链状、球状和杆状等。
放线菌的菌落形态也较 为多样，有的呈圆形， 有的呈不规则形状。
03
放线菌的菌落表面粗糙 或光滑，颜色各异，有 的呈白色，有的呈黄色 或橙色。
04
放线菌的细胞壁通常较 厚，具有分枝的菌丝， 有利于在各种环境中的 生存和繁殖。
03 实验步骤
样品采集与制备
样品采集
从不同环境（土壤、水体、空气 等）中采集放线菌、霉菌及真菌 的样本。
样品制备
将采集的样本进行分离、纯化， 制备成适合显微镜观察的样品。
显微镜观察
显微镜选择
选择适合观察放线菌、霉菌及真菌的 显微镜，如光学显微镜或电子显微镜 。
观察方法
将制备好的样品放置在显微镜下，观 察放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 如菌丝、孢子等。
放线菌和真菌形态的观察 PPT课件
• 觀察放線菌鏈黴菌的形態 • 觀察酵母菌的形態 • 觀察黴菌的形態 • 看錄象
實驗程式Ⅱ（觀察放線菌鏈黴菌的形態）
• 個體形態直接觀察法： 觀察菌絲和孢子絲自然生長的性狀，其中包括氣生 菌絲（較粗），基內菌絲（較細）和孢子絲的形狀， 如分枝狀況及孢子絲的捲曲等，並繪圖說明。
• 印片染色法： 印片 微熱固定 石炭酸複紅染色1min 水洗 晾乾 鏡檢。（示範片）
放線菌和真菌形態的 觀察
放線菌和真菌形態的觀察
• 目的要求 • 實驗材料 • 實驗程式 • 思考題
目的要求
• 學習觀察放線菌和真菌形態的基本方法 • 加深理解放線菌和真菌的形態特徵
實驗材料
• 放線菌和真菌培養物
1. 放線菌培養物：青色鏈黴菌（Streptomyces glaucus）或 “5406”產生菌（St. microflacus）四天培養物。
實驗程式Ⅲ（觀察放線菌鏈黴菌的形態）
• 插片染色法：
280C插片培養4—6d，輕輕 取出蓋玻片，進行固定、 染色、水洗、晾乾、鏡檢。 觀察方法同“直接觀察 法”，觀察基內菌絲、氣 生菌絲及孢子絲的捲曲狀 況，及分生孢子的形狀， 繪圖加以說明（本實驗採 用青色鏈黴菌接種後觀 察）。
實驗程式Ⅳ（觀察酵母菌的形態）
2. 啤酒酵母（Saccharomyces cervisiae）24至28h液體培養
物或斜面培養物。 3. 黃麯黴（Aspergillus flavus）4d平面培養物。 4. 各種真菌示範片。
• 顯微鏡、載玻片、接種環、解剖針、解剖刀、酒 精燈、鑷子等。
• 乳酚油、碘液、酒精、蒸餾水等。
實驗程式Ⅰ
實驗程式Ⅴ（觀察黴菌的形態）
• 觀察黃麴黴菌絲分隔情況和分生孢子著生情況（著重辨認分 生孢子梗、頂囊、小梗和分生孢子）：在潔淨載玻片中央加 一滴酒精，用接剖針挑取黃麯黴培養物少許放入其中，再加 入酒精和蒸餾水各一滴（重複一次），使分生孢子分散，便 於觀察。傾去酒精和蒸餾水，加一滴乳酚油（防止細胞變形 和氣泡產生，又可防止乾燥以保持較長時間），蓋上蓋玻片， 鏡檢、觀察、繪圖。
放线菌霉菌的形态观察及微生物的分离纯化PPT课件
二、实验原理: 采用适宜(选择)培养基和培养条件，或加入某种抑
制剂有利于目标微生物的生长，从而分离获得目标微 生物的纯培养：常用稀释平板分离法和划线分离法在 固体培养基上形成单个菌落
依据一个单细胞在固体培养基上培养后可以长成一菌 落从而推算样品中含有多少细菌或真菌的活菌数目
三、实验步骤：
从土壤中稀释分离微生物的方法如下：
⑵气生菌丝：又称二级菌丝体。营养菌丝体发育到一定时期，
长出培养基外并伸向空间的菌丝为气生菌丝。
⑶孢子丝：当气生菌丝体发育到一定程度，其上分化出可形成
孢子的菌丝即孢子丝，又名产孢丝或繁殖丝。
放线菌最突出的特性之一是产生大量的、种类繁多的抗生素 ，根据估计，全世界共发现4000多种抗生素，其中绝大部分是由
Please Criticize And Guide The Shortcomings
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
（六）检查结果
平板涂布
简单易行，但易 造成机械损伤
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败 也是伟大的，所以不要放弃，坚持 就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
放线菌、真菌形态观察及各类微生物菌落特征观察
粘质 沙雷 氏菌
细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与 培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。
放线菌特征
致密、坚硬、多皱、 不易用针挑起，不 Biblioteka 明。孢子成熟后， 表面粉末状，干燥。
酵母菌菌落特征
与细菌相似
比细菌大而厚， 不透明，表面光滑、 湿润、粘稠，易用 针挑起。多呈乳白 色。
青 霉 菌 落
2 实验原理
放线菌形态结构介于细菌与真菌之间，菌体 由无隔、分支状菌丝构成，可分为基内菌丝 和气生菌丝两类，基内菌丝伸入营养基质内； 气生菌丝位于营养基质上方。在发育过程中， 气生菌丝分化形成孢子丝，孢子丝产生孢子。 孢子丝形态因菌种不同而不同，有直线形、 波曲形、螺旋状等形态，而孢子一般有球形、 圆柱形、椭圆形等。
3 实验材料
啤酒酵母斜面菌种 （马铃薯斜面培养基培养24小时）
4 操作步骤
水浸片观察
（1） 在载玻片上滴加一滴碘液，用接种环以 无菌操作方式挑取少许啤酒酵母，在碘液中充分混 匀，盖上盖玻片。
（2） 镜检：先低倍镜观察，后换用高倍镜观 察细胞形态。
（3） 绘出酵母菌形态特征图
三 霉菌形态观察
实验四 放线菌、真菌形态观察 及各类微生物菌落特征观察
实验内容：
一 放线菌形态观察 二 酵母菌形态观察 三 霉菌形态观察 四 各类微生物菌落特征观察
一 放线菌形态观察
1 实验要求 2 实验原理 3 实验材料 4 实验步骤
1 实验要求
学习并掌握印片法制备标本片的方法 观察放线菌各部分菌丝特征 巩固显微镜油镜的使用 按要求绘放线菌的形态图
霉菌的菌落特征 比细菌菌落大，由菌丝组 成疏松的绒毛状、絮状或 蜘蛛网状，有的无固定大 小，延至整个培养基中， 产色素，使菌落显色。
实验二放线菌霉菌和酵母菌形态的观察ppt课件
实验二
放线菌、酵母菌、霉菌的形态观察和测量 一旦我单位在贵局承办的“海峡两岸渔业资源增殖放流活动”放流苗种招标中中标，我单位将严格按照招标方案的要求和合同的约定执行
一、实验目的
熟练使用显微镜、显微测微尺的工作原理和操 作要领；
通过观察和测量了解放线菌、酵母菌、霉菌细 胞的形态和大小
实验二 放线菌、酵母菌、霉菌的形态观察和测量
三、实验材料、仪器、试剂
仪器：光学显微镜〔Leica〕〔带测微尺〕 材料 永久装片〔注意生产厂家：放线菌、酵母菌、
根霉、青霉菌 4种未知真菌的新鲜培养物(PDA培养基中28℃
培养4d〕 试剂及其他 0.05%棉蓝乳酚油染色液 香伯油，擦镜液，镜头纸，镊子、载玻片、盖4
丝、基内菌丝，孢子丝〕。 霉菌：由菌丝体构成的真核微生物。不同种类
的霉菌可以通过子实体的形态来区分，此外特 化的营养菌丝也可以作为主要的区别特征。
3
实验一
一旦我单位在贵局承办的“海峡两岸 渔业资 源增殖 放流活 动”放 流苗种 招标中 中标， 我单位 将严格 按照招 标方案 的要求 和合同 的约定 执行
木霉 5. 真菌的活体染色原理及方法
21
根霉：菌丝、假根、匍匐枝，孢子囊及孢子 青霉：菌丝、分生孢子头、分生孢子 曲霉：菌丝、分生孢子头、分生孢子
活体真菌染色及观察
菌丝大小及是否有隔膜、子实体、分生孢子
5
一旦我单位在贵局承办的“海峡两岸 渔业资 源增殖 放流活 动”放 流苗种 招标中 中标， 我单位 将严格 按照招 标方案 的要求 和合同 的约定 执行
五、实验要求
实验要求 每位学生独立操作 选择适宜的放大倍数观察和测量三种类
微生物菌落特征形态总结大全(带图片)
菌落特征比较总结菌落特征比较：细菌：湿润，粘稠，易挑起放线菌：干燥,多皱，难挑起，菌落较小，多有色素酵母菌：湿润，粘稠，易挑起，表面光华，比细菌的菌落大而厚霉菌：菌丝细长,菌落疏松，成绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状，无固定大小,多有光泽，不易挑起细菌：一般形成较小的圆形菌落，颜色有白色、黄色等，表面光滑或不光滑放线菌：菌落背面有同心圆形纹路。
这点可以和细菌菌落区分.酵母菌:菌落为淡黄色，光滑，半透明，比细菌菌落大.霉菌：菌落大型,肉眼可见许多毛状物，棕色、青色等，可见黑色的分生孢子群.对于科学实践中鉴别微生物种类有重要意义。
金黄色葡萄球菌在BP琼脂上典型特征金黄色葡萄球菌呈圆形，表面光滑、凸起、湿润，直径2 ～3mm 。
灰黑色至黑色, 有光泽，常有浅色( 非白色) 的边缘，周围绕以不透明圈（沉淀），其外常有一清晰带( 卵磷脂环） .当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。
有时可见到不分解脂肪的菌株，除没有不透明圈和清晰带外，其他外观基本相同。
从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落，其黑色常较典型菌落浅些，且外观可能较粗糙, 质地较干燥。
微生物菌落形态图片金黄色葡萄球菌在海博金黄色葡萄球菌显色培养基上典型特征典型的金黄色葡萄球菌为灰黑色菌落，其外围有一不透明圈。
本培养基用于直接鉴定金黄色葡萄球菌，如果在18—24 小时没有出现典型菌落，需再培养18-24 小时。
有时金黄色葡萄球菌不显灰黑色，但其外围有一不透明圈。
金黄色葡萄球在甘露醇高盐琼脂培养基上典型特征典型特征:金黄色葡萄球菌显黄色，其外围有一黄色的晕环.大肠杆菌在海博大肠杆菌/大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色，大肠菌群为粉红色菌落，其它细菌为无色菌落。
大肠菌群显色培养基上典型特征大肠菌群在去氧胆酸盐琼脂典型菌落为红色, 菌落周围有红色的胆盐沉淀环.菌落直径为2—3mm 或更大。
（DC)上典型特征大肠菌群在结晶紫中性红琼典型菌落为紫红色, 菌落周围有红色的胆盐沉淀环.菌落直径为0。
放线菌和霉菌的形态观察
实验4 放线菌和霉菌的形态观察实验时间：20 18年4月18日星期三第789节实验地点：13- 1331. 实验目的学习并掌握观察放线菌形态的基本方法，并观察放线菌的形态特征学习并掌握观察四类常见霉菌形态的基本方法，并观察其形态特征2. 实验原理放线菌原理放线菌是由不同长短、纤细的菌丝所形成的单细胞的菌丝体。
菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝(或称基内菌丝，简称基丝)和生长在培养基以上的气生菌丝。
有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等，孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。
能否产生气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落形态特征为: 形成干燥、不透明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉”的菌落。
菌落与培养基连接紧密，难以挑取，菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平板上有变形的现象，有泥腥味。
霉菌原理霉菌是一类可产生菌丝体的真核微生物的统称。
霉菌的菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。
霉菌的菌丝体分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比放线菌粗的多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。
霉菌菌丝较粗大，细胞容易收缩变形，而且孢子很容易飞散、所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。
此染色液制成的霉菌标本片特点是: (a) 细胞不变形: (b)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间; (c) 溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。
霉菌的菌丝、分生孢子梗和分生孢子的形态常作为分类的重要依据。
3. 材料仪器1、菌种: 放线菌划线平板28C,3-5 天后培养物;产黄青霉，黑曲霉，黑根霉，等斜面或平板划线菌种28C培养2~3 天。
放线菌和霉菌的形态观察
实验四放线菌和霉菌的形态观察实验报告一．实验目的1.学习并掌握微生物的制片及简单染色的基本技术。
2.初步了解细菌﹑放线菌﹑酵母菌及霉菌的形态特征和相互区别。
3．巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
二．实验原理对个体较小的细菌进行制片时采取涂片法，通过涂抹使细胞个体在载玻片上均匀分布，避免菌体堆积面无法观察个体形态，通过加热固定使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上，这种加热处理还可以杀死大多数细菌面且不破坏细胞形态。
放线菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成，制片时不采取涂片法，以免破坏细胞及菌丝体形态。
通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。
在插片法中，首先将灭菌盖玻片插入接种有放线菌的平板，使放线菌沿盖玻片和培养基交接处生长面附着在盖玻片上，取出盖玻片可直接在显微镜下观察放线菌在自然生长状态下的形态特征，而且有利于对不同生长时期的放线菌形态进行观察。
在玻璃纸法中，采用的玻璃纸是一种透明的半透膜，将放线菌菌种接种在覆盖在固体培养基表面的玻璃纸上，水分及小分子营养物质可透过玻璃纸被菌体吸收利用，而菌丝不能穿过玻璃纸而与培养基分离，观察时只要揭下玻璃纸转移到载玻片上，即可镜检观察。
由于孢子丝形态，孢子排列及形状是放线菌重要的分类学指标，可采用印片法将放线菌菌落或菌苔表面的孢子丝印在载玻片上，经简单染色后观察。
单细胞的酵母菌个体是常见细菌的几倍甚至几十倍，大多数采取出芽方式进行无性繁殖，也可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖。
由于细胞个体大，采取涂片的方法制片有可能损伤细胞，一般通过美蓝染液水浸片法或水–碘液浸片法来观察酵母菌形态及出芽生殖方式。
同时，采用美蓝染液水浸片法还可以对酵母菌的死、活细胞进行鉴别。
美蓝对细胞无毒，其氧化型呈蓝色，还原型无色。
由于新陈代谢，活细胞胞内有较强还原能力，使美蓝由蓝色氧化型转变成无色的还原型，染色后活细胞呈无色。
死细胞或代谢能力微弱的衰老细胞胞内还原能力弱，染色后细胞呈蓝色或淡蓝色。
实验六+放线菌、霉菌形态的显微观察(张理珉)
子座：由菌丝集结 而成的、在其内部或 外部形成繁殖细胞的 褥座
典型例子：冬虫夏草
冬虫夏草
冬虫夏草，是麦角菌科真菌冬虫夏草感染寄 生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫，以其体内的有机物 质作为营养能量来源进行寄生生活，经过不 断生长发育和分化后，最终菌丝体扭结并形 成子座伸出寄主外壳，从而形成的一种特殊 的虫菌共生的生物体
①沸腾前勤搅拌，以免煮糊；
②沸腾后不要过分搅拌，以免搅碎马铃薯， 造成过滤困难，滤液不清；
③煮沸后注意把漂浮的泡沫去除。
察氏（Czapek）培养基配方：
此培养基主要用于霉菌培养，为合成培养基，是霉 菌形态学特征观察必须做的培养基之一。
NaNO3
2g
蔗糖
30g
K2HPO4
1g
琼脂
20g
KCl
0.5g
实验内容一
培养基和实验物品的准备
各组需要准备的培养基和实验物品
高氏1号固体平板培养基——1皿/组，全班共 计16皿，全班统一准备；
PDA固体平板培养基（3皿/组，20ml/皿）— —200ml，全班共计8组（一半准备）
察氏固体平板培养基（3皿/组，20ml/皿）— —200ml，全班共计8组（另一半准备）
3、可以非破坏连续观察相应结构的形成过 程（发育过程）。
目的要求
掌握观察放线菌形态的制片技术（扦 片法），并观察其基本形态特征
了解观察霉菌形态的制片技术（小培 养技术和三点点植技术），并用直接 制片观察其基本形态特征
实验内容
放线菌形态的观察（个体形态）—— 扦（插）片法 显微观察放线菌的三种菌丝形态特征
玻璃纸法：——透明的半透膜（醋酸纤维素）， 用于透析培养；
印片法：—— 盖玻片（需要加热）、透明胶带 （条），粘附作用。
微生物学实验10放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察
微生物学实验10放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察南京大学生物技术系实验报告题目放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察姓名年05 月24 日【一、实验目的】1、通过菌落及细胞形态的观察和比较，掌握区分细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的要点。
2、掌握观察放线菌孢子的方法。
3、掌握观察霉菌孢子及根霉假根的方法。
4、了解酵母菌子囊孢子形成的方法。
【二、实验原理】1、三类微生物菌落形态特征：霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌营养体的基本形态单位是菌丝，包括有隔菌丝和无隔菌丝。
营养菌丝分布在营养基质的内部，气生菌丝伸展到空气中。
营养菌丝体除基本结构以外，有的霉菌还有一些特化形态，例如假根、匍匐菌丝、吸器等。
霉菌的繁殖体不仅包括无性繁殖体，例如分生孢子，孢子囊等，包裹其内或附着其上的有各类无性孢子；还包括有性繁殖结构，例如子囊果，其内形成有性孢子。
在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
酵母菌是单细胞的真核微生物，细胞核和细胞质有明且分化，个体比细菌大得多。
酵母菌的形态通常有球状、卵园状、椭圆状、柱状或香肠状等多种。
酵母菌的无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子；酵母菌的有性繁殖形成子囊和子囊孢子。
酵母菌母细胞在一系列的芽殖后，如果长大的子细胞与母细胞并不分离，就会形成藕节状的假菌丝。
2、三点接种法与霉菌菌落形态的观察霉菌的菌落形态是分类鉴定的重要依据。
为便于观察，通常用接种针挑取极少量霉菌孢子点接于平板中央，使其形成单个菌落；或在平板上接三点，即在等边三角形的三个顶点上接种，经培养后同一菌种可形成三个重复的单菌落。
实验六 放线菌、霉菌形态观察
实验六放线菌、霉菌形态观察一、实验目的•学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法。
•初步了解放线菌和四类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理放线菌（原核微生物）：由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。
菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基以上的气生菌丝。
有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等。
孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。
气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。
培养和观察方法扦片法：在放线菌平板上扦上盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。
观察时直接取出盖玻片置于载玻片上镜检。
镜检：用镊子拔出盖玻片，擦去背面培养物，将有菌的一面朝上置于载玻片上，直接镜检。
宜用略暗光线观察，低倍镜—高倍镜；染色后观察效果更好。
玻璃纸法：将玻璃纸覆盖在平板表面，接种放线菌、培养，放线菌在玻璃纸上形成菌苔。
观察时取下玻璃纸固定在载玻片上镜检。
镜检：先在载玻片上滴一小滴水，取下玻璃纸，使菌面朝上，使玻璃纸平贴于载玻片上。
优点：可观察到放线菌自然生长状态下的特征，和不同生长期的形态。
注意:整过程勿触动菌面培养物。
印片法：将要观察的放线菌的菌落或菌苔直接印在载玻片上，经染色后观察。
•用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基一起切下，菌面朝上。
另取一载玻片，微热后，轻轻按压菌苔，固定，染色后镜检。
•主要用于观察孢子丝的形态，孢子的排列及其形状等，但形态特征可能有所改变。
霉菌（真核微生物）：霉菌是一类可产生复什分枝的菌丝体的真核微生物的统称。
分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比放线菌粗的多。
培养和观察方法载玻片法：将培养基薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在其间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
观察时直接将载玻片镜检。
玻璃纸法：与放线菌相似。
直接制片观察法：用解剖针挑取少量培养物置于预先滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。
实验5 放线菌和霉菌形态学观察
二、实验原理——放线菌
1.放线菌菌丝的类型？ 放线菌：能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革 兰氏阳性真细菌。紧贴培养物基表面或深入培 养基内生长的叫基内菌丝(简称基丝),基丝长到 一定程度能向空气中生长出气生菌丝(简称气 丝),并进一步分化产生孢子丝以及孢子. 放线菌菌丝无横隔，一个菌落就是一个菌体。 分化产生的各种形态的孢子丝是放线菌分类鉴 定的重要依据.
根霉
BW
青霉菌的帚状枝
二、实验原理——霉菌
5.透明剂及其作用：
透明剂即乳酸石炭酸溶液。由于霉菌的菌丝较粗大，孢子
容易飞散，如将菌体置于水中容易变形，故观察时不用水 浸片法制片，而将其置于乳酸石炭酸溶液中，使细胞不变 形，具有防腐作用,不易干燥,能保存较长时间；能防止孢子 飞散。 BW
三、实验器材
放线菌的菌落形态
质地: 致密、干燥、多皱、小 而不蔓延、不挑起，表面有放 射状沟纹。 形状：随菌种不同可有两类： (1)产生大量分枝状菌丝的菌种： 如Streptomyces)形成与培养基 结合较紧的 菌落，不易挑起或 整个挑起。
(2)不产生大量菌丝的菌种： 如Nocardia形成的菌落呈粉质， 挑之易碎 BW
二、实验原理——放线菌的繁殖
放线菌的繁殖
放线菌孢子丝的形态特点？
分生孢子 孢子囊孢子
无性孢子（主要）
菌丝片段
BW
横隔分裂
缩缢分裂
二、实验原理——放线菌的繁殖
放线菌孢子丝的形态多样BW
孢子形态及其特点
BW
二、实验原理——霉菌
3. 霉菌菌丝有何特点？ • 霉菌是丝状真菌的俗称，意即“发霉的真菌”。 • 构成霉菌营养体的基本单位是菌丝，即管状细丝，很像一根透明胶管。 菌丝可伸长并产生分枝，许多分枝的菌丝相互交织在一起，就叫菌丝体。 • 根据菌丝中是否存在隔膜分成：无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。 • 无隔膜菌丝类似放线菌。整团菌丝体就是一个多核单细胞。低等真菌