第13章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析..
合集下载
13莨菪烷类抗胆碱药物分析.pptx
展开，晾干，喷以稀碘化铋钾试液-碘化钾
碘试液（1∶1）。供试品溶液所显主斑点位
置和颜色，应与对照品溶液的主斑点相同。
六、硫酸盐和溴化物的反应 氢溴酸盐：
1）硝酸酸性条件下与硝酸银生成淡黄色沉淀。 2）滴加氯试液，溴即游离，可被氯仿萃取，显
黄色或红棕色。
第三节 特殊杂质与检查
氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
莨菪醇
莨菪酸
2. 碱性 五元脂环含有叔胺氮原子。
3. 旋光性 阿托品外消旋化，无旋光性。氢溴酸东
莨菪碱为左旋体。
4.紫外吸收
第二节 鉴别反应
1 托烷生物碱的鉴别反应（Vitali反应）
鉴别 反应
2 与硫酸-重铬酸钾的反应 3 与生物碱显色剂和沉淀剂的反应 4 光谱鉴别法
5 色谱法
6 盐的反应
第二节 鉴别反应
第三节 特殊杂质与检查
酸度
强酸弱碱盐：取本品0.50g ，加水10ml溶解后，依法测 定（附录Ⅵ H），pH值应 为4.0～5.5。
阿扑东莨菪碱、其他 含有不饱和双键的有 机物质
氢溴酸东莨菪碱 中特殊杂质检查
－阿扑阿托品、颠茄碱
取本品0.15g,加水 易氧 5ml溶解后，在15～ 化物
20℃加高锰酸钾滴定
(BH+·In-)水相
有色离子对
(BH+·In-)有机相
UV
第四节 含量测定
• 1.离子对 2.染料空白（对照品平行测定，空白吸收可被 扣除） 3.阿托品（水溶液在420nm附近无吸收）
第四节 含量测定
酸性染料的选择及 其浓度
B
水相最佳pH值 A
的选择
酸性染料比 色法的影响
因素
C 有机试剂的选择
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
第三节 特殊杂质与检查
(一）氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取
酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐
氢溴酸东莨菪碱（粗品）75% C2H5OH/精制 成品
根据其制备工艺，本 品可通过酸度、其它 生物碱、和易氧化物
质检查进行控制
1. 酸度 东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。
氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过其5%水溶
液的pH值为4.0～5.5，来控制本品中的酸性杂质。
2. 其他生物碱 本品水溶液+氨试液
不混浊 合格 混浊 存在其他生物碱
+KOH试液
混浊（东莨菪碱） 瞬间消失
3. 易氧化物 主要是检查本品在生产中可能引入的阿扑阿托品及 其它含有双键的有机物质，可使KMnO4溶液褪色。
（二）硫酸阿托品中有关物质的检查
硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左 旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查
ChP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积 的比值及保留时间来控制杂质限度
第四节 含量测定
莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂 量较少，因此测定方法要专属、灵敏:
酸性染料 比色法
B C D E
E D A C
例题： 氢溴酸东莨菪碱中其他生物碱的检查方 法是（BE） （多选题）
A．水溶液加入氨试液产生浑浊 B．水溶液加入氨试液不得发生浑浊 C．加入氢氧化钾试液则有浑浊 D．加氢氧化钾试液无浑浊 E．加氢氧化钾试液数滴，只发生瞬即消失的 类白色浑浊
酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可 稍过量
第十三章莨菪烷类抗胆碱药物分析精品PPT课件
例1 置水浴上蒸干，得黄色残渣，放冷，加乙醇2~3滴湿润，加
固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。
第二节 鉴别反应
二、与硫酸-重铬酸钾的反应
O H
C H 2
C H O
H O O C H 2 O H O O C 2 O 2 + 2 C O 2 ↑ H 2 O H 2 S O 4
三、与生物碱显色剂和沉淀剂的反应
阿托品＋氯化汞醇试液→黄色沉淀
东莨菪碱＋氯化汞醇→白色复盐沉淀
第二节 鉴别反应（例2）
取本品约10mg，加 水1ml溶解后，置分
液漏斗中
即生成白色沉淀（与 阿托品及后马托品的
区别）
氢溴酸东莨 菪碱的鉴别
加氨试液使成碱性后 ，加三氯甲烷5ml，
摇匀
分取三氯甲烷液，置 水浴上蒸干，残渣中 加二氯化汞的乙醇溶
棕色或棕褐色沉淀
碘化汞钾试液(Mayen试剂)
在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄 色沉淀
三硝基苯酚试液（Hager试剂或苦味 酸试液）
结晶性沉淀并有特定熔点
硅钨酸试液（Bertrend试剂）
白色、淡黄色或黄棕色沉淀
磷钨酸试液（Scheibler试剂）
酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀
第二节 鉴别反应
四、光谱鉴别法
O
樟柳碱
( Anisodine ）
H3CBiblioteka + NCH3
O
H
OH
H
Br-
O
*
O
甲溴东莨菪碱
( Methscopolamin Bromide ）
第一节 莨菪烷类药物的结构和性质
（二）主要化学性质 1. 水解性 阿托品和东莨菪碱分子结构中，具有酯的结构，易水解。以
固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。
第二节 鉴别反应
二、与硫酸-重铬酸钾的反应
O H
C H 2
C H O
H O O C H 2 O H O O C 2 O 2 + 2 C O 2 ↑ H 2 O H 2 S O 4
三、与生物碱显色剂和沉淀剂的反应
阿托品＋氯化汞醇试液→黄色沉淀
东莨菪碱＋氯化汞醇→白色复盐沉淀
第二节 鉴别反应（例2）
取本品约10mg，加 水1ml溶解后，置分
液漏斗中
即生成白色沉淀（与 阿托品及后马托品的
区别）
氢溴酸东莨 菪碱的鉴别
加氨试液使成碱性后 ，加三氯甲烷5ml，
摇匀
分取三氯甲烷液，置 水浴上蒸干，残渣中 加二氯化汞的乙醇溶
棕色或棕褐色沉淀
碘化汞钾试液(Mayen试剂)
在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄 色沉淀
三硝基苯酚试液（Hager试剂或苦味 酸试液）
结晶性沉淀并有特定熔点
硅钨酸试液（Bertrend试剂）
白色、淡黄色或黄棕色沉淀
磷钨酸试液（Scheibler试剂）
酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀
第二节 鉴别反应
四、光谱鉴别法
O
樟柳碱
( Anisodine ）
H3CBiblioteka + NCH3
O
H
OH
H
Br-
O
*
O
甲溴东莨菪碱
( Methscopolamin Bromide ）
第一节 莨菪烷类药物的结构和性质
（二）主要化学性质 1. 水解性 阿托品和东莨菪碱分子结构中，具有酯的结构，易水解。以
南医大药物分析第13章__莨菪烷类抗胆碱药物的分析2
C、加入氢氧化钾试液则有浑浊
D、加氢氧化钾试液无浑浊
E、加氢氧化钾试液数滴，只发生瞬即消失的类白色浑浊
练习与思考
8、ChP2010硫酸阿托品含量测定：取本品约0.5g，精 密称定，加冰醋酸与醋酐各10mL溶解后，加结晶紫指示 液1-2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定至溶液显纯
第十三章莨菪烷类抗胆碱药 物的分析
药物分析
教学目的与要求 掌握莨菪烷类抗胆碱药物的鉴别试验和含 量测定方法。 熟悉莨菪烷类抗胆碱药物的基本结构和主 要性质。
了解莨菪烷类抗胆碱药物的杂质检查。
莨菪烷类抗胆碱药物的分析 结构
莨菪烷衍 生的氨基 醇
酯+生物碱 莨菪烷类 抗胆碱药 物
与各种不同 有机酸缩合
OH
N
H OH
+
HOOC
阿托品
莨菪醇
莨菪酸
2.碱性 与生物碱沉淀剂产生有色沉淀
阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子， 较强的碱性，易与酸成盐，如阿托品pKb1为4.35.
二、主要性质
二、鉴别试验
一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)
托烷生物碱类的特征反应，鉴别阿托品和莨菪碱类
CHP用HPLC法检查其中有关物质， 通过峰面积的比值及保留时间来控 制杂质限度
第四节 含量测定
莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较 强、临床使用剂量较少，因此测 定方法要专属、灵敏:
非水溶液 滴定法
酸性染料 比色法
高效液相 色谱法
第四节 含量测定
酸性染料 比色法
+
在一定的pH条件下，某些生物碱 药物可与某些酸性染料结合而呈色， 进而可用分光光度法进行测量
莨菪烷类抗胆碱药物分析
CHO
2O2
+2CO2↑＋H2O
三、与生物碱显色剂和沉淀剂的反应
阿托品＋氯化汞醇试液→黄色沉淀 东莨菪碱＋氯化汞醇→白色复盐沉淀
ChP2015氢溴酸东莨菪碱的鉴别：
取本品约10mg，加水1ml溶解后，置分液漏斗中 加氨试液使成碱性后，加三氯甲烷5ml，摇匀 分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣中加二氯化汞 的乙醇溶液1.5ml 即生成白色沉淀（与阿托品及后马托品的区别）
表13-2 常用的生物碱沉淀试剂及反应 Tab. 13-2 The precipitation reagents and reaction for testing alkaloids
生物碱沉淀试剂
反应条件及结果
碘化铋钾试液（Dragendorff试剂）
橙红或棕红色沉淀
碘化钾碘试液(Wagnen试剂)
阿托品、莨菪碱等托烷类生物碱水解后生成莨 菪酸，均可发生Vitali反应
与发烟硝酸共热，得到黄色三硝基衍生物，放 冷，加醇制氢氧化钾少许，即脱羧
生成具有共轭结构的阴离子而显深紫色
COOH
CHCH2OH O2N
3HNO3
COOH
CHCH2OH NO2 O2N KOH C2H5OH
COOH
CCH2OH
第三节 有关物质与检查
一 氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查
氢溴酸东莨菪碱来源：茄科植物颠茄、白曼陀罗、莨菪中等提取
（我国，白曼陀罗的干燥品：洋金花中提取东莨菪碱，制成氢溴酸盐）
制备方法：
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取
酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐
第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析
第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物是一类常用于治疗运动障碍、遗尿症和胃肠道疾病的药物。
这类药物的主要作用机制是通过抑制胆碱能神经传递，从而减少相应器官的运动和分泌功能。
在药物分析中，对莨菪烷类抗胆碱药物的分析主要包括药物含量分析、质量控制和研究药物的降解产物等方面。
本章将对这些方面进行详细介绍。
1.药物含量分析药物含量分析是对莨菪烷类抗胆碱药物配方中所含药物的含量进行定量分析。
常用的分析方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和红外光谱法等。
其中HPLC是最常用的分析方法之一、在HPLC分析中，可以使用反相HPLC进行分离和定量，通过选择合适的色谱柱和流动相条件，可以得到高灵敏度和准确性。
2.质量控制质量控制是对莨菪烷类抗胆碱药物产品质量的评估和监控。
通过质量控制可以确保生产的药物产品是符合药典标准的。
常用的质量控制方法包括对药物外观、理化性质、含量、纯度等进行测试。
其中，对药物含量的测试是最基本的质量控制测试之一3.降解产物的研究药物在储存和使用过程中，可能会遭受环境条件的影响而发生降解。
研究药物的降解产物，有助于了解药物在不同条件下的稳定性，并指导药物的储存和使用。
常用的降解产物研究方法包括质谱分析和核磁共振谱分析等。
4.生物等效性评价莨菪烷类抗胆碱药物是通过抑制胆碱能神经传递来发挥作用的，其生物利用度和药物代谢动力学对药物疗效有重要影响。
生物等效性评价可以通过动物实验和人体临床试验来进行。
动物实验可以用于评估药物的生物利用度和代谢动力学，并指导药物剂量的确定。
而临床试验则可以进一步确认药物的疗效和安全性。
总结起来，莨菪烷类抗胆碱药物的分析主要包括药物含量分析、质量控制、药物降解产物研究和生物等效性评价等方面。
这些分析方法可以帮助确认药物的质量和安全性，并促进药物的研发和临床应用。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
3、其他生物碱 原理：氢溴酸东莨菪碱水溶液加入氨试液不发生混浊，
而当有其他生物碱（如阿扑阿托品、颠茄碱存在
时），加入氨试液则会产生混浊
检查方法:取本品0.10g加水2m1溶解后，分 成两等份:一份中加氨试液2～3滴，不得发生 浑浊;另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发 生瞬即消失的类白色浑浊。
二、硫酸阿托品中莨菪碱和有关物质的检查 1、莨菪碱的检查 原理：利用药物主成分和杂质旋光性的差异 主成分：消旋体；杂质：左旋体 2、有关物质的检查 HPLC法 离子对色谱；不加校正因子的主成分自身 对照法
离子对试剂的浓度大约为：3 ~ 10 mmol/L
示例： 氢溴酸东莨菪碱原料、片剂、注射剂
75% C2H5OH/精制
成品
1、酸度
东莨菪碱的碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱 性反应 控 制 氢 溴 酸 东 莨 菪 碱 的 5% 水 溶 液 的 pH 值 在 4.0～5.5之间，来控制药品中的酸性杂质
强酸弱碱
2、易氧化物 杂质：阿扑阿托品 含有不饱和双键的有机物质 原理：杂质会使高锰酸钾溶液褪色（ChP） 紫外法（BP2003） 检查方法（ChP） :取本品0.15g加水5 m1溶解 后 ， 在 15 ～ 20℃ 下 加 高 锰 酸 钾 滴 定 液 (0.O2mo1/L) 0.05ml，lOmin内红色不得完全消 失。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱
药物的分析
第一节 莨菪烷类药物的结构和性质 一、典型药物 莨菪烷类药物是从茄科植物中提取的生物 碱， 由莨菪烷衍生的氨基醇和不同有机酸 缩合成酯。
典型药物为（表13-1）：
硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱
二、主要化学性质 1、水解性：含有酯结构，易水解
CH3 N
CH3 H OH N
13-莨菪烷类抗胆碱药物分析
CCH2OH NO2 O2N KOH
脱羧
CHOOHCCH2OH源自NO2NO2NN
HO
O
醌式
KO
O
氢溴酸山莨菪碱的鉴别 取本品约10mg，加发烟硝酸 例1 5滴，置水浴上蒸干，得黄色残渣，放冷，加乙醇
2~3滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。 10
第二节 鉴别反应
二、与硫酸-重铬酸钾的反应
O H H O O C
12
第二节 鉴别反应
四、光谱鉴别法
UV
ChP：丁溴东莨菪碱
IR
绝大多数生物碱原料药都 采用IR法鉴别
13
五、色谱法
Ch.P氢溴酸山莨菪碱注射液TLC鉴别：取
本品1ml，置水浴上蒸干。取残渣与消旋山
莨菪碱对照品，分别加甲醇制成10mg /ml的
溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶
例4
液各10µl，分别点于同一氧化铝薄层板上， 以三氯甲烷-无水乙醇（95∶5）为展开剂，
精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置 预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加 溴甲酚绿溶液4ml，振摇提取后，静置使分层；分 取三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法，在 420nm波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与 1.027相乘，即得。 1.027：(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O与无水硫酸阿托 品的分子量换算系数。
16
第三节 特殊杂质与检查
酸度
强酸弱碱盐：取本品0.50g ，加水10ml溶解后，依法测 定（附录Ⅵ H），pH值应 为4.0～5.5。
阿扑东莨菪碱、其他 含有不饱和双键的有 机物质
氢溴酸东莨菪碱 中特殊杂质检查
－阿扑阿托品、颠茄碱
取本品0.15g,加水 易氧 5ml溶解后，在15～ 化物
脱羧
CHOOHCCH2OH源自NO2NO2NN
HO
O
醌式
KO
O
氢溴酸山莨菪碱的鉴别 取本品约10mg，加发烟硝酸 例1 5滴，置水浴上蒸干，得黄色残渣，放冷，加乙醇
2~3滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。 10
第二节 鉴别反应
二、与硫酸-重铬酸钾的反应
O H H O O C
12
第二节 鉴别反应
四、光谱鉴别法
UV
ChP：丁溴东莨菪碱
IR
绝大多数生物碱原料药都 采用IR法鉴别
13
五、色谱法
Ch.P氢溴酸山莨菪碱注射液TLC鉴别：取
本品1ml，置水浴上蒸干。取残渣与消旋山
莨菪碱对照品，分别加甲醇制成10mg /ml的
溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶
例4
液各10µl，分别点于同一氧化铝薄层板上， 以三氯甲烷-无水乙醇（95∶5）为展开剂，
精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置 预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加 溴甲酚绿溶液4ml，振摇提取后，静置使分层；分 取三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法，在 420nm波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与 1.027相乘，即得。 1.027：(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O与无水硫酸阿托 品的分子量换算系数。
16
第三节 特殊杂质与检查
酸度
强酸弱碱盐：取本品0.50g ，加水10ml溶解后，依法测 定（附录Ⅵ H），pH值应 为4.0～5.5。
阿扑东莨菪碱、其他 含有不饱和双键的有 机物质
氢溴酸东莨菪碱 中特殊杂质检查
－阿扑阿托品、颠茄碱
取本品0.15g,加水 易氧 5ml溶解后，在15～ 化物
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
中国药典中托烷类药物采用溴甲酚绿作酸性染料。
酸性染料的浓度对测定结果影响不大，只要足够量即可。
Company Logo
2 、影响因素
（3） 有机溶剂的种类
常用的有机溶剂有：CHCl3、CH2Cl2、苯、甲苯等 苯、甲苯毒性大，污染环境
Company Logo
2 、影响因素
（4） 水分
如果水分进入有机层，可引入有色的酸性染料，影响比
如果水相pH值过高，则生物碱几乎全部以游离碱的形式
存在，离子对浓度减小，有机溶剂萃取的不是离子对，而是 生物碱本身。 故应选择一个水相的最适pH值。
Company Logo
2 、影响因素
（2） 酸性染料及其浓度
常用：溴甲酚绿(BCG)、溴麝香草酚蓝（BTB）、溴甲酚紫 （BCP）、溴酚兰(BPB)、甲基橙等。
庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠，还有高氯酸、磷酸、十二烷基 硫酸钠等 分析酸性物质时：季铵盐阳离子对试剂，如四丁基溴化铵、 四丁基氢氧化铵等
注意：
流动相水相由具有适宜pH值的缓冲溶液所构成，同时含有 3～10mmol/L适宜的离子对试剂
Company Logo
O
硫酸莨菪碱
左旋体
Company Logo
HO
N H3 C H
O
H O
OH HBr
氢溴酸山氢溴酸东莨菪碱
Company Logo
O H3C H 3C H N O H O OH Br
甲溴酸东莨菪碱
OH N H3C H O O HBr
氢溴酸后马托品
第十三章
莨菪烷类抗胆碱药物的分析
Company Logo
第一节 结构与性质
莨菪烷(Tropane) 莨菪醇(Tropine)
第13章莨菪烷类抗胆碱药物的分析2003
1.用溶剂提取后非水溶液滴定法测 定硫酸奎宁片的含量时， 1mol 硫酸奎
宁消耗高氯酸的摩尔数是
2.非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原 料药的含量时， 1mol 硫酸奎宁消耗高
氯酸的摩尔数是
A. 0.5 B. 1 C. 2 D. 3 E. 4
能在稀硫酸溶液中显蓝色荧光的喹
啉类药物是 A. 硫酸奎宁
B. 磷酸氯喹
氢溴酸后马 IR, Br-, HPLC 托品 丁溴东莨菪 UV, IR, Vitaili, Br碱
有关物质： HPLC 有关物质： HPLC
原料：非水
原料：硝酸银滴定； 制剂： HPLC
C. 磷酸哌喹 D. 磷酸咯萘啶
E. 二盐酸奎宁
硫酸奎宁的检查项目是
A. 其它金鸡纳碱 B. 三氯甲烷－乙醇不溶物
C. 乙醇不溶物
D. 酸度 E. 酸中不溶物
青蒿素类药物的主药鉴别试验是
A. 碘化钾－淀粉反应 B. 羟肟酸铁反应
C. 香草醛硫酸反应
D. IR E. UV
某供试品水溶液中滴加溴试液与氨
含量测定
非水溶液滴定法 原料药
(1) HClO 4直接滴定时，药物和HClO4的摩尔比？ HClO 4直接滴定时，反应摩尔比为 1∶1
CH3 N
H2SO4 H2O
O CO CH CH2OH 2
含量测定
（2）加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后
滴定
硫酸阿托品 一元碱不能滴定
（3）加入碱游离后，再用高氯酸滴定 硫酸阿托品 反应摩尔比为1∶2
小结
药物 鉴别 杂质检查 莨菪碱：旋光 度；有关物质 HPLC 其它生物碱、 有关物质、易 氧化物 其它生物碱： TLC 含测 原料：非水；制剂： 酸性染料比色 原料：HPLC；制剂： HPLC 原料：非水；制剂： 酸性染料比色 硫酸阿托品 Vitaili, IR, SO42氢溴酸东莨 Vitaili, HgCl2, IR, Br菪碱 氢溴酸山莨 Br-, IR, Vitaili 菪碱
宁消耗高氯酸的摩尔数是
2.非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原 料药的含量时， 1mol 硫酸奎宁消耗高
氯酸的摩尔数是
A. 0.5 B. 1 C. 2 D. 3 E. 4
能在稀硫酸溶液中显蓝色荧光的喹
啉类药物是 A. 硫酸奎宁
B. 磷酸氯喹
氢溴酸后马 IR, Br-, HPLC 托品 丁溴东莨菪 UV, IR, Vitaili, Br碱
有关物质： HPLC 有关物质： HPLC
原料：非水
原料：硝酸银滴定； 制剂： HPLC
C. 磷酸哌喹 D. 磷酸咯萘啶
E. 二盐酸奎宁
硫酸奎宁的检查项目是
A. 其它金鸡纳碱 B. 三氯甲烷－乙醇不溶物
C. 乙醇不溶物
D. 酸度 E. 酸中不溶物
青蒿素类药物的主药鉴别试验是
A. 碘化钾－淀粉反应 B. 羟肟酸铁反应
C. 香草醛硫酸反应
D. IR E. UV
某供试品水溶液中滴加溴试液与氨
含量测定
非水溶液滴定法 原料药
(1) HClO 4直接滴定时，药物和HClO4的摩尔比？ HClO 4直接滴定时，反应摩尔比为 1∶1
CH3 N
H2SO4 H2O
O CO CH CH2OH 2
含量测定
（2）加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后
滴定
硫酸阿托品 一元碱不能滴定
（3）加入碱游离后，再用高氯酸滴定 硫酸阿托品 反应摩尔比为1∶2
小结
药物 鉴别 杂质检查 莨菪碱：旋光 度；有关物质 HPLC 其它生物碱、 有关物质、易 氧化物 其它生物碱： TLC 含测 原料：非水；制剂： 酸性染料比色 原料：HPLC；制剂： HPLC 原料：非水；制剂： 酸性染料比色 硫酸阿托品 Vitaili, IR, SO42氢溴酸东莨 Vitaili, HgCl2, IR, Br菪碱 氢溴酸山莨 Br-, IR, Vitaili 菪碱
莨菪烷类抗胆碱药物的分析-20200217
OH HOOC
CH2 －H2O HOOC H2SO4
CHO
2O2
+2CO2↑＋H2O
三、与生物碱显色剂或沉淀剂反应
沈阳药科大学
➢ 生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合 物沉淀。不同沉淀剂与生物碱反应的灵敏度不同。
生物碱沉淀试剂 碘化铋钾试液 碘化钾碘试液 碘化汞钾试液 三硝基苯酚试液
乙醇/渗漉
减压蒸馏
洋金花粗粉
渗漉液
浸膏
H2SO4/提取
酸性提取液
Na2CO3, CHCl3/提取
Na2CO3, CHCl3/分离
HBr/成盐
总生物碱
东莨菪碱
75%
氢溴酸东莨菪碱（粗品）
C2H5OH/精制
成品
生产和贮藏过程中可能引入的有关物质可通过酸度、其他生物碱和易氧化物 检查进行控制。
一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查
含量测定。
一、酸性染料比色法 ➢反应示意式：
沈阳药科大学
➢也可将呈色的有机相经碱化（如加入醇制氢氧化钠），使与有机碱结合的
酸性染料释放出来，测定其吸光度，在计算出碱性药物的含量。
一、酸性染料比色法
沈阳药科大学
➢影响因素：
1）水相最佳pH的选择 只有选择合适的pH，使有机碱性药物均成阳离子（BH+），而同一pH条件下
KOH +3H2O
C2H5OH
NO2
OH NO2
HOOC O2N
O N
OH
KOH
OH NO2
HOOC O2N
O N
OK
沈阳药科大学
一、Vitali鉴别反应
沈阳药科大学
➢Vitali鉴别反应系托烷生物碱类的特征反应。
13莨菪烷类抗胆碱药物的分析
2020/12/20
化学与制药工程学院
15．中国药典规定“精密称定”，是指称量时（ ） A.使用分析天平称准至0.1mg B.使用万分之一天平称准至0.1 mg C.使用标准天平称准至0.1 mg D.使用微量分析天平称准至0.01 mg E.不论是用何种天平，但须乘准至所取质量的千分之一
2020/12/20
2020/12/20
化学与制药工程学院
10．中国药典（2010年版）规定，乙醇未指 明浓度时，是指浓度为（ ）
A.100%(mL/ mL) B.B.99.5%(mL/ mL) C.C.95%(mL/ mL) D.D.75%(mL/ mL) E.E.50%(mL/ mL)
2020/12/20
化学与制药工程学院
2020/12/20
化学与制药工程学院
二、Identification
三、沉淀反应 生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分 子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀
2020/12/20
化学与制药工程学院
二、Identification
三、沉淀反应 生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分 子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀
化学与制药工程学院
6．日本药局方的英文缩写是（ ） A.BP B.JP P D.CHP E.以上都不是
2020/12/20
化学与制药工程学院
7．GLP的中文全称是（ ） A.药品非临床研究质量管理规范 B.药品生产质量管理规范 C.药品经营质量管理规范 D.药品临床试验管理规范 E.分析质量管理规范
2020/12/20
化学与制药工程学院
第四节 含量测定
2020/12/20
UV
化学与制药工程学院
第四节 含量测定
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第十三章
莨菪烷类抗胆碱药物的分析
第一节 莨菪烷类药物的结构与性质
结构
莨菪烷衍 生的氨基 醇
酯+生物碱 莨菪烷类抗 胆碱药物
与各种不同 有机酸缩合
一. 典型药物 莨菪烷
7 6 5 8
N
1
2
H3C N
4
莨菪烷(Tropane) 含氮的生物碱 (氨基)
3
一. 典型药物 莨菪醇
红外光谱法 CHP收载的原料药一般都 采用红外光谱法进行鉴别
五、色谱鉴别法
色谱法 一般用于已知生物碱的鉴 别，主要有TLC、HPLC、 GC、PC等
六、硫酸盐和溴化物的反应
药物大都以硫酸盐或 溴化物的形式存在
通过加沉淀试剂如硝酸银 等生成溴化银沉淀或加入 氯试剂生成溴溶于三氯甲 烷而显色
第三节 特殊杂质与检查
丁溴酸东 莨菪碱
二、主要性质
1.水解性（酯水解生成醇和酸）
N CH3 CH3
H O O
OH
N
OH
H OH
+
HOOC
阿托品
莨菪醇
莨菪酸
2.碱性：阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子， 较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.35 3.旋光性：可用于鉴别阿托品和东莨菪碱
第二节 鉴别试验
H3C H N O CH2 O O
(杂质Ⅰ)
(杂质Ⅱ)
一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查
3. 其它生物碱
本品水溶液加入氨水试液不得 发生混浊。当有其它生物碱存 在时，则易产生混浊。
二、硫酸阿托品
硫酸阿托品为消旋体，无旋光性， 而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光 性对莨菪碱杂质进行检查 CHP用HPLC法检查其中有关物质， 通过峰面积的比值及保留时间来控 制杂质限度
氢溴酸后 马托品
一. 典型药物
N H3C H
O
H O
OH HBr
氢溴酸山 莨菪碱
一. 典型药物
O N H 3C H O H O OH 3H2O HBr
氢溴酸东 莨菪碱
一. 典型药物
O H3C H 3C H N O H O OH Br
甲溴酸东 莨菪碱
一. 典型药物
O H 3C N H 3C H O H O OH Br
作为萃取溶剂。
影响因素
4. 水分的影响： 影响结果，脱水剂或滤纸除去水分 5. 酸性染料里面的有色杂质 影响结果，先用萃取溶剂萃取除去
二. 非水溶液滴定法
非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测 定有机碱及其氢卤酸盐、硫酸盐、磷酸盐以及有机酸碱金属盐类的含量。
硫酸是二元酸，在水溶液中可以发生二级解离，生成SO42-。但是冰醋 酸非水介质中，只能发生一级解离，生成HSO4-,即只提供一个H+。所以硫 酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，可用高氯酸滴定液直接滴 定。
一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)
OH HOOC O2N OH NO2 KOH +3H2O NO2 OH KOH O O2N N OH O2N N OK C2H5OH
HOOC
+3HNO3
莨菪酸
OH NO2
硝基化
脱羧化
NO2
HOOC
HOOC O
深紫
共轭结构
取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙 醇2～3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。
(BH+)2 • SO42- + HClO4 → (BH+)•ClO4 + (BH+) • HSO42-
硫酸阿托品与高氯酸反应的化学计量摩尔比为1:1.
三.高效液相色谱法
莨菪烷类药物HPLC分析测定时，常采用烷基磺酸盐作为
离子对试剂，流动相一般呈酸性，以利于碱性药物的质子
化。
ChP2010中采用HPLC测定氢溴酸东莨菪碱及其片剂和注射液的含量。 测定丁溴酸东莨菪碱的有关物质及其胶囊和注射液含量时，均采用 十二烷基硫酸钠作为离子对。 BP2009中HPLC测定硫酸阿托品制剂（滴眼液、片剂和注射剂）含量 时，均采用磺基丁二酸钠二辛脂作为离子对试剂（USP多库酯钠） ChP2010中硫酸阿托品有关物质的检查，采用庚烷磺酸钠作为离子对 试剂。
第五节 体内莨菪烷类药物分析
检测临床常规使用剂量小 体内样品机制复杂 药物浓度低
采用专属灵敏方法进行临 床监测和法定鉴别研究
采用SPE处 理，HPLC-MS法
影响因素
1. 水性最佳pH值：使得BH+和In-最多
pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低 影响离子对的形成；
pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成， 因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。
其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机 相的分配系数而定
影响因素
第四节
含量测定
莨菪烷类抗胆碱药物药理活性 较强、临床使用剂量较少，因 此测定方法要专属、灵敏
非水溶液 滴定法
酸性染料 比色法
高效液相 色谱法
酸性染料 比色法
在一定的pH条件下，某些生物碱药 物可与某些酸性染料结合而呈色， 进而可用分光光度法进行测量
+
B +H HIn
Ʊ (BH ·In )水相 + (BH ·In )有机相
一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取 酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐 氢溴酸东莨菪碱（粗品）75% C2H5OH/精制 成品
根据其制备工艺，本品可通 过酸度、其它生物碱、和易 氧化物质检查进行控制
一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查
1. 酸度 如氢溴酸东莨菪碱为弱酸弱碱 盐、通过其5%的水溶液pH为 4.0~5.5可控制酸性杂质
一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查
2. 易氧化物
可能杂质为阿扑东莨菪碱、及 其它含有不饱和双键的有机物， 他们的紫外吸收波长会红移、 可使高锰酸钾溶液褪色
CH2 N H3 C H O O
2. 酸性染料及其浓度：
定量结合，产物溶解性好；可稍过量。
一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以；
但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去， 往往影响测定结果。
影响因素
3.有机溶剂的选择：
提取效率高，氯仿最理想；
一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率
高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂
OH
8
N
H3C N
1
2
7 6 5
4
H
含氮的醇 (莨菪醇)
3
OH
莨菪醇(Tropine)
一. 典型药物 性质区别
H3C H H O 2 OH 2H2O H2SO4
N
O
N H3C H
H O O
OH
H2O H2SO4 2
硫酸 莨菪碱
硫酸 阿托品
熔点、溶解度、 旋光度、分子量
一. 典型药物
OH N H3C H O O HBr
UV
酸性染料 如磺酸酞类指示剂等，如 溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、 溴甲酚紫、溴酚蓝等
其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱 明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂 定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的 特征波长处的吸光度，即可进行含量测定
应用示例
氢溴酸东莨菪碱片的含量测定
精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精 密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液4ml， 振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外-可见分 光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。
药物水 二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）
药物水解后生成莨菪酸，可与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下， 发生氧化反应，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味。反应式如下：
OH HOOC －H2O H2SO4 HOOC
CH2 2O2
CHO +2CO2↑＋H2O
三、与生物碱显色剂或沉淀剂的反应
生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、 复盐或配合物沉淀。 生物碱沉淀试剂 反应条件与结果
碘化铋钾试液
碘化钾碘试液 碘化汞钾试液 三硝基苯酚试液 硅乌酸试液
橙色或棕红色沉淀
棕色或棕褐色沉淀 白色或淡黄色沉淀 结晶性沉淀并有特定熔点 白色或淡黄色或黄棕色沉淀
磷乌酸试液
淡黄色沉淀
四、光谱鉴别法
紫外光谱法
一般通过比较药物的 max、
min
或吸收光谱的一致性来进行鉴别 以及吸光系数。
四、光谱鉴别法
莨菪烷类抗胆碱药物的分析
第一节 莨菪烷类药物的结构与性质
结构
莨菪烷衍 生的氨基 醇
酯+生物碱 莨菪烷类抗 胆碱药物
与各种不同 有机酸缩合
一. 典型药物 莨菪烷
7 6 5 8
N
1
2
H3C N
4
莨菪烷(Tropane) 含氮的生物碱 (氨基)
3
一. 典型药物 莨菪醇
红外光谱法 CHP收载的原料药一般都 采用红外光谱法进行鉴别
五、色谱鉴别法
色谱法 一般用于已知生物碱的鉴 别，主要有TLC、HPLC、 GC、PC等
六、硫酸盐和溴化物的反应
药物大都以硫酸盐或 溴化物的形式存在
通过加沉淀试剂如硝酸银 等生成溴化银沉淀或加入 氯试剂生成溴溶于三氯甲 烷而显色
第三节 特殊杂质与检查
丁溴酸东 莨菪碱
二、主要性质
1.水解性（酯水解生成醇和酸）
N CH3 CH3
H O O
OH
N
OH
H OH
+
HOOC
阿托品
莨菪醇
莨菪酸
2.碱性：阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子， 较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.35 3.旋光性：可用于鉴别阿托品和东莨菪碱
第二节 鉴别试验
H3C H N O CH2 O O
(杂质Ⅰ)
(杂质Ⅱ)
一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查
3. 其它生物碱
本品水溶液加入氨水试液不得 发生混浊。当有其它生物碱存 在时，则易产生混浊。
二、硫酸阿托品
硫酸阿托品为消旋体，无旋光性， 而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光 性对莨菪碱杂质进行检查 CHP用HPLC法检查其中有关物质， 通过峰面积的比值及保留时间来控 制杂质限度
氢溴酸后 马托品
一. 典型药物
N H3C H
O
H O
OH HBr
氢溴酸山 莨菪碱
一. 典型药物
O N H 3C H O H O OH 3H2O HBr
氢溴酸东 莨菪碱
一. 典型药物
O H3C H 3C H N O H O OH Br
甲溴酸东 莨菪碱
一. 典型药物
O H 3C N H 3C H O H O OH Br
作为萃取溶剂。
影响因素
4. 水分的影响： 影响结果，脱水剂或滤纸除去水分 5. 酸性染料里面的有色杂质 影响结果，先用萃取溶剂萃取除去
二. 非水溶液滴定法
非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测 定有机碱及其氢卤酸盐、硫酸盐、磷酸盐以及有机酸碱金属盐类的含量。
硫酸是二元酸，在水溶液中可以发生二级解离，生成SO42-。但是冰醋 酸非水介质中，只能发生一级解离，生成HSO4-,即只提供一个H+。所以硫 酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，可用高氯酸滴定液直接滴 定。
一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)
OH HOOC O2N OH NO2 KOH +3H2O NO2 OH KOH O O2N N OH O2N N OK C2H5OH
HOOC
+3HNO3
莨菪酸
OH NO2
硝基化
脱羧化
NO2
HOOC
HOOC O
深紫
共轭结构
取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙 醇2～3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。
(BH+)2 • SO42- + HClO4 → (BH+)•ClO4 + (BH+) • HSO42-
硫酸阿托品与高氯酸反应的化学计量摩尔比为1:1.
三.高效液相色谱法
莨菪烷类药物HPLC分析测定时，常采用烷基磺酸盐作为
离子对试剂，流动相一般呈酸性，以利于碱性药物的质子
化。
ChP2010中采用HPLC测定氢溴酸东莨菪碱及其片剂和注射液的含量。 测定丁溴酸东莨菪碱的有关物质及其胶囊和注射液含量时，均采用 十二烷基硫酸钠作为离子对。 BP2009中HPLC测定硫酸阿托品制剂（滴眼液、片剂和注射剂）含量 时，均采用磺基丁二酸钠二辛脂作为离子对试剂（USP多库酯钠） ChP2010中硫酸阿托品有关物质的检查，采用庚烷磺酸钠作为离子对 试剂。
第五节 体内莨菪烷类药物分析
检测临床常规使用剂量小 体内样品机制复杂 药物浓度低
采用专属灵敏方法进行临 床监测和法定鉴别研究
采用SPE处 理，HPLC-MS法
影响因素
1. 水性最佳pH值：使得BH+和In-最多
pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低 影响离子对的形成；
pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成， 因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。
其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机 相的分配系数而定
影响因素
第四节
含量测定
莨菪烷类抗胆碱药物药理活性 较强、临床使用剂量较少，因 此测定方法要专属、灵敏
非水溶液 滴定法
酸性染料 比色法
高效液相 色谱法
酸性染料 比色法
在一定的pH条件下，某些生物碱药 物可与某些酸性染料结合而呈色， 进而可用分光光度法进行测量
+
B +H HIn
Ʊ (BH ·In )水相 + (BH ·In )有机相
一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺
洋金花粗粉 乙醇/渗漉 渗漉液 减压蒸馏 浸膏 H2SO4/提取 酸性提取液 Na2CO3, CHCl3/提取 总生物碱 Na2CO3, CHCl3/分离 东莨菪碱 HBr/成盐 氢溴酸东莨菪碱（粗品）75% C2H5OH/精制 成品
根据其制备工艺，本品可通 过酸度、其它生物碱、和易 氧化物质检查进行控制
一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查
1. 酸度 如氢溴酸东莨菪碱为弱酸弱碱 盐、通过其5%的水溶液pH为 4.0~5.5可控制酸性杂质
一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查
2. 易氧化物
可能杂质为阿扑东莨菪碱、及 其它含有不饱和双键的有机物， 他们的紫外吸收波长会红移、 可使高锰酸钾溶液褪色
CH2 N H3 C H O O
2. 酸性染料及其浓度：
定量结合，产物溶解性好；可稍过量。
一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以；
但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去， 往往影响测定结果。
影响因素
3.有机溶剂的选择：
提取效率高，氯仿最理想；
一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率
高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂
OH
8
N
H3C N
1
2
7 6 5
4
H
含氮的醇 (莨菪醇)
3
OH
莨菪醇(Tropine)
一. 典型药物 性质区别
H3C H H O 2 OH 2H2O H2SO4
N
O
N H3C H
H O O
OH
H2O H2SO4 2
硫酸 莨菪碱
硫酸 阿托品
熔点、溶解度、 旋光度、分子量
一. 典型药物
OH N H3C H O O HBr
UV
酸性染料 如磺酸酞类指示剂等，如 溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、 溴甲酚紫、溴酚蓝等
其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱 明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂 定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的 特征波长处的吸光度，即可进行含量测定
应用示例
氢溴酸东莨菪碱片的含量测定
精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精 密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液4ml， 振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外-可见分 光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。
药物水 二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）
药物水解后生成莨菪酸，可与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下， 发生氧化反应，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味。反应式如下：
OH HOOC －H2O H2SO4 HOOC
CH2 2O2
CHO +2CO2↑＋H2O
三、与生物碱显色剂或沉淀剂的反应
生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、 复盐或配合物沉淀。 生物碱沉淀试剂 反应条件与结果
碘化铋钾试液
碘化钾碘试液 碘化汞钾试液 三硝基苯酚试液 硅乌酸试液
橙色或棕红色沉淀
棕色或棕褐色沉淀 白色或淡黄色沉淀 结晶性沉淀并有特定熔点 白色或淡黄色或黄棕色沉淀
磷乌酸试液
淡黄色沉淀
四、光谱鉴别法
紫外光谱法
一般通过比较药物的 max、
min
或吸收光谱的一致性来进行鉴别 以及吸光系数。
四、光谱鉴别法