玉米赤霉烯酮ELISA说明书
玉米赤霉烯酮 (ZEN) ELISA 快速检测试剂盒操作说明书
七、自备仪器及试剂
1. 2. 3. 4. 5. 酶标仪(内置 450nm 滤光片)或黄曲霉素 B1 专用测定仪 20-200ul 微量移液器及配套吸头 (0℃-50℃)恒温培养箱、冰箱、感量 0.01g 的天平、小型粉碎机或碾钵 玻璃器皿:锥形瓶、烧杯、分液漏斗、蒸发皿、量筒、具塞试管、滴管、移液管等 其他:三氯甲烷、甲醇、定性滤纸、吸水纸等
2
山西德丰信成生物科技有限公司
体, 将酶标板倒置在吸水纸上拍打以除去孔中的液体。 再重复操作洗涤步骤三次(共洗四次)。 4.4 加酶标二抗:将洗好的板孔平放,加入酶标二抗 100 µl /孔,将酶标板置于湿盒内,37 ℃温育 30 分钟。 4.5 洗板:参照 4.3; 4.6 显色:将洗好的酶标板平放,加入显色液 100 µl /孔,将板条置于湿盒内,放入温箱内 37℃显色 5 分钟(若显色较浅,可适当延长,但不宜超过 10 分钟)。 4.7 终止及测定:将显色完毕的酶标板取出,加入终止液 50 µl/孔,轻微震荡混匀,以空 白孔调零,在 450 nm 处测量吸光值 A(在加入终止液 5 分钟内读取吸光值) 。 4.8 结果判定:以 ZEN 标准品浓度 30ppb、60ppb、200ppb、500ppb 的常用对数值(1gC) 为 横坐标,各浓度标准品相应的吸光值 A 与 0ppb 的标准品 A 值的比值(B/B0%) 为纵坐标 [B/B0%=标准品(或样品)的吸光值/0ppb 标准品的吸光值×100%],绘制标准曲线。 根 据样品孔的吸光值计算样品的 B/B0%值,查标准曲线,可得到相应样品中 ZEN 的含量 (已考虑样品提取的稀释倍数,结果无需换算 )。(或可直接用 RADEWIN 等专用 ELISA 分析软件对数据进行分析得出结果)。如果检测结果高于检测上限,请将待测样品提取 液用 30%甲醇/水(甲醇/水体积比为 30:70)稀释后再检测,测定结果乘以相应的稀释 倍数。
玉米赤霉烯酮快速检测试纸卡说明书
AccuDip TM玉米赤霉烯酮快速检测试纸卡使用说明书
(产品编号:AAF-11171)
1.产品概述:
玉米赤霉烯酮(Zearalenone)引起玉米赤霉病,是由玉米赤霉菌产毒菌产生的毒素,又称F-2毒素。玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物。玉米赤霉烯酮具有雌激素的作用,可造成家禽和家畜的雌激素水平提高。玉米赤霉烯酮作用于生殖系统,妊娠期的动物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流产、死胎和畸胎。
另外,食用含赤霉病麦面粉制作的食物也可引起中枢神经系统的中毒症状,如恶心、发冷、头痛、神智抑郁和共济失调等。
玉米赤霉烯酮快速检测试纸卡将胶体金免疫层析原理应用于玉米赤霉烯酮含量的快速测定。产品用于测定谷物及谷物产品玉米赤霉烯酮的存在。
本品具有灵敏度高、特异性好,并且操作简便的特性,不需要任何仪器设备,可通过肉眼直接判读结果。样本中玉米赤霉烯酮的最低检出限为200ng/ml(200ppb)。
2.用途及灵敏度:
本产品玉米赤霉烯酮快速检测试纸卡适用于测定谷物及谷物产品中玉米赤霉烯酮的存在。
检测灵敏度:200ng/ml(200ppb)
3.检测原理:
玉米赤霉烯酮快速检测试纸卡将胶体金免疫层析原理应用于玉米赤霉烯酮含量的快速测定。在试纸卡中,抗玉米赤霉烯酮抗体偶联到胶体金颗粒上,玉米赤霉烯酮测试抗原固定在纤维素滤膜上。如果样品不含有玉米赤霉烯酮,胶体金抗体偶联物与固定抗原结合,在膜上显示检测线,检测结果为阴性。如果样品中含有玉米赤霉烯酮,玉米赤霉烯酮结合在胶体金抗体偶联物上,抑制了胶体金抗体偶联物与固定抗原的结合,不显示检测线,检测结果为阳性。
玉米赤霉烯酮的限量标准
玉米赤霉烯酮的限量标准
玉米赤霉烯酮是一种由赤霉菌产生的毒素,对人体健康有一定的危害。因此,国家针对食品中玉米赤霉烯酮的含量制定了限量标准。
根据《食品安全国家标准食品中玉米赤霉烯酮的限量》(GB 2761-2017)规定,食品中玉米赤霉烯酮的限量标准如下:
1. 玉米及其制品(不包括婴幼儿配方食品):不得超过20μg/kg;
2. 饲料:不得超过100μg/kg。
需要注意的是,婴幼儿配方食品中玉米赤霉烯酮的限量标准另有规定,不在此范围内。
以上是国家对食品中玉米赤霉烯酮的限量标准,食品生产企业和消费者应当严格遵守,确保食品安全。
玉米赤霉烯酮的限量标准
玉米赤霉烯酮的限量标准
玉米赤霉烯酮是由真菌产生的一种毒素,容易在玉米及其制品中积累。长期摄入过量的玉米赤霉烯酮会对人体健康造成影响,如免疫力下降、肝脏损伤等。
因此,为了保障公众健康,各国纷纷制定了玉米赤霉烯酮的限量标准。例如,欧盟规定的限量标准为每公斤玉米及其制品中不超过4毫克的玉米赤霉烯酮含量;美国则规定玉米及其制品中的玉米赤霉烯酮含量不得超过20ppb。
此外,玉米种植和加工过程中的卫生状况也对玉米赤霉烯酮的含量有重要影响,因此加强生产和食品安全监管也是减少玉米赤霉烯酮含量的重要手段。
- 1 -
玉米赤霉烯酮检测方法
玉米赤霉烯酮检测方法
玉米赤霉烯酮是一种由产自赤霉菌的黄曲霉烯酮合成的毒素。该毒素在玉米和其他谷物中广泛存在,对人和动物的健康有害。因此,玉米赤霉烯酮的检测方法至关重要,以保障食品安全和质量。
目前,市场上常用的玉米赤霉烯酮检测方法主要有以下几种:
1. 高效液相色谱法(HPLC):该方法是将样品溶解后经过净化处理,然后使用高效液相色谱仪进行分析。这种方法可以测定不同类型的赤霉烯酮类毒素,但是需要较复杂的样品预处理过程。
2. 气相色谱法(GC):这种方法是将样品中的赤霉烯酮蒸发,然后通过气相色谱进行定量分析。该方法对于特定类型的赤霉烯酮类毒素的测定较为准确,但需要耗费较多的时间和资源。
3. 免疫分析法:这种方法利用特殊的抗体与赤霉烯酮结合,产生可见的信号,从而测定样品中的赤霉烯酮含量。这种方法操作简便,结果可即时获得,但是对样品中的干扰物较为敏感。
4. 毛细管电泳法(CE):这种方法利用样品在毛细管中的化学性质差异,通过分离电泳来测定赤霉烯酮的含量。该方法适用于复杂的样品矩阵,并且可同时测定多种赤霉烯酮。
除了以上主流的检测方法,还有一些新兴的检测技术被应用到玉米赤霉烯酮的检测中:
1. 生物传感器:利用生物分子与赤霉烯酮的特异性结合,通过传感器产生的电信号来测定赤霉烯酮含量。这种方法具有灵敏度高、响应速度快的优势,但是需要对传感器进行特定设计和构建。
2. 分子印迹技术:利用功能单体与赤霉烯酮形成特异的相互作用,构建具有特异性识别能力的分子印迹聚合物。该方法具有高选择性和较好的再生性,但是制备分子印迹聚合物需要较长的时间和较高的成本。
饲料中玉米赤霉烯酮检测方法概况
格率97.7%; 2号板Cov值0.187,抗体阳性孔数86个,抗体 阴性孔数4个,合格率95.5%; 3号板Cov值0.178,抗体阳性 孔数34个,抗体阴性孔数0个,合格率100% (详见表2)遥 3讨论
关键词:饲料;玉米赤霉烯酮;检测方法;综述
目前关于饲料中玉米赤霉烯酮(Zearalenone)的检测方法 很多,随着科学技术的发展,不仅可以定性判断饲料中是否存 在玉米赤霉烯酮, 还可以对其进行精准定量, 为饲料安全提供 技术保障。
1薄层层析法
薄层层析法(Thin Layer Chromatography, TLC)是较早用 于检测玉米赤霉烯酮的试验方法,也是饲料中玉米赤霉烯酮检 测的国家标准测定方法之一。TLC的工作原理为待检样品通过 提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后,在紫外光下(波长 为365nm)会岀现黄绿色或蓝紫色荧光,根据其在薄层上显现
作者简介:高琳(1980.4-),女,天津市人,大学本科,兽医师,主要从事农产品质量安全监测工作。
(约300滋l),滞留1min后甩去。重复洗涤3次,最后一次甩 净,在吸水纸上拍干。 1.3.7 显色反应
按照一板96孔用量,取底色液5ml和显色液5ml充分混合, 每孔加入100滋l,盖好封板膜,37益避光恒温箱反应10min遥 1.3.8终止反应
玉米赤霉烯酮
风险术语
R34:Causes burns. 引起灼伤。 R62:Possible risk of impaired fertility. 可能有损伤生育力的危险。 R63:Possible risk of harm to the unborn child. 可能有损害未出生婴儿的危险。
谢谢观看
动物毒害
中毒治疗
动物中毒
预防中毒
动物中毒
玉米赤霉烯酮中毒分为急性中毒和慢性中毒。在急性中毒时,动物表现为兴奋不安,走路蹒跚,全身肌肉振 颤,突然倒地死亡。同时还可发现粘膜发绀,体温无明显变化。动物呆立,粪便稀如水样,恶臭,呈灰褐色,并 混有肠粘液。频频排尿,呈淡黄色。同时还表现为外生殖器肿胀,精神萎顿,食欲减退,腹痛腹泻的特征。在剖 检时还能发现淋巴结水肿,胃肠粘膜充血、水肿,肝轻度肿胀,质地较硬,色淡黄。而在慢性中毒时,主要对母 畜的毒害较大。它会导致母畜外生殖器肿大。充血,死胎和延期流产的现象大面积产生,并且伴有木乃伊胎的现 象。50%的母畜患卵巢囊肿,频发情和假发情的情况增多,育成母畜乳房肿大,自行泌乳,并诱发乳房炎,受胎 率下降。同时对公畜也会造成包皮积液、食欲不振、掉膘严重和生长不良的情况。
中wenku.baidu.com治疗
目前,对动物玉米赤霉烯酮中毒尚无特效药治疗,生产中应立即停止饲喂可疑饲料,并对饲料加以检测,确 定饲料中是否含有玉米赤霉烯酮。对于已经中毒的家畜,为了减少损失也应给予一定的治疗。对于急性中毒的动 物,可采取静脉放血和补液强心的方法。具体的疗法是使用Na2SO4300~500g配成的10%浓度一次内服,并根据动 物的种类和大小不同从静脉放血200~1000mL。同时,用10%葡萄糖500~1000mL,5%葡萄糖500~1000mL,40% 乌洛托品60mL,右旋糖着500~1000mL,三磷酸酚酥11万单位静脉补液。再使用VK。10mL一次性肌注。对于急性 中毒的动物,投入一定量的清药也是有利于解毒和保护肠胃的方法。对于慢性中毒的动物首先要将霉变的饲料停 喂,然后灌服绿豆苦参煎剂,静脉注射葡萄糖和樟脑磺酸钠,同时再肌注VA、VD。VE和黄体酮。对外阴部的治疗 可用0.l%高锰酸钾洗涤肿胀阴户,对于破清处可用3%碘酒擦拭。一般,慢性中毒动物在治疗3~12个月后各项生 理指标趋于正常,但在治疗过程中使用雄性激素和保胎素的方法效果不明显。
玉米赤霉烯酮毒素检测
玉米赤霉烯酮毒素
PriboFast ○R
霉菌毒素免疫亲和柱
PriboFast ○R
多功能净化柱
产品名称
产品描述
产品编
号
规格
PriboFast ○R 净化柱(柱压型) PriboFast ○R 226 多功能净化柱
黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮 M2006 25T PriboFast ○R
226 多功能净化柱
黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮
M2006
50T
PriboFast ○R
净化柱(推杆型) PriboFast ○R 260 多功能净化柱 黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮 M2600 25T PriboFast ○R 260 多功能净化柱
黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮
M2600 50T
PriboSpin TM 净化小柱 PriboSpin TM 玉米赤霉烯酮 PS-02
25T PriboSpin TM 玉米赤霉烯酮
PS-020
50T
PriboFast ○R
酶联免疫试剂盒
产品名称
产品描述 产品编号 规格 玉米赤霉烯酮试剂盒 检测范围:0-16.2ppb EKT-020 48T 玉米赤霉烯酮试剂盒
检测范围:0-16.2ppb
EKT-020
96T
产品名称
产品描述
产品编号 规格
玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(3ml)
适用于玉米、谷物、饲料、植物油、辣
椒等作物中玉米赤霉烯酮定量检测 符合国标:GBT 5009.209-2008;GBT
23504-2009 IAC-020-3
25T
玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(3ml)
适用于玉米、谷物、饲料、植物油、辣椒等作物中玉米赤霉烯酮定量检测 符合国标:GBT 5009.209-2008;GBT
玉米赤霉烯酮
玉米赤霉烯酮
玉米赤霉烯酮(Zearalenone)又称F-2毒素,玉米烯酮. Cas号【17924-92-4】
分子式:C18H22O5 分子量:318.36 它首先从有赤霉病的玉米中分离得到.
玉米赤霉烯酮其产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌侏,如禾谷镰刀菌(F.graminearum)和三线镰刀菌(F.tricinctum).玉米赤霉烯酮主要污染玉米,小麦,大米,
大麦,小米和燕麦等谷物,其中玉米的阳性检出率为45%,最高含毒量可达到2909mg/kg;小麦的检出率为20%,含毒量为0.364~11.05mg/kg.玉米赤霉烯酮的耐热
性较强,110℃下处理1h才被完全破坏.
2011年4月20日,中华人民共和国卫生部发布了《食品中真菌毒素限量》国家标准,2011年10月20日开始实施,其中对玉米赤酶烯酮的限量标准是:谷物及其制品小麦、小麦粉、玉米、玉米面(渣、片)限量指标60µg/kg。
玉米赤霉烯酮具有雌激素作用,主要作用于生殖系统,可使家畜,家禽和实验小鼠产生
雌性激素亢进症.妊娠期的动物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流产,死胎
和畸胎.食用含赤霉病麦面粉制作的各种面食也可引起中枢神经系统的中毒症状,如恶心,发冷,头痛,神智抑郁和共济失调等.
玉米赤霉烯酮的危害
作者:涂华莱齐德生来源:华中农业大学营养卫生实验室发布时间:2008-03-25 11:17:29阅读数:836
玉米赤霉烯酮首先由赤霉病玉米中分离得出,是玉米赤霉菌的代谢产物,又称为F-2毒素。自从1980年李季伦教授发现植物体内也存在玉米赤霉烯酮以来,立刻受到人们的关注。玉米赤霉烯酮具有雌激素的作用,能引起动物流产、死胎、返情等生殖异常现象,近年来,我国南方不少猪场因使用霉变玉米造成种猪流产、返情现象时有发生,给猪场造成了严重的经济损失,因此,本文对其生物学作用及对动物的危害做了综述。
薏苡仁中玉米赤霉烯酮(1)
薏苡仁中玉米赤霉烯酮
【来源】本品为禾本科植物薏苡Coix lacryma-jobi L.var.ma-yuen(Roman.)Stapf的干燥成熟种仁。秋季果实成熟时采割植株,晒干,打下果实,再晒干,除去外壳、黄褐色种皮和杂质,收集种仁。
【功能与主治】利水渗湿,健脾止泻,除痹,排脓,解毒散结。用于水肿,脚气,小便不利,脾虚泄泻,湿痹拘挛,肺痈,肠痈,赘疣,癌肿。
【玉米赤霉烯酮】
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(50:50)为流动相;以荧光检测器检测,激发波长λex=232nm,发射波长λem=460nm。理论板数按玉米赤霉烯酮峰计应不低于10000。对照品溶液的制备精密称取玉米赤霉烯酮对照品适量,加甲醇制成每1ml含1ug的溶液,作为贮备溶液。精密量取贮备溶液1ml,置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,即得。
供试品溶液的制备:取供试品粉末约20g(过二号筛),精密称定,置于均质瓶中,加入氯化钠4g,精密加入90%乙腈100ml,高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11000r/min),离心10分钟(离心速度4000r/min),精密量取上清液10ml,置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,离心10分钟(离心速度4000r/min),量取上清液20.0ml,通过免疫亲合柱,流速每分钟3ml,用水10ml洗脱(必要时可先用淋洗缓冲液10ml洗脱,再用水10ml洗脱),弃去洗脱液,使空气进入柱子,将水挤出柱子,再用适量甲醇洗脱,收集洗脱液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.22um)滤过,取续滤液,即得。
玉米赤霉烯酮的限量标准
玉米赤霉烯酮的限量标准
玉米赤霉烯酮是一种致病微生物孢子的毒素,广泛存在于作物、肉类和食用植物中。其污染物的限量标准可根据食品安全法规制定。
在二十国集团(G20)食品安全行动计划(FoSAP)的建议中,要求G20成员国对玉米赤霉烯酮的污染物进行严格的监测,并确定最大质量标准限度,以保护消费者的健康。根据相关法规,FoSAP建议将玉米赤霉烯酮的污染物最大允许极限(MRL)设定在50μg/kg。
此外,联合国食品和农业组织(FAO)也就玉米赤霉烯酮的限量标准作出了建议。其提出,在玉米等水稻和谷物中,玉米赤霉烯酮的最大极限(MRL)应设置为50μg/kg。
此外,欧盟也就玉米赤霉烯酮的污染物限量问题进行了规定,明确方案如下:(1)采用一般原则规定,不允许在玉米及其制品中检测出此毒素;(2)对谷物及其制品,包括水稻、小麦、玉米及其碾磨产品,设置了极限值,每公斤最大不超过50微克;(3)对畜禽及其产品,采用一般原则,不允许在其中检测出此毒素。
此外,各国也就玉米赤霉烯酮的最大质量标准限度进行了规定,如中国的《食品安全法实施条例》明确规定,玉米赤霉烯酮的污染物限量为50微克/公斤,印度的《食品安全法》规定限量为5 mg/kg,日本《食品安全法》规定限量为50mg/kg,而美国《食品药品法》则规定玉米赤霉烯酮的最大质量标准限度为100微克/公斤。
总之,玉米赤霉烯酮污染物的限量标准不同国家也有所不同,但一般情况下,都设定在50μg/kg左右。因此,消费者在购买食物的时候,一定要注意选择正规检测合格的食品,以确保食品安全。
玉米油中玉米赤霉烯酮标准物质-概述说明以及解释
玉米油中玉米赤霉烯酮标准物质-概述说明以及解释
1.引言
1.1 概述
概述
玉米赤霉烯酮是一种存在于玉米和其他谷物中的黄曲霉菌产生的毒素。它具有强烈的毒性,对人体和动物的健康造成潜在威胁。由于玉米是世界上最重要的粮食作物之一,玉米油是人们日常生活中常用的调味品之一,其中的玉米赤霉烯酮含量受到广泛关注。
本文将重点讨论玉米油中的玉米赤霉烯酮,包括其来源、危害和风险。此外,我们还将介绍玉米赤霉烯酮标准物质的重要性以及其在食品安全领域中的应用前景。
通过深入了解玉米赤霉烯酮及其标准物质,我们可以更好地认识和评估玉米油中的潜在风险,为相关行业提供科学依据和技术支持。着眼于食品安全和人民的健康,我们需要建立可靠的检测方法和标准,以保障人们日常生活中的食品安全问题。
接下来,我们将详细介绍玉米油中玉米赤霉烯酮的相关知识,包括其产生原因、影响因素、检测方法等,以期为解决相关问题提供参考和启示。
同时,我们还将探讨玉米赤霉烯酮标准物质的研究意义以及未来的应用前景。
在研究的过程中,我们应该高度重视玉米赤霉烯酮对人类健康的潜在危害,并主动开展一系列的控制和预防措施,以确保人们在日常生活中能够得到高质量、安全的食品。这将为保障人类根本权益和社会稳定做出重要贡献。
在本文的结论部分,我们将对整个研究进行总结,并展望玉米赤霉烯酮标准物质的应用前景。我们希望本文的研究结果能够对相关领域的科学研究和实践产生积极影响,为食品安全和人民的健康问题作出贡献。
1.2文章结构
1.2 文章结构
本文按照以下结构进行展开:
第一部分为引言,包括概述、文章结构和目的。
玉米赤霉烯酮脱霉剂主要成分
玉米赤霉烯酮脱霉剂主要成分
玉米赤霉烯酮脱霉剂的主要成分是什么?这是一个很重要的问题,因为玉米赤霉烯酮是一种可能对人体健康造成危害的毒素。玉
米赤霉烯酮脱霉剂通常包含的主要成分是化学物质。常见的主要成
分包括氧化钙、氧化铝、氧化锌等无机物质,以及丙二醇、山梨醇、聚乙二醇等有机物质。这些成分可以通过吸附、化学反应或者其他
方式来降解或者减少玉米中的赤霉烯酮含量,从而保障玉米的食用
安全。
从化学角度来看,氧化钙、氧化铝和氧化锌等无机物质可以起
到吸附和催化分解赤霉烯酮的作用,从而减少其在玉米中的含量。
而丙二醇、山梨醇、聚乙二醇等有机物质则可以通过与赤霉烯酮发
生化学反应或者改变其溶解度来达到脱霉的目的。
除了化学成分外,玉米赤霉烯酮脱霉剂还可能包含一些辅助成分,如防结块剂、润滑剂等,以提高脱霉剂的稳定性和加工性能。
总的来说,玉米赤霉烯酮脱霉剂的主要成分是多种化学物质,
它们通过吸附、化学反应等方式来降解或减少玉米中的赤霉烯酮含
量,从而保障玉米的食用安全。这些成分在合理使用的情况下,可以有效地保护玉米免受赤霉烯酮的危害。
玉米赤霉烯酮毒素标准检测规程
玉米赤霉烯酮标准操作规程
1、目的
为了规范亲和柱净化样本中玉米赤霉烯酮的操作流程,特制订本操作规程。2、范围
本标准适用于粮食、饲料、食品中玉米赤霉烯酮的检测。
3、检出限和定量限
5.1 原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、过滤后,缓慢的通过玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱玉米赤霉烯酮,然后注入到高效液相色谱仪中用于检测。
5.2 溶液配制
5.2.1 提取液:80%乙腈
----用量筒移取800mL 乙腈,加入超纯水定容至至1L。
5.2.2 稀释液:0.01M PBST 溶液
----称取8g NaCl、0.2g KCl、0.2g KH2PO4和1.16g Na2HPO4.12H2O,加入800mL 超纯水溶解,加入2mL Tween-20,定容至1L。
5.2.3 玉米赤霉烯酮标准工作液:用色谱级甲醇将储备工作液分别稀释到1000 ng/ml、
500 ng/ml、200ng/ml、100 ng/ml、50 ng/ml。
5.3 样品前处理
----20g±0.01g 样品(固体样品需粉碎,并过2mm 分样筛)加入100mL 提取液(80%
乙腈-水溶液)混匀;
----高速均质(≥10,000r/min)1min,或摇床(200r/min~300r/min)剧烈振荡20min,用快速定性滤纸过滤,收集滤液;
----取10mL 滤液加入40mL 稀释液稀释,再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;
玉米赤霉烯酮最新国家标准
玉米赤霉烯酮最新国家标准
玉米赤霉烯酮是一种由镰刀菌属真菌产生的毒素,它主要存在于玉米和其他谷
物中,对人体和动物健康造成严重威胁。因此,制定和实施玉米赤霉烯酮国家标准具有重要意义,可以有效保障食品安全,保护公众健康。
根据最新的国家标准,玉米赤霉烯酮的限量标准得到了明确规定。在玉米及玉
米制品中,玉米赤霉烯酮的限量标准为每公斤不超过5μg。这一限量标准的制定,充分考虑了玉米和玉米制品的生产加工特点,既能有效控制玉米赤霉烯酮的含量,又不至于对玉米产业造成过大影响。
此外,国家标准还对玉米赤霉烯酮的检测方法进行了详细规定。采用高效液相
色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)进行检测,可以确保对玉米赤霉烯酮进行准确、快速的检测。这一检测方法的确定,为监管部门提供了科学、可靠的手段,保障了玉米及玉米制品中玉米赤霉烯酮的监测工作。
除了限量标准和检测方法外,国家标准还对玉米赤霉烯酮的风险评估和风险管
控进行了全面规定。通过对玉米赤霉烯酮的毒性、暴露途径、暴露水平等方面进行科学评估,可以更好地了解玉米赤霉烯酮对人体健康的影响,为相关部门制定风险管控措施提供科学依据。
总的来看,玉米赤霉烯酮最新国家标准的出台,为玉米及玉米制品的生产、加工、流通和监管提供了明确的指导和依据。在实际操作中,各级监管部门和生产企业应严格按照国家标准的要求进行生产和监管,确保玉米及玉米制品中玉米赤霉烯酮的含量符合国家标准要求,保障公众健康和食品安全。
在未来,国家标准的修订和完善也将是一个持续的过程,监管部门和科研机构
需要不断跟进最新的科学研究成果,及时修订和完善国家标准,以更好地适应玉米赤霉烯酮监管的需要,保障公众健康和食品安全。
【测试】玉米赤霉烯酮检测试剂盒说明书
【关键字】测试
玉米赤霉烯酮(ZEN)ELISA检测试剂盒产品描述:
一、概要
玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)又称F-2 毒素,主要成分为禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌等产生的2,4-二羟基苯甲酸内酯类化合物。ZEN 主要污染玉米、麦类、谷物等作物,具有很强的雌性激素作用,可引起猪、大鼠、小鼠、家禽等动物的雌激素过多症和严重的生殖道症状及不孕症,还具有免疫毒性、基因毒性等,对人也有雌激素作用。玉米赤霉烯酮一般用薄层色谱、高效液相色谱法检测, 但因其操作繁杂、费用昂贵而影响实际应用。而使用玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中玉米赤霉烯酮残留。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品,操作时间低于60min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被玉米赤霉烯酮抗原,样本中玉米赤霉烯酮和此抗原竞争玉米赤霉烯酮的抗体,酶标二抗催化TMB底物显色,样本吸光值与其含有的玉米赤霉烯酮成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中玉米赤霉烯酮的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测玉米及玉米制品、饲料等样本中的玉米赤霉烯酮。
四、交叉反应率
玉米赤霉烯酮……………………………………………100%
玉米赤霉酮…………………………………………13%
玉米赤霉醇 (1)
五、检测步骤
测定前应须知:
1、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温(20~25℃)。
2、使用之后立即将所有试剂放回2~8℃。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
玉米赤霉烯酮ELISA快速检测试剂盒操作说明书
1、简介
本试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附ELISA原理快速定量检测谷物、饲料中的玉米赤霉烯酮(ZearaLenone,ZEN)。
谷物/饲料的前处理包括:提取、过滤、稀释,处理时间大约为20-40分钟。
本试剂盒的检测限为:10 ppb;谷物/饲料中ZEN的回收率≥80%;批内、批间变异系数<15% 。
2、试剂盒组成
A. 24/48/96孔ZEN酶标板: 3/6/12条×8孔
B. 20×浓缩洗涤液:25mL (用蒸馏水稀释20倍使用) 1瓶
C. ZEN抗体: 3/6/12mL 1瓶(红盖)
D. 酶标二抗:3/6/12 mL 1瓶(绿盖)
E. 显色液:3/6/12 mL 1瓶(蓝盖)
F. 终止液:3/6 mL 1瓶(黄盖)
G. ZEN标准品:1.5/2mL/瓶(0、30、60、200、500ppb)各1瓶
H. 操作说明书1份
注意:标准品含有低浓度ZEN、终止液含2 N H2SO4,需小心取用;勿在有效期外使用本试剂盒。
3、贮存条件与有效期
2-8℃避光贮存,忌0℃以下冻存,有效期见试剂盒内盖。
4、样品处理程序
●实验准备:配制60%甲醇水溶液(v/v,60:40)和20%甲醇水溶液(v/v,20:80)。
注意:请精确配制上述溶液,以免影响检测的准确性。
●称取5 g 具有代表性的粉碎样品于100 mL带塞三角瓶内,准确加入25 mL 60%甲醇水
溶液。
●将加入了甲醇水溶液的样品放入振荡器内(或用手强力振荡),充分振荡3分钟后,用
whatman 1号滤纸过滤,收集滤液。
●取滤液2mL,加入6 mL 20%甲醇水溶液,混匀,用whatman 1号滤纸过滤,此为样品
待检液。
注意:
某些样品待检液(如花生等)久置影响检测结果的准确性,为保证检测的准确性,样品
提取后请即时检测。
若样品待检液不立即检测,请将其存储于棕色玻璃瓶内,2-8℃避光保存。
试剂盒在使用前,请将试剂盒内所有试剂放到室温(20-25℃)进行温度平衡。试剂用完后立即将其放置回2-8℃冰箱内保存。
在每个步骤操作时,速度要快,不要使板孔暴露在空气中时间过久,避免酶标板变干。
未用完的酶标板需密闭于自封带内,防止受潮且避光保存于2-8℃冰箱内。
在温育时,避免光照,建议将酶标板置于湿盒内(在有盖容器内放置一块平整湿纱布)进行温育。
若样品数量超过20份,请用多通道加样器操作。
5、定量检测程序
5.1 实验准备:从冰箱取出试剂盒,恢复至室温后,打开自封袋,取出所需数量的板条插入
微孔架,记录空白、ZEN标准品①②③④⑤号及样品的位置(可参照下表所示)。其余板条封口后放入冰箱。将20×浓缩洗涤液用超纯水或蒸馏水稀释20倍,待用。
5.2加样:空白孔加入100 µL 洗涤液(不加ZEN抗体)。ZEN标准品孔和样品孔相应地加入
标准品(①②③④⑤)和样品待检液各50 µL/孔(如上表所示加入),再加入ZEN抗体(50 µL /孔),此时各孔中溶液体积为100 µL。将酶标板在水平桌面上轻微振荡(注意避免液体溅出),使之混匀,放入湿盒内(在有盖容器内放置一块平整湿纱布),37℃温育30分钟。
注意:此操作步骤要快,尽量保持前后孔温育时间一致,每次加样须更换新的吸头。5.3洗板:甩出孔中的液体,用洗瓶或移液器将洗涤液加入各孔中(满孔),再次甩出孔中液体,将酶标板倒置在吸水纸上拍打以除去孔中的液体,再重复操作洗涤步骤三次(共洗四次)。5.4加酶标二抗:将洗好的酶标板平放,加入酶标二抗100 µL /孔,置于湿盒内,37℃温育30分钟。
5.5洗板:参照5.3
5.6显色:将洗好的酶标板平放,加入显色液100 µL /孔,37℃显色5分钟(若显色较浅,可适当延长,但不宜超过10分钟)。
5.7终止及测定:将显色完毕的酶标板取出,加入终止液50 µL/孔,轻微震荡混匀,以空白孔调零,在450 nm处测量吸光值A(在加入终止液5分钟内读取吸光值)。
5.8结果判定:以ZEN标准品浓度30ppb、60ppb、200ppb、500ppb的常用对数值(1gC)为横坐标,各浓度标准品相应的吸光值A与0ppb的标准品A值的比值(B/B0%)为纵坐标[B/B0%=标准品(或样品)的吸光值/0ppb标准品的吸光值×100%],绘制标准曲线。根据样品孔的吸光值计算样品的B/B0%值,查标准曲线,可得到相应样品中ZEN的含量(已考虑样品提取的稀释倍数,结果无需换算)。(或可直接用RADEWIN 等专用ELISA分析软件对数据进行分析得出结果)。如果检测结果高于检测上限,请将待测样品提取液用30%甲醇水(v/v,30:70)稀释后再检测,测定结果乘以相应的稀释倍数。
6、限量(定性)检测程序
样品处理程序见四,适用于同时定性检测多个限量标准不同的样品,以ZEN标准品③号(60ppb)作参照进行定性比较,不需作标准曲线。待测样品提取液根据限量标准的不同,用30%的甲醇水溶液按下表稀释:
6.1实验准备:从冰箱取出试剂盒,恢复至室温后,打开自封袋,取出所需数量的板条插入
微孔架,记录空白、ZEN标准品③号(60ppb)及样品的位置,其余板条封口后放入冰箱。
6.2反应:空白孔加入100 µL 洗涤液(不加ZEN抗体)。ZEN标准品孔和样品孔相应地加入
标准品③号(60ppb)和稀释后的待检样品提取液各50 µL/孔,再加入ZEN抗体(50 µL /孔),将酶标板在水平桌面上轻微振荡(注意避免液体溅出),使之混匀,置湿盒内,37℃温育30分钟。注意:此操作步骤要快,尽量保持前后孔温育时间一致,每次加样须更换新的吸头。
6.3洗板:参照5.3
6.4加酶标二抗:参照5.4
6.5洗板:参照5.5
6.6显色:参照5.6
6.7终止及测定:参照5.7 (目测法不加终止液)
6.8结果判定:目测法(未加终止液前目测):比较样品孔与标准品参照孔的颜色,若样品孔显色比标准品参照浅,则为阳性,样品中ZEN的含量超出限量标准;若深者,则为阴性;若颜色接近,则需用酶标仪测吸光值比较。仪器法:酶标仪检测在450nm波长处各孔的吸光值A,若样品的A值<标准参照的A值,为阳性,表示样品中ZEN的含量超出限量标准;若样品A值≥标准参照A值,为阴性。
7、自备仪器及试剂