药物制剂的微生物学检查
微生物限度检查概述及方法
微⽣物限度检查概述及⽅法微⽣物限度检查概述及⽅法第⼀部分药品微⽣物限度检查原理；⼀微⽣物学基本原理（⼀）、微⽣物的概念和类别；所谓微⽣物（microorgamisms）是⼀群个体微⼩结构简单⾁眼不能直接看到，必须借助显微镜以及其它⼿段才能辨别微⼩⽣物。
1、结构类型按微⽣物细胞结构和组成不同可分原核细胞型微⽣物：代表（细菌）真核细胞型微⽣物：代表（真菌）⾮细胞型微⽣物：代表（病毒）2、营养类型根据微⽣物的不同营养要求，可分为⾃养型和异养型两类，⼜以所利⽤能源的来源不同，分为化能营养型和光能营养型。
药品中所污染的微⽣物，从营养型⾓度看，他⼤多数异养型，且以腐⽣性和兼性寄⽣性化能异养型为主，容易⽤⼈⼯培养繁殖，是药品进⾏⽆菌及限度检查的最基本原理。
3、影响微⽣物⽣长繁殖的因素1）物理因素：温度、湿度、渗逶压、辐射2）化学因素：营养物质、酸碱度、氧、有毒物质：其影响微⽣物⽣长的机制主要有a 使菌体蛋⽩变性或沉淀b ⼲扰微⽣物酶系统各的影响其代谢c 损伤微⽣物细胞膜，使内容物逸出。
3）⽣物因素。
在微⽣物之间，微⽣物与寄主动植物之间均存在着各种互相作⽤的关系，主要为寄⽣、共⽣、拮抗关系等。
噬菌体与寄主菌、细菌素对某些细菌的抗菌作⽤，就是⽣物因素的具体表现。
四、微⽣物代谢及其在⽣长检定中的意义微⽣物⽣化鉴定试验，所使⽤的基本原理，就是利⽤微⽣物所物有的代谢反应，其中⼤部分波及到酶的反应1）微⽣物主要代谢内容A、呼吸作⽤-根据微⽣物呼吸作⽤最终电⼦受体性质分为呼吸作⽤，⽆氧呼吸作⽤及发酵作⽤三种，⽆本质区别，都是物质被氧化，同时另⼀物质被还原只是物质被氧化分解程度和释放⽔平不同。
相关的⽣化鉴反应如过氧化氢酶试验，硝酸盐还原试验，氰化钾试验等。
B、糖的分解有关的⽣化鉴定反应如糖（醇、苷）类发酵试验，葡萄糖的氧化/发酵试验，甲基试验，甲基红试验，VP试验C、蛋⽩质和氨基酸的分解相关⽣化鉴定试验如吲哚试验、明胶液化试验、硫化氢试验等。
二部、四部通则微生物检测法
二部、四部通则微生物检测法
二部、四部通则微生物检测法是《中华人民共和国药典》中的重要组成部分，用于检查药品中微生物的污染程度。
二部通则微生物检测法主要用于检测药品中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数，以及控制菌检查。
其中，需氧菌总数检查需要取适量药品，用薄膜过滤器过滤，然后将滤膜放入培养基平板上培养计数。
四部通则微生物检测法主要用于检查中药材及中药饮片的微生物污染程度，检查项目包括需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数、耐胆盐革兰阴性菌、大肠埃希菌和沙门菌。
其中，耐热菌总数检查需要将供试液置水浴中处理30分钟，然后按照需氧菌总数测定方法进行检测。
在进行二部、四部通则微生物检测时，试验环境应符合微生物限度检查的要求，检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。
药物制剂的微生物学检查
微生物与药学
2. 2.琼脂扩散法 利用药物在琼脂培养基中扩散，并在一定浓度范围内抑制细菌 生长的原理进行的。一般用于细菌和酵母菌的药敏试验。
于新药的初筛试验（初步 药物是否有抗菌作用）及临床的药敏试验（细菌药物第三 性试验、以便选择用药）。滤纸片分湿、干两种，可以在 试验时用无菌纸片沾取药物溶液放在含菌的平板表面，也 以预先做成一定浓度的干燥纸片。一般来说预先做成的干 燥纸片实用一些而且准确一些。
微生物与药学
第一节 药物的体外抑菌试验
一、药物的体外抑菌试验 （一）体外抑菌试验 药物的体外抑菌试验是常用抗菌试验方法，其中最常用 的方法用系列稀释法和琼脂扩散法。
稀释法 稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法（斜面法） 两种。这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度 （MIC）：是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度，通 常用μg∕ml或U/ml表示。 具体的液体培养基连续稀释法见书本（P138图8-1），
微生物与药学
三、影响抗菌试验的因素
1. 菌种 在抗菌试验中所用到的菌种，必需是国家
卫生部生物制品检定所菌各保藏中心专门提供 的标准菌株。在特殊情况下，也可以采用临床 新分离的并经过鉴定、纯化及合理保藏的菌株。 而且我们要用到的试验菌种应该选择是对数期 生长的菌。因为那时菌种生命力最旺盛，这对 于我试验测定的结果也会准确些。
微生物与药学
抗菌药物
纸片含药量 （ug）
丁胺卡那霉素
30
头孢唑啉
30
先锋霉素I
75
头孢噻吩
30
头孢噻甲羧肟
30
氯霉素
30
红霉素
15
庆大霉素
10
药物制剂的微生物学检查
检查结果的异常分析
异常指标识别
根据检查结果，识别异常的微生 物学指标，如菌落总数超标、霉
菌和酵母菌数过多等。
原因分析
对异常指标进行深入分析，探究 可能的原因，如生产过程中灭菌 不彻底、存储条件不当、原材料
污染等。
风险评估
根据异常指标的严重程度，评估 其对药物制剂质量和安全性的影
响，以及可能产生的风险。
菌和酵母菌计数，以及控制菌检查等内容。
药品生产质量管理规范（GMP）
02
要求制药企业必须建立严格的微生物控制体系，确保药品生产
过程中的微生物污染得到有效控制。
药品注册管理办法
03
规定药品注册时必须提交微生物方面的相关资料，包括微生物
限度、无菌保证水平等。
国际标准与法规
1 2
国际药典（Ph. Int.） 由世界卫生组织（WHO）和国际制药联合会 （IFP）共同制定，为各国药典的制定提供了参 考。
05
药物制剂的微生物学检 查技术发展
新技术介绍与应用
01
02
03
自动化检测系统
通过集成样品处理、检测 和分析等步骤，提高检测 效率，减少人为误差。
基因检测技术
利用基因测序等方法，快 速、准确地检测微生物种 类和耐药性。
生物感器技术
通过生物传感器对微生物 代谢产物进行检测，实现 快速、灵敏的微生物检测。
预防疾病传播
微生物学检查可以检测出可能携带病 原体的微生物，从而预防疾病传播， 保护公众健康。
微生物学检查的方法与标准
方法
包括细菌计数、霉菌和酵母菌计数、 支原体检测、细菌内毒素检测等。
标准
根据不同药物制剂的国家标准和行业 标准，规定了各种微生物的限量要求 和检测方法。
原料药及药物制剂稳定性重点考察项目参考表--药典规定
原料药及药物制剂稳定性重点考察项目参考表--药典规定原料药及药物制剂的稳定性是指其在一定条件下的化学、物理和微生物学性质的变化情况。
稳定性研究是制药过程中非常重要的一个环节，可以评估药物质量的可靠性和持久性，并为药物的保质期确定提供依据。
药典规定了一些重点考察项目，以下是一些常见的参考表：1.化学性质的稳定性：-pH值：药物溶液或悬浮液的pH值的变化可以影响药物的稳定性和溶解性。
药典规定了一些药物的pH范围和变化限制。
-氧化物和还原物的含量：药品中存在的氧化物或还原物会对药物的稳定性产生影响。
药典规定了一些药物中氧化物和还原物的含量限制。
-水含量：水分含量会影响药物的稳定性和保质期。
药典规定了一些药物中水含量的限制。
2.物理性质的稳定性：-外观：药物制剂的外观应符合药典规定的标准，如颜色、透明度、颗粒大小等。
-凝胶和离析：有些药物制剂容易形成凝胶或发生离析现象，药典规定了这些物理性质的稳定性要求。
3.微生物学的稳定性：-微生物污染：药物应符合药典规定的微生物限度，以确保其不受细菌、真菌等微生物的污染。
4.抗氧化性：-氧化危害：一些药物容易被氧化而降解。
药典规定了一些药物的抗氧化性要求，如添加抗氧化剂或以惰性气体保护药物。
此外，药典还规定了一些特定药物的稳定性要求，如抗肿瘤药物、抗生素等。
这些药物具有特殊性和易变性，对稳定性要求更高。
总之，药典规定的稳定性考察项目是制药过程中非常重要的参考，可以评估药物的质量和可靠性。
制药企业需要根据这些参考表来开展稳定性研究，并根据实验结果进行调整和改进，以确保药物的质量和稳定性。
药物制剂微生物学检查
药物制剂微生物学检查
药物制剂微生物学检查是通过对药物制剂中的微生物进行检测和分析，以确定其微生物污染的程度和类型。
这个检查的目的是确保药物制剂的质量和安全性。
药物制剂微生物学检查通常包括以下内容：
1. 细菌检查：使用培养基和相关的培养技术，检测药物制剂中是否存在细菌污染。
常见的方法包括菌落计数、肉汤稀释法、滤膜法等。
2. 真菌检查：使用培养基和相关的培养技术，检测药物制剂中是否存在真菌污染。
常见的方法包括菌落计数、真菌培养、荧光显微镜检查等。
3. 真空法检查：使用真空吸引药物制剂样品到微孔滤膜上，然后将滤膜移植到培养基上进行菌落计数和分析。
4. 内毒素检查：使用内毒素试剂盒，检测药物制剂中是否
存在内毒素污染。
常见的方法包括内毒素抑制试验、内毒
素检测试纸法等。
5. 孢子检查：使用染色方法，检测药物制剂中是否存在孢
子污染。
常见的方法包括热耐受试验、营养条件筛选法等。
药物制剂微生物学检查是药品质量控制的重要环节，可以
有效预防和控制微生物污染对药物制剂的影响，确保药物
制剂的质量和安全性。
微生物学在制药工程专业中的应用
微生物学在制药工程专业中的应用自古以来，人类在日常生活和生产实践中，已经觉察到微生物的生命活动及其所发生的作用。
中国的《神衣本草经》中，有白僵蚕治病的记载。
《左传》中，有用麦曲治腹泻病的记载。
《医宗金鉴》中，有关于种痘方法的记载。
1796年，英国人琴纳发明了牛痘苗，为免疫学的发展奠定了基石。
什么是微生物？微生物是肉眼看不见或看不见的所有微生物的总称。
它们都是低水平生物，体积小（一般<0.1mm），结构简单。
微生物学是生物学的一个分支。
它在分子、细胞或种群水平上研究各种微生物的形态结构、生长繁殖、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动的基本规律，并将其应用于工业发酵领域，医疗卫生和生物工程。
其根本任务是探索、利用和保护有益微生物，控制、消除或转化有害微生物，为人类社会进步服务。
本文主要研究微生物学在制药工程中的应用。
一、微生物学在制药专业的重要性在药理学中，抗生素的作用机制需要与真菌和细菌细胞结构的分析联系起来。
抗菌药物主要有四种作用机制：第一，抗菌药物抑制细胞壁的形成；第二，当细胞膜起作用时，抗生素可以抑制它；第三，细菌细胞蛋白在形成过程中会受到抗生素的影响；第四，细菌在形成过程中会受到抗生素的抑制。
在药物制剂中，微生物一旦将药物污染后，将会分解药物中的有效成分，改变药物的性质，进一步促使药物失去效果，除此之外，存在于药物中的代谢微生物也会给人们身体带来损伤。
为了尽量避免污染微生物，需要在清洁、干净的室内生产药物制剂。
决定清洁室内空气清洁度的是药物的品级、试剂类型、生产环节等步骤所产生的质量技术要求。
gpm在此方面也做出了详细的要求。
在生物制药发酵过程中，最关键的因素是微生物。
微生物也是生物制药的重要物质来源。
微生物发酵技术是获得生物制药原料的主要途径。
因此，微生物菌种的培养和保存、微生物的培养以及微生物发酵的全过程控制已成为生物制药技术的保障。
大多数微生物产品是由微生物或其加工代谢产物制成的。
药物的制剂检验法
药物的制剂检验法药物的制剂检验法是药学中重要的一项研究内容。
通过对药物制剂的检验，可以确保药物的质量，保障患者的用药安全。
本文将介绍一些常见的药物制剂检验法及其原理和应用。
一、理化性质检验法1. 外观检验法外观检验法是一种对药物制剂外观特征进行评估的方法。
通过观察药物颜色、形状、气味等外观特征，可以初步判断药物的质量。
2. pH值测定法pH值是描述溶液酸碱性的指标，药物制剂的pH值可以反映其适应性和稳定性。
常用的pH值测定法包括玻璃电极法和指示剂法。
3. 溶解度测定法溶解度是药物在溶剂中能够溶解的程度，常用于评估药物的物理性质和溶解度特性。
溶解度测定法可以根据药物在不同溶剂中的溶解度来评估药物溶解度特性。
二、质量控制检验法1. 含量测定法含量测定法是评估药物中活性成分含量的方法。
常用的含量测定法包括比色法、色谱法、滴定法等。
通过测定药物中活性成分的含量，可以确保药物的疗效和安全性。
2. 可溶性和可溶出性测定法可溶性和可溶出性测定法用于评估药物制剂中溶解的活性成分。
药物的可溶性和可溶出性直接关系到药物的溶解速度和溶解度特性。
常用的可溶性和可溶出性测定法包括溶出度测定法、相对溶出度测定法等。
3. 残留溶剂测定法残留溶剂测定法用于评估药物中残留的有机溶剂量。
有机溶剂是药物制剂过程中常用的溶剂，但过高的残留溶剂会对用药安全造成潜在风险。
常用的残留溶剂测定法包括气相色谱法、气相色谱-质谱联用法等。
三、微生物检验法1. 细菌限度检验法细菌限度检验法用于评估药物制剂中细菌的污染情况。
常用的细菌限度检验法包括总大肠菌群检验、金黄色葡萄球菌检验等。
通过细菌限度检验，可以确保药物制剂符合微生物质量标准。
2. 真菌限度检验法真菌限度检验法用于评估药物制剂中真菌的污染情况。
常用的真菌限度检验法包括霉菌限度检验、酵母菌限度检验等。
真菌的污染会导致药物的变质和安全问题，因此真菌限度检验对于药物质量控制至关重要。
四、稳定性检验法稳定性检验法用于评估药物制剂在储存期间的稳定性和可持续性。
药物的体外抗菌试验药物制剂的微生物学检查
三、耐药性的控制
1 、避免耐药菌传播（医院） 2 、合理用药 （1）抗生素可不用尽量不用，使用时应足量。 （2）合理联合用药 3、 抗耐药菌新抗生素的寻找，如酶抑制剂抗生 素等。 4 、耐药机制的研究—耐药规律寻找，有助于合 理用药。
四、耐药性和青霉素酶的测定
1 、耐药性—药敏试验 2 、青霉素酶 耐药菌接平板培养 →加含青霉素的淀粉 → 加I2出现透明圈（eg.金葡菌产酶 株）。
医疗用抗生素的特点
差异毒力大 生物活性强、有不同抗菌谱 不易使病原菌产生耐药性 毒副作用小，不易引起超敏反应 半衰期长，生物利用度高
抗生素的分类 抗生素产生菌的分离和筛选 抗生素的制备 抗生素的生物合成 抗生素的主要作用机制 抗药性 抗生素的单位及效价测定
（1）按化学结构分类
ß-内酰胺类—青霉素、头孢菌素等 四环类—四环素、土霉素、金霉素 氨基糖苷类—链霉素、卡那霉素、庆大霉素 大环内酯类—红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素 多肽类—多黏菌素、杆菌肽等 多烯类—制霉菌素、两性霉素B、万古霉素 苯羟基胺类—氯霉素 蒽环类—柔红霉素、阿霉素 环桥类—利福霉素 其他
平板倍比稀释法
目前抗生素的临床前研究一般采用此法。平板倍比稀释法是 根据药物在琼脂培养基中扩散的原理，将细菌接种在含有不 同浓度抗生素的平板上恒温培养16~18小时，可抑制细菌生长 的最低药物浓度为最低抑菌浓度（MIC），可杀灭细菌的最低 药物浓度为最低杀菌浓度（MBC）。MIC或MBC值愈小，则药 物的抑菌或杀菌作用愈强。
磺胺类耐药菌株合成了对磺胺不敏感的二氢叶酸合 成酶，而引起耐药。 （靶位的改变）
喹诺酮类耐药菌的gyrA(gyrase)基因突变，DNA螺 旋酶A亚单位的变化，对该类药物不敏感。其中， gyrase（DNA旋转酶）为一种类型的拓扑异构酶， 引入负超螺旋至闭环双链DNA中。 （靶位的改变）
药物制剂微生物检
产生毒素
微生物在药物制剂中生长繁殖过 程中可能会产生毒素，对人体造 成危害。
改变药物制剂性质
微生物的生长繁殖可能会改变药 物制剂的理化性质，如颜色、气 味等，影响药物制剂的质量和稳 定性。
03
药物制剂微生物检测的实验 方法
实验前生理盐水、酒 精灯等实验器材，确保
加强国际间的合作与交流，共同推动药物制剂微生物安全性评价体系的建立与完善。
感谢您的观看
THANKS
准确性和效率。
药物制剂微生物安全性评价体系的建立与完善
完善微生物限度标准和检测方法
根据药物制剂的特点和安全性要求，制定更加科学、合理的微生物限度标准和检测方法。
加强风险评估与风险管理
建立药物制剂微生物安全性评价体系，对不同药物制剂中的微生物进行风险评估，制定相 应的风险管理措施。
强化国际合作与交流
接种培养
将稀释后的样品接种于相应的培养基上，在 适宜的温度和湿度条件下进行培养。
染色鉴定
对有需要的微生物进行染色鉴定，以便更准 确地识别其种类。
实验结果分析与报告
结果分析
根据观察记录和染色鉴定的结果， 分析微生物的种类、数量等参数， 判断药物制剂是否符合质量标准。
撰写报告
根据分析结果撰写药物制剂微生物 检测报告，包括实验目的、方法、 结果和结论等内容。
02
药物制剂中微生物的来源与 危害
微生物的来源
01
02
03
生产原料
药物制剂的生产原料可能 携带微生物，如未能彻底 清洁或灭菌，会导致微生 物污染。
生产环境
生产车间、设备、容器等 可能成为微生物的滋生地， 如清洁和消毒不彻底，会 导致微生物污染。
人员操作
药物制剂的微生物学检查
❖ 方法是将所要检测菌的相应阳性对照菌株，稀释成每毫升含 活菌1000个的菌液，将其0.lml吸到待检药品的相应培养液 中，在同等条件下进行检测。如果阳性对照菌生长良好，说 明检测结果有效。
h
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活螨的检验
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37
h
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沙门菌
❖ 寄生于人和动物的肠道内，能引起伤寒、 副伤寒、急性胃肠炎（食物中毒）和败血症。
h
24
1、革兰阴性，杆菌
2、分离培养：
❖ EMB平板上菌落无色或粉红色。
3、生化反应： 4、血清学反应： ❖ 凝集反应： ❖ 抗原——可疑菌， ❖ 抗体——沙门菌A-F组的多价血清（抗O抗体）
h
25
❖ O抗原： ❖ 细菌细胞壁脂多糖中的特异性多糖，100℃不被破
h
20
❖ 检测时先把一定量药均经增菌后转种到选 择鉴别培养基——麦康凯平板或伊红美兰平 板（EMB平板）。
❖ 培养后挑取可疑菌落作革兰染色及生化反应。 生化反应包括 IMViC试验和乳糖发酵试验。 大肠杆菌IMViC试验结果为+、+、—、—
h
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❖ 大肠杆菌的鉴定主要靠形态和生化反应两方面 的特征。
h
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❖ 毒力试验和保护力试验
取破伤风杆菌液体培养物于小鼠后肢肌肉 注射，动物发病时，腿及尾巴强直，肢体痉 挛，最后死亡。
在对照组动物中，先注射破伤风抗毒素， 再注射液体培养物，则该动物得到特异性保 护。
h
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❖ 上述致病菌检测时，皆需同时作相应细菌的阳性对照试验， 即与药品检测同步用阳性对照菌作对照试验。
５天 ７天
药物制剂微生物检验
药物制剂微生物检验一、概述药物制剂微生物检验是确保药品质量和安全性的重要环节。
它通过对药品制剂中微生物的种类、数量和活性进行检测和分析，确保药品符合相关法规和质量控制标准，保障公众的健康和安全。
本文将探讨药物制剂微生物检验的基本概念、检验方法和实际应用。
二、药物制剂微生物检验的基本概念药物制剂微生物检验主要包括细菌、真菌、病毒等微生物的检测。
这些微生物可能对药品质量和公众健康构成威胁。
例如，某些细菌和真菌可能会引起药品污染，而病毒则可能引发感染。
因此，进行药物制剂微生物检验是十分必要的。
三、药物制剂微生物检验的方法1、细菌学检验：通过培养、分离、鉴定细菌，检测细菌种类和数量，评估药品制剂的细菌污染程度。
2、真菌学检验：通过培养、分离、鉴定真菌，检测真菌种类和数量，评估药品制剂的真菌污染程度。
3、病毒学检验：通过检测病毒的核酸、蛋白质等成分，鉴定病毒种类和活性，评估药品制剂的病毒感染风险。
4、生物安全实验室：为了确保药物制剂微生物检验的准确性和安全性，通常需要在生物安全实验室中进行检验。
这些实验室具备特殊设备和条件，可以防止微生物外泄，保障检验人员的安全。
四、药物制剂微生物检验的实际应用1、新药研发：在新药研发过程中，药物制剂微生物检验有助于评估新药的抗菌、抗真菌和抗病毒效果，为新药的研发和优化提供依据。
2、药品质量控制：通过对药品制剂进行微生物检验，可以评估药品生产过程中的质量控制情况，确保药品符合相关法规和质量标准。
3、感染预防：通过对药品制剂进行病毒学检验，可以评估药品的抗病毒效果，为预防和治疗病毒感染提供参考。
4、公众健康保障：通过药物制剂微生物检验，可以保障公众使用的药品安全、有效，防止药品污染和病毒感染。
五、结论药物制剂微生物检验是保障药品质量和安全性的重要环节。
通过对药品制剂中微生物的种类、数量和活性进行检测和分析，可以确保药品符合相关法规和质量控制标准，保障公众的健康和安全。
未来，随着微生物检测技术的发展和药物制剂研究的深入，药物制剂微生物检验将在新药研发、药品质量控制、感染预防和公众健康保障等方面发挥更大的作用。
药品微生物检测项目
药品微生物检测项目
微生物检测分为染菌量检测和控制菌检测，其中药品微生物限度检测的内容有以下三个方面：
-细菌数检测：细菌数测定是衡量药品卫生质量的重要指标。
-真菌数检测：包括霉菌、酵母菌数检测。
细菌、真菌数测定是对染菌量检测，是检测单位质量、体积或面积（g、ml或10cm²）的药品中所污染活菌数量。
其测定结果可用于判断药品被污染的程度，用于评价药品卫生质量。
-控制菌检测：非规定灭菌制剂不但要控制微生物的数量，同时不允许含有致病菌。
此外，无菌检查、微生物无限度检查、细菌内毒素、热原质检查也是药品微生物检测的重要项目。
药物微生物学与制剂防腐的研究
药物微生物学与制剂防腐的研究近年来，随着医药领域的发展和人们对药物安全性的要求日益提高，药物微生物学与制剂防腐的研究也变得越来越重要。
本文将探讨微生物学在药物制剂防腐中的应用以及相关研究的进展。
一、药物微生物学概述药物微生物学是一个综合学科，它研究的是药物和微生物之间的相互作用。
微生物在药物中的污染和繁殖会导致药物的质量下降以及对患者的安全构成威胁。
因此，了解和控制药物中的微生物是至关重要的。
在药物微生物学中，主要研究对象包括细菌、真菌和病毒等微生物。
这些微生物对药物具有不同的影响，比如细菌可以引起变质和腐败，真菌可以生成毒素，病毒可以传播疾病。
因此，研究药物中的微生物是为了保证药物的质量和安全性。
二、药物制剂防腐的重要性药物制剂防腐是指在制药过程中采取的各种措施来防止微生物的污染和生长。
药物制剂中的微生物不仅会导致药物的变质，还可能对患者的健康造成损害。
在药物制剂中，微生物的污染来源多种多样，比如原材料、制药设备、包装材料等。
因此，对药物制剂进行有效的防腐是保证药物质量和患者安全的关键。
只有有效控制药物中微生物的生长，才能确保药物有效性和稳定性。
三、药物微生物学在药物制剂防腐中的应用1. 质量控制药物微生物学可以用于药物制剂的质量控制。
通过对药物中微生物的检测和分析，可以及时发现污染源并采取相应的措施进行控制。
常用的质量控制方法包括微生物计数法、细菌培养法和PCR等。
2. 预防措施预防是药物制剂防腐的重要环节。
根据药物制剂的特点和微生物的分布情况，采取合适的预防措施可以有效地减少微生物的污染和生长。
比如，在制药过程中加入一定浓度的防腐剂可以抑制微生物的生长。
3. 新技术研究近年来，随着科技的不断进步，一些新的技术也被引入到药物微生物学和制剂防腐的研究中。
比如，基因工程技术可以用于研发新型的抗菌药物，纳米技术可以制备具有抗菌性能的材料，微生物生态学可以优化生产环境等。
四、药物微生物学与制剂防腐的研究进展目前，对药物微生物学和制剂防腐的研究已经取得了一些重要的进展。
药物制剂微生物检验
三、控制菌检查－检查流程
供试品
增菌培养
分离培养
纯培养
报告结果 生化反应试验 染色镜检
三、控制菌检查－ 检查流程
1.增菌培养目的
使被检药物中的被 检菌增殖，避免出 现漏检。
三、控制菌检查－检查流程
2.分离培养目的
经增殖培养后,被检菌大量繁殖， 同时其他一些杂菌也出现增殖。 因此分离培养能使目的菌从混合 菌中分离出来。
分
菌 18-24h 离 24-72h
培 30-35℃ 纯 30-35℃
养
化
有浑浊带
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
★金黄色葡萄球菌检查流程图
01
卵黄氯化 钠琼脂
★大肠埃希菌
俗称大肠杆菌，属肠 杆菌科埃希菌属，革 兰阴性杆菌，兼性厌 氧菌，能发酵多种糖 产酸产气。
01 控 制 菌 检 查 － 大 肠 埃 希 菌 检 查
02
大肠埃希菌检查意义
大肠埃希菌为条件致病菌，当人体免疫力低下或是侵入肠外组织、器官，可引 起肠外感染，乃至败血症。也可随人和动物的粪便排出体外，污染环境，一旦 食品、药品、水等物品中检出该菌，说明已受粪便污染，可能存在其他肠道致 病菌和寄生虫卵，人们饮用或服用它们则可能引起消化道传染病。
三、控制菌检查－铜绿假单胞菌检查
胆盐乳糖培养基
十六烷三甲基 溴化铵琼脂
灰白色、扁平、
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
增
分
菌 18~24h 离 18~24h
培 30-35℃ 纯 30-35℃
微生物在药学中应用精选全文
以春、秋两季采土为宜。去除表土， 采取5-
10cm深处的土壤，装入无菌容器。
2、分离菌株 将2-4克土壤均匀散布水中 待其沉降，上清部分经适当稀释后（一般 为10-3-104），涂布于适宜培养基中，并培 养至单菌落出现，挑取单个菌落移种纯 培养，根据菌落的特征，初步排除相同 菌。
二、筛选 ：是指从大量待筛选微生物中，尽快 地鉴别出有实用价值的抗生素产生菌的实验过程。
（3）氨基糖苷类抗生素（氨基环醇类）
[来源] 包括很广的由链霉菌、小单孢菌和芽孢 杆菌产生的物质。
[化学特征] 具有环状氨基醇和与之相连的氨基 糖。葡萄糖是氨基醇和氨基糖的来源。
[作用机制] 以不可逆的方式作用于核糖体而抑制 蛋白质的合成，具有杀菌作用，主要作用革兰 阳性菌。
[代表药物] 链霉素（第一个发现，也是第一个对 抗生素有效的抗生素）、卡那霉素、庆大霉素、 妥布拉霉素和丁安卡那霉素。
抗生素：是一个低分子量（指一个 分子有一定的化学结构，其相对质 量最大可达数千）的微生物代谢产 物，在低浓度（﹤1mg/ml）时能抑 制其他微生物生长。
医疗用抗生素需要以下要求：
1、差异毒力大
是指微生物或肿瘤细胞等靶体的抑制或杀灭作 用，与其对机体损害程度的差异比较。抗生素 的差异毒力 愈大，则愈有利于临床应用。如青 霉素能抑制细菌细胞壁的合成，而人及哺乳类 动物细胞不具备细胞壁，因而青霉素的差异毒 力大。一般的化学消毒剂对微生物和机体的毒 力无明显差异。
1、抗生素产生菌的鉴别 通过形态、培养、生 化反应等实验对抗生素产生菌进行初步的分类 鉴定。
2、抗生素的鉴别
常用理化方法如： 纸层析法 测定抗生素的极性和在
各种溶媒中的溶解度。 纸电泳法 判断抗生素是酸性、碱性、
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O抗原：
细菌细胞壁脂多糖中的特异性多糖，100℃不被破
坏。至少有58种，可将沙门菌分为多个组。引起人
类疾病的为A-E组。
H抗原： 鞭毛抗原，不耐热，60 ℃，30分钟被破坏。
绿脓杆菌
绿脓杆菌为条件致病菌，对烧伤、眼科疾 病等病人可因感染后病情加重，造成患者创
伤处组织化脓，严重的可引起败血症、眼角
它能判明待检药品被细菌污染的程度，生 产单位的原料、设备及工艺流程的卫生状况。
方法：普通琼脂培养基倾注平皿计数法。 37℃，72小时 将一定稀释度的药物和琼脂培养基混合后，培 养一定时间，计数平板内的菌落，根据数得菌落均 值和相应稀释度的乘积，得到每克或每毫升待检药
品中所含细菌总数，判断药品是否符合标准。
目的是检测待检药品本身有无干扰因素（如抑菌或防腐成 分）；以及所用常规检测方法的灵敏度。
方法是将所要检测菌的相应阳性对照菌株，稀释成每毫升含
活菌1000个的菌液，将其0.lml吸到待检药品的相应培养液 中，在同等条件下进行检测。如果阳性对照菌生长良好，说 明检测结果有效。
活螨的检验
螨本身带有各种病原菌，除了直接危害 人体健康外，还能传播一些疾病，如引起皮
方面有相似之处，而产气杆菌一般多存在于水中，
无卫生学意义。因而检测大肠杆菌要与产气杆菌相
鉴别。二者的鉴别一般采用IMViC试验（I——吲哚 试验，M——甲基红试验，Vi——V．P．试验， C——椽枸酸盐利用试验）来鉴定。
如检测结果为革兰阴性杆菌，乳糖发酵 阳性及IMViC试验符合，则可判断每克或每
药物制剂的 微生物学检查
无菌制剂的无菌检查
各种注射剂、手术用滴眼剂要求无菌、 无热原质，尤其是直接注入病人血管内的注 射剂，如被微生物或热原质污染即有可能引 起发热、菌血症、中毒性休克甚至死亡等等。 因此药典规定出厂前都必须做无菌检查以确 保安全。
无菌检查的基本原则：
在无菌操作情况下将被检测的药品，按 其剂型的不同分别取一定量加入适合各类微 生物生长的不同培养基（需氧菌、厌氧菌及 真菌培养基）中，在各自适宜的条件下进行 培养。在规定时间内观察有无微生物生长， 以判断药品是否符合要求确为无菌。
毒力试验和保护力试验 取破伤风杆菌液体培养物于小鼠后肢肌肉 注射，动物发病时，腿及尾巴强直，肢体痉 挛，最后死亡。 在对照组动物中，先注射破伤风抗毒素， 再注射液体培养物，则该动物得到特异性保 护。
上述致病菌检测时，皆需同时作相应细菌的阳性对照试验，
即与药品检测同步用阳性对照菌作对照试验。
１、油剂性药物的检测 油剂性药物因难于和培养基充分混合，往往影
响检出结果。如果加入吐温－80，与油剂性药物混
合乳化，再用培养基稀释，可以使药品均匀分布在 培养基中。
对照：吐温－80 。
２、含抑菌或防腐成分药物的检测 有些药品本身含有抑菌成分，或于制作 过程中加入防腐剂等，如按上法检测往往不 能证明它们是否真正无菌 ，必须先经一定的 处理。 灭活法、稀释法、微孔滤膜过滤法和离心沉 淀集菌法
病原菌检验
大肠杆菌 沙门菌 绿脓杆菌 金黄色葡萄球菌 破伤风杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌是人、畜肠道主要寄生菌。它随粪便 排出体外，故常作为食品、饮水等被粪便直接或间 接污染的指示菌。
如药品中检出大肠杆菌，表明该药品已被粪便
污染，可能有肠道致病菌和寄生虫卵等病原体存在， 服用后有被感染的危险性。因而，不能用灭菌方法 处理的口服药物，大肠杆菌检测是常规项目之一。
一般注射剂 系指本身不含任何抗菌或抑菌成分，而且 其为水溶性的药品的无菌检查 特殊注射剂 油剂性药物 含抑菌或防腐成分药物
一般注射剂的无菌检查
直接接种法
需氧菌和厌氧菌的培养已全部采用硫乙醇酸 钠培养基检查。在同一培养基中，需氧菌在 培养基表面生长，而厌氧菌在培养基内生长。 真菌检查用真菌培养基
破伤风杆菌
破伤风杆菌广泛存在于土壤及人和牲畜 的粪便中。以根，茎、叶类植物为原料的中 草药制剂特别易受破伤风杆菌污染，在条件 合适时感染伤口引起病变。
因此用于深部组织、创面和溃疡面的外 用制剂不得检出破伤风杆菌。
检测时首先把待检药品加入到0.1％葡萄糖庖 肉培养基中进行增菌产毒培养。 根据培养基所表现出的破伤风杆菌生长特有 的现象（产气、有恶臭味、消化庖肉），再 经革兰染色及动物毒力试验和保护力试验证 实。如找到革兰阳性破伤风杆菌的典型形态， 毒力试验和保护力试验阳性，可确证存在破 伤风杆菌。
薄膜滤菌器
口服药及外用药物 的微生物学检查
口服药：细菌总数、霉菌总数、大肠杆菌、活螨的 检测。 外用药：绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和破伤风杆菌。 一般眼科制剂：细菌总数、霉菌总数、绿脓杆菌、
金黄色葡萄球菌。
均不能检出致病菌。
细菌总数测定
细菌总数，指每克或每毫升待检药品内含 有的活菌总数。
金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌是最常见的化脓性球菌之一，80%以上 的化脓性疾病由本菌引起。 它广泛分布于自然界中，常可污染药品及食品，也经常 存在于人的皮肤及某些腔道中。在制药过程中可被混入药品 内，在条件合适时引起疾病。因而目前规定，凡外用药和眼 科制剂不得检出金黄色葡萄球菌。
药物在检测时先经亚碲酸钠肉汤增菌， 然后转种选择培养基（如甘露醇高盐琼脂、 卵黄高盐琼脂等）经培养后挑取可疑菌落作 革兰染色及生化反应。根据选择培养基上典 型菌落、革兰阳性菌、发酵甘露醇及血浆凝 固酶阳性。可得出结论，检测到金葡菌。
膜溃疡甚至失明。
将被检药品经增菌后转种明胶十六烷三甲 基溴化胺琼脂平板上，经培养后根据菌落特
征、蓝绿色色素、革兰阴性杆菌，氧化酶试
验和绿脓菌素试验均阳性，可得出结论。
氧化酶试验 细菌的氧化酶能将二甲基对苯二胺脱氨而 成带有红色的醌类化合物。 绿脓菌素试验 绿脓菌素溶于氯仿内，加入盐酸变成粉红色
硫乙醇酸钠培养基
硫乙醇酸钠 还原剂 亚甲蓝 氧化还原指示剂 下层 －－ 厌氧 －－ 无色 上层 －－ 需氧 －－蓝绿色
阳性对照： 需氧菌：藤黄八叠球菌 厌氧菌在培养基中加入对照菌。 意义：阳性对照必须长菌，证明微生物确实 可在应用的实验条件下生长。
毫升药品检出大肠杆菌。
沙门菌
寄生于人和动物的肠道内，能引起伤寒、 副伤寒、急性胃肠炎（食物中毒）和败血症。
1、革兰阴性，杆菌 2、分离培养：
EMB平板上菌落无色或粉红色。
3、生化反应： 4、血清学反应： 凝集反应： 抗原——可疑菌， 抗体——沙门菌A-F组的多价血清（抗O抗体）
阴性对照： 用未加药物和对照菌的培养基
意义：证明培养基本身无菌。
测试时用无菌操作法吸取一定量的药物加 入各种培养基内在适宜的温度下培养，并每 天观察作出记录。如在规定时间内无任何微 生物生长则可判定待检药品符合标准. ５天 ７天
需氧菌、厌氧菌：37℃ 真菌： 25℃
特殊注射剂的无菌检查
炎、过敏性哮喘，消化道、泌尿道和呼吸道
疾病。
螨是属节肢动物门、蜘蛛纲、螨目的一类微 小动物。它的分布很广泛。螨体约0.5mm 大 小，似面粉状，显微镜下观察呈圆形或椭圆 形的囊状。 直接检测法、漂浮法、分离法和螨卵孵育法 等四种，具体使用时可根据待检的药品种类 及实验室条件，选用合适的方法。
检测时先把一定量药均经增菌后转种到选 择鉴别培养基——麦康凯平板或伊红美兰平 板（EMB平板）。
培养后挑取可疑菌落作革兰染色及生化反应。 生化反应包括 IMViC试验和乳糖发酵试验。 大肠杆菌IMViC试验结果为+、+、—、—
大肠杆菌的鉴定主要靠形态和生化反应两方面 的特征。
但由于大肠杆菌和产气杆菌在形态和生化反应
一般选取菌落数在30-300之间的平板计数。
霉菌总数测定
霉菌总数测定是了解待检药品每克 或每毫升内含有的活霉菌总数，借以判 明药品的真菌污染程度。
琼脂倾注平皿计数法
虎红培养基
25℃，72小时
选取菌落数在5-50个的平板，根据数得菌落均值和
相应稀释度的乘积，得到每克或每毫升待检药品中 所含细菌总数，判断药品是否符合标准。