实验7 绿叶中色素的提取和分离
高中生物第一轮复习 实验12 实验设计专题研究系列之“绿叶中色素的提取和分离”的实验分析
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【典例示范】 下图表示叶绿体色素的提取和分离实验的 部分材料和用具。据图回答：
(1)图中步骤①加入研钵内的物质A__________10 mL， 作 用 是 __________ ； B__________ 少 许 ， 作 用 是 研 磨 得充分；C__________少许，作用是__________。
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解析：(1)研磨时需要加入3种物质，10 mL无水乙醇，作用是溶解 色素；二氧化硅可以增大摩擦力，使细胞和叶绿体破碎；细胞研 磨破碎后，会溢出有机酸，为防止叶绿素中的镁被氢取代，破坏 叶绿素，研磨时需加入少许碳酸钙中和有机酸。
(2)过滤研磨液时，漏斗基部不能用滤纸，因为色素可吸附在滤纸 上。一般用一层尼龙布过滤。
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2．实验流程图示
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特别提醒：1.利用色素能溶解在有机溶剂中的特点可以用无水乙醇 或汽油洗去衣物上被绿叶污染的斑点。
2．将长方形滤纸条换成圆形滤纸观察层析实验结果。
3．设计实验探究用其他有机溶剂提取绿叶中的色素效果是否比无 水乙醇好。
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3．实验中几种化学试剂的作用 (1)无水乙醇用于提取绿叶中的色素。 (2)层析液用于分离绿叶中的色素。 (3)二氧化硅可增加杵棒与研钵间的摩擦力，破坏细胞结构，使研 磨充分。 (4)碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。
(3)剪去两角的作用是防止两边色素扩散过快。画滤液细线的要求 是细、齐、直。
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(4)层析时的关键技术是不能让层析液没及滤液细线，否则，滤液 细线会被层析液溶解，不能分离。4种色素溶于层析液中，因溶解 度的差异，造成在滤纸条上扩散速度不同，从而达到分离的目的， 由于层析液有毒，而且可以挥发，所以要加盖，色素带的宽度是 由各种色素含量不同造成的。含量越多，色素带越宽，一般植物 叶片中叶绿素a含量最多，所以叶绿素a色素带最宽。扩散速度最 快的是胡萝卜素，在色素带的最上一层。
绿叶中色素的提取和分离实验
绿叶中色素的提取和分离实验编制：审核：年级：高一编号：07 使用日期：目的要求：1、进行绿叶中色素的提取和分离。
2、探究绿叶中含有几种色素。
实验原理：叶绿体中色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中色素。
色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸上扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。
材料用具：新鲜的绿叶，干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒，天平，无水乙醇，层析液，二氧化硅，碳酸钙。
方法步骤：①提取色素：称取5克绿色叶片并剪碎，加入少量SiO2、CaCO3、和10mL无水乙醇迅速充分研磨→过滤（单层尼龙布）→滤液收集到试管内并塞紧瓶口（色素的提取实验中：研磨时加CaCO3的目的是：防止研磨中色素被破坏。
加SiO2的目的是：研磨得充分）②制滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角。
并在距这一端1Cm处用铅笔画一条细的横线。
③画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀的画出一条细线，待滤液干后，再画一两次（这样可以增大滤液细线中色素的量，使色素带更加清晰）④分离叶绿体中色素：（用纸层析法：分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶于层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。
）⑤观察实验结果：滤纸条上从上到下四条色素带依次是：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。
⑥实验注意：为避免过多的吸入层析液中的挥发性物质，本实验应在通风条件下进行，实验结束时及时用肥皂洗手预习内容1、提取色素时加入少量SiO2的作用:有助于研磨___________________,从而提取较多的______________。
2、提取色素时加入CaCO3作用: 。
3、分离色素时,一定不要让滤液纸条上的滤液细线接触到层析液原因是___________________________________________________________________。
绿叶中色素的提取和分离实验ppt课件
Ⅰ、提取叶绿素
•
• Ⅱ、探究pH对叶绿素稳定性的影响 取一些叶绿素粗产品，配成一定浓度的溶液，于室温（约25℃）下进行实验，方法和 结果如下表：
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• 小李想了解叶绿素粗产品中是否含有其他色素，请你提供检测方法并说出主 要步骤
参考答案： 纸层析法 。 主要步骤：1.制备滤纸条； 2.画色素液 细线；
操作目的 使滤液中叶绿素的含量高 有助于研磨充分和保护叶绿素
防止溶剂挥发，并充分溶解色素 使分离的色素分层，防止色素重叠 使分离的色素带清晰，便于观察 防止滤液溶解到层析液中，无法分离
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实验拓展、能力提升 1、用毛细吸管划滤液细线时很难保证细且直，有什么解决办法？ 2、课下搜集资料，探究其他色素提取和分离的方法 。
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设计实验
分离色素的原理
各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随 层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种 色素相互分离。
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实验步骤
两角
1cm
毛细吸管 细齐 直
一两
适量 滤液细线
滤液细线
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分组实验，探究要点
1、制备滤纸条时为什么要剪去两角，否则会出现什么现象？ 2、滤液细线为什么不能浸到层析液中？ 3、画滤液细线为什么要细且直，并待干后重复几次？ 4、为什么装有滤液和层析液的试管一定要用棉塞塞严？ 5、实验后滤纸条上出现了几条色素带?分别是什么颜色? 6、从上往下色素带顺序如何？各色素带宽窄如何？这些说明了什么？
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典例分析 （2012上海）图6表示叶绿体色素提取分离实验中纸层析的结果，据图判断用作
实验材料的叶片颜色为 • A．红色 B．黄色 • C．绿色 DB．紫色
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• 【实践应用】
“绿叶中色素的提取和分离”实验的改进和创新
“绿叶中色素的提取和分离”实验的改进和创新普通高中生物必修1教材中“绿叶中色素的提取和分离”实验的操作过程复杂，时间耗费多，且实验现象并不明显，或者材料选择不佳，在限定的时间内往往难以达到预期的实验效果。
对此，我对这个实验进行了如下改进：1、色素的提取（1）实验材料：选择叶片较肥厚的绿色植物叶片作实验材料：如豆腐菜，色素含量高。
（1）过滤装置的改进：将过滤用的尼龙布改为用三层纱布，过滤速度快，操作更为简单。
2、色素的分离教材实验步骤中滤纸条的制备，不仅要考虑与层析时的装置配套，还要去除边缘效应；画滤液细线时要求每次都画的又细又直；层析时还要注意层析液不能没过滤液细线，滤纸条不能贴壁等，基于这些种种细致的要求，我的改进和创新如下：（1）实验试剂的改进人教版课本层析液（由20份在60～90摄氏度下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成），本实验中考虑到实验的安全性，1份苯换成1份甲苯，最后实验结果证明现象很明显，四条色素带跑的很好，况且甲苯相对苯对人的危害性弱一点。
（2）实验步骤的创新制备滤纸条：本实验要求将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，改为将干燥的定性滤纸剪成大于烧杯长的滤纸条，并将滤纸条折成7字型，以保证滤纸条不贴壁的要求。
画滤液细线：画滤液细线时要求用毛细吸管蘸取滤液每次都画的又细又直，切容易将滤纸划破；改为：每次用盖玻片边缘蘸取滤液印在滤纸条上，可以保证又细又直，又不会弄坏滤纸条。
且实验效果更好。
第1步：取一圆形定性滤纸（干燥处理），靠近中间部位打一小孔（用牙签较好）放在小培养皿上（如图1）。
第2步：用毛细吸管吸取提取出的色素滤液，点样在小孔边缘（如图2），待滤液干后重复2次。
第3步：自制棉花线，待滤纸上滤液干后从背面穿入（如图3）第4步：将少许层析液倒入小培养皿中，棉花线浸入，开始层析，层析中的滤纸既是跑道,又相当于培养皿的盖子，可减少层析液的挥发。
一分钟之后就会出现4个非常漂亮的同心圆（如图4为两次实验结果），由外到内依次是橙黄色、黄色、蓝绿色、黄绿色。
绿叶中色素的提取和分离实验的改进
通过改进分离方法，色素的分离效果得到显著改 善，各色素带更加清晰。
实验时间缩短
优化实验流程，减少实验时间，提高了实验效率。
结果分析
提取方法的改进
01
采用新型的提取剂和提取方式，能够更有效地溶解叶绿素，提
高提取效率。
分离条件的优化
02
调整分离介质和洗脱液的组成，改善了色素在分离柱上的吸附
绿叶中色素的提 取和分离实验的 改进
目录
• 引言 • 实验原理 • 实验材料和步骤 • 实验结果与讨论 • 结论
01
引言
实验背景
01
绿叶中色素的提取和分离实验是 生物学和化学领域中常见的基础 实验，用于研究植物叶片中的色 素组成和性质。
02
传统实验方法存在一些不足，如 提取效率不高、分离效果不理想 、实验操作繁琐等。
将研磨后的混合物通过尼龙布 或滤纸过滤，去除杂质和叶片 残渣。
色素提取
将过滤后的提取液倒入无水乙 醇中，充分搅拌，使色素完全 溶解在乙醇中。
分离色素
将提取液倒入层析柱中，用适 量的石油醚和丙酮进行洗脱，
使色素得以分离。
04ห้องสมุดไป่ตู้
实验结果与讨论
实验结果
提取效率提高
改进后的实验方法能够更有效地提取绿叶中的色 素，提取效率明显提高。
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可以进一步研究其他植物中色素的种类和含量， 以拓展对植物色素的认识。
THANKS
感谢观看
碳酸钙
用于保护色素不被破坏，同时 防止研磨过程中色素被分解。
新鲜绿叶
选择新鲜、健康的绿叶，如菠 菜叶或豌豆叶，以保证色素含 量丰富。
石英砂
用于研磨绿叶，有助于色素的 释放。
实验7 叶绿体色素的提取和分离
步
骤
注 意 问 题
分
析
1．提取色素 5 克绿叶剪碎， 放入研钵，加 SiO2、CaCO3 和 5mL 丙酮（或 10mL 无水 乙醇）迅速、充分研磨。 （若 没有无水乙醇，也可用体积 分数为 95%的乙醇，但要加 入适量的无水碳酸钠，除去 水分） 2．收集滤液漏斗基部放一单 层尼龙布，研磨倒入漏斗内 挤压，将滤液收集到小试管
胡萝卜素（橙黄色）
杯要盖培养是胡 萝卜素，扩散
四种色素之所以能被分离，是因为四种色素 随层析液在滤纸上的扩散速度不同。
叶黄素（黄色） 叶绿素 a（蓝绿色） 叶绿素 b（黄绿色）
最慢是叶绿素 b， 含量最多的 是叶绿素 a。
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尼龙布起过滤作用。
中，用棉花塞塞住试管口。 3．制备滤纸条将干燥的滤纸， 顺着纸纹剪成长 10cm，宽 1cm 干燥 的纸条，一端剪去二个角，并 顺着纸纹剪成 在距这一端 1cm 处划一铅笔 长条 线。 一端剪去二个 角 4．划滤液细线用毛细吸管吸 取少量滤液，沿铅笔线划出 滤液细线越
试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。
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加 SiO2 为了研磨得更充分。 加 CaCO3 防止研磨时叶绿素受到破坏。因为 加 SiO2 加 CaCO3 加丙酮 迅速 叶绿素含镁， 可被细胞液中的有机酸产生的氢 代替， 形成去镁叶绿素， CaCO3 可中和液泡破 坏释放的有机酸，防止叶绿体被破坏。 叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。 减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性的 丙酮挥发。
可吸收更多的滤液。 层析时，色素分离效果好。 可使层析液同时到达滤液细线。
防止色素带之间部分重叠。
细、齐、直的一条滤液细线， 细、 越齐越好。 干后重复三次。 重复三次。 增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明 显。 5．纸层析法分离色素 层析液不能没 防止色素溶解在层析液中，
绿叶中色素的提取和分离实验步骤
绿叶中色素的提取和分离实验步骤
绿叶中色素的提取和分离实验步骤如下：
1.提取绿叶中的色素：称取5g新鲜绿叶，剪碎后放入研钵中，加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10mL无水乙醇，迅速、充分研磨。
接着，将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤，收集滤液到小试管中，及时用棉塞将试管口塞紧。
2.制备滤纸条：将定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与直径的滤纸条，并在一端剪去两角，然后在距离剪角一端1cm 处用铅笔画一条细的横线。
3.画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。
待滤液干后，再重复画2～3次。
4.分离绿叶中的色素：将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微倾斜靠着试管的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用棉塞塞紧试管口（注意不能让滤液细线触及层析液）。
5.观察结果：滤纸条上会出现4条颜色、宽度不同的色素带。
注意事项：
1.叶片要新鲜、颜色要深绿，含有较多色素。
2.研磨要迅速、充分。
叶绿素不稳定，易被活细胞内的叶绿素酶水解。
充分研磨使叶绿体完全破裂，提取较多的色素。
3.滤液细线不仅要求细、直，而且要求含有较多的色素，所以要求待滤液干后再重复画1～2次。
4.滤液细线不能触及层析液，否则色素溶解到层析液中，滤纸条上得不到色素带。
以上信息仅供参考，具体实验步骤可能会因实验条件和设备的不同而有所调整。
在进行实验时，请确保遵循实验室安全规定，佩戴适当的防护设备，并在必要时寻求教师的指导。
绿叶中色素的提取和分离(纸层析法).ppt
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实验步骤：
3.画滤液细线
2019-11-27
滤液细线的要求：
细、直、齐（使色素处于同 一起跑线）；
重复2—3次（防止色素太少 分离现象不明显）。
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4
实验步骤：
4.分离绿叶中的色素
培养皿
注意:
滤液细线
层析液
滤液细线不能触到层析液（防止色素溶解在层析液中）
烧杯要盖上培养皿、试管要塞上棉塞（层析液易挥发且有毒）
颜色
度
能
胡萝卜素 橙黄色 最少 叶黄素 黄色 较少
最大 较大
最快 蓝紫光 较快
叶绿素ａ 蓝绿色 最多 叶绿素ｂ 黄绿色 较多
较小 最小
较慢 蓝紫光 最慢 红光
与光合作用有关的色素存在于哪呢？
2019-11-27
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四种色素对光的吸收 叶绿体中的色素提取液
叶绿素a、b主要吸__蓝__紫__光__、__红__光___
胡萝卜素和叶黄素主要吸收_蓝__紫__光_____
2019-11-27
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叶绿体中色素提取和分离实验中几个关键问题
• 取叶要新鲜 ， 滤液中含有较多的色素；
• 研磨要迅速充分，防止无水乙醇挥发，同时可以得到色素浓度较大的
滤液；
• 画滤液细线要重复２－３次，以便色素带清晰；
• 滤液细线要细、直、齐，防止色素带重叠；
2019-11-27
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实验步骤：
5、观察与记录实验结果
胡萝卜素 捕 类胡萝 （橙黄色）
获 光 能
卜素
(占1/4)
叶黄素
（黄色）
的
叶绿素a
绿叶中色素的提取和分离
《绿叶中色素的提取和分离》实验教学设计学院附中陈建志一、教材分析生物学是以实验为基础的科学，实验教学对提高学生的生物科学素养起着无可替代的重要作用，他是素质教育和创新教育的重要场所和前沿阵地，也是基础教育改革的基础、前提和保证。
《绿叶中色素的提取和分离》是一个探究性实验，通过本实验，可以让学生知道绿叶中色素的种类和颜色对植物叶片颜色的影响，是学习光合作用的基础。
本实验要求层次较高、操作难度较大、考查频率高的一个实验，但是按照教材的实验步骤和方法，多数学生把握不够，操作不当。
分离后的色带或不全或色浅，辨认困难，实验效果皆不理想。
笔者在实验教学中将有关操作作了调整。
1、教材中值得推敲的地方实验选材和研磨教材推荐用菠菜为实验材料。
菠菜生长受季节的限制，有的季节很难采集。
另外菠菜叶片含水量较高，较多的水分子与丙酮分子接触，降低了丙酮对色素分子的萃取率，导致提取液中含色素分子少，进而影响实验结果。
教材中选用5克叶片．相对于仅需的几滴滤液来说，显然太多，也增加了研磨的时间和难度。
相对于5克叶片，5毫升丙酮又显太少。
丙酮极易挥发，实验中常出现叶片未研碎。
丙酮已挥发干的情况。
因为研磨不彻底，提取液中色素含量少。
研磨剂的配制学生只是按课本要求按顺序添加无水、乙醇、CaCO3、SiO2，并不能很深刻的理解添加这些物质的原理和作用。
过滤装置课本要求用放置单层尼龙布的漏斗过滤滤液，但实际操作中这个方法耗时且费力。
画线方法由于学生平时的实验操作中很少用到毛细吸管，所以采用课本要求的方法划线，很难做到滤液细线细、直、均匀的要求。
色素分离装置分离色素是将滤纸条插入到加入层析液的烧杯中，为了防止层析液挥发，还可以给烧杯加盖。
而实际操作很难做到滤纸条在烧杯中保持竖直，也不能有效减少层析液的挥发。
分离色素的方法课本是让色素在长形滤纸条上扩散分离，方法单一，不能很好地激发学生的创新思维。
2实验改进只要是新鲜、浓绿的叶片皆可选，但要对叶片作些处理。
绿叶中色素的提取和分离实验的完善和改进
绿叶中色素的提取和分离实验的完善和改进绿叶中色素的提取和分离是一项常见的实验，其中提取过程主要基于色素的极性差异，分离过程则通过色谱等手段进行。
但是这项实验也存在一些不足之处，例如提取效率低、杂质多、分离时间长等问题。
因此，我们需要对该实验进行改进和完善，以提高其可行性和效率。
一、提取过程的改进绿色植物中含有多种色素，但叶绿素是其中最主要的成分。
目前，常用的叶绿素提取方法主要包括乙醇提取法、丙酮提取法和二氯甲烷提取法等。
然而，这些方法都存在一些问题。
1、乙醇提取法乙醇提取法是常用的叶绿素提取方法之一，但其提取效率较低。
这是由于乙醇的极性较大，无法充分溶解非极性的叶绿素等色素。
因此，我们可以选择一些更为极性适中的有机溶剂，如甲醇、异丙醇等，来替代乙醇。
2、丙酮提取法丙酮提取法虽然提取效率较高，但其提取液中常含有大量的杂质，如脂肪酸、糖类等。
这些杂质降低了叶绿素等色素的纯度，影响了后续的分离和检测。
因此，我们可以将丙酮与甲酸或硫酸等酸性溶液混合使用，利用酸性溶液去除杂质，提高提取液的纯度。
3、二氯甲烷提取法二氯甲烷提取法能够有效地提取非极性物质，例如脂溶性色素和脂肪酸。
但是，这种方法在操作过程中需要注意防止对人体造成伤害，同时还需考虑环境污染的问题。
因此，我们可以尝试使用其他安全环保的有机溶剂来替代二氯甲烷。
分离过程常用的方法包括薄层色谱法和高效液相色谱法等。
然而，这些方法分离时间长，需要的化学试剂较多，而且分离效率可能低。
因此，需要寻找一些新的改进方案。
1、离心沉淀法离心沉淀法是近年来被广泛应用于生物科学中的一种新方法。
该方法基于纳米颗粒的特性，将待分离物质的颗粒大小控制在纳米级别，然后通过离心沉淀实现精准分离。
这种方法具有操作简便、时间短、分离效率高等优点，并且不需要过多的化学试剂，可以大幅度降低实验成本。
2、超声波辅助法超声波辅助法是利用超声波能量对液体中的生物分子和颗粒进行强烈的机械作用和物理效应，促进其离子化、溶解和分散等。
高三总复习生物课件 绿叶中色素的提取和分离、光合作用的基本过程
1．分析“绿叶中色素的提取和分离”实验中的异常现象
异常现象
原因分析
①未加石英砂(二氧化硅)，研磨不充叶绿素)太少； 绿色过浅 ③一次加入大量的无水乙醇，提取液浓度太低(正确做法：分次加入少量 无水乙醇)；
④未加碳酸钙或加入过少，色素分子被破坏
滤纸条色 ①滤液细线不直；
细线
待滤液干后，再画一两次 增加色素附着量，使分离出的色素带分明
层析
加盖 层析液不能触及 滤液细线
防止层析液挥发 防止色素溶解在层析液中
(3)实验结果
色素种类
胡萝卜素 叶黄素 叶绿素 a 叶绿素 b
色素 颜色 橙黄色 黄色 蓝绿色 黄绿色
色素 含量 最少 较少 最多 较多
溶解 度
最高 较高 较低 最低
()
A．培养蓝细菌研究光合作用时，需提供葡萄糖作为碳源
B．叶绿素 f 主要分布在蓝细菌叶绿体类囊体薄膜上
C．叶绿素 f 能够吸收、转化红外光，体现了蓝细菌对环境的适应
D．在正常光照条件下，蓝细菌会同时吸收可见光和红外光进行光合作用
解析：蓝细菌是自养生物，不从外界吸收葡萄糖，培养蓝细菌研究光合作用时，不需提 供葡萄糖作为碳源，A 错误；蓝细菌是原核生物，没有叶绿体，B 错误；某些蓝细菌在 近红外光环境下生长时，含有叶绿素 f 的光合系统会启动。进一步研究发现，叶绿素 f 能吸收、转化红外光，用于光合作用，体现了蓝细菌对环境的适应，C 正确；在正常光 照条件下，蓝细菌光合作用依赖叶绿素 a 来收集、转化可见光，用于光合作用，不能吸 收红外光进行光合作用，D 错误。
能力二 围绕光合色素的种类和功能，考查科学思维能力
3．(2021·潍坊二模)通常情况下，光合作用依赖叶绿素 a 来收集、转化可见光，用于光
生物叶绿素提取实验
考点名称：实验：绿叶中色素的提取和分离•绿叶中色素的提取和分离：1．原理(1)各种色素能溶解在有机溶剂（无水乙醇等）中形成溶液，使色素从生物组织中脱离出来。
(2)各种色素都能溶解在层析液中，但在层析液中的溶解度不同。
溶解度大的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，因而不同色素可以在滤纸上通过扩散分开，各种色素分子在滤纸上可形成不同的色素带。
2．实验过程观察结果：滤纸条上色素带有四条，由上到下分别是胡萝卜素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素a、黄绿色的叶绿素b，如图••实验要点及注意事项：1、实验中几种化学药品的作用①加入少量SiO2，可破坏细胞结构，使研磨更充分，便于色素完全释放。
②加入少量CaCO3，，可以中和细胞内的有机酸，防止有机酸夺取叶绿素中的镁离子使叶绿素破坏，从而起到保护色素的作用。
但SiO2.和CaCO3的加入量要少，否则滤液杂质多、混浊、颜色浅，实验效果差。
2、实验成功的关键①叶片要新鲜，颜色要深绿，保证色素的含量。
②研磨要迅速充分。
叶绿素不稳定，易被破坏，时间过长或研磨不充分都会导致色素的量太少而使实验失败。
③滤液细线不仅要求细、直、均匀，而且要求含有较多的色素（可以重复画二至三次）。
④滤液细线不能触及层析液，否则色素溶解到层析液中，将得不到清晰的色素带。
3、注意事项①制备滤纸条时，要剪去两角，这样可以减小边缘效应，使色素在滤纸上扩散均匀，便于观察实验结果。
②收集滤液后，要及时用棉塞将试管口塞紧，防止滤液挥发。
4、滤纸条上的滤液细线，不能触及层析液的原因：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。
5、提取和分离叶绿体色素的关键：（1）提取叶绿体色素的关键是：①叶片要新鲜、浓绿；②研磨要迅速、充分；③滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。
（2）分离叶绿体色素的关键是：①是滤液细线要细且直，而且要重复划几次；②是层析液不能没及滤液线。
绿叶中色素的提取和分离实验的完善和改进
绿叶中色素的提取和分离实验的完善和改进绿叶中色素的提取和分离是一项常见的化学实验，通过提取绿叶中的色素可以更好地了解绿叶中的化学成分和色素组成，同时也可以帮助学生更好地理解提取和分离的基本原理。
然而在实践中，该实验存在一些不足之处需要进行完善和改进。
本文将针对绿叶中色素的提取和分离实验进行完善和改进的探讨。
一、实验原理及基本步骤1. 实验原理绿叶中的色素主要包括叶绿素和类黄酮素两种。
叶绿素是植物中的主要色素，具有光合作用的关键作用；而类黄酮素则是植物中的辅助色素，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生理活性。
绿叶中的色素分离主要依靠色素与不同溶剂间的亲疏性差异，通过适当的溶剂提取、分离和纯化绿叶中的色素。
2. 基本步骤（1）取一定量的鲜叶，将其切碎并加入适量的溶剂（如乙醇、丙酮等），研磨成均匀的混合液。
（2）将混合液离心，得到上清液。
（3）取上清液，通过过滤和蒸发得到纯净的绿叶色素。
二、实验改进措施1. 选择合适的溶剂在绿叶中色素的提取和分离实验中，选择合适的溶剂是至关重要的。
原先较常使用的乙醇、丙酮等溶剂，其溶解度较低，且易挥发，操作过程中易造成挥发量损失，从而影响实验结果。
建议使用环保、安全且具有良好溶解度的有机溶剂（如乙腈、二甲亚砜等）进行提取和分离。
2. 优化提取条件在绿叶中色素的提取和分离实验中，提取条件的优化对实验效果起着决定性作用。
可在提取过程中适量加入助溶剂，如甘油、Tween-80等，能够提高色素的溶解度，提高色素的提取率。
也可考虑加入酸碱等调节剂，以提高色素在溶剂中的溶解度。
3. 应用新技术手段随着科技的发展，一些新的技术手段也可以应用于绿叶中色素的提取和分离实验中。
比如超声波提取法、微波辅助萃取法等，这些新技术手段可以提高提取速度、提高提取效率，并且操作简便、省时省力。
4. 引入现代分析方法在实验实施过程中，可以引入现代分析方法进行色素的鉴定和分离，如高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）、质谱联用技术（LC-MS/MS）等，可以使得色素的分离更加准确、快速。
实验：绿叶中色素的提取和分离
实验步骤
• 1 提取绿叶中的色素
(1) 称取5g绿叶，剪碎，放人研钵中。 (2) 向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再 加入10ml无水乙醇，进行迅速、充分的研磨。 (二氧化硅有助于研磨得充分，碳酸钙可防止 研磨中色素被破坏。) 。 (3) 将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放 一块单层尼龙布)中进行过滤。将滤液收集到 试管中，及时用棉塞将试管口塞严。
实验原理
• 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂
无水乙醇中，所以，可以用无水乙醇提
取绿叶中的色素。绿叶中的色素不止一
种，它们都能溶解在层析液中。然而，
它们在层析液中的溶解度不同：溶解度
高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之
则慢。这样，几分钟后，绿叶中的色素
就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离
开
。
目的几种色素
胡萝卜素
叶黄素 叶绿素a 叶绿素b
胡萝卜 素
叶黄素 叶绿素a 叶绿素b
• 讨论
1 滤纸条上有几条色素带?其排序怎么 样?宽窄如何?这说明了什么? •
2 滤纸上的滤液细线，为什么不能触 及层析液?
类胡萝卜素吸收光谱
叶绿素吸收光谱
2 制备滤纸条： 将干燥的定性滤纸条剪成长与宽略小
于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪 去两角，放入试管下端，并在距离这一端 1cm处用铅笔画一条细的横线。
3 画滤液细线： 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线
均匀地画出一条细线。待滤液干后，再画一 两次。注意：滤液细线要画得细、齐、直。
• 4 分离绿叶中的色素：将3ml层析液倒 入小烧杯中，将滤纸条(有滤液细线的一 端朝下)轻轻插入层析液中,用培养皿盖住 小烧杯 。注意：不要让滤液细线接触到 层析液。 5 观察与记录：观察试管内出现了几条 色素带，以及每条色素带的颜色。将观 察结果记录下来
绿叶中色素的提取和分离实验原理
绿叶中色素的提取和分离实验原理随着绿色化学的兴起，绿叶中的色素提取和分离已成为一种重要的研究课题。
绿叶中的色素有多种，其中包括：叶绿素、黄素、类胡萝卜素、花青素、黄酮类等。
本文将详细介绍从绿叶中提取和分离这些色素的实验原理。
首先，在提取色素之前，需要进行样品预处理。
首先，将所需的绿叶样品粉碎成细小的粉末，然后加入足够的溶剂，使其充分溶解，提取成溶液。
一般常用的溶剂有乙醇、乙醚等，具体选择取决于实验中色素的种类及溶解度。
接下来，就是提取绿叶中的色素。
这一步骤主要依靠萃取溶剂来实现。
在此，一般使用有机溶剂与水混合溶剂，使色素完全溶于其中。
萃取过程主要分为单次萃取和多次萃取，其中单次萃取较为简单，只需在溶液中加入萃取溶剂，使得溶质分离而得到色素。
多次萃取可以提取更多的溶质，把未萃取出来的溶质重新萃取。
接下来，就是分离绿叶中的色素。
实验中常用的主要有离子色谱、高效液相色谱等技术实现。
常用的离子色谱包括双极性色谱和三极性色谱。
前者主要利用不同离子的不同表聚作用，在柱表面上形成的相吸键来分离；后者利用试剂的离子表聚力，在三种不同介质(pH值)中极性梯度形成的流体中分离绿叶中的不同色素。
高效液相色谱可以有效地分离绿叶中的不同色素，实现快速准确的分离。
此外，该技术还可以分析具有极性特征的色素，比如黄酮类色素。
高效液相色谱技术通常需要经过特殊处理，将绿叶中的色素经过凝胶色谱分离，或者通过HPLC色谱，将色素经过固相色谱分离。
总的来说，绿叶中的色素提取和分离是一项重要的研究工作，能够有效地分析绿叶中的色素，探究色素的分布特征，为绿色化学研究提供重要信息。
本文详细介绍了从绿叶中提取和分离色素的实验原理，并分析了常用的色谱分离技术。
希望本文能够为从事该课题的研究人员提供参考。
高中生物人教版必修一课件：Flash动态演示实验 7 绿叶中色素的提取和分离
4.(2013·海南高考)关于叶绿素提取的叙述,错误的是( ) A.菠菜绿叶可被用作叶绿素提取的材料 B.加入少许CaCO3能避免叶绿素被破坏 C.用乙醇提取的叶绿体色素中无胡萝卜素 D.研磨时加入石英砂可使叶片研磨更充分
【解析】选C。本题考查绿叶中色素的提取和分离实验。A项,新鲜 菠菜绿叶含大量的色素,是提取色素的良好材料,故正确。B项,加入 CaCO3的目的是防止研磨中色素被破坏,故正确。C项,叶绿体中的色 素有叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素,故错误。D项,研磨时 加石英砂的目的是使研磨更充分,故正确。
3.(2013·江苏高考)关于叶绿体中色素的提取和分离实验的操作,正 确的是 ( ) A.使用定性滤纸过滤研磨液 B.将干燥处理过的定性滤纸条用于层析 C.在划出一条滤液细线后紧接着重复划线2～3次 D.研磨叶片时,用体积分数为70%的乙醇溶解色素
【解析】选B。本题考查叶绿体色素提取和分离实验。A项中,过滤 研磨液使用的是单层尼龙布,故错误。B项中,层析时使用的是干燥处 理过的定性滤纸条,故正确。C项中,在划出一条滤液细线后待滤液干 燥后再重复划线1～2次,故错误。D项中,研磨叶片时,用无水乙醇或 体积分数为95提取和分离
下列用鲜菠菜进行色素提取、分离实验的叙述,正确的是 ( ) A.应该在研磨叶片后立即加入CaCO3,防止酸破坏叶绿素 B.即使菜叶剪碎不够充分,也可以提取出4种光合作用色素 C.为获得10 mL提取液,研磨时一次性加入10 mL乙醇研磨效果最好 D.层析完毕后应迅速记录结果,否则叶绿素条带会很快随溶剂挥发 消失
2.(2015·江苏高考)为研究高光强对移栽幼苗光合色素的影响，某 同学用乙醇提取叶绿体色素，用石油醚进行纸层析，下图为滤纸层 析的结果(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为色素条带)。下列叙述正确的是(多选)
【人教版】高三上册生物基础实验：实验7 叶绿体色素的提取和分离(含解析)
——叶绿体色素的提取和分离原理、色素的种类和吸收光谱、试剂的作用和实验成败关键前情提要：关键词：色素提取和分离的原理、色素的种类、试剂的作用难度系数：★★★重要程度：★★★★基础回顾：考点一、实验的原理（1）实验：绿叶中色素的提取和分离（纸层析法）①可以利用无水乙醇提取绿叶中的色素，在研磨时还应加入少许二氧化硅和碳酸钙，其中前者有助于研磨充分，后者可防止在研磨中色素被破坏。
②分离的原理是利用色素在层析液中的溶解度不同，溶解度越大的在滤纸上扩散的快，反之则慢。
考点二、色素的种类和吸收光谱1．提取绿叶中色素的关键（1）叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅速、充分以保证提取较多的色素。
（2）滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以防止滤液挥发。
（3）称取绿叶的质量和加入无水乙醇的体积要适当，以保证提取液的浓度。
2．分离绿叶中色素的关键（1）滤液细线不仅要细、直，而且要含有较多的色素，因此要在滤液干后，重复画1～2次。
（2）滤纸上的滤液细线不能触及（或没入）层析液，否则会使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色素带，使实验失败。
3． 实验流程提取色素⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧取材：称取5 g 绿色叶片↓研磨：加少许SiO 2、CaCO 3和10 mL 无水乙醇↓过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布 ↓收集：收集滤液，试管口用棉塞塞严制备滤纸条⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧干燥滤纸↓剪滤纸条：将滤纸剪成长与宽略小于试管长和宽的滤纸条，并在一端剪去两角↓铅笔画线：在距剪去两个角一端1 cm 处用 铅笔画一条细的横线画滤液细线⎩⎪⎨⎪⎧用毛细吸管吸取少量滤液↓画线：沿铅笔线画出一条细线↓待滤液干后，重复画一两次分离绿叶中的色素⎩⎪⎨⎪⎧将3 mL 层析液倒入试管中，装置如图所示插入滤纸条有滤液细线的一端朝下，随后用软木塞塞紧试管口。
注意：不能让滤纸条上的滤液细线触到层析液4、由操作要求探究操作目的5（1）收集到的滤液绿色过浅的原因分析 ①未加石英砂（二氧化硅），研磨不充分。