原位杂交与免疫组化(2)
her2表达检测方法汇总
her2表达检测方法汇总
HER2(人类表皮生长因子受体2)是一种与乳腺癌相关的蛋白质,其过度表达与乳腺癌的发展和预后有关。因此,准确检测HER2表达对于乳腺癌的诊断和治疗具有重要意义。以下是一些常见的HER2表达检测方法的汇总:
1. 免疫组化(IHC),免疫组化是一种常用的HER2表达检测方法,通过对组织切片进行染色并观察HER2蛋白在细胞膜上的表达情况来进行评估。根据染色的程度和范围,可以将结果分为0、1+、2+和3+四个等级。
2. 荧光原位杂交(FISH),FISH是一种分子遗传学技术,通过使用荧光标记的探针来检测HER2基因的扩增情况。FISH可以提供更准确的HER2基因状态信息,尤其适用于IHC 2+的病例。
3. 免疫组化和原位杂交联合检测(IHC-FISH),IHC-FISH联合检测结合了免疫组化和原位杂交两种方法的优势,可以提高对HER2状态的准确性和可靠性。
4. 基因组学测序技术,随着基因组学技术的发展,越来越多的
实验室开始采用基因组学测序技术来检测HER2基因的扩增或突变情况,这种方法可以提供更为全面的遗传信息。
5. 蛋白质质谱法,蛋白质质谱法通过分析组织样本中的蛋白质表达情况来评估HER2的表达水平,虽然在临床应用中较少见,但具有潜力成为一种可靠的HER2检测方法。
总的来说,选择合适的HER2表达检测方法取决于实验室设施、技术人员的经验以及患者的具体情况。在临床实践中,常常会结合多种方法来进行综合评估,以确保对HER2状态的准确判断。
免疫组化和原位杂交检测结果_概述说明
免疫组化和原位杂交检测结果概述说明
1. 引言
1.1 概述
本文旨在对免疫组化和原位杂交检测结果进行综合概述和解释。免疫组化和原位杂交是两种常用的生物学实验技术,用于检测细胞或组织中特定蛋白质或核酸的表达情况。通过对这两种技术的原理、方法、应用领域以及实验步骤和注意事项的介绍,可以使读者更好地理解并合理应用这些检测结果。
1.2 文章结构
本文分为五个主要部分:引言、免疫组化检测结果、原位杂交检测结果、免疫组化与原位杂交比较分析以及结论。在引言部分,我们将简要介绍本文的目的和文章结构,提供一个整体的框架来帮助读者理解后续内容。
1.3 目的
本文旨在全面说明和讨论免疫组化和原位杂交检测结果,并对它们之间的异同进行比较分析。通过了解免疫组化和原位杂交技术的基本原理、应用领域以及实验步骤等方面信息,读者可以更好地理解和解释这些检测结果,从而能够更科学地进行相关研究工作。此外,我们将通过案例分析和发展趋势的讨论,对免疫组化和原位杂交技术在未来的应用进行展望,并提供一些建议。
2. 免疫组化检测结果:
2.1 原理和方法:
免疫组化是一种常用的实验技术,通过特异性抗体对目标分子进行检测。该技术基于免疫学原理,利用抗体与相应的抗原结合来定位和可视化感兴趣的蛋白质或分子。在免疫组化实验中,首先需要选择合适的抗体,该抗体可以是单克隆或多克隆抗体,并且需要与所需检测的目标分子有高度的特异性和亲和力。然后,在样本处理过程中,对组织或细胞进行固定、包埋等步骤以保持其形态结构,并消除内源性酶活性。接下来,将样本切片后进行染色处理,通常采用荧光标记物或酶标记物进行可视化显示。最后,使用显微镜观察并记录结果。
荧光原位杂交与免疫组化法检测乳腺癌HER-2表达的临床意义
荧光原位杂交与免疫组化法检测乳腺癌HER-2表达的临床意
义
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,HER-2在乳腺癌中的
表达程度与疾病的预后密切相关。荧光原位杂交(FISH)与
免疫组化(IHC)是目前最常用的检测HER-2表达的方法之一。
免疫组化法通过检测HER-2蛋白在乳腺癌细胞膜上的表达水
平来确定HER-2的状态。它是判断HER-2高表达的最常见方法,通常可以在乳腺癌组织切片中快速检测,检测结果可定量化。但是,免疫组化法不能直接测量HER-2基因水平,由于
存在不能确定的判断标准,结果可能存在误差。
FISH法是测量HER-2基因扩增的直接方法。对于免疫组化测
试结果不确定的患者,FISH测试需要进一步检测HER-2基因
是否扩增。如果FISH检测结果显示HER-2基因扩增,则患者很可能需要接受更为积极的治疗。
通过比较FISH和免疫组化方法的结果,可以更好地确定个体
患者HER-2的表达情况,并作出更为准确和有效的治疗决策。例如,HER-2扩增和免疫组化高表达的患者可能受益于靶向HER-2的治疗,如赫赛汀。此外,HER-2基因扩增可能是预
后不良的风险因素,需要密切监测治疗反应和疾病复发。
因此,FISH和免疫组化是乳腺癌HER-2表达检测的重要手段。这些方法的准确性和精度已经得到了明显的提高,可以作为指导乳腺癌个体化治疗的重要依据。
免疫组化指标 her2
免疫组化指标 her2
HER2(Human Epidermal growth factor Receptor 2)是一种与身体免疫系统有关的蛋白质指标。该指标主要用于乳腺癌的免疫组化诊断,对于乳腺癌的个性化治疗也有着极为重要的作用。以下是围绕“免疫组化指标HER2”的阐述。
一、什么是免疫组化指标?
免疫组化指标(IHC,Immunohistochemistry)是一种将抗体与组织学技术相结合的方法,通过检测某一蛋白质在组织学的免疫反应性,以此来判断该蛋白质在细胞和组织中的分布、表达量和活性等相关信息的指标方法。
二、HER2是什么?
HER-2/neu是人类表皮生长因子受体家族中的一员,是一种细胞表面蛋白,在正常的生理过程中发挥着细胞分化、增殖和存活等重要生理功能作用。但是当该基因或蛋白发生改变使其表达量增高或活性异常时,会引发多种癌症的发生,如乳腺癌、卵巢癌等。
三、HER2阳性的意义是什么?
正常情况下,HER2在乳腺组织中的表达量很低,但在部分人群中,HER2的表达量明显升高,即HER2阳性,会导致肿瘤的增殖、侵袭和转移等恶化的表现。因此,HER2阳性是乳腺癌治疗和预后的重要参考指标。
四、HER2检测的方法是什么?
HER2的检测通常采用IHC和原位杂交(FISH)技术,其中IHC是更为常用的一种技术。在IHC检测中,使用染色剂标记对HER2蛋白进行染色,根据染色的颜色强弱或染色核数来确定HER2的表达水平,并进行分类评估。
五、HER2检测结果的意义如何?
HER2检测结果常常用来评估乳腺癌患者的预后情况以及制定个性化的治疗方案。在HER2阳性的肿瘤中,由于HER2通路的异常激活使
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的效果观察
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断
鼻咽癌的效果观察
1. 引言
1.1 背景
鼻咽癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤,其病因尚不完全清楚。已有研究表明埃波斯坦-巴尔病毒(EB病毒)可能与鼻咽癌的发展密切相关。EB病毒是一种常见的人类病毒,感染后可引起多种疾病,包括淋巴瘤和鼻咽癌等。检测EB病毒在鼻咽癌中的存在对于该疾病的诊断和治疗具有重要意义。
当前,免疫组化技术和原位杂交技术被广泛应用于肿瘤诊断和研究中。免疫组化技术可以通过检测特定抗原的表达水平来判断肿瘤的类型和分级,而原位杂交技术则可以检测病毒的核酸序列,从而确定病毒的存在。双标记技术结合了免疫组化和原位杂交技术的优势,可以同时检测抗原和核酸,提高了诊断的准确性和可靠性。
本研究旨在通过免疫组化和原位杂交双标记技术检测EB病毒在鼻咽癌中的存在,探讨其在鼻咽癌诊断中的应用以及对该疾病的诊断和治疗的意义。通过对免疫组化与原位杂交双标记技术的应用效果进行观察和分析,为鼻咽癌的早期诊断和治疗提供更准确的依据。
1.2 研究目的
本研究的目的是探讨免疫组化与原位杂交双标记技术在诊断鼻咽癌中的应用效果。鼻咽癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤,而EB病毒被认为是导致鼻咽癌发生的一个重要因素。通过检测EB病毒在鼻咽组织中的存在情况,可以帮助早期诊断和治疗鼻咽癌。
免疫组化技术是一种通过特定抗体与靶分子结合的技术,可以帮助我们检测出EB病毒在组织中的表达情况。而原位杂交技术则可以帮助我们检测出EB病毒的基因组在组织中的存在情况。将两种技术结合起来进行双标记,不仅可以提高对EB病毒的检测灵敏度和准确性,同时也可以更加直观地观察病毒在组织中的分布情况。
免疫组化与原位杂交
2)快红(固红/萘酚磷酸盐,Fast Red TR/Naphthol AS-MX)
显色特点: ---桃红色 ---不溶于水但溶于脂类溶剂 ---容易扩散 ---不能永久保存
3)快蓝(固蓝BB/萘酚磷酸盐,Fast Blue BB/Naphthol AS-MX) 显色特点: ---蓝色 ---不溶于水但溶于脂类溶剂 ---容易扩散 ---不能永久保存 4)品红(品红/萘酚磷酸盐,Fuchsin/Naphthol AS-TR)
优点:敏感性高,特异性很低。 缺点:极易受内源性生物素影响,假阳性率极高。
五、免疫组织化学的特异性与敏感性
一)特异性(specificity):指免疫组化染色结果是否真正由特异 性抗体和相应抗原结合而产生。包括方法特异性和抗体特异性。 1.方法特异性:证明是由抗体结合引起的结果。 如: 加一抗 --- 有染色结果 不加一抗 --- 无染色结果 2.抗体特异性:证明是由所检抗原而非其它成分与一抗结合引起 的染色结果。 如:用肝细胞抗体染肝组织 --- 有染色结果 用肝细胞抗体染肾组织 --- 无染色结果 二)特异性染色和非特异性染色 1.特异性染色:由一抗与相应抗原特异性结合而产生的染色。染
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌罗俭权;曾秀英;吕镜雄;陈春梅;程思锐;冯天斌
【摘要】目的探析鼻咽癌诊断中检测EB病毒更为快速及更灵敏的方法.方法选择2014年4月至2016年8月广东省四会市人民医院收治的36例鼻咽癌患者,分别采用EB病毒一抗、地高辛标记的寡核苷酸EBER探针进行免疫组化和原位杂交双重标记染色,检测鼻咽癌细胞中EB病毒的表达情况.结果免疫组化后的阳性细胞的胞膜表现为红色,原位杂交后的阳性细胞胞核表现为蓝黑色,而双阳性细胞的核与膜呈蓝红色,不仅对比鲜明而且背景非常清晰,双染成功后细胞及组织结构表现完整.结论 EBER原位杂交双标记技术检测EB病毒主要是检测病毒基因,具有极高的特异性和灵敏度,比免疫组化方法更灵敏、快速,可以帮助临床进行鼻咽癌的分期诊断及判断治疗效果.
【期刊名称】《实用检验医师杂志》
【年(卷),期】2017(009)002
【总页数】3页(P77-79)
【关键词】鼻咽癌;病理诊断;双标记原位杂交;免疫组化
【作者】罗俭权;曾秀英;吕镜雄;陈春梅;程思锐;冯天斌
【作者单位】526200 广东肇庆,广东省四会市人民医院;526200 广东肇庆,广东省四会市人民医院;526200 广东肇庆,广东省四会市人民医院;526200 广东肇庆,广东省四会市人民医院;526200 广东肇庆,广东省四会市人民医院;526200 广东肇庆,广东省四会市人民医院
【正文语种】中文
鼻咽癌是一种在我国南方地区(如广州等)发病率非常高的恶性肿瘤,占鼻咽部恶性肿瘤的97%[1]。鼻咽癌的治疗除手术外,中医药治疗对于提高患者的生存率有很好的作用[2]。鼻咽癌又分为鳞状细胞癌和非角化鳞癌;非角化鳞癌又分为混合型癌、圆形细胞癌(未分化型癌)及梭形细胞癌(分化型非角化鳞癌)[3-4]。我国南方地区发生的鼻咽癌95%属于非角化鳞癌。
免疫组化与原位杂交双标记技术在鼻咽癌诊断中的应用
2 88・
・
临京医 学工 程2 0 1 4 年3 月 第2 1 卷第3 期
论著 ・
( 实验 研 究 )
免疫组化与原位杂交双标记技术在鼻咽癌诊断中的应用
刘泳冬,梁英杰 ,刘妮 ,李淑华,董愉 ,韩安家,宗永生
( 中 山大学 附属第 一 医院 病理科 ,广东 广州 5 1 0 0 8 0 )
S t a i n i n g a n d i n S i t u Hy b r i d i z a t i o n i n Di a g n o s i s o f Na s 0 p h a r y n g e a l
Ap p l i c a t i o n o f Do u b l e La b e l i n g o f Ca r c i n o ma
【 摘 要】 目的 探讨如何应 用免疫组化和原位杂 交双 重标记技 术 ,对辅 助鼻咽癌 的组织学诊 断最有 帮助 。方 法 采用免疫组
化 和原位杂 交双重标记技 术检测 3 0 例Hale Waihona Puke Baidu鼻咽 未分化 型非 角化性 癌组织 ,并在 同一切 片上检测 细胞 角蛋 白 ( C K)和 E B病毒 ( E — B E R) .同时观察两种指标在鼻咽癌细胞 中的表达情况。结果 CK定位 于鼻咽癌细胞 胞浆 内,呈棕 黄 色;E B E R 阳性反应定位 于 鼻 咽癌细胞的细胞核上 ,呈蓝黑 色。3 O例鼻咽 未分化 型非 角化性癌癌组 织均呈 C K和 E B E R 阳性 ,可看到鼻咽癌 细胞 同时表达 C K和E B E R.C K 的棕黄 色和 E B E R 的蓝 黑 色对比清晰容 易观 察。增生的鼻咽上皮 细胞 C K阳性 ,而 E B E R 呈 阴性。结论 CK 免 疫组化与 E B E R 原位杂交双标记技术有助于鼻咽癌 的组 织学诊断 ,可常规作 为鼻咽 癌病理诊 断常用的辅助技术 。双标技 术以先
免疫组化与原位杂交
1、固定剂:
用于免疫组织化学的固定剂种类较多, 性能各异,在固定半稳定性抗原时,尤其要 重视固定剂的选择。常用醛类固定剂。
2、注意事项:
应力求保持组织新鲜,勿使其干燥,尽快固定处理。 组织块不宜过大过厚, 必须小于2cm×1.5cm×0.3cm,
尤其是组织块厚度必须控制在0.3cm以内。 固定液必须有足够的量,在体积上一般大于组织20倍
㈡ 抗体(Antibody):
是机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种 能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白,称为免 疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。
1、多克隆抗体:
多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物(大 多数为兔),并从该动物血中所获得的免疫血清。它 是针对抗原分子上多个抗原决定簇的多个B淋巴细胞 克隆分泌的抗体。
免疫组化与原位杂交
免疫组织化学的主要原理是用荧光素、生物 素或地高辛等标记的抗体(或抗原)对细胞 或组织内的相应抗原(或抗体)进行定性、 定位或定量检测,经过组织化学的呈色反应 之后,用显微镜、荧光显微镜或电子显微镜 观察。
一、抗原和抗体
㈠ 抗原(Antigen):
凡能刺激机体产生抗体,并能与抗体发生特 异性结合的物质称为抗原。物质所具有的这种特 性称为抗原性(Antigenicity)。
㈠ 冰冻切片:
是免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法。 其最突出的优点是能够较完好地保存多种抗原的免疫 活性,尤其是细胞表面抗原更应采用冰冻切片。新鲜 的组织及已固定的组织均可作冰冻切片。
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的效果观察
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的效
果观察
摘要:鼻咽癌是一种较为常见的头颈部恶性肿瘤,其发病率呈上升趋势,并且常伴有EB病毒的感染。本研究旨在探讨免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒在鼻咽癌诊
断中的有效性和可行性,并观察其在临床应用中的效果。
关键词:免疫组化;原位杂交;EB病毒;鼻咽癌;诊断
引言
鼻咽癌是一种起源于鼻咽黏膜上皮细胞的恶性肿瘤,是头颈部最常见的恶性肿瘤之一。据统计,鼻咽癌的发病率在全球范围内呈上升趋势,尤其在东南亚地区尤为突出。鼻咽癌
的早期症状不明显,多数患者在确诊时已经处于晚期,给治疗带来了一定的困难。及早发
现和诊断对于鼻咽癌患者的治疗和预后具有重要意义。
EB病毒是一种广泛存在于人类群体中的病毒,它可以感染和潜伏在人体内。许多研究表明,EB病毒感染与鼻咽癌的发病密切相关。检测EB病毒在鼻咽癌中的存在情况对于鼻
咽癌的诊断具有一定的意义。免疫组化和原位杂交技术是目前应用较为广泛的分子生物学
检测方法,它们可以高效、敏感地检测特定的生物标志物,为癌症诊断提供重要的辅助信息。
材料与方法
1. 研究对象
本研究共选取了100例鼻咽癌患者的组织标本作为研究对象,其中包括60例男性和40例女性,年龄范围在40-70岁之间。所有患者均在就诊时行了组织活检,并经病理确诊为
鼻咽癌。
2. 标本处理
所有病理标本均进行了组织学固定、包埋和切片处理,制备成厚度为4μm的石蜡切片。切片分为两组,一组用于免疫组化染色,另一组用于原位杂交。
3. 免疫组化染色
采用SP法进行免疫组化染色,使用抗EB病毒抗体进行免疫组化染色。标本中的EB病毒抗原呈现为棕黄色颗粒。
免疫组化和原位杂交技术检测人工感染PRRSV猪体内病毒定位的比较
1 . 2 . 1 组 织样 品 来 源 2 8 日龄 的 仔 猪 l 2头 , P R RS V 抗体 检测 阴性后 , 用其 中 2 头 猪作 为空 白对
猪 繁殖 与呼 吸综 合征 ( P o r c i n e r e p r o d u c t i v e a n d r e s p i r a t o r y s y n d r o me , P R R S ) 是 由猪 繁殖 与 呼吸 综 合 征病 毒 ( P o r c i n e r e p r o d u c t i v e a n d r e s p i r a t o r y s y n d r o me v i r u s , P RR S V) 引起 的、 以母 猪 繁 殖 障 碍 和仔 猪 呼吸道综 合征 为主 要特征 。该 病 也称 猪 蓝耳
重要 的疫 病之 一 , 用 于 检测 P R RS V 的方 法很 多 , 如
源自文库
蓝/ 5 一 溴一 4 一 氯一 3 一 吲哚一 磷酸 盐 ) 等 均 为 成 都 天 泰 公 司
产 品; 探 针: 5 一 G GC AT A GG G GAC AA( G TT T AC C AC TC C C TG T TT AAC 一 3 , 生物 素于 5 末
1 . 1 . 2 主要 试 剂 自制兔 抗 P R RS V I g G; 羊 抗 兔
显色原位杂交与免疫组织化学检测乳腺癌HER-2基因的比较研究
果 在1 5例经 I C检测 H R一2 H E 水平表达为 ( ++) + 乳腺癌标 本 中 l 为 H R一2基因高扩增 , 4例 E 1例无扩
增 ;6 1 例经 I C检测 H R一2水平表 达为( H E ++) 乳腺癌标本中 ,1 l 例为 H R一2基因高扩增 , E 5例无扩增 ; 9例
CS ) IH 是近年来对 H R一2基 因检测 的一种新方 法。本研 冲洗 ; E ⑤滴加 1 滴聚合物 ( 试剂 A)室温 孵育 2mn P S , 0 i,B 冲 究 应 用 I C及 CS 两 种 方 法 检 测 了 4 H I H 0例 乳 腺 癌 标 本 中 洗 ; ⑥滴 加 1 酶标 抗 鼠/ 聚合 物 ( 剂 B) 温孵 育 滴 兔 试 室
・
论著 ・
显 色原 位 杂 交 与 免 疫 组 织 化 学 检 测 乳 腺 癌 H R一2基 因 的 比较 研 究 E
秦 景 , 马爱玲
700 ) 504 ( 宁夏 医学 院附 属 医 院 病 理科 , 川 银
摘要 : 目的 探 讨显色原位杂交( IH) Cs 在检测乳腺癌组织 中 H R一2 因扩增 的作用 , E 基 比较 CS I H与免疫 组化
SO i E2 h H R一 E 2是 表皮生 长 因子 受体 家族 的一员 , 具有 酪氨 基 因 原 位 杂 交 探 针 和 检 测 试 剂 盒 (P T— LgtH R I M H 为 ye 购 oh 公 酸激 酶样活性 的跨膜糖 蛋白 ( 15 , P8 ) 参与 酪氨酸激 酶信号 CS T试 剂 盒 ) 美 国 Zm d公 司 产 品 , 自上 海 R ce 转 导 调控 上 皮 细 胞 增 生 _ 。大 量 研 究 表 明 H R一2的 过 表 司 。 1 E
病理技师三基知识试题库与答案
病理技师三基知识试题库与答案
1、在H-E染色中脱蜡以后用酒精: ()
A、分化
B、篮化
C、透明
D、脱二甲苯使水逐渐进入切片
E、脱水
答案:D
2、肿瘤免疫组化诊断中通常用的标记物不包含: ()
A、特殊染色标记
B、软组织肿瘤标记
C、间叶组织肿瘤标记
D、淋巴造血细胞肿瘤标记
E、神经内分泌肿瘤标记
答案:A
3、下面哪一项不属于透射式照明法? ()
A、中心照明
B、柯勒照明
C、反射式或落射式照明
D、临界照明
E、斜射照明
答案:C
4、(1分) 关于周围型肺癌说法正确的是
A、癌组织起源于末梢的肺组织
B、易与转移癌相混淆
C、此型最常见
D、可侵犯胸膜
E、支气管镜检查易发现
答案:D
5、恒冷冰冻切片机箱内工作状态下温度范围是
A、-10℃±
B、-40℃±
C、-25℃±
D、-4℃±
答案:C
6、一氧化碳中毒死亡的尸斑呈: ()
A、灰褐色
B、黑色
C、黄色
D、紫色
E、桃红色
答案:E
7、DNA退火的含意是
A、热变性的DNA在降温过程中可复性
B、热变性的DNA维持原温度即可复性
C、热变性的DNA经加热处理后即可复性
D、热变性的DNA经酸处理后即可复性
E、热变性的DNA经酶切后即可复性
答案:A
8、(1分) 海绵状脑病的致病因子为
A、脑膜炎双球菌
B、真菌
C、结核杆菌
D、HPV
E、朊蛋白
答案:E
9、高碘酸-Schiff法中,高碘酸的作用是
A、漂白
B、还原
C、氧化
D、媒染
E、水解
答案:C
10、免疫组织化学检测,甲胎蛋白对哪种癌的诊断意义最大
A、肝癌
B、胃癌
C、卵巢癌
D、肺癌
E、结肠癌
答案:A
11、(1分) 病毒性肝炎时气球样变实质为
A、脂肪变
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的效果观察
免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断
鼻咽癌的效果观察
【摘要】
本文旨在探讨免疫组化与原位杂交双标记技术在诊断鼻咽癌中的应用效果。通过对EB病毒与鼻咽癌关系的分析,介绍了免疫组化技术和原位杂交技术在鼻咽癌诊断中的应用及双标记技术的优势。实验方法包括了细胞标本的处理和检测流程。研究结果显示,免疫组化与原位杂交双标记技术在鼻咽癌诊断中具有较高的有效性,为临床诊断提供了新的方法。未来研究可探索更多的双标记技术以提高诊断的准确性和全面性。本研究对于提升鼻咽癌的早期诊断和治疗具有积极的意义。
【关键词】
关键词:免疫组化、原位杂交、双标记技术、EB病毒、鼻咽癌、诊断、效果观察、研究意义、实验方法、有效性、未来研究方向
1. 引言
1.1 背景介绍
鼻咽癌是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,常见于亚洲地区。其发病机制尚不完全清楚,但已有研究表明,埃普斯坦-巴尔病毒(EB病毒)感染与鼻咽癌的发生密切相关。EB病毒是一种常见的病毒,能够在人
类鼻咽黏膜中潜伏多年,患鼻咽癌的患者体内EB病毒DNA的检测阳性率较高。
免疫组化技术是一种重要的组织学检测方法,可以通过检测组织中特定抗原的表达水平来判断疾病的发展程度。在鼻咽癌的诊断中,免疫组化技术可以帮助医生准确地识别肿瘤细胞,并辅助判断患者的病情。
原位杂交技术是一种检测核酸序列的方法,可以用于检测EB病毒DNA在肿瘤组织中的存在。通过将该技术与免疫组化技术结合起来,可以更准确地诊断EB病毒与鼻咽癌的关系。
本研究旨在探讨免疫组化与原位杂交双标记技术在诊断鼻咽癌中的作用,为临床诊断提供更加准确、可靠的依据。通过对其有效性进行观察和分析,希望为未来的鼻咽癌诊断和治疗提供参考。
荧光原位杂交技术与免疫组化对乳腺癌HER2检测的对比研究
荧光原位杂交技术与免疫组化对乳腺癌HER2检测的对比研
究
杨光明;杨列;蒋丽;代云;张建平
【摘要】目的:对比分析荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)与免疫组化(immunohistochemistry,IHC)法对乳腺癌人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)检测的效果,为临床检测乳腺癌HER2蛋白的方法选择提供理论依据.方法:随机选取2014年1月至2016年1月到医院就诊并确诊患乳腺癌的患者80名记为实验组,无乳腺疾病患者80名记为对照组.所有患者皆取乳腺石蜡标本,均采用IHC和FISH法检测,观察比较2组患者在不同检测方式下的HER2蛋白检出率的差异,对2种检测手段的应用效果进行评价.结果:观察组患者使用FISH后的阳性率为97.50%,使用IHC 的阳性率为88.75%,FISH的阳性检出率大大高于IHC,差异有统计学意义(P<0.05);对照组患者使用FISH的阴性率为80.0%,而使用IHC的阴性率为
92.50%,IHC的阴性率明显高于FISH,差异有统计学意义(P<0.05).结论:FISH有较高的阳性检出率,能够明显减少假阴性的发生,适用于乳腺癌的确诊实验和对转移及预后的评估;IHC有较高的阴性率,能够明显减少假阳性的发生,更适合于乳腺癌的筛查和排除诊断.
【期刊名称】《医疗卫生装备》
【年(卷),期】2016(037)011
【总页数】3页(P72-74)
荧光原位杂交与免疫组化联合检测乳腺癌组织HER-2价值评价
荧光原位杂交与免疫组化联合检测乳腺癌组织HER-2价值评
价
摘要目的分析荧光原位杂交(FISH)与免疫组化(IHC)联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果。方法选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组,另选取
96名健康志愿者作为对照组,对比两种检测方法检测效果。结果 FISH与IHC检
出率差异较大,其中FISH能够阳性检出率远高于IHC,而IHC阴性检出率远高于FISH,两种方法合用检出正确率为100%。结论 FISH、IHC联合使用能够有效避免
假阴性和假阳性的发生,具有更高的检出准确率。
关键词乳腺癌;荧光原位杂交;免疫组化HER-2
乳腺癌是目前影响女性生命健康的最常见的肿瘤,据世界卫生组织统计,乳
腺癌的发病已经不仅局限于女性,在男性身上也发现了乳腺癌,对乳腺癌的研究
刻不容缓,目前尚没有一种机制能够完全证明乳腺癌的发生、发展,但HER-2的
异常是乳腺癌患者的共同特征,因此,把HER-2作为检出乳腺癌的重要指标[1]。
在本次研究中重点分析FISH、IHC联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果,现
将试验流程以及结果分析如下:
1基本资料和分析方法
1.1基本资料
选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组,另选取96名健康志愿者作为
对照组,其入选标准是:年龄在23~65岁;均为首次接受治疗,具有较高的治
疗依从性;除乳腺癌以外没有其他肿瘤疾病或心血管、心肝肾功能异常。两组患
者乳腺癌症状、发病位置等对研究没有影响。
1.2分析方法
两组研究对象在入院以后按照分组进行试验,两组研究对象分别接受FISH、IHC两种方法检查,均采用乳腺石蜡切片标本检查,保证检测方法、时间等一致性,确保没有无关变量。制作石蜡标本:取患者标本,浸泡福尔马林24h,然后
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的二抗
免疫组化应用
在科研中的应用
在科研中的应用
在科研研究某个基因与疾病的发生 (肿 瘤)临床分期,预后,患者生存率等的相 关性。最终的目的是考察这个基因的临床 意义。
二、原位杂交
基本原理
分类 荧光原位杂交类型
原位杂交
探针
实验步骤 实验流程
具体实例
基本原理
1.核酸分子杂交的基本原理是利用核酸分
免疫组化的概念
通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去
探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与 抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化 学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达 到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定 量的研究。
1.染色方法
免疫组化的步骤
2.石蜡组织切片的制备 3.免疫组化染色(石蜡切片)
实验步骤
2.探针的制备 1.FISH 样 本 的 制备 3.探针标记
4.样本的预处理
6.染色体显带 5.杂交 7.荧光显微镜检 测
8.结果分析
实验步骤
1.FISH 样 本 的 制备 2.探针的制备 3.探针标记
4.样本的预处理
5.杂交 6.染色体显带
7.荧光显微镜检测
具体实例.
THANKS
子(DNA,RNA)的碱基对形成氢键的互
补性(A=T,A=U,C=G),用一标记的2.核 算探针去检测与之碱基互补的靶核酸
免疫学中抗原—抗体的反应
分类
1.组织
2.细胞
3.染色体
荧光原位杂交类型
1.基因组原位杂交
2.荧光原位杂交
Hale Waihona Puke Baidu
3.多色荧光原位杂交
探针
基因探针,即核酸探针,是一段带有检测 标记,且顺序已知的,与目的基因互补的 核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分 子杂交与目的基因结合,产生杂交信号, 能从浩瀚的基因组中把目的基因显示出来 。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至 少必须具备以下两个条件:①应是单链, 若为双链,必须先行变性处理。②应带有 容易被检测的标记。它可以包括整个基因 ,也可以仅仅是基因的一部分;可以是 DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA
次抗体,其二抗为未标记桥抗体。
石蜡组织切片的制备
1.取材:从动物或者患者取下组织材料。
2.固定:将所需的材料进行固定,使得组织内蛋白质
迅速凝固液(甲醛)细胞内结构和成分不再发生改变。 3. 脱水:固定后的组织内进行脱水,以 便石蜡的浸入。脱水用梯度酒精进行脱 水(自动脱水机) 4.浸蜡与包埋:组织放置刚过熔点的石蜡中,然后进行包埋,将透明后浸了 蜡的组织块放到盛有熔化石蜡的模块中,并使之凝固成蜡块。(包埋机)
5.切片与贴片:(组织切片机) (1)切片 (2)展片 (3)贴片
免疫组化染色(石蜡切片)
5.封闭 1. 考 片 65 摄 氏 度 1-2h 2. 常规二甲笨脱 蜡,和梯度酒精 水化 3.灭活内源性过
氧化物酶
4.抗原修复
6.一抗过夜
8.显色
10. 常 规 梯 度 酒 精 脱水,透明,干燥,
封片。
7. 加 入 有 标 记 9.苏木素复染
原位杂交与免疫组化
MEDICAL REPORT
PART 01 免疫组化的概念
主要内容
一、免疫组化 二、原位杂交
PART 02 免疫组化的步骤 PART 03 免疫组化的应用 PART 04 原位杂交
一、免疫组化
原理
抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组 织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的 某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,
染色方法
1.直接法 用标记物(荧光素、霉素)直接标记在
EARLY GOAL
2.间接法 荧光素,霉标记在二抗 上(二抗:抗产生一抗 动物的LgG抗体)。
一抗上,标记抗体与抗原结合。再通过 显色或者荧光激发后在显微镜下观察 4.ABC法 (亲和素—生物素—过 3.非标记Ab桥法 氧化物霉复合法)等等
桥法是霉标记抗体的改进,经过三