骨桥蛋白在骨关节炎中的研究进展
骨桥蛋白与关节炎
需 的 。一 些 炎 性 因 子 或 骨 组 织 的 机 械 压 力 可 使 骨 桥 蛋 白表 达
增 加 。在 炎 症 反 应 、 应力 引 起 的骨 重 建 、 胞 介 导 的 免 疫 反 应 、 细
磷 灰 石 表 面 ， 导 细 胞 与 细 胞 、 胞 与 基 质 的 相 互 作 用 。 骨 桥 介 细
ｃ ｎ ６ ０ ｈｏ ｇ ３７ ００，Ｓｉ ｈｕ ｃ ａｎ， Ｃｈｉ ａ ｎ
Ａｂ ｔａ ｔ ｓｒ ｃ ： Ｏｓ ｅ ｐ ｎ ｉ ｓａ ｐ ｒ ｏ ｅ ｌｗａ ｌ ｔ ｏ ｏ ｔｎ ｉ ａ ｔ ｆ ｃ ｌ ｌ，ｗｈ ｃ ｌｙ ｎ ｉ ｐ ｒａ ｔ ｒ ｌ ｎ ａ ｈ ｒ ｎ ｅ ｉ ｈ ｐ ａ ｓ ａ ｍ ｏ ｔ ｎ ｏ ｅ ｉ ｄ ｅ ｅ ｃ ，ｍｉ ｒ ｔ ｎ ｏ ｅ ｌ ｇ ａ ｉ ｆ ｃ ｌ， ｏ Ｎｅ ｒｙ ｓ ｕ ｉｓ ｓ ｇ ｅ ｔｔ ａ ｈ ｒ ｒ ｅ ａ ｉ ｎ ｈ ｐ ｂ ｔ ｅ ｓ ｅ ｐ ｎ ｉ ｎ ｒｈ ｉｉ． ａ ｌ ｔ ｄ ｅ ｕ ｇ ｓ ｈ ｔｔ ｅ ｅａ ｅ ｒ ｌ ｔ ｓ ｉ ｅ ｗｅ ｎ ｏ ｔ ｏ ｏ ｔｎ ａ ｄ ａ ｔ ｒｔ ｏ ｓ
１ 骨 桥 蛋 白结 构 及 特 性
ａｔ ａｉｎｇ ｎ￣ ，Ｅａ１ ， 证 实 骨 桥 蛋 白 是 Ｔ 淋 巴 细 胞 的 抑 ｃｉ ｔ ｅｅｌ ｔ一） 并 ｖ ｏ 制 因 子 ， 能 增 加 Ｂ淋 巴 细 胞 免疫 球 蛋 白（ｇ 产 生 和 增 值 ， Ｉ 并 Ｉ） 在 型 细胞 免 疫 中 有 重 要 作 用 ， 免 疫 系 统 和 骨 之 间 的 桥 梁 。Ｓ ｒ 是 ｅ 残 基 的磷 酸 化 可 以提 供 分 子 信 息 以 调 节 蛋 白 的 生 物 活 性 ， 酸 磷 化 的 骨桥 蛋 白通 过 整 合 素 受 体 结 合 于 细 胞 表 面 而 不 是 细 胞 外 基质 ， 对 于 依 赖 Ｃ 受 体 的相 互 作 用 ，ｅ 残 基 磷 酸化 不 是 必 但 Ｄ Ｓｒ
Elk-1调节骨骼系统功能的研究进展
中国骨质疏松杂志2020年12月第26卷第12期Chin J Osteoporo,December2020,V026,No12Published online doi：10.3969/j.issn.1006-7108.2020.12.0261857 Elk-1调节骨骼系统功能的研究进展王艺璇王可张舒!空军军医大学航空航天生物动力学教研室/航空航天医学教育部重点实验室，陕西西安710032中图分类号：R852.22文献标识码：A文章编号：1006-7108（2020）12-1857-04摘要：Elk-1是一种转录因子，属于Ete转录因子家族，在基因表达调控中发挥着重要作用）最近的研究结果表明,Elk-1参与调控骨组织细胞功能，主要可促进成骨细胞分化及增殖，并抑制成骨细胞凋亡）Elk-1可影响骨肿瘤、骨质疏松症等骨性疾病的病理过程，与骨肉瘤、骨尤文肉瘤、骨转移癌等多种骨肿瘤的侵袭、转移及预后不良密切相关,且在骨质疏松症等骨性疾病中Elk-1的表达及转录活性异常）本文将对Elk-1调节骨骼系统功能的研究进展进行概述）关键词：Elk-1；骨骼系统；成骨细胞Research progress of Elk-1regulating skeletal system functionWANG Yixuan,WANG Ke,ZHANG Shu!Department of Aerospace Biodynamics,The Key Laboratory of Aerospace Medicine,Chinese Ministry of Education,Xi'an 710032,China*Corresponding author:ZHANG Shu,Email：shuzhang@Abstract：Elk-1is atranscription factor,belonging to Ett transcription factor family,which plays an important role in gene expression regulation.Recent findings show that Elk-1is involved in regulating the function of bone tissue cells,mainly promotes the differentiation and proliferation of osteoblasts,and inhibitt the apoptosis of osteoblasts.Elk-1can affect the pathological process of bone tumors,osteoporosis and other bone diseeses.It is closely related to the invasion,metastasis and poor prognosis of many kinds ofbone tumors,such as osteosarcoma,Ewing's sarcoma and metastatic cencer of bone.Moreover,the expression and transeriptionaaaetivity ofEak-1areabnormaain osteoporosisand otherbonediseasescThispaperwi a summarizethereseareh progre s ofEak-1reguaating theskeaetaasystem funetioncKey words：Elk-1；skeletal system；osteoblastEte转录因子属于进化上保守的最大的转录调节因子家族之一，该家族由30多个成员组成，可参与细胞内稳态的调节,在人类生理和病理过程中发挥着重要的调节作用-1］o转录激活因子ETS样蛋白1（ETS-like1transcription factor,Elk-1%属于Ete 结构域转录因子家族，具有调控细胞增殖、分化和凋亡等功能，在骨骼系统中也发挥着重要的作用［2］。
骨桥蛋白研究现况及其在ITP发病机制中的研究展望
中国 农 村 卫 生 ２ ０ １ ６年 ６月 第 １ ２期总 第 ９ ｏ期 Ｃｈ ｉ ｎ ａ ＇ ｓ ｒ ｕ ｒ ａ ｌ ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ ， Ｊ ｕ ｎ ｅ ２ ０ １ ６ ， Ｎｏ ． １ ２ ， Ｔｏ ｔ ａ ｌ Ｎｏ ９ ０
骨 桥 蛋 白研 究 现 况 及 其 在 Ｉ ＴＰ发 病 机 制 中 的 研 究 展 望
张 华 陶 洁 （ １ ． 山 西 医科 大 学 ０ ３ ０ ０ ０ ０ ２ ． 山西 医科 大 学 第一 医院 血 液 科 ０ ３ ０ ０ ０ １ ）
【 摘要】 骨桥 蛋 白 （ ｏ ｓ ｔ ｅ ｏ ｐ ｏ ｎ ｔ ｉ ｎ ， Ｏ Ｐ Ｎ） 是一种分子量为 ４ ４ ｋ Ｄ 的 分 泌 型 糖 基 化 磷 蛋 白， 他 的作用 广泛， 可 以 介 导 细胞 与 细 胞 ， 细 胞 与基 质 间 的相 互作 用 ， 参与骨质代谢 ， 调 控 炎 症基 因表 达 ， 影响细胞 迁移， 调 节 Ｔ、 Ｂ细胞 的分化和功 能， 被认 为是一 种新 的细胞信 号 分子 。原 发 免 疫性 血 小板 减 少症 （ ｐ ｒ ｉ ｍａ ｒ ｙ ｉ ｍｍｕ ｎ ｅ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍｂ ｏ ｃ ｙ ｔ ｏ ｐ ｅ ｎ ｉ ａ ，Ｉ ＴＰ ） 是 一 种 获 得 性 自身 免 疫 性 疾 病 ， 患 者 出 现 自身免 疫 性 血 小板 减 少 、 伴 或 不 伴 皮 肤 黏 膜 出血 等 临床 表 现 ， 严 重 者 可 出现 内脏 出血 。有 研 究 显 示 Ｉ Ｔ Ｐ是 一 种 Ｔ ｈ １占 主 导 的 疾 病 。ＯＰ Ｎ 在 自身 免 疫及 其 他 炎 症过 程 中 作 为 一种 潜在 的促 炎 症 细胞 因子起 作 用 ， 且能促进 Ｔ ｈ １免 疫 反 应 而抑 制 Ｔ ｈ ２免 疫 反 应 。 本 文 通 过 对 ＯＰ Ｎ的
骨桥蛋白简介、功效及应用介绍
骨桥蛋白简介、功效及应用介绍一、骨桥蛋白简介骨桥蛋白，一听名字，即使是食品科学、营养学专业的人也会感到陌生，甚至从未听过。
绝大多数人的认知中，对乳清蛋白、大豆蛋白以来源为区分依据的蛋白种类更为熟知。
同一来源的不同分子结构的蛋白质，相对熟悉的有乳清蛋白、酪蛋白、乳铁蛋白、α-乳白蛋白这些大部分应用于婴幼儿配方奶粉行业的功能型乳蛋白原料。
同样，说骨桥蛋白熟悉的理由是这种蛋白也是存在于乳中，乳为其重要的来源。
有喝牛奶习惯的人群每天都会摄入一定量的骨桥蛋白。
骨桥蛋白在牛乳中的含量为18mg/L，人乳中高得多，达138mg/L，且不同个体差异大。
骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）是一种带负电荷、高磷酸化和糖基化的蛋白质，等电点为3.6，含有一个RGD（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸，Arg-Gly-Asp）序列，除存在于乳汁外，胆汁、尿液等多数细胞和组织中都可分泌。
骨桥蛋白作为一种功能性蛋白，同乳铁蛋白类似，虽然在乳中含量极低，但通过提纯后的物质被证实有一定的生物活性。
目前，市场上已有从牛乳清中分离得到的高纯度的骨桥蛋白，但市场应用尚未普及。
二、骨桥蛋白的功效及应用1、免疫功能据研究，骨桥蛋白的生物活性一般是通过与细胞表面受体和整合素，直接相互作用来实现的。
乳中的骨桥蛋白会通过一些作用力与乳铁蛋白等一些功能蛋白发生结合，并可能作为这些免疫调节或抗菌蛋白到其作用位点的转运体。
研究表明口服骨桥蛋白可能通过改变免疫反应来促进病原防御，可以抵御细菌、病毒等感染。
因人乳与牛乳的差异性，骨桥蛋白作为母乳化的重要原料可添加至婴幼儿配方奶粉中，发挥其对婴儿免疫调节的重要作用。
2、关节健康骨关节炎不仅存在于中老年，目前年轻人的发病率也逐年上升。
这种疾病的发病机制尚不清楚，但发生炎症主要因软骨退变、滑膜增生、软骨下骨硬化以及骨赘而形成。
软骨细胞作为关节软骨中的唯一细胞，在维持基质的完整性和组织稳定中起着重要的作用。
骨桥蛋白是一种基质糖蛋白，通过研究证实骨桥蛋白对骨关节炎软骨细胞的增殖具有促进作用，同时能是通过细胞外基质完整性两方面进行调控，进而对骨关节炎起到治疗的作用。
骨桥蛋白在免疫中的作用
骨桥蛋白在免疫中的作用李娜;安利国;乔宇;杨桂文【期刊名称】《山东师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(027)001【摘要】骨桥蛋白(OPN)是一种多功能的磷酸化糖蛋白,其涉及多种病理生理学过程.近来研究发现骨桥蛋白通过不同的翻译起始位点产生两种形式的蛋白,即分泌型骨桥蛋白( sOPN,secreted OPN)和胞内型骨桥蛋白(iOPN,intracellular OPN).本文主要介绍了sOPN及iOPN在免疫应答中的作用.%Osteopontin ( OPN) is a glycophosphoprotein protein that is involved in various pathophysiological events. Recent reports showed that two isotypes of OPN which are sOPN and iOPN were produced by different translation initiation site. In this study we discussed the role of sOPN and iOPN in immune response.【总页数】4页(P130-133)【作者】李娜;安利国;乔宇;杨桂文【作者单位】山东师范大学生命科学学院,250014,济南;山东师范大学生命科学学院,250014,济南;山东师范大学生命科学学院,250014,济南;山东师范大学生命科学学院,250014,济南【正文语种】中文【中图分类】R392【相关文献】1.自身免疫性疾病研究的新进展--骨桥蛋白在类风湿性关节炎中的病理机制研究[J], 臧敬五2.骨桥蛋白在风湿免疫性疾病患者血浆中的表达及意义 [J], 李兴锐;徐建华;周小妹3.骨桥蛋白在原发免疫性血小板减少症患者血浆中的表达及意义 [J], 陶洁;张华;高丹;葛晓静;张伟华;张秀莲4.骨桥蛋白在肺结核治疗中的免疫调节作用机制分析 [J], 杜鸿; 陈刚; 张立明5.肝包虫周围纤维囊壁中骨桥蛋白免疫印记与组化分析 [J], 李建辉;彭心宇;唐娟;吴向未;张示杰;牛建华;孙红;牛少雄;吕游因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
关于公布2016+年中南大学研究生创新项目的通知
附件：1.2016 年推荐为湖南省研究生科研创新项目名单 2.2016 年中南大学博士生自主探索创新项目名单 3.2016 年中南大学硕士生自主探索创新项目名单 中南大学 2016 年 4 月 27 日
―2―
附件 1
2016 年推荐为湖南省研究生科研创新项目立项名单
序号
项目名称
项目负
研究
层次
2016zzts033 钽铌基生物医用材料的制备与性能研究
曾钢 许慧霞 刘超 张响 刘珏
2016zzts034 Ni 基合金电极的粉末冶金制备及析氢性能的研究
2016zzts035 2016zzts036
异原子掺杂的多孔碳/碳量子点催化材料表面可控化 设计及其催化机制研究 赤泥自然堆存过程中碱物质转变及生物质调碱机理 研究
李官成
3
制研究
项
基因-环境在 ASD-3D-mini 大脑模型中的交互作用及其毒
公共卫生与预防
23
钟霞丽 博士生 2 年
SCI2-3 篇
性通路的分子机制研究
医学
钟才高
3
24 基于化学生物学方法的药物与靶点相互作用预测平台的构建 董界 博士生 2 年 药学
SCI2-3 篇
曾文彬
3
25 谷氨酰胺合成酶在放疗抵抗中的作用及其机制
3
血清γ-氨基丁酸水平和心理弹性对有儿童期虐待史大学
28
刘剑波 博士生 2 年 临床医学
生的情绪面孔注意偏向的影响研究
腓骨肌萎缩症新致病基因 MORC2 的基因型-表型相关性分
29
赵鑫 博士生 2 年 临床医学
析及功能研究
SCI2-3 篇 SCI2 篇
罗学荣
3
张如旭
人乳活性成分—骨桥蛋白研究进展
人乳活性成分—骨桥蛋白研究进展朱婧1综述汪之顼2陈同辛3审校1. 北京市科学技术研究院北京市营养源研究所（北京 100069）；2. 南京医科大学公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学系（江苏南京 211166）；3. 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心免疫科（上海 200127）摘要： 骨桥蛋白（OPN）是近年来备受关注的一种高度磷酸化，具有O-糖基化修饰的酸性蛋白。
根据OPN在体内的分布，可分为分泌型OPN和细胞内OPN，可由体内多种组织细胞合成或分泌，广泛存在于骨、肾、脑、肌肉等多种组织和细胞中。
近年的研究发现，乳汁尤其是初乳中分泌型OPN含量高，且分泌型OPN在生命早期的肠道生长、免疫调节、神经系统发育中发挥着重要作用。
本文综述乳汁中OPN对生命早期生长发育和健康作用的研究进展。
关键词：骨桥蛋白；肠道发育；免疫；婴幼儿Research progress in human milk active ingredient-osteopontin Reviewer: ZHU Jing1, Reviser: WANG Zhixu2, CHEN Tongxin3 (1.Beijing Institute of Nutritional Sources, Beijing Academy of Science and Technology, Beijing 100069, China;2. Department of Child and Adolescent Hygiene and Maternal and Child Health, School of Public Health, Nanjing MedicalUniversity, Nanjing 211166, Jiangsu, China; 3. Department of Immunology, Shanghai Children's Medical Center, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200127, China)Abstract: Osteopontin (OPN) is a highly phosphorylated acidic protein with O-glycosylation modification and has attracted much attention in recent years. According to the distribution of OPN in the body, it can be divided into secreted OPN and intracellular OPN. It can be synthesized or secreted by a variety of tissues and cells in the body, and widely exists in bone, kidney, brain, muscle and other tissues and cells. Recent studies have found that secretory OPN is high in breast milk, especially in colostrum, and that secretory OPN plays an important role in intestinal growth, immune regulation and nervous system development in early life. This article reviews the research progress in the effects of OPN in milk on early life growth and health.Key words: osteopontin; intestinal development; immunity; infants and young childrendoi:10.3969/j.issn.1000-3606.2021.04.019母乳可提供婴儿生长发育所需的营养物质和活性成分，特别是一些与免疫保护密切相关的功能成分，包括蛋白质类，如乳铁蛋白（lactoferrin）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）；脂类，如1，3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯（1,3-dioleoyl-2-palmitoyl triglyceride，OPO）、乳源神经节苷脂（gangliosides milk origin，gsMO），以及母乳低聚糖（human milk oligosaccaride，HMO）等。
中西医治疗膝关节骨性关节炎的机理研究进展文献综述
瘀，祛风湿通络止痛为法；中药内服、针灸、艾灸、中药熏洗、穴位贴敷等中医疗法都可以起到一定的治疗作用。
本文共纳入10篇文献，并根据文献中治疗有效率，JOA 评分，V AS 评分等结局治疗，进行Mate 分析，绘制森林图，结果表明运用中西医结合治疗腰椎退行性疾病有效率高于单纯西医治疗，JOA 评分高于单纯西医治疗，V AS 评分低于单纯西医治疗。
总的来说中西医结合治疗腰椎退行性疾病的临床疗效优于单纯西药治疗，并在改善腰椎功能及缓解疼痛上有较好的效果。
本文局限性：①纳入文献10篇，可能存在文献遗漏，样本较小；②纳入文献的Jadad 质量评分较低；③有效率指标可能存在发表偏倚。
提示我们还应进一步加强对腰椎退行性疾病的研究。
综上，本研究认为中西医结合治疗腰椎退行性疾病疗效较好，以供参考。
但更明确是结论有待于更科学严谨和样本量更大的随机对照研究。
参考文献：[1]王经宇,董玉珍,安永博,等.HXN 型微创椎弓根螺钉系统经伤椎固定治疗胸腰椎骨折[J].中国组织工程研究,2017,21(35):5616-5621.[2]段大波,张树鹰.椎体成形术治疗创伤性胸腰椎骨折的效果探究[J].当代医学,2016,22(18):31-32.[3]Jadad AR,Moore RA,Carroll D,et al .Assessing the quality of reports of randomized clinical trials:Isblingding necessary[J].Contron ClinTrials,1996,17(1):1-12.[4]陈博,黄肖华,易生辉.中西医结合治疗强直性脊柱炎疗效的Meta 分析[J].中医临床研究,2016,8(32):4-8.[5]刘海峰,沈志民,王满,等.独活寄生汤配合西药治疗急性腰椎退行性骨关节病的临床研究[J].陕西中医,2015,36(7):863-864.[6]石睿,傅麟炜,王小彬,等.中西医结合保守治疗腰椎间盘突出症临床观察[J].双足与保健,2019,28(1):127-128.[7]张宝喜,孙艳林,曹建青.中西医结合保守治疗腰椎间盘突出症临床观察[J].名医,2019(2):130.[8]王刘玉.中西医结合疗法治疗腰椎间盘突出症的临床疗效分析[J].河南医学研究,2015,24(12):44-46.[9]曲安龙.中西医结合治疗腰椎间盘突出症疗效观察[J].实用中医药杂志,2017,33(7):787-788.[10]梁丽瑞.中西医结合治疗腰椎间盘突出症临床观察[J].实用中医药杂志,2019,35(12):1464-1465.[11]严巍.中西医结合治疗腰椎退行性骨关节病78例临床观察[J].医药论坛杂志,2011,32(14):149-150.[12]马京欢.中西医结合治疗腰椎退行性骨关节病的疗效研究[J/CD].中西医结合心血管病电子杂志,2015,3(3):80-81.[13]丁思明,向伟明,唐吉莲,等.中西医结合治疗退变性腰椎管狭窄症疗效观察[J].现代中西医结合杂志,2012,21(34):3813-3814.[14]董兵.中西医结合治疗退行性腰椎管狭窄的临床疗效观察[J].医学信息(上旬刊),2011,24(5):2955-2956.编辑：田杏茹 编号：EA-4200608079（修回： 2021-01-18）中西医治疗膝关节骨性关节炎的机理研究进展文献综述A literatures review on the mechanism of treating knee osteoarthritis inTCM and Western medicine易 岚 欧阳厚淦* 欧阳彦楚 崔田田 吴慧婷 陈 楚（江西中医药大学，江西 南昌，330004）中图分类号：R322.7+2 文献标识码：A 文章编号：1674-7860（2021）02-0142- 证型：ID 【摘 要】为了了解现时段中西医在膝骨性关节炎（Knee Osteoarthritis ，KOA ）中的治疗进展，从文章治疗机理角度进行总结，通过选取近年来代表性强、影响力大的相关文献，分析得出：目前治疗KOA 的方法西医多以药物配合，后期予以手术，但存在一定的不良反应；而在中医的方面，治疗方式多种多样，且效果显著。
骨桥蛋白在免疫调节和肿瘤中的研究进展
骨桥蛋白在免疫调节和肿瘤中的研究进展姚辉（1978-），女，硕士研究生，副主任检验师，主要从事分子生物学及生物化学检验关键词：骨桥蛋白(OPN),免疫调节,肿瘤;骨桥蛋白(OPN)，是一种在多种组织和细胞广泛表达的磷酸化糖蛋白。
研究中发现，OPN能够被启动的淋巴细胞和巨噬细胞所分泌，是一种可能的淋巴细胞因子，因此又称为Eta-1（早期淋巴细胞启动基因-1）。
在T淋巴细胞、上皮细胞、骨细胞、巨噬细胞、内皮细胞及肿瘤细胞中均有表达；在骨组织的矿化与重建、动脉硬化、自身免疫性疾病及感染、缺血－再灌注损伤、肿瘤的发生发展等过程中发挥着重要的作用。
OPN已经被作为多种肿瘤和炎症性疾病的生物标志物。
研究表明，过表达和OPN表达失调和多发性硬化症，系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎，炎症性肠病等自身免疫疾病有着密切的联系。
虽然OPN早期被认为是包含RGD结构的骨粘连基质蛋白，但是现在充足的证据证明OPN作为可溶性的细胞因子能激活多种细胞信号转导通路。
1 OPN的结构及受体1.1 OPN的结构人OPN基因具有7个外显子和6个内含子,位于染色体4q13。
人OPN 共有314个氨基酸 ,其中RGD序列是骨桥蛋白分子发挥黏附功能的结构基础，具有高度保守性，如果变异或缺失，将丧失促黏附功能。
另外，骨桥蛋白还有一个有意义的结构特征是：在RGD序列附近区域(离RGD列仅有6个氨基酸残基有1个RSK位点结构)存在凝血酶裂解位点，能被凝血酶裂解成大小不同的一个氨基末端片段和一个羧基末端片段, 把OPN 分子分开成为两个功能区,包括GRGDS 区在内的N 端片段对整合素αvβ3 (在恶性肿瘤中表达异常丰富)和αvβ5 (广泛存在于正常组织)特异性较强；C端片段和黏附分子与CD44结合。
另外在RGD片段和CD44 结合位点之间含有整合素β1识别位点,整合素β1可能作为OPN 的受体将其同整合素α链(α4和α9)结合，诱导细胞迁移。
1.2整合素和CD44OPN和细胞表达的多种受体相互作用，包括αvβ1、αvβ3、αvβ5、αvβ6和α5β1一个隐藏的整合素结合位点（人SVVYGLR和鼠SLAYGLR）通过促进α4和α9(α4β7、α9β1)的表达，调节细胞黏附，运动和迁移。
骨科试题集3
一、填空题1．胫骨中下1／3骨折不愈合率高，原因在于 ( D )A．不能有效地制动 B．难于早期发现 C．近侧骨折段血液供应差 D．远侧骨折段血液供应差 E．损伤暴力大2．在下列各项中，哪项不是骨折切开复位的指征 ( D )A．骨折合并血管，神经损伤，需手术探查 B．骨折断端有软组织嵌入，手法整复失败 C．关节内的骨折，关节面移位超过2mm D．通过手法整复，仍不能达到解剖复位 E．多处骨折，为减少并发症3．肢体离断伤，前往医院就诊。
当气温较高时，用消毒敷料包裹的肢体可 ( E ) A．置放在冷生理盐水中 B．置放在温生理盐水中 C．置放在冷水中 D．直接放在冰盒内 E．用塑料袋封闭后放入冰盒内4．伏克曼缺血性挛缩的早期症状为 ( D )A．远端肢体疼痛，皮肤温度升高，肿胀 B．远端肢体苍白，肿胀，淤血 C．肢体疼痛，活动受限，麻木 D．肢体疼痛，麻木，苍白，脉搏减弱或消失 E．肢体疼痛，皮肤温度升高，活动受限，脉搏次数增加5．有关骨折的功能复位标准，下列哪一项错误 ( E )A．成人下肢骨折缩短不超过1cm B．成人骨折成角移位不超过10度，儿童不超过15度 C．长骨干横形骨折对位达1／3 D．儿童下肢骨折缩短移位不超过2cm E．成人骨折分离移位不超过2.5cm6．关于骨折愈合的标准中，下列哪一项不正确 ( C )A．局部无反常活动 B．局部无压痛及纵向叩击痛 C．骨折后已满3个月D．连续观察2周，骨折不变形 E．X线片显示骨折线模糊，有连续骨痂通过骨折线7．Colles骨折远端的典型移位是 ( B )A．向尺侧及背侧移位 B．向桡侧及背侧移位 C．向尺侧及掌侧移位 D．向桡侧及掌侧移位 E．只向背侧移位8．哪支动脉损伤最易引起股骨头缺血坏死 ( C )A．股圆韧带内的小凹动脉 B．股骨干滋养动脉升支 C．旋股内侧动脉 D．旋股外侧动脉 E．腹壁下动脉9．肱骨干中段骨折或手术最容易造成的并发症 ( C )A．肌皮神经损伤 B．正中神经损伤 C．桡神经损伤 D．肱动静脉损伤E．尺神经损伤10．儿童化脓性骨髓炎的脓肿不易进入关节腔的主要原因是 ( E )A．儿童的关节对化脓性炎症的抵抗力强 B．关节囊对关节腔具有保护作用C．脓液容易局限和吸收 D．脓肿容易由软组织溃破 E．骺板起屏障作用11．前臂双骨折易导致 ( D )A．血管损伤 B．肌腱断裂 C．骨筋膜室综合征 D．旋转功能障碍 E．神经损伤12．在肩关节前脱位的病人中，下列哪项可以作为确诊依据 ( D )A．肿胀 B．疼痛 C．功能障碍 D．方肩畸形 E．反常活动13．诊断腰椎间盘突出症最重要的依据是 ( E )A．X线平片 B．MRI C．CT D．电生理检查 E．病史、症状及体格检查14．一病人为自行车撞伤右膝外侧，拍片证实为腓骨小头骨折，检查发现踝关节不能主动背伸，可能并发 ( C )A．坐骨神经损伤 B．胫神经损伤 C．腓总神经损伤 D．胫前肌撕裂伤E．腓骨长、短肌撕裂伤15．Colles骨折典型的体征是 ( B )A．爪形手 B．餐叉样畸形 C．垂腕畸形 D．对掌困难 E．猿手畸形16．男性，68岁，下台阶时摔伤，右下肢短缩约3cm，足外旋45度，髋部叩痛明显，肿胀不明显，最可能的诊断是 ( C )A．右股骨干骨折 B．右髋臼骨折 C．右股骨颈骨折 D．右股骨头骨折E．右股骨粗隆间骨折17．男性，25岁，右膝关节扭伤2周，行走时打软，不稳，有“错位”感，下列哪项检查可诊断为交叉韧带损伤 ( B )A．McMurray试验阳性 B．抽屉试验阳性 C．过伸过屈试验阳性 D．浮髌试验阳性 E．内外翻试验阳性18．肩周炎的主要治疗方法是 ( E )A．制动 B．理疗 C．推拿按摩 D．针灸 E．功能锻炼19．在脊柱骨折病人的搬运过程中，应固定的体位是 ( D )A．半卧位 B．侧卧位 C．俯卧位 D．仰卧过伸位 E．屈曲侧卧位20．判断骨盆骨折合并尿道断裂最简单有效的方法是 ( D )A．肾脏CT检查 B．肾脏MRI检查 C．静脉肾盂造影 D．放置导尿管检查E．膀胱镜检查21．骨盆骨折最严重的并发症是 ( E )A．尿道损伤 B．膀胱损伤 C．直肠损伤 D．神经损伤 E．盆腔血管损伤22．关于腰椎间盘突出症的预防，下列哪项预防措施是错误的 ( B )A．避免长期久坐 B．坚持弯腰训练 C．加强腰背肌锻炼 D．使用腰围E．定期行理疗、推拿、按摩23．腕关节掌侧玻璃切伤，出现哪项体征说明有正中神经损伤 ( C )A．伸指受限 B．外展小指受限 C．外展拇指受限 D．并指功能受限 E．内收拇指受限24．在尺神经损伤的临床表现中，下列哪项是正确的 ( D )A．手的第二蚓状肌麻痹 B．拇背伸功能障碍 C．猿手畸形 D．第三、四蚓状肌及骨间掌、背侧肌麻痹 E．桡侧皮肤感觉迟钝25．男性，69岁，平素体健，在跑步时，不慎摔伤右髋部。
软骨下骨在骨性关节炎中的研究进展
软骨下骨在骨性关节炎中的研究进展摘要】骨性关节炎(OA)不仅是骨与软骨发生退行性变的过程,同时软骨下骨也发生着改变，其在维持软骨的正常结构与功能中起着重要的作用。
在生物学及生物力学作用下，软骨下骨的重塑过程使骨与软骨承受更高的应力。
软骨下骨损伤及新生血管的形成扩大了骨与软骨之间异常的交流通道，软骨下骨代谢产生的生物调节因子通过扩大的生物学交流通道直接促进软骨的退变。
因此，研究软骨下骨内细胞及结构的变化、新生血管形成、骨与软骨之间的生物学交流以及软骨下骨的重塑过程，将会对OA的研究及治疗有很大的帮助。
本文从解剖结构、生物力学、骨重塑和治疗等方面对软骨下骨在OA中的改变及作用的相关研究进展作一综述。
【关键词】骨性关节炎；软骨下骨；骨重塑【中图分类号】R68 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）21-0005-03引言随着全球老龄化人口增加，骨性关节炎(OA)正逐渐成为关节炎中最常见的类型之一，它是导致中老年人群功能残疾和造成经济损失的主要疾病之一[1]。
通过大量的调查研究显示，软骨下骨的变化在OA的发生与发展过程中起着极为重要的作用，是OA进程的重要标志。
在OA发展过程中不论软骨下骨改变是否早于软骨损伤，软骨下骨都是治疗OA的潜在目标[2]。
现对近年来软骨下骨在OA中的相关研究进展进行综述。
1.软骨下骨解剖结构骨和软骨之间由骨软骨板相隔，骨软骨板是骨与软骨之间的交流区。
骨软骨板由薄层皮质骨(软骨下皮质终板)和钙化软骨层组成，起抵抗剪切力、传导分散应力、紧密连接骨软骨等作用。
钙化的软骨层经潮线与关节软骨相隔，潮线表面密集分布着胶原纤维，对抗剪应力和限制软骨钙化。
软骨下皮质终板是位于钙化软骨层和松质骨之间的一层富有血管薄层皮质骨。
小动脉、小静脉和窦状小管可穿行于软骨下终板血管通道中，软骨下皮质终板终末血管可与深层软骨直接接触，连接髓腔和软骨层，提供给软骨大约50%的营养。
Pan等[3]在研究中发现软骨和软骨下骨间存在着物质运输的通道。
Indian+hedgehog信号通路与骨关节炎相关性的研究进展
不充分，最重要的是有致畸陛而止步临床‘３“”。。因此寻找一种
安全的可临床应用的Ｉｈｈ通路抑制剂成为其临床转化的难点。 ＩＰＩ一２６９６０９是一种Ｃｙｃｌｏｐａ—ｍｉｎｅ衍生物，它的酸稳定性及 水溶性更好，在抑制Ｉｈｈ通路方面更具潜力ｐ…；ＩＰＩ一９２６是 ＩＰＩ一２６９６０９的同类异构体，它的选择性更好、代谢更稳定，也具 有很大的潜力，已作为ｈｅｄｇｅ—ｈｏｇ信号通路抑制剂进入治疗肿 瘤的Ｉ期临床试验旧…。 依普黄酮，又名异丙氧基异黄酮，是一种人工合成的异黄 酮类植物雌激素，进人人体后可增加雌激素的作用进而治疗骨 质疏松ｍ Ｊ。１９８３年依普黄酮在日本被批准为骨质疏松症的治 疗药物后已在很多国家上市。２０１０年Ｌｉｐｉｎｓｋｉ等。４１。用小分子 筛选法，对４ ２４０种复合物进行筛选，发现依普黄酮可以在Ｉｈｈ 通路的Ｐｔｃｈｌ下游、Ｇｌｉｌ上游，即Ｓｍｏ水平抑制Ｉｈｈ通路。可见 依普黄酮除了有雌激素替代作用外，还可能通过抑制Ｉｈｈ通路 在ＯＡ的治疗中发挥作用。 三、展望
ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路可能通过促进软骨细胞肥大样
变，从而参与了ＯＡ的发病过程。针对Ｉｎｄｉａｎ ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通 路的阻断剂可能成为治疗ＯＡ的治疗靶点。以上近年来发现的 少数细胞毒性较小的Ｉｎｄｉａｎ ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路抑制剂，如可达 到抑制软骨细胞肥大、关节软骨退行性变进而治疗ＯＡ的目的， 则具有重要的临床意义。在不远的将来，寻找更多且不良反应 少的Ｉｎｄｉａｎ ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路抑制剂将有望为ＯＡ的治疗带来 全新突破。 参考文献
１．Ｉｎｄｉａｎ
１．软骨细胞中的Ｉｎｄｉａｎ ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路：在前肥大软骨 细胞中，ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路的激活始于活化的Ｉｈｈ蛋白的产生。 活化的Ｉｈｈ蛋白是由ｌｈｈ蛋白经过自我催化分解而产生的一种 胆同醇化氨基末端信号片段（ＨｈＮ）。随后，活化的ｌｈｈ蛋白 ＨｈＮ通过棕榈化而固定到细胞膜上。ＨｈＮ从细胞膜的释放依 赖于派送蛋白（Ｄｉｓｐ），一种结构上类似于Ｈｈ蛋白受体碎片蛋 白（Ｐｔｃ／Ｐｔｃｈｌ）的１２次跨膜蛋白’。 大量研究表明，软骨细胞表面分泌两种特殊的Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信 号通路膜蛋白，包括具有１２次跨膜结构的Ｐｔｃｈｌ和具有７次跨 膜结构的平滑蛋白（Ｓｍｏ）。当缺乏Ｉｈｈ蛋白时，Ｐｔｅｈｌ抑制Ｓｍｏ 的活性，后者通过蛋白酶切作用使通路下游的锌指转录因子ｃｉ 的ｃ末端形成一个转录抑制区，抑制细胞核内下游基因的表 达。当活化的Ｉｈｈ蛋白含量增高并与Ｐｔｃｈｌ结合后，即可解除 Ｐｔｃｈｌ对Ｓｍｏ的抑制作用，激活Ｈｈ通路，从而使完整的ｃｉ片段 进入细胞核，发挥转录激活子的作用，增强目的基因的转录表 达水平】８。下游的ｃｉ家族在脊柱动物体内存在３个亚型，即 Ｇｌｉｌ、Ｇｌｉ２和Ｇｌｉ３。其中Ｇｌｉｌ的功能相对简单，主要作为转录启 动子存在，Ｇｌｉ一１含量增高主要提示Ｈｈ通路激活；而Ｇｌｉ２和
幼年特发性关节炎患儿血清、关节液骨桥蛋白水平及意义
幼年特发性关节炎患儿血清、关节液骨桥蛋白水平及意义俞晗春;吴菱;钟世玲;陈圆玲;狄亚珍;王佳佩【期刊名称】《浙江医学》【年(卷),期】2016(038)009【摘要】目的探讨血清、关节液骨桥蛋白(OPN)在幼年特发性关节炎(JIA)中的临床意义.方法采集确诊为JIA 39例患儿(JIA组)及腹股沟斜疝修补术30例患儿(对照组)的静脉血,并抽取JIA组急性期15例患儿的关节液,采用ELISA法测定血清、关节液OPN水平.结果JIA组血清OPN水平急性期[(4.8±2.4)ng/ml]明显高于缓解期[(2.1±1.2)ng/ml]及对照组[(0.5±0.1)ng/ml],差异有统计学意义(P＜0.05).JIA组关节液OPN水平[(16.5±1.7)ng/ml]明显高于血清OPN水平[(4.8±2.4)ng/ml],差异有统计学意义(t=17.234,P＜0.05).JIA组中关节破坏的患儿血清OPN水平[(6.9±1.9)ng/ml]明显高于无关节破坏的患儿[(32±1.2)ng/ml],差异有统计学意义(t=7.243,P＜0.05).JIA组急性期血清OPN水平与血白细胞、中性粒细胞、C反应蛋白、血沉、关节肿胀数呈正相关(r=0.662、0.811、0.777、0.833、0.375,均P ＜0.05),与血红蛋白、血小板、关节压痛数、晨僵时间无关(r=0.091、0.296、0.229、0.019,均P ＞0.05).结论OPN可能作为促炎因子参与JIA疾病活动、关节破坏.【总页数】4页(P643-645,674)【作者】俞晗春;吴菱;钟世玲;陈圆玲;狄亚珍;王佳佩【作者单位】315211 宁波妇女儿童医院小儿风湿免疫科;315211 宁波妇女儿童医院小儿风湿免疫科;315211 宁波妇女儿童医院小儿风湿免疫科;315211 宁波妇女儿童医院小儿风湿免疫科;315211 宁波妇女儿童医院小儿风湿免疫科;宁波大学医学院【正文语种】中文【相关文献】1.25－羟维生素D3在幼年特发性关节炎患儿血清中的表达水平及意义 [J], 马志超;阮和球;黄白丽2.幼年特发性关节炎患儿外周血清及关节液中IL-6、IP-10及IL-17的表达 [J], 商艳朝3.IL-17在幼年特发性关节炎患儿血清中的表达水平及意义 [J], 孟景红;杜向一;陈海英;王俊祥;谢建丽;王倩倩;姚林虎;魏平4.RSV毛细支气管炎患儿血清瘦素和骨桥蛋白水平测定及临床意义 [J], 何月贤5.RSV毛细支气管炎患儿血清瘦素和骨桥蛋白水平测定及临床意义 [J], 何月贤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
蛋白多糖与骨性关节炎的研究
１６２第１ｉ届奎国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编蛋白多糖与骨性关节炎的研究王玉泉宋敏甘肃中医学院兰州７３００００骨性关节炎（ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＯＡ）以其高发病率及由此产生的病废，生活质量下降等问题已引起人们的广泛关注，但至今其发病机制并不完全清楚・ＯＡ的原发病变在关节软骨。
以往人们对软骨细胞和基质胶原成分研究较多，而对基质中另一主要成分蛋白多薷（ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ，ＰＧ）未引起足箍重视。
进来分子生物学的研究进展向人们揭示：陌在缅胞问信息传递．维持缅胞表型，与其他基质问相互作用及保持组织整体功能方面发挥着极其重要的生物学功能Ⅲ。
１蛋白多糖的生物化学组成蛋白多睹（ＰＧ）是～类非常复杂的大分子藉复台物，主要由糖胺聚糖（ＧＡＧ）链共价连接于核心蛋白所组成蜘。
分子量从ｌｌ至２２０ｋｄ・在软骨中蛋白聚糖以巨大分子聚集体存在，许多巨大的单体可能非共价地连或聚集在一根中央丝上，该中央丝由透明质酸的重复二糖单位构成其总分子量可达到几千万道尔顿单位。
现有研究表明，核心蛋白的分子量与构型具有多样性咖，这些多肽的氨基酸组成在不同的物种与组织中差别很大，但通常都不舍半胱氨酸．而富含谷氨酸，丝氨酸及苏氨酸。
氨基酸序列分析显示有不同功能区的存在硼。
过去ＧＡＧ常被称为酸性粘多糖，ＧＡＧ的基本构成区段与重复单位由数目不等的相同的或类似的＝糖单位构成。
Ｃ８ｍｅｙ啪等已发现了许多氨基葡聚糖类物质的重要结构，包括透明质酸（ｍ）、４一或６－硫酸软骨素（ｃｓ）、肝素（Ｈｅｐ）、硫酸乙酰肝素（Ｈｓ）、硫酸皮肤素（Ｄｓ）及硫酸角质素（ＫＳ）。
２蛋白多糖的生化特性蛋白多糖可根据在离心时的浮力密度差异进行分类。
低密度蛋白多糖群体一般为低分子量的分子群，主要由携带着一条或两条ＧＡＧ链的核心蛋白组成．核心蛋白上也可能存在Ｎ＿和／或ｏ．连接的寡糖啪，这种蛋白多糖是软骨中的主要类型，也是细胞外的各组成部分（例如胶原、纤维结合素）的主要生物粘合剂。
肿痛安胶囊对风痰瘀血阻络型膝骨关节炎关节滑液中骨桥蛋白表达的影响
肿痛安胶囊对风痰瘀血阻络型膝骨关节炎关节滑液中骨桥蛋白表达的影响王鹏;崔书国;国延军;赵建【摘要】目的:观察肿痛安胶囊对风痰瘀血阻络型膝骨关节炎关节滑液中骨桥蛋白表达的影响.方法:将118例风痰瘀血阻络型膝骨性关节炎病人分为试验组59例和对照组59例,试验组给予肿痛安胶囊口服治疗,对照组给予硫酸氨基葡萄糖口服治疗,治疗4周,检测治疗前后关节液中骨桥蛋白浓度,并采用WOMAC骨关节炎指数评分进行疗效评定.结果:2组治疗后滑液中OPN平均浓度明显低于各自治疗前,经检验差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组治疗前后滑液中OPN浓度差值的平均值高于对照组,经检验差异有统计学意义(P＜0.05).2组治疗后的WOMAC积分均比治疗前显著降低(P＜0.05).结论:肿痛安胶囊能够改善风痰瘀血阻络型KOA患者临床症状,并能显著降低膝关节液中OPN平均浓度,值得临床推广.【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2014(020)002【总页数】2页(P217,230)【关键词】肿痛安胶囊;膝骨关节炎;风痰瘀血阻络型;骨桥蛋白【作者】王鹏;崔书国;国延军;赵建【作者单位】河北省中医院骨科,石家庄 050011;河北省中医院骨科,石家庄050011;河北省中医院骨科,石家庄 050011;河北省中医院骨科,石家庄 050011【正文语种】中文【中图分类】R285.6近年研究表明，骨桥蛋白(OPN)在骨关节炎(OA)的发病过程中起重要作用，其可作为OA严重程度的判断依据。
本研究以膝骨关节炎(KOA)患者为研究对象，观察患者服用肿痛安胶囊前后膝关节滑液中OPN的含量变化，现报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料在我院骨科KOA患者中选择入组KOA风痰瘀血阻络证病例118例，其中试验组59例，对照组59例。
试验过程中，2组均无脱落和剔除病例。
2组病例的年龄、性别、体质量、身高、生命体征、药物过敏史、既往治疗史、合并疾病以及治疗前症状体征积分等基线资料方面比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。
成人骨关节炎软组织中COL2A1和NFAT1mRNA及蛋白表达的差异意义
成人骨关节炎软组织中COL2A1和NFAT1mRNA及蛋白表达的差异意义杨月楼;芦北极;候瀚涛;刘春磊【期刊名称】《临床心身疾病杂志》【年(卷),期】2016(022)0z1【摘要】目的:探讨骨性关节炎软骨组织中COL2A1和NFAT1基因蛋白的表达水平及临床意义.方法:收集30例因髋关节骨性关节炎行全髋或半髋置换的患者的软骨组织样本,并选取30例股骨颈骨折患者的软组织样本作对照.RT-PCR法检测COL2A1和NFAT1的mRNA水平,Western-blot法检COL2A1和NFAT1的mRNA和蛋白水平均高于股骨颈骨折患者,并有统计学差异(P＜0.05),结论:髋关节骨性关节炎软骨组织中COL2A1和NFAT1的基因及蛋白表达水平上调,提示两者在骨性关节炎软骨组织退变中起重要作用.【总页数】2页(P133-134)【作者】杨月楼;芦北极;候瀚涛;刘春磊【作者单位】广州医科大学附属第六医院清远市人民医院广州清远511518;广州医科大学附属第六医院清远市人民医院广州清远511518;广州医科大学附属第六医院清远市人民医院广州清远511518;广州医科大学附属第六医院清远市人民医院广州清远511518【正文语种】中文【中图分类】R684.3【相关文献】1.原发性与继发性胶质母细胞瘤中MGMT与突变型P53蛋白表达的差异及其生物学意义 [J], 李剑敏;万丽;黄卡特2.骨关节炎中骨桥蛋白表达及意义 [J], 王江一;郑稼;郑磊;刘珂;赵永强3.不同类型胃组织病变中p21蛋白表达的差异及其临床意义 [J], 李继承;邵志平;邵庆红;胡育昌;徐伟栋4.组织蛋白酶Z基因启动子部分位点在成人哮喘中的差异性甲基化表达及意义 [J], 张黎莎;杨贤苗;钱粉红5.胸苷激酶1在痛风性关节炎、类风湿性关节炎和骨关节炎中的表达差异及临床意义 [J], 陈刚;谢文光;周京国;党万太因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达及意义
膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达及意义张大威;陈向阳;査国春【摘要】目的探讨膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达及意义.方法选取行人工膝关节置换术患者28例,收集膝骨关节炎软骨标本,体外培养软骨细胞,分为空白对照组、siRNA组(siRNA脂质体2000转染软骨细胞)、重组人骨桥蛋白刺激组(1 mg/L重组人骨桥蛋白干预软骨细胞).酶联免疫吸法检测细胞培养上清液中IL-18,IFN-γ,IL-6,TNF-α水平;RT-PCR检测透明质酸合成酶mRNA表达水平.结果转染48 h后,空白对照组、siRNA组、重组人骨桥蛋白刺激组中膝骨关节炎软骨细胞的骨桥蛋白mRNA和蛋白相对表达量差异具有统计学意义(P<0.01);其中siRNA组骨桥蛋白mRNA和蛋白相对表达量明显降低,重组人骨桥蛋白刺激组明显提升.siRNA组细胞培养液中IL-18,IFN-γ,IL-6,TNF-α水平明显低于空白对照组、重组人骨桥蛋白刺激组,差异具有统计学意义(P<0.01);重组人骨桥蛋白刺激组细胞培养液中IL-18,IFN-γ,IL-6,TNF-α 水平明显高于空白对照组、siRNA组,差异具有统计学意义(P<0.01).siRNA组透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3 mRNA相对表达量明显高于空白对照组、重组人骨桥蛋白刺激组,差异具有统计学意义(P<0.05);重组人骨桥蛋白刺激组透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3 mRNA相对表达量明显低于空白对照组、siRNA组,差异具有统计学意义(P<0.01).结论下调膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达可抑制炎症因子分泌,促进透明质酸合成,改善膝骨关节炎病情.【期刊名称】《北华大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2019(020)004【总页数】5页(P472-476)【关键词】膝骨关节炎;软骨细胞;骨桥蛋白;炎症因子;透明质酸合成酶【作者】张大威;陈向阳;査国春【作者单位】徐州医科大学附属医院,江苏徐州 221000;徐州医科大学附属医院,江苏徐州 221000;徐州医科大学附属医院,江苏徐州 221000【正文语种】中文【中图分类】R684.3正常关节软骨组织由软骨细胞及分泌的胞外基质组成，胶原蛋白、透明质酸、蛋白聚糖是胞外基质的主要成分［1］.透明质酸可连接软骨组织中基质蛋白聚糖、多糖等大分子蛋白，在维持软骨正常生理特征中发挥关键作用［2］.透明质酸合成酶是调节透明质酸分泌的主要蛋白，包括透明质酸合成酶1和2共同形成的大分子量透明质酸以及透明质酸3形成的低分子量透明质酸［3］;其中透明质酸合成酶2在软骨细胞中作用最明显［4］.IL-18在膝骨关节炎患者关节液中呈高表达，且与IFN-γ，IL-6，TNF-α 等炎症因子表达水平密切相关，共同参与了炎症过程［5］.骨桥蛋白属于小整联蛋白结合配体N-连结糖蛋白家族，广泛分布于矿化骨组织中，软骨细胞、破骨细胞等骨细胞均能分泌骨桥蛋白.相关研究［6］显示:骨桥蛋白介导了正常软骨的生长代谢和修复过程.本研究在体外培养人膝骨关节炎软骨细胞，并通过脂质体转染siRNA下调细胞中骨桥蛋白表达，探讨对软骨细胞培养液中炎症因子以及透明质酸合成酶表达的影响.1 对象与方法1.1 研究对象选取28例2016年6月—2018年3月在徐州医科大学附属医院行人工膝关节置换术的患者，均符合2007年中华医学会制定的骨关节炎诊治指南中的标准诊断为原发性膝骨关节炎患者;近3个月内无膝关节腔内药物注射治疗史，无骨关节炎口服药物治疗史;排除创伤性关节炎等非原发性膝骨关节炎患者.其中，男16例，女12例;年龄57～75岁，平均(66.28±4.02)岁.本研究经医院伦理委员会审核批准，膝骨关节炎软骨标本取材均告知患者，并签署知情同意书.1.2 主要试剂胎牛血清、DMEM培养基(上海斯信生物科技有限公司);骨桥蛋白siRNA由上海拜力生物科技有限设计并合成;脂质体2000、重组人骨桥蛋白(艾美捷科技有限公司);炎症因子酶联免疫吸附法检测试剂盒(北京贝尔生物工程股份有限公司).1.3 方法1.3.1 细胞分离与培养术中取胫骨平台侧标本，磷酸缓冲液洗涤后用无菌手术剪将标本表面软骨块剪1 mm大小，装入离心管中，加入Ⅱ型胶原酶，混合均匀后放入37℃5%CO2培养箱中过夜，次日将离心管中混合液过60目滤网，将滤液转入20 mL离心管中，使用磷酸缓冲液定容至15 mL，1 000 r/min离心10 min，收集下层含软骨细胞的滤液.使用含10%胎牛血清DMEM完全培养基将细胞密度调整至1×109/L，分别装入细胞培养瓶中，常规培养至细胞覆盖瓶底80%以上后进行传代.1.3.2 细胞转染与鉴定将脂质体2000转染骨桥蛋白siRNA置于6孔板中，转染浓度为 100 nmol/L.将siRNA脂质体2000混合液加入DMEM完全培养基中，37℃ 5%CO2培养6 h 后，更换为DMEM完全培养基培养，继续培养24 h为siRNA组，荧光显微镜下观察带荧光标记的siRNA转染效率.同时设置不进行任何干预的空白对照组;1 mg/L重组人骨桥蛋白处理24 h的为重组人骨桥蛋白刺激组.1.3.3 细胞培养上清液中炎症因子检测将3组软骨细胞以3×105个/孔的密度接种于96孔板中，每孔加入150 μL DMEM完全培养基，37℃ 5%CO2培养24 h，收集细胞培养上清液，酶联免疫吸附法检测 IL-18，IFN-γ，IL-6，TNF-α 水平，操作严格按试剂盒说明进行.1.3.4 RT-PCR 检测Trizol法提取膝骨关节炎软骨细胞总RNA，反转录得到cDNA.透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3及内参β-actin引物合成由上海合星生物科技有限公司完成，透明质酸合成酶1引物序列:上游5'-ACTTCCGATGG GTCATAGCG-3'，下游 5'-AGAACTCCGGACCATGTTGG-3';透明质酸合成酶 2引物序列:上游 5'-CAGCAGG AGTCGGACAGACA-3'，下游 5'-GAGGAGGAACCTT AGTGTC-3';透明质酸合成酶3引物序列:上游5'-AACTTCCGGCACAT GTACTG-3'，下游 5'-CTCCTC CTAGGGGTTCATCC-3';β-actin引物序列:上游5'-AAGTATTGACAGGAAGGGTG-3'，下游 5'-GTCCTT GAAAGGTTTCAGTC-3'.反应条件:94 ℃ 30 s，94 ℃5 s，72 ℃ 30 s，共 40 个循环，延伸72 ℃ 10 min.扩增产物行2%琼脂糖凝胶电泳，计算透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3 mRNA的相对表达量.1.3.5 Western blot检测RIPA提取膝骨关节炎软骨细胞总蛋白，BCA法蛋白定量，行 SDS-PAGE凝胶电泳，转膜至PVDF，室温下用5%脱脂奶粉封闭1 h，滴加兔抗人骨桥蛋白单克隆抗体(1∶200)，4℃过夜，滴加HRP标记的二抗(1∶1 000)，室温反应1 h，滴加ECL显色液，避光显影，以β-actin为内参对照计算各条带灰度值.1.4 统计学分析应用SPSS 18.0软件进行统计分析，结果以均数±标准差(珋x±s)表示，进行方差分析、t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义.2 结果2.1 膝骨关节炎软骨细胞形态及转染情况鉴定原代培养膝骨关节炎软骨细胞，在培养瓶中贴壁成团生长，细胞呈梭形、三角形、椭圆形;荧光显微镜下观察软骨细胞已多数转染siRNA，转染效率＞90%.转染48 h后，空白对照组、siRNA组、重组人骨桥蛋白刺激组中膝骨关节炎软骨细胞的骨桥蛋白mRNA和蛋白相对表达量差异具有统计学意义(P＜0.01);其中siRNA组骨桥蛋白mRNA和蛋白相对表达量明显降低，重组人骨桥蛋白刺激组明显提升.见图 1～2，表 1.图1 膝骨关节炎软骨细胞形态及转染情况观察Fig.1 Observation of chondrocyte morphology and transfection in knee osteoarthritisAⅡ型胶原酶消化后的膝骨关节炎软骨细胞(×100);B荧光显微镜下观察siRNA转染后的软骨细胞(×100)图2 各组膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达水平的Western blot电泳结果Fig.2 Western blot electrophoresis of osteopontin expression in chondrocytes of knee osteoarthritis1空白对照组;2 siRNA组;3重组人骨桥蛋白刺激组表1 各组膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白mRNA和蛋白相对表达量Tab.1 Relative expression of osteopontin and osteopontin in chondrocytes of knee osteoarthritis in each group注:与空白对照组比较，a:P＜0.05;与 siRNA 组比较，b:P＜0.05?2.2 各组细胞培养液中 IL-18，IFN-γ，IL-6，TNF-α水平检测siRNA 组细胞培养液中 IL-18，IFN-γ，IL-6，TNF-α水平明显低于空白对照组、重组人骨桥蛋白刺激组，差异具有统计学意义(P＜0.01);重组人骨桥蛋白刺激组细胞培养液中 IL-18，IFN-γ，IL-6，TNF-α水平明显高于空白对照组、siRNA组，差异具有统计学意义(P＜0.01).见表 2.表2 各组细胞培养液中 IL-18，IFN-γ，IL-6，TNF-α水平Tab.2 IL-18，IFN-γ，IL-6 and TNF-α levels in cell culture medium of each group，ρ/(ng·mL－1))注:与空白对照组比较，a:P＜0.05;与 siRNA 组比较，b:P＜0.05?2.3 各组透明质酸合成酶mRNA表达水平siRNA组透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3 mRNA相对表达量明显高于空白对照组、重组人骨桥蛋白刺激组，差异具有统计学意义(P＜0.05);重组人骨桥蛋白刺激组透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3 mRNA相对表达量明显低于空白对照组、siRNA组，差异具有统计学意义(P＜0.01).见表 3.表3 各组透明质酸合成酶mRNA相对表达量Tab.3Relative expression of hyaluronic acid synthase mRNA in each group注:与空白对照组比较，a:P＜0.05;与 siRNA 组比较，b:P＜0.05?3 讨论膝骨关节炎多发于老年人群，严重影响患者生活质量［7］.膝骨关节炎发病过程受多因素共同调控，引发软骨细胞凋亡.研究［8］发现:IL-18是关节炎性病变早期的主要细胞因子，关节滑膜液中IL-18可直接接触T淋巴细胞，促进单核细胞分泌TNF-α;同时IL-18诱导生成的IFN-γ在关节滑膜液中可刺激IL-6，PGE2等炎症因子分泌，而TNF-α，IFN-γ是介导骨性关节炎等多种炎症疾病发生、发展的炎症因子［9］.骨桥蛋白是由T淋巴细胞、巨噬细胞等分泌的可溶性糖蛋白，广泛分布于骨骼组织、平滑肌、肾脏组织以及具有分泌功能的腺体，其中以骨骼组织含量最高［10］.骨桥蛋白通过胞外基质中RGD序列与细胞表面受体结合，促进细胞黏附和趋化［11］;骨组织中骨桥蛋白高表达可能参与骨关节炎症反应、软骨内骨化等多种病理过程［12］.本研究通过原代培养膝骨关节炎软骨细胞，并通过脂质体转染siRNA下调细胞中骨桥蛋白表达水平，结果显示:骨桥蛋白表达下调后膝骨关节炎软骨细胞培养液中 IL-18，IFN-γ，IL-6，TNF-α 水平明显下降，而重组人骨桥蛋白刺激组 IL-18，IFN-γ，IL-6，TNF-α水平明显上升.提示骨桥蛋白能够上调膝骨关节炎软骨细胞中炎症因子表达，破坏关节内炎症因子间的平衡状态，导致软骨退变和关节损伤加重.但骨桥蛋白在膝骨关节炎软骨细胞中通过哪些信号通路激活炎症因子分泌仍需进一步深入研究.透明质酸是广泛存在于关节软骨、晶状体、皮肤真皮层等组织中一种葡聚糖醛酸，是关节滑液中的主要成分［13］.透明质酸可通过影响胞外基质的形成以及直接作用于细胞来影响细胞行为，对关节内稳态的维持及关节润滑具有重要影响.同时，透明质酸还具有抑制IFN-γ，TNF-α等炎症因子的活性，可降低关节炎患者的关节内炎症反应［14］.相关研究［15］显示:骨桥蛋白可影响透明质酸合成酶表达水平及透明质酸浓度，但针对膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达对透明质酸合成酶影响的研究报道仍十分少见，且无法明确透明质酸浓度的改变受哪种透明质酸合成酶的影响最显著.研究［16］已发现:人体透明质酸合成酶基因包括3种，具有高度的结构同源性，具有约80%的相同序列;但其稳定性存在差异，透明质酸的延伸效率及生成长度也不同［17］.本研究显示:siRNA组膝骨关节炎软骨细胞中透明质酸合成酶表达水平明显升高，重组人骨桥蛋白刺激组明显下降，且透明质酸合成酶2在各组细胞中表达水平变化最明显，透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶3表达水平变化幅度相似.提示下调膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达可提升透明质酸合成酶表达水平，进而提升透明质酸分泌量，改善关节润滑程度并抑制炎症因子分泌，改善膝骨关节炎病情. 参考文献:【相关文献】［1］艾克白尔·吐逊，帕孜拉·艾拉，麦麦提热夏提·米吉提，等.沉默信息调节因子2对骨关节炎软骨组织中炎症反应、骨质破坏的影响［J］.海南医学院学报，2018，24(14):1327-1330.［2］杨骁，周建林，彭昊，等.透明质酸治疗膝关节骨性关节炎的研究进展［J］.安徽医药，2016，20(2):209-213.［3］杨俊龙，王艳娉，张源，等.透明质酸治疗膝骨关节炎相关机制的研究进展［J］.中国疼痛医学杂志，2017，23(6):451-454.［4］ P ouyani Tara，Sadaka Basma H，Papp Suzanne，et al.Triiodothyronine(T3)inhibits hyaluronate synthesis in a human dermal equivalent by downregulation of HAS2［J］.Journal of the Tissues Culture Association，2013，49(3):178-188.［5］王玉辉.类风湿性关节炎患者血清Th17/Treg细胞变化特征［J］.北华大学学报(自然科学版)，2018，19(1):53-55.［6］ Bondarenko A，Angrisani N，Meyer-Lindenberg A，et al.Magnesium-based bone implants:Immunohistochemical analysis of peri-implant osteogenesis by evaluation of osteopontin and osteocalcin expression［J］.Journal of Biomedical Materials Research，Part A，2014，102A(5):1449-1457.［7］李丰义，吕藏.血清β-CrossLaps、N-MID、P1NP 水平变化与类风湿性关节炎患者膝关节功能的关联性［J］.中国卫生工程学，2018，17(4):606-607.［8］ Lima-Junior，R C P，Freitas，et al.Targeted inhibition of IL-18 attenuates irinotecan-induced intestinal mucositis in mice［J］.British Journal of Pharmacology，2014，171(9):2335-2350.［9］李旭光，上官改珍，徐燕，等.IL-18和IL-8在类风湿性关节炎患者血清中的表达及其与抗CCP相关性的研究［J］.细胞与分子免疫学杂志，2014，30(8):865-867.［10］黄芳，胡雅琳，姜程今，等.白介素18在颞下颌关节炎中的作用研究［J］.中国全科医学，2017，20(12):1457-1462.［11］安丽欣.血清IL-18、IL-22、IL-23表达在类风湿性关节炎中的意义［J］.国际检验医学杂志，2018，39(7):801-804.［12］李天然，黄晓斌，黄楚恒，等.骨髓间充质干细胞对经转化生长因子β1、骨桥蛋白基因沉默肝癌细胞MHCC97-H的影响［J］.中国组织工程研究，2017，38(5):687-692.［13］潘立群，竺湘江，舒建国，等.盐酸氨基葡萄糖联合透明质酸钠治疗膝关节骨性关节炎效果观察［J］.中国乡村医药，2018，25(22):18-19.［14］尤娜.生物活性透明质酸对LPS诱导的人树突状细胞和巨噬细胞炎症应答的作用研究［D］.合肥:安徽医科大学，2017.［15］杨悦.骨桥蛋白激活NF-κB信号通路调控OA滑膜细胞 MMP13表达的实验研究［D］.青岛:青岛大学，2017.［16］胡炳炎，艾金伟，刘楚繁，等.臭氧与透明质酸治疗膝骨性关节炎安全性和有效性的Meta分析［J］.重庆医学，2017，46(9):1240-1245，1248.［17］韦健.透明质酸治疗骨关节炎疗效及安全性的研究进展［J］.风湿病与关节炎，2017，6(3):64-68.。
骨性关节炎生物标志物的研究进展
骨性关节炎生物标志物的研究进展任敏;魏垒【摘要】As a kind of multifactor diseases especially in the olds, osteoarthritis (OA) is characterized by major symptom of joint pain, joint deformity and joint degeneration during its progression. Although age has been widely recognized as one influencing factor, which means the development of the disease is positively correlated with growth and development of bone, its pathogenesis is still unclear, which leads to skimble-scamble standard in early diagnosis and limited ways including symptomatic treatment and replacement only in early treatment. This paper holds that, in order to solve this problem, it is of great significance for the early diagnosis and monitoring of the disease, and the study of body's reaction to drugs to find out an extremely sensitive and specific marker from blood, joint synovial fluid and urine by reviewing related literatures in past few years. Therefore a review on the re-search progress of OA biomarkers is done.%骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一类好发于中老年患者的多病因疾病，随着病程进展，其症状主要表现为关节疼痛、畸形、关节功能的退化。
蛋白质组学在骨关节疾病研究中的应用
蛋白质组学在骨关节疾病研究中的应用【关键词】蛋白质蛋白质作为细胞中的活性大分子，其表达水平的改变与疾病、药物作用或毒素作用直接相关。
蛋白质组学的理论和技术的进展与完善令人们从组织或细胞的蛋白质整体水平去熟悉疾病成为可能。
这一技术将是发觉疾病标志物、鉴定和评判药物靶蛋白等十分有效的工具。
1 蛋白质组学的概念及研究意义蛋白质组(Proteome)与蛋白质组学(Proteomics)的提出至今已有10年左右的时刻。
蛋白质组一词，源于蛋白质(protein)与基因组(genome)两个词的杂合，意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全数蛋白质。
蛋白质组是一个动态的概念，在同一个机体的不同组织和细胞中不相同，在同一机体的不同发育时期，不同的生理状态下，乃至不同的外界环境下也不相同。
各类复杂的生命活动，都是特定蛋白质群体在不同时刻和空间不同组合的结果。
蛋白质组学那么是大规模、系统地在蛋白质组整体水平进行研究的一门新兴学科［1］，包括研究细胞内动态转变的蛋白质组成成份、表达水平和翻译后修饰状态、蛋白质之间的彼此作用和联系。
蛋白质组学可分为比较蛋白质组学和表达蛋白质组学［2］。
前者通过比较分析不同生理、病理条件下细胞、组织或体液中表达的蛋白质异同，挑选出许多具有临床标志意义的蛋白质关键分子。
后者目的在于成立蛋白质表达谱和修饰谱的数据库、细胞定位图、蛋白质作用连锁图，探讨和说明生命现象的本质。
将蛋白质组表达信息与基因组信息有效结合，这既可显示蛋白质翻译后加工修饰方式，又可克服分离蛋白质与理论蛋白质不一致的局限，从而使病理生理机制的说明更为完全和准确。
2 骨关节疾病的蛋白质组学研究各类骨关节疾病，包括退行性关节炎、滑囊炎、滑膜炎、肩周炎、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、股骨头坏死等，都是较难治愈的慢性疾患，患病后关节肿、痛、积液、僵硬、增生、骨刺，活动艰巨乃至致使残疾!蛋白质组学的进展将极大的增进骨关节疾病的研究，尽管目前还处于起步时期，但从基因组向蛋白质组方向转变不失为尔后骨关节疾病研究的一种新模式。