实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法

实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法

一、实验目的

掌握抑菌圈法测定杀菌剂的生物活性的方法及步骤。

二、实验原理

本实验主要采用抑菌圈法来测定杀菌剂的生物活性。抑菌圈法是利用

杀菌剂在琼脂平板上产生的抑菌效果来对其生物活性进行测定的一种方法。通常，将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，使其均匀地分布在琼脂上。然后，将含有细菌培养物的琼脂平板放入恒温箱中进行培养。在培养一段时间后，观察平板上是否出现了抑菌圈，并测量抑菌圈的直径来评估杀菌剂的生物

活性。

三、实验仪器和材料

1.显微镜

2.恒温箱

3.滴定管或移液管

4.琼脂平板

5.细菌培养物

6.杀菌剂溶液

四、实验步骤

1.准备琼脂平板。将琼脂平板置于恒温箱中，加热至溶化状态后取出，待其稍微冷却后均匀地倒入培养皿中。

2.滴加杀菌剂溶液。将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，并用移液管在

平板上转动，使杀菌剂均匀地分布在琼脂上。

3.检验杀菌剂效果。取一定量的细菌培养物，将其在琼脂平板上均匀

涂布。

4.培养细菌。将含有细菌培养物的琼脂平板放入预先恒温箱中，设置

合适的温度和培养时间。

5.观察抑菌圈。在培养一段时间后，取出琼脂平板，用显微镜观察平

板上是否出现了抑菌圈。

6.测量抑菌圈直径。使用直尺或量角器等工具测量抑菌圈的直径，并

记录结果。

五、实验注意事项

1.操作时要注意无菌技术，以避免细菌污染。

2.滴加杀菌剂溶液时要均匀并轻柔，以保证杀菌剂能充分分散在琼脂

平板上。

3.培养细菌时要控制好温度和培养时间，以确保细菌能够充分生长。

4.观察抑菌圈时要注意使用合适的放大倍数，以免错过细小的抑菌圈。

5.测量抑菌圈直径时要使用准确的测量工具，以获得准确的结果。

六、实验结果处理

根据实验所得的抑菌圈直径数据，可以通过计算其平均值、标准差等

统计指标来评估杀菌剂的生物活性。较大的抑菌圈直径通常表示杀菌剂具

有较强的抑菌效果，反之则表示其抑菌效果较弱。可以将实验结果与已有的标准值进行比较，以判断杀菌剂的生物活性。

七、实验结果分析

根据测得的抑菌圈直径结果，可以对杀菌剂的生物活性进行分析。如果杀菌剂的抑菌圈直径明显大于对照组，则可以判断该杀菌剂具有较强的生物活性；如果抑菌圈直径接近对照组，则说明杀菌剂的生物活性较弱。此外，还可以根据实验结果进行进一步的数据分析，例如计算半数致死浓度（LD50）等指标，以评估杀菌剂的安全性和毒性。

综上所述，通过抑菌圈法可以简单快捷地测定杀菌剂的生物活性，并通过观察抑菌圈直径来评估其抑菌效果。该方法具有操作简单，结果直观等优点，适用于对各类杀菌剂的生物活性进行初步筛选和评估。