新型甘氨酰环素类抗菌药物替加环素的体外药敏试验操作规程

表４替加环素药敏试验中各种质控菌株可接受的 质量控制范围
质控菌株的测试结果在可接受限度的范围内（在３０ ｄ 内连续测定，质控值中超出可接受限度的结果不多于
３个），按照表３所示的折点判读药敏结果。任何意义 不明的结果均需ＭＩＣ加以证实。抑菌圈直径的测量
参照图１。
（二）Ｅｔｅｓｔｏ（ＡＢ ＢＩＯＤＩＳＫ，Ｓｏｌｎａ，瑞典）试验条法
生物室采用自动化仪器进行替加环素的药敏试验，应当注意选择适当的判定标准。
无论采用何种方法，只有当质控菌株对替加环素的药敏结果在可接受的质控范围时（表４），待测菌株的
结果方真实、有效。
表１粹加环素平均药代动力学参数
（一）纸片扩散法 可以用于测定常见快生长菌及部分苛养菌。不能 用纸片扩散法检测厌氧菌。 替加环素纸片的保存非常重要！纸片保存温度应
对大肠埃希菌为１．８～２．９ ｈ。由于其具有时间依赖性型的特征和中一长时效的ＰＡＥ，ＡＵＣ／Ｍ１Ｃ比值可能是
决定其抗菌效能的重要参数。
二、替加环素抗菌谱和体外抗菌活性
体外研究显示，替加环素为超广谱抗菌药物，其抗菌谱覆盖革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧茵和快生长的
分枝杆菌（表２）。革兰阳性菌包括：金黄色葡萄球菌（包括甲氧西林耐药株）、凝固酶阴性葡萄球菌（包括甲
在１２．５～３００．０ ｍｇ剂量范围内，替加环素的Ｃｍａｘ和ＡＵＣ呈线性关系。该药组织分布广泛，稳态分布 客积平均为５００～７００ Ｌ。其清除途径主要是以原型和代谢产物的形式经胆汁清除。其次是以原型、糖苷化
产物和Ｎ．乙酰－９一氨基米诺环素的形式通过尿液排出。
体外研究表明，替加环素对金黄色葡萄球菌的抗生素后效应（ｐｏｓｔａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ，ＰＡＥ）为３．４～４．０ ｈ，
我国临床微生物室采用美国临床和实验室标准化研究所（Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， ＣＬＳＩ）制定指南进行药敏试验。而目前ＣＬＳＩ没有替加环素药敏结果的判定标准和操作指南，因此，实验室如 何进行替加环素的药敏，是个重要的问题。本文根据替加环素的处方信息、ＣＬＳＩ药敏的通用原则编写而成。 目的在于建立我国统一的替加环素药敏实验程序，确保结果的准确性和有效性。
革兰阳性菌 金黄色葡萄球菌 甲氧西林敏感 甲氧两林耐药 凝固酶阴惟葡萄球菌 甲氧两林敏感 甲氧西林耐药 Ｂ溶血性链球菌 草绿色链球菌 肺炎链球菌 肠球菌属 粪肠球菌 屎肠球菌
革兰阴性菌 大肠埃希菌ＥＳＢＬ（一） 四环素敏感 四环索耐药 大肠埃希菌ＥＳＢＬ（＋） 四环素敏感 四环素耐药 肺炎克雷伯菌 肺炎克雷伯菌ＥＳＢＬ（＋） 肠杆菌属 四环素敏感 四环索耐药 不动杆菌属 铜绿假单胞菌 嗜麦芽窄食单胞菌
注：‘当前不存在耐药分离株，因此无耐药和中介的折点。对于ＭＩＣ结果提示为“非敏感”范畴的分离株应提交中心实验室进行确证；６替 加环素的体外抗摩根菌属，变形菌属和普罗威登斯菌属的活性有所降低；‘琼脂稀释法；。参考文献为‘∞１；。ｎ／ａ＝不适用；ＭＲＳＡ为耐甲氧四林 金黄色葡萄球菌
万方数据
生堡撞墼医堂苤盍兰Ｑ螋生！！旦筮丝鲞筮！！翅星塾堕！！些丛型，盟竺！璺坠竺！Ｑ堕，！些丝。堕堡！！
（三）替加环素的药代动力学
健康受试者经静脉给予（Ⅳ）替加环素（首剂１００ ｍｇ，后每１２ ｈ给药５０ ｍｇ），给药后３０ ｍｉｎ与６０ ｍｉｎ的
稳态Ｃｍａｘ分别为（０．８７±０．２３）∥ｒＩｌｌ和（０．６３±Ｏ．１０）哕ＩＩｌｌ，稳态时的ＡＵＣｏ－１２ ｈ为（２．３５±０．８５）峭·ｈ／Ｉｌｌｌ。
表１为单次及多次静脉给药后健康人群中替加环素平均药代动力学参数。
≤８℃，一旦纸片从包装中取出，需置于有干燥剂的密
封容器内避光保存。替加环素纸片出厂时，ＢＢＬ、
ＯＸＯＩＤ纸片，均呈亮黄色。纸片应用铝箔将药芯包起
来避光保存。不能使用变色（如变成灰白、棕色或绿
色）的纸片。
琼脂平皿、接种物的制备、平皿的接种、培养和孵
育条件等步骤，均应当遵照ＣＬＳＩ Ｍ２一Ａ９的规定进行。
为此，中华医学会微生物与免疫学分会临床微生物学组与惠氏制药有限公司合作制定了针对中 国临床微生物实验室的“替加环素临床微生物操作手册”，临床微生物工作者可根据这一手册进行替 加环素的药敏试验。
替加环素（ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ，商品名泰阁）是米诺环素的衍生物，是第一个应用于临床的新型甘氨酰环素类抗 生素［１引。该药为静脉剂型，于２００５年在美国上市，适用于１８岁及以上患者敏感菌所致感染的治疗。美国 食品和药品监督管理局（ＦＤＡ）已批准的适应证包括：复杂性皮肤和皮肤软组织感染、复杂性腹腔内感染、社 区获得性细菌性肺炎。目前替加环素在中国申请的适应证为复杂性腹腔内感染。
ＤＯ！：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉ≈ｒＬ １００９－９１５８．２００９．１ １．００２ 作者单位：１００７３０ Ｉ｝Ｉ国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科（王辉、陈民钧）；上海交通大学附属瑞金医院微牛物窜（倪语 星）；复旦大学附属中山医院微乍物室（胡必杰）；复旦大学附属华山医院抗生素研究所（王明贵）；中国医科大学第一附属医院感染科（陈佰 义）；卫牛部北京医院卫生部临床检验中心（胡继红）；ＩＪ．生部北京医院检验科（胡云建） 通信作者：倪语星，电子信箱：ｙｌｌｘｉｎｇ－ｒＩｉ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
Ｅｔｅｓｔ试验条采用惰性无孔塑料条，该试验条的一
面标有ＭＩＣ刻度（彬Ｉｎｌ），另一面含有预设的、干燥、
稳定、连续的抗微生物药物浓度梯度。经过一段时间
的培养，在椭圆抑菌圈与Ｅ条交叉处，可以直接读取
ＭＩＣ值。
当采用Ｅｔｅｓｔ法，含高浓度锰（Ｍｎ２＋６３０ ｖ８
注：此表来自ＣＬＳＩ文件；。琼脂稀释法；一为无数据
ＭＩＣ（斗∥ｍ１） Ｉ
一 一 一 一 一
一４
一
一８ ４
Ｒ
一 一 一 一 一 一
≥８
一 一
≥１６ ≥８
Ｓ ≥１９ ≥１９ ≥１９ ≥２ｌ ≥１９ ≥１９ ≥１９ ≥２ｌ ≥２７ ｎ／ａ ≥１６
抑菌圈直径（ｍｍ）。
Ｉ １５—１８
１５—１８ １５一１８
ｎ／ａ １３～１５
Ｒ ≤１４
《１４ ≤１４
ｎ／ａ ≤１２
病原菌
葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌（包括ＭＲＳＡ） 链球菌属（肺炎链球菌除外） 肺炎链球菌 肠球菌属 粪肠球菌（仅万古霉素敏感菌株） 肠杆菌科６ 流感嗜血杆菌 卡他莫拉菌 厌氧菌。 不动杆菌６
Ｓ ≤Ｏ．５‘ ≤０．５‘ ≤０．２５‘ ≤０．１２‘ ≤０．２５‘ ≤Ｏ．２５‘ ≤２ ≤１‘ ≤Ｏ．１２‘ ≤４ ≤２
细菌签定和药敏检测为临床抗萧药物使用提供重要参考。美国ＦＤＡ和欧洲ＥＵＣＡＳＴ分别制定 了替加环索药敏结果的判定标准和操作指南。但我闰目前采用的美国临床和实验窜标准协会 （Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣＬＳＩ）标准中没有替加环素药敏结果的判定标准和操作指 南。同时替加环素药敏试验结果受纸片质量、培养基及判读方法等多种因素的影响。为确保临床微 生物实验室对替加环素药敏试验结果的准确性和有效性，需要在替加环素正式ｆ：市之前，建立我国统 一的替加环素药敏试验标准操作程序以指导临床微牛物实验窀Ｉｊ作人员进行操作。
革兰阴性菌对替加环素天然耐药，包括：铜绿假单胞菌、变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属。
细菌对替加环素天然耐药、获得性敏感性下降的机制是由多药外排系统介导的，如大肠埃希菌、阴沟肠 杆菌‘８Ｉ、肺炎克雷伯菌‘９ｆ、奇异变形杆菌‘川和摩根氏茵‘１１１中的ＡｃｒＡＢ系统，铜绿假单胞菌中的ＭｅｘｘＹ系
统¨２。，不动杆菌中的ＡｄｅＡＢＣ系统¨３｜。
≤２．５斗ｇ／ｍ１）的市售（Ｍｅｒｃｋ公司生产）ＭＨ琼脂平皿
所测得结果显示：替加环素的ＭＩＣ值上升２—８倍呤¨。
因此，进行替加环素药敏试验时，不能使用含高Ｍｎ２＋
浓度的ＭＨ琼脂。
氧西林耐药株）、肠球菌属（包括万古霉素耐药株）、肺炎链球菌、Ｂ溶血性链球菌、草绿色链球菌（包括咽颊
炎链球菌、中间链球菌和星座链球菌）。革兰阴性茵包括：大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌、弗劳地
柠檬酸杆菌等肠杆菌科细菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞茵。厌氧菌包括：
脆弱拟杆菌、多形拟杆菌、单形拟杆菌、普通拟杆菌、产气荚膜梭菌和消化链球菌等。
厌氧菌 脆弱拟杆菌 难辨梭状芽胞杆菌
塑丝壁壁堕昼
注：ＥＳＢＬ为超广谱Ｂ内酰胺酶
表２替加环素体外抗菌活性谱
菌株 （船） （船）
警黜
１００ １０１
７１ １８９ ２６２ ３７８ 儿９ ３ ２５８ １１２ １４６
３ ４０ｌ ｌ ６２５
６３ ２００
ｌ∞ ５６
ｌ ０６１ １６３ ７２６ １００
１∞
２８９ １１５
·１２０８·
．专家共识．
新型甘氨酰环素类抗菌药物替加环素的 体外药敏试验操作规程
王辉 倪语星 陈民钧 胡必杰 王明贵 陈佰义 胡继红 胡云建
【编者按】替加环素（ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎ）是一种甘氨酰环素（ｇｌｙｃｙｌｅｙｃｌｉｎｅ）类抗生素，是半合成四环素 米诺环素的衍生物。替加环素在细菌核糖体水平ｆ：抑制蛋白质合成，是针对ＭＲＳＡ及泛耐药鲍曼不 动杆菌等耐药细菌有效的广谱抗菌药物。替加环素予２００５年在美国Ｌ市，目前全球共有５０多个国 家和地区批准和上市了替加环索，预定２００９年底将在中国上市。
万方数据
生堡控验匿堂苤麦兰Ｑ塑生！！旦筮墼鲞筮！！翅垦丛蛆三坐丛型：堕唑些垃！圣Ｑ盟。！丛些丝：基垒！！
（二）替加环素耐药机制
获得性四环素耐药存在３种机制：外排机制、核糖体保护机制和酶钝化机制。其中外排机制和核糖体保
护机制是Ｉｌ缶床上最主要的耐药机制。替加环素克服了四环素类的这两种主要耐药机制。然而，有少数几种
堑
Ｏ．１２ Ｏ．１２
０．１２ ≤０．１２ ≤０．１２ ≤０．１２