人羟色胺转运蛋白HTT酶联免疫分析
人羧酸酯酶(CarE)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书
人羧酸酯酶(CarE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织等样本中羧酸酯酶(CarE)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人羧酸酯酶(CarE)水平。
用纯化的人羧酸酯酶(CarE)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入人羧酸酯酶(CarE),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人羧酸酯酶(CarE)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人羧酸酯酶(CarE)含量。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
人羟脯氨酸Hyp酶联免疫分析
人羟脯氨酸(Hyp)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T2μg/L -48μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中羟脯氨酸(Hyp)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人羟脯氨酸(Hyp)水平。
用纯化的人羟脯氨酸(Hyp)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入羟脯氨酸(Hyp),再与HRP标记的羟脯氨酸(Hyp)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的羟脯氨酸(Hyp)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人羟脯氨酸(Hyp)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人血清素血清胺(ST)酶联免疫(ELISA)分析试剂盒使用说明书
人血清素/血清胺(ST)酶联免疫(ELISA)分析试剂盒使用说明书樊克生物专业供应本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本血清素/血清胺(ST)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血清素/血清胺(ST)水平。
用纯化的人血清素/血清胺(ST)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血清素/血清胺(ST),再与HRP标记的血清素/血清胺(ST)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的血清素/血清胺(ST)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人血清素/血清胺(ST)浓度。
试剂盒组成1 20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液3ml×1瓶2 酶标试剂3ml×1瓶 8 标准品(1600ng/L)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×4条9 标准品稀释液1.5ml×1瓶4 样品稀释液3ml×1瓶 10 说明书1份5 显色剂A液3ml×1瓶 11 封板膜2张6 显色剂B液3ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
800 ng/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400 ng/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200 ng/L l 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100 ng/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50 ng/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
人酪氨酸羟化酶(TH)酶联免疫分析. 试剂盒使用说明书
人酪氨酸羟化酶(TH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:0.78ng/ml-50ng/ml最低检测限:0.195ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人TH,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中TH含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗TH抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗TH抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的TH呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
5-羟色胺转运体基因
5-羟色胺转运体基因
5-羟色胺转运体基因(5-HTT基因)是人类基因组中的一种基因,也被称为SLC6A4基因。
该基因编码了5-羟色胺转运体
蛋白,在细胞膜上嵌入并负责将5-羟色胺从细胞外载体转运
到细胞内。
5-羟色胺是一种神经递质,参与调节情绪、睡眠、食欲和行为
等多种生理过程。
5-羟色胺转运体基因的变异可以影响5-羟色胺的传递速度和清除速度,进而影响个体的情绪和行为表现。
有些研究表明,5-HTT基因的变异可能与一些精神疾病的发展和表现有关,如抑郁症、焦虑症和自闭症等。
其中最为研究广泛的是5-HTTLPR基因多态性,即5-HTT基因的基因座存在
长(L)和短(S)等等位基因。
一些研究发现,携带S等位
基因的个体,相对于携带L等位基因的个体,更容易表现出
焦虑和抑郁情绪。
然而,基因并非决定论,个体的行为和情绪受到多个基因和环境因素的复杂交互影响。
因此,对于精神疾病的发展和表现,
5-HTT基因只是其中的一部分因素,不能作为单一的预测标志。
五羟色胺转运蛋白结构
五羟色胺转运蛋白结构1.引言1.1 概述五羟色胺转运蛋白(serotonin transporter, SERT)是一种与神经系统活动密切相关的蛋白质。
它主要存在于神经元和其他细胞膜上,负责调节五羟色胺(serotonin)的转运和吸收。
五羟色胺是一种神经递质,参与调节多种生理和心理过程,如情绪、认知、睡眠和食欲等。
五羟色胺的水平失衡与多种精神疾病,如抑郁症、焦虑症和精神分裂症等有关。
五羟色胺转运蛋白在神经系统中的重要性不言而喻。
它通过转运五羟色胺到细胞内,控制了五羟色胺神经信号的持续和强度。
在神经元之间的神经传递中,五羟色胺转运蛋白的作用是不可或缺的。
它在调节五羟色胺神经递质水平的平衡中起着关键性的作用,对于维持神经系统的正常功能至关重要。
五羟色胺转运蛋白的结构特点也备受研究者们的关注。
它是一种跨膜蛋白,通过膜内外两侧的转运通道进行五羟色胺的转运。
在细胞膜上,五羟色胺转运蛋白形成了一种特定的立体结构,包括N端和C端的胞浆区域,多个跨膜螺旋区域和胞浆环区域。
这种结构特点对于五羟色胺转运蛋白的功能发挥起着至关重要的作用。
总结起来,五羟色胺转运蛋白作为调节五羟色胺神经信号的重要蛋白质,在神经系统功能的正常维持和多种心理疾病的发生发展中发挥着关键作用。
通过深入研究五羟色胺转运蛋白的结构特点,可以更好地理解其功能和调节机制,为未来的治疗药物研发和精神疾病的防治提供新的启示。
未来的研究方向包括进一步解析五羟色胺转运蛋白的结构细节,寻找其调节蛋白与信号通路的相互作用关系,以及开发针对五羟色胺转运蛋白的高效治疗药物。
1.2文章结构1.2 文章结构本文将围绕着五羟色胺转运蛋白的结构展开讨论。
首先,我们将在引言部分对文章的背景和目的进行简要介绍。
然后,在正文部分,我们将从两个方面来解析五羟色胺转运蛋白的结构。
首先,我们将详细说明五羟色胺转运蛋白的定义和功能,以便读者对其有一个更加清晰的认识。
接着,我们将探讨五羟色胺转运蛋白的结构特点,包括其组成成分、空间结构以及运输机制等方面。
人血清白蛋白酶联免疫分析
人血清白蛋白酶联免疫分析人血清白蛋白(HSA)是一种重要的血浆蛋白,它在人体中广泛存在,且在多种生物体内具有高度保守性。
HSA在维持渗透压、运输代谢物质、调节血液凝固等生理过程中发挥着关键的作用。
因此,对HSA的准确检测和定量分析对于了解人体健康状态具有重要意义。
酶联免疫分析(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是一种常用的高灵敏度、高特异性的免疫分析技术,被广泛应用于生物医学研究、临床检验和药物开发等领域。
ELISA基本原理是将待测物质(例如HSA)与特异性抗体反应,形成免疫复合物,然后通过抗原-抗体反应来检测目标物质的存在和数量。
下面将介绍人血清白蛋白酶联免疫分析的步骤和注意事项。
首先,制备试剂和材料。
这包括准备抗HSA抗体、酶标记的二抗和底物、微孔板、稀释缓冲液、洗涤缓冲液等。
利用了微量加样仪等器械,需要注意消毒和无菌操作,以避免污染。
其次,在微孔板上涂覆HSA抗体。
将HSA抗体稀释缓冲液加入微孔板孔槽中,与表面上的底物结合,使抗体固定在孔槽内。
在培养过程中,可以加入胶体金或辣根过氧化物酶等酶标记试剂,用于后续信号检测。
接下来,孔槽中加入待测样品,或即将配制好的标准物质溶液。
将孔槽封闭,进行孵育。
此过程中,待测HSA与抗体发生免疫反应,生成固相抗原-抗体复合物。
复合物的形成与待测样品中HSA的浓度成正比。
然后,洗涤步骤。
通过洗涤缓冲液对孔槽中的未结合试剂进行冲洗,去除干扰物和非特异性结合的物质。
最后,进行信号检测和数据分析。
将酶标记的二抗加入孔槽中,再次孵育,形成第二次的抗原-抗体反应。
此时,酶的活性可使底物分子变色或产生荧光信号。
测量信号的强度或荧光值,可以反映孔槽中HSA的含量。
在实际操作过程中,有几个注意事项需要考虑。
首先,需要了解选择合适的抗体和试剂,以保证实验的特异性和灵敏性。
其次,对于样品的处理和稀释需要严格控制,以避免干扰。
此外,洗涤步骤的次数和剂量也需要优化,以确保洗涤的彻底性和减少非特异性背景信号。
5-羟色胺转运体基因多态性与睡眠障碍的相关性研究进展
基金项目:国家自然科学基金地区科学基金(编号:81560228);2018年甘肃省人民医院院内基金项目(编号:18GSSY4 19)作者单位:1.730000甘肃兰州,甘肃中医药大学 2.甘肃省人民医院通讯作者:谢宇平,主任医师,教授,E mail:xyp5894@163.com5 羟色胺转运体基因多态性与睡眠障碍的相关性研究进展杨 军1 谢宇平2 周丽雅2 马 薇2 惠培林2 范 杰2 陈文娟1【摘要】 目前大量研究已经表明5 羟色胺转运体(5 HTT)与情感性精神障碍密切相关。
随着人们对睡眠健康问题的不断重视以及对该领域研究的不断深入,5 HTT与睡眠障碍关系的研究也得到广泛讨论。
近年来,国内外较多研究发现5 HTT与睡眠障碍存在一定的相关性。
本文结合国内外关于5 HTT基因多态性与睡眠障碍关系的研究进展作一综述。
【关键词】 5 羟色胺转运体 基因多态性 睡眠障碍【中图分类号】R256.23 【文献标识码】 A 【文章编号】 2095-9346(2020)-01-0078-03doi:10.3969/j.issn.2095-9346.2020.01.020 睡眠障碍是一个严重的公共卫生问题。
报道显示,我国失眠症的发生率为45.4%[1],明显高于世界水平。
研究表明,长期失眠会增加心血管疾病、脑卒中、高血压、代谢性疾病以及痴呆等的风险[2,3],同时也会造成焦虑、抑郁、记忆力减退、免疫力低下等严重问题[4,5]。
睡眠障碍的病因较为复杂,其发病机制目前尚不清楚,因而造成了临床中诊治的不确定性。
随着基因检测技术的发展,大量的研究已经证实睡眠障碍的发生与遗传密切相关。
因此,有众多的学者开始从基因学的角度对睡眠障碍展开研究,以便为睡眠障碍患者提供更为精准和有效的诊疗。
近年来,随着人们对睡眠障碍遗传物质的不断研究,多数研究证实了5 羟色胺转运体(5 HydroxytryptamineTransporter,5 HTT)基因多态性与睡眠障碍存在一定的相关性,并且使得该领域的研究成为睡眠医学的热点。
小鼠5羟色胺(5-HT)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
小鼠5羟色胺(5-HT)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织等样本中5羟色胺(5-HT)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠5羟色胺(5-HT)水平。
用纯化的小鼠5羟色胺(5-HT)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入小鼠5羟色胺(5-HT),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的小鼠5羟色胺(5-HT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠5羟色胺(5-HT)含量。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
双相情感障碍的病理生理学机制研究
双相情感障碍的病理生理学机制研究双相情感障碍(bipolar disorder)是一种临床上常见的精神疾病,以患者情绪波动剧烈为特征。
在抑郁和Mania(躁狂)两个极端状态之间往复转换,给患者生活带来巨大困扰。
虽然双相情感障碍已经被广泛认可,但其具体的病理生理学机制仍不完全清楚。
本文将围绕着双相情感障碍的病理生理学机制进行探讨。
一、遗传因素对双相情感障碍的影响1. 基因突变与双相情感障碍发病风险双相情感障碍具有很强的遗传性,多项家族和双胞胎研究均表明基因在该疾病的发生中起到重要作用。
近年来,通过基因组关联分析等技术手段,已经发现与双相情感障碍相关的多个位点和基因,如BDNF、CACNA1C等。
这些位点和基因与神经递质代谢、离子通道功能以及突触可塑性等相关,揭示了双相情感障碍发病机制的一部分。
2. 神经递质与双相情感障碍神经递质在调节人体的情绪和行为方面起着重要作用。
多个转运蛋白基因与双相情感障碍的发生相关,如5-HTT、MAOA等,这些基因影响着5-羟色胺和去甲肾上腺素等神经递质的转运和代谢。
此外,双相I型患者中颗粒瘤酮前体3α, 5α-四氢孕酮水平也明显降低,在抑郁状态下降低幅度更为显著。
这与孕激素系统紊乱有关,并可能关系到视交叉上核(SCN)及海马、杏仁核以及丘脑-垂体轴等多个结构功能变化。
二、内源性时钟调控异常导致的情绪周期波动1. 细胞内生物钟对情感调控的影响内源性时钟在人体内部生成并参与各种生理过程的调整。
大量研究表明,内源性时钟异常与心理疾病,包括双相情感障碍有关。
特别是与时长、强度具有周期性变化的很多疾病,在该调控因素上揭示了新的线索。
2. 影响内源性时钟的寿命和运作的基因双相情感障碍患者中存在一些与生物钟紊乱相关基因多态性变异,如CRY1、PER2等。
这些基因参与细胞内生物钟的调控,并通过影响脑区活动或神经递质释放来影响患者的心境稳定状态。
三、氧化应激与抗氧化系统异常导致神经元功能和结构损伤1. 抗氧化系统异常在双相情感障碍中的角色抗氧化系统是人体维持正常代谢所必需的,用于清除自由基等有害物质。
5-羟色胺转运体结合力
5-羟色胺转运体结合力
5-羟色胺转运体(5-HTT)是一种存在于神经元细胞膜上的蛋白质,它在调控5-羟色胺(5-HT,也称为血清素)的水平和活性中起
着重要作用。
5-HTT在神经递质5-HT的再摄取过程中发挥关键作用,它能够将5-HT从突触间隙中再摄取到神经元内部,从而调节神经元
之间的5-HT信号传导。
因此,5-HTT的结合力对于调节5-HT的水
平和神经传导具有重要影响。
从结合力的角度来看,5-HTT能够与5-HT分子发生特异性的结合,这种结合力对于5-HT的再摄取过程至关重要。
5-HTT的结合力
强弱可以影响5-HT的再摄取速率,进而影响神经元之间的5-HT信
号传导。
此外,5-HTT的结合力还可能受到外源性物质或药物的调节,例如一些抗抑郁药物就是通过调节5-HTT的结合力来增加5-HT
在突触间隙中的浓度,从而起到抗抑郁的作用。
另外,从生理学和病理生理学的角度来看,5-HTT的结合力也
与多种精神和神经系统疾病有关。
例如,一些研究表明,5-HTT的
结合力异常可能与抑郁症、焦虑症等精神疾病的发生和发展有关。
因此,对于5-HTT结合力的研究不仅有助于深入理解神经递质5-HT
的调控机制,还有助于揭示与神经系统疾病相关的潜在机制,为相
关疾病的治疗提供理论基础。
综上所述,5-羟色胺转运体的结合力对于5-HT的再摄取和神经传导具有重要影响,其结合力强弱可能受到药物调节,与多种精神和神经系统疾病相关。
对于5-HTT结合力的研究有助于深入理解神经递质调控机制,揭示相关疾病的潜在机制,为相关疾病的治疗提供理论基础。
五金色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因
五金色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因五金色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因在神经系统中起着重要的作用,它们参与调节神经递质五羟色胺(5-HT)的转运和平衡。
本文将从两者的结构、功能及其相关疾病等方面进行探讨。
五金色胺转运体蛋白(SERT)是一种位于神经元细胞膜上的蛋白质,它的主要功能是将细胞外的5-HT转运回细胞内,以维持神经系统中5-HT的浓度平衡。
SERT是一种内源性蛋白质,在人体中主要分布在中枢神经系统,尤其是在脑部的神经元突触间隙区域和血小板中。
SERT的基因编码了这一转运体蛋白的蛋白质序列,在人类基因组中命名为SLC6A4。
这个基因位于人类染色体17q11.1-q12位置上,该基因共有15个外显子(exon)和14个内含子(intron)。
许多单核苷酸多态性(SNP)和变异对SERT蛋白的表达和功能存在影响,其中5-HTTLPR基因变异是最为广泛研究的。
5-HTTLPR是指5-HT转运体长重复基因多态性(5-HTtransporter-linked polymorphic region),它主要存在于SERT基因的调控区域,影响SERT基因的转录和表达水平。
根据5-HTTLPR基因的长短重复序列,可分为长(L)和短(S)等位基因。
研究发现,长等位基因在基因表达和促进5-HT转运方面具有更高的效率,而短等位基因则可能与5-HT转运能力降低和相关精神疾病等有关。
五羟色胺转运体基因(HTT)也称为5-HT转运体基因,是编码5-HT转运体蛋白的基因,位于人类染色体17q11.2-q12区域上。
与SERT相比,HTT基因的结构更复杂,包含了约110 kb的DNA序列,其中包括16个外显子和15个内含子。
HTT基因的研究主要关注其在神经系统中的表达调控和功能作用。
5-HTTLPR基因和HTT基因的多态性与一系列神经系统疾病相关,例如抑郁症、精神分裂症和自闭症等。
抑郁症是一种常见的心理疾病,与5-HT的异常调节有关。
五金色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因
五金色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因
摘要:
1.五羟色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因的概述
2.五羟色胺转运体基因多态性与抑郁症的相关性
3.五羟色胺转运体基因对儿童青少年创伤后应激障碍的影响
4.五羟色胺转运体基因多态性与氟西汀疗效及副作用的关联
5.科学家对五羟色胺转运蛋白运输和别构调节机制的研究
正文:
【提纲】详解五金色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因
1.五羟色胺转运体蛋白和五羟色胺转运体基因的概述
五羟色胺转运体蛋白(5-HTT)是一种在人类神经系统中扮演重要角色的蛋白质,它负责调节五羟色胺(5-HT,即血清素)的浓度。
五羟色胺转运体基因(5-HTT 基因)则是控制五羟色胺转运体蛋白合成的基因。
2.五羟色胺转运体基因多态性与抑郁症的相关性
研究发现,5-HTT 基因的多态性与抑郁症的发病、性别、严重程度及自杀行为存在一定相关性。
这表明,5-HTT 基因可能对抑郁症的发生和发展起到一定作用。
3.五羟色胺转运体基因对儿童青少年创伤后应激障碍的影响
创伤后应激障碍(PTSD)是儿童青少年在经历灾害之后最容易发展出的心理问题。
研究发现,5-HTT 基因多态性与PTSD 症状的纵向发展变化有关,遗传因素可能影响PTSD 症的发生和发展。
4.五羟色胺转运体基因多态性与氟西汀疗效及副作用的关联
氟西汀是一种常用的抗抑郁药物,其作用机制与5-HTT 密切相关。
研究发现,5-HTT 基因多态性与氟西汀的疗效及副作用存在一定关联,这为个性化药物治疗提供了依据。
5.科学家对五羟色胺转运蛋白运输和别构调节机制的研究
近年来,科学家对五羟色胺转运蛋白的运输和别构调节机制进行了深入研究。
人C反应蛋白ELISA分析
人C反应蛋白ELISA分析ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)是一种常用的免疫学实验方法,通常用于测定生物样本中的特定蛋白质浓度。
人C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是一种广泛存在于人类血清中的急性期蛋白。
本文将介绍人C反应蛋白ELISA分析的原理、步骤和一些注意事项。
一、原理人C反应蛋白ELISA分析基于抗原抗体反应原理,其中包括酶联免疫吸附检测和颜色生成机制。
1. 酶联免疫吸附检测(ELISA):将含有CRP的样本加入预先涂有抗CRP抗体的微孔板孔中,使其与抗体结合。
洗涤后,加入HRP标记的第二抗体,与CRP结合并形成“抗原-抗体-标记物”复合物。
2. 颜色生成机制:加入底物TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺二氢盐),HRP作用于底物后,生成蓝色产物。
反应停止液(含硫酸)加入后,产生黄色终产物。
根据终产物的颜色深浅可定量测定CRP浓度。
二、步骤1. 样本准备:首先收集人类血清样本,可采用抗凝剂离心诱导静脉血液。
收集的血液样本需要离心,分离血清。
2. 预处理:对收集的血清样本进行预处理。
通常情况下,将样本稀释至适当浓度,以确保其蛋白质浓度在标准曲线范围内。
3. 板涂覆:将特定抗CRP抗体加入微孔板孔中。
孔板中的抗体会吸附靶分子,形成固定到表面的免疫复合物。
4. 样品加入:将预处理的样品加入孔中,使其与抗体结合。
经过一段时间的孵育,形成抗原与抗体的结合物。
5. 洗涤:用缓冲液洗涤掉未结合的物质,以消除干扰。
6. 二抗加入:加入HRP标记的第二抗体,它会与CRP结合形成“抗原-抗体-标记物”复合物。
7. 洗涤:再次用缓冲液洗涤掉未结合的二抗。
8. 底物加入:加入底物TMB,使其与HRP反应。
反应一段时间后,会产生蓝色产物。
9. 反应终止:加入反应终止液,使蓝色转变为黄色,停止反应。
10. 测定:使用酶标仪测定吸光度,通过读数可以反映CRP的浓度。
色胺途径的限速酶
色胺途径是体内合成神经递质5-羟色胺(5-HT)的代谢途径之一。
在色胺途径中,存在多个限速酶,其中最为重要的是色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,简称TPH)和芳香氨基酸脱羧酶(aromatic L-amino acid decarboxylase,简称AADC)。
色氨酸羟化酶(TPH):TPH是色胺途径的第一个限速酶,它催化色氨酸转化为5-羟色氨酸。
TPH有两个亚型,分别是TPH1和TPH2,它们分别参与中枢神经系统和外周组织的5-HT合成。
芳香氨基酸脱羧酶(AADC):AADC是色胺途径的第二个限速酶,它催化5-羟色氨酸转化为5-HT。
AADC也参与多种其他生物活性胺类物质的合成。
这两个限速酶在色胺途径中起着至关重要的作用,它们的活性和表达水平会影响5-HT的合成和释放,从而调节神经系统的功能和调节。
同时,其他酶和蛋白质也参与了色胺途径的不同步骤,如色氨酸转运蛋白、5-HT转运体等,它们对色胺途径的正常功能也发挥着重要作用。
抑郁症的心理学与神经生物学研究进展
抑郁症的心理学与神经生物学研究进展抑郁症,是一种常见的精神疾病,也是一种严重的心理健康问题。
长期以来,心理学和神经生物学领域对抑郁症的研究取得了许多重要的进展。
本文将从心理学和神经生物学两个方面,总结抑郁症研究的最新进展。
一、心理学研究进展1. 抑郁症的心理机制研究近年来,心理学家着重研究抑郁症的心理机制,旨在揭示抑郁症的起因和病程。
研究表明,负性认知偏差是抑郁症常见的特征之一,患者常常将自己和周围事物评价为消极的。
此外,心理学家还发现,慢性应激对抑郁症的发生和发展有着重要影响。
研究人员通过实验发现,持续的压力会导致抑郁症相关脑区功能异常,从而促进疾病的发生。
2. 抑郁症的心理干预研究心理干预是抑郁症治疗的重要手段之一。
心理学家们通过不同的心理干预措施,旨在缓解抑郁症患者的症状并提高其生活质量。
认知行为疗法(CBT)是最常用的心理干预方式之一,通过帮助患者矫正消极的认知偏差和改变负性思维模式,来缓解抑郁症症状。
此外,团体疗法、心理教育和心理支持等也被广泛运用于抑郁症的治疗。
二、神经生物学研究进展1. 抑郁症的神经影像学研究神经影像学研究使用功能性磁共振成像(fMRI)、脑电图(EEG)等技术,定量测量抑郁症患者脑区的活动变化,以揭示抑郁症的神经机制。
研究表明,抑郁症患者前额叶皮层和扣带回的功能紊乱与症状的出现和严重程度密切相关。
此外,杏仁核、杏仁核-海马回路和前扣带回等区域的功能异常也与抑郁症有关。
2. 抑郁症的遗传学研究抑郁症具有显著的遗传倾向,遗传学研究揭示了抑郁症发生和发展中的基因与环境相互作用。
研究表明,5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)、BDNF和COMT等基因的变异与抑郁症风险密切相关。
此外,研究人员还发现,抑郁症患者的基因表达谱与正常人存在显著差异,这为抑郁症的诊断和治疗提供了新的线索。
综合以上研究进展,我们可以看到心理学和神经生物学在抑郁症研究中起到了重要作用。
心理学研究揭示了抑郁症的心理机制和心理干预的有效性,为临床治疗提供了指导。
人组胺受体H1(HisH1)酶联免疫分析ELISA试剂盒实验原理
人组胺受体H1(HisH1)酶联免疫分析ELISA试剂盒实
验原理
人组胺受体H1(HisH1)酶联免疫分析ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组胺受体H1(HisH1)水平。
用纯化的人组胺受体H1(HisH1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入组胺受体H1(HisH1),再与HRP标记的组胺受体H1(HisH1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的组胺受体H1(HisH1)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人组胺受体H1(HisH1)的浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
封板膜
2片(48)
2片(96)
密封袋。
人17α羟化酶17αOH酶联免疫分析
人17-α-羟化酶((17-α-OH)酶联免疫分析试剂盒利用说明书本试剂盒仅供研究利用。
检测范围:96T 0.7μg/L-26μg/L利用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中17-α-羟化酶((17-α-OH)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人17-α-羟化酶((17-α-OH)水平。
用纯化的人17-α-羟化酶((17-α-OH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入17-α-羟化酶((17-α-OH),再与HRP标记的17-α-羟化酶((17-α-OH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,通过完全洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的17-α-羟化酶((17-α-OH)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人17-α-羟化酶((17-α-OH)浓度。
标本要求1.标本搜集后及早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行实验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可依照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:别离设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽可能不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
人17α羟化酶17αOH酶联免疫分析
人17-α-羟化酶((17-α-OH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T0.7μg/L-26μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中17-α-羟化酶((17-α-OH)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人17-α-羟化酶((17-α-OH)水平。
用纯化的人17-α-羟化酶((17-α-OH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入17-α-羟化酶((17-α-OH),再与HRP标记的17-α-羟化酶((17-α-OH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的17-α-羟化酶((17-α-OH)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人17-α-羟化酶((17-α-OH)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
人5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T
11pg/ml - 400pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)水平。
用纯化的人5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入5-羟色胺转运蛋白(5-HTT),再与HRP标记的5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人5-羟色胺转运蛋白(5-HTT)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。