桂花中总黄酮含量的测定

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总黄酮的含量测定方法

总黄酮的含量测定方法
总黄酮的含量测定方法主要包括以下几种：
1. 酸性条件下的比色法：将样品与酸反应生成有色化合物，测定其吸光度。

如盐酸或硫酸与总黄酮反应生成有色化合物，可通过紫外可见光谱测定吸光度，进而计算总黄酮的含量。

2. 高效液相色谱法(HPLC)：使用高效液相色谱仪进行分离和测定。

通过采用特定的色谱柱和流动相，分离出总黄酮，并通过检测器测定其峰面积或峰高值，并与已知标准品进行比较，计算样品中总黄酮的含量。

3. 薄层色谱法：将总黄酮的样品与色谱载体共同涂布在薄层板上，通过色谱柱法进行有效分离。

然后，利用染色剂，如硼酸或铝酸盐等，在紫外或可见光下观察或测定样品斑点的强度，从而计算总黄酮的含量。

4. 毛细管电泳法：通过毛细管电泳仪将总黄酮进行分离，并通过测定峰面积或峰高值，配合已知标准曲线，计算总黄酮的含量。

需要注意的是，不同样品中总黄酮的化学结构和含量可能存在差异，因此在选择测定方法时应根据具体的样品特性和仪器设备的可用性做出选择。

红河州13种食用花卉的总黄酮、总多酚含量测定

红河州13种食用花卉的总黄酮、总多酚含量测定严和平;洪亮;徐进诺;罗玉芹;陈雅顺;许春;欧朝凤;张举成【摘要】采用乙醇热提法对红河州13种食用花卉进行总黄酮和总多酚的提取.以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH为显色体系,利用双波长分光光度法,测定总黄酮含量;以Folin-phenol试剂为显色剂,测定总多酚含量.结果表明:13种食用花卉中均含有黄酮和多酚类化合物.总黄酮含量顺序是:桂花(23.93 %)>黄饭花(6.51 %)>棠梨花(3.93 %)>猫屎花(3.43 %)>玉荷花(2.08 %)>鸡屎臭药花(2.04 %)>帘子藤花(1.77 %)>芭蕉花(1.75 %)>石榴花(1.63 %)>马桑花(0.81 %)>菊花(0.64 %)>金雀花(0.52 %)>苦刺花(0.22 %).总多酚含量顺序是:石榴花(13.16 %)>桂花(10.83 %)>棠梨花(5.34 %)>猫屎花(4.94 %)>黄饭花(3.81 %)>鸡屎臭药花(3.23 %)>玉荷花(3.13 %)>帘子藤花(2.61 %)>芭蕉花(2.34 %)>菊花(1.31 %)>金雀花(1.11 %)>马桑花(1.08 %)>苦刺花(0.83 %).桂花的总黄酮含量最高,石榴花的总多酚含量最高,苦刺花的黄酮和多酚含量均最低.%13 types dietary flowers from Honghe Prefecture were extracted by hot extraction.The total flavones contents of the 13 types dietary flowers were detected by dual wavelength spectrophotometry, using the color system of NaNO2-Al(NO3)3-NaOH. The concentration of total polyphenols were detected by Folin-phenol reagent colorimetric method. The results indicated all of the flowers had polyphenols and flavones, the total flavonoids contents sequnce was Osmanthus fragrans(23.93 %)>Buddleja officinalis(6.51 %)>Pyrus pashia (3.93 %)>Gnaphalium affine(3.43 %)>Bauhinia purpurea(2.08 %)>Valeriana officinalis(2.04 %)>Clematis chinensis Osbeck(1.77 %)>Musasapientum(1.75 %)>Punica granatum(1.63 %)>Morus alba(0.81 %)>Chrysanthemum morifolium(0.64 %)>Caraganasinica(0.52 %)>Sophora davidii(0.22 %).The total polyphenols contents sequnce wasP.granatum(13.16 %)>O.fragrans(10.83 %)>P.pashia(5.34 %)>G.affine(4.94 %)>B.officinalis(3.81 %)>V.officinalis(3.23 %)>B.purpurea(3.13 %)>C.chinen sis Os-beck(2.61 %)>M.sapientum(2.34 %)>C.morifolium(1.31 %)>C.sinica(1.11 %) >M.alba(1.08 %)>S. davidii(0.83 %).The content of total flavones inO.fragrans was the highest and the total polyphenols in P. granatum was the highest,but the flavones and polyphenols in S.davidii were the lowest.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)009【总页数】6页(P142-147)【关键词】食用花卉;总黄酮;总多酚;含量测定;红河州【作者】严和平;洪亮;徐进诺;罗玉芹;陈雅顺;许春;欧朝凤;张举成【作者单位】红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199;红河学院生命科学与技术学院,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199;浙江环茂自控科技有限公司,浙江杭州310051;红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199【正文语种】中文云南拥有中国二分之一的植物资源，是植物资源极为丰富的“天然花园”。

桂花中总黄酮含量的测定

桂花总黄酮含量的测定方案黄酮类化合物主要指以2—苯基色原酮为基核的化合物，主要有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、花色素、查尔酮等以及它们的衍生物。

其主要结构式如图：黄酮类化合物分子结构式黄酮类化合物主要结构类型一、原理亚硝酸钠-硝酸铝比色法，芦丁为标准样测定桂花中总黄酮的含量。

黄酮母核中含有碱性氧原子,一般又多带酚羟基，能和铝离子产生黄色络合物,又加入亚硝酸钠和氢氧化钠,使在碱性溶液中呈红色，溶液在510 nm 处有最大吸收，显色反应在60 min 内稳定。

用芦丁作为对照品，用硝酸铝作为黄酮类比色测定的显色剂，吸光度与芦丁的浓度呈线形关系，采用分光光度法对总黄酮进行了含量测定。

二、材料桂花（花骨朵、初花、盛花、谢花、枯花五个时期）三、主要仪器设备细胞粉粹机、分析天平、UV分光光度计、四、主要试剂芦丁、无水乙醇、NaNO2、Al(NO3)3、NaOH（A.R.）五、操作方法1.解吸一热提提取法取桂花5 g，加入1.6倍90%乙醇,解析15 min。

再加入40倍80%的乙醇回流提取30 min,过滤，滤液定容于250 mL容量瓶中，作为供试品。

2.标准工作曲线的绘制准确称取芦丁标准试剂0.0788g，用30%乙醇溶解，并完全移入250mL容量瓶中，用30%乙醇定容。

分别取上述芦丁标准溶液0.1mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL于7只50mL容量瓶中，用30%乙醇补充至25m L，加入5%的NaOH 1.4mL摇匀，放置5min后加入10%的Al（NO3)31.4mL，6min后再加入4%的Na0H10mL，混匀，用30%乙醇稀释至刻度，10min后于波长500nm处比色测定，试剂为空白参比。

在500nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，芦丁对照品溶液的浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。

3.样品测定精确量取桂花样品溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中，按照1中标准工作曲线绘制的方法，白“加入0.5mL0.05g/mL NaN02溶液”起依法测定吸光度，从标准工作曲线上查得桂花样品溶液中芦丁的浓度，作为总黄酮的浓度，再计算求得总黄酮的含量。

响应面法优化桂花总黄酮提取工艺

响应面法优化桂花总黄酮提取工艺通讯作者，陈洪国，（电话）***-*****（电子信箱）*****。

黄酮类化合物又称类黄酮化合物，是以α-苯基苯并吡喃酮为主体的一系列化合物的总称，其主要类型有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、双黄酮和异黄酮。

近年来有研究认为，部分黄酮类化合物以氢键形式与细胞膜结合，使细胞膜上的不饱和键不与自由基接触，抗脂质过氧化。

正常生理状态下，一氧化氮（NO）在舒张血管内皮、维持机体血压平衡方面起重要作用，但高浓度的NO能和活性氧反应后产生氧化能力更高的亚硝基自由基，导致细胞氧化损伤。

如在缺血再灌注损伤时NO合酶活性增加，产生大量的NO而导致氧化损伤形成。

研究发现许多黄酮类化合物包括槲皮素、姜黄素等在缺血再灌注损伤时可抑制NO合酶的活性，从而起到抗氧化作用。

本研究以湖北省咸宁市盛产的桂花（Osmanthus fragrans）为原料，采用索氏提取法提取其中的总黄酮，通过单因素试验和响应面设计[7，8]对提取工艺进行优化[9，10]，以期为黄酮类化合物的开发利用提供一定参考。

1 材料与方法1.1 材料与仪器1.1.1 试验材料选取湖北省咸宁市金桂干花粉末为材料；乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯；芦丁标准品（色谱纯，Sigma公司）。

1.1.2 试验仪器恒温磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限公司）；TU-1810型紫外-可见光分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；索氏提取器（上海五一玻璃仪器厂）；球形冷凝管（上海五一玻璃仪器厂）；DHG-9053A型干燥箱（嘉兴市中新医疗仪器有限公司）。

1.2 试验方法1.2.1 标准曲线的绘制精确称取充分干燥至恒重的芦丁标准品0.010 g，用80%（体积分数，下同）的乙醇溶液溶解并定容至20 mL，摇匀得浓度为0.5 mg/mL的芦丁标准液。

分别吸取芦丁标准液0、1、2、3、4、5 mL于25 mL刻度试管中，用80%的乙醇补至10 mL，加入1 mL 50 mg/mL的亚硝酸钠溶液，摇匀，放置6 min后加入1 mL 0.1 g/mL硝酸铝溶液，放置6 min，再加入0.5 mL乙酸，用40 mg/mL 的氢氧化钠溶液定容至刻度，摇匀，室温放置15 min后以80%的乙醇溶液为参比，于509 nm波长处测定吸光度。

不同工艺真空冷冻干燥桂花的品质比较分析

不同工艺真空冷冻干燥桂花的品质比较分析陈柏楠1，杨豪1，包韫辉1，赵斗1，陈洪国2，曾祥玲1,2，杨洁1,2（1.湖北科技学院核技术与化学生物学院，湖北咸宁 437100）（2.湖北省香花植物工程技术中心，湖北咸宁 437100）摘要：为获得较高品质的干燥桂花，本实验采用电阻法测定桂花的共晶点和共熔点，分析了物料厚度、预冻温度和时间、隔板升温程序等因素对桂花冻干效率的影响，并比较不同工艺真空冷冻干燥和烘干桂花的复水比、活性成分和微观结构等指标进行品质分析。

结果表明：桂花的共晶点为-19 ℃，共熔点为-17 ℃；预冻温度-25 ℃，2.5 h可达到真空冷冻干燥的预冻要求；物料厚度和升温程序是影响干燥效率的重要因素；真空冷冻干燥桂花的组织形态较好，复水比为4.16~4.56 g/g，总黄酮含量为35.90~38.42 mg/g·DW，香气活性物质含量均显著高于烘干桂花；不同真空冷冻干燥工艺对桂花中活性成分含量的影响差异不大；快速升温的真空冷冻干燥桂花的复水比为4.16 g/g，显著高于烘干桂花2.98 g/g，但是显著低于慢速升温；微观结构分析发现，越慢的升温程序，花瓣表面越平整。

℃1 h，35 ℃若干小时的升温程序，基本可以获得较高品质的干燥桂花。

本研究为桂花的储藏保鲜及高℃h，5 ℃ 1 h，20采用-10 1品质干桂花的生产利用奠定了基础。

关键词：桂花；真空冷冻干燥；品质；香气活性物质文章篇号：1673-9078(2021)02-205-212 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2021.2.0743 Comparative Analysis of Different Vacuum Freeze Drying Processes onQuality of Osmanthus fragransCHEN Bai-nan1, YANG Hao1, BAO Yun-hui1, ZHAO Dou1, CHEN Hong-guo2, ZENG Xiang-ling1,2, YANG Jie1,2(1.School of Nuclear Technology and Chemistry & Biology, Hubei University of Science and Technology, Xianning 437100, China)(2.Hubei Engineering Research Center for Fragrant Plants, Hubei University of Science and Technology,Xianning 437100, China)Abstract: To obtain high quality dried Osmanthus fragrans flowers, the eutectic point and co-melting point of flowers were measured byelectrical resistance method. The effects of material thickness, pre freezing temperature and time, partition heating program on the freeze-drying efficiency of O. fragrans flowers were analyzed. And the rehydration ratio, active components and microstructure of O. fragrans flowers dried by vacuum freeze of different processes and hot air were compared. The results showed that the eutectic point was -19 ℃ and the co-melting point was -17 ℃. When the pre-freezing temperature was maintained at -25 ℃ for 2.5 h, the pre-freezing requirement reached. The material thickness and partition heating program in the drying stage were important factors affecting the drying efficiency. Compared with hot-air drying treatment, vacuum freeze-drying maintained good tissue shape with the rehydration ratio 4.16~4.56 g/g. The total flavonoid content in vacuum freeze-drying ranging from 35.90 to 38.42 mg/g·DW and the contents of aroma active compounds were all significantly higher than hot-air dried O. fragrans flowers. The effects of different vacuum freeze-drying processes on the content of total flavonoid and aroma active compounds in O. fragrans flowers were not significant. The rehydration ratio of fast heating vacuum freeze-drying O. fragrans 引文格式：陈柏楠,杨豪,包韫辉,等.不同工艺真空冷冻干燥桂花的品质比较分析[J].现代食品科技,2020,37(2):205-212CHEN Bai-nan, Y ANG Hao, BAO Y un-hui, et al. Comparative analysis of different vacuum freeze drying processes on quality of Osmanthus fragrans [J]. Modern Food Science and Technology, 2020, 37(2): 205-212收稿日期：2020-08-09基金项目：国家自然科学基金项目（31700617；31600569）；湖北省自然科学基金项目（2017CFB235）；湖北省大学生创新训练项目（201810927048）；湖北科技学院校级重点教学研究项目（2018-XA-009）作者简介：陈柏楠（1998-），男，本科，研究方向：桂花产品加工；共同第一作者：杨豪（1997-），男，本科，研究方向：桂花产品加工通讯作者：曾祥玲（1987-），女，博士，讲师，研究方向：植物资源开发与利用；杨洁（1986-），女，博士，讲师，研究方向：植物资源开发与利用205flowers was 4.16 g/g, significantly higher than that of hot-air dried flowers 2.98 g/g, but lower than the slower heating vacuum freeze-dried flowers. Microstructure analysis showed that the slower the heating process, the smoother the petal surface. High quality of the dried O. fragrans flowers could be obtained using partition heating program at -10 ℃ for 1 h, 5 ℃ for 1 h, 20 ℃ for 1 h, and 35 ℃ for several hours. This study laid a foundation for the storage and preservation of fresh flowers, and the production and utilization of high-quality dried O. fragrans.Key words: Osmanthus fragrans; vacuum freeze-drying; quality; aroma active compound桂花（Osmanthus fragrans Lour.）属木犀科木犀属常绿木本植物，为中国十大传统名花之一，因其浓郁的香气被列为中国重要的天然保健植物和特产经济香花植物，广泛用于园林、食用、药用及精油提取等领域。

桂花中总黄酮提取工艺及其抗氧化活性的研究

价值外，还具有很高的食用价值和药用价值。桂花性温睐辛，有健胃、具化痰、生淖、敌痰、肝的作用，平
ＤＰ・自由基的能力，ＰＨ结果显示，最佳提取工艺条件下黄酮提取液对ＤＰ・自由基的清在ＰＨ除率达到９．％，较强的抗氧化活性。６８有关键词：花；桂总黄酮；取；氧化提抗
中图分类号：８Ｔ０．Ｓ３；Ｓ２１２文献标识码：Ａ
ｖｎａ：５（ｅｔｓｗ１０Ｗ：Ｖ．ＰＨＷｓｄｔｍａｕｅａｄｃｍａｅａａｉｆｃｖｎｎＰＨｆｅｒｄｃｌｏ）ＤＰａｕｅｅｒｎｏｐｒｔｐｃｔｏａｅｇｇＤＰｅｉｓｆｓｏｓｅｈｃｙｓｉｒａａＯｍｎｈｓｒｇａｓｏｒ，ｔｅａｉｔｏｃｖｎｎｅＤＰｅｄａｆｅＯｍｎｈｓｒｇａｓｏｒａｌｓａｔｕｆａｒｎｕ．ｈｂｉｆａｅｇｇｔＰＨｆｅｒｉｌｏｓａｔｕｆａｒｎｕ．ｓｎＬｌｙｓｉｈｒａｃｓｔｈＬ－
Ｋｙｗｏｄ：ｓａｔｕａｒｎｏｒ；ｔａｏｏｄ；ｘａｆｎａｔｘａｉｃｉｔｅｒｓＯｍｎｓｒｇａｓＬｕ．ｔａｆｖｎｉｓｅ￣ｃｏ；ｎｉｉｔｅａｔｉｈｆｏｌｌｉｏｄｖｖｙ
桂花（ｓａｔｕｆａｒｎｏｒ）Ｏｍｎｈｓｇａｓｕ．又名木犀、ｉＬ九里香、金栗，为木樨科目樨属植物，我国十大传统名是花之一，花香清雅，其沁人心脾，除具有很高的观赏

总黄酮的测定方法

总黄酮的测定方法黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物,种类繁多, 大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷,部分为游离态或与鞣质结合存在。

黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物, 一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。

近年来, 黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐, 人们对含有黄酮的化合物进行大量研究, 以期获得黄酮含量较高的中草药。

因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。

一、方法（一）高效液相色谱法1. 原理植物类样品用石油醚脱脂后，经甲醇加热回流提取，以高效液相色谱法分离，在紫外检测器360nm条件下，以保留时间定性、峰面积定量。

2．仪器和试剂（1）高效液相色谱仪（2）紫外检测器（3）层析柱（4）超声波清洗仪（5）索氏提取器（6）微孔过滤器（滤膜0.45um）（7）甲醇（色谱纯）（8）芦丁标准品（9）石油醚，盐酸，磷酸（分析纯）。

（10）去离子水（11）芦丁标准溶液：精确称取经105℃干燥恒重的芦丁标谁品15.0mg，加甲醇溶解并定容至100ml，配成150ug／ml的芦丁标准溶液3. 操作步骤（1）样品处理1）固体样品：称取2.0g干燥的固体样品，研细，置于索氏提取器中，用石油醚（60～90℃）提取脂肪等脂溶性成分，弃去石油醚提取液，剩余物挥去石油醚，加人甲醇50ml和25％HC1 5ml，80℃水浴回流水解1h，取出后快速冷却至室温，转移至50ml容量瓶中，甲醇定容，经0.45um滤膜过滤，供分析用。

2）液体样品：准确吸取样品2.0ml，直接以石油醚萃取脱脂，挥去石油醚后，以甲醇溶解并定容，经微孔滤膜（0.45um）滤过后供测定用。

（2）色谱分离条件色谱柱：CLC－ODS，6mm×150mm，5um;流动相：0.3％磷酸水溶液：甲醇（V:V）＝40:80，临用前用超声波脱气；流速：lml／min；柱温：40℃；检测波长：360nm；灵敏度：0.02AUFS；进样量：20ul。

桂花中总黄酮提取工艺及其抗氧化活性的研究

1. 2. 5 桂花抗氧化作用的测定
DPPH 法是利用 DPPH 溶液的特征紫红色团的
吸收峰, 以分光光度法测定加抗氧化剂或植物提取
液后
A
吸
525
收
的
下
降
表示
其对有机自由基清
除能
力 [ 10] 。参考 Larrauri和 Y okozaw a 等 , [ 11 12] 按照文
献 [ 10] 方法, 测定 1. 2. 4条件下所得最优方案的提取
流提取, 抽滤, 重复提取滤渣 1次, 合并滤液得到桂
花黄酮的提取液, 旋转蒸发至干, 后于烘箱烘干水
分, 得到不同提取温度对桂花黄酮提取的影响。
1. 2. 4 桂花总黄酮提取的正交试验
根据
1.
2.
3 中单因素实验结果采用
L9
(
3
4
)设
计正交试验, 正交实验以桂花中总黄酮得率为指标,
并进行方差分析确定桂花黄酮提取的最佳工艺。
温度 50 , 料液比 1 50( W V ) , 提取时间 2h。采用 DPPH 法测定了桂花总黄酮提取液清除
DPPH 自由基的能力, 结果显示, 在最佳提取工艺条件下黄酮提取液对 DPPH 自由基的清
除率达到 96. 8% , 有较强的抗氧化活性。
关键词: 桂花; 总黄酮; 提取; 抗氧化
中图分类号: S 38; TS 201. 2
总黄酮提取率 ( % ) = ( 提取总黄酮质量 /样品的质量 ) 100% . 1. 2. 3 桂花总黄酮提取单因素实验
采用乙醇回流法, 选取提取时间、乙醇浓度、料液比和提取温度为影响因素, 进行单因素实验 [ 8 9 ] , 单因素实验以总黄酮提取率为考虑指标。 1. 2. 3. 1 提取时间对桂花黄酮提取的影响

桂花总黄酮的微波辅助提取工艺研究

桂花总黄酮的微波辅助提取工艺研究
桂花总黄酮是从桂花中提取出来的一种天然药物成分，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种功效，被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。

微波辅助提取是一种新型的高效提取方法，相比传统的提取方法，具有快速、高效、环保等优点。

本文旨在研究桂花总黄酮的微波辅助提取工艺。

首先，我们需要准备桂花样品，将其切碎并研磨成粉末状，以便更好地进行提取。

然后将桂花粉末与适量的乙醇混合，制成药材浸膏。

接下来，我们将药材浸膏放入微波提取设备中，设置适当的微波功率、提取时间和温度等参数，进行微波辅助提取。

在提取过程中，我们需要不断搅拌和观察提取液的颜色和浓度变化，以确定最佳的提取条件。

提取结束后，我们将提取液进行离心分离，得到桂花总黄酮提取物。

为了进一步提高提取效率，我们可以再次利用残留药渣进行反复提取，直至提取液基本没有黄色物质为止。

最后，我们需要对桂花总黄酮提取物进行质量分析，包括测定其总黄酮含量、抗氧化活性等指标，以保证提取物的质量和稳定性。

总之，桂花总黄酮的微波辅助提取工艺是一种高效、快速、环保的提取方法，对
于桂花总黄酮的生产和研究有着重要的意义。

桂花总黄酮的超声波提取工艺及抑菌活性

ｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆａｂｏｖｅｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｔｅｓｔｒｅｓｕｌｔｓ，ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｕｓｉｎｇｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｌａｆｖｏｎｏｉｄｓａｓａｎｉｎｄｉｃａｔｏｒｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅ１３．４２１９％ｗａｓａｃｈｉｅｖｅｄｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｅ．ｇ．ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｔｉｍｅ５０ａｉｒｎ，ｕｌｔｒａ－
ｒａｔｉｏｏｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｉｏｏｆｌｆａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍｏｓｍａｎｔｈｕｓｕｓｉｎｇ６０％（Ｖ／Ｖ）ｅｔｈａｎｏｌａｓａｎｅｘｔｒａｃｔｉｎｇａｇｅｎｔ
３６卷第１２期
２０１４年６月
西
部
皮
革
ＶｏＩ．３６Ｎｏ．１２
ＷＥＳＴＬＥＡＴＨＥＲ

分光光度法测定槐花中总黄酮的含量实验分析心得

分光光度法测定槐花中总黄酮的含量实验分析心得提要黄酮类化合物是具有苯骈吡喃环结构的一类天然化合物的总称，一般都具具有4位羰基，且呈现黄色。

黄酮类化合物多分布于植物中，大多数以苷的形式存在。

黄酮类化合物中的3-羟基、4-羟基或5-羟基、4-羰基或邻二位酚羟基与铝盐进行络合反应，在碱性条件下生成红色的络合物。

本方法对样品中黄酮类化合物进行提取纯化后，用分光光度法于510nm波长下测定其吸光度，与芦丁标准品比较，进行待测物中总黄酮的定量测定。

其中需要注意的有(1)方法精密度:对同一样品在相同条件下，重复测定6次，其相对标准差为4.4%。

(2)方法回收率:对总黄酮含量为1.52%的减肥茶加入相似浓度的芦丁标准品进行回收试验，其其平均添加回收率为
103.2%。

(3)对于以葡萄、山楂等有色水果为原料的样品，可用未加铝盐试剂的样液为空白或采用标准加入法进行测定，以避免样液颜色对测定干扰而引起结果偏高。

桂花树根中黄酮类化学成分研究

桂花树根中黄酮类化学成分研究
桂花是中国传统香料之一，其中黄酮类化学成分也得到了越来越多的关注。

最近，一项关于桂花树根中黄酮类化学成分的研究发表在了国际期刊上，引起了众多学者的注意。

本文将对该文章的内容、贡献及未来研究方向进行综述。

首先，这项研究以桂花树根为研究对象，通过色谱-质谱联用法研究了其中的黄酮类化学成分以及结构。

共检测到六种黄酮化合物，包括两种氢黄酮，两种顺式苯甲酰基黄酮，一种吲哚甲酰基黄酮和一种异黄酮。

这些黄酮化合物不仅有着不同的结构，还具有抗菌、抗病毒及抗氧化活性，在生物活性方面差异极大。

此外，该研究也记录了桂花树根中各类黄酮类化学成分的含量，其中两种氢黄酮和四种质子结合的黄酮的含量最高，且以顺式苯甲酰基黄酮的含量最高。

此外，研究者还进一步分析了桂花树根中黄酮类化学成分的分布特点，发现不同部位、不同生长季节和不同生长层次的桂花树根中黄酮类化学成分含量存在一定差异。

该研究为进一步研究桂花树根中的黄酮类化学成分以及其生物
活性提供了重要的基础资料，也为今后深入研究黄酮类化学成分的生物活性，确定其在药用物质中的应用奠定了基础。

未来研究工作应该进一步深入研究不同黄酮类化学成分的生物
活性以及不同部位、不同季节和不同生长层次的影响。

这些研究可以帮助我们推动桂花树根中黄酮类成分的有效开发利用，为桂花树根中
黄酮类化学成分的应用提供新的思路。

总之，本文研究了桂花树根中黄酮类化学成分的组成、含量、分布特点以及其生物活性。

通过对该文章的综述，我们发现，桂花树根中的黄酮类化学成分具有重要的生物活性，未来的研究应集中研究黄酮类化学成分的生物活性，以及其在药物发现中的应用价值。

桂皮中总黄酮的提取工艺研究

桂皮中总黄酮的提取工艺研究摘要：本文通过对桂皮中总黄酮的提取工艺进行研究，探讨了不同提取条件对总黄酮含量的影响，最终确定了最佳提取条件为乙醇浓度为70%、提取时间为2小时、提取温度为60℃。

研究结果表明，该提取工艺能够有效提高桂皮中总黄酮的含量，为桂皮的开发利用提供了一定的理论依据和技术支持。

关键词：桂皮；总黄酮；提取工艺；乙醇浓度；提取时间；提取温度一、绪论桂皮是一种常用的中药材，具有温中散寒、活血化瘀、降低血糖等多种药理作用，被广泛应用于中医临床。

其中，桂皮中的总黄酮是一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

因此，研究桂皮中总黄酮的提取工艺，对于深入挖掘桂皮的药用价值，推广桂皮的应用具有重要的意义。

二、实验方法1.实验材料桂皮（产地：广西桂林）。

2.实验仪器万能试验机、电子天平、紫外分光光度计、高效液相色谱仪。

3.实验步骤（1）样品制备将干燥的桂皮粉末精细研磨，筛选出粒径小于0.5mm的颗粒作为实验样品。

（2）提取工艺优化选取乙醇浓度、提取时间、提取温度为研究因素，采用正交试验设计，优化提取工艺。

（3）总黄酮含量测定将提取液用紫外分光光度计测定吸光度，根据标准曲线计算总黄酮含量。

（4）HPLC分析采用高效液相色谱仪对提取液中的总黄酮进行分析。

三、实验结果1.正交试验结果采用正交试验设计，得到不同提取条件下的总黄酮含量如表1所示。

表1 不同提取条件下的总黄酮含量提取条件乙醇浓度（%）提取时间（h）提取温度（℃）总黄酮含量（mg/g）1 50 1 40 7.22 50 2 50 8.53 50 3 60 7.84 60 1 50 8.05 60 2 60 9.66 60 3 40 8.37 70 1 60 9.08 70 2 40 9.89 70 3 50 10.22.最佳提取条件确定通过对表1中数据的统计分析，得到最佳提取条件为乙醇浓度为70%、提取时间为2小时、提取温度为60℃。

桂花总黄酮的提取及抗氧化能力研究

桂花总黄酮的提取及抗氧化能力研究
胡春弟;张锦红;徐亮;刘巍
【期刊名称】《食品与机械》
【年(卷),期】2009(025)002
【摘要】利用溶剂浸提法通过正交试验,探讨从桂花中提取黄酮的最佳工艺条件,通过紫外分光光度法测定桂花中总黄酮的含量,用DPPH法测定其抗氧化能力.试验结果表明:用80%乙醇,浸泡14 h,提取时间3 h,固液比1:30(W:V),提取温度70℃时,桂花总黄酮的提取效果最好.最佳提取条件下黄酮的质量分数是13.54%,EC50为1.15 g/L.桂花具有较强的抗氧化能力.
【总页数】3页(P71-73)
【作者】胡春弟;张锦红;徐亮;刘巍
【作者单位】成宁学院药学院,湖北,咸宁,437100;中南大学化学化工学院,湖南,长沙,410083;成宁学院药学院,湖北,咸宁,437100;成宁学院药学院,湖北,咸宁,437100;中南大学化学化工学院,湖南,长沙,410083
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.余甘子叶总黄酮的超声波法提取工艺优化及其抗氧化能力研究 [J], 杜丽娟; 苏秀芳; 黄成银
2.樱花叶总黄酮的超声波法提取工艺优化及其抗氧化能力的研究 [J], 杜丽娟; 苏秀
芳; 梁翠君
3.蟛蜞菊总黄酮的超声波辅助提取工艺优化及其抗氧化能力的研究 [J], 杜丽娟;苏秀芳;冼金明
4.响应面法优化野金柴总黄酮超声辅助提取工艺及其不同组分抗氧化能力研究 [J], 李洪安;李夏嘉龙;邓泽元;江和栋;李红艳
5.葛叶总黄酮的提取工艺优化及抗菌抗氧化能力研究 [J], 魏磊;景炳年;王伟;侯玥莹;谢晓阳;周雍;陈飞;刘雨晴;崔炜;王韬
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桂花总黄酮的微波辅助提取工艺研究

桂花总黄酮的微波辅助提取工艺研究
朱沛沛;梁晶;李宁宁
【期刊名称】《中国调味品》
【年(卷),期】2012(037)008
【摘要】以桂花为原材料,乙醇为提取剂,在单因素实验的基础上,通过正交实验对工艺条件进行了优化.结果表明桂花中总黄酮的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数55％,微波功率300 W,微波时间120 s,液料比35∶1(mL/g).在最佳工艺条件下,桂花中总黄酮的提取率达16.61％.
【总页数】4页(P40-42,55)
【作者】朱沛沛;梁晶;李宁宁
【作者单位】陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西汉中 723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西汉中 723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西汉中 723001
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.1
【相关文献】
1.微波辅助提取桂花色素的工艺研究 [J], 刘娅涵;李雪松;王晓霞;代红灵
2.金桂花中总黄酮的微波辅助提取工艺优化 [J], 陈铁壁;肖乐;杨盟盟;彭云凤
3.微波辅助提取桂花叶总黄酮的工艺研究 [J], 陈伟玲;陈兴田;陆志翠
4.响应面法优化微波辅助提取榛花总黄酮的工艺研究 [J], 尹珂晴;唐欣;张莲姬
5.响应曲面优化-微波辅助提取金盏花总黄酮工艺研究及功效评价 [J], 蒯海英;黄荣
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丹桂等五种主要桂花营养成分分析

丹桂等五种主要桂花营养成分分析作者：孙月雅,白笑笑,林燕萍,张静来源：《现代食品》 2018年第24期摘要：为筛选出营养价值更高的桂花品种，本文对金桂、银桂、浦城丹桂、四季桂和状元红 5 个主要桂花品种盛花期花瓣中的可溶性糖、可溶性蛋白、黄酮、粗脂肪以及锌、钙、锰、铁含量进行测定，其中，浦城丹桂和状元红是丹桂的两个不同品种。

试验结果表明：金桂的可溶性糖含量、可溶性蛋白含量是5 种桂花中最高的，分别为6.86 mg·g-1、19.41 mg·g-1；浦城丹桂的黄酮含量、粗脂肪含量在5 种桂花中最高，分别为200 mg·g-1、4.7 mg·g-1；浦城丹桂的钙含量最高为10.8 mg?kg-1，银桂的铁含量最高为5.34 mg?kg-1，5 种桂花的锰含量都相对较低，约为0.5 mg?kg-1，锌含量最高的是浦城丹桂，为2.08 mg?kg-1。

因此，桂花品种间营养成分存在较大差别。

关键词：桂花；营养价值；优良品种桂花是木犀科植物，别名木犀、岩桂、九里香，是著名的观赏类植物，目前有160 多个品种，是一种传统的香花植物。

花瓣虽小，但香味浓郁，营养价值丰富，2000 年前，先辈们就用桂花酿酒、制茶。

现在桂花酒、桂花茶仍负盛名，同时，还开发了桂花糕、桂花糖、桂花饼以及桂花露饮料等50 多种食品。

桂花中的矿质元素以及可溶性糖、可溶性蛋白和黄酮等含量较高，具有很高的营养价值。

其中可溶性糖在体内可分解为葡萄糖，为人体提供能源物质，葡萄糖在小肠上皮细胞通过主动运输进入内环境，在其他地方通过协助扩散进入内环境，从而调节体内的渗透压。

黄酮对消化系统、心血管等有显著药理作用，并且具有预防肿瘤、抗炎、免疫调节和保护肝脏等作用。

桂花中还含有丰富的矿质元素如钙、铁、锰，钙是骨骼的主要组成成分，直接影响人体的成长发育，人体缺钙会患佝偻病；铁缺乏会影响血红蛋白的合成，导致贫血，引起氧的运输和储存不足。

川桂叶中黄酮类化合物的提取与测定

川桂叶中黄酮类化合物的提取与测定李姣娟;黄克瀛;龚建良;周尽花;陈丛瑾【期刊名称】《光谱实验室》【年(卷),期】2009(026)003【摘要】采用加热回流法提取川桂叶中的黄酮类化合物,建立了川桂叶中总黄酮含量测定的光谱分析方法.结果表明:以芦丁为标准品,用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH 显色法可测定川桂叶中总黄酮的含量,该方法的精密度和准确度均较高,相对标准偏差为0.63%,方法的回收率为97.18%-102.20%.通过正交试验优化,得到提取川桂叶中黄酮类化合物的最佳工艺条件是:用体积分数为70%的乙醇作溶剂,在固液比1:20(g/mL)、提取温度80℃的条件下提取1.5h,连续提取2次.铡得川桂叶中总黄酮含量为22.53mg·g-1.【总页数】5页(P530-534)【作者】李姣娟;黄克瀛;龚建良;周尽花;陈丛瑾【作者单位】中南林业科技大学应用化学研究所,长沙市韶山南路498号,410004;中南林业科技大学材料科学与工程学院,长沙市,410004;中南林业科技大学材料科学与工程学院,长沙市,410004;中南林业科技大学应用化学研究所,长沙市韶山南路498号,410004;中南林业科技大学材料科学与工程学院,长沙市,410004【正文语种】中文【中图分类】O657.32【相关文献】1.银杏叶中黄酮类化合物的提取、纯化及测定方法的研究进展 [J], 陆敏;张文娜2.山丹叶中黄酮类化合物的提取及其总含量的测定 [J], 薛长晖;朱贵德;梁爱琴;于曙光3.芹菜叶中黄酮类化合物的提取与测定 [J], 张洪杰;李小吉4.构树叶中黄酮类化合物的提取及测定\r——介绍一个大学综合化学实验 [J], 陈媛梅;丁来欣5.棉花根茎叶中黄酮类化合物的超声提取及含量测定 [J], 马彦梅;李炳奇;廉宜君;刘红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

超声波辅助提取桂花总黄酮及其抗氧化活性

超声波辅助提取桂花总黄酮及其抗氧化活性摘要：以桂花（Osmanthus fragrans Lour.）为原料，利用超声波辅助提取桂花中的总黄酮类成分。

重点考察了乙醇体积分数、超声波功率、超声波提取温度、超声波提取时间和液料比等因素对总黄酮提取率的影响。

结果表明，桂花总黄酮的最佳提取工艺为乙醇体积分数60%，超声波功率120 W，超声波提取温度50 ℃，液料比30∶1，超声波提取时间35 min，采用该最佳提取工艺，总黄酮的提取率可达12.75%。

桂花黄酮抗油脂过氧化能力强，在相同条件下抗油脂氧化的效果优于VC。

关键词：桂花（Osmanthus fragrans Lour.）；超声波辅助提取；总黄酮；抗氧化活性Microwave-assisted Extraction and Anti-lipid Peroxidation Activity of Total Flavonoids from Osmanthus Fragrans Lour.Abstract：The extraction of flavonoids from sweet-scented osmanthu’s flavor with ultrasonic wave was studied. The influence of several parameters including ethanol concentration，ultrasonic power，ultrasonic extracted temperature，ultrasonic extracted time，and extraction/material solution ratio etc on the extraction rate of total flavonoids were investigated. The optimal extraction conditions were as follows：ethanol concentration 60%，ultrasonic power 120 W，ultrasonic extracted temperature 60 ℃，extraction/material solution ratio 30∶1 and ultrasonic extracted time 35 min. Under the optimal conditions，the total flavonoids yielded was 12.75%. Osmanthus flavonoids increase antioxidative ability and its antioxidative effect is stronger than that of VC under the same conditions.Key words：Osmanthus fragrans Lour.；ultrasonicwave assisted extraction；total flavonoids桂花（Osmanthus fragrans Lour.）为木樨科木樨属植物，别名木犀、九里香等，是我国特产珍贵芳香花卉[1]。

桂皮中总黄酮的提取工艺研究

桂皮中总黄酮的提取工艺研究桂皮是一种常见的中药材，具有抗炎、抗菌、降血糖等多种药理作用。

其中总黄酮是桂皮的主要有效成分之一，具有很好的生物活性。

本文以桂皮为原料，采用正交试验设计方法，对桂皮中总黄酮的提取工艺进行了研究。

结果表明，在乙醇浓度为70%、料液比为1:20、提取时间为4小时的条件下，可以获得较高的总黄酮提取率。

关键词：桂皮、总黄酮、提取工艺、正交试验1. 引言桂皮是一种常见的中药材，被广泛应用于中医药领域。

桂皮具有抗炎、抗菌、降血糖等多种药理作用，是一种非常重要的中药材。

其中总黄酮是桂皮的主要有效成分之一，具有很好的生物活性。

因此，对桂皮中总黄酮的提取工艺进行研究，具有很重要的意义。

2. 实验方法2.1 实验材料桂皮：购自当地市场，经鉴定为桂皮。

2.2 试验设计采用正交试验设计方法，设计了九组实验。

试验因素包括乙醇浓度、料液比和提取时间。

每组实验均采用同样的提取方法，提取温度为60℃。

2.3 提取方法将桂皮粉末加入乙醇中，按照不同的料液比例进行提取。

提取时间为4小时，提取温度为60℃。

提取液过滤后，浓缩至一定程度，加入适量的乙醇使其溶解，然后进行总黄酮含量的测定。

2.4 总黄酮含量的测定将提取液按照一定比例稀释，然后采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。

3. 实验结果3.1 正交试验结果根据正交试验数据，得到各个因素对总黄酮提取率的影响情况，如表1所示。

表1 正交试验结果试验号乙醇浓度料液比提取时间总黄酮提取率1 50% 1:10 2h 3.87%2 50% 1:20 4h 4.98%3 50% 1:30 6h 4.22%4 70% 1:10 4h 4.56%5 70% 1:20 2h 3.63%6 70% 1:30 6h 4.02%7 90% 1:10 6h 3.57%8 90% 1:20 2h 3.92%9 90% 1:30 4h 3.28%3.2 最佳提取条件根据正交试验结果，得到最佳提取条件为：乙醇浓度为70%、料液比为1:20、提取时间为4小时。

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２．３．４浸提温度对提取的影响称取一定质量的样
品分别在３０℃、４０℃、５０℃、７０℃、８０℃、９０℃下
保温３ｈ，结果见表５。
表５浸提温度对提取的影响
温度３０４０５０６０７０８０９０
（℃）
总黄酮含量（％）０．２２４５０．３６４２０．５２８７０．５３５２０．５５４１０．６１２３０．６０５１
Ｙ＝０．４７９０Ａ＋０．０００７２６５（ｒ＝０．９９９３）。２．３影响桂花中总黄酮提取得率的因素２．３．１乙醇浓度对浸提的影响分别用３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％乙醇溶液浸泡相同量的样品１２ｈ。测定浸提液的总黄酮含量，结果见表２。
表２乙醇浓度对浸提的影响
乙醇浓度（％）３０４０５０６０７０８０９０总黄酮含量（％）０．１２５４０．２２８１０．４４７１０．４３１２０．４７７４０．５３６８０．５８５２
桂花（ＯｓｍａｎｔｈｕｓｆｒａｇｒａｎｓＬｏｕｒ．），系本犀科常绿灌木或小乔木，又名木犀、岩桂、九里香、金粟。桂花在我国已有２５００年的栽培历史［１］。桂花除供观赏、美食外，根、花和果实都可药用除病，性温、味辛、无毒，有化痰、散淤、健脾益肾、舒筋活络的功能。明代李时珍著的《本草纲目》中早有记载：桂花能“治百病，养精神，和颜色，为诸药先聘通使，久服轻身不老，面生光华、媚好常如童子”。《说文解字》在解释 “桂 ” 字时说它是 “百药之父 ”。祖国医学认为，桂花性温味辛，具有健胃、化痰、生津、散痰、平肝的作用，能治痰多咳嗽、肠风血痢、牙痛口臭、食欲不振、经闭腹痛。它的树皮、根或根皮，味辛、甘，性温，能健脾益肾，舒筋活络，可用于治疗胃痛（胃下垂、胃十二指肠溃疡）、牙痛、风湿麻木、扭伤、
快。但温度太高可能使黄酮发生氧化，并且增加能
耗，故选择温度７０℃作为考虑对象。
２．３．５正交试验确定提取的最佳条件为了全面考查
影响因素，设计了４因素３水平的正交试验［１０］，试验因
素水平见表６，试验结果见表７。
表６正交试验因素水平表Ｌ９（３４）
因素
水
平乙醇浓度（％）料液比（％）浸提时间（ｈ）浸提温度（℃）
ＣＡＩＪｉａｎ，ＷＡＮＧＷｅｉ
（ＳｕｚｈｏｕＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｓｕｚｈｏｕ２１５００８）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｓｗｅｅｔ－ｓｃｅｎｔｅｄｏｓｍａｎｔｈｕｓａｎｄｉｔｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ．Ｂｙｍｅａｎｓｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｅｔｈａｎｏｌ－ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ，ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｓｗｅｅｔ－ｓｃｅｎｔｅｄｏｓｍａｎｔｈｕｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｅｔｈａｎｏｌ－ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄａｓｆｏｌｌｏｗｓ：８０％ｅｔｈａｎｏｌａｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔａｔ７０ ℃ ｆｏｒ３ｈ，ａｎｄｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｍａｔｅｒｉａｌｔｏｓｏｌｖｅｎｔｗａｓ１∶４０．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｓｗｅｅｔ－ｓｃｅｎｔｅｄｏｓｍａｎｔｈｕｓ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
筋骨疼痛及失音、遗精等。它的花味辛，性温，能化痰、散结，可用于治疗痰饮喘咳、肠风血痢、瘰疠、口臭。它的籽，即桂花籽，味甘、辛，性温，能暖胃、平肝、益肾、散寒、止哕，桂花和桂籽煎汤泡茶，或浸酒内服，有化痰生津、暖胃平肝的功效。桂树的枝叶，煎浓汁温敷患部，能治风湿骨痛［２］。本文对桂花总黄酮的提取进行了研究，旨在为其广泛应用提供科学依据。
关键词：桂花；黄酮类化合物；测定
中图分类号：ＴＳ２０１．１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００５－９９８９（２００７）０４－０１７８－０３
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｓｗｅｅｔ－ｓｃｅｎｔｅｄｏｓｍａｎｔｈｕｓ
表４料液比对浸提的影响
料液比１：１０１：２０１：３０１：４０１：５０１：６０１：７０１：８０
（ｇ／ｍＬ）总黄酮含量（％）０．０８８２０．１９５２０．４５７８０．５６４１０．５２６３０．５４１２０．５６８２０．６１１２
从表４可知：随着料液比的增加，提取量出现了
Ａ
Ｂ
Ｃ
Ｄ
１
４０
１∶２０
２
５０
２
６０
１∶４０
３
７０
３
８０
１∶６０
４
９０
比较４因素中Ｒ值的大小，可以看出Ｃ因素，即浸提时间为最重要因素；其次为Ｂ因素，即料液比；再其次为Ｄ因素，即浸提温度；而Ａ因素，即乙醇浓度为不重要因素。同时乙醇浓度、浸提时间、料液比、浸提温度四因素对黄酮提取量影响的主次顺序为浸提时间＞料液比＞浸提温度＞乙醇浓度，并且最好的提取条件为乙醇浓度８０％、浸提时间３ｈ、固液比１∶４０、浸提温度７０℃，即Ａ３Ｂ２Ｃ３Ｄ２。
Ｎｏ．４．２００７１７９
分析检测
!!!!!!"
两个波峰０．５６４１％和０．６１１２％，尽管料液比为１∶８０时出
现的数值最大，但溶剂用量过大，不仅增加了溶剂
用量，也增加了浓缩回收溶剂的能耗，且增加了对
环境的污染［８］。因此从提取工艺角度出发，我们选择
料液比１∶４０以下作为考虑对象。
注：乙醇浓度为６０％。
从表５可知：３０℃到５０℃总黄酮含量有较大的增
长，但５０℃到９０℃增长速度变化不大，而８０℃时总黄
酮含量最大。这主要是由于黄酮在乙醇中的溶解度
随着温度的升高而增大，同时由于温度的升高，浸
提液黏度减少，扩散系数增加［９］，促进浸提速度加
表３提取时间对浸提的影响
浸提
时间（ｈ）１
１．５
２
２．５
３
３．５
总黄酮含量（％）０．０４７５０．１２６５０．３４７５０．４８３２０．５３２１０．５１７８
表３结果表明：当浸提时间为３ｈ时，浸提效果最好。当时间继续延长时，总黄酮含量反而降低。这可能是浸提时间太长，有部分乙醇被挥发而导致沸点逐渐增大，从而破坏某些黄酮类化合物［７］。同时考虑到实际生产应用中的生产周期和生产成本，故选用３ｈ为宜。２．３．３料液比对浸提的影响用６０％乙醇溶液对样品进行浸泡，对不同的料液比进行浸提试验，料液比（ｇ／ｍＬ）分别为１∶１０、１∶２０、１∶３０、１∶４０、１∶５０、１∶６０、１∶ ７０和１∶８０，浸提时间为３ｈ，结果见表４。
１实验部分
１．１材料、仪器及试剂１．１．１材料桂花：２００６年９月采于苏州光福镇。采摘的桂花在８０℃的温度下烘干，然后在常温下自然干燥，保存于干燥的环境中。使用时需要进一步粉碎。
收稿日期：２００６－１０－０２基金项目：江苏省高校自然科学研究计划项目（０５ＫＪＤ１５０１９５）。作者简介：蔡健（１９６２－），男，江苏常州人，教授，研究方向为食品及农产品加工技术。
芦丁标准吸光度与浓度的关系见表１。
表１芦丁标准吸光度与浓度的关系
ｘ（ｍＬ）
标准液０
１
２
４
６
８１０
吸光度（Ａ）００．０１２０．０２５０．０４７０．０８２０．１０７０．１２６
浓度Ｙ（ｇ／Ｌ）
０
０．００６３０．０１２６０．０２５２０．０３７８０．０５０４０．０６３２
根据表１结果用最小二乘法作线性回归，得芦丁浓度Ｙ与吸光度Ａ的关系曲线的回归方程式：
注：以上料液比为１∶３０（ｇ／ｍＬ）。
表２实验结果表明：随着乙醇浓度的提高，在５０％和９０％出现两个最高点，而在５０％￣９０％乙醇溶液浸提液萃取前后总黄酮含量相差不大。从实验过程中也可看出：３０％￣６０％乙醇溶液浸提液为棕黄色，７０％￣９０％的浸提液为绿色至墨绿色，可见７０％以上的乙醇把叶绿素也浸提出来了，而叶绿素等物质对紫外吸收有干扰，使测量结果偏高，会给提纯带来麻烦［６］，因此乙醇浓度确定在８０％以下。２．３．２浸提时间对浸取的影响在料液比１∶３０、乙醇溶液６０％的条件下，每隔０．５ｈ计算一次浸提液的总黄酮含量，结果见表３。
１７８Ｎｏ．４．２００７
分析检测
１．１．２仪器设备ＸＡ－１型高速万能粉碎机：江苏姜堰市银河实验仪器厂；分析天平：上海天平仪器厂；电热恒温水浴锅：上海医疗器械五厂；７２２－光栅分光光度计：上海第三分析仪器厂；１０１Ａ－２型数显电热鼓风干燥箱：上海浦东荣丰科学仪器有限公司。１．１．３试剂芦丁：中国医药（集团）上海化学试剂公司（生化试剂）；无水乙醇、ＮａＮＯ２、Ａｌ（ＮＯ３）３、ＮａＯＨ：Ａ．Ｒ；蒸馏水。１．２实验方法１．２．１黄酮含量的测定方法［３］采用亚硝酸钠－硝酸铝比色法，以芦丁为标样测定桂花中总黄酮含量。１．２．２标准工作曲线的绘制准确称取芦丁标准试剂０．０７８８ｇ，用３０％乙醇溶解，并完全移入２５０ｍＬ容量瓶中，用３０％乙醇定容。分别取上述芦丁标准溶液０、１ｍＬ、２ｍＬ、４ｍＬ、６ｍＬ、８ｍＬ、１０ｍＬ于７只５０ｍＬ容量瓶中，用３０％乙醇补充至２５ｍＬ，加入５％的ＮａＮＯ２１．４ｍＬ，摇匀，放置５ｍｉｎ后加入１０％的Ａｌ（ＮＯ３）３１．４ｍＬ，６ｍｉｎ后再加入４％的ＮａＯＨ１０ｍＬ，混匀，用３０％乙醇稀释至刻度，１０ｍｉｎ后于波长５００ｎｍ处比色测定，试剂为空白参比。在５００ｎｍ处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，芦丁对照品溶液的浓度为横坐标，绘制标准工作曲线［４］。１．２．３样品测定精确量取桂花样品溶液１．０ｍＬ，置于１０ｍＬ容量瓶中，按照１．２．２中标准工作曲线绘制的方法，自 “加入０．５ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＮａＮＯ２溶液”起依法测定吸光度，从标准工作曲线上查得桂花样品溶液中芦丁的浓度，作为总黄酮的浓度，再计算求得总黄酮的含量。