医学课件EB病毒感染的实验室诊断方法及合理运用

在罕见的病例中抗CA 抗体(IgM)会持续阳 性
20-30% 的EBV新近感染 抗 EA抗体（IgG）阴 性
抗EBNA抗体(IgG)阴 性
实验室指标四：EBV病毒核酸检 测
• Real-time PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法，可以指导治 疗和判断疗效，如PTLD/EBV-HLH/CAEBV等
N Engl J Med. 2010;362:1993-2000 World J Pediatr, 2011, 7(1): 45-49
实验室指标三: EBV特异性抗体
• EBV-CA-IgM 检测
1、近期EBV感染的指标，广泛应用于临床 2、EBV感染的血清学反应复杂多样，有的病例抗EBV-CA-IgM产生 延
• 荧光定量PCR检测EBV核酸 • EBERs原位杂交实验：EBV感染受累的组织学证据
特异性 指标
实验室指标一：嗜异凝集抗体
• 血清嗜异凝集抗体检测
也称“Monospot”试验，1932年引 入临床 实践诊断传染性单核细胞增多症
该为IgM抗体，在病程第1～2周出 现，持 续约6个月
在青少年原发性EBV感染中其阳性 率可达 80％-90％，约10％的青少年缺乏对嗜异性 抗体的阳性反应
• 肿瘤相关病毒，每年EBV相关 肿瘤死亡病例达15-20万
• 与很多疾病相关，几乎可引起 所有脏器和组织的相关疾病
• 细胞免疫非常重要
Khan G et al. Infectious Agents and Cancer, 2014, 9:38.
EB病毒持续感染示意图
• 原发感染后， EBV 在人体B淋巴细胞建 立潜伏感染，只表 达潜伏抗原，受感 染者成为终生病毒 携带者
• 样本：血样本（包括全血、单个核细胞、或血清/血浆），非鼻 咽拭子或鼻咽吸取液，不同疾病所需的适宜样本不同
注意：Real-time PCR阳性，只能提示机体存在活动性EBV感 染或 病毒活动性复制，不能鉴别是原发EBV感染还是既往EBV感染 再 激活，如淋巴瘤患者、免疫抑制患者、HIV感染者，因此，单 纯Real-time PCR阳性在IM诊断中价值有限
临床实践诊断EBV感染时需要回答的问题
• 是否感染EBV? • EBV感染的时相？ • 是否EBV活动性感染？ • 组织或器官中EBV感染的细胞定位如何？
EBV感染相关的实验室指标
• 血常规：淋巴细胞比例＞50%（学龄以上儿童）
• 嗜异凝集抗体 • 异型淋巴细胞
非特异 性指标
• EBV特异性抗体
儿童EBV感染诊治中存在的问题
• EBV实验室诊断方法的选择和结果解读 存在误区
• IM的抗病毒治疗较为混乱
• 重症EBV相关疾病（CAEBV、EBV-HLH） 等诊断和治疗缺乏经验
Epstein–Barr virus(EBV)
• 1964年发现，DNA病毒，疱疹 病毒
• 人群感染率高，终身潜伏感染， 具有感染-潜伏-活化的特性
EBV血清抗体阳性转化 率
1
0.8 百 0.6
CA-
分
IgG
率 0.4
NA-
IgG 0
.
2 0-
3m-1y 1y-3y 3y-6y 6y- ≥10
CAIgM
0 3m
ຫໍສະໝຸດ Baidu
10y
y
年龄
中华实验和临床病毒杂志，2008,22（1）：30-32
北京儿童医院资料
• 传染性单核细胞增多症（Infectious mononucleosis，IM） • 慢性活动性EB病毒感染（Chronic active EBV infection，CAEBV） • EB病毒相关性嗜血细胞综合征（EBV-associated hemophagocytic
小于12岁者，EBV感染IM患者该试 验的阳性率为25%-50%
J Appl Clin Pediatr, 2007,22(22) N Engl J Med. 2010;362:1993-2000
实验室指标二：异型淋巴细胞
• 外周血异型淋巴细胞比例≥10%
1、在西方国家，其诊断IM的敏感性为75%，特异性为92% 2、学龄前儿童异型淋巴细胞比例较低。外周血异型淋巴细胞 比例≥ 10%的病例在学龄前儿童EBV-IM中只有41.8%；对于较 大年龄儿童异型淋巴细胞的诊断意义更大
• EBV健康携带者咽 部不定时排毒
• 在机体免疫功能下 降和某些因素触发 下 ， 潜 伏 的 EBV 可 以被再激活，引起 病毒复制及临床症 状
Rev. Med. Virol. 2008; 18: 305–319
EBV感染的流行病学
• 在我国，EBV的原发感染的高峰年龄在儿童，10岁时 90%以上血清阳性转化
迟，有的持续缺失或长时间存在 3、12%-17%大于16岁的青少年原发EBV感染后不能检测到CA-IgM 抗
体，且4岁以下幼儿CA-IgM抗体水平低，持续时间短，易见假阴性 结果
Gao Li wei, et al. Chin J Evid Based Pediatr, 2011,6(6):467-470. Robertson P, J Med Virol, 2003,70(4): 617-623
syndrome, EBVAHS)
• 伴性淋巴增殖综合征 （X-linked lymphoproliferative syndrom） • 鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma） • Burkitt’s 淋巴瘤（Burkitt’s lymphoma） • 何奇金淋巴瘤（Hodgkin’s lymphoma） • 其他：脑炎，肾炎，间质性肺炎，肝炎，多发性硬化…
单份血清VCA-IgM在诊断 小年龄儿童原发性EBV感染IM的局限性
Pediatrics International (2010) 52, 536–540
原发EBV感染的体液免疫
• 原发性EBV感染过程中首先产 生针 对衣壳抗原（capsid antigen，CA） IgG和IgM（抗 CA-IgG/IgM）
• 在急性感染的晚期，抗早期抗原（ early angtigen，EA）抗体出现
• 在恢复期晚期，抗核抗原 （nuclear antigen，NA）抗体 产生 • 抗CA-IgG和抗NA-IgG可持续终身
不同时间段的抗体谱不同
JMD, 2008, 10(4):279-292
体液免疫的特殊情况
5% 的EBV新近感染 抗CA抗（IgM）阴 性