绞股蓝总皂苷提取分离及鉴别方法
绞股蓝总甙标准(卫生部颁标准)
绞股蓝总甙标准中华人民共和国卫生部WS3-Z-006-93(Z)部标准绞股蓝总甙Jiaogulan Zongdai本品为从葫芦科植物绞股蓝Gynostemme pentaphylium(Thunb.)Mak.全草中提取得到的总甙经精制而成。
〔性状〕本品为浅黄色粉末;气微,味微苦、甘。
在水及甲醇中易溶;在乙醚、氯仿中几乎不溶,在石油醚中不溶。
〔鉴别〕取本品加甲醇溶解,制成每1ml含10mg的溶液,作为供试品溶液;另取绞股蓝皂甙-A对照品,加甲醇溶解,制成每1ml 含1mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典1990年版一部附录57页)试验,吸取供试品溶液及对照品溶液各2Ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开12cm,取出,挥尽残存溶剂,喷以10%硫酸乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰,在日光下及紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
〔检查〕干燥失重取本品适量,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过5%(中国药典1990年版一部附录31页)。
炽灼残渣不得过1.5%(中国药典1990年版一部附录32页)。
〔含量测定〕对照品溶液的制备精密称取于60℃,减压2.67KPa以下干燥3小时的绞股蓝皂甙-A对照品适量,加甲醇溶解,制成每1ml含2mg的溶液。
供试品溶液的制备精密称取本品50mg,加甲醇溶解,制成每1ml含2mg的溶液。
测定法精密吸取对照品溶液及供试品溶液各100ul,分别置15ml具塞试管中,精密加入新鲜配制的含5%香草醛冰醋酸溶液与高氯酸(2.8V/V)的混合液2ml,摇匀,密塞,置60℃水浴中加热15分钟,取出,立即放入冰水中冷却2分钟,精密加入冰醋酸10ml,摇匀,以试剂作空白,照分光光度法(中国药典1990年版一部附录51页)试验,于555±5nm波长处测定吸收度,计算,即得。
绞股蓝总皂甙(UV)
编号:FZD0157 绞股蓝提取物中总皂甙(Total Gypenoside)含量测定方法一、试剂
5%香草醛溶液:称取香草醛5.0g加冰醋酸溶解定容至100mL。
此溶液需临用新制。
二、溶液制备
对照品溶液:精密称取约20mg绞股蓝皂甙A对照品(自制)于50ml容量瓶中,用甲醇溶解定容。
样品溶液:精密称取约25mg绞股蓝提取物于50ml容量瓶中,加约30ml甲醇超声20min溶解,放至室温后以甲醇定容,过滤取续滤液。
三、样品测定与结果计算
分别精密吸取0.2ml、0.4ml、0.6ml对照品溶液、0.5ml样品溶液0.5ml甲醇于10ml具塞试管中,真空加热挥干溶剂,精密加入0.2ml 5%香草醛溶液,0.8ml高氯酸,混匀后于60℃水浴中加热15min,取出并立即放入冰水中冷却2min,随后加入冰醋酸溶液10ml,摇匀,待气泡消失后以试剂空白液(甲醇管)为参比,于550nm测吸光度。
以对照品管中皂甙绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线,由工作曲线计算样品管中皂甙绝对量(mg)。
绞股蓝总皂甙含量(%) =(C×50)/(W×0.5)×100%
式中:C为由工作曲线计算的样品管绝对量;W为样品称样量(mg)。
注:除甲醇外,其余均需平行显色两份。
绞股蓝皂苷的提取原理
绞股蓝皂苷的提取原理
绞股蓝皂苷是一种从绞股蓝根部提取出来的有效成分,具有抗炎、镇痛、抗菌等多种药理作用。
其提取原理主要包括以下几个步骤:
1. 原料准备:采集绞股蓝的根部,并鲜切、晒干等处理,使其达到适合提取的状态。
2. 研磨粉碎:将处理好的绞股蓝根部研磨成细粉,增加提取效率。
3. 固液提取:将绞股蓝根部粉末与适量的溶剂(如水、醇等)混合,并进行搅拌、浸泡等操作,使绞股蓝根部中的绞股蓝皂苷与溶剂发生充分的物质交换,使其溶解于溶剂中。
4. 滤液分离:将混合物进行过滤,分离出液相和固相。
液相中含有溶解的绞股蓝皂苷,固相中则是未溶解的植物残渣等。
5. 溶剂回收:通过蒸馏等方法将提取液中的溶剂进行回收,以减少生产成本和环境污染,并将溶剂用于后续的提取工序。
6. 结晶分离:通过控制温度、浓度等条件,使绞股蓝皂苷结晶沉淀,再通过离心、过滤等操作将结晶物与溶液分离。
7. 干燥收集:将结晶分离得到的绞股蓝皂苷进行干燥处理,使其得到固态的绞股蓝皂苷产品。
绞股蓝皂苷的提取原理基于物质的溶解性与物质之间的分配平衡,通过合理选择溶剂、控制条件等因素,使绞股蓝根部中的绞股蓝皂苷释放并溶解于溶剂中,最终得到纯净的绞股蓝皂苷产品。
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关于绞股蓝总皂苷提取工艺研究【摘要】目的研究绞股蓝总皂苷的提取工艺。
方法采用正交试验设计法,以绞股蓝总皂苷提取量为考察指标,对影响绞股蓝总皂苷提取工艺的因素进行了优选。
结果提取时间、提取次数对提取效果有显著影响,乙醇用量的影响不显著。
结论绞股蓝总皂苷的最佳提取工艺为:药材加8 倍量70%的乙醇,回流提取3 次,每次2 h。
【关键词】绞股蓝总皂苷;提取工艺;正交设计Abstract:Objective To study the extraction techniques of total saponin in Gynostemma.Method According to the total saponin extracting rate, the extracting techniques wereoptimized by orthogonal design. Results The factors that extracting time and extracting timeshave significant effect on total saponin extraction, and the amount of alcohol solution hasinsignificant effect on it. Conclusion The optimal extracting techniques were A1B3C3, refluxing extraction for 3 times with 8 fold 70% ethand, 2 hours for each time.Key words:Gynostemma total saponin;extracting techniques;orthogonal design绞股蓝(Gynostemma)为葫芦科绞股蓝属多年生蔓生草本植物,主要含有皂苷、黄酮、多糖,还含有人体必须的多种氨基酸、维生素和微量元素等成分。
绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别
绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别(设计性实验)绞股蓝为葫芦科植物Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)干燥全草,又名七叶胆。
从绞股蓝中分得皂苷已达80余种,其中七种与人参皂苷完全相同,故绞股蓝又有“南方人参”的美誉。
绞股蓝总皂苷是绞股蓝全草中有效成分,具有降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗衰老、保护肝脏及增强机体免疫功能等作用。
主要药理实验证明绞股蓝总皂苷对肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用。
对人体有滋补、镇静、催眠、促食欲、降血脂、降胆固醇、降转氨酶、延缓衰老等作用。
一、实验目的:1.掌握D-101大孔吸附树脂分离纯化绞股蓝总皂苷的原理和实验操作方法;2.掌握查阅文献资料的方法和思路;3.熟悉皂苷类成分的性质及鉴别方法。
二、仪器与试药:(一)仪器D-101大孔吸附树脂玻璃层析柱(2.0ⅹ50)圆底烧瓶(1000mL)SHB-循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱烧杯空气回流管移液管(10mL、5mL)锥形瓶(100mL)硅胶G(薄层层析用)滤纸研钵球形冷凝管(二)试药绞股蓝药材乙醇蒸馏水盐酸氢氧化钠等三、实验原理:大孔吸附树脂(Macfofeticulaf Resin)是六十年代末发展起来的一类有机高聚物吸附剂,它具有多孔网状结构和较好的吸附性能,为白色的球状颗粒,粒度多为20~60目,通常分为非极性、弱极性、中极性和强极性等几大类。
目前常用的为苯乙烯型和丙烯腈型,在树脂合成时根据需要引人极性基团则成为极性树脂从而增强吸附能力。
它的理化性质稳定,不溶于酸、碱及有机溶剂。
对有机物的选择性较好,不受无机盐类及强离子低分子化合物存在的影响,在天然化合物的分离和富集工作中被广泛应用。
大孔吸附树脂为吸附和筛选原理相结合的分离材料。
它的吸附性是由于范德华引力或生成氢键的结果。
分子筛原理是由于其本身多孔性结构所决定。
由于吸附和分子筛原理,有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小,在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而分开。
中草药绞股蓝中绞股蓝皂苷分离提取的研究
中草药绞股蓝中绞股蓝皂苷分离提取的研究本论文主要对中草药绞股蓝中绞股蓝皂苷的提取、分离和纯化进行了研究,在研究中采用醇提法提取,树脂法进行初步分离纯化,再经硅胶柱层析法进一步分离纯化。
通过实验确定了醇提法的最佳提取工艺条件为:料液比为1:12,乙醇溶液浓度为70%,浸提温度为40℃,浸提次数为3次。
通过对树脂法分离纯化绞股蓝皂苷的研究表明:D-280阴离子交换树脂对绞股蓝总皂苷具有较好的脱色效果,脱色后皂苷的损失量平均为0.58mg/mL。
AB-8大孔吸附树脂对绞股蓝皂苷的吸附量在充分吸附的情况下为37.47mg/mL,吸附后经75%的乙醇洗脱,洗脱率为90.07%。
分别选用了 20%、45%、75%和90%的乙醇进行洗脱,45%的乙醇可将绞股蓝总皂苷初步分成两部分。
绞股蓝皂苷粗品经脱脂、D-280脱色、AB-8脱糖纯化后的绞股蓝总皂苷得率为5.09%,皂苷含量为88.64%。
硅胶柱层析实验表明;硅胶柱层析法可对绞股蓝皂苷实现较好的分离作用。
本实验中经硅胶柱层析共获得三种组分分别为:Gyp2、Gyp3、Gyp4。
经HPLC检测Gyp2纯度为42.68%、Gyp3纯度为67.92%、Gyp4纯度为68.29%。
并对Gyp2和Gyp3进行了二次分离纯化,纯化后的纯度分别为Gyp2-2纯度为74.38%、Gyp3-2纯度为78.72%,较初次硅胶柱分离纯化纯度分别提高了 31.70%和10.80%。
绞股蓝皂苷的提取
绞 股蓝 ( G y n o s t e m m a p e n t a p h y l l u m ) , 葫芦科 绞股蓝属 , 多年生 草本 植物 , 在长江 以南的地 区均 有分布 , 野 生资源丰 富 , 绞股蓝 中含有 独特 的生物活性 物质 , 其 主要有 效成分 为皂 苷 、 黄酮类 物质 、 多糖 以及多种 氨 基酸和微 量元素 。绞 股蓝的 医疗价 值已有研究 报道 , 在 临床上可用 作 防癌药物 , 并 对 白细胞减 少症 、 高血 脂症及 胃溃 疡 、 肝炎等 均有确切 疗效, 绞 股蓝 的保健 价值也 已通过 多种保健 产品进 入市 场。 医药品 、 酒、 茶 等形式 中 , 部 分产 品需 要 以经浸提 获得 的绞股蓝皂 苷来加 以应
选。 ( 2 ) 正交设计法
绞股 蓝皂 苷 ( G y p e n o s i d e ) , 分 子式 为 C H O , , 分 子量 为 1 0 4 7 . 2 3 。 绞股 蓝皂 苷可以有效的调节生理机能 、 增强 肌体 免疫力 、 清除激素类药 物 副作用 、 抗癌、 抗疲劳 、 抗缺氧 、 抗热 、 抗衰 老、 促进 细胞新陈代谢等作 用, 是 目前 医药及保健 品行业需求较 大的原料 。绞 股蓝总皂 苷片作为 药 品 已经上 市多年 , 用 于治高脂血 、 心悸气短 、 胸 闷肢麻 、 眩晕 头痛 、 健 忘耳 鸣、 自汗乏力 、 痰阻血瘀 。 本实验 以绞股蓝 为原料 , 设置浸 提温度 、 浸提 时间 、 浸提溶 剂量 3 个 因素 , 采用单 因素实验法 和正交 实验设 计 , 研究绞股蓝皂苷的提取工 艺。 2 、 材料与方法 2 . 1材料 ( 1 ) 精选 绞股蓝干样( 广东 ) , 规格 3 ( 包。 ( 2 ) 香兰 素冰醋 酸溶液 ( 新配置 , 称取 5 g 香兰素 , 加冰醋 酸溶解并
绞股蓝皂苷提取方法的研究现状
绞股蓝皂苷提取方法的研究现状【摘要】绞股蓝为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物,以全草药食两用,含有皂苷、黄酮、多糖等成分。
其中皂苷为主要的药用成分之一,具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血脂、降血压、增强免疫力等作用。
本文对近年来有关皂苷的提取方法作以综述。
【关键词】绞股蓝;绞股蓝皂苷;提取方法绞股蓝Gyrtostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino为葫芦科绞股蓝属多年生攀缘草质藤本植物,又名七叶胆、公罗锅底。
绞股蓝以全草供药食兼用,味苦、性寒,具有清热解毒、补气、止咳、祛痰之功效[1]。
近期的研究表明,绞股蓝具有抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老、调节脂质代谢、降低过氧化脂质、镇静、催眠、镇痛、防治老年性白发等作用[2]。
绞股蓝中含有皂苷类、黄酮类、氨基酸、糖、微量元素等成分[3]。
其中皂苷为主要的药用成分之一,在药品和保健食品中有广阔的应用前景,为便于查阅、分析和研究目前有关绞股蓝总皂苷的实验资料,对其提取方法进行以下综述。
1.溶剂提取法溶剂提取法是实际工作中应用最普遍的方法,它是根据被提取成分的溶解性能,选用合适的溶剂和方法来提取。
其作用原理是溶剂穿透入药材粉末的细胞膜,溶解溶质,形成细胞内外溶质浓度差,将溶质渗出细胞膜,达到提取目的[4]。
1.1 水提取水浸提法有方法简单、成本低、安全无污染等特点。
林硕等[5]通过实验确定水提取的最佳提取工艺为:料液比1:35,温度85℃,时间90min。
在此最佳条件下绞股蓝皂苷平均提取得率为7.7943%,提取纯度为26.8522%,各提取得率相对标准差RSD为1.2099%。
皂苷提取率与纯度较高,提取工艺稳定,符合工业化生产要求。
1.2 乙醇提取董玉睿[6]采用正交试验设计法,以绞股蓝总皂苷提取量为考察指标,对影响绞股蓝总皂苷提取工艺的因素进行了优选。
结果表明:提取时间、提取次数对提取效果有显著影响,乙醇用量的影响不显著。
确定绞股蓝总皂苷的最佳提取工艺为:药材加8倍量70%的乙醇,回流提取3次,每次2h。
提取绞股蓝皂苷实验方案
一、原位凝胶的制备:(基于壳聚糖的纳米凝胶口服药物输送载体的构建及其透黏膜机理的研究-冯超)直接购买CMCS,CS/CMCS 纳米凝胶(CS/CMCS-NGs)的制备:聚电解质凝聚法配制浓度为 3 mg/mL 的 CS 稀醋酸溶液中,其中醋酸溶液的浓度为 1 %(v/v),调节 pH 至 6.0,将一定浓度的 TPP水溶液滴加到上述溶液中,室温搅拌 30 min,将一定浓度的 CMCS 水溶液滴入到 CS-TPP 混合液中,室温搅拌30 min,得到 CS/CMCS-NGs。
(TPP:三聚磷酸钠)二、绞股蓝皂苷的提取(华南理工大学硕士学位论文《绞股蓝皂苷的提取、分离纯化及抗氧化作用的研究》洪秀云)1、绞股蓝皂苷提取※有机溶剂提取法空白对照组:常规水提法作为对照组,称取1.000g绞股蓝干叶粉末,以料液比1∶25于80℃加热浸提120min,离心取上清液,(按照2.3.2的方法)测定吸光值,计算总皂苷提取率。
试验组:在水提法的基础上,加入纤维素酶,提取绞股蓝皂苷。
2、绞股蓝皂苷含量、提取率测定的计算公式:(1)、绞股蓝总皂苷含量的测定:分别吸取100μL(V1)样液置于10 mL试管中,按上述方法测其吸光值A,代入回归方程可得所测样液绞股蓝总皂苷的含量C。
再根据公式2-1计算各部分样液的绞股蓝总皂苷含量M1。
(2)、绞股蓝皂苷提取率的测定乙醇提取的单因素实验和正交试验三、绞股蓝皂苷的分离纯化(华南理工大学硕士学位论文《绞股蓝皂苷的提取、分离纯化及抗氧化作用的研究》洪秀云)※D101大孔吸附树脂纯化绞股蓝皂苷1、树脂的预处理方法:足量的D101 大孔吸附树脂用80 %乙醇浸泡溶胀24 h 后,用80 %乙醇反复清洗数次,再用蒸馏水洗涤至无醇味,于 4 ℃冰箱中保存备用。
2、上样浓度的确定:精确称取湿态大孔树脂每份各20 g(等于干重 5.5 g),加入适量水填柱(17 mm×200mm)后,待树脂沉底后,测柱体积(约22 mL)。
绞股蓝中几种人参皂苷的提取分离和检识的实验教学设计
教育研究绞股蓝为葫芦科植物绞股蓝Gynostemma pentapHylla(Thunb.)Makjno 的根茎或全草,中药名为七叶胆〕在怀化市及周边地区广有分布[1]。
全草有消炎解毒、止咳祛痰功能,用于治疗慢性支气管炎、病毒性肝炎、糖尿病肾病等[2-4]。
全草含甾醇、糖类、色素及皂苷等成分,皂苷含量约3%,1976年至今分离出了201种绞股蓝皂苷,其中不少与人参皂苷骨架相同,药理实验表明绞股蓝皂苷具有类似人参的增强免疫力及抗肿瘤[5]、调节血脂和降血糖[6-7]等作用,且过量服用不会引起副作用,因而引起了广泛的关注。
绞股蓝皂苷在工业上已经提取较多,广泛应用于食品、饮料、药品中。
在抗衰老、抗疲劳、促进细胞新陈代谢、强壮补益,调理神经等方面有较好效果。
绞股蓝皂苷主要为四环三萜的达玛烷型结构,其中6种与人参皂苷相同,绞股蓝皂苷3、4、8、12分别与人参皂苷Rb1、Rb3、Rd、Rf 在化学结构上完全相同,绞股蓝皂苷分子中含有糖链,其极性强,有较好的水溶性。
在我校药学本科专业天然药物化学实验教学中把其选作三萜及其苷这一章的实验教学内容具有一定的代表性。
一、实验目的与原理1.实验目的(1)掌握皂苷的提取方法。
(2)熟悉大孔吸附树脂法纯化绞股蓝皂苷的操作技术。
(3)熟悉皂苷及其制剂的鉴定方法。
2.基本原理绞股蓝总皂苷有较好的水溶性,可用水为提取溶剂,因为绞股蓝皂苷分子中含有非极性部分三萜母核,故可使其在非极性大孔树脂上能较好地被吸附,相反,极性较大的成分如糖类则在非极性大孔树脂上难以吸附,因而选用非极性大孔吸附树脂D101型,可将绞股蓝水提物中的总皂苷与糖类等水溶性成分较好地分离,最后用活性炭脱色,从而达到分离纯化的目的。
二、仪器与试剂1.仪器250ml 的圆底烧瓶和与之配套的冷凝管、层析柱、分液漏斗、两孔恒温水浴锅、旋转蒸发仪、烘箱、10*20cm 硅胶层析板(使用前于110℃烘箱中活化30min)、层析缸、点样毛细管、电吹风、紫外分析仪、滤纸等。
绞股蓝总皂苷及其制备方法[发明专利]
专利名称:绞股蓝总皂苷及其制备方法专利类型:发明专利
发明人:胡义扬,冯琴,彭景华,田华捷申请号:CN201610106326.1
申请日:20160226
公开号:CN107126452A
公开日:
20170905
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及一种绞股蓝总皂苷及其制备方法。
属中药领域,涉及中药有效部位及其提取、纯化及精制方法,具体指一种从绞股蓝全草原料中提取精制绞股蓝皂苷及其制备方法。
本发明将绞股蓝药材置于回流提取器中用高浓度乙醇进行回流提取,滤过,除醇得无醇滤液,滤液用大孔树脂进行吸附洗脱,洗脱液分别为水,低浓度碱,低浓度醇和高浓度醇,逐步洗脱后,得各洗脱液,保留高浓度醇洗脱液,浓缩蒸干,即得绞股蓝总皂苷。
制得的绞股蓝总皂采用紫外分光光度法测定其中的总皂苷含量以绞股蓝皂苷A计,含量为92%~94%。
本发明方法效率高,步骤简化,周期短,成本低,适用于工业化生产。
申请人:上海中医药大学附属曙光医院
地址:200021 上海市黄浦区普安路185号
国籍:CN
代理机构:上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:吴桂琴
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黔产绞股蓝中总皂苷含量测定方法研究
The study of total saponin content in Gynostem ma pentaphylluan f ive—leave Gynostemma pentaphyllum.The extraction ef i cient of total saponins showed that 75% ethanol
ultrasonic extraction > M ethanol ultrasonic extraction > N —butyl alcohol ultrasonic extraction .
saponin at wavelengths of 546 nm .【Results】:The method had a good precision, stability,repeatability and recovery.The order of total sapoinin by different methods all showed that zunyi(seven leave) > zunyi(five—leave) > guiyang(f ive leave),and seven—leave Gynostemmapentaphyllum contents was as high as 7.83%,signif icantly
摘 要 :目的 :以黔产绞股 蓝为研究对象 ,筛选 出适宜 的绞股蓝总皂苷的提取方法 以及 测定方法 ,为绞股 蓝相 关产 品的开 发研究提供质量 控制依据 。方法 :采用紫外 一可见分光光度法 ,以人参皂苷 Re为对照 品,于 波长 546nm 处对黔产 绞股 蓝总皂苷 吸光度 进行测定 。结果 :所建 立绞股蓝总皂 苷含量测定方法有 良好的精密 度 、稳定性 、重现性和 回收率 ;不 同制样方法测定的黔产绞股蓝总皂苷含量均呈现出遵 义 (七叶)>遵义 (五 叶) >贵 阳 (五叶 )规律 ,且七 叶绞股 蓝均 明显高于五 叶绞股蓝 ,含 量高达 7.83% ;绞股蓝 总皂苷 的提 取效 果 呈现出 75% 乙醇超声提取法 > 甲醇超声提取法 >正丁醇超声提取法趋 势 ,且提取效果 显著 。结论 :黔产绞 股蓝 总皂苷的提取 效果以 75% 乙醇超声提取法 最佳 ,所建立 的提 取工艺可作为 绞股 蓝总皂苷质量控 制的有效 方 法 。
绞股蓝总皂苷中单体皂苷的分离纯化
绞股蓝总皂苷中单体皂苷的分离纯化孔玉琼;金凤燮;鱼红闪【摘要】The total gypenoside was separated and purified by silica gel column. Chloroform and methanol were used as mobile phase in gradient elution, the sample was determined by TLC. 7.87 g total saponin was obtained from 5000 g Gynostemma pentaphyllum by the process of extracted with alcohol, defatted with ligarine, leached with normal butanol, desugared with AB-8 macro porous resin, decolored with D-296 anion ion exchange resin. Three kinds of gypenoside monomer were obtained from 5 g total gypenoside by the proportion in 9.5∶0.5 and 9∶1 chloroform and methanol as mobile phase. The yields were 2.6%, 3.0%, 5.2% and the purity was up to 88. 73%, 93.11%,78.54% respectively. The result indicated that the silica gel column is a good separation function to gypenoside.%采用硅胶柱层析法分离绞股蓝总皂苷,以氯仿-甲醇混合液为流动相进行梯度洗脱,薄层层析法跟踪检测.5 000 g绞股蓝干草经乙醇提、石油醚脱脂、正丁醇萃取、AB-8大孔吸附树脂脱糖、D-296阴离子交换树脂脱色后得到总皂苷7.87 g.5 g绞股蓝总皂苷进行硅胶柱层析分离,在体积比为9.5:0.5和9:1的氯仿-甲醇洗脱液洗脱下得到3种较纯的绞股蓝皂苷的单体组分,得率分别为2.6%、3.0%和5.2%.经高效液相色谱检测其纯度,组分A、B、C纯度分别为88.73%、93.11%和78.54%.3种皂苷较粗品纯度得到很大提高,且洗脱液比例和体积的确定为大量制备这3种绞股蓝单体皂苷提供了理论依据.【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷),期】2011(030)003【总页数】4页(P173-176)【关键词】绞股蓝皂苷;硅胶柱层析;高效液相色谱【作者】孔玉琼;金凤燮;鱼红闪【作者单位】大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,116034【正文语种】中文【中图分类】TS218;Q556.20 引言绞股蓝中含有绞股蓝皂苷、氨基酸、蛋白质、脂肪、黄酮类、糖类、无机元素、纤维素和维生素等多种化学成分,其中以绞股蓝皂苷为主要的药理活性成分。
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绞股蓝总皂苷提取分离及鉴别方法
该药是从植物中提取出来的,为七叶树科植物天师栗(Aesculus Wilsonii Rehd.)的干燥成熟果实(娑罗子)提取物得到的皂苷钠盐,是天然植物药,呈白色粉末或结晶性粉末,味苦涩而辣,具引湿性,符合未来用药趋势,
注射用七叶皂苷钠有什么药理作用?
①抗炎作用。
七叶皂苷可消退由卵白蛋白,福尔马林和葡聚糖诱导的大鼠爪肿胀。
V ogel 等注意到七叶皂苷对正常大鼠有促进钠排泄作用,但排钾维持正常水平,注射七叶皂苷后,立即显示利尿作用。
对于七叶皂苷抗炎作用的机理,一些学者认为抗炎作用在于能使炎症刺激剂所致的炎症初期的毛细血管通透性增大变为正常。
另一些学者认为皮质甾类化合物的正常分泌是七叶皂苷抗炎作用所必要。
②消肿胀作用。
七叶皂苷对大鼠脑水肿有保护作用;Siering证实七叶皂苷的抗肿胀作用与改善细胞通透性有关。
Mussgnug认为七叶皂苷抗水肿作用机理为:(1)表面张力活性;(2)提高红细胞与水结合的能力,随着边缘血浆流量提高,产生代谢被动钠泵的依赖;(3)使细胞内、外流体交换正常;(4)在结缔组织和细胞膜上有直接作用的位点。
③抗渗出作用。
七叶皂苷对大鼠巴豆油急性渗出和磷酸组织胺引起的小鼠毛细血管通透性增大具有显著的抑制作用,其强度分别约为氢化可的松的7倍和8倍;并能对抗紫外红斑渗出及缓激肽所致家兔后肢淋巴通透性增加。
④促皮质甾酮作用。
七叶皂苷能促进肾上腺皮质分泌皮质醇,抑制组胺所致的毛细血管通透性增加,增加前列腺素F2,减少前列腺素E1的释放量,阻滞细胞的胞苷二磷酸酯的作用,并延缓Na+交换,从而具有抗炎,抗渗出活性,提高静脉张力。
⑤抗自由基作用。
提高血浆过氧化物歧化酶活性,使抗自由基活性增强。
回答者:drinkyle
方法:分别采用无水乙醇回流提取、无水乙醇回流-正丁醇萃取、体积分数为70%乙醇回流提取、体积分数为70%乙醇回流提取-正丁醇萃取、水提取、超声波提取和超临界CO2提取方法,以人参皂苷Re作对照品,比色法测定提取液中山茱萸总皂苷的含量。
结果及结论:不同提取方法对皂苷含量有较大的影响,超临界CO2提取技术无溶剂残留,操作温度低,对环境友好,提取效率高,皂苷含量是传统溶剂提取的1.5~2.0倍,有较好的应用前景
可以采用D101大孔吸附树脂用于提取人参皂甙的分离工艺。
现生产工艺已成熟完善。
1、人参提取物回收乙醇后加水溶解通经预处理的吸附柱,先用水洗脱除尽游离糖等非皂甙极性成分,以60%乙醇洗脱下总皂甙,残留于柱层析上的非极性成分则用工业乙醇洗净。
树脂可再生重复使用。
总皂甙再通过一次吸附树脂即得以精制。
2、在PH<6.5,西洋参总皂甙的水解反应随溶液酸度的增大而加快。
在PH6.5~9.00,水溶液中西洋参总皂甙几乎不水解而稳定存在。
据此,人参皂甙水提液可调PH值至9上柱,将有利于极化色素等难溶于水的杂质不被吸附而被分离。
但需注意采碱性溶液上柱,吸附后需强化水洗(最好仅冲一次),彻底将树脂层碱液洗净,不留死角,否则将会影响最终产品质量。