10~23脱氧核酶沉默Survivin基因表达诱导人肝癌细胞的凋亡

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survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞可诱导caspase-3活化

survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞可诱导caspase-3活化

survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞可诱导caspase-3活化王颖;吴亮;王家(马龙)【期刊名称】《中西医结合肝病杂志》【年(卷),期】2007(17)3【摘要】目的:观察survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide, AS ODN)诱导肝癌细胞凋亡的可能途径.方法:培养survivin表达阳性的肝癌细胞株SMMC-7721.设计合成特异性靶向survivin的反义寡核苷酸.将SMMC-7721细胞接种于6孔培养板内,分为6组:①空白对照组;②脂质体转染对照组;③正义链转染对照组;④200nmol/L AS ODN转染组;⑤400nmol/L AS ODN转染组;⑥600nmol/L AS ODN转染组.作用20小时后收获各组细胞,并进行后续实验:①倒置显微镜下观察细胞形态变化;②western blot法检测各组细胞survivin蛋白的表达情况;③流式细胞术检测细胞增殖和凋亡指数;④比色法检测各组细胞caspase-3的活性变化.结果: ①AS ODN转染组细胞survivin表达减弱,以600nmol/L转染组最为明显,各对照组survivin蛋白表达无明显改变;②AS ODN转染组细胞形态出现变圆、折光增强、漂浮、细胞碎片形成等变化,而各对照组细胞生长良好;③各AS ODN转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组(P<0.05),以600nmol/L转染组最为明显,而各对照组间差异无显著性意义(P>0.05);④各AS ODN转染组细胞增殖指数明显低于各对照组(P<0.05),以600nmol/L转染组最为明显,而各对照组间差异无显著性意义;⑤在各AS ODN转染组中,可见到不同程度的caspase-3的活化,而对照组细胞内无明显的变化.结论: survivin AS ODN转染能下调survivin蛋白表达,诱导肝癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,其作用途径可能涉及抑制survivin表达,诱导caspase-3活化,启动凋亡信号传导.【总页数】3页(P151-153)【作者】王颖;吴亮;王家(马龙)【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科;华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.Survivin与Caspase-3在光动力诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡中的作用 [J], 汪胜林;张振玉2.survivin反义寡核苷酸激活caspase-3诱导SGC7901胃癌细胞凋亡的实验研究[J], 何金兰;孔庆兖3.LIGHT、IFN-γ基因转染人肝癌HepG2细胞凋亡及其Caspase-3和survivin表达 [J], 毕崇尧;吴力群;韩冰;卢云;吕振华;刘相萍4.Caspase-3在survivin反义寡核苷酸诱导人结肠癌细胞 HT29凋亡时的表达 [J], 靳秋月;陈立军;呼文亮5.单独及联合转染survivin和bcl-2反义寡核苷酸诱导胆囊癌细胞凋亡的研究 [J], 冯立民;王建立;乌新林;姜希宏;寿楠海因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

Survivin基因沉默对裸鼠人卵巢癌细胞移植瘤凋亡的影响

Survivin基因沉默对裸鼠人卵巢癌细胞移植瘤凋亡的影响

C mprdwt ot l ru s u l ddvc r n nrnfc dgop,h u a vr ncne e n K V o ae i cn o gop (no e —et du t s t ru) teh m noa a a crcll eS O 3 h r a oa a ee i li
【 关键词 】 卵巢肿瘤 ;基因沉默 ; 细胞凋亡 ;Srv uv i in
Ef c f u v vn g n i n i g o u a v r a a c r x n g a ta o t ssi u e mi e Z f to r i i e e sl cn n h m n o a i n c n e e o r f p p o i n d c HANG Ha -i . e s e n i a x
张海 霞 赵 宏伟
【 摘 要 】 目的 探讨 srv 基 因沉默对人卵巢癌细胞株 S O 3 鼠移植瘤凋亡的影响。方法 u in vi KV裸
将重
组 srii sR A pam d uvv h N ls i 转染人卵巢癌细胞株 S O 3细胞 ,通 过裸 鼠移植瘤实验 比较 sri n 因沉默对裸 n K V uv i 基 v
鼠移植瘤 的生 长抑制作用 , 荧光定 量聚合酶链 反应 (C ) P R 和蛋 白印迹法检测 与凋 亡密切相关 的 ct ho —、 y c r c o me
c sae aps一 csae3基因的表达 。 9和 ap s. 结果 裸 鼠移植瘤 实验显示 , 与对照组 ( 空载体组和未转染组 ) 比,uv i 相 sri n v sR A pami h N ls d转染组人卵巢癌细胞 株 S O 3细胞生长速 度减慢 , K V 肿瘤体积缩小( < .5 ; P 0 )荧光定量 P R和蛋 0 C 白印迹法结果都显示 , 与对照组 相比 , rinsR A pami s v i h N l d转染组 ct ho eccsae9和 csae3的表达 u v s y c rm —、ap s一 o aps一 明显升高( 00 ) 火 .5 。结论 sr v uv i i n基因沉 默可通过促进肿瘤细胞 的凋亡而抑制裸 鼠移植瘤生长。

Survivin基因沉默对脑胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的影响

Survivin基因沉默对脑胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的影响

Survivin基因沉默对脑胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的影响汪杰;刘补兴;童军卫;胡小铭【摘要】目的探讨Survivin基因沉默对脑胶质瘤细胞株C6体外细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响.方法设计并合成针对Survivin基因的siRNA,构建Survivin-shRNA和阴性对照shcontrol慢病毒表达载体并感染脑胶质瘤C6细胞,用Western Blot 法检测感染后C6细胞Survivin蛋白表达的抑制率,MTT法观察感染后24、48和72h细胞增殖的变化,流式细胞术检测感染后48 h细胞凋亡和细胞周期的改变.结果 Survivin shRNA慢病毒载体感染C6细胞后Survivin 蛋白的抑制率约为80%,阻滞C6细胞由G1期进入S期,抑制细胞的生长,增加了细胞的凋亡.结论 Survivin shRNA慢病毒表达质粒特异高效地抑胶质瘤C6细胞Survivin基因的表达,阻断C6细胞的细胞周期,抑制其增殖并促进凋亡.【期刊名称】《现代实用医学》【年(卷),期】2011(023)005【总页数】3页(P510-512)【关键词】脑肿瘤;细胞增殖;Survivin【作者】汪杰;刘补兴;童军卫;胡小铭【作者单位】317000,浙江省台州,台州医院;317000,浙江省台州,台州医院;317000,浙江省台州,台州医院;317000,浙江省台州,台州医院【正文语种】中文【中图分类】R730.264胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,手术治疗多无法根治,且对常规的化疗和放疗均不敏感,临床预后差。

有研究发现,Suvivin与胶质瘤的发生、病程进展及预后密切相关[1-2]。

因此有学者认为,Survivin的基因是脑胶质瘤治疗的潜在靶点[3-4]。

为探讨高效RNAi沉默脑胶质瘤C6细胞Survivin基因的表达,笔者构建了Survivin特异性RNAi慢病毒表达载体,感染人胶质瘤C6细胞株,观察Survivin蛋白表达水平及对C6细胞增殖和凋亡的影响,为脑胶质瘤的基因治疗提供有用的实验依据。

Survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对化疗药物的增敏作用

Survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对化疗药物的增敏作用

E e t fa t e s l o e x n cet e( ODN)o u vvn g n n id c g a o ts n h moh rp f c o ni n eoi d o y u loi AS s g d f r ii e eo u i p poi a d c e tea y s n n s
维普资讯
医学信 息手术学 分册 20 0 8年 2月第 2 卷第 2期 1
Sri n反 义 寡 核 苷 酸 诱 导 胃癌 细胞 uv i v 凋 亡 及 对 化疗 药 物 的增 敏作 用
刘胜 , 双 秦
( 乡医学院第一附属 医院普外科 , 新 河南 卫辉 4 3 0 ) 5 10
3 . % 和单用顺 铂组 的 3 . % ( 84 3 6 P<0 0 ) . 1 。结论 能增加 MGC 0 8 3细 胞对 化疗药 物 的敏感性 。 关键词 : uvvn 反 义寡 核苷 酸 ; sri ; i 胃癌 细胞株 MG 8 3 化 疗 ; 感性 C0 ; 敏 中图分 类号 : 7 5 2 R 3 . 文献 标志 码 : A 文章编 号 :0 6—15 (0 8 0 0 3 0 10 9 9 2 0 )2— 17— 3 srii S D uvv A O N能 够抑 制 MG 8 3细胞 增 殖 、 导凋 亡 , n C0 诱 并
Po ic ,C ia rvn e hn )
Abta tObef e T x lr teefc o ni n eoi do yu l t e( S D sr c: jc v oepoe h f t f t es l o exn ce i i e a s g o d A O N)o uv i gn nte f ri n e eo s v h
s n i v t fGa t i a c r c l e st iy o s rc c n e el i

Survivin反义寡核苷酸诱导人胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡的研究

Survivin反义寡核苷酸诱导人胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡的研究

胞 裸 鼠移 植 瘤 生 长 的影 响 , 探 讨 其 诱 导 人 胃癌 移 植 瘤 凋 亡 的 分 子 生 物 学 机 制 。方 法 建 立 S 一 并 GC
70 9 1胃癌 细 胞 裸 鼠 皮 下 移 植 瘤 模 型 , 机 分 为 4 组 ,即 s rii AS 随 u vvn— 0DN+ 脂 质 体 组 、 u vvn— s r ii AS ODN 组 、 质 体 组 和 空 白对 照 组 ( 馏 水 ) 脂 蒸 。瘤 体 内 隔 日给 药 , 药后 4 停 8小 时 处 死 裸 鼠 , 离 瘤 组 剥
a l tmo p po i W ANG a be u ra o tss Ch o— q n,e a . u t 1
t e P. h R.Ch n ) ia
( z o e ia l g , z o Ja g u 2 1 0 Xu h uM dc l Col e Xu h u,in s 2 0 2, e
AO s DN+ 脂质 体 组 的 s ri n蛋 白表 达 量 明 显低 于对 照 组 ( uvv i P< 0 0 ) C sae 3 白表 达 高 于对 . 5 , aps 一 蛋
照组 ( P< 0 0 ) . 5 。结 论 s r ii 义 寡 核 苷 酸 转 染 胃癌 移 植 瘤 能 够 明 显 抑 制 肿 瘤 生 长 , 主要 机 制 与 uvvn反 其
齐 齐 哈 尔 医学 院学 报 2 1 0 2年 第 3 3卷第 1 O期
・ 12 5 6 ・
S r ii 义寡 核苷 酸诱 导人 胃癌 细胞 裸 鼠皮 下 uvvn反
移 植 瘤 细胞 凋 亡 的研 究
王超群 郑 茂 金 梁 栋 周 云
【 要】 目的 研 究 s r ii 摘 u vvn反 义 寡 核 苷 酸 ( n ie s l o e x n ce td , ODN) 人 胃癌 细 a t n e0i d o y u 10ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱe AS s g 对

survivin基因在化疗药物诱导的肺癌细胞凋亡中的作用

survivin基因在化疗药物诱导的肺癌细胞凋亡中的作用

survivin基因在化疗药物诱导的肺癌细胞凋亡中的作用王孝养;张珍祥;李西融【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2002(018)002【摘要】目的探讨survivin基因在化疗药物顺铂(DDP)和足叶乙苷(VP16)诱导的肺癌细胞凋亡中的作用.方法用肺腺癌A549细胞株进行培养传代,MTT试验检测DDP和VP16不同药物浓度对肺癌细胞生长的抑制作用,实验分为:DDP、VP16和对照组.DDP和VP16组的肺癌细胞又分为高浓度和低浓度化疗药物处理组.用逆转率PCR检测survivin基因的表达.同时利用流式细胞术定量检测细胞凋亡. 结果不同浓度VP16和 DDP对肺癌细胞生长均有明显的抑制作用,并有浓度和时间的依赖性.化疗药物组细胞凋亡率和survivin基因表达抑制率高于对照组,也有时间依赖性. 结论 survivin基因的抑制在DDP和VP16诱导肺癌细胞凋亡中起重要作用.【总页数】5页(P144-148)【作者】王孝养;张珍祥;李西融【作者单位】广西壮族自治区第二人民医院呼吸内科,桂林,541002;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸疾病研究室,武汉,430030;广西壮族自治区第二人民医院呼吸内科,桂林,541002【正文语种】中文【中图分类】R-332;R329.24;R329.25;R341;R394.2;R734.202;R【相关文献】1.survivin基因在化疗药物诱导的喉鳞癌Hep-2细胞凋亡中的作用 [J], 肖辉;金德均;王超;徐秀玉;李晓丹2.CyclinL2在化疗药物诱导肺癌细胞凋亡中的作用 [J], 高松源;尚晓斌;钱碧云;王伟;曹维志;孙保存;巴一;于振涛3.Survivin基因在顺铂诱导Tca8113舌鳞癌细胞凋亡中的作用 [J], 许建辉;黄洪章;潘朝斌;张彬;张磊涛4.Survivin基因表达在小剂量阿糖胞苷诱导白血病细胞凋亡中的作用 [J], 李中东;齐振华;刘巍;黄进5.Survivin基因在三氧化二砷诱导腺样囊性癌-M细胞凋亡中的作用 [J], 牟海滨;张斌;王晓峰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

凋亡抑制基因survivin表达载体的构建及其在HepG2中的表达

凋亡抑制基因survivin表达载体的构建及其在HepG2中的表达

凋亡抑制基因survivin表达载体的构建及其在HepG2中的表达成胜权;王文亮;晏伟【期刊名称】《第四军医大学学报》【年(卷),期】2004(25)5【摘要】目的:克隆细胞凋亡抑制蛋白Survivin(SVV)的编码序列,构建含SVV基因的真核细胞表达载体并在肝癌细胞系HepG2中表达,为进一步研究该基因在肝癌发病中的作用奠定基础. 方法:根据已发表的SVV基因的核苷酸序列设计并合成一对引物,以HL-60细胞系抽提的RNA为模板进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物用BamHI和XhoI双酶酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.0中,用限制性内切酶酶切重组质粒pcDNA3.0-SVV和DNA序列测定进行鉴定. 用脂质体法将pcDNA3.0-SVV导入肝癌细胞系HepG2中,G418选择培养,经免疫组化法和RT-PCR鉴定其表达. 结果:RT-PCR扩增出长445 bp的特异性片段,经克隆至pcDNA3.0后酶切鉴定证实,并测序表明序列与GenBank报道完全一致. pcDNA3.0-SVV在HepG2细胞中有稳定表达. 结论:成功克隆了SVV的编码序列,构建了其真核细胞表达载体pcDNA3.0-SVV,有助于对SVV基因在肝癌发生中的致瘤机制做进一步研究.【总页数】4页(P452-455)【作者】成胜权;王文亮;晏伟【作者单位】第四军医大学西京医院病理科,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院病理科,陕西,西安,710033【正文语种】中文【中图分类】R329.2【相关文献】1.凋亡抑制基因Survivin siRNA真核表达载体的构建 [J], 饶国洲;李昂;苟建重;牛洁;刘亚东;杨麦贵2.Nucleophosmin基因表达载体的构建及其在HepG2中的表达 [J], 李辉宇;罗飞;赵浩亮;贺杰峰;肖红3.pDsRED-LC3真核表达载体的构建及其在肝癌细胞系HepG2中的表达和定位[J], 彭琬昕;孙瑶湘;陈琛;金洁;邵根宝;王嫘4.survivin基因shRNA真核表达载体的构建及其对人胃癌细胞株中survivin表达的影响 [J], 陈敏;刁振宇;张松;邹晓平;徐肇敏;李运红5.HCV包膜糖蛋白基因真核表达载体的构建及其在HepG2中的瞬时表达 [J], 张建敏;姚敏;吕欣;黄小军;杨敬;雷迎峰;兰海云;汪爱勤;尹文因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

siRNA沉默Livin基因表达对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响的开题报告

siRNA沉默Livin基因表达对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响的开题报告

siRNA沉默Livin基因表达对肝癌细胞HepG2增殖
与凋亡的影响的开题报告
一、研究背景
肝癌是一种常见的恶性肿瘤,具有高度恶性、易转移、预后差等特点,是全球癌症致死率排名第三的癌症。

Livin是一种新发现的与肿瘤相关的抗凋亡基因,常在多种肿瘤中高表达,包括肝癌。

因此,研究Livin 基因的表达和调控对于肝癌的治疗具有重要意义。

二、研究目的
本研究旨在探讨siRNA沉默Livin基因表达对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响,为肝癌治疗提供实验基础。

三、研究方法
1.建立HepG2细胞中Livin表达的siRNA载体。

2.将siRNA载体转染到HepG2细胞中,并采用Western blot检测Livin蛋白表达水平。

3.采用细胞增殖实验和MTT法检测HepG2细胞的增殖率,比较沉默Livin基因表达组和对照组的增殖率差异。

4.采用流式细胞术检测HepG2细胞的细胞周期。

5.采用Annexin V-FITC/PI双染法检测HepG2细胞的细胞凋亡率。

四、预期结果
1.成功建立Livin基因的siRNA载体,成功将其转染到HepG2细胞中。

2.沉默Livin基因表达HepG2细胞的增殖率将明显低于对照组。

3.沉默Livin基因表达HepG2细胞的细胞周期会受到影响。

4.沉默Livin基因表达HepG2细胞的凋亡率较对照组明显升高。

五、意义与价值
1.为肝癌治疗提供实验基础。

2.对Livin基因在肝癌发生和发展中的作用有更深入的了解。

3.对siRNA靶向治疗肝癌提供了新思路。

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Bi y a p s 8 d b c s a e me i ts t e d a e h mi c o d a a g n t e a t h n f d ma e i h F s o i l
meie yT F—a h ndnt yFsl ad J .A P yil da db N l aa o b a i n [ ] mJ hs t p g o
有效抑制肝癌细胞的生长( 00 ) D T和 D T 在胞 内能有效地切割 S rinm N D T 比 D T的切割活性更 P< . 5 ; z zi uv i R A, zi v z
显 著 ; 光免 疫 法 测 的 DT和 D T 能显 著 的 下 调 Sri n蛋 白 水平 ( 00 ) 流式 细 胞 术 结 果 提 示 , z 荧 z zi uv i v P< .1 ; D T和 DT zi
4 6:8 5—8 2. 0 5 6

15・ 8
性 肝 衰竭 模 型 [] J .世 界华 人 消 化 杂 志 , 0 7 5 1 ) 4 2 0 ,1 (0 :11 1

Nau e, 2 0 tr 0 0,
l 4 1 5.
[] JSP 4 O E H SM D,B H A A J T FR,F K Z K U U U A K,e a.Lp p- t 1 i o o
R glner o hs l 20 28 ( ) 9 eu t mpP yi , 00, 7 5 :116—1 0 . I gC o 1 2
ptw yo ppoi[ ] n u R vCl D vBo,19 ,1 : a a f o t s J .A n e el e il 9 9 5 h a s
细胞 凋亡率明显升高出现凋亡峰 ( 0 0 ) DT和 D T 组细胞 出现细胞周期 阻滞 , P< .5 ; z zi 表现 为 G / 。 。G 细胞所 占比例 上升 , 期 细胞所 占比例 下降。结论 s
癌细胞凋亡。
脱氧核酶能有效沉默 S rinm N uv i R A表达 , v 抑制 S rin蛋 白表达和促进肝 uv i v
sni o sp ao ti at i [ ] e i ,2 0 ,13 et l ri m ppoc cvt J .JC l Bo 0 1 5 af t t i y l l
( ) 2 1— 2 . 1 : 2 27
a li[ ] a r, 0 0, 0 9 my d J .N t e 20 4 3: 8—13 o u 0.
杨 永光 ,李明意 ,赵 家明 ,刘丽娟 ,戴 东
广 东 医学 院 附属 医院 肝 胆 外科 ( 东 湛江 54 0 ) 广 2 0 1
【 摘要 】 目的 研 究脱氧核酶 沉默 Sri n表达 对人肝癌 B L一70 uvv i E 42细Srv uv i 因的“ O~ 3 型 脱氧 核 酶 及 其 类 似 物 ; 染肝 癌 细胞 ; T—P R检 测 脱 氧核 酶 细胞 内 S rinmR A 的 i n基 1 2” 转 R C uv i v N
[ ] N K G WAT, HUH, R S I e a.C psl e 8 A A A Z MO IHMA N, t 1 a ae2m ・ s
d ae n o l mi r t u u it s e d p a c ei l m s e i c p p o i a d yo o i i s c p c f a o t ss n c tt xc t i y
2 9—2 0. 6 9
[ 5] R B R S D L O E T ,ME R S N W,M C A AN e a.T e R 1O A F RL E M, t 1 h
ih b t ro p po i p o e n— b n ig d man o ma s n t e ・ n i i fa o t ss r t i - i d n o i f S c i o s o ・
( 收稿 日期 :0 8— 7—0 编 辑 : 华 ) 20 0 2 祝
[ 6] C A , U C, ,e a.S utr dboh mcl ai H I D WUJW t J 1 t cuea i e i s r n c ab s
1 2 3脱 氧 核酶 沉 默 uv i 因表 达 诱 导 O~ S ri n基 v 人 肝 癌 细胞 的凋 亡 术
广 东 医学
20 09年 2月 第 3 0卷 第 2期 Gn n d n dcl or a Fb 0 9, o.3 N .2 a  ̄ o gMeia u n l e .20 V 1 0, o J o ppo catai yS c D A L J faoti ci tn b ma/ I B O[ ] t v o
切 割 作 用 ;荧光 免 疫 法 测 定 脱 氧 核 酶 对 Srin蛋 白表 达 影 响 ; 式 细 胞 术 检 测 脱 氧核 酶 对 肝 癌 细胞 凋 亡 的 影 uv i v 流
响 。结 果 “O~ 3 型 脱 氧核 酶及 其 类 似 物 成功 转 染入 肝 癌 ; 修 饰 脱 氧核 酶 ( z ) 1 2” 非 D T 和修 饰 的脱 氧 核 酶 ( z i能 DT )
lsc hr ea d D —g l t a ie—id c d h p t nuy i ya c ai n d aa o sm n c n u e e ai ijr s c
[ ] B D H R J , LV RH, u ’E e a.Bohmcl f 7 U I A D O I O I E L 1 R M, t r 1 i e iao c
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