赛润ELISAclassic风疹病毒IgGIgM
风疹病毒抗体
风疹病毒抗体一、概述风疹病毒抗体是指人体对风疹病毒感染产生的免疫反应中产生的抗体。
风疹是一种由风疹病毒引起的急性呼吸道传染病,主要通过呼吸道飞沫传播。
风疹对孕妇的影响特别大,会导致流产、死胎、新生儿畸形等严重后果。
风疹病毒抗体的检测对于了解个体的风疹免疫状况,及时采取相应的防护和治疗措施至关重要。
二、风疹病毒抗体检测方法风疹病毒抗体检测主要包括风疹病毒特异性IgM抗体和IgG抗体的检测。
IgM 抗体是在感染初期产生的抗体,属于早期抗体;IgG抗体是在感染后一段时间内产生的抗体,属于晚期抗体。
通过检测患者的风疹病毒抗体水平,可以确定感染的时间点和阶段,为临床诊断和治疗提供重要参考。
1. 风疹病毒特异性IgM抗体检测风疹病毒特异性IgM抗体检测通过ELISA等方法进行。
阳性结果提示当前感染或近期感染,阴性结果则排除当前感染可能性。
2. 风疹病毒特异性IgG抗体检测风疹病毒特异性IgG抗体检测同样通过ELISA等方法进行。
阳性结果表示曾经感染或疫苗接种后产生免疫力,阴性结果则提示尚未感染或免疫力低下。
三、风疹病毒抗体意义风疹病毒抗体检测对于疾病的预防和控制具有重要意义。
1.早期干预:通过检测风疹病毒特异性IgM抗体,可以及时发现感染者,采取相应的隔离和治疗措施,避免疾病传播。
2.免疫状态评估:检测风疹病毒特异性IgG抗体水平,评估个体对风疹的免疫状态,指导疫苗接种和预防措施的实施。
3.孕前筛查:对准备怀孕的女性进行风疹病毒抗体检测,及时了解其感染情况,采取必要的预防措施,避免因风疹感染导致胎儿畸形。
四、风疹病毒抗体检测注意事项1.检测时间点:风疹病毒抗体检测的结果会受到感染时间的影响,需根据病程以及临床情况确定最佳的检测时间点。
2.检测方法:选择正规医疗机构进行检测,确保准确可靠。
3.结果解读:检测结果需由专业医师进行解读,结合临床情况进行综合分析。
五、总结风疹病毒抗体检测是了解个体免疫状态的重要手段,对于预防风疹感染以及及时干预具有重要意义。
定量ELISA法检测肺炎支原体特异性IgG、IgM的临床意义
定量ELISA法检测肺炎支原体特异性IgG、IgM的临床意义发表时间:2017-07-24T15:41:56.167Z 来源:《健康世界》2017年第9期作者:周志峰[导读] 采用定量ELISA法分别检测急性期与恢复期患者MP-IgG、MP-IgM,随着年龄的增长MP感染阳性率逐渐升高。
内蒙古省锡林浩特市妇幼保健院 026000摘要:目的探究定量ELISA法检测肺炎支原体特异性IgG、IgM的临床意义。
方法采用定量ELISA法检测我院2015.07~2016.07期间收治的60例呼吸道感染患者分别在急性期与恢复期的血清MP-IgG、MP-IgM。
观察并分析两份血清的阳性率及MP的阳性检测率。
结果 ?随着年龄的增长,MP-IgG、MP-IgM阳性率越高,且1~12岁组患者的MP-IgG、MP-IgM的阳性率明显小于13~24岁、24~65岁两组(P<0.05);?急性期与恢复期均呈阳性(20%)或均呈阴性(66.7%)明显高于急性期阳性、恢复期阴性(3.3%)或急性期阴性、恢复期阳性(10%)(P<0.05)。
结论采用定量ELISA法分别检测急性期与恢复期患者MP-IgG、MP-IgM,随着年龄的增长MP感染阳性率逐渐升高,双份血清检测有助于提高检测准确性。
关键词:ELISA;肺炎支原体;IgG;IgM肺炎支原体(M.Pneumonia,MP)是一种可经飞沫传染的呼吸道致病原,以间质型肺炎感染较为常见[1]。
MP感染临床表现为发热、咳嗽、咽痛、头痛,部分患者无临床症状,因此MP感染多被认为具有良好自限性。
但仍有患者出现呼吸困难、肺纤维化、阻塞型细支气管炎等症状逐渐出现恶化。
因此,MP感染仍然应该贯彻早发现早治疗的原则,以提高临床治疗疗效,降低并发症。
本院2015.07~2016.07期间采用ELISA等量检测MP患者血清中特异性MP-IgG、MP-IgM抗体,现将结果报道如下。
1资料与方法1.1一般资料选取我院2015.07~2016.07期间收治确诊的呼吸道感染患者60例为研究对象,男性36例,女性24例。
IgGIgM试剂盒免疫法测定人体抗体IgGIgMIgA--814PL
赛润 ELISA classic 嗜肺军团菌(1-7) IgG/IgM目录1.用途2.诊断意义3.赛润 ELISA classic-检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质,试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润 ELISA classic的检验步骤7.1注意事项7.2样品准备和储存7.3试剂盒反应试剂的准备工作7.4检测程序概要7.5检测过程8.检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2检验有效性标准8.3计算赛润 ELISA classic嗜肺军团菌(1-7) IgG/IgM(定量)8.4检测结果分析9. 性能特性9.1重复性9.2 敏感性和特异性10.警告10.1警告和安全措施10.2废料处理赛润 ELISA classic 嗜肺军团菌(1-7) IgG/IgM 试剂盒酶联免疫法测定人体抗体(IgG/IgM)- 只限用于体外诊断-IgG-试剂盒(定量) 编号: ESR106GIgM-试剂盒(定量) 编号: ESR106M1. 用途赛润 ELISA classic嗜肺军团菌1-7 IgG/IgM 主要用于定性和/或定量检测人血清或血浆中抗嗜肺军团菌1-7的抗体活性。
检测系统用于完善直接检测方法,以鉴别非典型性肺炎的各种影响因素。
2. 诊断意义嗜肺军团菌属于军团菌科、军团菌属。
它是一种革兰氏阴性、需氧、多形性的非孢子类杆菌,它能利用鞭毛来运动。
目前发现军团菌有39种,而种内的免疫学差异又建立在血清分型上。
最重要的人致病菌是嗜肺军团菌,它包括14个血清型。
多数军团菌肺炎(80-85%)是由第1-6种血清型嗜肺军团菌引起的。
军团菌普遍存在于物体表面和饮用水中,能够在阿米巴原虫和其他原生动物体内繁殖,l, 225-45℃的温水系统是它理想的繁殖环境。
军团菌通过气溶胶传染到人体内以后,会被肺泡巨噬细胞吞噬,其逃避机制不仅能使军团菌存活,而且会在吞噬细胞中繁殖。
典型军团病(美国退伍军人病)在感染后有一些非典型的前驱症状,如普通的不适、头痛、肌肉痛和干咳。
风疹病毒igg
风疹病毒igg风疹病毒igg是什么育龄妇女孕期特别是早孕期间,若感染风疹病毒会引起胎儿宫内感染导致先天性风疹综合症。
所以,很多女性在怀孕前都会去医院检测风疹病毒,因此时常会听到风疹病毒igg这个词,那风疹病毒igg到底是什么意思呢?如果一个人的检测结果写着风疹病毒igg阳性,那就表示该人曾经感染过风疹病毒,已经有了免疫力,胎宝宝感染的可能性很小;如果一个人的检测结果写着风疹病毒igg阴性,那就表示该人没有感染过风疹病毒。
那么,是不是只要看风疹病毒igg就可以了呢?答案是否定。
如果风疹病毒igg为阳性,还需看风疹病毒igm,若风疹病毒igm是阳性,那就要打风疹减毒活疫苗,而且在接种疫苗后三个月内要避孕;若风疹病毒igm是阴性,那就可以放心怀孕。
而风疹病毒的正常范围为抗风疹病毒抗体igm阴性,抗风疹病毒抗体igg阴性;抗风疹病毒抗体igm主要用于诊断风疹病毒的急性感染,一般在感染后2周血清出现抗风疹病毒抗体。
另外,要注意的是,在孕早期,孕妈咪尽量少去公共场所,避免与风疹病人接触。
风疹病毒igg阳性风疹是一种病毒传染性疾病,由于患者常常伴有全身皮疹,所以对于患者的皮肤是有一定的危害的,而认识风疹病毒抗体阳性是什么,对于防治风疹有着很重要的意义,下面让我们一起来了解一下吧!RV—Ab,这项化验是判断是否感染风疹病毒的一项参考指标,阴性或lgGAb<1:512。
风疹病毒的实验室检测是通过抽取静脉血检测体内抗风疹病毒的igg和igm抗体。
风疹病毒发病高峰为春季至初夏,而风疹病毒抗体的阳性率随年龄增大而上升,新生儿可以通过早年感染了风疹病毒的母亲而获得风疹病毒的igg抗体。
igm抗体于发疹4天左右产生,约10天达高峰,持续6~12周,偶尔也可持续达一年;igg抗体较igm抗体出现稍晚,逐渐上升,1~2个月达高峰,以后下降,多维持终生,人群中80%以上的人此抗体阳性。
风疹病毒igg阳性是什么意思呢?风疹病毒igg抗体定量为阳性,只能证明感染过风疹病毒,而且一旦被感染igg就终生阳性,但对身体没有影响。
rv-igg和rv-igm标准范围
RV-IgG和RV-IgM是针对风疹病毒(Rubella Virus,RV)的免疫球蛋白G和免疫球蛋白M。
这些抗体通常在感染风疹病毒后产生,并可以在血液中检测到。
了解这些抗体的水平可以帮助医生评估一个人是否曾经感染过风疹病毒,或者是否正在感染风疹病毒。
然而,具体的RV-IgG和RV-IgM的正常范围可能因不同的实验室和测试方法而有所不同。
通常,实验室会提供一个参考范围,以帮助解读结果。
一般来说,如果RV-IgG和RV-IgM的水平高于参考范围的上限,这可能意味着一个人曾经感染过风疹病毒,或者正在感染风疹病毒。
然而,如果水平低于参考范围的下限,这可能意味着一个人没有感染过风疹病毒,或者免疫系统没有产生足够的抗体来对抗病毒。
请注意,这些解释可能因具体的实验室和测试方法而有所不同。
因此,如果你有任何关于你的RV-IgG和RV-IgM结果的疑问,最好直接咨询你的医生或实验室。
他们会根据你的具体情况和测试结果,为你提供最准确的解释和建议。
风疹G说明书
风疹病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)说明书【产品名称】通用名称:风疹病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)英文名称:Diagnostic Kit for IgG Antibody to Rubella Virus (ELISA)【包装规格】48人份/盒,96人份/盒【预期用途】风疹是由风疹病毒(rubella virus,RV)引起的急性呼吸道传染病,孕期急性感染风疹病毒,可引起胎儿多种畸形,导致先天性风疹综合症。
一般认为风疹病毒IgM、IgG抗体的联合检测可有效提高孕妇风疹急性感染的判断率。
本试剂盒用于检测人血清或血浆中的风疹病毒IgG抗体,适用于辅助诊断风疹病毒感染和风疹病毒感染者的流行病学调查。
【检验原理】本试剂盒采用基因工程表达的重组RV抗原包被反应板,酶标记的鼠抗人IgG为示踪物,四甲基联苯胺显色系统,ELISA间接法检测人血清或血浆中的风疹病毒IgG抗体。
【主要组成成份】半成品名称主要组分规格半成品名称主要组分规格1 RV-IgG反应板重组RV抗原4×12孔/ 8×12孔8 底物液A 过氧化氢溶液1瓶(4ml / 8.5ml)2 RV-IgG酶结合物HRP标记鼠抗人IgG 1瓶(6.5ml/13ml) 9 底物液B TMB 1瓶(4ml / 8.5ml)3 阴性对照山羊血清1瓶(1ml) 10 终止液硫酸1瓶(4ml / 8.5ml)4 RV-IgG阳性对照RV-IgG阳性血清1瓶(1ml) 11 塑封袋1个5 Cut-off对照 RV-IgG阳性血清1瓶(1ml)12 封板膜3贴6浓缩洗涤液(20×)磷酸盐1瓶(25ml /50ml) 13 说明书1份7 标本稀释液NaCl1瓶(6.5ml/13ml)【储存条件及有效期】试剂盒置2-8℃可存放12个月。
【样本要求】血浆标本可采用肝素、柠檬酸钠或EDTA进行抗凝处理。
血清标本按常规方法由静脉采集。
标本置于2~8℃可保存7天,-20℃可保存6个月。
风疹病毒抗体
风疹病毒抗体【基本信息】[简要描述]·风疹病毒(rubella virus)是引起风疹(又名德国麻疹)的病原体。
风疹是一种以全身麻疹样出疹伴耳后及枕下淋巴结肿大为特征的急性呼吸道传染病。
·风疹病毒检测主要查抗体,一般感染后首先出现IgM抗体,持续1-3个月,2周后可出现IgG型抗体。
·对早孕妇女进行风疹病毒特异性IgM、IgG抗体监测有重要意义。
[其他名称]RuVAb、Rub-IgM、Rub-IgG、rubella-IgM、rubella-IgG【测定方法及参考值范围】·ELISA:阴性。
·HIAb小于1:8。
8-16倍可能为假阳性;2周后4倍稀释度增高有意义。
·还可通过反向血凝法、MEIA法测定。
【结果及临床意义】[阳性]◇疾病因素·风疹近期感染注释:风疹病毒IgM抗体阳性,提示有近期感染,必要时应终止妊娠。
·既往风疹感染注释:风疹病毒IgG抗体阳性,表示机体已受过风疹病毒感染,具有免疫力。
·先天性风疹综合征(classical congenital rubella syndrome, CRS)注释:CRS患儿一般出生时血清中就有IgM抗体和从母体获得的IgG抗体,或能证明宫内羊水中有IgM抗体等均可判定为CRS。
【样本准备与采集】[样本类型]血液[准备与采集]分离血清后如不能立即测定,应-20℃冷冻保存。
间隔2周两次以上采血,用同一方法测定,观察动态变化。
【注意事项】·IgM抗体应在发病的第5-15日内检测,阳性率最高。
IgG抗体在发病2周后升高,因此可在发病4日后和15日后各采血1份检测,可得满意结果。
·风疹病毒易感人群为1-5岁的儿童及孕妇。
风疹病毒抗体阴性的育龄妇女应接种疫苗,并在2个月内避孕。
·CRS发生概率以妊娠1个月内感染为最高约50%,2个月内约25%,3个月内约10%,6个月后感染一般不发生。
风疹病毒(IgMIgG)抗体检测试剂盒(酶联免疫法)国产进口注册情况一览表
风疹病毒(IgM/IgG)抗体检测试剂盒(酶联免疫法)国产/进口注册情况一览表厂家/代理商名称/注册号注册规格/有效期/适用范围北京健安生物科技有限公司风疹病毒抗体(IgM)检测试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2013第3400923号48/96人份/盒批准日期:2012.07.20 有效期至:2016.06.19利用酶联免疫吸附法(ELISA)定性检测人血清或血浆中的风疹病毒抗体(IgM)。
风疹病毒抗体(IgG)检测试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2013第3400172号48/96人份/盒批准日期:2013.02.01 有效期至:2017.01.31利用酶联免疫吸附法(ELISA)定性检测人血清或血浆中的风疹病毒抗体(IgG)。
郑州安图生物工程股份有限公司风疹病毒IgM抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2013第3401959号48人份/盒、96人份/盒、288人份/盒批准日期:2013.12.09有效期至:2017.12.08该产品用于定性检测人血清或血浆中风疹病毒IgM抗体。
风疹病毒IgG抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国械注准2015340077848人份/盒、96人份/盒、288人份/盒批准日期:2015.05.19有效期至:2020.05.18该产品用于定性检测人血清或血浆中风疹病毒IgG抗体。
风疹病毒IgG抗体亲和力检测试剂盒(酶联免疫法)国械(准)标准2015340076948人份/盒准日期:2015.05.19有效期至:2020.05.18该产品用于定性检测人血清或血浆中风疹病毒IgG抗体亲和力。
北京现代高达生物技术有限责任公司风疹病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)(国食药监械(准)字2013第3400680号)48人份/盒,96人份/盒批准日期:2013.05.15有效期至:2017.05.14体外定性检测人血清或血浆中的风疹病毒IgM抗体。
风疹病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)(国食药监械(准)字2014第3400269号)48人份/盒,96人份/盒批准日期:2014.01.27有效期至:2018.01.26体外定性检测人血清或血浆中的风疹病毒IgM抗体。
风疹病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
风疹病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)【产品名称】风疹病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)。
【用途】利用酶联免疫吸附法(ELISA)定性检测人血清或血浆中的风疹病毒(RV)IgM抗体,适用于人类风疹病毒感染的辅助诊断。
【试验原理】本试剂盒采用捕获法原理检测人血清或血浆样品中风疹病毒IgM抗体(RV-IgM),微孔中预包被鼠抗人-IgM(U-链),首先加入待测标本的血清或血浆样品后,样品中的IgM抗体都可被捕获,为结合的其他成分(包括特异的IgG 抗体)请被洗涤除去,第二步,加入RV抗原酶标记物,被捕获的IgM中的RV-IgM 会与来更过氧化物酶标记的RV重组抗原特异性的结合,洗去其它未结合物,做好用TMB底物显色。
通过酶标仪检测吸光度(A值)从而判定样品中的RV-IgM 抗体的存在与否。
【主要组成成分】1抗人-IgM(U-链)包被板1块(48孔/96孔),4×12/8×12孔板,微孔条可以拆开使用。
包被板由板条和板架组成,与含有干燥剂的铝箔袋密封。
未使用完的微孔条与干燥剂一起放在塑料袋中放置于2-8℃保存,包被板放置与自封袋保存后,减少开封次数,不良的保存条件将缩短稳定期。
2 RV-IgM阳性对照 1支(0.5ml),主要成分为蛋白缓冲稀释液稀释的RV-IgM抗体,含稳定剂、防腐剂。
3 RV-IgM阳性对照 1支(0.5ml),主要成分为蛋白缓冲稀释液稀释的正常人血清,检测无RV-IgM抗体反应,含稳定剂、防腐剂。
4酶标工作液1瓶(3ml/6ml),主要成分为辣根过氧化物酶标记的RV重组抗原,含稳定剂。
5 浓缩洗涤液(20×)1瓶(20ml/50ml),为无色液体,成分为磷酸缓冲液和吐温20。
用前用蒸馏水或去离子水按照1:20的比例稀释。
6 底物液A 1瓶(3ml/6ml),为无色液体,主要成分为过氧化物。
7 底物液B 1瓶(3ml/6ml),为无色液体,主要成分为TMB。
什么是IgM,IgG检测?
什么是IgM,IgG检测?中国医学人文IgG、IgM都是人体产生的抗体。
血清检测中如出现IgG表明感染早已有一段时间,而IgM提醒正处于急性感染期。
以近期流行的新冠检测为例,IgM、LgG是新冠检测中非常普遍的检查内容,但是很多人并不是清楚这两项检查内容有什么意义。
下面我们将介绍什么是IgM、IgG,以帮助大家了解检测结果。
一、什么是IgM,IgG?IgM是一种免疫球蛋白,感染或者患自身免疫疾病时IgM检测呈阳性。
IgM属于免疫球蛋白的一种,具备抗体活性。
当细菌以及病毒等病原微生物侵略人体,会把B淋巴细胞转化成浆细胞,产生抗原抗体后形成免疫球蛋白。
IgM由浆细胞生成代谢,化学结构与抗体分子结构类似,可以分为IgM1和IgM22个亚型。
IgM存在血清中,是个体发育环节中最早所产生的抗体,同时也是体液免疫中抗原刺激后,最早出现的特异性抗体,因而适合于感染早期确诊。
一般情况下,在脐带血里可检测到IgM,产检过程检测IgM,还可以确定胎儿存不存在宫腔内感染。
检查时IgM上升,检测呈阳性。
但IgM呈阳性延续时间往往不会过于长,因此检查身体的时候发现IgM上升,一般说明人体处于急性感染期。
但是该抗体保持时间较短、消退快,在血液里可持续2-3周。
IgM具备融解细菌、激话补体、调节免疫等功效,在感染初期有助于人体清除病毒,起到一定的抗感染功效。
此外,有系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等疾病时,IgM也会上升。
IgM可谓是参与了少数自身免疫及超敏反应的病理过程。
IgG为免疫球蛋白G的简称,是血清中最主要的抗体成份,占血清免疫球蛋白75%,在血清中占据50%左右,其余组织中也有分部。
IgG作用主要体现在对人体免疫具有较好的保护作用,能预防感染类病症。
与此同时,其指标值水平可作为某些疾病的诊断依据。
IgG是唯一一种能通过胚胎的免疫球蛋白,由孕妈传达给胎宝宝的IgG,在防御荨麻疹、白喉等感染病症方面具有重要价值。
年龄阶段不同,IgG水平标准值也不同。
赛润ELISAclassic支原体肺炎IgGIgMIgA
赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA目录1.用途2.诊断意义3.赛润ELISA classic-检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质,试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润ELISA classic的检验步骤7.1注意事项7.2样品准备和储存7.3试剂盒反应试剂的准备7.4检测程序概要7.5检测过程8.检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2检验有效性标准8.3计算赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA(定量)8.4检测结果分析9. 性能特性9.1重复性9.2 敏感性和特异性10.警告10.1警告和安全措施10.2废料处理11.参考文献赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA酶联免疫法测定人体抗体(IgG/IgM/IgA)- 只限用于体外诊断-IgG试剂盒(定量)编号ESR127GIgM试剂盒(定量)编号ESR127MIgA试剂盒(定量)编号ESR127A检测评估标准: BEP 2000, BEP III, DSX, 手动操作1.用途赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA用于定性和/或定量检测人血清或血浆内肺炎支原体。
抗肺炎支原体病毒IgG,IgM和IgA联合使用会有助于对肺炎支原体感染做出确切的诊断。
IgA-Elisa的使用特别在诊断再感染时,对于IgG 和IgM诊断是一个重要的补充。
2.诊断意义支原体肺炎病毒的感染会导致许多有可能引起严重并发症的呼吸系统疾病。
在这些疾病中首先值得一提的是初级非典型肺炎,咽炎以及呼吸道支气管炎。
在美国支原体肺炎病毒的感染要占每年门诊肺炎的20%。
肺炎支原体感染的临床症状具备多样性并且与其它原因引起的呼吸道感染(如呼吸道合孢病毒,流感-感染等)很难区别。
肺炎支原体可使气管、支气管以及细支气管上皮细胞增生。
感染后10-20天之后才出现一些非特异症状,如头疼、发烧、无痰干咳等。
风疹病毒IgG抗体检测操作规程
风疹病毒IgG抗体检测操作规程一、检测目的规范风疹病毒IgG抗体的检测实验,以保证检测结果的准确性和重复性。
二、检测方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IgG抗体。
三、检测原理采用基因工程表达的重组RV抗原包被反应板,酶标记的鼠抗人IgG为示踪物,四甲基联苯胺显色系统,ELISA间接法检测人血清或血浆中的风疹病毒IgG抗体。
四、实验条件(1)实验室应具有空调、离心机、加样器、水浴锅,酶标仪等设备。
(2)检验人员应经过操作前培训。
(3)用酶标仪测定。
五、操作程序(1)样本采集。
无抗凝静脉血2ml,当日不做的标本4℃保存,必要时,-20℃冻存。
(2)操作步骤。
○1平衡:将试剂盒从冷藏环境中取出,置室温平衡30分钟后使用。
○2配液:将浓缩洗液用蒸馏水或去离子水20倍稀释,摇匀备用。
○3稀释待测血清:将待测血清分别用标本稀释液稀释作1:101稀释(1ul 血清加入100ul标本稀释液或者5ul血清加500ul标本稀释液),混匀。
○4加样:预留一个空白孔,不加任何液体(每次实验设1孔阴性对照、1孔阳性对照及2孔Cut-off值对照)将阴、阳性对照及Cut-off值对照各取100ul/孔加入反应孔内,稀释好的待测血清各取100ul加入反应孔内。
○5温育:在反应板上加盖封板膜,置37℃温箱或水浴锅中,反应60分钟。
○6洗板:甩去孔内液体,用洗液加满各孔,静止30秒,甩去板内液体,如此反复洗板5次,最后在吸水纸上拍干。
○7加酶:每孔加入酶结合物100ul。
○8温育:加盖封板膜,置于37℃反应30分钟。
○9洗板:同操作步骤○6。
○10显色:每孔依次加入底物液A、B各50ul,振荡混匀,37℃避光反应15分钟。
○11终止:每孔加入终止液50ul,振荡混匀。
六、参考值:○1采用酶联仪(波长450/630nm或450nm)测定各孔OD值。
(结果须在终止反应后30分钟内测定完毕)。
○2临界值(Cut-off)=两孔Cut-off对照OD 值的均值。
torch维润赛润(ELISA-classic)体外诊断试剂讲解
M au ritiu s M e xic o M ic ro n e sia M o ld o va M o n ac o M o n g o lia M o ro c c o
M o zam b iq u e M yan m ar N am ib ia N au ru N ep al T h e N eth e rlan d s N ew
U n ited S tate s o f A m e ric a U ru g u ay U zb e k istan Van u atu
Ve n e zu e la Vie tn am W e ste rn S ah ara Ye m e n Yu g o sla via Z aire Z am b ia
10、评估表(1份)
实验操作流程
标本预处理
IgM检测:
取10ul检测者血清+800ul稀释缓冲液+200ul 类风湿因子吸附剂。混匀。
血清:稀释缓冲液:类风湿因子吸附剂= 1:80:20(1:100)
加入类风湿因子吸附剂的意义
降低假阳性的结果。
类风湿因子抗体是IgM型的自身抗体,可与IgG免 疫复合物结合。非特异性类风湿因子抗体的存在 将导致IgM检测的假阳性结果。另外,也存在弱 结合的病原体特异性IgM抗体被强结合的IgG抗体 取代的可能性。在这种情况下,IgM的检测将得 到假阴性的结果。因此,在进行IgM检测前应用 类风湿因子吸附剂对血清作预处理。
风疹病毒抗体igm的具体介绍
风疹病毒抗体igm的具体介绍
关于《风疹病毒抗体igm的具体介绍》,是我们特意为大家整理的,希望对大家有所帮助。
现如今,生小孩早已并不是以往那样非常容易的事儿了,生小孩前需要做各式各样的查验,做到优生的总体目标,以便给孩子一个身心健康的生长发育自然环境,因此想要做母亲的女性朋友们都是去身体检查,看一下人体内是否会带上对胎宝宝不好的病毒感染。
风疹多发性于学龄前儿童和青少年儿童,80%以上群体因此病毒感染抗体。
孕妇在怀孕20周前感染风疹病毒,胎宝宝胎儿畸形发病率较高。
成年人及少年儿童感染风疹病毒则会造成皮疹。
(1)试品收集,作筛粉实验仅需收集单份血液,但如要分辨病毒感染感染者的免疫力情况,需要对异常风疹病人在出現斑疹后3天内及其接着的14~21天各自抽样另外检验。
(2)同一般ELISA,在对比和试品各孔里加PBS 50μl,继加试品10μl,25℃隔热保温45min,清洗、吸走。
(3)各孔加酶标识物250μl,同法隔热保温和清洗。
(4)加上pNPP底物水溶液250μl,同法隔热保温和清洗后,加1mol/L氢氧化钠溶液50μl中断反映,测量各孔OD值值405nm,分辨被测试品結果。
(5)若为呈阳性結果,可将试品作进一步稀释液后作抗体滴度测量,较为依次二份试品結果,并开展分辨。
判断
1.风疹病毒的IgG和lgM抗原均为呈阳性,或是是IgG抗体滴度≥1:512,说明有风疹病毒最近感染。
2.风疹病毒的IgG和IgM抗体均为呈阴性,说明沒有受到风疹病毒感染。
3.风疹病毒的lgG抗体滴度。
赛润麻疹风疹IgM抗体检测说明
德国维润赛润风疹麻疹IgM检测流程步骤(一)准备阶段1.样品处理:取稀释缓冲液(DILB)800μl,RF吸附剂200μl于一EP管中,然后加入10μl患者待测血清混匀,常温放置15min,或者4℃过夜。
2.配置洗液:将33.3毫升浓缩洗液(WASH)加入蒸馏水稀释至1000毫升,洗液置4-8度冷藏保存。
(二)检测阶段1.加样:取100毫升样品稀释液加入微孔板中。
加入2孔阳性对照血清,一孔阴性对照血清,每孔各100毫升;空白对照一孔,不加任何液体。
3.孵育;将反应板震荡,样品混匀后置37℃1小时。
4.洗板:a机洗:洗5次,每次30秒,每孔加入洗液300微升。
b手洗:将反映板孔内容物倾去,将洗液注满反应孔,放置20-40秒后用力甩去,如此重复5次后拍干。
5.加酶标物(APC)每孔100μl,空白孔除外,37℃半小时。
6.重复步骤4。
7.加底物(PNPP)每孔100μl(包含空白对照孔),37℃半小时。
注意,底物液容易被污染,请先计算好加样量,用干净离心管分出后再加到微孔板中,底物液变黄了就不能使用了。
8.终止:加入终止液(STOP)每孔100微升(包含空白对照孔),终止反应。
(三)结果判定1,使用405nm波长比色。
每孔OD值需减去空白OD值为实际有效OD值。
空白对照OD值必须小于0.25,阳性对照值必须在评估表给的有效范围。
2,根据特殊评估系统:临界值上限=阳性对照平均值×大的判定系数系数;临界值下限等于=阳性对照平均值*小的判定系数(判定系数在试剂盒说明里,单张纸的那张,图例如下)。
3,样品OD值大于临界值上限即为阳性,样品OD值小于临界值下限即为阴性,样品OD值处于临界值区间即为可疑阳性。
试剂盒说明图例,其中圈红的地方即“判定系数”的高值和低值。
巨细胞病毒IgGIgM目录
赛润ELISA classic巨细胞病毒IgG/IgM目录1.用途2.诊断意义3.赛润ELISA classic - 检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质,试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润ELISA classic的检验步骤7.1注意事项7.2检验前的准备工作和储存7.3试剂盒反应试剂的准备7.4检测程序概要7.5检测过程8.检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2检验有效性标准8.3计算赛润ELISA classic巨细胞病毒IgG / IgM(定量)8.4检测结果分析9. 性能特性9.1重复性9.2 敏感性和特异性10.警告10.1警告和安全措施10.2废料处理11.参考文献V10.03/07-1赛润ELISA classic巨细胞病毒IgG/IgM试剂盒酶联免疫法测定人体抗体(IgG/IgM)- 只限用于体外诊断-IgG 试剂盒 (定量) 编号: ESR109GlgM 试剂盒 (定性)编号: ESR109M检测评估标准: Dade Behring BEP ® III / BEP ® 2000, DSX, 手动操1.用途:赛润ELISA classic巨细胞病毒IgG/IgM试剂盒主要用于人血清、脑脊液或血浆中抗巨细胞病毒抗体的定性和/或定量测定,IgM-ELISA试剂用于确定急性感染,而IgG-ELISA试剂则用于近期感染和血清学状态的诊断。
2.诊断意义巨细胞病毒(CMV)是一种DNA病毒,它是人病原体-疱疹病毒属的一种。
巨细胞病毒的主要感染途径是与被感染病人或有过接触,包括接触被感染病人的唾液、生殖器分泌物、尿液和乳汁,同时也可通过胎盘传播或发生医源性传染(输血,移植手术)。
初期感染后就会相继发生终生的潜在性感染。
巨细胞病毒寄生淋巴细胞中,可以在特定的环境下被激活。
巨细胞病毒在发达和不发达国家的感染率在45-50%之间,个别国家和地区感染率超过90%。
血清转化有两个高峰期:在感染后第2-3年间以及年龄在15-30岁之间。
赛润腺病毒检测试剂盒(IgG IgA)
7.1 注意事项
- IgM 检测::赛润类风湿因子 Rf-吸附剂(产品编号 Z100/5ml 和 Z200/20ml) - 分光光度计,波长 405 纳米,建议参考波长范围 620 纳米- 690 纳米(例如 650
纳米) - 37℃温箱 - 湿盒 - 蒸馏水。
6. பைடு நூலகம்存及稳定性
只有全部使用赛润 ELISA classic 试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关 联的,不能混用其他制造商的产品。尤其是标准血清,对照血清以及酶标记物,必 须使用试剂盒配备的,不要使用其它批号产品。稀释缓冲液,洗液,终止液和底物 溶液可用于所有赛润 ELISA classic 试剂盒。
湿盒中
↓ 洗涤
↓ 加入底物溶液(100 微升)
↓
再孵育 30 分钟 / 37℃ 湿盒中
3. 赛润 ELISA classic - 检验原理
下表中汇总了腺病毒引发的重要疾病及相关症状。
器官系统
症状
上呼吸道 下呼吸道 百日咳综合征 眼睛
胃肠道(常见于婴儿)
泌尿生殖道
咽炎 支气管炎 (肺炎) 咳嗽发作、发烧、呕吐 咽结膜热 角膜结膜炎 肠胃炎、 隔膜淋巴腺炎 子宫颈炎、尿道炎
最常见的分离物 (病毒亚型) 1, 2, 3, 5, 7 3, 4, 7, 21 5 3, 7 8, 19, 37 40, 41 1, 2, 3, 5 2, 19, 37
洗涤不充分将影响试验结果:
应该小心进行洗涤。洗涤步骤应遵守相关洗涤器(平底孔,孔直径 7 毫米,深 10.9 毫米)指导手册进行。重要的是所有的孔内均应加入相同体积的洗涤缓冲液。洗涤 结束时,应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打,以确保所有孔内均无洗涤缓冲液。 避免产生泡沫!如果使用自动洗板机,注意正确操作。
风疹病毒抗体igm的具体介绍
如对您有帮助,可购买打赏,谢谢风疹病毒抗体igm的具体介绍
导语:如今,生孩子已经不是过去那般容易的事情了,生孩子前需要做各种各样的检查,达到优生优育的目标,为了给孩子一个健康的生长环境,所以想要
如今,生孩子已经不是过去那般容易的事情了,生孩子前需要做各种各样的检查,达到优生优育的目标,为了给孩子一个健康的生长环境,所以想要做妈妈的女性朋友们都会去检查身体,看看身体内会不会携带对胎儿不利的病毒。
风疹多发于学龄儿童和青少年,80%以上人群为此病毒抗体阳性。
孕妇在妊娠20周前感染风疹病毒,胎儿致畸发生率较高。
成人及儿童感染风疹病毒则会引起皮疹。
(1)样品采集,作过筛试验仅需采集单份血样,但若需判断病毒感染者的免疫状态,需对可疑风疹患者在出现斑疹后3天内以及随后的14~21天分别取样同时检测。
(2)同一般ELISA,在对照和样品各孔中加PBS 50μl,继加样品10μl,25℃保温45min,洗涤、吸干。
(3)各孔加酶标记物250μl,同法保温和洗涤。
(4)再加pNPP底物溶液250μl,同法保温和洗涤后,加1mol/L氢氧化钠50μl中止反应,测定各孔吸光度值405nm,判断被测样品结果。
(5)若为阳性结果,可将样品作进一步稀释后作抗体滴度测定,比较先后两份样品结果,并进行判断。
判定
1.风疹病毒的IgG和lgM抗体均为阳性,或者是IgG抗体滴度≥1:512,表明有风疹病毒近期感染。
2.风疹病毒的IgG和IgM抗体均为阴性,表明没有受过风疹病毒感常识分享,对您有帮助可购买打赏。
HSV2 IgG
产品注册证号:3400298赛润ELISA classic单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书德国维润赛润研发有限公司北京代表处北京建国门北大街8号华润大厦2503B邮编:100005电话:+86.(0) 10.85 19 20 70传真:+86.(0) 10.85 19 20 71电子邮件:dialog@网址:单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书赛润ELISA classic目录1.名称2.用途3.诊断意义4.说明5.赛润ELISA classic - 检测原理6.试剂盒组成7..检测所需物质,试剂盒未提供8.储存和稳定性9.赛润ELISA classic的检验步骤9.1注意事项9.2样品准备和储存9.3试剂盒反应试剂的准备9.4检测程序概要9.5检测过程10.检测结果评估10.1 4PL单点定量法10.2检验有效性标准10.3计算赛润ELISA classic单纯疱疹病毒2型IgG(定量)10.4检测结果分析11.性能特性11.1重复性11.2 敏感性和特异性12.有效期13.警告13.1警告和安全措施13.2废料处理14.参考文献15.制造商名称、地址及联系方式单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒(酶联免疫法)赛润ELISA classic酶联免疫法测定人体抗体IgG- 只限用于体外诊断-1. 名称通用名:单纯疱疹病毒2型IgG 试剂盒(定量)英文名:Herpes simplex Virus 2 IgG (quant.)商品名:赛润ELISA classic单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒(酶联免疫法)汉语拼音:Serion ELISA classic danchun paozhen 2xing IgG kangti dingliang jiance shijihe (meilian mianyifa)产品编号: ESR1052G检测评估标准: Dade Behring BEP ® III / BEP ® 2000, DSX, 手动操作2.用途用于定量检测人血清或血浆中产生的对抗单纯疱疹病毒2型IgG的抗体。
风疹病毒IgG
抗风疹病毒IgG抗体测定1.原理采用蔗糖梯度离心法纯化并灭活的风疹病毒抗原包被微孔条,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗人IgG多克隆抗体为示踪物,TMB显色系统,应用间接酶联免疫吸附法原理检测人血清或血浆中抗风疹病毒IgG抗体(抗RUB-IgG)。
适用于风疹病毒感染的辅助诊断。
2.样品采集采集无抗凝静脉血2~3ml,也可采集常规肝素或枸橼酸钠抗凝血;若不能立即检测,标本可于4℃保存不超过5d;-20℃可保存3个月。
避免溶血或反复冻溶。
浑浊或有沉淀的标本应离心或过滤澄清后再检测。
3.试剂3.1试剂来源3.2试剂组成标准品1(0 U/ml,1×2.0ml/瓶),标准品2(50 U/ml,1×2.0ml/瓶),标准品6(1000 U/ml,1×2.0ml/瓶),对照血清,血清稀释液(2×60ml/瓶),酶结合物(1×16ml/瓶),SUBS TMB(1×16ml/瓶),终止液(1×15ml/瓶),浓缩洗液(1×60ml/瓶)。
试剂保存于2~8℃,有效期内均可直接使用。
4.仪器MK3酶标仪、EGATE-2310洗板机、LD5-10B型离心机、BHW-IV型恒温水浴箱。
5.操作步骤5.1试验前准备将试剂盒从冷藏环境中取出,置室温平衡30min后使用。
样品血清的稀释:把血清做1:100倍稀释(如取500μl血清稀释液加入5μl血清)。
5.2操作5.2.1设空白对照1孔、标准品12孔、标准品22孔、标准品61孔,每孔各100μl,检测孔加稀释后血清100μl,空白孔除外。
5.2.2充分振荡后(37±0.5)℃水浴孵育(60±3)min。
5.2.3洗板机吸去板孔内液体,以洗涤液注满各孔,静置20~30s后吸干,重复洗涤4~5次。
5.2.4除空白孔外其余各孔加酶结合物100μl。
5.2.5重复5.2.2和5.2.3。
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`赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM目录1.用途2.诊断意义3.赛润 ELISA classic- 检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质,试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润 ELISA classic的检验步骤7.1注意事项7.2样品准备和储存7.3试剂盒反应试剂的准备工作7.4检测程序概要7.5检测过程8.检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2检验有效性标准8.3计算赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM(定量)8.4检测结果分析9. 性能特性9.1重复性9.2 敏感性和特异性10. 风疹病毒IgG抗体的亲和力评估11. 警告11.1警告和安全措施11.2废料处理12.参考文献V9.03/07-1赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM酶联免疫测定法体外诊断人体抗体(IgG/IgM)- 只限用于体外诊断-IgG试剂盒(定量)编号 ESR129GIgM试剂盒(定量)编号ESR129M检测评估标准: Dade Behring BEP ® III / BEP ® 2000, DSX, 手动操作1.用途赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM用于定性和/或定量检测人体内血清、脑脊液或血浆中抗风疹病毒的抗体。
检测抗风疹病毒IgG和IgM对于风疹病毒的血清学研究具有特殊的价值,如判断机体免疫状态及初次感染。
2.诊断依据风疹病毒是一种人类病原体,属于RNA病毒的披膜病毒科,可通过飞沫和直接接触等方式传播,潜伏期一般为10-21天。
大约50%的感染病例初期伴有弥散性斑疹,随后这些微小的斑疹可能融合。
出生后感染通常并无大碍,有25-30%的患者尽管出现心肌炎,神经炎,耳炎,支气管炎,脑炎等并发症,也属于亚临床感染。
风疹病毒感染的临床诊断都应有血清学证据的支持,因为皮疹和关节炎这些临床症状也可以由其它病毒引起。
(见1.,2.)妊娠期风疹感染可能导致胎儿受到严重损伤及多系统疾病。
因此,妊娠期风疹的诊断就尤显重要。
当其他的检验系统(如血细胞凝集抑制实验)的结果为弱阳性或可疑,不能由此判断免疫状态的时候,免疫球蛋白G-酶联免疫吸附试验(IgG-Elisa)在确认检验结果和判断免疫状态方面就非常重要了。
通常来讲,IgM-Elisa (免疫球蛋白 M-酶联免疫吸附试验)的阳性结果是初次感染的指标。
患者感染后,抗风疹病毒的IgM抗体通常存在1-2个月,但也可能在可检测水平上维持一年。
由于风疹再次感染也可能产生IgM(免疫球蛋白M)抗体,在这种情况下,对所有IgM检测结果阳性的患者取双份血进行检测是至关重要的,而且我们也应清醒的认识到,没有任何一个血清检测的特异性和敏感性是100%(见2.,3.)。
鉴于风疹感染对胎儿带来的严重后果,抗风疹IgM检测为阳性的怀孕患者,应该用另一种反应原理的酶联免疫吸附试验对IgM再次进行检测。
此外,也应进行其他的确认检测,如IgA(免疫球蛋白A)抗体试验,免疫印迹或亲和力试验。
(见2.)。
多数情况下,妊娠期的初次感染不会导致胎儿子宫内感染。
因此,为评价可能引起胎儿损伤的风险(5.),应该进行产前诊断(4.)。
3.赛润ELISA classic - 检验原理用抗原包被微量板孔,制成固相载体。
加患者血清到板孔中,其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原结合,形成免疫复合物。
除去多余物质后,加入碱性磷酸酶标记的IgG、IgA和IgM抗体,使之与上述免疫复合物反应。
洗板,除去多余的结合物,加入底物(对硝基苯磷酸盐)。
其与酶结合的免疫复合物反应,产生有颜色产物,颜色强度与特异性抗体含量成正比。
4.试剂盒的组成5.检测所需物质,试剂盒未提供- 普通实验室所配的仪器装置- IgM检测:另需赛润含对照抗原的类风湿因子Rf—吸附剂 (Rf-吸附剂/对照抗原(产品编号T200/20ml))- 分光光度计,波长405纳米,建议参考波长范围620纳米- 690纳米(例如650纳米)- 37℃温箱- 湿盒- 蒸馏水。
6.储存及稳定性7.赛润 ELISA classic的检验步骤7.1注意事项只有全部使用赛润 ELISA classic试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他制造商的产品。
尤其是标准血清,对照血清以及酶标记物,必须使用试剂盒配备的,不要使用其它批号产品。
稀释缓冲液,洗液,终止液和底物溶液可用于所有赛润 ELISA classic试剂盒。
ELISA classic试剂盒内所有试剂均必须正确地存放。
应在未开封的情况下,保存于2-8℃,并在有效期(见标签说明)内使用。
详细的稳定性和储存资料在“6. 储存及稳定性”内将加以详述。
每一种试剂都是经过校准以保证最佳的检测结果。
这些试剂如果未经规定被稀释或改动都会导致检测的敏感性的降低。
在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,避免试剂受到微生物污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
请从标记处剪开密封袋。
如果铝袋破损或者已开启装有干燥剂的铝袋而未以夹子封紧的,则不要继续使用微孔条。
开始试验前,将所有试剂置于室温。
从试剂管中吸取试剂的时候,应注意使用无菌技术以防污染。
为避免假阳性结果,吸加酶结合物时,吸嘴应确保不接触或喷洒于小孔的顶避,注意不要盖错瓶盖或管盖。
试验结果的可重复性依赖于充分混匀试剂。
使用前振荡装有对照血清的小管和所有稀释过的溶液(例如使用混合器)。
小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。
请注意在吸取标本 / 对照血清,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果长,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
只有严格遵守赛润ELISA classic试剂的试验说明才会得到最佳的检测结果。
如果实验中未严格遵守质量控制认证文件上的有效性特异准则,则试验结果无效。
洗涤不充分将影响试验结果:应该小心进行洗涤。
洗涤步骤应遵守相关洗涤器(平底孔,孔直径7毫米,深10.9毫米)指导手册进行,所有的孔内均应加入相同体积的洗涤缓冲液。
洗涤结束时,应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打,以确保所有孔内均无洗涤缓冲液。
避免产生泡沫!如果使用自动洗板机,注意正确操作。
7.2检验前的准备工作和储存避免使用高血脂、溶血或黄疸的标本,尽管在我们的检测中没有发现有副影响。
明显被污染的标本(血清或血浆)不能用于检测。
样品不应加热灭活。
7.2.1样品准备赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG开始试验前,患者的待测样品必须以稀释缓冲液稀释如下(V1+V2):稀释后及加入微孔板前,样品必须充分混匀。
赛润 ELISA classic风疹病毒 IgM类风湿因子抗体是自身IgM型的抗体,可与IgG免疫复合物结合。
非特异性风湿因子抗体的存在将导致IgM检测的假阳性结果。
另外,也存在弱结合的病原体特异性IgM抗体被强结合的IgG抗体取代的可能性。
在这种情况下,IgM的检测将得到假阴性的结果。
因此,在进行IgM检测前应用类风湿因子吸附剂对血清作预处理。
特别类风湿因子Rf—吸附剂(产品编号T200,20ml)不仅包含抗人IgG抗体,还含有一定量的对照抗原,对照抗原同时能与类风湿因子及可识别宿主细胞膜成份的抗体结合。
因此,无须再进行微量孔包被对照抗原的平行试验。
在进行以下SERION ELISA classic IgM检测时,此类RF—吸附剂需作为附加试剂另行购买:巨细胞,单纯疱疹病毒,麻疹,腮腺炎,风疹病毒,刚地弓形虫,带状疱疹病毒首先应该使用稀释缓冲液(V2)对类风湿因子吸附剂(Rf-吸附剂/对照抗原)(V1)进行如下稀释:然后将患者的待测样品(V1)在此Rf-稀释缓冲液(V3)中进行稀释:7.2.2样品储存密封的患者样品可在冰箱中2-8℃保存7天。
≤ -20℃可保存更久。
避免样品反复冻融。
已稀释的样品可在2-8 ℃保存一星期。
7.3 试剂和反应试剂的准备工作7.3.1 微孔条微孔条置于一框架内,并与干燥剂一同封于铝袋之中。
应将不需要的微孔条取下并重新放入铝袋。
将袋口折叠2-3次,并以夹子夹紧,确保铝袋的密封性。
7.3.2 对照血清 / 标准血清对照和标准血清立即可用,不必进一步稀释。
试验时,可直接使用。
对于每次试验和每批检测体系,无论使用的微量板数目的多少,均应包括阴性阳性对照孔。
临界值血清应作双份测定。
如果是定量试验,标准血清也应作双份。
不要用RF吸附剂处理对照血清!7.3.3 抗人 IgG, IgA 或IgM抗体稀释液,用 AP标记(即用)禁止将不同试剂盒的酶标抗体混合。
同一试剂盒才能具最佳检测效果。
7.3.4 洗液以1:30稀释浓缩洗涤缓冲液(V1)至终体积V2。
例如:7.3.5 样品的稀释缓冲液(即用)7.3.6底物(即用)试验时戴手套以避免污染。
必须以无菌枪尖吸取底物溶液。
7.3.7 终止液(即用)7.4 检测程序概要定量的风疹病毒IgG / IgM进行IgM检测时先用类风湿因子吸附剂预处理血清,请参见7.2.1;室温孵育15分钟或4℃过夜样品稀释液(病人血清)1+100↓将稀释的样本,和立即可用的对照血清 / 标准血清,加到微量孔内(100微升)洗涤↓加入立即可用的酶标记抗体溶液(100微升)↓洗涤↓加入底物溶液(100微升)加入终止液(100微升)↓7.5检测过程7.5.1 将检测所需数目的微孔条放到微孔板框上并准备好一张草签。
7.5.2 在微量孔内分别加入100微升的已稀释样本或立即可用的对照血清。
留一个孔为底物空白使用,例如:7.5.3 将样品于湿盒内37℃(±-1℃)孵育60分钟(±5分钟)。
7.5.4 孵育后以洗液缓冲液洗涤板孔(使用自动洗板机或手工洗板):- 吸去或甩去洗液- 每孔内加入300微升洗液- 吸去或甩去洗液- 重复洗涤过程3次(共4次!)- 将微孔板翻转过来在纸巾上拍打,使微孔中不再含有液体7.5.5加入酶标记抗体。
于适当孔内(底物空白除外)加入100微升 IgG / IgM / IgA酶标记抗体7.5.6 湿盒内37℃(±1℃)孵育30分钟(± 1分钟)*。
7.5.7 孵育后,以洗液清洗板孔(洗涤见上)*注意:在特殊的工作环境下有必要对孵育时间进行调整。
7.5.8 加入底物于每孔内加入100微升底物溶液(包括底物空白孔)7.5.9 湿盒内37℃(±1℃)孵育30分钟(±1分钟)*。
7.5.10 终止反应每孔内加入100微升终止液,轻微振荡微孔板以混合溶液。
7.5.11 读取消光度以底物空白为空白对照液, 60分钟内读取405纳米的OD值,建议参考波长范围为620纳米-690纳米(例如650纳米)。