感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选

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椰子织蛾高毒力金龟子绿僵菌菌株的筛选

椰子织蛾高毒力金龟子绿僵菌菌株的筛选孙晓东;李富恒;阎伟;李朝绪;吕朝军;覃伟权【期刊名称】《植物保护》【年(卷),期】2016(042)006【摘要】椰子织蛾是为害热带地区棕榈科植物的重要害虫，本试验对从海南省陵水县采集的椰子织蛾僵虫上分离得到的4株金龟子绿僵菌进行了分子生物学鉴定，并测定了其对椰子织蛾3龄幼虫的室内生物活性，筛选出了高毒力菌株 LS-Y1。

试验结果表明，经 NCBI BLAST 比对，4株菌株的 rDNA-ITS 序列与 GenBank中已知基因序列相似性分别为99％、100％、99％、99％。

菌株 LS-Y1处理椰子织蛾3龄幼虫后6 d 的 LC50为4．41×106个／mL。

6．25×106、1．25×107、2．5×107、5×107和1×108个／mL 浓度处理下，金龟子绿僵菌 LS-Y1对椰子织蛾3龄幼虫的 LT50分别为5．77、4．88、4．43、3．82和3．36 d。

该菌株对椰子织蛾幼虫具有较高毒力，具有较好的生防潜力。

%Opisina arenosella Walker is an important insect pest on palm plants in the tropical area of China.In order to find efficient biocontrol agent against O .arenosella ,four Metarhizium anisopliae strains with good cul-tural characters were obtained from dead overwintering O .arenosella larvae collected from Lingshui,Hainan Province.The strains were identified by molecular method and their toxicities against the 3rd instar of O.arenosella were investigated in laboratory.Strain LS-Y1 demonstrated high toxicity againstO .arenosella .NCBI BLAST with the rDNA-ITS fragments from the four tested strains revealed that the nucleotide sequences of these genes havethe similarity of 99%,100%,99% and 99% with the sequences ofJN377427.1,NR132017.1,FJ545278.1, FJ545294.1,respectively.LC50 value of LS-Y1 on the 3rd instar larvae of O .arenosella was 4.41×106 conidia/mL 6 days after treatment.The LT50 values of LS-Y1 on the 3rd instar larvae ofO .arenosella at the spores concentra-tions of6.25×106 ,1.25×107 ,2.5×107 ,5×107 and 1×108 conidia/mL were 5.77 d,4.88 d,4.43 d,3.82 d and 3.36 d,respectively.These results showed that the strain LS-Y1 was highly toxic against O .arenosella larvae, which was the promising candidate in the biological control of O .arenosella .【总页数】4页(P215-218)【作者】孙晓东;李富恒;阎伟;李朝绪;吕朝军;覃伟权【作者单位】中国热带农业科学院椰子研究所，文昌 571339; 东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030;东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030;中国热带农业科学院椰子研究所，文昌 571339;中国热带农业科学院椰子研究所，文昌571339;中国热带农业科学院椰子研究所，文昌 571339;中国热带农业科学院椰子研究所，文昌 571339【正文语种】中文【中图分类】S436.67【相关文献】1.椰心叶甲高毒力绿僵菌菌株筛选及分子鉴定 [J], 李亚;黄贝芳;陈月银;高新;陈龙通;李锦鸿2.对华北大黑鳃金龟幼虫高毒力绿僵菌菌株的筛选及分子鉴定 [J], 于浩海;郭巍;李瑞军;陆秀君;赵丹3.对华北大黑鳃金龟幼虫高毒力绿僵菌菌株的筛选及分子鉴定 [J], 于浩海;郭巍;李瑞军;陆秀君;赵丹;4.杨扇舟蛾幼虫高毒力绿僵菌菌株筛选研究 [J], 潘永胜;徐福元;韩正敏5.高毒力金龟子绿僵菌的筛选及其胞外蛋白酶产量测定 [J], 臧欢;刘廷辉;李瑞军;陆秀君;房雪;耿硕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

萧氏松茎象病原真菌的调查与鉴定

were highly pathogenic to both larvae and adults of H. xiaoi, among which the ZR100 strain had the highest infection speed and the highest infection rate, and thus was considered as the most promising strain for future development and application. The results of the study provided important material basis and scientific grounds for biocontrol of Hylobitelus xiaoi Zhang.
源性比对。
界干扰作用也较小,土壤中的微生物多样性较高、保存较好。
1. 3 病原真菌的生物测定对采集到的代表菌株进行生物
从不同林分采集不同的森林腐殖层土壤样品,分别置于广口
测定。首先,用 0. 1 %吐温-80 的无菌水将不同菌株配制成
头分别半埋于土壤样品中;用纱网绑紧瓶口后将玻璃瓶置于
1. 2×107 个 / mL)。其次,准备足够数量的新鲜健康的萧氏松
Abstract By ways of field investigation and artificial soil bait technique, a total of 12 species ( strains) of entomopathogenic fungi were obtained. According to the results of morphological study combing with the rDNA ITS sequence comparisons, 5 strains( ZR100,ZR168,ZR345,

金龟子绿僵菌MaECM33基因的克隆及分析的开题报告

金龟子绿僵菌MaECM33基因的克隆及分析的开题报告一、选题背景和意义金龟子绿僵菌是一种重要的拟南芥拟南孢菌，具有重要的生物学意义。

绿僵菌MaECM33基因是一种编码酵母菌膜蛋白的基因，已被证明在细胞膜形成和维护中起重要作用。

然而，目前关于绿僵菌MaECM33基因的研究仍然有限。

因此，对绿僵菌MaECM33基因的克隆、表达及功能分析具有重要的研究意义。

二、研究内容1. 绿僵菌MaECM33基因的克隆和序列分析。

2. 绿僵菌MaECM33基因的表达检测和基因功能研究。

三、研究方法1. PCR扩增：使用绿僵菌Aspergillus nidulans的基因组DNA为模板，设计MaECM33基因的特异性引物，采用PCR技术进行扩增。

2. 克隆与构建表达载体：将PCR扩增产物进行酶切，使用T4 DNA连接酶将酶切产物与pET-28a(+)质粒酶切后进行连接，构建MaECM33基因表达载体。

3. 表达重组蛋白：将载体转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中，使用IPTG诱导表达重组蛋白。

4. 纯化重组蛋白：采用Ni2+亲和层析法对目的蛋白进行纯化。

5. 纯化蛋白的SDS-PAGE分析：使用SDS-PAGE技术对纯化后的重组蛋白进行分析。

6. 绿僵菌MaECM33基因的功能研究：通过体外蛋白功能实验和基因敲除实验研究MaECM33基因的生物学功能。

四、预期结果1. 成功克隆绿僵菌MaECM33基因。

2. 成功表达和纯化绿僵菌MaECM33重组蛋白。

3. 研究绿僵菌MaECM33基因的功能。

五、研究意义绿僵菌是一种重要的拟南芥拟南孢菌，其研究对于理解真菌的生长发育及繁殖机理具有重要意义，也可为绿僵菌的应用与开发提供理论基础和实验基础。

同时，本研究对酵母菌膜蛋白基因的研究也可为酵母菌细胞膜形成和维护的研究提供参考。

金龟子绿僵菌选择性培养基的筛选

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一
７一６
江苏农业科学
２００７年第５期
金龟子绿僵菌选择性培养基的筛选
程子路，詹儒林，许天委，宋妍，郭立佳张世清黄俊生，，
（．中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，１海南儋州５１３；．中国热带农业科学院南亚热带作物研究所，７７７２广东湛江５４９）２０１
２１１选择性培养基上的成菌落数．．
对绿僵菌在
选择性培养基上形成的目标菌落数量进行方差分
析，发现Ｉ号培养基与 Ⅵ号培养基差异不显著，与其
余培养基差异显著。 Ⅱ号培养基与Ⅶ号培养基差异
不显著，与其余培养基差异显著。 Ⅲ号培养基除与
按表１配制各种培养基，ＰＤ以ＰＡ培养基作为
对照。各培养基灭菌后倒入直径为９ｃ的培养皿ｍ中，制成平板备用。
１４方法．
数量的多少，影响其防治持效性的关键。土壤是是
一
个相对复杂的环境，病原菌受到诸多因素的影响，
Ⅷ 号培养基差异不显著外，与其他培养基差异都显
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程子路等：金龟子绿僵菌选择性培养基的筛选
Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ｖ Ⅵ Ⅶ ｍ
一７一７
燕麦片３，５ｇ琼脂５ｇ结晶紫１０ｇｍ，，０／ｌ多菌灵０８／ｌ．ｇｍ，青霉素１ｇｍ，００／ｌ硫酸链霉素１０／ｌ１０ｌ０ｇｍ，０ｍ水０

松枯梢病拮抗细菌的筛选、鉴定及拮抗活性的初步研究

松枯梢病拮抗细菌的筛选、鉴定及拮抗活性的初步研究王凤各;叶建仁【摘要】从江苏省林业科学研究院、南京市中山陵(水榭、灵谷寺)、南京林业大学(树木园、苗圃)等地采集,于南京林业大学二级学科国家重点学科森林保护学实验室分离得到1株对松枯梢病菌有明显抑制作用的拮抗细菌,将其命名为JS-JK8.经形态学、BIOLOG、分子生物学将其鉴定为芽孢杆菌属菌株.生长测试表明,JS-JK8在PDA培养基28C培养5h达到对数期生长.以松枯梢病为指示菌,抗菌活性物质产生条件为:1％转接种龄1d,28℃培养48 h.【期刊名称】《宜春学院学报》【年(卷),期】2016(038)003【总页数】7页(P88-93,123)【关键词】松枯梢病;分离;鉴定;抗菌【作者】王凤各;叶建仁【作者单位】皖南医学院药学院,安徽芜湖241002;南京林业大学林学院,南京210037【正文语种】中文【中图分类】X703.1松枯梢病(Sphaeropsis sapinea(Fr.)Dyko＆Sutton)引起的危害具有发病广、危害严重、病期久的等特征，分布在全世界二十多个国家，主要发生国为南非、美国、新西兰、中国、澳大利亚、荷兰、智利等国［1］。

病情严重者枝梢枯死，引起相当大的损失。

据研究，因病砍伐未成熟病树造成的木材损失达28%，潜在的木材损失达55%［2，3］。

在我国境内，已有湖南、湖北、广东、江苏、黑龙江、江西等地相继报道了松枯梢病等病情的蔓延［4］。

从1909年南非报道发现松枯梢病起，对该病的观察研究已达近100年历史，1937年前南非学者就观察到树木受伤后容易盛病，生长于潮湿和土坡贫府的立地条件下，树木容易感病［5］。

对此病害的防治目前仍以化学防治为主，但防治效果并不理想。

研究和利用松树自然生态系中以及枯梢病斑上的拮抗微生物，防治病害的发生，改善松体微生物环境，恶化病菌生境，对枯梢病的可持续控制有着重要意义［6］。

国外曾报道体外实验中，Trichodermna hazianum和壳聚糖对Sapstain的抑制效果［7，8］。

一种金龟子绿僵菌菌株及其应用[发明专利]

专利名称：一种金龟子绿僵菌菌株及其应用
专利类型：发明专利
发明人：占智高,刘卓荣,关丽梅,况文东,王金昌,靳亮,李鹏,邱小忠,张婷
申请号：CN201910836022.4
申请日：20190905
公开号：CN110438016A
公开日：
20191112
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种金龟子绿僵菌菌株及其应用，本发明的一种金龟子绿僵菌菌株，所述的菌株为金龟子绿僵菌；保藏名称为金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae JXAS‑03；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是湖北省武汉市洪山区八一路武汉大学中国典型培养物保藏中心；保藏日期：2019年08月14日；保藏编号：CCTCC M 2019626。

本发明的菌株对蝼蛄类害虫具有较强杀虫能力，为蝼蛄类害虫防治提供了一个新的材料。

申请人：江西省科学院微生物研究所
地址：330029江西省南昌市青山湖区上坊路108号
国籍：CN
代理机构：江苏银创律师事务所
代理人：何红梅
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金龟子绿僵菌(Metarhizium_anisopliae_HN1)几丁质酶与谷胱甘肽S-转移酶GS

金龟子绿僵菌(M etar hiziu m anisopliae HN 1)几丁质酶与谷胱甘肽S -转移酶GST 在大肠杆菌中的高效融合表达任文彬1,2,张世清1,黄俊生1(1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南儋州571101;2.仲恺农业工程学院,广东广州510225)摘要使用RT -P CR 方法,从高毒力金龟子绿僵菌M etar h izium anisop liae H N 1中,克隆得到一个全长为1275bp 的几丁质酶基因,经B la st 分析此基因序列与M.anisop liae E 6的chi 1基因(AF 02749)同源率为96%。

将此基因克隆到pG EX -6p-1载体上,使之与载体上一个约26kD 大小的谷胱甘肽S -转移酶(G ST )相连,构建pG EX -ch i 融合表达载体,转化到大肠杆菌(E sche rich ia co li )B L 21中,经SD S -PAG E 结果分析显示:表达出的融合蛋白大小为68kD,此目的蛋白占表达总量的64.5%。

经破碎处理后可检测到几丁质酶活性。

关键词金龟子绿僵菌;几丁质酶基因;融合蛋白;大肠杆菌中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)17-07900-03H ig h -e ffic ie n t F u s io n E xp re ss ion o f Ch it in a s e an d G STfrom M etar h iz i u m an isop liae HN 1in Escheich ia co li R EN W en -b in e t a l (E n v ironm en t an d P lan t P ro tection In s titu te ,C h i n e se A cade m y o f T rop ica l A g ricu ltu ra l S cien ces ,D an zh ou,H a in an 571101)A b s tra c t C h itin a se gen e s from M etarh iz ium an isop liae th a t is a n i m po r tan t en tom opa th o gen ic fu n gu s w e re co n s ide red on e o f th e k ey fac to rs to in va de th e ir h o sts .T o ta l RN A w a s e x trac ted from M etarh iz ium an isop liae H N 1s tra inan d ch itin a se gen e w a s am p li fied by R T -P CR.T h e w h o le len g tho f th is gen e w a s 1275bp ,an d th e nu cle o tide sequ en ce o f th e g en e w a s 96%si m ila r ity to th a t o f th e M.an isop liae E 6(A F 02749).T h enth e g en e w as su bclon e d in to prok an yo e x-p re ssion vec to r pG E X -6p -1an d con n ected w ith G S T.T h e clon e s w e re iden tif ied by en zym e d ig es tionan d sequ e n ced.T h is ex pre ssion p la sm id w a s tran s fo rm ed in -to E.co li s tra in B L 21an d e ffec tive fu s ion w a s e xp ressed.SD S -P AG Ean a ly sis in d ica tedth a t th e re com b in an t fu sio n pro te in w a s 68kD.T h e leve l o f exp re s-s ionfu sion p ro te in w a s a bou t 64.5%o f to ta l e xpre ssed pro te in s.T h e activ ity o f ch itin a se cou ld b e d e tec ted a fte r fragm en ta tiontrea tm en t .K e y w o rd s M e tarh iz iu m an isop liae ;C h iti n a se g en e ;F u s ion p ro te in ; E.co li基金项目国家科技支撑计划(2007BAD 48B 00)。

不同来源金龟子绿僵菌菌株生物学特性

不同来源金龟子绿僵菌菌株生物学特性苏文晶【摘要】选择不同地理、寄主来源的15株金龟子绿僵菌(Metarhizium ankopliae)菌株,对各菌株菌落形态、生长速度、产孢量等生物学性状进行比较.结果表明:(1)根据菌丝质地和颜色、产孢能力、孢子颜色等将15株菌株分为6类,其中A、B、C类菌株分别有3、3、6株,D、E、F各有1株.(2)不同金龟子绿僵菌菌株的生长速度在初期(10 d以内)差异显著,MaQZ-01、MaJGZ-01和MaFZ-0,菌株10 d时菌落直径均超过6 cm,显著快于其他菌株;到生长后期(15 d),由于进入了产孢阶段,除Ma-20、MaJGSTR-01菌落直径较小外,其他菌株差异不显著.(3)不同菌株产孢量差异显著,MaQZ-01、MaZPTR-04和MaSHTR-05菌株产孢量显著高于其他菌株,分别达到0.147×109、0.145×109和0.137×109个·cm-2.综合生长速度与产孢量两项指标,MaQZ-01菌株具备生长迅速、产孢量大等优良生产性能,可作为优良菌株进一步在害虫防治中加以利用.【期刊名称】《亚热带农业研究》【年(卷),期】2015(011)002【总页数】5页(P123-127)【关键词】金龟子绿僵菌;生物学特性;菌落形态;生长速度;产孢量【作者】苏文晶【作者单位】泉州市森林病虫防治检疫站,福建泉州362000【正文语种】中文【中图分类】S476.12Key words:Metarhiziumanisopliae; biological characteristics; colonial morphology; growth speed; sporulation绿僵菌[Metarhizium (Metsch.) Sorokin]是虫生真菌的重要类群之一，寄主范围广，能寄生8个目30个科约200种昆虫、螨类及线虫[1]。

萧氏松茎象优良白僵菌菌株的筛选

萧氏松茎象优良白僵菌菌株的筛选王丽娜;唐艳龙;李冬;温小遂;施明清;何小龙【期刊名称】《南京林业大学学报：自然科学版》【年(卷),期】2010(34)4【摘要】在室内对球孢白僵菌(Beauveria bassiana)6个自然菌株的营养生长、产孢量、孢子活力、孢子耐热能力、孢子抗紫外线能力及其对萧氏松茎象成虫的毒力等指标进行了研究。

结果表明:菌株B6和B3对萧氏松茎象成虫的毒力最强,20d的死亡率和白僵率均达到90%和80%。

B6菌株生长最快,14d直径生长量达24.21mm,产孢量最高,达12.15×107个/mm2,产孢时间最早,108h就开始产孢。

B3菌株的孢子萌发率最高,36h后达到71.07%,且耐热性较好,抗紫外线能力较强,但其在PPDA培养基上的产孢量最低。

因此,B6菌株是防治萧氏松茎象的优良菌株,具有较大应用价值。

【总页数】5页(P74-78)【关键词】萧氏松茎象;白僵菌;菌株筛选【作者】王丽娜;唐艳龙;李冬;温小遂;施明清;何小龙【作者单位】中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所;江西农业大学林学院;江西省林业有害生物防治检疫局【正文语种】中文【中图分类】S763.6【相关文献】1.感染萧氏松茎象幼虫的绿僵菌菌株的初步筛选 [J], 童应华;陈顺立;林强2.无纺布白僵菌剂林间防治萧氏松茎象试验研究 [J], 温小遂;刘继生;施明清;张足勇3.萧氏松茎象致病性白僵菌无纺布菌条的制作及培养基的筛选 [J], 刘继生;肖斌;王丽娜;温小遂;唐艳龙;施明清4.萧氏松茎象致病性白僵菌培养基的筛选 [J], 王丽娜;彭秀梅;史东平;唐艳龙;温小遂;何小龙5.感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选 [J], 童应华;陈顺立;林强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

椰子织蛾高毒力金龟子绿僵菌菌株的筛选

（１＿中国热带农业科学院椰子研究所，文昌
摘要
５７１３３９；２．东北农业大学生命科学学院，哈尔滨
１５０Ｏ３０）
椰子织蛾是为害热带地区棕榈科植物的重要害虫，本试验对从海南省陵水县采集的椰子织蛾僵虫上分离得
到的４株金龟子绿僵菌进行了分子生物学鉴定，并测定了其对椰子织蛾３龄幼虫的室内生物活性，筛选出了高毒力菌株ＬＹ１。试验结果表明，经ＮＣＢＩＢＩＡＳＴ比对，４株菌株的ｒＤＮＡ－ＩＴＳ序列与ＧｅｎＢａｎｋ中已知基因序列相似
ｔｕｒａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｄｅａｄｏｖｅｒｗｉｎｔｅｒｉｎｇＯ．ａｒｅｎｏｓｅｌｌａｌａｒｖａｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍＬｉｎｇｓｈｕｉ，Ｈａｉｎａｎ
性分别为９９、１００％、９９、９９。菌株ＬＳ－Ｙ１处理椰子织蛾３龄幼虫后６ｄ的ＬＣ５。为４．４１ ×ｌＯ个／ｍＬ。６．２５ ×
１０、１．２５ ×１０、２．５ ×１０、５ ×１０和１ ×１０个／ｍＩ浓度处理下，金龟子绿僵菌ＬＳ￣Ｙ１对椰子织蛾３龄幼虫的Ｉ５。
ＯｐｉｓｉｎａａｒｅｎｏｓｅｌｌａＷａｌｋｅｒ
ＳｕｎＸｉａｏｄｏｎｇ，ＬｉＦｕｈｅｎｇ。，ＹａｎｗｅＬｉＣｈａｏｘｕ，ＬｎＣｈａｏｊｕｎ，ＱｉｎＷｅｉｑｕａｎ

感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选

感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选童应华;陈顺立;林强【期刊名称】《林业科学》【年(卷),期】2010(046)001【摘要】A total of 12 strains of Metarhizium anisopliae Sorokin were tested for pathogenicity to Hylobitelus xiaoi,and a superior strain was used to infect trials in a forest.The results indicated that the strain Ma1291-2 had strong pathogenicity to H.xiaoi after treatment for 30 d by dipping inoculation with (1.5±0.5)×108 conidia·mL-1.The correct mortality,the muscardine cadaver rate and the conidia content individual of H.xiaoi were resp ectively 70.59%,70.81% and (1.90±0.34)×108 conidia individual,and the quickest median lethal times (LT_ 50 ) were 13.89 d.The median lethal concentration (LC_ 50 ) was 1.135 3 ×106 conidia·mL-1.By infecting trials to H.xiaoi in a forest with the strain Ma1291-2,mortality of the treatment was extremely significant higher than the control,the correct mortality,the muscardine cadaver rate and the conidia content individual of H.xiaoi were 57.85%±1.19%,55.43%±2.90% and (1.12±0.41)×108 conidia individual after 30 d,respectively,and the median lethal times (LT_ 50 ) was 16.56d.The results suggest that the strain of Ma1291-2 has great application value.【总页数】6页(P169-174)【作者】童应华;陈顺立;林强【作者单位】福建农林大学林学院,福州,350002;福建农林大学林学院,福州,350002;福建省森林病虫害防治检疫总站,福州,350003【正文语种】中文【中图分类】S763.306.4【相关文献】1.感染茶假眼小绿叶蝉的金龟子绿僵菌菌株筛选 [J], 李万里;包亚星;童应华2.感染萧氏松茎象幼虫的绿僵菌菌株的初步筛选 [J], 童应华;陈顺立;林强3.感染松墨天牛的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选 [J], 何学友;陈顺立;黄金水4.感染星天牛幼虫高致病力金龟子绿僵菌菌株的筛选 [J], 蔡守平;何学友;曾丽琼;黄金水;钟景辉;嵇保中5.感染油茶象幼虫的高致病力金龟子绿僵菌菌株筛选 [J], 何学友;蔡守平;杜月飞;陈德兰;黄金水;李孔泉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

金龟子绿僵菌MANGS71814及其在马铃薯块茎蛾防治方面的应用[发明专利]

专利名称：金龟子绿僵菌MANGS71814及其在马铃薯块茎蛾防治方面的应用
专利类型：发明专利
发明人：肖关丽,陈斌,郑亚强,杜广祖,和淑琪,桂富荣,李正跃
申请号：CN201911022041.X
申请日：20191025
公开号：CN110669675A
公开日：
20200110
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种金龟子绿僵菌MANGS71814及其在马铃薯块茎蛾防治方面的应用，该金龟子绿僵菌MANGS71814于2019年08月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.18121，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

金龟子绿僵菌MANGS71814的获得过程为：从采集到的罹病马铃薯块茎蛾3龄幼虫体分离获得野生金龟子绿僵菌菌株，在萨氏培养基上培养，将分生孢子转接到新的培养基上进行纯化，然后进行单孢分离获得纯化的金龟子绿僵菌MANGS71814。

本发明提供的金龟子绿僵菌MANGS71814是一种能用于防治马铃薯块茎蛾的生防真菌，具有对马铃薯块茎蛾致病性强、环保无污染、不易产生抗药性的特点，可以广泛地用于马铃薯块茎蛾卵、幼虫和蛹的防治。

申请人：云南农业大学
地址：650000 云南省昆明市盘龙区黑龙潭云南农业大学
国籍：CN
代理机构：北京挺立专利事务所(普通合伙)
代理人：刘阳
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ARTP与紫外线复合诱变选育高性能绿僵菌菌株(1)

ARTP与紫外线复合诱变选育高性能绿僵菌菌株本期为您推荐安徽工程大学生物与化学工程学院张国强教授研究团队发表在《食品工业科技》上的一篇文章：ARTP与紫外线复合诱变选育高性能绿僵菌菌株文章摘要内容如下：金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae）是一种环境友好型杀虫剂，目前已成功应用到田间，正稳步取代传统的化学农药。

但田间的不利环境会限制绿僵菌的感染性和有效性。

因此，筛选具有抗逆性的优良绿僵菌菌株具有重要的意义。

近年来对优良绿僵菌菌株的选育通常采用的是传统的紫外诱变方法，目前尚未见利用ARTP诱变技术增强绿僵菌性能的报道。

本研究采用常压室温等离子体（ARTP）和紫外线复合诱变处理金龟子绿僵菌，以期获得高性能的金龟子绿僵菌菌株，通过比较产孢快慢和生长直径大小进行初筛，用抗紫外能力和毒力作为复筛指标选育菌株，并对育种获得的突变株进行耐热性和遗传稳定性试验，最终在ARTP40s和紫外120s时筛选出一株产孢量高、耐紫外线、毒力强、遗传稳定的优良菌株AU34。

该菌株产孢时间比原始菌株快，产孢量为1.63±0.22（108cell/cm2），较原始菌株提高了63.81%。

经紫外照射5 min 后，AU34存活率为3.18%，比原始菌株更耐紫外照射。

并且AU34对小菜蛾的毒力强，校正死亡率为85.71%，半数致死时间（LT50）为6.12 d。

与原始菌株相比，AU34 的耐热性也有较大提高。

传代培养6 代后，菌株AU34 的产孢量无明显变化，具有良好的遗传稳定性。

常压室温等离子体（Atmospheric and room temperature plasma，ARTP）是一种新兴的诱变方式，已成功应用于细菌、真菌等微生物，具有突变率高，操作简便，易得到突变株等优点。

本研究以金龟子绿僵菌421为材料，采用ARTP 和紫外线复合诱变处理菌株，以小菜蛾为生测对象，筛选出产孢量高、耐紫外、毒力强的优良诱变株。

感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选

桂等 , 2004) 。该虫国外分布未见报道 ,国内主要分布江西、福建、贵州、广东、广西、湖南、湖北 7 省 (区 )的 100 多个县 (市 ) 1) 。各发生地开展了该害虫种群发生规律与控制技术研究 ,但尚无有效控制方法。
虫生真菌是昆虫种群自然调控的重要因子 ,在害虫控制方面有巨大的潜力 (蒲蛰龙等 , 1996)。自 1879 年 Metchnikoff 首次从奥地利丽金龟 ( Anisoplia austriaca)中分离出绿僵菌 ,并成功进行奥地利丽金龟和甜菜象甲 (B othynoderes punctiventris)的防治以来 ,绿僵菌就成为了害虫微生物防治的主要病原菌之一 (蒲蛰龙等 , 1996; Donald et al. , 2004)。绿僵菌寄主极为广泛 ,达 7个目 200多种昆虫 (Latch, 1965; Veen et al. , 1966) , 是当今世界广泛应用于防治农林害虫的病原真
表 1 供试绿僵菌菌株来源 ①
Tab. 1 O r ig in of tested M. an isop liae stra in s
菌株编号 Strain No.
采集地 Locality
寄主或分布 Hosts or distribution
分离日期 Isolated date
MaFzzL 201 福建省福州市 Fuzhou, Fujian
收稿日期 : 2008 - 07 - 09。基金项目 : 福建省自然科学基金项目 ( Z0516020) ; 福建省科技厅重点项目 (2006N0002) ; 福建省科技厅重点项目 (2004N013) 。 3 陈顺立为通讯作者。本研究 9个供试金龟子绿僵菌菌株由福建省林业科学研究院森林保护研究所何学友教授级高工提供 ,在此表示衷心感谢。 1) 国家林业局植树造林司 ,国家林业局森林病虫害防治总站. 2006年上半年全国主要林业有害生物发生情况及下半年发生趋势预测. 森防简报 , 2006, 16.