感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选
两株绿僵菌菌株的分离鉴定及其对花生蛴螬的致病力
两株绿僵菌菌株的分离鉴定及其对花生蛴螬的致病力申剑飞;王中康;张建伟;殷幼平【期刊名称】《中国生物防治学报》【年(卷),期】2012(028)003【摘要】从山东日照、青岛两地的花生生产示范大田采集得到天然罹病的花生蛴螬僵虫中,分离得到两株绿僵菌菌株（Metarhizium spp.）。
对两株菌株的ITS1-5.8S rRNA-ITS2区域进行序列分析,并结合菌株的形态和培养特征,分别确定为平沙绿僵菌M.pingshaense（CQM132）和贵州绿僵菌M.guizhouense（CQM135）。
筛选了菌株CQM132和CQM135的最适培养温度和最适培养基,结果表明两个菌株均在28℃温度条件下,在PPDA培养基上的生长速度最快且产孢时间显著最短。
室内测定了菌株CQM132和CQM135对铜绿丽金龟和暗黑腮金龟幼虫（蛴螬）的致病力。
结果表明,菌株CQM132和CQM135对铜绿丽金龟和暗黑腮金龟幼虫均具有较强的毒力。
菌株CQM132的高浓度孢悬液（1.1×107～1.1×108孢子mL-1）对两种金龟幼虫的累计死亡率均达到85%以上,致死中时LT50≤7.58 d。
菌株CQM135的高浓度孢悬液（1.1×107～1.1×108孢子mL-1）对两种蛴螬的累计死亡率均达到90%以上,致死中时LT50≤6.85 d。
相比而言,菌株CQM135对两种蛴螬的致病力略优于菌株CQM132,可以作为优良菌株进一步研究。
%In this study, two species of Metarhizium spp. were isolated from natural cadaver of white grubs from peanut planting field in Rizhao and Qingdao, Shandong province. The two Metarhizium species were identified as M. pingshaense for strain CQM132 and M. guizhouense for strainCQM135 based on the sequence of their ITS1-5.8SrRNA-ITS2 andmorphological and cultural characteristics. The optimum culture temperature and medium for strain CQM132 and CQM135 were screened, results showed that the optimal culture temperature for the two strains was 28℃ and PPDA was the best m edia for hyphal growing and sporulation of the two strains. Virulence of CQM132 and CQM 135 to the larvae （white grubs） of Anomala corpulenta and Holotrichia parallela was evaluated in the laboratory. Bioassay results indicated that the two strains were highly virulent against two species of white grubs. The corrected accumulative mortality on the two grubs was over 85% with the suspension at a high concentration （1.1×107--1.1×108 spore-mL-1） of CQM132, and the LTs0was less than 7.58 d; while the corrected accumulative mortality against two grubs was over 90% with the spore suspension at a concentration 1.1× 107-1.1× 108 spore-mL-1 of CQM135, and LTs0 was less than 6.85 d. The results indicated that the virulence of CQM135 was more aggressive than CQM132 and it could be used as a potential biocontrol agent against white grubs in the peanut field.【总页数】7页(P334-340)【作者】申剑飞;王中康;张建伟;殷幼平【作者单位】重庆大学生物工程学院,重庆市杀虫真菌工程技术研究中心,重庆400030;重庆大学生物工程学院,重庆市杀虫真菌工程技术研究中心,重庆400030;重庆大学生物工程学院,重庆市杀虫真菌工程技术研究中心,重庆400030;重庆大学生物工程学院,重庆市杀虫真菌工程技术研究中心,重庆400030【正文语种】中文【中图分类】S476.12;S433.8【相关文献】1.不同来源绿僵菌对云斑金龟蛴螬致病力评价 [J], 陈祝安;黄基荣2.两株绿僵菌菌株的分离鉴定及其对花生蛴螬的致病力 [J], 申剑飞;王中康;张建伟;殷幼平3.一株白僵菌菌株的分离鉴定及对紫薇梨象成虫致病力的初步研究 [J], 张建华;查玉平;陈京元;王义勋;蔡三山;洪承昊;赵东容4.绿僵菌对暗黑金龟蛴螬的室内致病力测定 [J], 陈祝安;张玉琢5.两株草鱼源维氏气单胞菌菌株的主要表型特征及致病力比较 [J], 任燕;高彩霞;曾伟伟;王庆;王英英;李莹莹;尹纪元;常藕琴;石存斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
萧氏松茎象病原真菌的调查与鉴定
源性比对。
界干扰作用也较小,土壤中的微生物多样性较高、保存较好。
1. 3 病原真菌的生物测定 对采集到的代表菌株进行生物
从不同林分采集不同的森林腐殖层土壤样品,分别置于广口
测定。 首先,用 0. 1 %吐温-80 的无菌水将不同菌株配制成
头分别半埋于土壤样品中;用纱网绑紧瓶口后将玻璃瓶置于
1. 2×107 个 / mL)。 其次,准备足够数量的新鲜健康的萧氏松
Abstract By ways of field investigation and artificial soil bait technique, a total of 12 species ( strains) of entomopathogenic fungi were obtained. According to the results of morphological study combing with the rDNA ITS sequence comparisons, 5 strains( ZR100,ZR168,ZR345,
感染星天牛幼虫高致病力金龟子绿僵菌菌株的筛选
感染星天牛幼虫高致病力金龟子绿僵菌菌株的筛选蔡守平;何学友;曾丽琼;黄金水;钟景辉;嵇保中【期刊名称】《中国生物防治学报》【年(卷),期】2012(028)002【摘要】室内测定了6株金龟子绿僵菌菌株的菌落生长速率、产孢量及其对星天牛幼虫的致病力。
结果表明：不同菌株生长速率和产孢量存在显著差异,在PPDA 培养基上,菌株MaYTTR04和MaZPTR01的菌落生长较快,培养15 d后,菌落直径分别为6.3 cm和5.9 cm;产孢量以菌株MaYTTR04最大,MaZPTR01其次,分别为2.0×108孢子·cm-2和1.1×108孢子·cm-2,显著高于其他菌株。
生物测定结果表明,不同绿僵菌菌株对星天牛幼虫的致病力差异显著,接种20 d后,星天牛幼虫累积死亡率在40%～96.7%之间;菌株MaZPTR01和MaYTTR04对星天牛幼虫致死率分别达到96.7%和93.3%;僵虫率也高,分别达到86.7%和80%;致死中时（LT50）短,分别为5.71 d和5.80 d。
研究结果表明,菌株MaZPTR01和MaYTTR04对星天牛幼虫致病力较强,同时具备良好的生产性能,故可作为优良菌株用于星天牛的防治。
【总页数】5页(P293-297)【作者】蔡守平;何学友;曾丽琼;黄金水;钟景辉;嵇保中【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】S476.12【相关文献】1.感染星天牛幼虫高致病力金龟子绿僵菌菌株的筛选 [J], 蔡守平;何学友;曾丽琼;黄金水;钟景辉;嵇保中2.感染杨干象幼虫的高致病力虫生真菌菌株筛选 [J], 曹庆杰;迟德富3.感染油茶象幼虫的高致病力金龟子绿僵菌菌株筛选 [J], 何学友;蔡守平;杜月飞;陈德兰;黄金水;李孔泉4.绿僵菌MS01菌株的生物学特性及在不同温湿度下对光肩星天牛幼虫的致病力[J], 王宝辉;郑建伟;黄大庄;王达;马向超;韩小勇5.一株对红棕象甲幼虫具高致病力新型金龟子绿僵菌的鉴定 [J], 魏敏;刘丽;朱辉;孙晓东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
金龟子绿僵菌选择性培养基的筛选
一
７ 一 ６
江苏农业科学
２０ ０ ７年第 ５期
金龟子绿僵菌选择性培养基 的筛选
程 子路 ，詹儒林 ，许天委 ，宋 妍 ，郭立佳 张世 清 黄俊 生 ， ，
（．中国热带农业科学院环境与植物保护研究所， １ 海南儋州 ５ １３ ； ．中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 ， ７７７ ２ 广东湛江 ５４ ９ ） ２０ １
２ １１ 选择 性培 养基 上 的成 菌 落数 ．．
对绿 僵 菌在
选择性培 养 基 上 形成 的 目标 菌 落 数 量进 行方 差分
析， 发现 Ｉ 号培养 基与 Ⅵ号培养基 差异不显 著 ， 与其
余 培养基 差异显 著 。 Ⅱ号培养基 与Ⅶ号培养 基差异
不 显著 ， 与其余 培养 基 差异 显 著 。 Ⅲ号 培养 基 除与
按表 １配制 各 种培 养基 ， Ｐ Ｄ 以 Ｐ Ａ培 养 基作 为
对 照 。各培 养基灭 菌后 倒 入 直径 为 ９ ｃ 的培养 皿 ｍ 中， 制成平板 备用 。
１ ４ 方 法 ．
数量 的多少 ， 影 响其 防治 持效 性 的关 键 。土 壤是 是
一
个 相对复 杂 的环境 ， 病原菌 受到诸 多 因素 的影响 ，
Ⅷ 号培 养基 差异 不显 著外 ， 与其 他 培养基 差 异都显
维普资讯
程子路 等 ： 金龟子绿僵菌选择性培养基的筛选
Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ｖ Ⅵ Ⅶ ｍ
一 ７ 一 ７
燕 麦片 ３ ， ５ｇ 琼脂 ５ｇ结晶紫 １０ ｇｍ ， ， ０ ／ ｌ 多菌灵 ０ ８ ／ ｌ ． ｇ ｍ ， 青霉素 １ ｇ ｍ ， ０ ０ ／ｌ 硫酸链霉素 １０ ／ ｌ １ ０ ｌ ０ ｇｍ ， ０ｍ 水 ０
江西省萧氏松茎象栖境内绿僵菌的种群遗传异质性
江西省萧氏松茎象栖境内绿僵菌的种群遗传异质性张海燕;张扬;何万存;李冬;张林平;栾丰刚【期刊名称】《江西农业大学学报》【年(卷),期】2017(039)002【摘要】为更好地应用虫生真菌防治萧氏松茎象,对江西省主要萧氏松茎象发生危害区内绿僵菌属真菌物种多样性及主要物种种群遗传多样性进行研究.通过内转录间隔区(ITS)与转录延伸因子基因(EF-1α)序列比对,并采用邻接法构建系统发育树,5株供试绿僵菌分别与Metarhizium pemphigi、M.pinghaense、M.guizhouense、M.anisopliae和M.indigoticum亲缘关系最为接近.采用ISSR 分子标记分析了6个地区90株金龟子绿僵菌的种群遗传结构, Nei's基因多样性(h)为0.155 7,Shannon信息指数(Is)为0.264 7,种群间遗传分化系数(Gst)为0.232 1.UPGMA聚类分析及主坐标分析表明,90株金龟子绿僵菌形成3个来源复杂的分支.研究结果表明,江西省萧氏松茎象栖境内绿僵菌属物种组成复杂,广布种金龟子绿僵菌种群属于分化较为明显的异质性种群.【总页数】9页(P286-294)【作者】张海燕;张扬;何万存;李冬;张林平;栾丰刚【作者单位】南昌工程学院水利与生态学院,江西南昌330099;江西农业大学林学院,江西南昌330045;江西省林业厅,江西南昌330038;江西农业大学林学院,江西南昌330045;江西农业大学林学院,江西南昌330045;江西农业大学林学院,江西南昌330045【正文语种】中文【中图分类】S476.12【相关文献】1.绿僵菌超低容量油剂防治萧氏松茎象试验研究 [J], 童应华;陈顺立;林强2.萧氏松茎象绿僵菌无纺布菌条防治试验 [J], 童应华;陈顺立;林强;宋漳3.感染萧氏松茎象幼虫的绿僵菌菌株的初步筛选 [J], 童应华;陈顺立;林强4.营林措施对萧氏松茎象种群的控制作用 [J], 胡绍平;胡志华;温小遂;王辉5.感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选 [J], 童应华;陈顺立;林强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一株绿僵菌的鉴定、生物学特性及对东亚飞蝗的致病力
一株绿僵菌的鉴定、生物学特性及对东亚飞蝗的致病力侯颖;夏彦飞;徐建强;刘芳芳;林晓民;都胜芳【期刊名称】《中国生物防治学报》【年(卷),期】2015(031)003【摘要】从河南省汝阳县林地里采集到的天然罹病的黑蚱蝉僵虫中,分离到1株绿僵菌Metarhizium spp.,根据菌落培养特征和产孢结构特性,结合菌株ITS1-5.8s RNA-ITS2基因序列,鉴定为金龟子绿僵菌M.anisoliae,编号Ma121.测定了温度、光照、pH值以及碳氮源、微量元素对菌株Ma121菌丝生长和产孢的影响,得到菌株Ma121生长和产孢的适宜条件为温度25～30℃、全黑暗、培养基以大豆粉为碳源和蛋白胨为氮源并添加锰盐、pH 7.室内测定了菌株Ma121对东亚飞蝗若虫的致病力,结果显示菌株Ma121高浓度孢悬液(1×107～1×108孢子/mL)对若虫的校正累计死亡率均达到90％以上,致死中时(LT50)少于5d.说明菌株Ma121能够有效侵染东亚飞蝗若虫并将其致死,菌株Ma121可以作为优良菌株进行杀蝗生物农药的进一步研发.【总页数】7页(P333-339)【作者】侯颖;夏彦飞;徐建强;刘芳芳;林晓民;都胜芳【作者单位】河南科技大学食品与生物工程学院,洛阳471023;河南科技大学林学院,洛阳471003;河南科技大学林学院,洛阳471003;河南科技大学林学院,洛阳471003;河南科技大学林学院,洛阳471003;河南科技大学林学院,洛阳471003【正文语种】中文【中图分类】S476.12【相关文献】1.一株绿僵菌的鉴定、生物学特性及对东亚飞蝗的致病力 [J], 侯颖;夏彦飞;徐建强;刘芳芳;林晓民;都胜芳;2.绿僵菌对东亚飞蝗的室内致病力测定 [J], 代鹏;唐复润;谢玉萍;石晓珍;程子路;黄俊生3.不同温度下绿僵菌对东亚飞蝗3龄蝗蝻的致病力影响 [J], 刘银民; 程雨蒙; 李红梅; 农向群; Belinda LUKE4.不同温度下绿僵菌对东亚飞蝗3龄蝗蝻的致病力影响 [J], 刘银民; 程雨蒙; 李红梅; 农向群; Belinda LUKE5.广州地区一株绿僵菌的鉴定及其对草地贪夜蛾的致病力测定 [J], 雷妍圆;王德森;薛志洪;吕利华;黄少华;章玉苹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
金龟子绿僵菌(Metarhizium_anisopliae_HN1)几丁质酶与谷胱甘肽S-转移酶GS
金龟子绿僵菌(M etar hiziu m anisopliae HN 1)几丁质酶与谷胱甘肽S -转移酶GST 在大肠杆菌中的高效融合表达任文彬1,2,张世清1,黄俊生1(1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南儋州571101;2.仲恺农业工程学院,广东广州510225)摘要 使用RT -P CR 方法,从高毒力金龟子绿僵菌M etar h izium anisop liae H N 1中,克隆得到一个全长为1275bp 的几丁质酶基因,经B la st 分析此基因序列与M.anisop liae E 6的chi 1基因(AF 02749)同源率为96%。
将此基因克隆到pG EX -6p-1载体上,使之与载体上一个约26kD 大小的谷胱甘肽S -转移酶(G ST )相连,构建pG EX -ch i 融合表达载体,转化到大肠杆菌(E sche rich ia co li )B L 21中,经SD S -PAG E 结果分析显示:表达出的融合蛋白大小为68kD,此目的蛋白占表达总量的64.5%。
经破碎处理后可检测到几丁质酶活性。
关键词 金龟子绿僵菌;几丁质酶基因;融合蛋白;大肠杆菌中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)17-07900-03H ig h -e ffic ie n t F u s io n E xp re ss ion o f Ch it in a s e an d G STfrom M etar h iz i u m an isop liae HN 1in Escheich ia co li R EN W en -b in e t a l (E n v ironm en t an d P lan t P ro tection In s titu te ,C h i n e se A cade m y o f T rop ica l A g ricu ltu ra l S cien ces ,D an zh ou,H a in an 571101)A b s tra c t C h itin a se gen e s from M etarh iz ium an isop liae th a t is a n i m po r tan t en tom opa th o gen ic fu n gu s w e re co n s ide red on e o f th e k ey fac to rs to in va de th e ir h o sts .T o ta l RN A w a s e x trac ted from M etarh iz ium an isop liae H N 1s tra inan d ch itin a se gen e w a s am p li fied by R T -P CR.T h e w h o le len g tho f th is gen e w a s 1275bp ,an d th e nu cle o tide sequ en ce o f th e g en e w a s 96%si m ila r ity to th a t o f th e M.an isop liae E 6(A F 02749).T h enth e g en e w as su bclon e d in to prok an yo e x-p re ssion vec to r pG E X -6p -1an d con n ected w ith G S T.T h e clon e s w e re iden tif ied by en zym e d ig es tionan d sequ e n ced.T h is ex pre ssion p la sm id w a s tran s fo rm ed in -to E.co li s tra in B L 21an d e ffec tive fu s ion w a s e xp ressed.SD S -P AG Ean a ly sis in d ica tedth a t th e re com b in an t fu sio n pro te in w a s 68kD.T h e leve l o f exp re s-s ionfu sion p ro te in w a s a bou t 64.5%o f to ta l e xpre ssed pro te in s.T h e activ ity o f ch itin a se cou ld b e d e tec ted a fte r fragm en ta tiontrea tm en t .K e y w o rd s M e tarh iz iu m an isop liae ;C h iti n a se g en e ;F u s ion p ro te in ; E.co li基金项目 国家科技支撑计划(2007BAD 48B 00)。
不同来源金龟子绿僵菌菌株生物学特性
不同来源金龟子绿僵菌菌株生物学特性苏文晶【摘要】选择不同地理、寄主来源的15株金龟子绿僵菌(Metarhizium ankopliae)菌株,对各菌株菌落形态、生长速度、产孢量等生物学性状进行比较.结果表明:(1)根据菌丝质地和颜色、产孢能力、孢子颜色等将15株菌株分为6类,其中A、B、C类菌株分别有3、3、6株,D、E、F各有1株.(2)不同金龟子绿僵菌菌株的生长速度在初期(10 d以内)差异显著,MaQZ-01、MaJGZ-01和MaFZ-0,菌株10 d时菌落直径均超过6 cm,显著快于其他菌株;到生长后期(15 d),由于进入了产孢阶段,除Ma-20、MaJGSTR-01菌落直径较小外,其他菌株差异不显著.(3)不同菌株产孢量差异显著,MaQZ-01、MaZPTR-04和MaSHTR-05菌株产孢量显著高于其他菌株,分别达到0.147×109、0.145×109和0.137×109个·cm-2.综合生长速度与产孢量两项指标,MaQZ-01菌株具备生长迅速、产孢量大等优良生产性能,可作为优良菌株进一步在害虫防治中加以利用.【期刊名称】《亚热带农业研究》【年(卷),期】2015(011)002【总页数】5页(P123-127)【关键词】金龟子绿僵菌;生物学特性;菌落形态;生长速度;产孢量【作者】苏文晶【作者单位】泉州市森林病虫防治检疫站,福建泉州362000【正文语种】中文【中图分类】S476.12Key words:Metarhiziumanisopliae; biological characteristics; colonial morphology; growth speed; sporulation绿僵菌[Metarhizium (Metsch.) Sorokin]是虫生真菌的重要类群之一，寄主范围广，能寄生8个目30个科约200种昆虫、螨类及线虫[1]。