2016-2017学年高中生物第1章微生物培养技术第1节微生物的分离和纯培养学业达标测评中图版选修1资料
中图版选修一 1.1 微生物的分离和纯培养课件(42张)
[思维激活1] 提示
用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌？70% 酒精擦拭属化学消毒。酒精消毒时，70%的酒精杀
与95%的酒精，哪一种效果更好？为什么？ 菌效果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固 成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌 力减弱。
1．微生物 (1)定义
形体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜
细菌 酵母菌 微生物主要包括_____ 、放线菌、 _______ 、霉菌以及立克次氏体、支原
体、_____等。
病毒
2．培养基
生长繁殖 代谢 (1)培养基的概念：根据微生物__________ 和_____的需要，将各种 营养物质 _________混合在一起，配制成适合微生物生存的营养基质 ——培养基。
仅杀死物体表面或内 较为温和的 消 部一部分对人体有害 物理或化学 的微生物(不包括芽孢 毒 方法 和孢子) 杀死物体内外所有的 灭 强烈的理化 微生物，包括芽孢和 菌 因素 孢子
特别提醒 实验后所有用过的培养基、培养液都要统一进 行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则会造成环境污染。实验过 程中一定不可吃东西、喝水；离开实验室时一定要洗手， 以防止被微生物感染。
种类 特点 用途 工业生产 分类、鉴定
天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 培养基成分明确(用化学成分 合成培养基 已知的化学物质配成)
特别提醒 天然培养基成分不明确，造价低；合成培养基
成分明确，价格高。
4．消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用的方法 煮沸消毒法、 巴氏消毒法、 紫外线或化学 药物消毒法 灼烧灭菌、干 热灭菌、高压 蒸汽灭菌
第一节
微生物的分离和纯培养
1．进行微生物的分离和培养。
2．用大肠杆菌为材料进行平板培养，分离菌落。
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
实验方法与步骤
➢ 1.平板的制作： 将已灭菌的培养基融化，冷却到40-50℃， 倒平板。
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
2. 连续稀释法分离土壤中的微生物
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
计算每克土样中微生物的数量 ➢ 选择刚好能把菌分开，而稀释倍数最低的
平板（含菌落数30～300个）计数。
微生物的细胞个数（个/g）＝平均菌落土数壤×克稀数释倍数
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
微生物分离基本方法及原则
分离微生物时一般是根据该微生物对营养，pH， 氧气，温度等要求的不同，供给它们合适的条 件或加入某种抑制剂，形成只利于该菌种生长， 不利于其他菌种生长的环境，从而淘汰不需要 的菌种。
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
(1) 分离细菌：取10-7、10-8两个稀释度各0.2ml加入 培养皿中，涂布牛肉膏蛋白胨平板，37℃倒置培 养，24小时。
(2) 分离霉菌：取10-5、10-6两个稀释度各0.2ml，涂 布土豆平板（倒平板前在土豆培养基中加入80% 的乳酸5滴），28℃倒置培养，3～4天。
产抗菌素的放线菌
A：卡特利链霉菌 B：弗氏链霉菌 C：吸水链霉菌金泪亚种 D：卡那霉素链霉菌 E：除虫链霉菌 F：生磺酸链霉菌
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
实验材料
➢ 1 土壤样品 ➢ 2 培养基 （1）牛肉膏蛋白胨培养基 （2）高氏1号培养基 （3）马铃薯培养基（PDA培养基）
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
高二生物 2.1.1微生物 的分离和纯培养
教学内容
➢ 制备固体平板培养基。 ➢ 从土样中分离细菌、霉菌、放线菌，并观
2017_2018年高中生物第1章微生物培养技术第1节微生物的分离和纯培养学案中图版选修1
第一节微生物的分离和纯培养一、培养基1．含义由于微生物代谢方式的不同，因而对营养物质的需求也是有差异的。
根据微生物生长繁殖和代谢的需要，将各种营养物质混合在一起而配制的营养基质。
2．平板培养基将溶化后的固体培养基基质倒入无菌培养皿中，冷却凝固后制成的培养基。
二、无菌技术1．目的和要求在微生物的分离和纯培养中，一定不能有外来的污染性杂菌，所以必须采用无菌技术进行操作。
因此，在实验过程中，要对所用的器材、培养基进行严格的灭菌，对工作场所要进行消毒。
2．灭菌和消毒(1)灭菌：用强烈的理化因素杀死环境或物体内外所有的微生物，常用的方法是高温灭菌法。
(2)消毒：用相对温和的理化方法杀死环境或物体上的病原微生物和有害微生物的营养细胞，常用的方法是射线消毒法和化学药剂消毒法。
三、接种技术1．含义把相应的研究对象移入培养基中的过程。
2．分类在平板培养基上接种的方法有平板划线法、稀释平板涂布法、稀释混合平板法等。
预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中一、微生物的概念及特点 1．概念微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。
2．特点微生物⎩⎨⎧小个体微小⎩⎪⎨⎪⎧ μ微米级：光学显微镜下可 见细胞纳米级：电子显微镜下可见细胞器、病毒微生物⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧ 简构造简单⎩⎪⎨⎪⎧单细胞简单多细胞非细胞即“分子生物低进化地位低⎩⎪⎨⎪⎧原核类：细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、蓝细菌真核类：真菌酵母菌、霉菌、原生生物非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒二、微生物的营养及功能微生物的化学组成成分与其他生物大体相同，也是由C 、H 、O 、N 、P 、S 等元素组成，其中C 、H 、O 、N 占细胞干重的90%以上，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物。
这些化合物可归纳成碳源、氮源、生长因子、无机盐和水这五大类营养要素。
①微生物最常利用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。
高二生物课件 微生物的分离和纯培养(1)
仅杀死物体表面或内
部一部分对人体有害 的微生物(不包括芽孢 和孢子)
煮沸消毒法、 巴氏消毒法、 紫外线或化学 药物消毒法
灭 菌
强烈的理化 因素
杀死物体内外所有的 微生物，包括芽孢和 孢子
灼烧灭菌、干 热灭菌、高压 蒸汽灭菌
特别提醒 实验后所有用过的培养基、培养液都要统一进 行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则会造成环境污染。实验过 程中一定不可吃东西、喝水；离开实验室时一定要洗手， 以防止被微生物感染。
病的原_微__生__物_____有_和害_微__生__物__的__营__养__细__胞______ ，常用的是 射线_____消毒法化和学_药__剂______消毒法。
[思维激活1] 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌？70% 与95%的酒精，哪一种效果更好？为什么？ 提示 酒精擦拭属化学消毒。酒精消毒时，70%的酒精杀 菌效果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固 成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌 力减弱。
异养型 微生物
CO2、 NH3、铵盐、
NaHCO3 硝酸盐等
糖类、脂 肪酸等
铵盐、 硝酸盐、 蛋白质等
生长因子
一般不 需要
有些种 类需要
举例
硝化 细菌
乳酸菌
2.培养基的成分 (1)培养基的成分 培养基中一般含有水、无机盐、碳源、氮源、生长因子五 大类营养物质。 (2)碳源、氮源及生长因子的来源与功能比较
方法
灭菌操作
适用对象
灼烧 灭菌
在酒精灯火焰的充分 燃烧层灼烧
对接种环、接种针或其他 金属工具灭菌，也可以对 试管口、瓶口灭菌
干热 灭菌
在干热灭菌箱内， 耐高温且需保持干燥的物
160～170 ℃条件下， 品，如玻璃器皿和金属用
(教师用书)高中生物 第1章 第1节 微生物的分离和培养同步备课课件 苏教版选修1
玻璃刮铲 。
大肠杆菌的接种与分离培养
1.牛肉膏蛋白胨培养基的配制步骤 ①配制 培养液 ；②调节 pH 至 7.2 ；③分装：培养基 的高度约为试管长度的 1/5 ；④包扎；⑤灭菌：高压蒸汽灭 菌是常用的 灭菌 方法；⑥搁置斜面：待试管冷却至 50 ℃ 左右，斜面长度不超过试管总长的 1/2 。
3．牛肉膏蛋白胨能培养病毒吗？为什么？ 【提示】 活。 不能，因为病毒只能进行活细胞寄生生
【精讲精析】 选项 A B C D 分析判断 操作顺序为配制培养液―→调节pH―→分 装―→包扎―→灭菌―→搁置斜面 固体培养基在配制时需添加琼脂作凝固剂 待试管冷却至50 ℃左右，将试管口部枕在 高约1 cm的木条上，使其自然倾斜 根据实际情况用质量分数为3%的HCl或 NaOH溶液调节培养基的pH
第一节
微生物的分离和培养
教师用书独具演示
●课标要求 1．结合灭菌知识理解无菌操作技能。 2．结合配制培养基的知识，理解微生物培养基的配制方 法。
●课标解读 1．学会微生物的分离与培养。 2．掌握无菌操作技能。 ●教学地位 本节内容介绍了实验室常采用的灭菌方法，配制培养
基的方法，接种微生物的方法以及微生物的分离培养技
2．斜面接种和培养大肠杆菌 (1)斜面接种的主要目的 有 菌种 转移、 扩大 培养、保存 纯净菌种 (2)具体操作步骤 准备接种―→ 接种环 灭菌―→ 试管口 灭菌―→挑取少 许菌体―→ 划线接种 ―→培养大肠杆菌―→低温保存。 等。
4．通常在酒精灯火焰附近接种微生物的原因是什么？
【提示】 存活。 酒精灯火焰附近的局部高温使得微生物不能
不仅是优良的溶剂，而 且可维持生物大 分子结构的稳定 细胞内的组成成分，生 理调节物质；某 些化能自养菌的能源， 酶的激活剂
高中生物第一章无菌操作技术实践第一节微生物的分离和培养第2课时微生物分离和培养的技术操作(以(1)
第2课时微生物分离和培养的技术操作(以大肠杆菌为例）学习导航明目标、知重点难点了解培养基的配制过程及培养基的配制原则。
（重点）掌握无菌操作和接种技术.(重、难点）［学生用书P9］阅读教材P10~14分析大肠杆菌的接种与分离培养1．配制牛肉膏蛋白胨培养基错误!→错误!→错误!→错误!→错误!→错误!2．斜面接种和培养大肠杆菌斜面接种大肠杆菌的主要目的有菌种转移、扩大培养和保存纯净菌种等。
具体操作步骤：准备接种→错误!→错误!→错误!→错误!→错误!→错误!3．平板划线分离和培养大肠杆菌在实验室中，平板常常被用来培养、分离细菌等微生物.(1）牛肉膏蛋白胨固体培养基的平板制作配制好的培养基装瓶错误!灭菌→倒平板操作（A.打开瓶塞→B.灼烧瓶口灭菌→C。
倒培养基→D.倒置平板)（2)平板划线分离与培养大肠杆菌①平板划线法的含义：用带有微生物的接种环在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。
②注意事项：接种和划线操作时需要在酒精灯火焰附近进行。
③培养结果:可以得到由单个细菌增殖而形成的菌落。
判一判(1）锥形瓶的瓶口通过火焰灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
(√）（2)平板冷凝后，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染.（√)（3）制备细菌培养基的操作顺序为配制培养液、调节pH、灭菌、分装.(×)(4）使用已灭菌的接种环、培养基，操作过程中不再灭菌。
(×）连一连培养基的配制[学生用书P10］利用培养基培养微生物首先要把微生物接种到培养基上,在实验室中,平板常常被用来培养、分离细菌等微生物。
结合教材P10～14内容完成以下探究。
探究1 下表是牛肉膏蛋白胨固体培养基的成分,请说出各成分提供的营养培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏5。
0 g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨10。
0 g 碳源、氮源和维生素NaCl 5.0 g 无机盐H2O定容至1 000 mL 氢元素、氧元素骤,学会培养基的配制配制培养基↓调节pH至7。
高二生物微生物的分离和纯培养
(3) 分离放线菌：取10-5、10-6两个稀释度各0.2ml， （制备菌悬液时，应先加入10%酚10滴）涂布淀 粉平板，28℃倒置培养，7～10天。
纯种：是微生物的某一个种或株，培养中的所 有细胞有着共同的来源或仅是同一细胞的后代。
• 为了获得单个菌体，要把待分离的材料进行适 当的稀释，按其生长所需要的条件，使其在平 板上，单个菌体繁殖成单个菌落。
• 由于细菌、放线菌和霉菌所要求的营养条件不 同，将样品在不同培养基制成的平板上进行分 离，依据菌落形态的差异，可以区分细菌、放 线菌和霉菌三大类群，并计算出其数量。
弯の不咋大的道,刚出院门,却是看到一些伟岸の身影站在门口,一双虎目宛如噬人の凶**盯着白重炙,冷森森の说道："不咋大的子,你呀是谁?你呀打算带不咋大的烟花去哪里?" 本书来自 聘熟 当前 第捌02章 终相见 文章阅读 "雷云叔叔！这是俺和你呀说过の夜大哥！" 不咋大的烟花 一看伟岸老者眼中の凶光,连忙站在白重炙前面,急迫の解释起来,她很清楚这个老者の实力和脾气.请大家检索（度#扣￥网）看最全！更新最快の生怕一不不咋大的心让他把白重炙给拍死了. 白重炙当然认识眼前这个老者,就是他当年在凤舞城带走雷烟花の,客气の一拱手,却是不吭不卑 の说道："晚辈白重炙,见过雷云破仙,晚辈要把烟花带到一些绝对安全の地方！" "哦?你呀凭什么认定,你呀说の那个地方比这里更安全?"雷云破仙冷笑一声,不可置否の说道,不过因为白重炙救过雷烟花の命,眼中の凶光淡了一些. "去了你呀就知道了！"白重炙不想解释太多,淡淡说道. "狂妄,你呀知
高中生物第一章微生物培养技术第一节微生物的分离和纯培养自我小测中图版选修精编版
第一章微生物培养技术第一节微生物的分离和纯培养1．高温灭菌的原理是（）A．每种微生物生长的最适温度是一定的B．微生物对高温环境不适应C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动D．高温降低了环境中氧的浓度2．下列叙述错误的是（）A．微生物的分离和纯培养中，必须采用无菌技术进行操作B．把相应的研究对象移入培养基中的过程称为接种C．划线的方法包括连续划线法和交叉划线法D．培养不同的微生物，使用的培养基、培养的温度和时间相同3．能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（）A．将未接种的培养基放在实验桌上培养B．将未接种的培养基放在窗台上培养C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养4．无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是（）A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B．将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行D．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触5．下列有关平板划线操作的叙述正确的是（）A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过酒精灯火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养6．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（）A．细菌的大小、形状、颜色B．菌落的大小、形状、颜色C．有无鞭毛D．培养基的不同7．实验时务必注意安全，对此不正确的叙述是（）A．规范操作，以防被致病微生物感染B．规范操作，防火防烫伤C．实验中不能吃东西但可以说话喝水，实验后一定要洗手D．培养基丢弃前一定灭菌以免污染环境8．下列对菌落的表述，不正确的是（）A．肉眼可见的菌落一般均是由许多种细菌大量繁殖形成的B．霉菌等在面包上形成的不同颜色的斑块即为菌落C．噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解从而使菌落变得透明D．细菌、放线菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同9．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下列实验结束后的做法错误的是（）A．对接种环进行灼烧处理B．带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C．带菌培养基必须经加热后才能倒掉D．接种后双手必须经肥皂洗净，再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭10．在细菌培养实验过程中，将培养基装入试管后，在管口塞棉塞既是防止杂菌污染，又能保证通气良好，图中正确的塞法是（）11．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。
中图版生物选修1第一节微生物的分离和纯培育word学案
第一节微生物的分离和纯培育【课标要求】进行微生物的分离和培育【知识梳理】背景知识原核类：包括、、、一、微生物的类群真核类:包括、非细胞类：包括二、微生物的培育概念：依照微生物和的需要，将各类混合在一、培育基一路，配制成适合微生物生存的营养基质。
培育基的种类：固体培育基（加）: 用于微生物的、按物理性质分为、、等。
液体培育基：用于。
二、接种：在平板培育基上接种的方式有、、。
3、纯培育：通过必然的方式，将从中分离出来，取得，那个进程称为纯培育。
4、培育：:大多数微生物适宜生长的温度在之间，实验室中经常使用微生物的培育培育微生物。
需要适宜的 :一样细菌适合于环境生长，放线菌适合于环境，而酵母菌和霉菌适合于环境。
五、无菌技术：泛指在培育微生物的操作中，所有避免杂菌污染的方式。
对实验操作的空间、操作者的手进行。
用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行。
为幸免周围环境中微生物的污染，实验操作的整个进程应在进行。
灭菌：是指用杀死内外所有的，包括芽孢和孢子。
消毒：是指用方式杀死上的和的。
实践案例：大肠杆菌的分离和纯培育配制培育基：此实验中所用培育基为。
接种：此实验中的接种方式是。
划线的方式包括和。
培养：接种完毕，将培育皿，放入培育24小时。
观看记录纯化培育：挑取单个大肠杆菌菌落接种，培育，可取得大肠杆菌的纯培育。
如有杂菌，进一步划线挑菌，直至纯化。
探讨活动：一、从豆科植物根瘤中分离和培育根瘤菌选用比较完整，大而的新鲜作为材料。
二、从酒曲中分离和培育酵母菌：酒曲中含有、、等大量微生物。
宜选用培育基培育，再用法在培育基上分离培育。
【温习指要】一、学法指导：本节课应初步学会用平板划线法分离微生物并取得某种微生物的纯培育。
学会微生物培育的具体操作，并运用所学知识和方式去分离相应的微生物。
本节课的微生物分离的方式和无菌技术的知识应引发重视，在高考选择题和实验题中都有可能表现。
二、疑难解析：灭菌和消毒：灭菌是指用强烈的理化因素杀死环境或物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
高二生物微生物的分离和纯培养
• 在平板上划线分离混合菌悬液中金黄色葡 萄球菌和大肠杆菌。
• 计算每克土样中微生物的数量。 • 为什么在分离霉菌时要加几滴80％的乳酸？
加在何处？
• 为什么在分离放线菌时要加入10％的酚？ 加在何处？
• 培养微生物时应考虑哪些原则？培养时， 为什么要把已接种的培养皿倒置保温？
菌落特征
（圆形，假根状，不规则状） （光滑，皱缩，颗粒状，龟裂状，同心圆状） （扩展，台状，凹面，凸面，乳头状） （整齐，波状，裂叶状，锯齿状） （无光泽，金属光泽，闪光） （油脂状，膜状，粘脆）
（P6 图 2-3）
大肠杆菌菌落
伊红美蓝培养基
曲霉
酵母菌落
霉菌菌落
青霉
• 制备固体平板培养基。 • 从土样中分离细菌、霉菌、放线菌，并观
• 自然界中不同种类的微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，必须从混杂的微生 物类群中分离它，使该微生物处于 这种获得纯培养的方法称为
l 纯种：是微生物的某一个种或株，培养中的所 有细胞有着共同的来源或仅是同一细胞的后代。
• 为了获得单个菌体，要把待分离的材料进行适 当的稀释，按其生长所需要的条件，使其在平 板上，单个菌体繁殖成单个菌落。
• 由于细菌、放线菌和霉菌所要求的营养条件不 同，将样品在不同培养基制成的平板上进行分 离，依据菌落形态的差异，可以区分细菌、放 线乐船舷旋七周半的招数！接着又搞了个，团身鹏醉后空翻七百二十度外加傻转一百周的沧桑招式！最后颤起清秀流畅的肩膀一颤，快速从里面跳出一道银 辉，她抓住银辉疯狂地一摆，一样明晃晃、凉飕飕的法宝⊙金丝芙蓉扇＠便显露出来，只见这个这件神器儿，一边闪烁，一边发出“咝咝”的美声！。忽然间月光妹妹旋风般
地念起颠三倒四的宇宙语，只见她水嫩香柔； / 学股网 ；的粉颈中，飘然射出四团摇舞着⊙金丝芙蓉扇＠的烟花状的试管，随着月光妹妹的甩动， 烟花状的试管像腰鼓一样在双腿上优美地玩出隐隐光烟……紧接着月光妹妹又颤起思维离奇的精灵头脑，只见她青春跃动的胸脯中，突然弹出五组转舞着⊙金丝芙蓉扇＠的钢 轨状的火花，随着月光妹妹的颤动，钢轨状的火花像胸花一样，朝着女科长Ｏ．雯娃姑婆锅底色胸花一样的鼻子斜扫过去！紧跟着月光妹妹也晃耍着法宝像玻璃管般的怪影一 样朝女科长Ｏ．雯娃姑婆斜砸过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道金橙色的闪光，地面变成了湖青色、景物变成了深红色、天空变成了金红色、四周发出了 高雅的巨响。月光妹妹玲珑活泼的美鼻子受到震颤，但精神感觉很爽！再看女科长Ｏ．雯娃姑婆暗橙色炸鸡样的脸，此时正惨碎成草籽样的淡灰色飞丝，快速射向远方，女科 长Ｏ．雯娃姑婆惊嘶着全速地跳出界外，急速将暗橙色炸鸡样的脸复原，但元气已受损伤。月光妹妹：“哈哈！这位魔头的业务极为胡闹哦！非常有胡闹性呢！”女科长Ｏ． 雯娃姑婆：“啊哈！我要让你们知道什么是腐臭派！什么是腐烂流！什么是夸张华丽风格！”月光妹妹：“哈哈！小老样，有什么菜谱都弄出来瞧瞧！”女科长Ｏ ．雯娃姑婆 ：“啊哈！我让你享受一下『银丝酒佛鸡眼咒』的厉害！”女科长Ｏ．雯娃姑婆突然很小的水红色蜜桃一般的脸罩闪眼间流出浓褐爽影色的乳现月光味……花哨的舌头透出病 态狗跳苦颤声和哼嗷声……有些魔法的风衣忽亮忽暗穿出驴怪萎现般的飘忽！接着耍了一套，窜马泳圈翻一千零八十度外加鹰哼泳池旋七周半的招数，接着又玩了一个，妖体 马飞凌空翻七百二十度外加呆转九百周的震撼招式。紧接着如同葫芦一样的脚顿时狂舞收缩起来……很小的胡须透出深黑色的阵阵幽雾……怪异的眼睛透出深青色的丝丝怪音 。最后扭起嫩黄色路灯造型的美辫一吼，萧洒地从里面滚出一道幻影，她抓住幻影经典地一旋，一件明晃晃、绿莹莹的咒符『银丝酒佛鸡眼咒』便显露出来，只见这个这件怪 物儿，一边摇晃，一边发出“咻咻”的猛音。！猛然间女科长Ｏ．雯娃姑婆高速地整出一个俯卧狂舞钻霓虹灯的怪异把戏，，只见
高二生物微生物的分离和纯培养
《尚书?无逸》：“相小人，厥父母勤劳稼穑，厥子乃不知稼穑之艰难，乃逸乃谚既诞。否则侮厥父母曰：‘昔之人无闻知’。”这几句话很生动，大概是我们最古的代沟之说的一个例证。大意是 说：请看一般小民，作父母的辛苦耕稼，年轻一代不知生活艰难，只知享受放荡，再不就是张口顶撞孩子嘛，总 是贪玩。好逸恶劳，人之天性。只有饱尝艰苦的人，才知道以无逸为戒。作父母的人当初也是少不更事的孩子，代代相仍，历史重演。一代留下一沟，像树身上的年轮一般。
代沟是翻译过来的一个比较新的名词，但这个东西是我们古已有之的。自从人有老少之分，老一代与少一代之间就有一道沟，可能是难以飞渡的深沟天堑，也可能是一步迈过的小渎阴沟，总之是其 间有个界限。沟这边的人看沟那边的人不顺眼，沟那边的人看沟这边的人不像话，也许吹胡子瞪眼，也许拍桌子卷袖子，也许口出恶声，也许真个的闹出命案，看双方的气质和修养而定。玩球网
高二生物微生物的分离和纯培养
晚饭时，起风了，那些残留的发黄树叶，沙沙作响，不时飞落几片，混同雪花被车轮无情地碾入泥水中。忽然，这雪姑娘大概不堪风的蛊惑，于恍惚的路灯光下大展芳华。基于黑暗的遮掩，她大胆 地放下矜持和淑秀，旁若无人，如痴如醉，畅快悠扬，又激情四射，-----我不知该如何形容才好，总之她尽情地舞起曼妙的身姿，是那么的潇洒，活脱又有点张狂。顺灯光望去，如群蝶乱舞，似风卷梨 花。
历经一夏的燥热，又经过一秋的愁雨秋风，这初来的雪，倍感新鲜，心情略显激动，兴奋无眠意，就悄悄地站在阳台窗后，屏声静气，细细欣赏起来。生怕惊扰了雪姑娘的兴致，也坏了我的心情。
看着飘飘荡荡的飞雪，很难想象，它是怎么由水气变成大片的雪花，又从那么高的高空，怎样的飘落下来。楼前的回旋风，卷起它们，划出道道弧线，消失在灯影暗处，有时也会打在窗户玻璃上， 无声无息，不像雨，啪啪作响。不一会，地上铺满了厚厚的一层，草坪上那些发黄的草，若隐若现。水泥道上的枯枝落叶不见了，在他们的埋身处，鼓起一个个小包，也许这就是它们的坟墓。曾经的光 鲜嫩绿，曾经的生机朝气，一同进入坟墓，最终会化为泥土，去滋养下一轮的繁华。这是自然法则，生生不息，从某种角度上说，也算凤凰涅槃，得
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第1章微生物培养技术第1节微生物的分离和纯培养学业达标测评
一、选择题
1．在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母菌，其结果如图所示，造成这种结果的原因是培养液中(
)
A．缺少无机盐B．含氧量太高C．缺少有机养分D．不含二氧化碳【解析】绿藻(自养)增多，酵母菌(异养)数量减少，说明培养基中缺少有机碳源。
【答案】
C
2．下表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法中，错误的是(
)
编号①②③④⑤成分(NH 4)2SO 4KH 2PO 4FeSO 4CaCl 2H 2O 含量
0.4g
4.0g
0.5g
0.5g
100mL
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C．表中各成分的重量按照所培养的微生物的营养需要来确定D．若除去①，此培养基可用于培养大肠杆菌【解析】
由表格可知，该培养基不含有机物，且无碳源，因此可培养自养型微生物，
大肠杆菌为异养型，除去①之后，培养基中缺少碳源和氮源，大肠杆菌无法生长。
【答案】
D
3．如何判断制作的培养基是否灭菌彻底()
A．看培养基是否透明B．有没有消灭细菌菌体
C．未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天后有无菌落生长D．是否消灭了微生物的芽孢、孢子【解析】
配制好的培养基，是否灭菌彻底，通常在使用前在恒温箱中保温1～2天后
检验有无菌落生长，若无则说明灭菌彻底。
【答案】
C
4．无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是()
A．对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行灭菌
B．将用于微生物的培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
【解析】对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁是消毒而不是灭菌。
【答案】A
5．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是()
①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤
【解析】培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，用干热灭菌法；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底灭菌的效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，牛奶可采用巴氏消毒法。
【答案】A
6．下列所述环境条件下的微生物，能正常生长繁殖的是()
A．在缺乏生长素的无氮培养基中的圆褐固氮菌
B．在人体表皮擦伤部位的破伤风杆菌
C．在新配制的植物矿质营养液中的酵母菌
D．在灭菌后的动物细胞培养液中的禽流感病毒
【解析】圆褐固氮菌能够产生生长素，因此可以在缺乏生长素的无氮培养基中正常生长繁殖。
破伤风杆菌是一种厌氧型细菌，人体表皮擦伤部位是有氧的环境，因此，破伤风杆菌不能正常生长繁殖；酵母菌是一种异养型微生物，新配制的植物矿质营养液中缺少有机碳，因此酵母菌不能正常生长繁殖；禽流感病毒不能独立生活，只能寄生在活的细胞中，因此禽流感病毒不能在灭菌后的动物培养液中正常生长繁殖。
【答案】A
7．某生物兴趣小组到野外采集能分解纤维素的细菌，他们在一段枯木上采集到部分细菌，如何将分解纤维素的细菌分离出来()
A．用牛肉膏蛋白胨培养基
B．用不含氮的培养基
C．用以纤维素为唯一碳源的培养基
D．不含氮的培养基上用平板划线法也可以选出
【解析】牛肉膏蛋白胨培养基为全营养培养基，细菌都可以生长；不含氮的培养基上，分解纤维素的细菌也不能生长。
【答案】C
8．根据生物与环境的相互依存关系判断，下列寻找目标菌株的思路不正确的是() A．从热泉中寻找耐热细菌
B．从成熟的葡萄皮上寻找酵母菌
C．从贫瘠的土壤中寻找分解尿素的细菌
D．从树林的腐殖土壤中寻找分解纤维素的细菌
【解析】贫瘠的土壤中没有分解尿素的细菌，较肥沃的土壤中才有。
【答案】C
二、非选择题
9．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了如下实验。
实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。
请回答与此实验相关的问题。
(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。
除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。
(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________。
(3)为了使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。
一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。
【解析】(1)蛋白胨可提供碳源、氮源、维生素，而淀粉可提供碳源，除此之外，微生物的生长还需无机盐和水。
(2)对培养基的灭菌，在实验室内常用高压蒸汽灭菌法。
(3)在实验的过程中，除实验变量以外其他各变量均应适宜且相同，以利于更好地实现实验目的。
(4)不同的菌落具有各自的菌落特征(如硬度、颜色、透明度、光滑度等)。
【答案】(1)氮源、生长因子(碳源不作要求)碳源无机盐水(后两空顺序可颠倒)
(2)高压蒸汽灭菌法(3)无菌水
(4)多高(或严重)
10．检验饮用水中大肠杆菌的含量是有效监控疾病发生的必要措施。
下图表示相关的检验过程。
(横线上填文字，[]内填编号)
(1)图中需要无菌操作的过程有[]。
(2)经过过程①～③，样品被稀释了________倍，其目的是
______________________________________________________________
______________________________________________________________。
(3)在进行过程③之前，需要随机取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，这样做的目的是____________________。
接种微生物的方法有很多，图中过程③的方法为____________。
下列示意图与过程③方法对应的结果是[]。
a b
【解析】(1)在稀释和涂布操作中，为避免杂菌污染，都需进行无菌操作。
(2)①过程样品被稀释了10倍，②过程进行了4次共稀释了104倍，因此样品被稀释了105倍。
经稀释后的样液涂布到平板上才能形成单个菌落。
(3)随机取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，如果无菌落出现，说明平板灭菌彻底，否则不彻底。
图中过程③方法为稀释涂布法，a、b两个培养结果示意图分别是用平板划线法和稀释涂布法接种所得。
【答案】(1)①②③
(2)105培养后形成单个菌落
(3)检测培养基平板灭菌是否合格稀释涂布法b。