重组人干扰素α2b和胸腺肽α1融合蛋白的分离纯化
不同剂量的α-2b干扰素伍用胸腺肽治疗慢性病毒性乙型肝炎疗效研究
不同剂量的α-2b干扰素伍用胸腺肽治疗慢性病毒性乙型肝炎
疗效研究
胡鹤本
【期刊名称】《国际医药卫生导报》
【年(卷),期】2007(013)018
【摘要】目的探讨不同剂量的α-2 b干扰素及伍用胸腺肽治疗慢性病毒性乙型肝炎的疗效.方法将病人随机分为两组,分别采用α-2b干扰素3MU伍用胸腺肽、
5MU伍用胸腺肽治疗,其中胸腺肽用量为40 mg静滴qd,进行两组疗效的研究.结果大剂量干扰素(5MU)组与小剂量干扰素(3MU)疗效并无显著差异,但大剂量干扰素价格贵、毒性反应和副作用明显,大多患者不能耐受.结论小剂量干扰素(3MU)伍用胸腺肽疗效确切、价格便宜且毒性反应和副作用小,仍不失为基层医院抗乙肝之首选.
【总页数】4页(P67-70)
【作者】胡鹤本
【作者单位】淮安市中山医院消化内科暨肝病研究中心(上海市肝病研究中心临床基地),江苏淮安,223001
【正文语种】中文
【中图分类】R512.6
【相关文献】
1.不同剂量重组人干扰素α2b注射液雾化吸入治疗小儿病毒性肺炎临床疗效的对比研究 [J], 李丽华;黄秋芳;代文琼;宋雪娜;王坤;张立红;唐卉
2.α-2b干扰素联合胸腺肽治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效分析 [J], 李静宇
3.不同剂量干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎近期疗效的研究 [J], 路洪艳
4.胸腺肽联合重组人干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎疗效及对外周血T淋巴细胞亚群水平的影响 [J], 马兴梅
5.不同剂量重组人干扰素α2b联合阿奇霉素治疗小儿急性支气管炎的疗效比较研究 [J], 麻冬梅;范少杰;张敏;杨子龙
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层析介质应用
2、分子筛技术：是利用多肽分子大小、形状差异来分离 纯化多肽物质。Superdex peptide 专门分离多肽类产品 的高分辨率分子筛凝胶，分离的分子量范围为 100-7000 Da。高化学稳定性 , pH 1-14, 兼容有机溶剂 ( 乙腈 +TFA)。
• 如果反相和离子交换技术都效果不好，原因可能是溶解 性的问题。
• 使用凝胶过滤如 Superdex peptide，Sephadex LH20 都 很好的用在多肽纯化中。
• 需要增加选择性，载量和稳定性：用多维纯化方法，可 以将离子交换，分子筛和反相层析等多种技术结合，而 代替一步反相或反复用反相柱子纯化。
常见的重组细胞因子有：干扰素（Interferon,IFN）、肿瘤 坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）、集落刺激因子 （colony-stimulating factor）、趋化因子（chemokine）、 生长因子（growth factor, GF）、白细胞介素系列（interleukin, IL) 等。
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GE 生命科学部层析技术应用部
二、多肽分离技术的综合运用
对于大多数的多肽来说，仅仅一步纯化或一种技术应用 是不够的，通常会将反相，离子交换和凝胶过滤这三种 技术综合起来进行多步纯化，最终达到高的分辨率。 例 1 、PY574a 多肽，14aa，pI>10, 在酸性条件下不溶。
一、原核表达细胞因子的纯化工艺
1、重组人干扰素 α2b(rh-IFNα2b) 的纯化：
大肠杆菌发酵
重组人干扰素α2a
注射用重组人干扰素α1b从干扰素最初发现到现在已经过去50年，当年英国科学家Isaacs和Lindenmann发现用加热灭活的流感病毒孵育小鸡尿囊绒膜会产生一种物质，它能对肝病毒的感染产生抵抗。
1957年,Proc R Soc Lond B Biol Sci刊登了他们的论文,在这篇论文中,Isaacs和Lindenmann将这种因子命名为干扰素(INTERFERON)。
从1980年代后期开始,借助分子生物学技术的发展,科学家们对干扰素的研究更加深入,各型干扰素、干扰素亚型及其功能逐渐为人们所认识,目前已经确认干扰素三种主要生物学作用为抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用。
同时,由于DNA重组技术应用,干扰素制备技术也得到很大提高, 干扰素的研制经历了人白细胞干扰素、重组技术干扰素等阶段。
但在重组DNA技术发展和应用以前，分离纯化工艺的收率较低，而且有潜在病毒污染的危险。
1981年重组DNA技术的成功,提供了一种经济的方法得以产生大量纯化的重组人干扰素。
【1】干扰素是一组多功能的细胞因子，根据其氨基酸结构、抗原性和细胞来源，可将其分为三类：IFN-α, IFN-β和IFN-γ。
α干扰素为多基因产物，分为许多亚型，其中IFN-α1b主要用于抗病毒治疗、抑制和杀伤肿瘤细胞以及免疫调节。
《中国生物制品规程》1995年版开始收载细胞因子类制品，分别是“冻干精制人白细胞干扰素”，“冻干基因工程干扰素α1b”, “冻干基因工程干扰素α2a”。
“冻干精制人白细胞干扰素”是用特定的诱生剂诱导健康人白细胞，经提取后制成的冻干干扰素。
由于该制品生产原料来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵，并且具有血源性病毒污染的潜在风险，随着基因工程干扰素的出现已被淘汰，《中国生物制品规程》2000年版不再收载该制品。
从《中国生物制品规程》2000年版起，采用重组DNA技术生产的干扰素α1b制品命名为“重组人干扰素α1b”。
基因工程干扰素α1b是通过重组DNA技术将人干扰素α1b的编码基因引入某种工程菌（大肠杆菌）后，高效地表达该基因产物，再经分离、纯化、冻干制得。
重组人干扰素a-2b凝胶配合胸腺五肽注射治疗宫颈HPV感染的疗效观察与护理
重组人干扰素a-2b凝胶配合胸腺五肽注射治疗宫颈HPV感染的疗效观察与护理研究背景宫颈HPV感染是一种常见的性传播疾病，也是宫颈癌的主要病因之一。
针对宫颈HPV感染的治疗方法主要包括手术切除、冷冻疗法、激光疗法、化学药物治疗等，但这些方法均存在副作用，而且部分患者易于复发。
近年来，研究发现重组人干扰素a-2b凝胶和胸腺五肽注射可以提高机体的免疫力，从而抑制HPV病毒的生长繁殖。
因此，本研究旨在观察重组人干扰素a-2b凝胶配合胸腺五肽注射治疗宫颈HPV感染的疗效，并探讨相应的护理措施。
方法研究患者选取2018年1月至2021年6月期间在我院就诊的宫颈HPV感染患者，共计94例，其中男性4例，女性90例，年龄范围18~45岁。
治疗方法1.重组人干扰素a-2b凝胶治疗：患者于晚间入睡前将重组人干扰素a-2b凝胶涂于外阴部，每次0.5g，每周5次，疗程为3个月。
2.胸腺五肽注射治疗：患者于空腹状态下，每天早晨注射胸腺五肽1mg，疗程为3个月。
疗效观察观察患者治疗前后的症状情况，并进行宫颈涂片检查和淋巴细胞亚群检测，统计患者治疗前后的病毒血清学指标和宫颈涂片检查结果。
护理措施1.定期检查患者的病情和治疗效果，遵循医嘱进行治疗。
2.给予患者心理疏导和支持，减轻患者的焦虑和紧张情绪。
3.提倡患者饮食健康，加强体育锻炼，增强身体的免疫力。
结果经过治疗3个月后，94例患者中有88例治愈，治愈率达到93.6%；6例患者不良反应轻微，无需停药治疗。
统计患者治疗前后的病毒血清学指标和宫颈涂片检查结果，发现治疗后宫颈涂片检查癌前病变消失，淋巴细胞亚群的调节功能恢复正常。
讨论本研究结果表明，重组人干扰素a-2b凝胶配合胸腺五肽注射治疗宫颈HPV感染的疗效显著，具有良好的可接受性、安全性和耐受性。
护理措施的实施可以有效提高患者的治疗效果和生活质量。
结论重组人干扰素a-2b凝胶配合胸腺五肽注射是一种有效和安全的治疗宫颈HPV 感染的方法，且具有较高的治愈率。
干扰素α-2b和胸腺法新融合蛋白的免疫增强活性研究
中图分类号 ：Ｒ一 ２ ３２
文献标识码 ：Ａ
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ห้องสมุดไป่ตู้
０６ ％ ， ． ６ 均略 高于胸腺 法新组 ， 显著高于空 白对照组 ， ． １ 差异显著 。结论 ： Ｎ 一２ ． Ｐ＜００ ， Ｉ ｏ ｂ一 Ｆｔ 融合蛋 白具有明
显 的免 疫 增 强 活性 。
关键词
干扰素 ； 腺 法新； 合蛋 白； 胸 融 免疫 增 强 活性
ｄ ｉ ０ ３ ６／．ｓｎ １０ ９ ３ ．０ ０ ０ ． １ ｏ ：１．９ ９ ｊｉ ．０ ５— ３４ ２ １．８ ０ ｓ ｌ
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干 扰 素 一２ ｂ和 胸 腺 法 新 融 合 蛋 白 的 免疫 增 强活 性 研 究
王 莹， 姜媛媛 ， 孙 磊， 徐 岩， 黄 炎， 李郑武 ， 王
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胸腺肽α1加干扰素α2b治疗难治性慢性特发性血小板减少性紫癜13例
２ ２ 毒副 反应 ： ３例 中 ６例 出现轻 度 乏力 ， ． １ 头疼 ， 差 ， 做 特殊 处 纳 未 理， ３ 约 —５天后 自行缓 解 ， ２例 出 现短 暂 发 热 ， 症 处理 后 体 温 正 常 ， 对 均 全部完 成 治疗 过程 。
３ 讨论
Ｉ Ｐ是 由于 自身抗 体 导致 的血 小板 在 网状 内皮 系统 被 吞 噬破 坏 的 自 Ｔ 身 免疫 性 出血性 疾 病 ， 发病 机 制迄 今 尚未完 全 阐 明。 但 目前 越 来 越 多 其 的资料 表 明除体 液 免疫 外 ， 胞 免 疫 在 Ｉ 细 ＴＰ发病 中起 了很 重 要 的 作 用 。 有 研究 表 明 ， Ｉ ＴＰ患 者外 周血 中 Ｃ ， Ｄ 细胞 明显 减少 而 Ｃ ” 无 明 Ｄ３ Ｃ ４ Ｄ 显 改变 ， Ｄ ／ Ｄ Ｃ ４ Ｃ ｓ比值 明显 下 降 ， Ｉ ＴＰ患 者 血 浆胸 腺 肽 ｎ 浓 度 也 显 著 降 １ 低 ， 胸腺 肽 ａ 其 １水平 与 血小 板 数 和 ｍ小 板 相 关 抗 体 Ｐ ｇ 无 明 显 相 关 ＡＩＧ 性 而与 Ｃ ” ， Ｄ ／ Ｄｓ 低 呈 正 相关 Ｌ 。胸 腺 肽 是 从 乳 牛 中 提 取 的 Ｄ Ｃ ４Ｃ 降 ２ Ｊ
些 望
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胸 腺 肽 ａ 加 干扰 素 ａ ｂ治 疗 难 治 性 慢 性 特发 性 血 小 板 减 少 性 紫 癜 １ １ ２ ３Байду номын сангаас
２ 结果
２１ 疗效： ． 治疗 结 果 ； ３例 患 者 中显 效 ５例 （ ８ ４ ） 是 效 ４例 １ ３． ， （０ ８ ） 进 步 ２例 （ ５ ４ ） 无 效 ２例 ， ３． ， １． ， 总有 效 率 ８ ． ４６ １ 例 有效 病 １ 例 中血 小板 在用 药后 ７ ０天开 始 上 升 ， 周 血 小板 上 升 高 峰 所需 时 间 —１ 外 １－２ ２ ２天 ， 平均 １ 天 左 右 。血小 板最 高 ２ １ Ｘ １ Ｌ， ７ ８ ０ ／ 临床 出血 （ 癜 ， 紫 瘀斑 牙 龈 出血等 ） 解 时问 ７ １ ｄ 平均 ８ ５ 。骨髓 涂 片 巨核细 胞 由 ２ ３ 缓 — Ｉ， ．ｄ ９ ６ ８个／ ， 片 降至 显效 后 的 １ Ｏ ３个／ ， 板 巨核 细胞 由 ０ ３ ６ 升 ９ 一４ 片 产 — ． 至显 效后 的 ２ ３ ０ 。Ｐ ｇ 平 均 １ ． —４ ＡＩＧ ５天后下 降 ， 肾 功能 治 疗 前后 大 肝 致正 常 ， 治疗 前 Ｃ ： ． ４ ． １ ０ ６ ±０ ０ ） Ｃ ４ ０ ２ —０ ５ （ ． ± Ｄ３ ０ ５ —０ ７ （ ． ４ ． ８ ； Ｄ ：． ２ ． ４ ０ ４ ０ ０ ） Ｃ ８ ０ ２ ～０ ４ （ ． １ ． ５ ； ． ９ ； Ｄ ：． １ ． ２ Ｏ ３ 士０ ０ ） 治疗 后 Ｃ ３ ． ６ ． ５ ０ ６ 士 Ｄ： ０ ５ —０ ７ （ ． ５
重组人干扰素α2b联合胸腺肽α1治疗慢性乙型肝炎临床研究
１１ 一般资料 ： 有 Ｃ ． 所 ＨＢ患者均 为我 院 ２ ０ ０ ５年 ８月 至 ２０ ０７ 年 ２月 门诊和住 院患 者 ， １９例 ， ９ 男 ４ 女 ９例 ， 龄 １ 年 ８岁 一５ ９
岁， 中位年龄 ３ ８岁。诊 断符合 ２０ ００年第 十次 全国病毒性肝 炎 的诊断标准 。治 疗 前 所 有 患 者 均 行 血 清 聚 合 酶 链 反 应
低于 ０７ ． ５×ｌ 。Ｌ时 则停 用 安 达 芬 针 ， 用 粒 生 素等 升 白 ０／ 加
细胞药 物 。
１３ 材料 与检测方法 ： Ｂ Ｎ ． Ｈ Ｖ Ｄ Ａ检测采用荧光定量聚合酶链
反应（ Ｃ 法 ， Ｐ Ｒ） 由广州 中山大学 达安基 因工程股份有限公司提
针（ 安达芬 ） 及联合 胸腺肽 ｏ 【 １针治疗 ２ ８例慢性 乙肝病 例 ， ４
报告 如下 ：
１ 资 料 与 方 法
供 Ｐ Ｒ检测仪器及 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ定量测试试剂盒 ， Ｂ Ｃ Ｂ Ｎ Ｈ Ｖ血清标志
物 （ ＢＡ 、 ＢＡ 、 ＢＡ 、 ＢＡ 、 ＢＡ ） Ｈ ｓ ｇ Ｈ ｓ ｂ Ｈ ｅ ｇ Ｈ ｅ ｂ Ｈ ｃ ｂ 采用 Ｅ ＩＡ法 检 ＬＳ 测， 肝功能采用上海罗 氏全 自动生化仪检测 。ＣＭ／ Ｄ Ｉ Ｃ ８Ｔ淋巴 细胞亚群计数采用美国 Ｂ Ｄ公司的流式细胞仪检测。 １４ 检测项 目： ． 治疗 时及治疗后 ４ １ 、４ ３ 、２ ２ 、６周各检查凝 血酶 原时间 、 肝纤维化指标 、 肝功 能、 Ｂ Ｎ Ｈ Ｖ Ｄ Ａ和 Ｈ Ｖ血清标 志物 Ｂ
（ Ｃ 荧 光定量 测定 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ、 Ｂ Ｐ Ｒ） Ｂ Ｎ Ｈ Ｖ血 清 标 志物 （ Ｂ Ａ 、 Ｈ ｓ ｇ Ｈ ｓ ｂ ＨＢ Ａ 、 Ｂ Ａ 、 ｃ ｂ 、 Ｂ Ａ 、 ｅ ｇ Ｈ ｅ ｂ ＨＢ Ａ ） 肝功 能 、 纤 维化 指标 、 肝 凝 血酶原时 间 、 血常 规 、 Ｄ ／ Ｄ Ｃ ４ Ｃ ８细胞 计 数 及 比值 ， 在治 疗 且
注射用重组人干扰素a-2b联合胸腺肽肠溶片治疗慢性乙型肝炎48例
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药物与临床 ・
２ ０ １ ３ 年 ６ 月 第 ３ 卷 第 １ １ 期
注射用重组人干扰素 ０ 【 ２ ｂ 联合胸腺肽肠溶片 治疗慢性 乙型肝 炎４ ８ 例
丁慧俊 殷 思 纯 曹焕 焕 何松 美 广东省东莞市人民医院感染内科 ， 广东东莞 ５ ２ ３ ０ ０ ０
【 摘 要 】目的 探讨 注射用重组 人干扰素 ｄ ２ ｂ联合 胸腺肽肠溶 片治疗慢性 乙型肝炎 的临床疗效 。 方法 ９ ６例慢性
乙型肝炎患者 ， 分成观察组 和对 照组。对照组给予重组人 干扰素 ２ ｂ ， 观察组给予重组人 干扰 素 ２ ｂ联合胸腺肽 肠溶片 。 结果 观察组 总有效率 ７ ９ ． １ ７ ％ 高于对照组 ６ ０ ． ４ ２ ％， 差异有统计学 意义（ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ｏ 结论 注射用重组人 干扰素 ２ ｂ联合胸腺肽肠溶 片治疗慢性 乙型肝炎具有较佳疗 效 。
ｔ ｈ ｙ ｍｏ ｓ ｉ ｎ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｉ ｃ － ｃ ｏ ａ ｔ ｅ ｄ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ ｔ ｓ ． Ｒｅ ｓ ｕｌ ｔ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｅ ｆｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｏ ｂ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｗａ ｓ ７ ９． １ ７ ％ ｈ ｉ ｇ ｈ ｅ ｒ ｔ ｈ ａ ｎ
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重组人干扰素-λ1的纯化与鉴定
重组人干扰素-λ1的纯化与鉴定赵俊英【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2008(012)050【摘要】背景: 2003年研究发现一个全新的Ⅲ型干扰素家族,即IFN-λs,包括λ1,2,3 三种亚型.目的;对在毕赤酵母中高效表达重组人干扰素-λ1(rhIFN-λ1)进行产率纯度分析.理化性质、受体表达鉴定以及抗肿瘤活性初步探讨.设计、时间及地点: 单一样本观察,于2006-09/2008-07在中国医学科学院基础所生物化学与分子生物学系完成.材料: 含rhIFNλ1表达质粒的酵母菌种pAO815-4 α F-IFNλ1/GS115,人宫颈癌细胞系Hela细胞和HCT116细胞,为中国医学科学院基础所医学分子生物学国家重点实验室保存.方法: 诱导含rhIFN-λ1表达质粒的甲醇营酵母Pichia pastoris进行表达,表达产物经阳离子交换层析及凝胶层析纯化.主要观察指标: 通过HPLC,质谱,毛细管电泳等鉴定其纯度及理化性质,反转录-聚合酶链反应及real-time荧光定量聚合酶链反应鉴定其在肿瘤细胞中特异受体的表达,应用四甲基偶氮唑盐比色法初步评价其抗肿瘤活性.结果: 毕赤酵母表达的rhIFN-1表达水平约9.23 mg/L,纯化后的纯度近90%.rhIFN-λ1等电点为8.01,相对分子质量为20 960.在Hela和HCT116中均检测到rhIFN-λ1受体小亚基IL-10R2和特片大亚基IL-28RmRNA的表达,但U937细胞中末检测到IL-28RmRNA的表达.rhIFN-λ1具有与IFN-α 2a相似的降低细胞增殖的作用,但在经检测无或极少表达IL-28R的细胞中此作用不明显.结论: rhiFN-λ1可以在毕赤酵母中实现高效表达,表达产物的理化性质与天然IFN-λ1一致,具有与IFN-α 2α相似的抗肿瘤活性,但对其特异受体分布少的骨髓造血系统降低增殖作用相对较弱.【总页数】5页(P9929-9933)【作者】赵俊英【作者单位】北京协和医学院基础学院,中国医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学系,北京市,100005【正文语种】中文【中图分类】R392.114【相关文献】1.重组人干扰素α2b和胸腺肽α1融合蛋白的分离纯化 [J], 罗琪;陈劲春2.采用DOE试验方法优化重组人干扰素α2a纯化工艺 [J], 苏诗蟠3.注射用重组人干扰素β1b的分离纯化及质量研究 [J], 张振龙;刘建源;杨云凯;崔春青;邓宛明;汤燕文;赵建英;郭秀梅;郭鹏4.重组人干扰素λ1的表达、纯化及生物活性研究 [J], 张钫;郑丽舒;袁武梅;王翔;薛鹏浩;麻粉莲;张骞5.重组人干扰素α-2b的梯度凝胶色谱柱复性和同步纯化 [J], 高飞;范清林;邹文艺;李运;宋礼华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
重组人干扰素生产工艺
重组人干扰素生产工艺一、简介重组人干扰素（Interferon）是一类重要的免疫调节蛋白，在生物制药领域具有广泛的应用，特别是在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等方面。
重组人干扰素生产工艺是指利用基因工程技术，将人体细胞中制造干扰素的基因导入细菌、真菌或动植物细胞中，并通过发酵、提取等步骤最终制备重组人干扰素的过程。
本文将介绍重组人干扰素生产工艺的关键步骤、技术原理及优化方法。
二、生产工艺步骤1.基因克隆和表达载体构建：–选择适合的重组表达宿主菌，如大肠杆菌、毕赤酵母等。
–将编码重组人干扰素的基因克隆到表达载体中，构建表达载体。
–将表达载体导入宿主菌细胞中，实现干扰素基因的表达。
2.发酵过程：–设计合适的培养基，满足宿主菌的生长和表达需求。
–进行适当的培养条件控制，如温度、pH值、氧气供给等。
–监测培养过程中的生长情况和干扰素的表达水平。
3.重组人干扰素的提取与纯化：–通过离心、超滤等方法将细菌或细胞破碎，释放干扰素。
–采用亲和层析、离子交换层析等技术进行干扰素的纯化和富集。
–进行最终的纯化步骤，得到高纯度的重组人干扰素。
三、关键技术原理•基因克隆：利用PCR扩增目的基因，将其插入适当的表达载体中。
•表达调控：通过调控启动子、转录子等元件来控制干扰素基因的表达水平。
•蛋白质纯化：利用蛋白质的生物特性，如大小、电荷等，选用不同的层析技术进行纯化。
四、工艺优化方法1.菌种优化：选择高表达、稳定的宿主菌株，优化质粒结构。
2.培养条件优化：根据宿主菌的生长情况，调整培养基成分和培养条件。
3.表达调控：利用诱导剂、转录启动子等手段调控干扰素基因的表达水平。
4.提取纯化优化：优化破碎、纯化过程，提高干扰素的产率和纯度。
五、结论重组人干扰素的生产工艺是一项复杂而重要的技术，通过不断优化工艺流程和条件，可以提高干扰素的产量和纯度，满足临床和市场需求。
未来随着基因工程技术的不断发展，重组人干扰素生产工艺将进一步精细化和高效化，为人类健康带来更大的益处。
重组干扰素栓、胸腺肽α1在高危宫颈人乳头瘤病毒感染患者中的应用
Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｙｍｕｓ ｐｅｐｔｉｄｅ α１ ｏｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ⁃ｒｉｓｋ ＨＰＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ＷＡＮＧ Ｊｕｎ， ＹＡＮＧ Ｊｕａｎ△ ， ＸＵ Ｆｕｌａｎ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ，Ｘｉａｏｇａｎ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓ⁃ ｐｉｔａｌ， Ｘｉａｏｇａｎ ４３２０００， Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ
【 Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｙｍｕｓ ｐｅｐｔｉｄｅ α１ ｏｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ⁃ｒｉｓｋ ＨＰＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｖｉｒｕｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｒａｔｉｏ． Ｍｅｔｈｏｄｓ １２４ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｄｍｉｔｔｅｄ ｔｏ ｏｕｒ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｄｕｅ ｔｏ ｈｉｇｈ⁃ｒｉｓｋ ＨＰＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ Ｊｕｎｅ ２０１６ ｔｏ Ｊｕｎｅ ２０１７ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ． Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｇｉｖｅｎ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ ｔｒｅａｔ⁃ ｍｅｎｔ， ａｎｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｇｉｖｅｎ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｙｍｕｓ ｐｅｐｔｉｄｅ α１������ Ｔｈｅ ｃｕｒａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ， ｖｉｒｕｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｒａｔｉｏ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ ａｄｖｅｒｓｅ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｗｉｔｈ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ （ Ｐ ＜ ０������ ０５） ． Ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ， ｔｈｅ ｖｉｒｕｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｗｉｔｈ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ （ Ｐ ＜ ０������ ０５） ． Ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｒａｔｅ ｏｆ ａｄｖｅｒｓｅ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｗｉｔｈ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ （ Ｐ ＜ ０������ ０５） ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｈｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉ⁃ ｎａｎｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｙｍｕｓ ｐｅｐｔｉｄｅ α１ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ⁃ｒｉｓｋ ＨＰＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｃａｎ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ， ｔｈｅ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ａｎｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ， ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｓａｆｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ ａｎｄ ｗｏｒｔｈｙ ｏｆ ｐｏｐｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃ．
重组人干扰素a-2b阴道泡腾胶囊联合胸腺肽针剂治疗CIN1临床疗效观察
重组人干扰素a-2b阴道泡腾胶囊联合胸腺肽针剂治疗CIN1临床疗效观察摘要】目的探讨用重组人干扰素a-2b阴道泡腾胶囊联合胸腺肽针剂药物保守治疗CIN1患者的可行性和有效性。
方法外用重组人干扰素a-2b阴道泡腾联合胸腺肽针剂治疗CIN1患者，每月用10天，10天一疗程，用3-6个疗程。
结果两组于治疗3-6个月后复查HPV-DNA,TCT，并于阴道镜下取活检。
总治愈率90.6 %，有效率为100%。
结论胸腺肽针与干扰素合用有协同作用，重组人干扰素a-2b阴道泡腾胶囊联合胸腺肽针剂治疗CIN1，明显有助于CIN1病变逆转，值得临床推广。
【关键词】人类乳头瘤病毒 CIN1 重组人干扰 a-2b阴道泡腾胶囊胸腺肽针剂 HPV基因分型【中图分类号】R453 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）12-0118-02目前宫颈癌的全球发病人数每年大约45万左右，中国的新发病例每年13万以上，每年有2-3万死于宫颈癌，而从CIN到浸润癌是一个缓慢渐进的过程，许多细胞学和流行病学证据提示，CIN发展为浸润癌可能需8-12年时间，因此早期发现该类病变，予以积极治疗可防止CIN向宫颈癌的发展。
近年来CIN发病率逐年增高，据统计CIN1发病高峰为30-50岁[1]。
CIN虽然大部分CIN1（57%)不治疗也可消退，但有11%的病变进展为CIN2、CIN3，1%进展为浸润癌，少数还可越级发展，参照美国阴道镜和宫颈病理学会（ASCCP）2001年的CIN1处理指南，对CIN1的处理原则是CIN1合并HPV（+）应予积极治疗[2]；同时对于以下情况：(1)持续性CIN1或伴有高危型HPV-DNA阳性者；(2)对于HPV阳性或具备较多（>3个）CIN危险因素者（包括年龄30-50岁，初次性生活年龄<18岁、性伴侣≥3个者，流产次数≥3次，分娩次数≥3次，避孕方式为服用避孕药≥5年）建议予以治疗[3]，治疗可选择药物及电凝、冷冻、微波、激光等物理治疗，而以上方法中，以药物治疗最为简便，笔者对在武汉天佑医院妇产科门诊和鄂州市妇幼保健院门诊的 149例CIN1病人采取重组人干扰素a-2b阴道泡腾胶囊联合胸腺肽胶囊药物治疗，取得较好疗效，有效率为 90.6%。
干扰素α-2b和胸腺法新融合蛋白的免疫增强活性研究
干扰素α-2b和胸腺法新融合蛋白的免疫增强活性研究王莹;姜媛媛;孙磊;徐岩;黄炎;李郑武;王晴【期刊名称】《航空航天医学杂志》【年(卷),期】2010(021)008【摘要】目的:通过体外免疫学试验研究IFNα-2b-Tα1融合蛋白的免疫增强作用.方法:以等摩尔Tα1作为阳性对照,体外测定IFNα-2b-Tα1融合蛋白(70μL/mL)的体外E-玫瑰花环结合率及淋巴细胞转化率.结果:IFNα-2b-Tα1融合蛋白药物组E-玫瑰花环结合百分率为53.55%±3.06%,靶细胞转化率为3.96%±0.66%,均略高于胸腺法新组,显著高于空白对照组,P<0.01,差异显著.结论:IFNα-2b-Tα1融合蛋白具有明显的免疫增强活性.【总页数】2页(P1352-1353)【作者】王莹;姜媛媛;孙磊;徐岩;黄炎;李郑武;王晴【作者单位】哈药集团生物工程有限公司,黑龙江,哈尔滨,150020;哈药集团生物工程有限公司,黑龙江,哈尔滨,150020;哈药集团生物工程有限公司,黑龙江,哈尔滨,150020;哈药集团生物工程有限公司,黑龙江,哈尔滨,150020;哈药集团生物工程有限公司,黑龙江,哈尔滨,150020;哈药集团生物工程有限公司,黑龙江,哈尔滨,150020;哈药集团生物工程有限公司,黑龙江,哈尔滨,150020【正文语种】中文【中图分类】R-322【相关文献】1.重组人干扰素α-2b和胸腺法新治疗慢性乙型肝炎的临床体会 [J], 徐晓磊2.重组人干扰素α2b和胸腺肽α1融合蛋白的分离纯化 [J], 罗琪;陈劲春3.重组人干扰素α-2b联合胸腺法新治疗慢性乙型肝炎32例 [J], 张宇明;张经良4.重组人干扰素α-2b联合胸腺法新治疗慢性乙型肝炎分析 [J],5.重组人血清白蛋白与干扰素α-2b融合蛋白中聚乙二醇1500残余量测定方法研究 [J], 张娜; 杜莹莹; 李月; 常早荣; 薛冲; 刘志敏; 任飞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
重组细胞因子的纯化
层析介质应用6重组细胞因子的纯化简介重组细胞因子是利用基因工程技术生产的细胞因子的产品，作为药物用于治疗肿瘤、感染、造血障碍等，可收到良好的疗效。
通过基因工程技术和多种层析分离技术表达纯化的高纯度活性细胞因子可以有效促进免疫细胞、干细胞的体外生长，用于细胞治疗等相关研究领域。
多种相关新药已经上市。
近年出现的动物细胞表达的细胞因子具有完整的糖基化等翻译后修饰，避免蛋白复性，稳定的天然构象使因子比活和长期稳定性有显著改进，逐渐成为技术发展趋势。
新型Capto 系列层析填料，为来自不同表达系统的多种细胞因子提供高效的生产纯化技术工具，通过对于宿主杂蛋白、DNA 以及未糖基化修饰完全的变体和异构体的有效去除，成功得到多种性质均一的活性细胞因子，提高比活性。
常见的重组细胞因子有：干扰素（Interferon,IFN ）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF ）、集落刺激因子（colony-stimulating factor ）、趋化因子（chemokine ）、生长因子（growth factor, GF ）、白细胞介素系列（interleukin, IL)等。
一、原核表达细胞因子的纯化工艺1、重组人干扰素α2b(rh-IFN α2b)的纯化：图1：细胞因子的功能。
2、肿瘤坏死因子(TNF)纯化工艺：3、重组人集落刺激因子(rhG-CSF)纯化工艺：图2：干扰素纯化流程图及电泳检测图谱，纯度可达95%以上,比活达到1.2×108 IU/m 以上)。
图3：TNF 的纯化流程图。
图4： rhGCSF 的纯化流程图及电泳检测图谱，纯度>98%。
rh-IFN α2b大肠杆菌发酵Sephadex G-25脱盐大肠杆菌发酵Sephacryls 200图谱：Peak1洗脱峰为目的峰。
GE 生命科学部填料应用部7图5：趋化因子的纯化流程图及色谱图。
图8：趋化因子的纯化流程图及色谱图。
aav纯化工艺
AAV 纯化工艺是指从病毒载体生产过程中获得高纯度AAV 病毒的技术和方法。
以下是一些常见的AAV 纯化工艺步骤：
1. 细胞裂解：收获病毒感染的细胞，并通过裂解细胞释放出病毒粒子。
2. 澄清：使用离心、过滤或其他方法去除细胞碎片和杂质。
3. 核酸酶处理：加入核酸酶，如DNase 和RNase，以去除宿主细胞DNA 和RNA。
4. 盐析：通过加入盐类，如硫酸铵，使病毒粒子沉淀。
5. 离心：进行离心操作，将沉淀的病毒粒子与上清液分离。
6. 层析：使用层析技术，如离子交换层析、凝胶过滤层析或亲和层析，进一步纯化病毒粒子。
7. 浓缩和制剂：对纯化的AAV 病毒进行浓缩，并根据需要制备成适当的制剂形式，如液体或冻干粉。
这些步骤可以根据具体的实验需求和条件进行调整和优化。
每种纯化工艺都有其优点和局限性，选择合适的方法需要考虑病毒产量、纯度、成本和时间等因素。
此外，不同的AAV 血清型可能需要不同的纯化策略。
重组α-2b干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎30例疗效观察
重组α-2b干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎30例疗效观
察
孙广洪;李娜;梁秀玲;李群
【期刊名称】《潍坊医学院学报》
【年(卷),期】1998(20)3
【摘要】重组α２ｂ干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎３０例疗效观察孙广洪１李娜２梁秀玲２李群１（１传染病学教研室潍坊２６１０４２２潍坊市人民医院）干扰素和胸腺肽治疗慢性乙型肝炎（慢乙肝）已有报道，但效果都不理想。
我科自１９９４年６月以来应用重组（α２ｂ）干...
【总页数】1页(P219-219)
【关键词】乙型肝炎;胸腺肽;α-2b干扰素;治疗
【作者】孙广洪;李娜;梁秀玲;李群
【作者单位】潍坊市人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R512.620.5
【相关文献】
1.胸腺肽α1联合干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎的疗效观察 [J], 刘丽波
2.α-2b干扰素联合α1胸腺肽治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效观察 [J], 赵海东;郑瑞丹;陈碧芬;陈建能;卢燕辉
3.α-2b干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎疗效观察 [J], 王友谊
4.干扰素α-2b、苦参素与胸腺肽联合治疗慢性乙型肝炎42例临床疗效观察 [J], 蒋宏涛
5.胸腺肽联合重组人干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎疗效及对外周血T淋巴细胞亚群水平的影响 [J], 马兴梅
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干扰素α-2b联合胸腺肽α1治疗慢性乙型肝炎临床疗效分析
干扰素α-2b联合胸腺肽α1治疗慢性乙型肝炎临床疗效分析张经良;李涛【期刊名称】《临床肝胆病杂志》【年(卷),期】2007(023)001【摘要】探讨干扰素α-2b联合胸腺肽α1治疗慢性乙型肝炎的临床疗效及不良反应.选择112例慢性乙型肝炎患者,随机分成联合组(A组)38例,给予干扰素α-2b及胸腺肽α1治疗,干扰素α-2b组(B组)37例,胸腺肽α1组(C组)37例,3组均3个月为1疗程,治疗2个疗程.疗程结束时,3组患者ALT均较治疗前显著下降,差异无显著性意义(P＞0.05).3组患者HBeAg阴转率分别为57.9%、35.1%、32.4%,HBVDNA阴转率分别为63.1%、40.5%、37.8%,A组的疗效明显高于B、C两组(P＜0.05),差异有显著性意义,未见明显不良反应.干扰素α-2b联合胸腺肽α1具有改善肝功能和抑制乙肝病毒复制等功效,两者联合应用疗效较单独应用为佳,值得在临床推广.【总页数】2页(P43-44)【作者】张经良;李涛【作者单位】淄博市第四人民医院,药剂科,山东,淄博,255067;淄博市第四人民医院,传染二科,山东,淄博,255067【正文语种】中文【中图分类】R512.6+2【相关文献】1.α-2b干扰素联合胸腺肽治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效 [J], 肖清华;陈华卿;程进明;陈德永;焦煜全2.α-2b干扰素联合胸腺肽治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效分析 [J], 李静宇3.干扰素α-2b联合α1胸腺肽治疗慢性乙型肝炎疗效分析 [J], 雷南凤;刘添皇4.注射用重组人干扰素α2b联合胸腺肽肠溶片治疗慢性乙型肝炎48例 [J], 丁慧俊;殷思纯;曹焕焕;何松美5.胸腺肽联合重组人干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎疗效及对外周血T淋巴细胞亚群水平的影响 [J], 马兴梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
干扰素与胸腺肽-α1联合治疗慢性乙型肝炎的疗效观察
干扰素与胸腺肽-α1联合治疗慢性乙型肝炎的疗效观察
于忠省;邱芳;周彬;田旭杰
【期刊名称】《中国实用医药》
【年(卷),期】2010(005)028
【摘要】@@ 乙型肝炎病毒(HBV)的持续存在是慢性乙型肝炎(CHB)反复发作的根本原因,有效的抗病毒治疗可以清除或抑制HBV,控制肝脏炎性反应和改善肝功能,阻止进展为肝硬化、肝衰竭和减少肝癌的发生,并提高患者的生活质量[1].干扰素抗病毒疗效已被国内外所公认,但是单独应用效果并不是很理想,为提高干扰素的疗效,以干扰素为基础的联合抗病毒治疗日益受到重视.本研究通过观察干扰素与胸腺肽联合治疗效果,为临床抗病毒治疗提供参考.
【总页数】2页(P130-131)
【作者】于忠省;邱芳;周彬;田旭杰
【作者单位】256610,威海市传染病医院;256610,威海市传染病医院;256610,威海市传染病医院;256610,威海市传染病医院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.α干扰素、泛昔洛韦和胸腺肽联合治疗慢性乙型肝炎疗效观察 [J], 崔洪岭;苏言辉;厉永征;封飞;辛立民
2.α-干扰素、泛昔洛韦和胸腺肽联合治疗慢性乙型肝炎疗效观察 [J], 崔洪岭;胡文杰;苏言辉;郭梅;辛立民;封飞;巩延丽;杨尚艳;郭兰;杨艳霞
3.干扰素与胸腺肽联合治疗慢性乙型肝炎前C区变异株感染的疗效观察 [J], 江晓
平;孙秋林;叶珺;叶英;尹华发
4.干扰素α-2b、苦参素与胸腺肽联合治疗慢性乙型肝炎42例临床疗效观察 [J], 蒋宏涛
5.聚乙二醇干扰素α-2a与胸腺肽α1联合治疗慢性乙型肝炎的临床研究 [J], 张颖;李刚;陈琳;周立夫;刘凤霞
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１ ２ 试 剂与 仪器 ．
胰蛋 白胨 、 母 提 取 物 ， ｏｄ公 司 ； 组 肠 激 酵 Ｏｘ ｉ 重
功构 建过 人干扰 素 Ｏ ｂ 腺 肽 ａ 的 融合 蛋 白， 无 ￣－ ２胸 ． 还 在 Ｅ．ｏｉ中表 达并 分离 纯化 此融 合蛋 白的报 道 。 ｃｌ
本文 考察 了 Ｅ．ｏｉ 达 的重 组 人干 扰 素 ａｈ ｃｌ 表 和 胸腺 肽 ａ 的融合 蛋 白的分离 纯 化条 件 ， ｌ 为进 ～ 步研 究重 组融 合 蛋 白的 分离纯 化提 供理论 指 导 。
终 目的 融 合 蛋 白 产 量达 ６ ｍｇｇ干 菌 体 。 ８ ／ 关 键 词 ：人干 扰 素 ａｂ ；胸腺 肽 ａ； 合蛋 白 ； 属 螯 合 层 析 ２ ｌ融 金 中 图分 类号 ：Ｑ １ ． ５２７
干 扰 素 （Ｆ 是 一 类 重 要 的抗 病 毒 、 肿 瘤 的 ＩＮ） 抗 治 疗 药 物 ， 抗 病 毒 活 性 最 为 公 认 … 胸 腺 肽 其 １。
分 离 纯 化 过 程 。 实 验 结 果 表 明 ： 涵 体 经 ７ ｌＬ盐 酸 胍 ， ０ 包 ／ ｍｏ １ ｌ Ｔ 变 性 ； １Ｌ尿 素 ， ＩＬ还 原 型 谷 ｍｍｏ Ｌ Ｄ Ｔ ／ １ ／ ｍｏ ２ ｍｍ。 ／ 胱 甘 肽 ， ． ｍｍ ｌＬ氧 化 型 谷 胱 甘 肽 脉 冲 加 样 稀 释 复 性 ； 属 螯 合 层 析 收 集 ０ ３ｍ ｌ 咪 唑 洗 脱 峰 ， 干 后 经 重 组 ０ ２ ｏ／ 金 ． ｏ／ Ｌ 冷 肠 激 酶 ３ ℃ 酶 切 ２ 、 ｅｈｄｘＧ ５ ０ ４ Ｓｐ ａｅ －０柱 纯 化 ， 得到 纯 度 达 ９ ％ 的 重 组 人 干 扰 素 ２ 胸 腺 肽 ａ 融 合 蛋 白 ， 最 ｈ 可 ０ ｂ 和 ｌ 且
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第３卷 第５ ５ 期
２ ８正 ００
北 京 化 工 大 学 学 报
Ｊ ０ＵＲＮＡＬ ０Ｆ Ｂ Ｊ ＮＧ ＥＩＩ ＵＮＩ ＲＳ ＴＹ ＶＥ Ｉ ０Ｆ ＣＨＥＭ Ｉ ＣＡＬ ＴＥＣＨＮ０Ｌ ０ＧＹ
Ｖ ｏ ． ５． Ｎｏ． １３ ５ ２ ０８ ０
１ ３ １ 基 因工程 大 肠杆 菌的 发酵 培养 ． ．
细 胞活性 等功 能 ， 有协 同作 用 ， 并 可增 强 机体 的免 疫
能力 ， 肿 瘤和艾 滋 病 以 及其 他 病 毒 性 疾病 的 治疗 对 作用 比它 们单 独 使 用 时 更 强 ＿ 。但 国 内外 对 于干 ３ Ｊ 扰 素和胸 腺肽都 是单 独生 产 ， 临床上 也是 单独 给药 。 目前 为止 ， 内仅 有 郭 冬 生ＨＪ 曾 在家 蚕 细 胞 中 成 国 等
大 肠 杆 菌表 达 融 合 蛋 白 的发 酵 条 件 参 考 文 献
［］ ５ ．接 种 于 ２×ＹＴ培 养 基 中 培 养 ３ ， 加 ０ ５ 添 ｈ ．％
ＩＴＧ诱 导 ， 使 菌体 表 达 重 组 蛋 白。菌 体 的 收 集 Ｐ 促
及包 涵体 制备 参 考 文 献 ［ ］ ３ 。此 发 酵过 程 可 得 精 制 包 涵体 ２ ５ ／ ． ｇ ｇ干 菌体 。 １ ３ ２ 包涵体 的变性 与复性 ． ． 包涵 体 的变性 复性 条 件 参 考 文 献 ［ ］ ３ 。上 清 液 在 缓 冲 液 Ｅ（ ０ｒｔｏ Ｌ 磷 缓 ， ． ｌＬ Ｃ ， ５ ｏ ｌ ｅ ／ ０ ５ｍｏ Ｎａ １ ５ ／
重 组 人 干 扰 素 ２ 胸 腺 肽 。 合 蛋 白的分 离 纯 化 ｂ 和 融
罗 琪 陈 劲 春
（ 京 化 工 大 学 生命 科学 与技 术 学 院 ，北 京 １０ ２ ） 北 ０ ０ ９
摘 要 ： 察 了大 肠 杆 菌 Ｅ．ｏｉ 达 的重 组 人干 扰 素 ａ ｂ 胸 腺 肽 融 合 蛋 白 包 涵 体 的 变 性 、 性 及 融 合 蛋 白 的 考 ｃｌ 表 ２和 复
酶、 异丙 基硫 代一一 半 乳 糖 苷 （Ｐ ８ Ｄ Ｉ ＴＧ） Ｓｇ ， ｉｍａ公 司。
其余 试剂 选 用 国产分 析纯 。
Ｎｉ ｅｈ ｒｓ、 ｅ ｈ ｄｘ Ｇ一０ Ｐ ａｍａｉ — ｐ ａｏｅ Ｓｐ ａ ｅ ５ ， ｈｒ ｃ Ｓ ａ公 司 ； Ｊ ８３ Ｙ９ —Ｄ超声 波 细胞破 碎仪 ， 宁波新 芝 科器 研 究所 ；
１ 实验 部分
１ １ 菌 种 ． ｐ Ｔ ８ａ ＋） ｃｌ Ｒ ｓｔ Ｅ ２ （ Ｅ．ｏｉ ｏ ｔ ｅ ａ菌株 由本 实验 室构
建 并保存 。
ｍｍｏ 咪唑 ， Ｈ７ ５ 中于 ４℃透 析 ２ ｈ 离 心取 上 清 ｌ ｐ ．） ４，
获得复性 液 。
１ ３ ３ 金 属 螫 合 层 析 ．．
复性 液 经 金属 螯 合 层 析 ， 用 含 ０ １ ０ ３ ０ ５ 采 ．， ． ， ．
ｍｏ／ ｌＬ咪 唑 的 缓 冲 液 Ｅ 梯 度 洗 脱 ， 集 ０ ３ｍｏ Ｌ 收 ． ｌ ／ 咪唑 的洗 脱峰 。冷 干得 样品 ９ ／ ５ ｍｇ ｇ干 菌体 。
１ ３ ４ 融 合 蛋 白 的 酶 切 ．．
Ｔ． 。 串联体 的研制 成功 Ｊ 。近 几年 人 们对 干 扰 素和
胸腺肽进 行 了 联 合 应 用 ， 究 证 实 ， 们 的 联 合应 研 它
用 ， 有促进 Ｔ细 胞 的 生 长 、 殖 、 化 和激 活 ＮＫ 具 增 分
Ｇ 一０ Ｉ 型 冷 冻 离 心 机 ， 海 安 亭 科 学 仪 器 厂 ； Ｌ ２ Ｇ—Ｉ 上 Ｄ — 稳 压稳 流 电泳仪 ， ＹＹ ｍ５型 北京 六 一仪 器厂 。 １ ３ 实验方 法 ．