山西高平市农家酸菜汁中乳酸菌的分离及鉴定
酸菜汁中降胆固醇乳酸菌的分离鉴定
１．１ 材料
收稿日期： ２００７－ ０４－ ２６ 基金项目： 绍兴市重点科技项目（ Ｎｏ． ２００５１１００１） 作者简介： 尹军霞， 女， １９７０ 年出生， 硕士， 副教授
１．１．１ 原料 酸菜汁： 市售大白菜自然发酵成酸 菜， 挤压所得。 １．１．２ 试剂 总胆固醇（ ＴＣ） 测定试剂盒、高密度 脂蛋白－ 胆固醇（ ＨＤＬ－ Ｃ） 测定试剂盒， 上海荣盛 生 物 技 术 有 限 公 司 ； 甘 油 三 酯 （ ＴＧ） 测 定 试 剂 盒 ， 浙江东瓯生物工程有限公司。 １．１．３ 培养基 乳酸菌分离培养基 （ １００ ｍＬ） ： 牛 肉膏 １ ｇ、蛋白胨 １ ｇ、１ 酵母膏 １ ｇ、葡萄糖 １ ｇ、番 茄 汁 ２０％、土 温 ８０ ０．０５％、碳 酸 钙 ２ ｇ、溴 甲 酚 紫 ０．０１％、琼脂 ２ ｇ。
２．４ 耐胆汁盐试验 小肠是人体吸收胆固醇的重要场所， 同时也
是乳酸菌发挥其降胆固醇作用的主要部位。正常 人体小肠中胆汁盐含量在 ０．０３％～０．３％ 范围内波 动， 乳酸菌若要定植于小肠， 就必须有一定的耐受 胆汁盐的能力［８］。
从表 ３ 可以看出， 菌株 ２ 在 ０．１％胆汁盐的条
件 下 生 长 ６ ｈ， 活 菌 数 明 显 上 升 ； 在 含 ０．２％ 胆 汁 盐的 ＭＲＳ 培养基中 ６ ｈ 的存活率达 １３．８％； 在含 ０．３％ 胆汁盐的环境中生长 ６ ｈ 及在含 ０．４％ 胆汁 盐的环境中生长 ４ ｈ， 其活菌数仍能在 １０６ ｃｆｕ／ｍＬ 以上。说明菌株 ２ 具有较强的抗胆汁盐的能力， 食 入后有相当数量的菌体顺利地通过小肠到达大 肠， 发挥其健康促进作用。
ＴＣ 含量显著高于 Ａ 组 （ Ｐ＜０．０５） ； ２８ ｄ 时血清 ＴＧ 含量也显著高于 Ａ 组 （ Ｐ＜０．０５） ， 说 明 饲 喂 大 鼠 高 脂饲料 ２８ ｄ， 高脂模型已基本形成。２８ ｄ 时 Ｃ 组的 血清 ＴＣ 含量比 Ｂ 组极显著降低 （ Ｐ＜０．０１） ， ＴＧ 含 量比 Ｂ 组 显 著 降 低 （ Ｐ＜０．０５） ， 说 明 灌 胃 菌 株 ２ 发
酸菜汁中乳酸菌的分离与鉴定研究
关键 词 ：酸 菜 ；乳 酸 菌 ；分 离 ；鉴 定 中 图分 类 号 ：Ｔ ２ ９ Ｓ０ 文 献标 志码 ：Ａ ｄ ｉ ０３６ ／ｓｎ１７ — ６ ６Ｘ ． １．９ １ ｏ：１．９９ｊｓ ． １９ ４ （） ０ ０ ． ３ ｉ ６ ２ ００
Ｉｏａｉｎａ ｄＩ ｅ ｔｉａｉｎ ｏ ａ ｔ ａ ｔｒａｉ ａ ｅｋ ａ ｔ ｕｃ ｓｌｔ ｎ ｄ ｎｉ ｃ ｔ ｆＬ ｃｉ Ｂ ｃｅｉ ｎ Ｓ ｕ ｒ ｒｕ ｉｅ ｏ ｆ ｏ ｃ Ｊ
第 ９期（ 总第 ２ ０期） ２ ２１ ０ ０年 ９月
农产品￣．．・ ＪＴ 学刊 Ｉ Ｉ
Ａ ａ ｅ ｃＰ ｒｄｃｌ ｆ ａｍ Ｐｏｕ ｔＰ￣ｅｓ ｇ ｃｄｍｉ ｅｉ ｉ ｒ ｒｄ ｃｓ ｒ ｓｉ ｏ ａｏ Ｆ ｎ
Ｎｏ９ ． Ｓｐ ｅ
文章编号 ：１ ７ — ６ ６ ２ １ ０ — ０ ２ ０ ６ １ ９４ （ ０ ０） ９ ０ ５ — ３
Ａｂ ｔ ｃ ： Ｉ ｒ ｅ ｏ ｃａ ｉ ｐ ｃｅ ｆｌｃｉ ａ ｔｒ ｎ ｎ ｔｒ ｌｓ ｎ ｒ ｒ ｕ ． Ｓ ｄ ｕ ｗｉ Ｂ ｏ ｃｅ ｏ ｕ ｐ ｅ ｓ ｄ ｕ ｓ ｌ ｓ ａ ｔ ｎ ｏ ｄ ｒｔ ｌｒ ｙ ｓ ｅ ｉｓ ｏ ｔ ｂ ｃｅ ａ ｉ ａｕ ａ ａ ｅ ｋ ａ ｔ Ｌ ｍｅ ｉ ｍ ｔ ｒ ｆ ａ ｃ ｉ ｈ ｒ ｍｏ ｒ ｓ ｌ ｒ ｌ ｏ ｉ ｍ ａｔ ｐ
酸 菜汁 中乳酸茵的分 离与鉴定研 究
方 丽，郑明珠
１０ ） ３ １８ １ （ 吉林农业 大学 食 品科学与工程学院 ，吉林 长春
摘 要：为明确 自然发酵酸菜 中乳酸菌的种类 ，采用添加溴甲酚紫的 ｓ Ｌ分离培养基对其中的产酸菌进行分离 ，结合表型 形态测定筛选其中的乳酸菌 ，并根据 （ 杰氏系统细菌学手册》 （ ｆ 自 ，对筛选到的乳 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ菌进行形态学与生理生化鉴定。结果 表 明，自然发酵酸菜汁中的产 酸优势菌为 Ｇ ＋菌 ，且它们大多属于乳酸菌 ；筛选 到 ９株乳酸菌 Ｓ 一 Ｙ ，其 中 Ｓ ４为 Ｙ１Ｓ ９ Ｙ
乳酸菌的分离与纯化实验报告
乳酸菌的分离与纯化实验报告一、实验目的：1. 掌握乳酸菌的分离与纯化方法；2. 学习乳酸菌的形态特征及生长特性；3. 熟悉微生物实验室操作规范和安全注意事项。
二、实验原理：乳酸菌属于革兰氏阳性细菌，可以利用革兰染色方法进行初步鉴定。
乳酸菌的形态特征有很大差异，有的呈短杆状、短圆柱状，有的呈梭形或球形。
乳酸菌的培养基选择要根据实验目的而定，一般常用的是MRS培养基。
常规乳酸菌分离方法有两种：血漂白法和渐进稀释法。
血漂白法是用过氧化氢或次氯酸钠等对血液进行漂白处理后加入培养基进行分离，由于血液中含有多种抑菌物质，故需漂白处理后方能使用。
渐进稀释法则是将混菌液逐步稀释后按一定比例接种于选定的培养基上，经过多次传代，可得到单一的菌落。
三、实验步骤：1. 取适量样品加入1ml生理盐水中，充分摇匀。
2. 再从上述稀释液中取出1ml加入9ml生理盐水中，得到10-2悬液。
3. 再抽取1ml悬液加入9ml生理盐水中，得到10-3悬液。
4. 分别取适量的10-2和10-3悬液接种于MRS培养基上，并分别转移多次，培养时间一般为24-48小时，必要时可延长到72小时。
5. 分离菌落后进行鉴定。
四、结果及分析：实验结果显示，经过分离培养，从10-2和10-3悬液中分别分离出了多个菌落，经过重复转移，逐步稀释，最终获得了单一的菌落，可见分离培养方法的有效性和行之有效的可行性。
鉴定乳酸菌的一般方法包括形态学鉴定、生化特性鉴定和分子生物学鉴定等。
形态学鉴定包括形态、大小、形状和染色等方面；生化特性鉴定则主要包括代谢途径、酸产生量和果糖发酵能力等；分子生物学鉴定则是通过特异性引物扩增菌株中的核酸，进行分子水平鉴定。
五、实验心得：本次实验通过乳酸菌分离、培养和鉴定的过程，使我对乳酸菌的形态特征、生长特性和鉴定方法有了更深入的了解。
同时，要时刻注意实验室的操作规范和安全问题，确保实验顺利进行。
在今后的实验中，我将更加重视实验操作的规范性和安全性。
酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及其体外降胆固醇能力研究
酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及其体外降胆固醇能力研究章秀梅;刘昭明;黄翠姬;贤乾隆;黄源波【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2011(036)011【摘要】从发酵酸菜汁中分离乳酸茵菌株并进行鉴定,同时研究其发酵性能和降胆固醇的能力.通过对乳酸菌的菌落特征、形态特征和生理生化特性进行鉴定,初步确定分离得到的L1、L2和L3等3株乳酸菌申L1为植物乳杆菌,L2为发酵乳杆菌,L3为短乳杆菌；L1和L2在培养15 h后进入生长稳定期,产酸速度快,L3在21 h后进入生长稳定期,产酸速度相对较慢,菌株产酸能力由大到小的顺序为:L1＞ L3＞ L2；L1,L2和L3三株菌的降胆固醇降解率分别为34.28％,22.86％和54.29％,L3的降胆固醇的能力最高.【总页数】5页(P30-34)【作者】章秀梅;刘昭明;黄翠姬;贤乾隆;黄源波【作者单位】广西工学院生物与化学工程系,广西柳州 545006;广西工学院生物与化学工程系,广西柳州 545006;广西工学院生物与化学工程系,广西柳州 545006;广西工学院生物与化学工程系,广西柳州 545006;广西工学院生物与化学工程系,广西柳州 545006【正文语种】中文【中图分类】TS201.55【相关文献】1.发酵酸肉中降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降胆固醇作用 [J], 丁苗;刘洋;葛平珍;王丹;周才琼2.自然发酵肉制品中乳酸菌的体外降胆固醇特性 [J], 云月英;马宇南;王文龙3.降胆固醇乳酸菌鉴定及其在体外模拟胃肠环境中抗性研究 [J], 赖文;刘书亮;张倩颖;姜娟4.自然发酵肉制品中乳酸菌的体外降胆固醇特性 [J], 李敏5.一种三联乳酸菌的体外降胆固醇和抗氧化能力研究 [J], 黄元霞;彭传海;丁宁;邱忠平;李星;邹美慧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
酸菜中乳酸菌分离鉴定的研究进展
酸菜中乳酸菌分离鉴定的研究进展作者：李晓忱来源：《品牌与标准化》2016年第02期【摘要】随着生活水平的逐步改善，人们对食品多元化的追求也日趋提高，经乳酸发酵制得的食品以其口感独特种类繁多等特点广受好评。
特别是在我国的东三省，酸菜作为传统发酵蔬菜制品之一，以其独特的口感、久食不腻的特点深受人们青睐。
其汁液中富含的乳酸菌活菌成分作为酸菜发酵过程中主要的发酵菌之一，近年来也受到食品业的广泛关注，关于乳酸菌的各项研究也层出不穷，本文将对乳酸菌的研究现状进行阐述，包括乳酸菌的定义和分类、乳酸菌的分离鉴定方法，同时也会对该菌种在发酵生产中的作用机理和发展趋势加以简要分析。
【关键词】酸菜乳酸菌分离鉴定【DOI编码】 10.3969/j.issn.1674-4977.2016.02.0041 乳酸菌的定义及分类乳酸菌是分解发酵性糖类来供应自身能量同时伴有大量乳酸生成的一类微生物的统称。
此外，形态学方面还对其有如下描述：乳酸菌细胞呈革兰氏阳性，多为球状或杆状，无内生孢子，当葡萄糖消耗量超过50%时产生乳酸[1]。
截至目前，科学家已经确认的乳酸菌可划分出至少23个属56个种。
主要包括：乳杆菌属、肉食杆菌属、酒球菌属、环丝菌属、球菌属、链球菌属、片球菌属、明串珠菌属、气球菌属、奇异菌属、有球菌属、李斯特氏菌属、乳球菌属、孢乳杆菌属、芽孢杆菌属中的少数种、双歧杆菌属、丹毒丝菌属、孪生球菌属、糖球菌属、四联球菌属、乳球形菌属、魏斯氏菌属和营养缺陷菌属[2][3]。
其中，乳杆菌属中的保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌合链球菌属中的嗜热链球菌等常常被应用到乳制品的发酵中，植物乳杆菌、短乳杆菌、明串珠菌属的肠膜明串珠菌常被应用于蔬菜的发酵中。
2 酸菜与乳酸菌众所周知，酸菜是包括中国在内等诸多国家一年四季都在食用的一种发酵类食品。
酸菜可根据其发酵基物的不同来分类，例如由大白菜或圆白菜等发酵制得。
酸菜的食用范围相当广泛，冬季的食用地区主要集中在东北；而我国四川地区更是把酸菜作为一年四季都在食用的一种重要食品。
自然发酵酸菜汁中乳酸菌的分离、鉴定+及发酵剂的筛选
第４期
毕金峰等：自然发酵酸菜汁中乳酸茵的分茵、鉴定及发酵剂的筛选
－３４７
培养基为Ｉ号培养基（用于乳酸菌分离、活化）、Ⅱ号培养基（用于乳酸菌计数）、Ⅲ号培养基（用于乳酸
菌鉴定）。
１．２试验方法
１．２．１ 自然发酵酸菜汁中乳酸茵的分离、筛选的试验程序自然发酵酸菜汁液一稀释一培养一挑起单菌落染色、镜检一挑
2007(10)
11.巨晓英.韩烨.周志江 自然发酵泡菜中乳酸菌的分离鉴定[期刊论文]-食品与机械 2008(5) 12.陈仲翔.董英 泡菜工业化生产的研究进展[期刊论文]-食品科技 2004(4) 13.曾凡坤.侯东军 提高青菜头泡菜品质初探[期刊论文]-食品与发酵科技 2011(6) 14.张茜.赵文婧.李嘉祺.段学强 山西高平市农家酸菜汁中乳酸菌的分离及鉴定[期刊论文]-微生物学杂志 2010(4) 15.卢晓黎.尼海峰 发酵蔬菜功能菌研究与应用进展[期刊论文]-中国食品学报 2012(2)
图４不同ｐＨ值培养基按种Ｌ一乳
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２．２发酵剂初选试验结果分析 从表３可以看出：接种发酵速度均明显快于对照，随时间延长，ｐＨ值初期下降快，后期下降慢，可滴
乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌分离鉴定及试验方法一、引言乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有重要的生物学功能和应用价值。
乳酸菌可以通过发酵作用，将葡萄糖、果糖等碳源转化为乳酸和其他有机酸，同时还会产生一些对人体有益的物质，如维生素、酶、抗生素等。
乳酸菌在食品工业、医药工业、农业等领域具有重要的应用前景。
乳酸菌的分离鉴定及试验方法对于深入研究乳酸菌菌种的特性、功能以及在不同领域中的应用具有重要意义。
本文将介绍乳酸菌的分离鉴定及试验方法，旨在为相关研究人员提供参考和指导。
二、乳酸菌分离方法1. 采样乳酸菌的分离首先需要进行采样工作。
可以从发酵食品、乳制品、蔬菜、水果、土壤、肠道等多种来源进行采样。
在采样过程中应注意样品的新鲜性和卫生性，避免外部污染对实验结果造成影响。
2. 培养基的选择乳酸菌可以利用多种培养基进行分离和培养，常用的培养基有MRS培养基、乳清培养基等。
根据具体的分离目的和需求选择适合的培养基。
3. 分离将采样得到的样品进行系列稀释，取适量的稀释液均匀涂布在含有适当培养基的琼脂平板上，培养温度一般在30-37摄氏度之间，培养时间约48-72小时。
4. 纯化观察培养基上的菌落形态，选择典型的菌落进行分离单菌培养，通过多次传代稀释可以纯化获得纯种的乳酸菌。
5. 形态观察利用显微镜对分离得到的菌株进行形态学观察，包括细胞形状、大小、排列方式等。
三、乳酸菌鉴定方法1. 生理生化鉴定通过对分离得到的菌株进行生理生化特性的研究，包括乳酸发酵能力、氧耐受性、温度、pH值的适应能力等，可以初步判断乳酸菌的种属。
2. 生化试剂法利用生化试剂对乳酸菌进行鉴定，如气体发生试验、氧化还原酶试验、酶活性试验等。
3. 分子生物学鉴定通过PCR扩增乳酸菌的16S rRNA基因序列，测序后与数据库比对，确定乳酸菌的种属分类。
四、乳酸菌试验方法1. 发酵活性测定通过测定菌株在不同条件下的发酵活性，如发酵速率、产酸速率、产酶能力等。
2. 抗菌活性测定测定乳酸菌对一些有害菌的抑菌作用，判断其在抗菌方面的潜力。
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选酸菜是我国传统的发酵食品之一，其特点是制作简单、口感独特、营养丰富。
酸菜的制作过程主要涉及到乳酸发酵、酸化、腌渍等一系列过程。
乳酸发酵是酸菜制作过程中最重要的环节之一，其发酵产物主要是乳酸、乳酸菌等有益菌类。
乳酸菌是酸菜和腐乳杆菌中的主要发酵菌种之一。
乳酸菌通过代谢糖类产生乳酸，使酸度增加，同时抑制了其他有害菌类的繁殖。
乳酸菌还能够产生有益物质，如抗菌肽、维生素等，对人体健康有益。
鉴于酸菜和腐乳制作过程中乳酸菌和腐乳杆菌的重要性，对其进行检测与筛选，对于保证产品质量、提高生产效益具有重要意义。
1. 乳酸菌数的检测：通过适当的稀释方法和培养基，将酸菜中的乳酸菌进行分离培养，然后通过计数板法、融解法等方法确定乳酸菌的数量。
2. 乳酸菌的鉴定：通过形态学特征、生理生化特性以及分子生物学方法，对分离得到的乳酸菌进行鉴定。
常用的鉴定方法包括盐酸溶胞法、葡萄糖氧化酶试验、API系统酶促反应等。
3. 乳酸菌的发酵活性评价：通过评估乳酸菌的酸化能力、干酪水解能力、抗菌能力等指标，对乳酸菌的发酵活性进行评价。
酸菜发酵中乳酸菌的筛选主要关注以下几个方面：1. 乳酸发酵能力：通过对不同来源的乳酸菌进行筛选，选取具有较高乳酸发酵能力的菌种。
2. 耐盐碱能力：由于酸菜制作过程中会有腌渍过程，因此筛选过程中需要考虑菌株对盐碱环境的适应能力。
3. 抗菌能力：鉴于酸菜发酵过程中容易受到有害菌类的污染，因此可以通过评估菌株的抗菌能力来筛选具有抗污染能力的乳酸菌。
1. 蛋白水解能力：腐乳的制作过程中需要腐乳杆菌对豆蛋白进行水解，因此可以通过评估菌株的蛋白水解能力来筛选具有较强水解能力的菌株。
2. 香气生成能力：腐乳的特殊香气主要来源于腐乳杆菌在发酵过程中生成的挥发性化合物，因此可以通过评估菌株的香气生成能力来筛选具有特色香气的菌株。
酸菜食品中酸菜发酵过程中乳酸菌和腐乳食品中腐乳制作中腐乳杆菌的检测与筛选都是为了保证产品质量和提高生产效益。
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选
酸菜是一种具有酸酐味的中国传统食品，是中国北方地区特色的风味食品之一。
酸菜是利用乳酸菌对蔬菜发酵而成，乳酸菌在酸菜发酵过程中发挥着重要作用。
为了确保酸菜的质量和安全性，防腐乳杆菌的检测与筛选是必不可少的步骤。
防腐乳是一种富含乳酸菌的发酵食品，具有显著的抗菌作用。
为了将防腐乳杆菌应用于酸菜发酵中，首先需要从防腐乳中筛选出具有优良特性的乳酸杆菌株。
该过程可以通过以下步骤进行：
1. 选取防腐乳样本：从市场上购买不同品牌的防腐乳样本作为研究对象。
2. 分离乳酸杆菌：将防腐乳样本分别加入适量的生理盐水中，进行稀释后，通过平板计数法将其均匀涂布在乳酸菌选择性培养基上，进行培养。
3. 选取优良菌落：根据菌落的形态、颜色和外观特征，选取优良菌落进行次级分离。
4. 酸菜发酵实验：将优良菌落分别接种到酸菜的发酵基质中，培养一段时间后，通过pH、活菌数和风味等指标对酸菜的质量进行评估。
5. 物种鉴定：通过16S rRNA基因序列分析等方法对优良菌株进行物种鉴定，确定其属于防腐乳杆菌。
在防腐乳杆菌的检测方面，常用的方法主要包括传统的平板计数法和分子生物学的PCR法。
平板计数法通过将防腐乳样本加入选择性培养基，利用细菌的生长特性对菌落进行计数，以确定菌群的数量。
而PCR法则利用特定引物与菌株DNA相互作用，通过扩增特定的DNA序列，从而检测目标细菌的存在与数量。
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选是确保酸菜质量和安全性的关键步骤。
通过适当的实验步骤和方法，可以筛选出具有优良特性的乳酸杆菌株，并利用其进行酸菜的发酵，以提高酸菜的质量和风味。
酸菜中乳酸菌的分离筛选与鉴定研究
China Brewing
Research Report
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图2 L-6（A）、L-7（B）、L-8（C）菌株生长与温度关系 Figure 2. Relationship between the temperature and the strain growth of L-6（A），L-7（B）and L-8（C）
形态学鉴定：将分纯的菌种分别涂到MRS琼脂培养基 上，37℃培养24h，观察菌落特征，取典型菌落涂片革兰氏 染色，油镜下观察菌体形态。
生理生化特性鉴定：（1）生化特性研究：对分离的菌种 分别进行糖发酵产酸试验、过氧化氢酶试验、硝酸盐还原 试验、产生吲哚（靛基质）试验、明胶液化试验、硫化氢产生 试验、葡聚糖产生试验。（2）生理特性研究a生长曲线的绘 制：将l%的相应菌液接入培养基中，每隔4h吸取菌液做系 列梯度稀释，作混合平板，L-6于28℃，L-7和L-8于37℃培养 2d~3d，菌落计数。以培养时间为横坐标，菌落总数的对数 为纵坐标，绘制生长曲线。b培养温度及时间对菌株生长 的影响，OD 值以同温下不接种培养基作对照，定期取出接 种培养基在波长λ600nm测定。c 运动性检查：采用半固体培 养基穿刺法。
菌株
L-7 L-8 L-6
葡萄糖
+ + +
果糖
+ + +
乳糖
+ + -
表4 L-6、L-7和L-8菌株糖发酵结果 Table 4. Sugar fermentation of L-6, L-7 and L-8
半乳糖
+ + -
蔗糖
++ +
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选酸菜是一种传统的中国食品，它是通过发酵过程中的微生物转化作用而形成的。
在酸菜的发酵过程中，乳酸菌是主要的发酵微生物之一。
而在乳酸菌当中，防腐乳杆菌是一种重要的菌种，它能够产生乳酸和其他具有保健功能的物质，为酸菜的品质和口感提供了保障。
1. 样品的收集和处理：需要从发酵中的酸菜样品中收集样品。
确保样品的新鲜度和卫生性。
然后，将样品稀释并进行预处理，以便于后续的实验操作。
2. 防腐乳杆菌的培养基制备：为了检测和筛选防腐乳杆菌，需要准备适合其生长的培养基。
常用的培养基为MRS培养基，含有适当浓度的碳源、氮源、矿物质和pH调节剂。
3. 杆菌菌种的接种：将样品平铺于培养基表面，或者加入适量的样品于培养基中进行接种。
然后，以适当的温度和时间进行培养，通常在30-37摄氏度下培养24-48小时。
4. 防腐乳杆菌的筛选：在培养基上观察菌落的形态、大小、颜色等特征，并选择性状符合防腐乳杆菌的菌落进一步进行筛选。
5. 防腐乳杆菌的鉴定：通过生理生化试验和分子生物学方法，对筛选出的菌落进行进一步的鉴定。
生理生化试验可以包括对菌落的形态、氧需求、产酸的能力等特征的观察。
而分子生物学方法则可以利用PCR扩增防腐乳杆菌的特异基因片段，并通过测序进行鉴定。
6. 防腐乳杆菌的纯化和保存：对于已经鉴定出的防腐乳杆菌菌种，可以进行纯化和保存。
纯化的方法可以包括酶消化、分离、传代等步骤。
而保存的方法可以是冷冻保存或者低温液氮保存，以保证菌株的长期保存和利用。
通过以上的检测与筛选方法，我们可以有效地检测和筛选出防腐乳杆菌，为酸菜发酵工艺的优化和产品质量的改进提供有力的支持。
还可以为相关的微生物菌种研究和应用提供参考。
酸菜中乳酸菌的分离筛选与鉴定分析
为0.725、0.694、0.712，对照柠檬酸和乳酸的Rr 值分别为0.483、0.731，证明其三菌株都有乳酸，均为产乳酸菌株:2.形态学鉴定。
在MRS 培养基上分别涂上已经经过分纯操作的菌种，在38°C 的环境中培养24小时，然后观察其特征情况，进行试剂染色处理，运用油镜进行观察：观察 结果为：1号菌株在培养基上的菌落形态为突起，0.5到1 毫米的菌落直径，呈圆形、光滑和灰白色，在革兰氏染色 上呈阳性，具有厌氧兼性，且生长物浑浊，豆状或球状的 菌体，0.8到1.2um 的直径，列为短链或单个2号和1号的不同之处是菌体直径不同，菌体为圆端直杆状，0.9到 1.2L U T 1的直径，且排列为成对或单个3号菌落中间突起且为深色，菌体粗短杆状，0.9到1.2画的直径，从形态学特 征角度分析可知，1号有肠膜明串珠菌形态学特征，2号有 植物乳酸杆菌特征，3号有短乳杆菌特征：3. 生理特性鉴定和生化鉴定。
在培养基中引入1%的对应菌液，每隔4小时吸取菌液，进行梯度性稀释，结合结果 将生理特性明显的1号、2号和3号菌株再培养2-3小时，以 培养时间为横坐标、菌落总数为纵坐标，绘制生长曲线， 明确培养时间和温度等情况对乳酸菌的影响（图1 ) 生化特性鉴定的试验方法有很多，如明胶液化试验、硝酸盐还 原试验等，根据试验需要有序进行试验即可C 寸》O C 寸》c 丨O ，《 N V O Q时阐(h >图1:三种菌株生长曲线经这两种鉴定结果反馈，1号最佳生长温度在2 5 °C - 30°C , 2号和3号最佳生长温度为30°C -35°C ,都为乳酸菌， 结合其生化特性鉴定情况，确定1号菌株为肠膜明串珠菌，2号菌株为短乳杆菌，3号菌株为植物乳酸杆菌.7!作者简介：杨家玉（1999.7.5-),女，河北盐山县， 本科；研究方向：食品。
■文I 杨家玉青岛工学院菜是经过乳酸发酵而形成的蔬菜制品，其增进食欲 的功效是因为含有乳酸菌。
食品中乳酸菌的分离与鉴定
食品中乳酸菌的分离与鉴定乳酸菌是一类重要的微生物，在食品加工和保质过程中起着关键作用。
乳酸菌具有产生乳酸的能力，能够抑制有害菌的生长，提高食品的质量和安全性。
因此，乳酸菌的分离与鉴定对于食品工业具有重要意义。
乳酸菌的分离方法多种多样，常用的有直接涂布法、稀释涂布法和差减分离法等。
其中，直接涂布法是最常用的方法之一。
直接涂布法是将食品样品均匀涂布于含有特定培养基的琼脂平板上，利用乳酸菌对特定培养基的选择性生长来分离乳酸菌。
稀释涂布法则是将食品样品稀释到一定程度后，涂布于琼脂平板上进行分离。
差减分离法是相对于稀释涂布法的一种改进方法，通过两个不同培养基的对比，进一步筛选出乳酸菌。
乳酸菌的鉴定方法主要包括形态学观察、生理生化特性鉴定和分子生物学鉴定等。
形态学观察是最基本的鉴定手段之一，通过显微镜观察菌落和细胞形态特征，可以初步判断出乳酸菌的种类。
生理生化特性鉴定是将分离出的菌株在不同条件下进行相关实验，如气体产生、温度耐受性、胞外酶产生等，通过对比不同特性的表现，进一步鉴定乳酸菌的种类。
而分子生物学鉴定则能够更准确地确定乳酸菌的种属和亚属，如通过PCR扩增特定基因序列，利用DNA测序技术进行序列比对，从而鉴定乳酸菌的种类。
乳酸菌的分离与鉴定在实际食品加工中具有重要意义。
首先，通过分离和鉴定乳酸菌，可以确定食品中乳酸菌的种类和数量，进而判断食品是否存在质量和安全性问题。
其次，乳酸菌的鉴定有助于选择合适的培养条件，促进乳酸菌的生长和产酸过程，从而提高食品品质。
此外，乳酸菌的鉴定也有利于乳品行业中的产品研发和工艺改进，为创新和提高乳制品的营养和口感贡献力量。
然而，乳酸菌的分离与鉴定也面临一些挑战。
首先，食品中的乳酸菌种类繁多，分离出纯种菌株的难度较大。
其次，乳酸菌的生理生化特性相似，需要较为精确的实验手段和技术设备来进行鉴定。
此外，乳酸菌与其他微生物的相互作用也需要考虑，有时候必须结合其他鉴定方法才能得出准确结论。
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选
酸菜是一种受欢迎的食品，其发酵过程中产生的乳酸菌有很多益处。
在酸菜食品的发酵过程中，我们希望能够筛选出一些具有抗菌活性的菌株，特别是防腐乳杆菌。
本文将介绍酸菜食品中防腐乳杆菌的检测与筛选方法。
我们需要从酸菜样本中提取微生物。
我们可以通过采集一小段酸菜样品，并将其加入到无菌的PBS缓冲液中。
然后，我们可以将样品在无菌条件下进行均质处理，以得到一个均匀的样品悬液。
接下来，我们可以通过菌落计数方法来定量酸菜样品中的防腐乳杆菌。
我们可以将悬液进行一定倍数的稀释，并将其均匀地涂布在含有富营养的琼脂平板上。
然后，我们可以将琼脂平板培养在适宜的温度下，培养一段时间后，我们就可以观察到在琼脂平板上形成的菌落。
通过计数菌落的数量，我们可以推测原始样品中防腐乳杆菌的数量。
为了筛选出具有抗菌活性的防腐乳杆菌，我们可以使用抗生素敏感性试验。
我们可以挑选一些防腐乳杆菌的单菌落，将其接种在含有特定抗生素的琼脂平板上。
然后，我们可以观察菌落的生长情况，并根据抗生素对菌落的抑制效果，判断该菌株是否对特定抗生素具有耐药性。
通过这个方法，我们可以筛选出对抗生素敏感的菌株，并将其用于后续的研究。
通过微生物提取、菌落计数、抗生素敏感性试验和抑菌圈试验等方法，我们可以对酸菜食品发酵过程中的防腐乳杆菌进行检测与筛选。
这些方法可以帮助我们筛选出具有抗菌活性的菌株，并为酸菜食品的发酵工艺改进和产品质量提高提供科学依据。
酸菜汁中产细菌素乳酸菌的筛选与鉴定
干燥箱（ 上海一恒 科学仪 器有 限公 司） Ｚ Ｂ一３０ ；Ｍ ０ Ｅ型显微
收 稿 日期 ：００— ３—０ ２１ ０ ４
基金项 目： 辽宁省科 技攻关项 目（ 编号 ：０ ５ ００ ３ ； ２ ０ ２５ ０ ） 辽宁省重大 专
项 （ 号 ：０ ６０ ０ ３ 。 编 ２０ ３ １３ ）
１ 材 料 与方 法
１ Ｉ 试 验 材 料 ．
１１ １ 材 料 ．．
供试材料为 １ ６种天 然 发 酵 酸 菜 汁 。指 示 菌 为
膏 ６ｇ 氯化钠 ５ｇ 磷酸氢 二钾 ２ ５ｇ 葡 萄糖 ２ ５ｇ 蒸馏 水 ， ， ． ， ． ， １ ０ Ｌ ｐ ０ｍ ，Ｈ值 ７ ２～ ． 。Ｌ ０ ． ７ ４ Ｂ培 养基 ： 肉膏 ５ｇ 蛋 白胨 牛 ，
酸菜作为东北的传统食品 ， 史悠 久 ， 历 营养丰 富， 口味醇
厚， 深受消费者的喜爱。研究表明 ， 天然发酵酸菜 中含有大量 的乳 酸菌 ， 大多对健康 有益 。细菌素（ ａｔ ｉ ｉ） 由细菌产 ｂｃ ｒ ｃ 是 ｅｏ ｎ
生的一种抗生代谢产物 ， 含对同源种或近 似种 有拮抗作用 的
蛋 白质 或 多肽 物 质 。本 研 究从 不 同 的酸 菜 汁 中筛 选 出 ２株
关键词 ：酸菜汁 ；乳酸菌 ； 细菌素 ； 筛选 ； 鉴定 ； 乳杆菌
中 图分 类 号 ： Ｓ５ ．４ Ｔ ２ ５５ 文 献标 志码 ： Ａ 文章 编号 ： ０ １ ２—１０ （０ ０ ０ ０ ２ ０ ０ ３ ２ ２ １ ）３～ ３４— ３ 镜（ 上海 宙 山精 密 光 学 仪 器 有 限 公 司 ） 低 速 离 心 机 （ 京 医 ； 北
１ ， ０ｇ 氯化 钠 ５ｇ 蒸 馏 水 ｌ ０ Ｌ ｐ ， ０ｍ ，Ｈ值 ６５ ０ ．。
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选
酸菜食品发酵中防腐乳杆菌的检测与筛选酸菜是一种经过发酵制作的食品，具有浓厚的风味和独特的口感，深受人们喜爱。
酸菜的制作过程中，乳酸菌是起着重要作用的发酵菌种之一，可以促进酸菜的发酵过程，增强其口感和风味。
随着酸菜生产规模的不断扩大，发酵中产生的微生物问题在保质期和产品质量方面也逐渐凸显出来。
由于发酵过程中存在多种微生物群落，其中包括一些产生有害物质的微生物，因此如何进行发酵中的防腐乳杆菌检测与筛选就显得尤为重要。
在酸菜的发酵过程中，乳酸菌是一种重要的发酵菌种，是产生酸菜特有风味和酸菜质地的关键菌种。
乳酸菌主要通过在酸菜生产过程中的发酵活动产生大量乳酸，降低环境pH 值，抑制其它微生物的生长，从而保持酸菜的稳定性和可食性。
检测酸菜中的发酵防腐乳杆菌就显得尤为重要。
1.传统的检测方法目前，市面上主要采用传统的微生物学检测方法来检测酸菜中的发酵防腐乳杆菌。
这种方法主要是通过对酸菜样品进行菌落计数或鉴定酸菜中的微生物群落结构，来判断酸菜中的发酵防腐乳杆菌的数量和种类。
常用的检测方法包括菌落计数法、PCR扩增方法、实时定量PCR技术、荧光原位杂交技术、生物传感器技术等。
在常规的微生物学检测方法中，菌落计数法是最为常见的一种。
该方法通过将酸菜样品分离培养，然后对菌落进行计数。
传统的菌落计数法需要较长的培养时间，且结果不够准确、灵敏，难以对酸菜样品中存在的微生物进行全面而迅速的检测。
2.基于生物技术的检测方法酸菜中发酵防腐乳杆菌的检测和筛选，近年来逐渐倾向于采用基于生物技术的方法，这些方法具有高效、准确、快速等特点。
其中最突出的技术包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）和基因测序技术。
酶联免疫吸附测定法是一种先进的生物技术方法，它是一种高效、灵敏、快速、准确和可靠的定性和定量的分析方法。
其原理是利用酶标记抗体或抗原与患者血清中的抗原或抗体结合，再用底物染色产生颜色，进行半定量分析，测定微生物含量。
这种方法不仅可以对酸菜中的发酵防腐乳杆菌进行快速准确地检测，还可以大大降低误判率，提高检测效率。
酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及其体外降胆固醇能力研究
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２１ 年第 ｌ ０１ １期 总第 ３ 卷 ６
Ｃ ＮＡ ｏＮＤＩ ＥＮＴ ＨＩ Ｃ Ｍ
中 国 调 味 品
试 验 研 究
酸菜汁 中乳酸菌的分离鉴定及其体外降胆 固醇能力研究
章 秀梅 ， 昭 明， 翠姬 ， 刘 黄 贤乾 隆 ， 源波 黄
（ 西工学 院 生物与化 学工程 系 ，广西 柳 州 ５ ５ ０ ） 广 ４ ０ ６
（ ｐ ｒｍ ｅ ｔｏ ｏ ｏ ｉａ ｎ ｅ ｉａ ｇｎ ｅｉｇ，Ｇｕ ｎ ｘ ｉｅ ｓｔ Ｄｅ ａ ｔ ｎ ｆＢｉｌｇｃ ｌ ｄＣｈ ｍ ｃ ｌ ａ Ｅｎ ｉｅ ｒｎ ａｇ ｉ Ｕｎ ｖ ｒ ｉ ｙ ｏ ｃ ｎ ｌ ｇ ，Ｌｉｚ ｏ ４ ０ ６ ，Ｃ ｉａ ｆ Ｔｅ ｈ ｏｏ ｙ ｕ ｈ ｕ５ ５ ０ ｈｎ ）
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乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌的分离鉴定主要包括以下步骤：
1. 菌落筛选：根据菌落的颜色、大小、光泽度和透明程度，挑取含溶钙圈的单菌落。
2. 分离纯化：在MRS或Elliker固体培养基上反复划线分离，直到分离到纯的单一菌落。
3. 革兰氏染色：镜检观察菌体颜色、大小、形状和排列方式。
4. 过氧化氢酶实验：将革兰氏染色阳性、过氧化氢酶阴性的菌株初步认定为乳酸菌。
5. 保藏：用终浓度为25%甘油冻存管进行菌株的保藏，置于-80℃冰箱中保存备用。
乳酸菌的试验方法主要包括以下步骤：
1. 耐酸性优良菌株筛选试验：将分离纯化的乳酸菌和实验室耐酸性较好的WHH544接种到MRS液体培养基中，接种量为2%，于37℃培养箱中培养24小时，连续活化2代后，以6000r/min离心10分钟，弃去上清液，沉淀菌体用灭菌生理盐水洗涤、离心2次后，通过麦氏比浊法调整菌悬液浓度为×108CFU/mL。
2. 其他试验：根据具体研究需求进行相关试验，例如通过不同条件培养，观察菌株生长情况；或通过发酵实验，测定乳酸菌的产酸能力等。
以上内容仅供参考，建议查阅专业微生物学书籍或文献获取更全面和准确的信息。
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落 数 达 到 １３ ． ７×１ ｅ ／ ０ ｆ ｍＬ的 高 密度 富集 状 态 ， 发 酵 无 异 味 ， ｕ 且 口味 自然 ， 果较 好 。 效 关 键 词 农 家酸 菜 ； 乳酸 菌 ； 离及 鉴 定 分 中 图分 类 号 Ｑ ３— ３ ９ ３１ 文 献 标 识码 Ｂ 文章 编号 １０ ７ ２ （ＯＯ Ｏ ０ ９ ０ ０ ５— ０ １ ２ Ｌ ） ４— ０ ２— ４
（ 原 师 范学 院 生 物 系 ， 太 山西 太 原 ００ ３ ） ３０ １
摘
要 对 山 西 高平 市农 家酸 菜 汁 中乳 酸 茵含 量和 菌种 进 行 分析 研 究 ， 分 离筛选 得 到 ３株 产 酸 能 力较 强 的 经
菌 株 ， 其 进 行 鉴 定 并 对 其 生理 特 性进 行 研 究。 通 过 对 其 形 态 特征 、 落特 征 及 生 化特 征 进 行 分 析 可 知 ， 中 对 茵 其 ２株 为植 物 乳 杆 茵 （ ａｔ ａｉｕ ｐａ ｔ ｕ ， Ｌ ｃ ｂｃ ｓ ｌ ａ ｍ） ｌ株 为 短 乳 杆 菌 （ａｔ ａｉｕ ｒｒ ） ｏ Ｕ ｎｒ Ｌ ｃ ｂｃ ｌ ｂ ｌ 。对 筛 选 到 的 乳 酸 茵 进 行 酸 ｏ ｌ ｓ ｅｓ 菜 发 酵性 能研 究发 现 ， 中 茵株 Ｌ 其 ２在 发 酵 ２ 后 ， 酵 液 ｐ ４ｈ 发 Ｈ值 达到 ３４ 、 度 达 到 １６ 乳 酸 ／０ 、 ．７ 酸 ．７ｇ １０ｍＬ 菌
微 生物学杂 志 ２１年 ７ ００ 月第 ３ Ｏ卷 第 ４ 期
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山西 高 平市 农 家 酸菜 汁 中乳 酸菌 的分 离及 鉴 定
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