盘状结构域受体在人肝癌、肝硬化与正常肝组织中的表达及其意义
肝细胞癌癌组织中uPA及其受体的表达及意义
ｓ ｎ ｏ Ｐ ｎ Ｐ ｉ ｆｕ Ａ ａ ｄ ｕ ＡＲ ｙ ｐ ａ ｎ ｉ ｏ ｔｎ ｏ ｅ ｉ ｈ ｅ ｅｏ ｍｅ ｔ ｆＨＣＣ ｏ ｍａ ｌｙ ａ ｍｐ ｒ ｔｒ ｌ ｎ ｔ ｅ ｄ ｖ ｌ ｐ ｎ ａ ｏ ．
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Ｅｘ ｒｓ ｉｎ ａ ｄ ｃｉｉａ ｉｎｆ ａ ｃ ｆｕ ｐ ｅ ｓｏ ｎ ｌ ｃ ｌ ｇ ｉｃ ｎ ｅ ｏ ＰＡ， ＰＡＲ ｉ ｅ ａｏ ｅｌｌｒｃ ｒ ｉｏ ａ ｎ ｓ ｉ ｕ ｎ ｈ ｐ ｔ ｃ ｌ ａ ａ ｃｎ ｍ ｕ
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RhoA基因在肝细胞肝癌中的表达及其意义
RhoA基因在肝细胞肝癌中的表达及其意义*【摘要】目的探讨RhoA基因与肝细胞癌的发生、发展和侵袭、转移的关系。
方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）在半定量水平检测42例肝细胞癌及其相对应的癌旁肝组织中RhoA mRNA的表达，同时采用PCR产物单链构象多态性（PCR-SSCP）银染法检测RhoA基因的突变情况。
结果本组42例肝癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于癌旁肝组织（P<0.01）；有门静脉癌栓者其癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于无癌栓者（P<0.05）。
经PCR-SSCP银染法分析未发现异常泳动条带。
结论 RhoA基因在肝细胞肝癌进展中起重要作用，并可能与肝癌转移相关。
【关键词】肝癌；RhoA；基因表达；RT-PCR【Abstract】 Objective To investigate the expression of RhoA genein hepatocellular carcinoma and to evaluate the relationship between RhoA gene expression and invasion of hepatocellular carcinoma.Methods The mRNA expression of RhoA gene was examined by RT-PCR in 42 cases of hepatocellular carcinoma and adjacent non-cancerous tissue.In addition，the mutation of RhoA gene was examined by PCR-SSCP.Results The opacity density (OD) of RhoA mRNA expression in hepatocellular carcinoma tissues was significantly higher than that in adjacent non-cancerous tissues(P<0.01）.The OD of RhoA mRNA expression in hepatocellular carcinoma with intrahepatic metastasis was significantly higher than that without intrahepatic metastasis (P<0.05）.Mutation was not found in RhoA gene by PCR-SSCP examination.Conclusion The RhoA gene may be related to malignant transformation and development of hepatocellular carcinoma probably by overexpression.【Key words】 hepatocellular carcinoma；RhoA；gene expression；RT-PCR原发性肝癌发生率高，手术切除是目前最主要的治疗方法。
RhoA在肝癌组织中的表达及其临床意义
维普资讯
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Ｒｏ ｈＡ在 肝 癌 组 织 中 的表 达 及 其 临床 意 义
张晓梅 王波 陈孝平 田德安
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肿瘤细胞外基质及盘状结构域受体1研究进展
doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2023.23.0247肿瘤细胞外基质及盘状结构域受体1研究进展熊逸潇1，杨盛力2，张万广1Progress of Research on Tumor Extracellular Matrix and Discoidin Domain Receptor 1 XIONG Yixiao1, YANG Shengli2, ZHANG Wanguang11. Hepatic Surgery Center, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China;2. Cancer Center, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430023, China CorrespondingAuthor:ZHANGWanguang,E-mail:****************Abstract: Tumor extracellular matrix (ECM) is the center component of tumor microenvironment (TME), ECM diversity constitutes the inherent heterogeneity of TME that contributes to tumor growth, dormancy, drug resistance, and metastasis. Discoidin domain receptor 1 is one of the ECM receptors that interact with multiple ECM ligands. It also regulates the occurrence and development of tumors. Accordingly, DDR1 plays an increasingly important role in the prevention, diagnosis, and treatment of cancer. In this review, we primarily summarize the research of ECM and its receptors with components, regulation, cell receptors, and signaling pathways in tumor progression.Key words: Tumor microenvironment; Extracellular matrix; Discoidin domain receptor 1Competing interests: The authors declare that they have no competing interests.摘 要：肿瘤细胞外基质（ECM）是肿瘤微环境的重要成分，ECM的多样化和复杂的相互作用构成了肿瘤微环境丰富的异质性，在肿瘤的生长、休眠、耐药和复发转移过程发挥了巨大作用。
EPO及EPOR在肝细胞癌中的表达及临床意义
ＥＰＯ和ＥＰＯＲ在肝细胞癌中的表达及临床意义
中文摘要
ＥＰＯ和ＥＰＯＲ在肝细胞癌中的表达及临床意义
专业：肿瘤学
硕士生：梁文昌
导师：郭荣平主任医师
摘要
Ｇｒａｄｕａｔｅ ｓｔｕｄｅｎｔ：Ｌｉａｎｇ
Ｗｅｎｃｈａｎｇ
Ｓｕ ｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．Ｇｕｏ Ｒｏｎｇｐｉｎｇ
ＡＢ ＳＴＲＡＣＴ
ＢＡＣＫＧＲＯＵＤ＆ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ：Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＨＣＣ）ｉｓ
ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｆｒｅｑｕｅｎｔ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｉｎ Ｃｈｉｎａ，ＨＣＣ ｉｓ ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ｍｏｓｔ ｆｒｅｑｕｅｎｔ
ｏｎｅ
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ｃａｕｓｅ
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ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ－ｒｅｌａｔｅｄ ｄｅａｔｈ．Ａｔ
ｐｒｅｓｅｎｔ，ｈｅｐａｔｉｃ ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ ｉｓ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｃｈｏｉｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ＨＣＣ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｅｖｅｎ ｔｈｅ ＨＣＣ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｕｎｄｅｒｗｅｎｔ ｒａｄｉｃａｌ ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ
ＥＰＯ和ＥＰＯＲ在肝细胞癌中的表达及ｌ临床意义
中文摘要
组差异有统计学意义（Ｐ＜ｏ．０５）。ＥＰＯ低表达组的１、３、５年无瘤生存率分别为 ８１．４％、３７．６％及１４．Ｏ％，高表达组分别为５１．１％、２０．１％及１０．４％，差异无统 计学意义（尸＞０．０５）；ＥＰＯＲ低表达组的１、３、５年无瘤生存率分别为７６．２％、 ４２．１％及１６．５％，高表达组分别为５５．６％、１４．Ｏ％及７．８％，差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０５）。ＥＰＯ低表达组的ｌ、３、５年总体生存率分别为８５．５％、７５．Ｏ％及５２．４％，
生化检验指标相应缩写及所代表意义
生化检验指标相应缩写及所代表意义1、检验项目谷丙转氨酶英文缩写ALT正常参考值0-40IU/L临床意义增高：常见于急慢性肝炎，药物性肝损伤，脂肪肝，肝硬化，心梗，胆道疾病等。
谷丙转氨酶（又名谷氨酸转氨酶，简称GPT、ALT）升高在临床是很常见的现象。
肝脏是人体最大的解毒器官，该脏器是不是正常，对人体来说是非常重要的。
GPT升高是肝脏功能出现问题的一个重要指标。
在常见的因素里，各类肝炎都可以引起GPT升高，这是由于肝脏受到破坏所造成的。
一些药物如抗肿瘤药、抗结核药，都会引起肝脏功能损害。
大量喝酒、食用某些食物也会引起肝功能短时间损害。
2、检验项目谷草转氨酶英文缩写AST正常参考值0-40I/L临床意义增高：常见于心梗，急慢性肝炎，中毒性肝炎，心功能不全，皮肌炎等。
正常情况下，谷草转氨酶存在于组织细胞中，其中心肌细胞中含量最高，其次为肝脏，血清中含量极少。
谷草转氨酶主要存在于肝细胞线粒体内，当肝脏发生严重坏死或破坏时，才能引起谷草转氨酶在血清中浓度会偏高。
谷草转氨酶偏高，肝炎患者转氨酶数值老是居高不下，反映肝细胞炎症始终未停止，肝细胞肿胀、坏死持续存在。
测定血清中此酶含量可用以协助诊断疾病和观察预后。
3、检验项目转肽酶英文缩写GGT正常参考值0-40IU/L临床意义增高：常见于原发性或转移性肝癌，急性肝炎，慢性肝炎活动期，肝硬化，急性胰腺炎及心力衰竭等转肽酶（sortase）功能：在蛋白质生物合成过程中肽键的形成具有必须的作用。
转肽酶识别特异多肽,催化不同的转肽反应。
在体内分布很广，如肾、肝、胰等脏器均有些酶。
但血清中GGT主要来自肝脏，具有较强的特异性。
所以当肝胆系统病变的时候，GGT活性升高，临床上测定此酶活性来协助诊断肝胆疾病。
一、生理性造成的转肽酶高：如当出现阻塞性黄疸时，酶类出现异常，就会逆流入血，转肽酶就会出现偏高；另外，肝胆疾病引起的转肽酶偏高。
常见的疾病有病毒性肝炎，肝硬化，胆管炎、原发性肝炎、胆外管道炎。
DDR1在消化系统肿瘤中的研究进展
DDR1在消化系统肿瘤中的研究进展作者：魏丽娜程龙张德奎来源：《新医学》2021年第10期通信作者简介：张德奎，兰州大学第二医院消化内科主任医师、博士研究生导师，美国加州大学洛杉矶分校访问学者，甘肃省卫生厅领军人才，甘肃省消化委员会副主任委员，甘肃省细胞生物学会副主任委员，甘肃省消化医师协会副会长，甘肃省医学会幽门螺杆菌学组组长，中华医学会吴阶平基金会炎症性肠病联盟常委，Plos One、WJG、《中华临床医师杂志》《中国全科医学杂志》《中国现代医学杂志》及《兰州大学学报（医学版）》等杂志编委或审稿专家。
2011年恩德斯消化内镜杰出青年奖获得者。
主要研究方向为炎症性肠病与消化道肿瘤。
从事消化内科临床工作近20年。
现主持国家自然科学基金项目2项，省卫生厅行业计划项目1项，省自然科学基金2项，其他科研项目5项，在国内外杂志发表文章50余篇，其中SCI文章10篇。
获得省级科技进步二等奖1项，厅级医学科技奖2项。
【摘要】随着生活方式、饮食习惯的改变，消化系统肿瘤已经成为造成癌症相关死亡的重要原因，由于临床症状的非特异性，多数患者在发现病灶时已伴有远处转移，亟待寻找肿瘤早期转移的机制。
盘状结构域受体1（DDR1）是一种新型受体酪氨酸激酶，在许多肿瘤中表达异常，并且通过细胞增殖、上皮间质转化、迁移和侵袭等多种机制参与到肿瘤的进展过程。
该文就DDR1在消化系统肿瘤中的作用和机制作一综述，以期为其诊治研究提供新的思路。
【关键词】盘状结构域受体1;受体酪氨酸激酶;消化系统肿瘤Research progress on DDR1 in digestive system tumors Wei Lina， Cheng Long， Zhang Dekui. Department of Gastroenterology， Lanzhou University Second Hospital， Lanzhou 730030， ChinaCorresponding author， Zhang Dekui， E-mail：*****************【Abstract】 Along with the changes in lifestyle and eating habits， digestive system tumors have become a major cause of cancer-related deaths. Due to the non-specific clinical symptoms，most patients have been complicated with distant metastases when the lesions are detected. It is urgent to unravel the mechanism underlying early tumor metastasis. Discoidin domain receptor 1 （DDR1）is a novel type of receptor tyrosine kinase， which is abnormally expressed in multiple types of tumors. It is involved in tumor progression through multiple mechanisms， such as cell proliferation， epithelial mesenchymal transformation， migration and invasion， etc. This article reviewed the role and mechanism of DDR1 in digestive system tumors， aiming to provide novel ideas for the diagnosis and treatment of this disease.【Key words】 Discoidin domain receptor 1; Receptor tyrosine kinase; Digestive system neoplasm常见的消化系统肿瘤有胃癌、结直肠癌、肝癌及胰腺癌等，其病死率在各个国家和地区之间存在差异，但随着我国人口老龄化，其病死率也将逐渐上升[1-4]。
肝硬化pptppt课件【30页】
替代治疗
对于严重肝肾综合征患者，可 考虑血液透析或腹膜透析等替
代治疗。
05
患者教育与心理支持体系建设
提高患者对疾病认识水平
开展健康讲座和培训课程
01
组织专业医生或护士定期开展肝硬化相关健康讲座，提高患者
对疾病的认识和理解。
制作并发放宣传资料
02
设计并制作易于理解的肝硬化宣传资料，如手册、折页等，发
腹腔镜活检
在腹腔镜引导下进行肝组 织取样，适用于穿刺活检 难以确诊的患者。
术中活检
在手术过程中进行肝组织 取样，主要用于肝硬化合 并其他需要手术治疗的疾 病患者。
03
肝硬化治疗原则与措施
一般治疗原则
01
休息
肝功能代偿者宜适当减少活动，可参加轻工作；失代偿期患者应卧床休
息为主。
02
饮食
以高热量、高蛋白质和维生素丰富而易消化的食物为宜。严禁饮酒。
建立心理支持小组
组织有相似经历的患者成立心理支持小组，促进患者间的交流和 支持。
家庭和社会资源整合利用
家庭参与教育
鼓励家庭成员参与患者的健康教育过程，提高家庭对疾病的整体认 识和支持水平。
社会资源整合
利用社区、慈善机构等社会资源，为患者提供经济、物质等方面的 帮助和支持。
互助小组建设
组织患者及其家属成立互助小组，分享经验和资源，共同应对疾病带 来的挑战。
放给患者及其家属。者如何积极参与自身疾病的管理，包括合理饮食、按时
服药、定期复查等。
心理干预和辅导服务提供
评估患者心理状态
通过专业心理评估工具，了解患者的心理状况和需求。
提供个性化心理支持
根据患者的具体情况，提供个性化的心理支持和辅导服务，如认 知行为疗法、放松训练等。
肝脏受体的位置分布、配体与功能
清道夫受体配体广泛，有：
• ①乙酰化或氧化LDL等修饰的LDL； • ②多聚次黄嘌呤核苷酸和多聚鸟嘌 呤核苷； • ③多糖如硫酸右旋糖酐； • ④某些磷脂，如丝氨酸磷脂，但卵 磷脂不是配体； • ⑤细菌制中起有重要的作用； •可清除血管壁过多脂质； •清除病菌毒素，摄取内毒素多方面的功能。
功能： EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、 肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有 关。 EGFR的表达在恶性肿瘤的演进中起重 要作用。胶质细胞、肾癌、肺癌、前 列腺癌、胰腺癌、乳腺癌等组织中都 有EGFR的表达，对胶质细胞瘤的研究 发现EGFR的高表达主要与其基因扩增 有关。 EGFR在肿瘤中的高表达还可能与活化 后降解减少有关，
功能：在生殖系统、骨组织、心血管和中枢神经系统中发 挥着重要的生理作用,是治疗骨质疏松和乳腺癌的重要药 物作用靶标。
用于治疗绝经后妇女的骨质疏松和乳腺癌。
十一、肝X受体（LXRs）
肝X 受体( liverX receptors, LXRs)属于核受体家族成 员，作为一种氧化型固醇激活的核受体, 参与可通过调节脂 质代谢, 抑制炎症基因表达, 发挥抗动脉粥样硬化作用。
肝脏受体分类
通过查阅资料，肝脏受体主要有以下几种：
膜受体 核受体
蛋白类受体
低密度脂蛋白受体(LDL-R)、极低 密度脂蛋白受体(VLDL-R)、高密 度脂蛋白受体(HDL-R）、清道夫 受体 、去唾液酸糖蛋白受体
肝X 受体( LXRs) 雌激素受体
雌激素受体包括两大类： •一是经典的核受体，包括E R a 和E R b ； •二是膜性受体，包括经典核 受体的膜性成分以及属于G 蛋 白偶联受体家族的G P E R 1 ( G P R 3 0 ) 、G aq- E R 和E R – X。
盘状结构域受体1的研究进展
盘状结构域受体1的研究进展谢瑞霞;王小英;张建刚;张德奎【摘要】盘状结构域受体1(DDR1)是近年来发现的一种新型受体型蛋白酪氨酸激酶(RTK),能与多种胶原蛋白特异性结合并被激活,活化一系列细胞内外信号传导,参与多种疾病过程,如肿瘤的发生发展、炎性反应和纤维化的发生、进展等.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2014(034)004【总页数】4页(P555-558)【关键词】盘状结构域受体1;受体型蛋白酪氨酸激酶;肿瘤;炎性反应;纤维化【作者】谢瑞霞;王小英;张建刚;张德奎【作者单位】兰州大学第二医院消化科,甘肃兰州730000;兰州大学第二医院消化科,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院病理研究所,甘肃兰州730000;兰州大学第二医院消化科,甘肃兰州730000【正文语种】中文【中图分类】R73盘状结构域受体1(discoidin domain receptor1，DDR1)是近年来发现的一种新型受体型酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases, RTKs)，能与胶原蛋白特异性结合并被其激活，进而参与一系列细胞内外信号的传导。
DDR1能够促进机体细胞的黏附、迁移和分化以及炎性因子的释放。
DDR1与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移密切相关。
DDR1是在筛选乳腺癌细胞时发现的[1]，与随后发现的DDR2组成了DDRs家族，而DDRs家族为PTKs超家族的一员。
DDRs家族的特别之处在于胞外区都含有一个由155个氨基酸组成的的圆盘状结构。
DDR1基因定位于人的6P21和小鼠的17C，编码的蛋白质含913个氨基酸，由胞外区、跨膜区和胞内激酶区3部分构成。
人的DDR1基因组约包含17个外显子，其中胞外区有8个，跨膜区1个，近膜区3个，酪氨酸激酶催化区5个[2]。
DDR1可被一种未知的蛋白酶裂解为54 kb位于胞外区的可溶性α亚单位和63 kb的锚定于膜上的β亚单位。
通过选择性剪切，发现DDR1有5个亚型，分别为DDR1a、DDR1b、DDR1c、DDR1d和DDR1e，目前仅证实DDR1a和DDR1b有生物功能[2]。
肝癌的解剖学与病理学特点
肝癌的解剖学与病理学特点肝癌，即肝细胞癌，是世界范围内发病率较高的肿瘤之一，具有一定的解剖学和病理学特点。
了解肝癌的解剖学与病理学特点，对于肝癌的诊断和治疗具有重要的指导意义。
本文将就肝癌的解剖学特点、肿瘤分级、组织学类型和浸润方式等方面进行探讨。
一、肝癌的解剖学特点肝脏是人体最大的内脏器官之一，具有丰富的血液供应和淋巴引流系统。
肝癌最常见的发生部位是肝实质，通常呈现为多发的病灶。
其中，右叶和左叶是肝癌最常见的发生区域。
另外，肝门区、肝包膜、门脉分叉和肝内血管等也是肝癌好发部位。
肝癌在组织器官的解剖学特点主要表现为两方面：一是肝癌的发生常伴随肝硬化，而肝硬化又是肝癌的主要预癌病变；二是肝内血供丰富，血管网络发达，因此肝癌具有较高的血管浸润和转移率。
二、肝癌的肿瘤分级肝癌的肿瘤分级是根据肿瘤细胞的异型性程度和分裂活跃性来评估肿瘤的恶性程度。
肝癌的分级标准主要采用了Edmondson-Steiner分级标准，分为四个级别：I级为低分化，IV级为高分化。
分级越高，肿瘤细胞的异型性越明显，恶性程度越高。
肿瘤分级有助于判断肝癌的预后和治疗方案的选择。
三、肝癌的组织学类型肝癌的组织学类型多种多样，常见的有肝细胞癌、胆管细胞癌和混合型肝癌等。
1.肝细胞癌（HCC）肝细胞癌是最常见的肝癌类型，占据肝癌的大部分病例。
它起源于肝细胞，具有肝细胞的特点。
肝细胞癌的组织学形态多样，主要包括结节型、浸润型、间质型和混合型等。
2.胆管细胞癌（CCC）胆管细胞癌是一种来源于胆道上皮细胞的恶性肿瘤。
它的组织学特点是胆管样结构的增生，具有弥漫性生长的特点。
3.混合型肝癌混合型肝癌是指肝细胞癌和胆管细胞癌同时存在的肝癌类型。
它的组织学特征是具有肝细胞癌和胆管细胞癌的特点，两者呈现混合存在的形态。
四、肝癌的浸润方式肝癌的浸润方式有三种类型：局灶性生长、浸润性生长和混合性生长。
1.局灶性生长局灶性生长是指肝癌以结节的形式生长，肿瘤细胞仅局限于肝内一定的区域，不涉及肝的全身。
了解肿瘤相关细胞外基质
了解肿瘤相关细胞外基质癌症免疫治疗的发展，特别是免疫检查点阻断疗法，在癌症治疗方面取得了重大突破。
然而，仅有不到三分之一的癌症患者能够通过癌症免疫治疗获得显著而持久的治疗效果。
在过去的几十年里，我们了解到，慢性炎症的肿瘤微环境（TME）在肿瘤免疫抑制中起主要作用。
而肿瘤相关细胞外基质（ECM）作为TME的核心成员，成为近年来的研究热点。
越来越多的研究表明，肿瘤相关ECM是获得更成功的癌症免疫治疗病例的主要障碍之一。
ECM是一种非细胞三维大分子网络，由胶原蛋白、蛋白多糖（PGs）/糖胺聚糖（GAG）、弹性蛋白、纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白和其他几种糖蛋白组成。
无论是在正常组织还是在肿瘤中，基质成分和细胞粘附受体相互结合，形成了一个复杂的网络，其中存在着多种细胞。
多年来，ECM一直被认为是一种惰性的细胞支架，只为细胞提供结构。
然而在过去二十年中，人们发现了更多影响细胞生物化学和生物物理过程的功能，ECM被视为生物活性分子的储存库和结合位点。
细胞表面受体将信号从ECM传输到细胞，以调节多种细胞功能，如生存、生长、迁移、分化和免疫，这对维持正常内环境平衡至关重要。
大量研究表明，肿瘤相关ECM参与促进肿瘤细胞的生长、侵袭、转移和血管生成，而且抵抗细胞死亡和药物扩散。
因此，深入了解ECM与肿瘤免疫反应之间的关系，将有助于发挥靶向肿瘤相关ECM改善癌症免疫治疗的潜力。
细胞外基质与肿瘤细胞外基质是细胞外分泌的大分子（如胶原蛋白、酶和糖蛋白）的复杂网络，其主要功能涉及细胞和组织的结构支架和生化支持。
一般而言，ECM可分为基底膜（BM）和间质基质（IM），分别支持上皮/内皮细胞，以及底层基质室和细胞周膜。
周围ECM的降解是浸润性癌生长的重要组成部分，更重要的是，ECM的降解伴随着不同肿瘤特异性ECM的沉积，导致密度和硬度的增加。
基底膜由胶原、层粘连蛋白、PGs和FN组成，位于薄壁组织和结缔组织之间的界面，为薄壁细胞提供锚定片状层，以便将其固定在一起，防止其撕裂。
观察分析肝硬化及肝癌患者γδT细胞的表达
１ 资料与方法
１ ． １ 一 般 资 料
应病 毒 入 侵 的结 果 。 已有 许 多研 究 资 料表 明， 免疫 细胞 的 比例 失衡 与功能 失调 ，很有可 能是导致 乙型肝 炎、肝硬
选取 我院２ ０ １ ５ 年１ 月～２ ０ １ ６ 年６ 月收治 的肝硬化 与肝癌
化 、肝癌 发病 的重 要 因素 。ｙ Ｓ Ｔ细胞 是近 年来 临床 新认识
刘 玲
（ 唐河县人民医院 ，河南 南 阳
４ ７ ３ ４ ０ ０ ）
【 摘 要 】目的 对肝硬 化及肝 癌 患者ｙ ８ Ｔ ￣ ｌ 胞 的表达展 开分析 。方法 选取我 院２ 叭５ 年１ 月～２ ０ １ ６ 年６ 月收 治的肝硬化 与肝癌 患者 各４ Ｏ 例和４ ０ 例体检健 康者作 为研 究对象 ，分别将４ Ｏ 例体检健 康者 、肝硬化 者、 肝癌 者作 为三组研 究对 象，均应 用流式 细胞 仪检 测三组 外周Ａｙ Ｓ Ｔ￣胞 的 比例 ，比较 三组 间的差异性 。结 果 体 检健康 组 、肝硬 化组 、肝癌 组三组 的外周 血Ｙ ６ Ｔ 细胞分 别为 （ ６ ． ８ ３±２ ． ４ ２）％、 （ ４ ． ７ ８ ±２ ． ７ ６）％、
的一种Ｔ 细 胞亚群 ，绝大 多数 的７ ８ Ｔ 细胞为Ｃ Ｄ３ ＋ Ｃ Ｄ４ ＂ Ｃ Ｄｓ Ｔ 细 胞 。在体 检健康 的正常人 群 中，外 周血 ＠ｙ Ｓ Ｔ 细胞约 占Ｔ 细
患者 各４ ０ 例和４ ０ 例体 检健康 者作 为研究对 象 ，肝硬 化与 肝
癌患者 ，年龄分别为 （ ５ ２ ． ６ ±６ ． ４ ４ ）岁、 （ ５ ３ ． ４ ±６ ． １ ５ ）岁， 肝硬 化与肝 癌 患者均经 临床相 关检查 确诊疾病 ，排 除心 、
（ ３ ． ８ ５ ±２ ． １ ７ ） ％，体检健康 组外周血丫 ６ Ｔ 细胞分别与肝硬化组 、肝癌组进行 比较 ，组间比较 ，差异有统计学 意义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５）；肝硬 化与肝癌组外周－ ＆ｙ ８ Ｔ ￣胞 比较 ，差异无统计 学意义 （ Ｐ＞０ ． ０ ５）。结论 肝硬化 与肝 癌患者外周血１ ， ６ Ｔ 细胞表达呈逐渐降低趋势 ，说明丫 ６ Ｔ 细胞在肝硬化和肝癌的发病 中具有重要的作用 ，临床 可
盘状结构域受体DDRs家族在肝纤维化中的作用
安徽医科大学学报 ＡｃｔａＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＭｅｄｉｃｉｎａｌｉｓＡｎｈｕｉ ２０２１Ｊｕｎ；５６（６）
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及 ＨＳＣｓ的密度都明显增加。在四氯化碳诱导后的 ＤＤＲ２－／－小鼠的静息期 ＨＳＣｓ中，骨桥蛋白、转化生 长因子、单核细胞趋化蛋白１以及白介素 １０明显增 加，ＭＭＰ２、ＭＭＰ１３以 及 Ⅰ 型 胶 原 明 显 减 少。从 ＤＤＲ２－／－小鼠慢性损伤的肝脏中分离的 ＨＳＣｓ体外 迁移和增殖的能力增加，但降解 ＥＣＭ的活性降低。 从四氯化碳诱导的 ＤＤＲ２－／－小鼠肝脏中分离的巨 噬细胞向 ＨＳＣｓ的趋化活性明显强于野生型，同时 降解 ＥＣＭ能力增加，活化的 ＨＳＣｓ分泌巨噬细胞抗 迁移因子来防止 巨 噬 细 胞 向 外 迁 移［２２］。 这 些 研 究 表明 ＤＤＲ２通过协调 ＨＳＣｓ与巨噬细胞的旁分泌作 用来减缓慢性肝纤维化。ＤＤＲ２在 ＨＳＣｓ中的信号 通路中下 调 纤 维 化 相 关 的 细 胞 因 子 的 表 达，上 调 ＥＣＭ相关成分如 ＭＭＰ２、ＭＭＰ１３和Ⅰ型胶原的表 达，从而抑制慢性纤维化的发展。 ２．３ 抗纤维化药物的发展现状 抗纤维化药物对 于预防纤维化的发展和逆转晚期酒精性肝炎、非酒 精性脂肪性肝炎、病毒性肝炎（乙型和丙型）以及自 身免疫性肝病是特别需要的。肝脏是药物代谢的重 要靶器官，口服或非肠道给药后肝脏会维持一个较 高的药物水平。目前有一些治疗可以进一步靶向特 定的肝细胞或细 胞 受 体 ［２３］。 虽 然 针 对 慢 性 肝 病 的 主要病理过程的治疗方法是最佳的抗纤维化治疗策 略，对晚期纤维化能够进行有效的治疗，但并不能够 预防纤维化过程中的并发症———如肝的代谢失调、 静脉曲张引起的大出血、感染和肝癌［２４］。这就体现 了开展特异性抗纤维化药物临床验证的必要性。在 临床药物试验第 １～２阶段，正在测试的有希望的实 验药物主要是间接抗纤维化药物，其列表和详细描 述也已经出版［２５］。一些直接的抗纤维化的药物，即 那 些 针 对 下 游 靶 点 的 药 物，主 要 是 针 对 活 化 的 ＨＳＣ、ＭＦ和胆管细胞、ＥＣＭ 分子、ＥＣＭ 受体和 ＥＣＭ 交联酶，此类药物应适用于所有的纤维化肝病以及 其他的一些纤维化疾病。此外，靶向在纤维化进程 中扮演重要作用的 ＤＤＲｓ家族来间接影响纤维化的 进程也是一个不错的选择。ＤＤＲｓ家族中的两个成 员 ＤＤＲ１和 ＤＤＲ２在肝纤维化中的作用各不相同。 目前 ＤＤＲ１与 肝 纤 维 化 的 研 究 报 道 甚 少，已 知 ＤＤＲ１与肝硬化的发展相关。ＤＤＲ２缺失小鼠实验 证实 ＤＤＲ２抑制慢性肝纤维化的发展。通过干预 ＤＤＲｓ家族来 调 控 下 游 信 号 通 路，进 而 调 控 纤 维 化 的进程，将是一种治疗肝纤维化的新思路。
性激素受体在肝癌患者癌组织和癌旁组织中的表达及意义
性激素受体在肝癌患者癌组织和癌旁组织中的表达及意义摘要】目的：探讨性激素受体在肝癌患者癌组织和癌旁组织中的表达及意义。
方法：选取我院2013年5月～2015年5月在医院收治的48例肝癌患者，作为临床研究对象，对肝癌患者进行雌激素受体（ER）和雄激素受体（AR）蛋白的测定。
所有患者均进行雌激素受体（ER）、雄激素受体（AR）、孕激素受体（PgR）其血清含量的测定。
结果：ER和AR在肝癌患者癌组织和癌旁组织蛋白的阳性表达中，癌组织高于癌旁组织（P<0.05），具有统计学意义。
在癌灶组织和癌周组织中，肝癌组织和癌周组织的性激素受体含量，AR含量>Pg>ER，且P<0.05，差异具有统计意义。
结论：肝癌患者组织中性激素受体的阳性表达水平高于癌周组织，且肝癌组织和癌周组织的性激素受体含量水平雄激素高于孕激素，孕激素高于雌激素，在肝癌的病变过程中具有参考及诊疗的价值，可以进一步的研究。
【关键词】性激素受体；癌组织；癌旁组织【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）17-0138-02近几年来，伴随着经济的发展和物质的丰富，人们的生活习惯亦越来越不规律，肝癌的患者在日趋增多，因此对于如何预测和诊断肝癌的发生，如何通过有效的指标来防治肝癌，一直是临床医生们困扰的问题。
传统对肝癌诊断的主要指标之一是甲胎蛋白（AFP），现已被临床医生所熟悉和采用，有研究表明，性激素是肝癌患者病变发生和发展的标志物，本研究探讨性激素受体在肝癌患者中的作用机制，探索其效果，现将报告如下。
1.资料和方法1.1 一般资料选取2013年5月～2015年5月在我院收治的48例肝癌患者，将其作为临床研究对象，全组中男性34例，女性14例，年龄42～72岁，中位年龄57岁，病程4个月以内者42例，大于4个月者6例，乙肝表面抗原（HBsAg）阳性者38例，占79.17%，阴性者10例，占20.83%。
盘状结构域受体1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义
盘状结构域受体1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义姚红羽;阳志军【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2018(040)008【摘要】Objective To investigate the expression and clinical significance of discoidin domain receptor 1(DDR1) protein in human ovariantissues.Methods The expressions of DDR1 protein were detected by immunohistochemical method in 33 normal ovarian tissues,43 benign ovarian tumor tissues and 94 ovarian cancer tissues.The positive expression rates of DDR1 protein were compared among ovarian cancer patients with different clinicopathological features.The relation of the positive expression of DDR1 protein with the prognosis of ovarian cancer patients was analyzed.Results The positive expression rate of DDR1 protein in ovarian cancer tissues was higher than those in the other tissues(allP<0.05),but there was no significant difference between benign ovarian tumor tissues and normal ovarian tissues(P>0.05).The positive expression rates of DDR1 protein were higher in the patients with International Federation of Gynecology and Obstetrics(FIGO) stag e Ⅲ-Ⅳ,poor differentiation and peritoneal metastasis than the rates in the patients with FIGO stageⅠ-Ⅱ, moderate/well differentiation and without peritoneal metastasis respectively(all P <0.05).The positive expression of DDR1 protein and peritoneal metastasis were the risk factors for death in theovarian cancer patients(all P<0.05).Conclusion DDR1 protein is overexpressed in ovarian cancer tissues,probably participates in the occurrence,progression and distal metastasis of ovarian cancer,and may be taken as an important factor for evaluating the prognosis of ovarian cancer patients.%目的探讨人卵巢癌组织中盘状结构域受体1(DDR1)蛋白的表达情况及其临床意义.方法运用免疫组化法检测33例正常卵巢组织、43例卵巢良性肿瘤组织及94例卵巢癌组织中的DDR1蛋白表达情况,比较不同临床病理特征卵巢癌患者的DDR1蛋白阳性表达率,分析DDR1蛋白阳性表达与卵巢癌患者的预后关系.结果卵巢癌组织的DDR1蛋白阳性表达率均高于其他组织(均P<0.05),而正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤组织间,差异无统计学意义(P>0.05).国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ~Ⅳ期者、低分化者、有腹腔转移者的DDR1蛋白表达阳性率分别高于Ⅰ~Ⅱ期者、中-高分化者高、无腹腔转移者(均P<0.05).DDR1蛋白的阳性表达及腹腔转移是卵巢癌患者死亡的危险因素(均P<0.05).结论 DDR1蛋白在卵巢癌组织中呈高表达,其可能参与卵巢癌的发生发展与远处转移,或可成为评估卵巢癌患者预后的重要因素.【总页数】5页(P876-879,885)【作者】姚红羽;阳志军【作者单位】广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科暨区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室,南宁市 530021;广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科暨区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室,南宁市 530021【正文语种】中文【中图分类】R737.31【相关文献】1.半乳糖凝集素-3和盘状结构域受体1在食管鳞癌组织中的表达及意义 [J], 刘玉含;闫琛;康运凯;魏攀2.盘状结构域受体2在前列腺癌组织标本中的表达及临床意义 [J], 许妍妮;张键;李婧;张燕3.绿色荧光蛋白与鼠盘状结构域受体2融合基因的构建与表达 [J], 周洁;刘新平;张远强4.盘状蛋白结构域受体1在乳腺癌及其他恶性肿瘤中的研究进展 [J], 陈力;朱梦柳;孔祥溢;王翔宇;王仲照;方仪;王靖5.盘状结构域受体1在食管鳞癌组织中的表达 [J], 李超;向小勇;陈力;沈学远;洪斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
盘状结构域受体2胞外区在酵母系统中的融合表达、纯化和功能鉴定
盘状结构域受体2胞外区在酵母系统中的融合表达、纯化和功能鉴定作者：陈健康张伟刘楠楠刘利兵田菲铁茹【摘要】目的：盘状结构域受体2（discoidin domain receptor2, DDR2）是一种与肿瘤细胞转移相关的蛋白酪氨酸激酶，研究DDR2在类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis, RA）软骨破坏和肿瘤转移中的作用. 方法：在毕赤酵母中表达DDR2胞外区片段（不含信号肽和跨膜区，命名为DR），并将所表达的蛋白进行纯化和功能鉴定，以备将来用作DDR2的特异性阻断剂. 结果：获得了两株较高表达His DR融合蛋白的毕赤酵母克隆；其表达的蛋白质中可溶性部分约占全部融合蛋白的18%；经Ni NTA(nitric tri acetic acid)柱纯化后，获得了纯度约90%以上的可溶性His DR融合蛋白；竞争结合抑制实验显示，His DR具有阻断和细胞表面天然DDR2受体结合的功能. 结论：所表达的融合蛋白His DR具有抑制天然DDR2功能的作用.【关键词】盘状结构域受体2：胞外区；基因表达；阻断剂【Abstract】AIM: To investigate the role of discoidin domain receptor 2 (DDR2) in the destruction of cartilage in rheumatoid arthritis (RA) and tumor metastasis. METHODS: We expressed extracellular domain of DDR2 fused with a His tag to increase protein solubility and facilitate purification (without signal peptide and transmembrane domain, designated DR) in Pichia pastoris, purified the expressed protein, andcharacterized its function, for the purpose of future application as a specific DDR2 antagonist. RESULTS: Two clones with relatively high expression of HisDR were obtained. After purification by a Ni NTA (nitric tri acetic acid) chromatographic column, soluble fused His DR with over 90% purity was obtained. Competitive binding inhibition assay demonstrated that the expressed His DR could block the binding of DDR2 and natural DDR2 receptors on synovial cell surface. CONCLUSION: Extracellular domain of DDR2 fused with a His tag could block the binding of DDR2 and natural DDR2 receptors.【Keywords】discoidin domain receptor 2; extracellular domain; gene expression; blocker0引言盘状结构域受体(discoidin domain receptors，DDR2)是一类带有盘状结构域的受体型酪氨酸激酶，这类激酶在哺乳类动物体内有两种，分别为DDRl和DDR2［1］. 研究发现，这类激酶广泛分布，与某些肿瘤的转移相关，其中DDRl表达于肿瘤的组织细胞而DDR2表达于间质细胞［2-6］. 人关节滑膜组织也表达DDR2［7］. 对于DDR2，纤维性胶原，如I,Ⅱ和Ⅲ型胶原，是它的配体，胶原与DDR2的结合可上调细胞MMP1的表达［8］. 为了研究DR2在肿瘤转移和类风湿性关节炎中的作用，DDR2特异性阻断剂将是一个有力的工具. 但由于DDR2是一种比较新的分子，目前对它的研究又不多，所以尚无特异性的受体阻断剂. 可溶性受体作为特异性受体阻断剂已被广泛应用于多种受体的功能研究．甚至作为抑制剂进入临床治疗. 其机理是在细胞外，外源的模拟受体分子由于与天然受体结构相同而竞争性地与相应配体结合，从而阻断了配体与天然受体的结合，也就抑制了配体和受体相应的功能.我们采用此策略对DDR2胞外区用毕赤酵母系统进行了表达. 为了增加蛋白质的可溶性，选择了融合表达方式：采用pPIC3.5K载体，表达His融合蛋白. 融合蛋白经纯化后，通过竞争抑制实验验证其是否阻断配体II型胶原与细胞表面DDR2的结合，通过细胞实验验证其是否抑制II型胶原刺激下的细胞MMP l的分泌.1材料和方法1.1材料重组质粒pRset A ddrg2由本室构建；pPIC3.5K酵母表达载体、酵母GS115菌种、氨基酸混合物、大肠杆菌E.coli Top 10 F 购自invitrogen公司；酵母氮碱（YNB）、酵母消解酶、酸洗玻璃珠、Tween20为Sigema公司产品；山梨醇、胶回收和质粒提取试剂盒为上海华舜生物技术公司产品；鼠抗6His mAb, NTA亲合介质购于Qiagen公司；HRP标记的羊抗鼠二抗购自Santa Cruz Biotechnology公司；Western发光底物为Pierce公司产品，NC膜购于Amersham公司.1.2方法1.2.1PCR引物设计pPIC3.5K的多克隆位点只有EcoRI和NotI 适合ddrg2插入，考虑到Kozak序列（ACC ATG G）有利于外源基因在酵母中的表达，在6 His翻译起始码ATG上游引入ACC，又将ATG 后的C碱基突变为G. 两条引物分别为：5′端为：5′CGGAATTCACCATGGGGGGTTCTCATCATCATCAT 3′和3′端为：5′CGGGCGGCCGCTTAAGTGTTGCTGTCATCAACTTTAAGCATTGG 3′.1.2.2PCR产物回收、克隆及序列鉴定将PCR产物回收后直接与pMDl8T载体连接，转化大肠杆菌后挑克隆酶切鉴定，将鉴定正确的克隆送基康公司测序.1.2.3DR片段在pPIC3.5K载体中的亚克隆大量提取重组T载体质粒，用EcoRI和NotI酶切出目的片段后，连入用同样方法处理的pPIC3.5K载体，转化大肠杆菌后提取质粒，进行酶切鉴定.1.2.4重组载体的酵母电转化取10 μL（约5 μg）SalⅠ单酶切线性化的pPIC3.5K ddr2重组质粒与80 μL酵母电转化感受态细胞混匀，转移于预冷的0.2 cm电转化杯，冰浴5 min. 电转化后（参数为1500 V, 25 μF, 200 Ω）立即加入500 μL预冷的1 mol/L山梨醇，混匀，铺于RDB板，30℃培养3~4 d. 以上过程同时做空载体对照.1.2.5多拷贝整合重组酵母的筛选用2 mL的1 mol/L山梨醇收集所有酵母重组菌落后混匀，分别取100~200 μL铺于含G418分别为0,0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3, 4, 5 mg/mL的YPD板上，30℃培养3~4 d.1.2.6重组酵母菌落的PCR鉴定挑含G418浓度较高的YPD 板上的单菌落于0.5 mL离心管中，加10 μL去离子水、5 μL 5 U/μL的酵母消解酶混匀，30℃温育10 min，再-70℃冻10 min. 冰融后作为PCR模板，PCR引物为pPIC3.5K载体多克隆位点两侧的引物：5′端为：5′GACTGGTTCCAATTGACAAGC 3′；3′端为：5′GCAAATGGCATTCTGACATCC3′. PCR反应参数为：94℃30 s；56℃1 min；72℃90 s，30个循环.1.2.7DDR2DR 蛋白的酵母诱导表达及鉴定挑多拷贝重组酵母单菌落于30 mL的MGY培养液中，30℃, 250 r/min培养18 h. 室温2500 r/min离心5 min，菌体重悬于300 mL的MM培养基中. 30℃培养3 d（期间每隔24 h加甲醇至5 g/L）后离心收菌，菌体沉淀用10 mL裂解液重悬后，加入等体积的酸洗玻璃珠剧烈振荡30 s；冰浴30 s，重复8次. 4℃高速离心10 min，上清为裂菌液. 取15 μL裂菌液进行SDS PAGE和Western Blot鉴定表达.1.2.8DDR2DR蛋白的亲合纯化用10 mL洗涤液平衡NTANi2+柱，将裂菌液上样. 用5 mL Lysis缓冲液洗柱，再用15 mL Washing缓冲液洗柱，用3 mL Elution缓冲液洗脱DDRG2蛋白，收集洗脱液，0.5 mL/管.1.2.9竞争结合抑制实验包被RA细胞于96孔板上，在40 g/L 多聚甲醛中固定24 h：PBS洗涤5 min共3次. 加入倍比稀释的His DR溶液. 空白对照为His纯化蛋白质洗脱液（内无蛋白质），阴性对照为His纯化蛋白质(用pRSETA空载体转化大肠杆菌表达和纯化得到)，浓度为0.1 mg/L,各孔加入等量的II型胶原(不溶型，超声打散)的PBS液，37℃温育1 h：PBS洗涤5 min共3次：加入抗Ⅱ型胶原抗体，37℃温育1 h：PBS洗涤5 min共3次. 加入HRP标记的羊抗鼠二抗，37℃温育0.5 h. PBS洗涤5 min共3次. 加入ABTS显色液显色. 在ELISA仪上检测A410的吸光度.2结果2.1DDR2胞外区片段DR的PCR扩增、克隆和序列分析10 g/L 琼脂糖电泳显示，PCR产物为约1.3 kb的特异性片段，将此条带回收，即与pMDl8T载体连接，酶切鉴定后，对其中一个阳性克隆进行测序，并将序列在GenBank中进行分析，结果显示，序列完全正确. 图1显示，PCR产物和重组pMDl8T载体酶切产物的琼脂糖凝胶电泳结果.2.2重组酵母表达载体pPIC3.5K DR的构建及鉴定大量提取重组pMDl8T载体质粒，用EcoRI和NotI酶切出目的片段后，连入用同样方法处理的pPIC3.5K载体，转化大肠杆菌后提取质粒，进行酶切鉴定. 图2显示，重组pPIC3.5K DR载体的琼脂糖凝胶电泳结果.2.3重组酵母菌的筛选和PCR鉴定酵母电转化后每个RBD板上约长出5×103个His阳性单菌落，G418浓度筛选最高为4.0 mg/mL，根据同源重组一个载体约抵抗0.25 mg/mL G418估算，同源重组入同一酵母菌的pPIC3.5K ddrg2串联拷贝数最高可达到15个以上. 图3显示，重组酵母菌的PCR鉴定结果.2.4DR蛋白的表达和鉴定对PCR鉴定后的3号和4号重组菌进行目的蛋白质的诱导表达，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示，3, 4号阳性克隆细菌在约46 ku处均有一新生表达条带（His DR），与目的蛋白质大小相符（图4）. 根据薄层扫描结果分析，上清中的新生蛋白质约占融合蛋白质总量的18％. Western Blot验证结果显示：6 His DDRG2胞外区蛋白DR在毕赤酵母中可以表达，且为可溶性表达（图5). 2.5His DR蛋白的纯化利用Ni NTA agarose柱通过金属螯合亲合层析进行纯化，从酵母表达菌体的裂菌液上清中纯化出了天然可溶形式的6 His融合DR蛋白. 本实验中，洗脱液中含有目的蛋白质，薄层扫描分析显示，目的蛋白质纯度达90.5％（图6）. 通过蛋白质定量，计算可溶性目的产物的得量约为400 μg/L细菌(结果未列出).2.6His DR对II型胶原与DDR2结合的竞争抑制功能我们摸索了在不同Ⅱ型胶原浓度(2.5 mg/L，0.25 mg/L，0.025 mg/L)下，梯度浓度(0.4mg/L，1∶10；1∶100；1∶200；1∶400；1∶800；1∶1 600；1∶3200；1∶6 400；1∶12 800；1∶25 600)的His DR蛋白对胶原结合于细胞表面DDR2的影响. 这里II型胶原为不溶型的，反应时悬浮于PBS中. 结果显示(图7)，对于胶原0.025 mg/L组，加入His纯化的其他蛋白做对照的孔显色最深，说明His纯化的其他蛋白无封闭II 型胶原与细胞表面DDR2结合的功能；对于HisDR孔，从0.4 mg/L～l∶800范围内，基本无显色，说明His DR可以完全封闭II型胶原与DDR2的结合；从1∶1600开始有显色，1∶3 200~1∶25 600显色逐渐加深，说明His DR的存在可以竞争抑制II型胶原与细胞表面DDR2的结合. 表达的His DR融合蛋白在体外可以与II型胶原结合，起到竞争抑制DDR2受体的作用.3讨论DDRs是一类受体型蛋白酪氨酸激酶，由于其胞外区含有一个类似盘基网柄菌（discoidin）凝集素盘状结构I的DR结构，而被称为DDRs. DDR2广泛表达于多种组织，这种广泛又有选择性的分布提示，DDR2的功能是重要且特异的［1］.原位杂交显示，在肺癌和卵巢癌中，DDR2在癌细胞周围间质细胞高表达，提示DDR2在肿瘤发展中具有作用，可能肿瘤细胞转化后的侵袭和转移特性由DDR2介导，因为恶性细胞突破组织屏障需要破坏胞外基质［8］. 其他能降解基质的人类疾病如肺纤维化、肝硬化、骨硬化病和类风湿关节炎可能都存在DDR2的表达和信号转导过程，推测DDR2的一个重要功能可能是通过调节胶原的合成和降解来控制胶原性胞外基质水平. 若能找到阻断DDR2作用的分子，则可能有助于预防肿瘤细胞的转移和减轻类风湿性关节炎的软骨破坏［9］.由于目前尚不清楚DDR2胞外区与配体胶原结合的具体部位，我们选择了DDR2胞外区全长含399个氨基酸的片段来表达，作为阻断剂. 在以往研究DDR2胞外区功能的时候，我们也曾构建了几种GST和6 His融合的DDRG2胞外区原核表达载体（4T1Ddrg2和pRset A Ddrg2），但它们的表达形式无一例外均是包涵体. 利用包涵体的变性和复性进行纯化，效果都不理想. 又考虑到变性和复性会影响DDRG2胞外区的结构与活性，于是我们便尝试在毕赤酵母中表达DDRG2胞外区蛋白.毕赤酵母表达系统是比较新的酵母外源蛋白表达系统. 毕赤酵母表达质粒通过同源重组整合入酵母基因组而随同酵母染色体一起复制. 同源重组时，毕赤酵母表达质粒可以通过体内和体外两种方式多拷贝整合于毕赤酵母基因组中. 由于不同的基因具有不同的特性，在毕赤酵母中表达时，不同外源蛋白的表达水平可能会有很大的差异. 我们的实验表明，DDR2DR在毕赤酵母表达系统中获得了表达，表达产物经过纯化后得到了纯度约为90.5％的融合蛋白. 竞争结合实验表明，融合蛋白His DR在0.2 μg/L的浓度下能完全阻断II型胶原与细胞表面天然DDR2的结合. 虽然不能完全阻断，但仍可以说明两个问题：一是NIH 3T3细胞和RA滑膜细胞中的DDR2介导MMP 1的表达或过表达；二是可溶性DDR2受体胞外区作为阻断剂，可以在一定程度下抑制这种表达.【参考文献】［1］V ogel W. Discoidin domain receptors: Structural relations and functional implications［J］. 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正常人肝组织的及肝癌转移相关核心岩藻糖基化蛋白质组学的研究
正常人肝组织及肝癌转移相关核心岩藻糖基化蛋白质组学的研究.;学校代码:学号:织旦大学博士学位论文正常人肝组织及肝癌转移相关核?罐藻糖基化蛋白质组学研究中山医院院系专代智姓名:刘银坤教授指导教师:完成日期:兰鱼鱼生垒旦博卜论文正常人盯组织及肝癌转移相关核一岩藻诂基化蛋白质组学研究正常人肝组织及肝癌转移相关核心岩藻糖基化蛋白质组学研究中文摘要糖蛋白质组学是研究糖蛋白表达谱、糖链组成及其功能的一门有发展前景的新学科。
糖蛋白在细胞识别、粘附、细胞间相互作用等细胞功能中发挥了关键作用。
许多疾病的发生与蛋白质糖链结构异常有关。
至今仍没有一个完整数据库全面阐述正常生理状态下所有糖基化的蛋白质,也未见有系统的糖蛋白质组学手段筛查病理过程相关的异常糖基化蛋白质。
由于一,岩藻糖又称核心岩藻糖普遍存在于很多糖蛋白中,并且其糖基化程度异常与肝癌或慢性肝病的发生和诊断关系密切。
本研究利用扁豆凝集素对糖链内核,岩藻糖的高亲和性及适用于大样本的、高通量糖蛋白质组学共性技术平台,即凝集素亲和层析、双向电泳联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱?~/分析,首次建立了正常人肝脏组织核心岩藻糖基化蛋白数据库。
同时应用和凝集素印迹联合】?/分析,对高低转移潜能不同人肝癌细胞系即高转移的、低转移的和基本不转移的细胞进行研究,获、膜联得了它们的核心岩藻糖基化蛋白质修饰谱,发现膜联蛋白蛋白和细胞角蛋白等异常核心岩藻糖基化状态及差异性表达,分析了此种糖蛋白表达和糖链结构的改变与肝癌细胞系转移潜能的关系。
第一部分正常人肝组织核心岩藻糖基化蛋白质数据库的建立及生物信息学分析本部分研究旨在建立适用于大样本、相对稳定、标准的高通量糖蛋白质组学共性技术平台,并以此为基础,建立正常人肝脏组织核心岩藻糖基化蛋白质数据库,为正常状态下,机体内糖蛋白的全面阐述提供基本生物学信息,为蛋白质核心岩藻糖基化在体内功能研究提供理论依据。
选择不同正常人的肝脏组织例,提取总蛋白通过亲和层析柱后,分成正常人组织及肝确转移相关核心岩藻糖基化蛋白质组学研究博士论文两个组份,柱不结合组分由非核心岩藻糖基化蛋白构成;柱结合组份由核心岩藻糖基化蛋白组成。
载脂蛋白 E在正常和病变肝组织中的表达
载脂蛋白 E在正常和病变肝组织中的表达
李红乐;张乐升
【期刊名称】《河南医科大学学报》
【年(卷),期】1999(034)004
【摘要】目的：探讨载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）在正常和病变肝组织中的免疫定位分布。
方法：应用免疫组化ＳＰ法分别检测正常和病变肝组织ＡｐｏＥ的表达，正常肝组织１２例（正常肝组织３例，癌帝正常肝组织９例），病毒性肝炎６例，肝硬化２２例，肝癌３０例（Ⅰ级Ⅱ级１３例，Ⅲ级Ⅳ级１７例），肝母细胞癌６例，肝海绵状血管瘤４例。
结果：ＡｐｏＥ在正常肝细胞广泛表达，为胞浆表达，在临近肝窦一面的肝细胞为胞膜表达，Ｋｕｐｆｆｅｒ细
【总页数】3页(P15-17)
【作者】李红乐;张乐升
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7
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3.盘状结构域受体在人肝癌、肝硬化与正常肝组织中的表达及其意义 [J], 武曼群;
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4.EZH2和Survivin在肝癌肝硬化和正常肝组织中的表达及其临床意义 [J], 康凯夫;车爱文;陈小伍;石祥呈;康子婧
5.肝癌TAE后正常肝组织中PPAR-α和氧化应激指标的表达 [J], 李娟娟;杜伟;郭伟莲;王光明
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GPC3在肝细胞癌组织与癌旁组织中的表达及意义的开题报告
GPC3在肝细胞癌组织与癌旁组织中的表达及意义的
开题报告
背景：
肝细胞癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发病与病死率均非常高。
GPC3是一种膜结合肝细胞生长因子，是一种在细胞生长和分化中起重要作用的蛋白质。
自上世纪九十年代以来，研究人员发现GPC3在多种恶性肿瘤中高表达，成为诊断和治疗的重要指标。
但是，GPC3在肝细胞癌中的表达和意义仍有待深入研究。
研究目的：
本文的主要目的是探讨GPC3在肝细胞癌组织与正常组织中的表达及其对肝细胞癌发生发展的可能影响，以期为肝细胞癌的诊断、治疗和预后评估提供新思路。
研究内容：
1. GPC3基因及蛋白的结构、功能和生物学特性。
2. GPC3在肝细胞癌组织、正常肝组织及癌旁组织中的表达情况。
3. GPC3在肝细胞癌细胞中的高表达与其发生、发展的关系。
4. GPC3在肝细胞癌的诊断、治疗和预后评估中的应用。
研究方法：
1. 搜集国内外相关文献，对GPC3的基本知识、肝细胞癌的发病机制和GPC3在多种肿瘤中的表达情况进行综合分析。
2. 实验室进行GPC3的表达、检测、减弱或抑制肝细胞癌发生和发展的实验。
研究意义：
该研究将有助于进一步理解GPC3在肝细胞癌中的作用机制，为肝细胞癌的诊断、治疗和预后评估提供新的手段和靶点。
同时，还为涉及GPC3的肿瘤学研究提供新的思路和数据支持。
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［ 关键词］ 肝癌 ； 肝硬 化； 盘状结构域 ； 受体
Ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ｄ ｉ ｓ ｃ ｏ ｉ ｄ ｉ ｎ ｄ ｏ ｍａ ｉ ｎ ｒ ｅ ｃ ｅ ｐ ｔ ｏ ｒ ｓ ｕ ｂ ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ ｉ ｎ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗｉ ｔ ｈ
宁夏医学杂志 ２ ０ １ ４年 ９月第 ３ ６卷第 ９期
Ｎ ｉ ｎ ｇ ｘ ｉ ａＭｅ ｄ Ｊ 。 Ｓ ｅ ｐ ． ２ ０ １ ４。 Ｖ ｏ ｌ ３ ６ ． Ｎ ｏ ． ９
Ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ ３ ６ ２ １ ／ ｊ ． １ ０ ０ １ — ５ ９ ４ ９ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ９ ． ０ ８ ２ ４
・实验 研 究 ・
盘状 结构 域 受体 在 人肝 癌 、 肝硬 化 与 正 常肝 组 织 中的表 达及 其 意义
武曼群 ， 杨 少奇 ， 赵
［ 摘 要］ 目的
进‘ ， 马 爱玲
研究人肝癌 、 肝硬化及正常肝组织 中盘状 结构域受体 Ｄ Ｄ Ｒ １ 、 Ｄ Ｄ Ｒ ２的表达情况 ， 了解பைடு நூலகம்Ｄ Ｄ Ｒ ｓ 表
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Ｄ Ｄ Ｒ １ 在肝癌组织中的表达率及表达水平显著高于肝硬化及正常肝组织 ， Ｄ Ｄ Ｒ ２在肝硬化组织 中的表达率及表达
水平高于肝癌及正常肝组织。结论 ［ 中图分 类号］ Ｒ ７ ３ ５ ． ７
Ｄ Ｄ Ｒ １ 与肝癌的发生与发展可能相关， Ｄ Ｄ Ｒ ２可能与肝硬化的发生发展相关。 ［ 文献标识码 】 Ａ
分别 采用免疫组化及 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ技术检测 ３ ８例肝癌合并
达在上述组织 中的表达有无差异及其相关性。方法
结果
肝硬化患者 的肝癌与肝硬化组织及正 常肝组织 中 Ｄ Ｄ Ｒ ｓ蛋白的表达 ， 探讨 Ｄ Ｄ Ｒ ｓ 表达情 况与肝癌及肝 硬化 的关 系。