甾体皂苷的提取分离
第三节 强心苷类
剂反应产生颜色，甲型反应，乙型不反应
3、由于2-去氧糖产生的反应
Keller-Kiliani反应 对二甲氨基苯甲醛反应
七、强心苷的提取分离
（一）提取原生苷：注意抑制酶活力
使用新鲜原料，尽快用热水、醇、含水醇等萃取。
新鲜采集的原料不是立即提取的，需低温快速干燥后保存 避免新鲜采集的原料室温下长期放置 发酵（利用植物体中本身含有的酶使苷类酶解为次生苷或苷 元 加入能使待分离植物中的苷类物质水解为次生苷或苷元的酶 酶解
OH 菝葜皂苷
glc
第四节 甾体皂苷
五、甾体皂苷理化性质
1、甾体皂苷元溶解性： 结晶，易溶于石油醚、氯仿等弱极性有机溶剂，不溶于水 2、甾体皂苷（寡糖苷）的溶解性：
可溶于水，易溶于热水、稀醇，难溶于石油醚、苯、乙醚
等亲脂性有机溶剂 3、甾体皂苷的表面活性和溶血作用： 与三萜皂苷类似
第四节 甾体皂苷
甾体
三萜
第一节 概述
三、甾体化合物的颜色反应（与三萜类化合物相似）
在无水条件下遇强酸产生各种颜色
Liebermann-Burchard反应：样品溶于冰醋酸，加浓硫酸-醋 酐（1:20），产生红-紫-蓝-绿等颜色变化，最后褪色
Salkowski反应：样品溶于氯仿，沿壁滴加浓硫酸 三氯乙酸-乙醇 三氯化锑或五氯化锑反应
OH RO
R H -Rha -Rha-glc -Rha-glc-glc
第三节 强心苷类
六、强心苷的理化性质
(一) 理化性质 1、形态及溶解度：
无色结晶或无定型粉末
可溶于水、丙酮、醇等极性溶剂；略溶于乙酸乙酯、含醇
氯仿，几乎不溶于醚、苯、石油醚等非极性溶剂
胡芦巴水溶性甾体皂苷的提取分离工艺研究
天然产物研究与开发 2005 V ol 117 N o 11NAT URA L PRODUCT RESE ARCH AND DE VE LOPME NT 收稿日期:2004205225 接受日期:2004207223 基金项目:天津市高等学校科技发展基金项目(20031210)1 3通讯作者T el :86222260270043;Email :zhanglmd @yahoo 1com 1cn胡芦巴水溶性甾体皂苷的提取分离工艺研究张黎明3,徐 玮,杜连祥(天津科技大学生物工程学院,天津300222)摘 要:以薯蓣皂苷元的提取率为指标,应用L 9(34)正交试验设计优化了从脱多糖、脱脂胡芦巴豆粉中提取甾体皂苷的工艺条件,并且筛选了ZT C 澄清剂对胡芦巴甾体皂苷水提取液的澄清条件。
实验结果表明,影响水提取的主次因素为:提取次数>提取温度>固液比>提取时间;最佳水提取条件为:固液比为1:10,在70℃下提取3次,每次120min 。
得出胡芦巴种子水提取液的澄清条件如下:ZT C1+1澄清剂的加入次序是先加B 组分再加入A 组分;澄清剂B 和A 的最佳用量分别为110g/L 和015g/L ;加入组分A 或B 后在80℃下作用30min 即可达到澄清目的。
关键词:胡芦巴种子;水提取;甾体皂苷;ZT C1+1澄清剂中图分类号:R284.2;Q946.83 Studies on Extracting Technology of W ater 2solubleSteroidal Saponins from Fenugreek SeedsZH ANGLi 2ming 3,X U Wei ,DU Lian 2xiang(School o f Bioengineeringm ,Tianjin Univer sity o f Science and Technology ,T ianjin 300222,China )Abstract :Using the remainder of fenugreek seeds with separated endosperm as the raw material ,the optimum extraction condi 2tions of steroidal saponins were investigated by orthog onal design and with the extracting rate of diosgenin as index 1The clarify 2ing conditions of steroidal saponins aqueous s olution was als o selected by using ZT C flocculating method 1The results show that the factors in fluencing extraction efficiency were as follows :extraction times >temperature >ratio of feeding stock weight to the v olume of s olvent >duration of extraction 1The optimum extraction condition obtained was :adding 10times of water v olume as much as that of sample and extracting for 120min at 70℃(totally extracting for 3times )1The adding sequence of ZT C1+1natural clarifying agent was clarifier B before clarifier A 1The optimum am ount of ZT C clarifier was 110g/L for clarifier B ,and 015g/L for clarifier A 1The clarifying time after adding clarifier B and A was 30min 1Under these conditions ,the steroidal saponins aqueous s olution w ould become clarify and stability 1K ey w ords :Fenugreek seeds ;water 2extracting ;steroidal saponins ;ZT C 1+1natural clarifying agent 胡芦巴系豆科植物胡芦巴(Trigonella foenum 2graecum L 1)的种子,又名香豆子、芦巴子等。
中药化学问答题
1.木脂素：一类由两分子苯丙素衍生物（即C6-C3单体）聚合而成的天然化合物，多数呈游离状态，少数与糖结合成苷而存在于植物的木部和树脂中。
2.氰苷：主要指具有α-羟基腈的苷。
3.酚苷：是苷元分子中的酚羟基与糖的端基碳原子缩合而成的苷。
4.萜：指具有（C5H8）n通式以及其含氧和不同饱和程度的衍生物，可以看成是由异戊二烯或异戊烷以各种方式连结而成的一类天然化合物。
5.双皂苷：由6个异戊二烯单位、30个碳原子构成的，组成的糖既有中性糖也有酸性糖，组成的糖含有两条糖链的苷类化合物。
6.香豆素：香豆素是具有苯骈α-吡喃酮母核的一类天然化合物的总称，在结构上可以看成是顺邻羟基桂皮酸失水而成的内酯。
7.甾体皂苷：是一类螺旋甾烷及其生源相似的甾族化合物的低聚糖。
8.鞣质：指植物界存在的一类能与蛋白质结合生成水不溶性沉淀的结构复杂的多元酚类化合物。
简单题：1.如何预试某中药中是否含有脂溶性生物碱？答：利用吸附薄层色谱法检识是否含有脂溶性生物碱。
因为硅胶和氧化铝薄层色谱适用于分离和检识脂溶性生物碱。
尤其是氧化铝的吸附力较硅胶强，更适合于分离亲脂性较强的生物碱。
2.鞣质可分为哪些类型？分类依据是什么？答：（1）可水解鞣质（2）综合鞣质依据是它们的水解情况。
3.如何用化学反应鉴别3-羟基黄酮与5-羟基黄酮？答：锆盐－枸橼酸反应：加2%二氯氧锆(ZrOCl)的甲醇溶液到样品的甲醇溶液中，若出现黄色，说明有3-OH或5-OH与锆盐生成络合物，再加入2%的枸橼酸的甲醇溶液，黄色不退，示有3-OH，如果黄色减退，加水稀释后转为无色，示无3-OH，但有5-OH。
4.一般情况下，生物碱盐的溶解度有什么特点？┌氮原子的存在状态││分子的大小│·影响生物碱溶解度的因素┤功能团的种类││功能团的数目│└溶剂的种类·溶解性┌亲脂性│(数量多，易溶于低极性有机溶剂，可溶于极性较大的有机溶剂，难溶或不溶水。
)│游离生物碱┤│└水溶性(数量少，易溶于水、酸水和碱水，可溶极性大的有机溶剂。
甾体皂苷
O
HO
薯蓣皂苷元
(3) 呋甾烷醇类(furostanols)
27 21
O H 23 OH
25 20 17 22 24 26
18 12 19 1 2 10 11 9 8 13 14
O
16
15
HO
3 4
5 6
7
F环为开链衍生物
O
glc
OH
O
薤白苷丁
glc gal O
F环裂解的甾体皂苷的显色反应
对Ehrlich 试剂（对盐酸二甲氨基苯甲醛试 试剂显黄色
3.生物活性
防治心脑血管疾病 抗肿瘤 降血糖
免疫调节
地奥心血康胶囊——含8种从黄山药中提取的甾体 皂苷，对冠心病、心绞痛疗效显著。
心脑舒通——由蒺藜果实中提取的总甾体皂苷，具 有扩冠、改善冠脉循环作用。
云南白药---重楼
甾体皂苷I和甾体皂苷 IV，对P388和KB细胞有 显著抑制作用。
γδ -六元内酯环时，UV在（
征吸收。
17、IR光谱上内酯环羰基在（ 强吸峰，乙型较甲型波数（ ）处有两个 ）。
18、强心苷作为甾体衍生物有三类显色反 应，第一类为（ 反应；第二类为（ ）显色反应，如L-B ）可以用来区分
甲型与乙型强心苷，如Legal反应；第三类 为（ ）特征性反应，如K-K反应。
5.甾体皂苷元一般是（）。
A.A/B环反式稠合、B/C环顺式稠合
B.A/B环反式稠合、B/C环反式稠合
C.A/B环反式或顺式稠合、B/C环顺式稠合
D.A/B环反式或顺式稠合、B/C环反式稠合
E.以上均不是 答案：D
A. Liebermann-Burchard反应 B. Keller-Kiliani（K-K）反应 C. Kedde反应 D. Molish反应 6、区别甾体皂苷和三萜皂苷的反应是（）。 答案：A 7、区别甲型强心苷和乙型强心苷的反应是（）。 答案：C
甾体皂苷类成分提取分离方法
甾体皂苷提取分离方法甾体皂苷( steroidal saponins) 是天然产物中一类重要的化学成分,大多都具有一定的生理活性,在天然产物化学研究中日趋活跃。
据不完全统计,超过90 个科的植物含有甾体皂苷,尤以单子叶植物的百合科、石蒜科、薯蓣科和龙舌兰科等植物报道最多。
由于含甾体皂苷成分的动植物药有相当的疗效。
所以,人们在应用和研究方面越来越广泛。
例如: Dracaena draco 被用于抗腹泻和止血[1],蒺藜用于治疗眼病、浮肿、腹胀、高血压、皮癣和气管炎[2], Chlorophytum malayense 对肿瘤有潜在的细胞毒活性[3], A gave americana有通便和利尿的作用[4], Solanum nigrum 在中国和日本用于对各种癌症的治疗[5],白首乌民间用于滋补药膳,是一种有前途的抗衰老药物[6],虎眼万年青民间用于抗肿瘤[7],西陵知母用于治疗烦热消渴,骨蒸劳热,肺热咳嗽等[8]。
本文就甾体皂苷的提取分离方法做一简单综述。
甾体皂苷类化合物由于连有糖残基, 一般有较强的极性, 易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂, 不易溶于氯仿、乙醚等非极性溶剂。
甾体皂苷不易形成结晶（苷元例外）,且有时结构相似，给分离带来一定困难。
甾体皂苷提取分离基本步骤为粗提、除杂、分离。
1、提取目前, 实验室最常用不同浓度的工业乙醇或甲醇提取。
也有用水作为溶剂的, 如:Jianying zhang 等用80 - 85℃的水从Anemarrhena asphodeloides 的根状茎中提取到六种甾体皂苷[9]。
也可以先用氯仿、石油醚等强亲脂性溶剂处理中草药原料, 然后用乙醇为溶剂加热提取, 冷却提取液, 多数甾体皂苷由于难溶于冷乙醇而作为沉淀析出[10]。
2、除杂方法无论是用水还是醇作为溶剂提取所得到的皂苷,多还包含许多杂质, 如无机盐、糖类、鞣质、色素等, 尚需要进一步精制。
2.1 液液萃取法这是一种最普遍的皂苷除杂方法, 利用皂苷一般极性较大, 易溶于水而其中的一些杂质极性较小易溶于非极性溶剂的性质来去除一些脂溶性的杂质。
甾体皂苷
HO
3 4
5
4．变形螺甾烷醇类（pseudo-pirostanols） F环为五元四氢呋喃环
21 27
O
25 20 17 22
18 12 19 1 2 10 11 9 8 7 6 13 14
CH2OH
23 24 26
O
16
15
HO
3 4
5
甾体皂苷元共有27个碳原子组成:
（1）分子中含有A,B,C,D,E,F六个环，A,B, C,D为甾体母核---环戊烷多氢菲，C22 是E环和F环共有的碳原子，以螺缩酮 的形式相联。 （2）一般B/C 和C/D环稠合为反式（8β, 9α,13β,14α)，而A/B环有顺式或反 式（5β或5α）。 （3）分子中有含有多个羟基，大多在C3位 有羟基取代。多数为β-型，少数为 α-型。羰基和双键也是常见取代基。
（4） 在甾体皂苷元的E,F环中有3个手性碳 原子，为C20,C22,C25 。 C20甲基为α型，即C20-甲基位于E环平面 的背面，对E环来说是α型，但对F环来说是β 型。 C22也为α型。 C25甲基有两种构型，当C25甲基位于环平 面上的直立键时为β型，其绝对构型为L型 （25S,25L,25βF,Neo）; S型即为螺旋甾烷，由 其衍生的皂苷为螺甾烷醇皂苷类（spirostanol saponins）。
25 26 27
18 12 19 1 2 10 11 9 8 7 6 13 14
24
O
16
15
HO
3 4
5
3．呋甾烷醇类（furostanols） F环为开链衍生物
27 21
OH 23 OH
25 20 17 22 24 26
18 12 19 1 2 10 11 9 8 7 6 13 14
皂苷的概述
皂苷皂苷概述皂苷是苷元为三萜或螺旋甾醇类化合物的一类糖苷。
苷元为三萜类化合物则称为三萜皂苷，如为螺旋甾烷类化合物则称为甾烷皂苷。
皂苷类化合物主要分布于陆地高等植物中，其中甾体皂苷主要存在于薯蓣科、百合科和玄参科等;三萜类皂苷主要存在于五加科、豆科、远志科及葫芦科等。
有许多植物的皂苷含量很高，如甘草根含有2%-12%的皂苷，皂树皮含有10%的皂苷，七叶树种子含有高达13%的七叶皂苷，薯蓣的球状根茎含有丰富的甾体皂苷，是人工合成激素的重要原料。
此外，海星、海参等海洋生物也存在皂苷类化合物。
皂苷根据苷元连接糖链数目的不同，可分为单糖链皂苷，双糖链皂苷及三糖链皂苷。
在一些皂苷的糖链上，还通过酯键连有其他基团。
在皂苷的化学结构中，由于苷元具有不同程度的亲脂性，糖链具有较强的亲水性，使皂苷成为一种表面活性剂，用力振荡其水液可产生持久性的泡沫。
一些富含皂苷的植物提取物被用于制造乳化剂、洗洁剂及发泡剂等。
此外，一些皂苷对细胞膜具有破坏作用，表现出毒鱼、灭螺、溶血、杀精及细胞毒等活性。
皂苷的表面活性作用受其连接糖链数日的影响，一般单糖链皂昔的溶血，灭螺作用更强，双糖链皂苷的作用稍弱。
皂苷的溶血作用也与昔元有关，如以人参三醇为昔元的皂昔其有明显溶血作用，而以人参二醇为苷元的人参皂苷则具有抗溶血作用。
可用一些颜色反应对皂苷进行初步鉴定，最常用的颜色反应为Liebermann-Burchard反应，其方法如下：在试管中将少量样品溶十乙酸酐，再沿试管壁加入浓硫酸，如两层液体交界面呈紫红色则为阳性反应。
1 皂苷的存在形式和分布皂苷由皂苷元和糖、糖醛酸或其他有机酸所组成。
组成皂苷的糖常见的有：葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖和其他戊糖类。
根据苷元又可分为两大类：三萜类皂苷和类固醇类皂苷。
三萜又可分为四环三萜和五环三萜，其中以五环三萜为常见。
四环三萜型皂苷中以达玛烷型皂苷研究较多，且较深入；五环三萜型皂苷中作药用的以齐墩果烷型皂苷研究最多。
第九章甾体皂苷2
2.分离
溶剂沉淀法 胆甾醇沉淀法 吉拉尔试剂法 硅胶柱色谱法（氯仿-甲醇-水系统） 硅胶柱色谱法（氯仿-甲醇-水系统） 大孔吸附树脂柱色谱 葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱 葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱 液滴逆流色谱（DCCC） 液滴逆流色谱（DCCC）
胆甾醇沉淀法： 胆甾醇沉淀法：
乙醚 （甾醇）
甾体皂苷 + 甾醇 分子复合物 回流提取 沉淀 EtOH （如胆甾醇） 皂苷 （不溶乙醚）
乙醚
反应条件：甾醇需有 反应条件：甾醇需有C3-β-OH 三萜皂苷与甾醇形成的分子复合物不及甾体皂苷稳定
五、甾体皂苷的检识
理化检识 ：见颜色反应 Libermann-Burchard反应、Rosen反应、 反应 Heimer反应、 反应、 反应 Ehrlich试剂 、茴香醛试剂 （A试剂） 试剂） 试剂 试剂 色谱检识 ： 硅胶吸附 分配TLC来检识 吸附或 硅胶吸附或分配 来检识 常用显色剂有： 硫酸-乙醇液 常用显色剂有：10%硫酸 乙醇液、磷钼酸、 硫酸 乙醇液、磷钼酸、 热显色。 三氯乙酸等喷后加 热显色。
第三节 甾体皂苷
（steroidalsaponins）
一、概述
甾体皂苷是一类由螺甾烷类化合物与糖结合 甾体皂苷是一类由螺甾烷类化合物与糖结合 螺甾烷类 而成的甾体苷类， 而成的甾体苷类，其水溶液经振摇后多能产生 大量肥皂水溶液样的泡沫，故称甾体皂苷。 大量肥皂水溶液样的泡沫，故称甾体皂苷。 该类成分分布广泛，主要分布在单子叶植物 该类成分分布广泛， 大多存在于百合科、薯蓣科、 中，大多存在于百合科、薯蓣科、石蒜科和龙 舌兰科，由多种海洋生物和动物体内亦分离到 舌兰科， 一系列特殊结构的甾体皂苷。中药麦冬、知母、 一系列特殊结构的甾体皂苷。中药麦冬、知母、 百合、玉竹、薤白中都富含甾体皂苷。 百合、玉竹、薤白中都富含甾体皂苷
甾体皂苷的分离方法
甾体皂苷的分离方法甾体皂苷是一类具有广泛生物活性的天然产物，具有抗炎、抗肿瘤、降血脂、降血糖等多种药理作用。
因此，对甾体皂苷的分离方法的研究具有重要的意义。
本文将从甾体皂苷的来源、结构特点、分离方法等方面进行探讨。
一、甾体皂苷的来源甾体皂苷是一类广泛存在于植物中的天然产物，主要分布在葫芦科、番茄科、百合科、五加科、苦参科等植物中。
其中，葫芦科植物是甾体皂苷的主要来源，如苦瓜、冬瓜、丝瓜、黄瓜等。
此外，还有一些动物体内也含有甾体皂苷，如海参、海参皂苷等。
二、甾体皂苷的结构特点甾体皂苷是一类具有四环结构的化合物，其基本结构为甾核和糖基。
甾核是由四个环组成的，包括A环、B环、C环和D环。
其中，A 环和B环为六元环，C环为五元环，D环为六元环。
糖基则是由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖组成的。
1. 薄层色谱法薄层色谱法是一种简单、快速、经济的分离方法，适用于甾体皂苷的初步分离和鉴定。
其原理是利用不同化合物在固定相和流动相之间的亲疏性差异，通过在薄层板上的分离实现。
常用的固定相有硅胶、氧化铝、纤维素等，流动相则是有机溶剂和水的混合物。
2. 柱层析法柱层析法是一种高效的分离方法，适用于甾体皂苷的纯化和分离。
其原理是利用不同化合物在固定相和流动相之间的亲疏性差异，通过在柱子中的分离实现。
常用的固定相有硅胶、氧化铝、纤维素等，流动相则是有机溶剂和水的混合物。
柱层析法还可以根据不同的分离原理分为正相柱层析、反相柱层析、离子交换柱层析等。
3. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种高效、快速、灵敏的分离方法，适用于甾体皂苷的纯化和分离。
其原理是利用不同化合物在固定相和流动相之间的亲疏性差异，通过在高效液相色谱柱中的分离实现。
常用的固定相有C18、C8、C4等，流动相则是有机溶剂和水的混合物。
高效液相色谱法还可以根据不同的分离原理分为正相高效液相色谱、反相高效液相色谱、离子交换高效液相色谱等。
4. 气相色谱法气相色谱法是一种高效、快速、灵敏的分离方法，适用于甾体皂苷的纯化和分离。
C21甾体皂苷研究
３．２红外光谱技术 ：红外光谱分析可研究分子的结构和化学键鉴 大学 ，２００８．
表 １定量模 型统计表
盐 酸环 丙 沙 星 片 ，组 分 名 称 ：环丙 沙 星
留溶 剂 、厚度 、光学 性质都 可以对近红外 光谱产生 影响 ，不 同 厂家 的样 品 ，其 生产工艺 、辅料 、包 装材料 以及 样 品均匀 程度 等方 面均存 在一定差异 ，即便是 相同厂家相同批次的产 品 ，其 近红外光谱也会 有所差异 。模型测定 的结果与药典 方法 比较
北方药学 ２０１４年第 １１卷第 １期
９
Ｃ２，甾体 皂苷研究
陶瑛妮 （浙江中医药大学 杭卅１ ３１００００）
摘要 ：甾体化合物是 一类具有生物活性的天然产物 ，其 中 ｃ 甾体 皂苷生物 活性较 显著 ，本 文对 Ｃ 甾体皂苷分布状 态、提取分
离 、结 构 鉴 定 和 药 理 活性 研 究进 行 总结 。 关键词 ：Ｃ： 甾体皂苷 结构特 点 药理作 用
界点萃取自首乌 Ｃ。 甾苷的最佳工艺条件为 ：原料粒度 ４０目，压 参考文献
力 ３５ＭＰａ，时间 ９０ｍｉｎ，温度 ３５℃，夹带剂 ９５％乙醇添量 １５０ｍｌ。 ［１】赵 益斌 ，沈 月毛 ，何 红平 ，等．青 阳参的一 个新 Ｃ 甾体 苷ｌＪ１．
２．３硅胶 柱层 、ＨＰＬＣ制备分析法 ：层析法 的分离原理是根据物质 云南植 物研 究 ，２００５，２７（４）：４４３－４４６．
在硅胶 Ｅ的吸附力不 同，发生一系列吸附一解吸—再吸附一再 【２］张安元．通 关藤化 学成分研 究［Ｄ］．南京 中医药大学，２００９．
解吸过程。硅胶柱层析法是 ｃ：。甾体类化合物 常用的分离方法。 【３】张如松 ，叶益 萍，李 晓誉 ，等．黑鳗藤 中 Ｃ 甾体苷 的分 离和
14-8-15皂苷分离纯化
皂苷分离1、分段沉淀法：（适合于皂苷的分离）①原理：利用皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂。
②操作：将粗皂苷先溶于少量甲醇或乙醇中，然后逐滴加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮（1：1）的混合溶剂（加入量以能使皂苷从醇溶液中析出为限），边加边摇匀，皂苷即可析出。
③分段沉淀法，逐渐降低溶剂极性，极性不同的皂苷就可分批沉出，从而达到分离的目的。
分段沉淀法虽然简便，但难以分离完全。
2、胆甾醇沉淀法①原理：皂苷可与胆甾醇生成难溶性的分子复合物（三萜皂苷与胆甾醇形成的复合物不如甾体皂苷与胆甾醇形成的复合物稳定）。
②操作：先将粗皂苷溶于少量乙醇中，再加入胆甾醇的饱和乙醇溶液，至不再析出沉淀为止（混合后需稍加热），滤过，取沉淀用水、醇、乙醚依次洗涤以除去糖类、色素、油脂和游离的胆甾醇，然后将此沉淀干燥后，用乙醚回流提取，胆甾醇被乙醚提出，使皂苷解脱下来，残留物即为较纯的皂苷。
但是，此法已经基本不被应用。
3、色谱分离法色谱法是目前分离三萜类化合物最常用的方法，通常采用多种色谱法相组合的方法。
①吸附柱色谱法；②分配柱色谱法；③高效液相色谱法；④大孔树脂柱色谱；⑤凝胶色谱法。
（1）吸附柱色谱法：①常用方法，可用于分离各类三萜化合物。
②依据所用的吸附剂性质的不同，分为正相吸附柱色谱和反相吸附柱色谱。
③正相吸附柱色谱的吸附剂常用硅胶。
④反相柱色谱通常以键合相硅胶Rp-18、Rp-8或Rp-2等为填充剂。
（2）分配柱色谱法：多用于分离皂苷，常用硅胶等作为支持剂，固定相为3%草酸水溶液等，流动相为含水的混合有机溶剂：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等。
（3）高效液相色谱法：是目前分离皂苷类化合物最常用的方法，分离效能较高。
用于皂苷的分离制备一般采用反相色谱柱，以甲醇-水、乙腈-水等系统为洗脱剂。
（4）大孔树脂柱色谱：适用于皂苷的精制和初步分离。
操作：将含有皂苷的水溶液通过大孔树脂柱后，先用水洗涤除去糖和其他水溶性杂质，然后再用浓度由低到高的甲醇或乙醇依次进行梯度洗脱，极性大的皂苷可被l0%～30%的醇洗脱下来，极性小的皂苷则被50%以上的醇洗脱下来。
皂苷提取技术
•
树脂预处理
过柱 解吸 树脂的再生
在皂苷类成分的分离纯化中，利用弱极性的大孔树脂吸附后，很容易 用水将糖等亲水性成分洗脱下来，然后再用不同浓度的乙醇洗下被大孔树脂 吸附的皂苷类，达到纯化的目的。
4.色谱技术
• 经典的制备型薄层色谱和常规的柱色 谱设备简单，操作方便，但分离时间长， 分离效率低，不可逆吸附等缺点，多用于 条件有限的实验室中毫克级到克级的样品 分离，随着人们对色谱分离技术的深入研 究，出现了加压液相色谱、逆流色谱等特 殊的色谱，它们被广泛地用于天然药物的 分离纯化。
远高于传统的提超高压提取技术，是指将超高压技术运用到天 然产物提取中。超高压加工技术是冷加工技术，将其 应用到天然产物提取方面不仅有效地保留其有效成分， 提高药效，而且能提高得率，减少能耗，降低成本， 是一种具有广阔应用前景的新技术。超高压提取一般 在常温或低温条件下进行，即将包装好的样品置于提 取容器中，迅速施加100～1000 MPa的液压，保压一 段时间后卸压，取出样品就完成了整个提取过程。提 取过程中，超高压条件下溶剂利用细胞的通透性，快 速进入细胞内部，和细胞内的有效成分充分结合后， 在很短时间内快速地达到溶解平衡；卸压时以同样的 压差冲出细胞外，从而达到高效提取的目的。超高压 提取技术具有提取时间短、温度要求差、能耗低、安 全环保等优点。
2.超声波辅助提取法
• 超声震荡仪产生的超声波能产生强烈震动， 高速度，强烈的空化效应，搅拌作用，加速药材 中的有效成分溶解，可以提高有效成分的提出率。 超声震荡所需设备简单、操作方便、提取时间短、 提取效率高、节能、节约药材、无需加热、使药 材中的皂苷成分在提取完全的同时保持稳定。 • 专利：一种三七总皂苷的制备方法,包括超 声震荡提取，大孔吸附树脂富集，高效液相色谱 纯化。
中药化学3.6 皂苷类化合物的提取分离技术
（四）研究进展与生物活性
2、三萜皂苷类
人参皂苷能促进RNA蛋白质的生物合成，调节机体代谢，增强免疫 功能。
柴胡皂苷能抑制中枢神经系统，有明显的抗炎作用，并能减低血 浆中胆固醇和甘油三酯的水平。 七叶皂苷具有明显的抗渗出、抗炎、抗淤血作用，能恢复毛细血 管的正常的渗透性，提高毛细血管张力，控制炎症，改善循环， 对脑外伤及心血管病有较好的治疗作用。
一、 结构与分类 二、 理化性质 三、 检识方法 四、 提取与分离方法
一、结构与分类
（一）定义 该类化合物溶于水后，形成的 水溶液经振摇后能产生大量持久性、 似肥皂样的泡沫，这类化合物称为 皂苷。
（二）分布
1、甾体皂苷
主要分布薯蓣科、百合科、玄参科、菝契科、龙舌兰科等单子叶植 物中。
2、三萜皂苷
狭叶柴胡以及同属植物的干燥根。
柴胡中皂苷类成分主要为：柴 胡皂苷A、C、D、E等。具有解热、 镇痛、镇咳、抗炎等作用。
R1
CH2OH R2 HO CH2R1
R2
柴胡皂苷元A 柴胡皂苷元B 柴胡皂苷元C
OH - OH OH - OH H - OH
2） α-香树脂烷型（乌苏烷型）
-香树脂烷型(α -amyrane),又称为熊果烷型，其分
无此活性。
COOH
O H
RO
H
甘草次酸 甘草酸 乌拉尔甘草皂苷A 乌拉尔甘草皂苷B 黄甘草皂苷
R H -D-gluA2 -D-gluA2 -D-gluA3 -D-gluA4 -D-glu A-D-glu A-D-glu A-D-glu A-
举例：（3）
柴胡为伞形科柴胡属植物柴胡、
HO H 薯蓣皂苷元 OH O glc O O O CH2OH 剑麻皂苷元
麦冬中甾体皂苷提取分离流程
麦冬中甾体皂苷提取分离流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!1. 材料准备麦冬：选择新鲜、无病虫害的麦冬作为原料。
试剂：乙醇、正丁醇、石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水等。
甾体皂苷tryh分析
当C25甲基位于环平面下的平伏键时为α
型，其绝对构型为D型（25R，
25D,25αF,Iso）.
R型即为异螺旋甾烷。由其衍生的皂苷为
异螺甾烷醇皂苷类(isospirotanol saponins)。 两者互为异构体，常共存于植物体内， 25R型较稳定 （5）甾体皂苷分子中不含羧基，呈中性， 故又称中性皂苷。
21 20 17 14 8 7 6 15 22 27
O
25 24
12 19 1 2 10 5 4 11 9
18 13
O 23
16
CH2OH
26
HO
3
甾体皂苷元共有27个碳原子组成:
（1）分子中含有A,B,C,D,E,F六个环，A,B, C,D为甾体母核---环戊烷多氢菲，C22 是E环和F环共有的碳原子，以螺缩酮 的形式相联。 （2）一般B/C 和C/D环稠合为反式（8β, 9α,13β,14α)，而A/B环有顺式或反 式（5β或5α）。 （3）分子中有含有多个羟基，大多在C3位 有羟基取代。多数为β-型，少数为 α-型。羰基和双键也是常见取代基。
穿山龙（干燥根茎） 加水浸透后，再加入3.5倍量水，加入浓H2SO4 使达3%浓度，通蒸气加压进行水解8小时 水解物 用水洗去酸液，干燥后粉碎，使含水量不超过6% 干燥粉 加6倍量汽油（或甲苯），连续回流，提取20小时 汽油提取液 室温放置，使结晶 回收汽油，浓缩至约1:40 , 完全析出后，离心甩干 粗制薯蓣皂苷元 自乙醇或丙酮中重结晶，活性炭脱色 薯蓣皂苷元(mp204-207)
五、甾体皂苷的提取分离 方法与基本与三萜皂苷相似，只是 甾体皂苷一般不含羧基，呈中性， 亲水性较弱。 甲醇或乙醇提取——正丁醇萃取— —柱色谱分离（硅胶、sep LH-20、 大孔树脂等）。
中药化学9甾教案
四、理化性质
1、性状：
无定形粉末或结晶。味苦（ C17-β），
对粘膜有刺激性，有旋光性。 2、溶解性：
可溶于水、醇及丙酮等极性溶剂， 不溶于乙醚等亲脂性有机溶剂。
与分子中糖的数目、种类及苷元上 羟基的数目、位置有关。
3、水解反应 （1）温和酸水解 试剂：0.02~0.05mol/L的盐酸或硫酸 条件：在含水醇中短时间加热回流 结果：Ⅰ型强心苷水解成苷元、2-去
C=C: 205~225nm C=O: 285nm
C=C-C=C: 235nm
C=C-C=O: 240nm 甾体皂苷元 + 浓硫酸
可用于定量。
270~275nm
2、IR 螺缩酮结构：4个特征吸收带cm-1:
980(A)，920(B)，900(C)，860(D) C25-S构型(螺甾烷醇型): B带强度 > C带 C25-R构型: B带强度 < C带 3 、MS
山药）、心脑舒通（蒺藜） 抗癌——重楼皂苷Ⅰ和Ⅳ
降血糖、降胆固醇、调节免疫等 甾体皂苷元——合成甾体避孕药和激 素类药物
二、结构与分类
（一）结构特点
1、皂苷元由27个碳组成，共有
A.B.C.D.E和F六个环，E和F以螺缩
酮的形式连接，形成螺甾烷结构。
A/B：顺，反 B/C：反
21 20 22 18
9.2 甾体皂苷 一、概述
（一）定义 螺甾烷及其相似生源的甾体化合物
的低聚糖苷，其水溶液经强烈振摇后多 产生大量持久性肥皂样泡沫。 （二）分布 单子叶植物：百合科、薯蓣科、石蒜 科、龙舌兰科等,麦冬,薤白,百合,玉竹, 知母,重楼等; 海洋生物、动物
（三）生物活性及应用 心脑血管病——地奥心血康胶囊（黄
甾体皂苷.ppt
防治心血管疾病、抗肿瘤、降血糖、抗血栓、免疫调 节、抗菌作用。
二、结构与分类：
（一）甾体皂苷元化学结构特点 （1）基本母核 （ 2）结构特点
（二）结构类型及代表性成分 （三）糖： α -羟基糖
三、皂苷的理化性质
（一）物理性质 （二）化学性质
1、沉淀反应 （1）与甾醇的沉淀反应 （2）与金属盐类沉淀反应
螺甾烷醇型只对A试剂呈黄色，对E试剂不显色。
2、其双皂苷类无溶血作用，不能和胆甾醇形成复合物， 无抗菌活性。而即螺甾烷醇型单皂苷类则反之。
27
O O
CH2OH 26
变型螺甾烷醇
HO
物理性质：
1、性状--- 皂苷为白色或无色无定形粉末，熔点较高。
味苦辛辣，有强烈的吸潮性；有旋光性。 皂苷元有大多有完好结晶。
穿龙薯蓣药材粗粉
水浸透后，硫酸加热加压水解8h
水解物
水洗除酸后干燥
干燥粉
脱色，汽油提取
提取物
浓缩析晶
粗薯蓣皂苷元
重结晶
薯蓣皂苷元
四、甾体皂苷的检识 五、甾体皂苷的结构研究
UV IR MS 1HNMR 13CNMR
六、中药实例
麦冬 薤白 知母 重楼
甾体皂苷
一、概述
定义 ：是一类由螺甾烷类化合物与糖结合的寡 糖苷。其水溶液振摇后产生持久性的类似肥皂 溶液样泡沫，故称为甾体皂苷。
皂苷-PPT课件
冰醋酸
甘草酸单钾盐
75％乙醇重结晶 精制甘草酸单钾盐
从甘草中提取甘草酸和甘草次酸
3．甘草次酸 的制备：
甘草酸单钾盐
加5％H2SO4，加热10h水解， 抽滤，水洗至中性，干燥
甘草次酸粗品 溶于热三氯甲烷中，趁热过滤
三氯甲烷不溶物 三氯甲烷溶液 放冷，通过氧化铝柱色谱， 用三氯甲烷溶液洗脱
第八章 皂苷
主要内容
第一节 皂苷的结构类型 第二节 皂苷的理化性质 第三节 皂苷的提取分离 第四节 皂苷的色谱鉴定
第一节 皂苷的结构类型
概述
➢ 皂苷（saponins）：是一类结构比较复杂的苷类化 合物。由于它的水溶液振摇后能产生大量持久性、 似肥皂样的泡沫，故名皂苷。
➢ 组成：皂苷是由皂苷元和糖两部分组成。 ➢ 分类：常按皂苷元的化学结构将皂苷分成两大类：
甾体皂苷和三萜皂苷。
一、甾体皂苷
➢ 甾体皂苷是一类由螺甾烷类化合物与糖结合而 成的苷类。
➢ 此类皂苷元均为含27个碳原子的甾体衍生物， 分子中一般不含有羧基，呈中性，又称中性皂 苷。
➢ 基本骨架为螺旋甾烷和异螺旋甾烷。
一、甾体皂苷
（一）螺旋甾烷类
剑麻皂苷元（sisalagenin）
一、甾体皂苷
2．皂苷多味苦而辛辣，对黏膜有刺激性 3．皂苷多具有吸湿性，易吸潮，应干燥保存。
二、溶解性
1．皂苷一般可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、 热甲醇和热乙醇
2．皂苷在含水正丁醇或戊醇中有较大溶解度 3．次皂苷由于糖的数目减少，水溶性降低 4. 皂苷元不溶于水，可溶于苯、乙醚、三氯甲
烷等低极性溶剂
三、表面活性
1．多数皂苷水溶液经强烈振摇后可产生大量持 久性泡沫，并不因加热而消失
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
OH O CH3 + O C H3C CH3 O
HCl
氯代-L-鼠李糖丙酮化物
O
O
O
O OOΒιβλιοθήκη OH OHOH CH2 OH RO OH 乌本苷 R=鼠李糖
H3C CH3 OH C HCl O O CH2 acetone OH HO OH
H+ Δ
OH OHOH CH2 OH
HO
OH
3、酶解 特点：专属性强、条件温和、不易消旋化
O
21 17 14
O
16
O
13
OH
5
OH HO 乙型强心苷
HO
甲型强心苷
第二节 C21甾及海洋甾体化合物
一、C21甾类化合物
含有21个C的甾体衍生物 结构特点：
18 11 1 10 9 7 5 13 14 21 20 19
O
16
17
C3 –OH
C5-C6 双键
3
HO
C20 羟基或羰基
C8，C11，C12，C14，C17 有可能有羟基 C11，C12羟基与醋酸、苯甲酸、桂皮酸成酯 C3，C20羟基与糖成苷
二、C21甾类化合物的生物合成
HO
羊毛甾醇 O O
HO
甾醇
HO C21甾类
第二节 C21甾及海洋甾体化合物
三、海洋甾体化合物-squalamine
甾体类生物碱，抗癌
OSO3H
OH RO
R H -Rha -Rha-glc -Rha-glc-glc
第三节 强心苷类
六、强心苷的理化性质
(一) 理化性质 1、形态及溶解度：
无色结晶或无定型粉末
可溶于水、丙酮、醇等极性溶剂；略溶于乙酸乙酯、含醇
氯仿，几乎不溶于醚、苯、石油醚等非极性溶剂
第三节 强心苷类
六、强心苷的理化性质
(二) 苷键的水解
甾体（steroides)及其苷类
第一节 概述
一、定义：具有环戊烷骈多氢菲甾核的化合物 二、结构特点：
C-10，C-13角甲基，C-17侧链，β 构型 C-3 羟基
19 11 18 1 10 3 5 9 7 13 14
3
R
17 16
1 10 5 28 29 9 7 11 19 18
R
17 13 14 30 16
水解条件：0.4%-1% HCl, 室温, 2周
特点：
糖上邻羟基及苷元中邻二羟基生成丙酮化物 可得到原苷元
O
O
O
O
O CH OH O OH O CH3 OH OH 铃兰毒苷 O O OH
HCl CH3COCH3 O OH O CH3 O C H3C CH3 O
O CH OH OH
O CH OH HO OH
HO
毛地黄毒苷 R1＝R2＝H 羟基毛地黄毒苷 R1＝H，R2=OH 异羟基毛地黄毒苷 R1=OH,R2=H 双羟基毛地黄毒苷 R1=R2=OH 吉他洛苷 R1=H,R2=-OOCH
毛花毛地黄苷A、B、C、D、E
第三节 强心苷类
五、乙型强心苷类
O O 海葱苷元 原海葱苷 A 海葱苷A 葡萄糖海葱苷
四、天然甾体化合物的分类及编号
21 20 19 11 18 1 10 3 9 7 5 13 14 28 29 24 25 26 27
O
16
O O
21
22 20
17
HO
HO 甾体皂苷元
22 20 19 11 18 1 10 3 9
7
HO 谷甾醇（植物甾醇）
22 20 21 23 24
C21甾类
O
23
O
O
四、甲型强心苷类
R1 R2 OH
CH3 O O CH3 O O OH CH3 O O OH HOH2C O O OCOCH 3 OH OH
毛地黄毒苷元 R1＝R2＝H 羟基毛地黄毒苷元 R1＝H，R2=OH 异羟基毛地黄毒苷元 R1=OH,R2=H 双羟基毛地黄毒苷元 R1=R2=OH 吉他洛苷元 R1=H,R2=-OOCH
O
O
O
O
水解或酶解 OH 糖 O H HO H OH
1、酸水解
水解条件：
2-去氧糖：稀强酸（0.02－0.05mol/L, HCl or H2SO4)，在
含水醇中回流几小时
2-羟基糖：浓强酸（3%－5%, HCl or H2SO4 )，加压或延长 水解时间
2、盐酸丙酮法（Mannich水解)
7
O
23 20
22
23 24 21
O
21 17 14
O
16
O
13
OH
5
OH HO 乙型强心苷
HO
甲型强心苷
第三节 强心苷类
三、强心苷中糖的类型
六碳醛糖、甲基五碳糖(6-去氧糖)、2，6-二去氧糖
CH3 OH OH OH D-鸡纳糖 CH3 OH OH D-毛地黄毒糖 O OH OH CH3 O O AcO OCH3 4'-乙酰加拿大麻苷 O O OH O
O O
OHC OH CH3 O O OO CH2 O O OCH3 OH
毒毛旋花子苷元 加拿大麻苷 K-毒毛旋花子麻苷β K-毒毛旋花子苷
(三) 强心苷的显色反应
1、由于甾核产生的反应 与强酸(或Lewis酸)作用产生各种颜色 2、由于不饱和内酯产生的反应 在碱性溶液中双键异构化产生活性次甲基，与硝基苯类试
甾体
三萜
第一节 概述
三、甾体化合物的颜色反应（与三萜类化合物相似）
在无水条件下遇强酸产生各种颜色
Liebermann-Burchard反应：样品溶于冰醋酸，加浓硫酸-醋 酐（1:20），产生红-紫-蓝-绿等颜色变化，最后褪色
Salkowski反应：样品溶于氯仿，沿壁滴加浓硫酸 三氯乙酸-乙醇 三氯化锑或五氯化锑反应
（二）提取苷元或次级苷：注意利用酶活性
有时用酶解的方法水解不完全，需酶解后再酸水解
直接酸水解
第三节 强心苷类
五、强心苷的提取分离
(三) 提取： 原生苷：易溶于极性溶剂
H H2N H N H N H H H OH
Squalamine
第三节 强心苷类
一、定义：存在于植物中具有强心作用的甾体苷类化合物
二、强心苷的结构特点：
C3，C14 羟基 甲型强心苷：Δα β -γ-内酯 乙型强心苷：Δα β ，γδ -δ -内酯
22 20 19 11 18 1 10 3 9
剂反应产生颜色，甲型反应，乙型不反应
3、由于2-去氧糖产生的反应
Keller-Kiliani反应 对二甲氨基苯甲醛反应
七、强心苷的提取分离
（一）提取原生苷：注意抑制酶活力
使用新鲜原料，尽快用热水、醇、含水醇等萃取。
新鲜采集的原料不是立即提取的，需低温快速干燥后保存 避免新鲜采集的原料室温下长期放置 发酵（利用植物体中本身含有的酶使苷类酶解为次生苷或苷 元 加入能使待分离植物中的苷类物质水解为次生苷或苷元的酶 酶解